HPVl6 E7 siRNA表达载体对宫颈癌CaSki 细胞生物学活性的影响
HPV16 E6 E7SiRNA作用于人宫颈癌细胞株的实验研究
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外源性HPV16-E7癌基因表达对宫颈癌HeLa细胞Cyclin-E表达的影响
外源性HPV16 E7癌基因表达对宫颈癌HeLa细胞Cyclin E表达的影响【摘要】目的研究重组腺病毒介导人乳头状瘤病毒(HPV)16型E7病毒癌基因感染对人宫颈癌HeLa细胞周期蛋白E (Cyclin E)表达的影响,探讨HPV16 E7癌基因以及Cyclin E在宫颈癌发生发展中的作用。
方法用含有HPV16 E7病毒癌基因的重组腺病毒载体感染体外培养的人宫颈癌HeLa细胞。
免疫荧光染色后激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测感染前后Cyclin E表达的差异。
结果HPV16 E7感染后Cyclin E表达较感染前明显增加。
结论HPV16 E7基因的表达促进Cyclin E的表达，对宫颈肿瘤细胞有增殖促进的作用。
【关键词】乳头状瘤病毒人基因E7 感染宫颈肿瘤细胞周期蛋白EINFLUENCE ON EXPRESSION OF Cyclin E IN HeLa CELLS BY EXPRESSION OF THE EXOGENOUS HPV16 E7 ONCOGENETIAN TIAN, DAI SHU ZHEN, KONG SHOU FANG, et al (Department of Gynecology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China) ［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the expression of Cyclin E in HeLa cells after the transfection of HPV16 E7 oncogene by recombinant adenovirus vector, and assess the effect of HPV16 E7 oncogene and Cyclin E in the development of human cervical carcinoma. MethodsExpression of Cyclin E was detected by laser scanning confocal microscope (LSCM) before and after the transfection. ResultsExpression of Cyclin E protein in the HeLa cells increased significantly after the transfection of HPV16 E7 genes.ConclusionExpression of HPV16 E7 oncogene influences the expression of Cyclin E and enhances the proliferation of the cells of cervical carcinoma.［KEY WORDS］papillomavirus, human; genes, E7; infection; cervix neoplasms; Cyclin E宫颈癌是女性高发恶性肿瘤,在全球女性恶性肿瘤中其发病率仅次于乳癌,在我国则居首位。
hpv16e7的表达对宫颈癌变过程中cd163+巨噬细胞的浸润及上皮间质转化的影响
