实验二 芦丁的提取与定性反应
芦丁的提取与鉴定思考题答案
芦丁的提取与鉴定思考题答案（整理）芦丁的提取分离和鉴定综合化学实验:芦丁的提取分离和鉴定芦丁简介:芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。
目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。
尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophora japonica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。
芦丁是由槲皮素（quercetin）3位上的羟基与芸香糖（rutinoe，一种由葡萄糖glucoe与鼠李糖rhamnoe组成的双糖）脱水合成的苷，是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174，178℃，无结晶水时188，190℃。
溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
补充知识:关于苷（gān）和甙(dài): 苷类（glycoide，旧称甙）又称配糖体，是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物，水解后能生成糖与非糖化合物。
目前国际上通用“苷”如“皂苷”，而过去习惯使用的中文名称“甙”目前已不再使用如“皂甙”现统称“皂苷”。
一、目的要求：1．通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层析检测等手段在苷类结构鉴定上的作用。
3、通过UV、IR、HNMR和MS图谱解析，了解光谱方法黄酮类化合物结构鉴定中的作用。
二、已知重要成分性质：1、芦丁（rutin）：分子式C27H30O16·3H2O，为浅黄色针状结晶物，mp174～178℃（含三分子水）；100mmHg和110℃加热12小时后，变为无水物，115～117℃软化，214～215 ℃发泡分解。
芦丁提取的实验报告
一、实验目的1. 学习黄酮类化合物的提取方法。
2. 掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
3. 通过芦丁的提取，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
4. 了解UV及NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种广泛存在于植物界的黄酮类化合物，具有调节毛细血管壁的渗透性、抗炎、抗病毒、抗氧化等作用。
芦丁的提取方法主要有碱提法、水提法、醇提法等。
本实验采用碱提法提取芦丁，利用芦丁在碱水中溶解度较大的性质，将芦丁从植物材料中提取出来。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐花米、石灰水、盐酸、无水乙醇、蒸馏水、芦丁标准品等。
2. 实验仪器：烧杯、漏斗、玻璃棒、抽滤瓶、旋转蒸发仪、紫外-可见分光光度计、NMR仪等。
四、实验步骤1. 称取3g槐花米，置于研钵中研成粉末。
2. 将槐花米粉末转移至烧杯中，加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟。
3. 用漏斗和玻璃棒趁热过滤，滤液备用。
4. 将滤渣用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟，重复步骤3，合并滤液。
5. 用15%盐酸中和滤液，调节pH至4。
6. 将中和后的滤液静置6小时以上，待芦丁沉淀析出。
7. 抽滤，用蒸馏水洗涤沉淀1-2次，弃去滤液，得到芦丁粗品。
8. 将芦丁粗品按芦丁在热水中1:200的溶解度加入蒸馏水，加热煮沸15分钟，趁热过滤，弃去滤渣。
9. 将滤液静置，过滤，60-70℃干燥，得到芦丁精制品。
10. 对提取的芦丁进行UV及NMR分析，鉴定其结构。
五、实验结果与讨论1. 提取的芦丁在紫外-可见分光光度计上呈现典型的黄酮类化合物的吸收光谱，其最大吸收波长为257nm。
2. NMR分析结果显示，提取的芦丁具有典型的黄酮类化合物结构特征，与芦丁标准品结构一致。
3. 本实验采用碱提法提取芦丁，提取率较高，且操作简便，为黄酮类化合物的提取提供了一种有效的方法。
六、实验结论通过本实验，我们掌握了碱提法提取芦丁的原理及操作，成功提取了芦丁，并对其结构进行了鉴定。
芦丁的提取分离和鉴定
定性反应鉴别见附录。
（一）芦丁的酸水解
称取精品芦丁2g
置500ml烧瓶中
加2%的H2SO4200ml
加热回流1小时
放冷，静置，抽滤
酸性滤液沉淀
中和冷水洗两次，干燥
用95%乙醇25 ml最后称重，计算收率。
浓缩
黄色细针状结晶
浓缩液（槲皮素）
（供糖的鉴定）
补充知识:
关于苷（gān）和甙(dài):苷类（glycosides，旧称甙）又称配糖体，是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物，水解后能生成糖与非糖化合物。目前国际上通用“苷”如“皂苷”，而过去习惯使用的中文名称“甙”目前已不再使用如“皂甙”现统称“皂苷”。
展开剂：正丁酵-醋酸-水（BAW）（4：1：5）上层，悬挂并利用上层展开剂纸色谱分离。
显色剂：苯胺以及邻苯二甲酸混合试液，喷后105℃烘10分钟。显棕红色斑点。
注意事项:纸层析展开时可事先用铅笔在裁剪好的层析纸上画出展开起点(即点样的位置)和预制终点(即展开完毕后展开液的前沿)，这样方便进行测量计算比移值。另外由于糖液一般无色，因此点样位置也可事先用铅笔点出标记，注意如果糖液浓度过低（实验时应尽量将糖液蒸发浓缩至3毫升以内）则应多次点样以达到浓集的目的，否则展开后的点不够明显。点样时也需要注意点样液斑不易扩散太大，应控制液斑直径在3 mm以内，同时各点样点之间应尽量保持距离不可过于靠近，否则展开后可能得到较大的样班，而且不同样斑之间可能重合相互干扰而不易测量比移值。下图给出正确的纸层析法标示。
综合化学实验:芦丁的提取分离和鉴定
芦丁简介:
芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophorajaponica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。
天然药物实验报告.docx
天然药物化学实验实验报告实验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定（一）实验目的要求1.制备芦丁，供药用。
2.通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。
3.熟悉重结晶技巧。
4.了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。
（二）实验的基本原理1.芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基，呈酚酸性，能在碱水中溶解的性质，可用碱性溶剂进行提取，提取液加酸后可沉淀析出（碱溶酸沉法）。
也可利用芦丁在冷水中溶解度小，在热水中溶解度大的性质进行提取。
2. 芦丁的分离原理利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大，以及在热水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性质分离。
芦丁用溶剂加热溶解后，趁热抽滤，滤液放冷后能析出而达到分离的目的（如不纯可再重复操作进行分离）。
也可采用醇溶水沉法进行精制。
3. 芦丁的鉴定原理（1）利用吸附薄层色谱的分离原理，芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开，显色，以达到鉴定芦丁的目的。
（2）通过专属的化学显色反应（如三氯化铝显色反应），确定芦丁的成分类型（黄酮类）。
(三) 实验内容1. 用碱提法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。
2. 用酸沉法和冷却过饱和法分离芦丁。
3. 溶剂重结晶精制芦丁。
4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁(四) 实验药材仪器与试剂1. 实验药材槐米20g。
2. 仪器：磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、500ml烧杯，1000ml烧杯，50ml 烧杯，250ml园底烧瓶、500ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、50ml 锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置，布氏漏斗，抽滤瓶、层析缸等。
3. 试剂：硼砂、氧化钙、HCI、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、