中国组织化学与细胞化学杂志CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY第28卷第5期2019年10月V ol .28.No .5October .2019〔收稿日期〕2019-06-04 〔修回日期〕2019-10-12〔基金项目〕国家自然科学基金(81260442)；中央高校基本科研业务费专项资金项目（31920150044）〔作者简介〕尚立娜，女（1981年），满族，讲师*通讯作者(To whom correspondence should be addressed)：yxzj@HPV16E7的表达对宫颈癌变过程中CD163+巨噬细胞的浸润及上皮间质转化的影响尚立娜1，安利峰1，张城1，龚川友1，周彰映1，田世馨1，李晓琴2，赵晋1*（1西北民族大学医学院，2甘肃省肿瘤医院病理科， 兰州 730030）〔摘要〕目的 研究人乳头瘤病毒16E7（HPV16E7）、上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition ，EMT ）“cadherin switch ”标记物E-cadherin 、N-cadherin ，及肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages ，TAMs ）标记CD163在宫颈癌变过程中的表达情况，探讨在不同的HPV16E7表达情况下，上皮间质转化程度及肿瘤相关巨噬细胞浸润的差异及二者之间的关系。
方法 通过免疫组化法检测宫颈鳞状细胞癌、高级别上皮内瘤变(CINII-III)、低级别上皮内瘤变(CINI)及慢性宫颈炎患者的HPV16E7、E-cadherin 、N-cadherin 、CD163的表达情况。
结果 E-cadherin 的表达随着宫颈癌变的进展逐渐降低，N-cadherin 的表达以及CD163+巨噬细胞数量随着宫颈病变的进展逐渐升高。
慢性宫颈炎、CINI 、CINII-III 及宫颈鳞状细胞癌的HPV16E7阳性组和阴性组比较中，E-cadherin 的表达在CINII-III 及宫颈鳞状细胞癌中HPV16E7阳性组明显低于阴性组；N-cadherin 的表达在宫颈鳞状细胞癌中HPV16E7阳性组明显高于阴性组；CD163+巨噬细胞数目在CINI 、CINII-III 及宫颈鳞状细胞癌中HPV16E7阳性组明显高于阴性组。
外源性HPV16 E7癌基因表达对宫颈癌HeLa细胞Cyclin E表达的影响
外源性HPV16 E7癌基因表达对宫颈癌HeLa细胞Cyclin E表达的影响田甜;戴淑真;孔守芳;黄丽丽;罗兵【期刊名称】《青岛大学医学院学报》【年(卷),期】2007(43)3【摘要】目的研究重组腺病毒介导人乳头状瘤病毒(HPV)16型E7病毒癌基因感染对人宫颈癌HeLa细胞周期蛋白E(Cyclin E)表达的影响,探讨HPV16 E7癌基因以及Cyclin E在宫颈癌发生发展中的作用。
方法用含有HPV16 E7病毒癌基因的重组腺病毒载体感染体外培养的人宫颈癌HeLa细胞。
免疫荧光染色后激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测感染前后Cyclin E表达的差异。
结果HPV16 E7感染后Cyclin E表达较感染前明显增加。
结论HPV16 E7基因的表达促进Cyclin E的表达,对宫颈肿瘤细胞有增殖促进的作用。
【总页数】3页(P210-211)【关键词】乳头状瘤病毒,人;基因,E7;感染;宫颈肿瘤;细胞周期蛋白E【作者】田甜;戴淑真;孔守芳;黄丽丽;罗兵【作者单位】青岛大学医学院附属医院妇科;青岛大学医学院微生物学教研室【正文语种】中文【中图分类】R737.33【相关文献】1.子宫颈上皮内瘤变及鳞状细胞癌组织cyclin D1表达特征及其与HPV16 E7表达的相关性分析 [J], 王平;刘珊;程波;吴西钊;丁姗姗;武迪;许琳;石建玲;段恋2.宫颈癌细胞系中HPV16 E6、E7及E6/E7基因对STK31基因甲基化状态及表达的影响 [J], 殷复粉;王宁;于啸;毕晓宁;徐小惠;王言奎3.真核细胞内外源性HPV16 E7癌基因表达及其对cdc25A及Cyclin E表达的影响 [J], 戴淑真;田甜;孔守芳;黄丽丽;罗兵4.植酸酮对宫颈癌细胞株中 HPV16／18 E6／E7 mRNA 及蛋白表达的影响 [J], 王侃;高晓丽;田文艳;岳天孚5.外源性人乳头瘤病毒16型E7癌基因导入对HeLa细胞cdc25A表达的影响 [J], 戴淑真;田甜;孔守芳;黄丽丽;罗兵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
年河南省优秀博士学位论文公示【直接打印】
潘炳力 崔世忠 虎业勤 卢金斌 王晓雷 杨霞 张全国 夏平安 夏平安
王瑞宁 吴晓林 何慧凡 王举才 蔡德敏 张国强 苏晴 朱广蕊 田燕歌 岳静宇 谢世阳 邱天宝 吕水林 袁福宁 吕鹏
魏战勇 王伟 李燕 马新明 王艳玲 刘亮伟 李友勇 刘兴友 李建生 司富春 朱明军 李喜凤 孙自学 杨丽萍 李松武
聚双环戊 二烯复 合材料 的力学 及摩擦 学性能 研究 竹纳米纤 维素晶 须的制 备及其 生物复 合材料 运用 印刷媒介 对宋代 主流思 想演化 的影响 研究 Ni-Cr 合金保护气氛钎焊金刚石磨粒关键技术研究 基于 Matlab-DSP 光伏发电嵌入式系统实时仿真与控制方法 激流式生物反应器大规模培养 IB DV 制备高效灭活疫苗的研究 秸秆类生 物质超 微预处 理技术 及其产 氢可行 性研究 多个猪 IgGⅡB 类 Fc 受体剪接异构体的克隆与活性鉴定 免疫复合物在 P RRSV-ADE 作用中的研究 猪转移因子、猪白细胞介素 18 以及水溶性酵母葡聚糖对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果 的影响研 究 玉米种子 LEA 蛋白 EMB 564 的生物信息学分析及生化研究 自走式烟 叶收获 机的采 收刀的 理论设 计与分 析 夏玉米个 体可视 化系统 的设计 与实现 共轭亚油 酸诱导 小鼠附 睾脂肪 减少发 生机制 的研究 去除端部游离氨基酸对提高黑曲霉木聚糖酶 Xy nB 稳定性的研究 小麦 B NS 温敏雄性不育相关蛋白及基因的差异表达分析 鸭源性传染性支气管炎病毒 ZZ2004 毒株人工感染肉仔鸡肠道的病理研究 调补肺肾三法调控 JAK/STA T 信号通路治疗 COP D 模型大鼠的作用及远后效应机制 不同证候 食管癌 差异表 达基因 研究 加参优化 方对大 鼠心肌 梗死后 梗死范 围及心 功能的 影响 ISSR 分子生物技术对中药蒲公英的应用研究 补肾活血通淋方对良性前列腺增生症大鼠模型 Bcl-2、Bax 影响的研究 恐伤母鼠 对其仔 鼠空间 学习记 忆能力 的影响 及其神 经发生 机制 怀山药及 其非药 用部位 的成分 比较和 开发研 究
慢病毒介导的siRNA沉默hTERT基因对宫颈癌Caski细胞增殖和凋亡的影响
【 摘要 】 目的 探讨利用慢病毒介导小干扰核糖核酸（ ｓ ｉ Ｒ Ｎ Ａ ） 沉默人体端粒酶反转录酶（ ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ ） 的可行性及其对宫
颈癌 Ｃ ａ ｓ ｋ ｉ 细胞增 殖和 凋 亡的影 响 。方法 用前 期 构 建 的慢 病 毒 表 达 载体 ａ ｎ ｔ ｉ — ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ － Ｌ Ｖ和 Ｎ Ｃ － Ｌ Ｖ转 染 宫颈 癌 Ｃ ａ ｓ ｋ ｉ 细
广 西 医学 ２ ０ １ ５ 年 ５月第 ３ ７卷第 ５ 期
５ ９９
慢病毒介导 的 ｓ ｉ Ｒ Ｎ Ａ沉 默 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 基 因对 宫 颈 癌 Ｃ ａ ｓ ｋ ｉ 细 胞 增 殖 和凋 亡 的影 响 ▲
赵红珂 莫 凌 昭
５ ３ ０ ０ ２ １ ， Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： １ ５ ３ ４ ７ ７ ２ ４ １ ＠ｑ ｑ ． ｃ ｏ ｍ） （ 广 西 医科 大学 附属 肿瘤 医 院妇 瘤科 ， 南 宁市
【 关键词】 宫颈癌 ； Ｃ ａ ｓ ｋ ｉ 细胞 ； 人体端粒酶反转录酶 ； 细胞增殖； 细胞凋亡； 细胞周期 【 中图分类号】 Ｒ ７ ３ ７ ． ３ ３ 【 文献标识码】 Ａ 【 文章编号】 ０ ２ ５ ３ － ４ ３ ０ ４ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ５ － ０ ５ ９ ９ － ４ ０
ＤＯＩ ： １ ０ ． １ １ ６ ７ ５ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ０ ２ ５ ３ － ４ ３ ４． ０ ２ ０ １ ５ ． ０ ５ ． ０ ５
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HPV1618E7对宫颈癌细胞中HDAC1表达的影响的开题报告
HPV1618E7对宫颈癌细胞中HDAC1表达的影响的
开题报告
题目：HPV1618E7对宫颈癌细胞中HDAC1表达的影响
研究背景：宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，其患病率和死亡率呈现逐年上升的趋势，给女性健康带来极大威胁。
目前，人乳头瘤病毒高危型亚型（HPV16、HPV18等）感染被认为是宫颈癌的主要原因。
HPV16/18的E7蛋白可以通过不同的机制干扰细胞的正常功能，从而促进癌细胞的形成和生长。
目前，各种研究表明，E7蛋白与组蛋白去乙酰化酶（HDAC）家族关系密切，其中HDAC1在宫颈癌中的表达增高，且与其恶性程度、预后和药物治疗的敏感性密切相关。
因此，本研究旨在探究HPV1618E7对宫颈癌细胞中HDAC1表达的影响。
研究内容：本研究将选取一些HPV阳性的人宫颈癌细胞株，加入不同浓度的HPV1618E7表达质粒或空载体，培养一定时间后，采用RT-qPCR和Western blot等技术方法检测宫颈癌细胞株中HDAC1表达的变化情况，以此来探究HPV1618E7对HDAC1的调节作用，并进一步分析HPV1618E7调节HDAC1表达的可能机制。
研究意义：本研究的结果将有助于深入了解HPV1618E7与HDAC1的相互作用机制及其与宫颈癌发生和发展的关系，为探讨宫颈癌的发病机制提供新思路，为宫颈癌的治疗和预防提供理论依据，具有重要的临床应用价值和社会意义。
HPV16E6、E7通过糖原合成酶激酶-3β通路影响宫颈鳞癌细胞生物学行为
HPV16E6、E7通过糖原合成酶激酶-3β通路影响宫颈鳞癌细胞生物学行为陈良凤;王建【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2018(026)016【摘要】目的:探讨人乳头瘤病毒16(HPV16)的致癌基因E6、E7对宫颈鳞癌细胞C33A生物学行为的影响及其机制.方法:构建HPV16 E6、E7及E6/E7重组质粒,流式细胞术检测转染前后细胞周期的变化;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;克隆形成实验检测细胞的增殖能力;qPCR和Western blot检测相关基因和蛋白表达水平.结果:HPV16 E7重组质粒可引起宫颈鳞癌细胞S期比例显著增加(P＜0.01),HPV16E6、E7和E6/E7重组质粒能显著增强宫颈鳞癌细胞C33A的迁移能力(P＜0.05),同时细胞的克隆形成能力也显著增强(P＜0.05).HPV16 E6重组质粒可显著上调细胞糖原合成酶激酶-3β(GSK3β) mRNA水平(P ＜0.05);HPV16 E6、E7重组质粒可在24h内引起GSK3β磷酸化水平升高,同时调控下游靶基因CyclinD1和β-catenin在不同时间点的表达发生变化.结论:HPV16 E6、E7在较短时间(24h内)可通过GSK3β蛋白磷酸化激活,发挥对GSK3β下游靶基因CyclinD1、β-catenin基因的调控作用,从而促进宫颈鳞癌细胞的增殖、迁移及侵袭.【总页数】5页(P2485-2489)【作者】陈良凤;王建【作者单位】第四军医大学西京医院妇产科,陕西西安710032;安康市中心医院妇产科,陕西安康725000;第四军医大学西京医院妇产科,陕西西安710032【正文语种】中文【中图分类】R737.33【相关文献】1.锂对脆性X综合征小鼠模型的跳台行为及糖原合成酶激酶3β活性的影响 [J], 杨泉;陈盛强;曹开谊;张伟雯;黄越玲;刘国彬;沈岩松;孙卫文;李敏雄;戴丽军2.Wnt信号通路蛋白β-链蛋白和糖原合成酶激酶3β在单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层的表达变化 [J], 王智;邵威;袁学双;彭辉灿;费志刚;肖启国;夏世刚3.二氢槲皮素对异丙肾上腺素所致急性心肌缺血大鼠心肌磷脂酰肌醇3-激酶/糖原合成酶激酶-3β信号通路的影响 [J], 吴明娟; 费洪新; 田明; 周忠光; 韩玉生4.电针对APP/PS1小鼠皮质区磷脂酰肌醇-3激酶/糖原合成酶激酶-3α通路相关蛋白表达和老年斑沉积的影响 [J], 伍艳君;邬开会;刘茜;王依滢;邱国平;徐进;盛华均;朱淑娟5.异丙酚通过糖原合成酶激酶-3β/β-连环素信号通路影响大鼠认知功能及海马神经元凋亡的实验研究 [J], 苏孟勤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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１１ 材 料 ．
宫 颈 癌 细 胞 株 ＣＳｉ载 体 ｐ ｉｎｅ ６ ａｋ、 ＳｅｃＵ ｌ
１２ ４ Ｒ ．Ｃ ． ． Ｔ Ｐ Ｒ法 检测 ＨＰ ６Ｅ Ｎ Ｖ１ ７ｍＲ Ａ的表 达
由本 研究 所 保 存 。Ｔｉ ｌ Ｒ Ａ纯 化 试 剂 和 Ｌｐ— ｒｏ 总 Ｎ ｚ ｉｏ
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摘要 ： 目的
探讨人乳头瘤病毒 １ ６型（ Ｐ １ ）Ｅ Ｈ Ｖ ６ ７基因小干扰 Ｒ Ａ（ ｉＮ 表达载体对 宫颈癌 Ｃ Ｓ ｉ Ｎ ｓ Ａ） Ｒ ａ ｋ 细胞生
物学活性的影响。方法
利用脂 质体 Ｈ Ｖ ６Ｅ Ｐ １ ７特异 性 ｓ Ｎ ｉ Ａ表达 载体 （ Ｐ １ ．７ ｉ 、 Ｒ Ｈ Ｖ ６Ｅ Ｓ） 空载 体 （ ａｋ．ｉ 转染 ＣＳｉ ） Ｓ
ｆ ｔ ｎ ２ ０ ｅ ａ ｅ ０ ０购 自 Ｉｖｔ ｇｎ公 司 ； 制 性 内 切 ｃ ｍｉ ｎ ｉｏｅ ｒ 限
用 ０ ８ｍＬＴｉ ｌ 剂裂 解细 胞 ， 至无 Ｒ ａｅ的１５ ． ｒｏ试 ｚ 转 Ｎｓ ． ｍＬＥ Ｐ管 中 ； 入 １０ 氯 仿 ， 倒混 匀 ， 温静 置 加 ６ 颠 室
化组 织恶性 表 型 的过程 中具 有 重要 作 用 因此 ， ¨。
以Ｅ ７基 因为靶 点 的官 颈癌 基 因治疗 已成 为研究 热 点 。Ｒ Ａ干扰 （ Ｎ ｉ技 术 是 一种 封 闭基 因表达 的 Ｎ Ｒ Ａ） 有 效 方 法 ， 通 过 小 干 扰 Ｒ Ａ（ｉＮ 或 小 发 夹 能 Ｎ ｓ Ａ） Ｒ
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１ 材料 与方 法
Ｌｐｆ ｔ ｎ Ｔ２０ 剂 说 明 书分 别 进 行 转 染 。通 ｉｏｅ ａ ｅＭ００试 ｃ ｍｉ 过潮 霉 素 （． ｍＬ 抗性 筛 选 ， 染 ２ ０ ８ｍ ） 转 ０ｄ后分 别
得 到 抗 性 克 隆 细 胞 Ｃ Ｓｉ ７ ｉ 阴 性 对 照 Ｃ Ｓｉ ａｋ－ Ｓ 及 Ｅ ａ ｋ—
成功获得沉 默 Ｅ ７基
ＣＳｉ ａｋ 细胞 ， 荧光定量 Ｒ —Ｃ 流式细胞仪检测 Ｈ Ｖ ６Ｅ Ｓ、 ａｋ—ｉ Ｔ Ｐ Ｒ、 Ｐ １ ・７ ｉＣ Ｓ ｉ 细胞 Ｅ Ｎ Ｓ ７ｍＲ Ａ和蛋 白的变化 ； 流式 细胞仪及
ＭＴ 法检测 ２种细胞的细胞周期及生长 曲线变化 ， Ｙ 并检测 ２种 细胞对顺铂 的敏感性 。结果 因的克隆细胞株 Ｃ Ｓ ｉ ７ ｉ 阴性对 照 Ｃ Ｓ ｉ ｉＣ Ｓ ｉ ７ ｉ ａ ｋ— Ｓ 及 Ｅ ａ ｋ— ；ａｋ— Ｓ 细胞生 长明显慢 于 Ｃ ｓ ｉ ｉ Ｓ Ｅ ａｋ＿ 细胞 （ ０ ０ ） 且前者 ｓ Ｐ＜ ．５ ，
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１ Ｏ
山东医药 ２ １ 年第 ５ ０２ ２鲞
Ｒ Ａ来 介 导 Ｒ Ａ 作 用 Ｊ ０ １年 ７月 ～２ １ Ｎ Ｎｉ 。２ １ ０２年
２月 ， 我们 探讨 了 Ｈ Ｖ１ ７ｓ Ｎ Ｐ ６Ｅ ｉ Ａ表达 载体 对宫 颈 Ｒ 癌 ＣＳ ｉ ａ ｋ 细胞 生物学 活性 的影 响 。现报 告如 下 。
山东 医药 ２ １ ０ ２年第 ５ ２卷第 ２ ９期
Ｈ Ｖ ６Ｅ ｉＮ Ｐ １ ７ｓ Ａ表达载体对宫颈癌 Ｒ
Ｃ Ｓｉ ａｋ 细胞 生 物学 活性 的影 响
赵 琳 ， 刘朝奇 李志 英 鲁 选文 ， ，
（ １三峡 大学分子 生物研 究所 ， 湖北 宜 昌 ４３０ ； ４０ ２２三峡 大学第二 临床 医学 院； ３湖 北 医药学 院附属 太和 医院）
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流 行 病 学 调 查 显 示 ， 危 型 人 乳 头 瘤 病 毒 高 （Ｐ １ Ｈ Ｖ）６型感 染 与宫 颈 癌 的 发 生有 密切 关 系 。其 编码 的 Ｅ ７蛋 白与 细 胞 转 化 和 病 毒 复 制 的 调 控 有
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亡， 并增加顺铂 的敏感性 。
关键词 ： 宫颈肿瘤 ； 头状瘤病毒 ， ； Ｒ Ａ表 达载体 ； 铂 乳 人 ｓＮ ｉ 顺
中 图分 类 号 ： ７ ７３ Ｒ ３ ．３ 文献 标 志 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ２２ ６ （ ０２ ２ －０ ００ １０ －６ Ｘ ２ １ ）９０ １ － ４
细胞 的凋亡峰明显增多。２种细胞加用顺 铂作 用 ４ 发现 ， ａｋ—ｉ ８ｈ后 Ｃ Ｓｉ 细胞 周期 阻滞 在 Ｓ～Ｇ 期 ， Ｐ ６Ｅ Ｓ 阻 Ｓ ’ Ｈ Ｖ１一７ ｉ 滞在 Ｇ 期 。结论 ０ Ｈ Ｖ１ ７ｓ Ｎ Ｐ ６Ｅ ｉ Ａ表达载体能有效地抑制宫颈癌 ＣＳ ｉ Ｒ ａｋ 细胞 Ｅ 基 因的表达 ， ７ 促进肿瘤细胞 凋
篇 ，Ｃ 文章 ３ 余篇 。获湖北省教学成果三等奖和湖北省教育厅第三届教育科学研究成果二等奖各 １ ， ＳＩ ０ 项 湖北省宜 昌市科技进步三等奖 １ 项。 目前湖北省卫生厅项 目、 昌市科技计划项 目及三峡大学重大研究课题近 １ 。Ｅｍａ ：ｈｏ￣ ａｏ． ｏ 宜 Ｏ项 － ｉ Ｃａｑ ＠ｙｈｏ ｃｍ ｌ ｌ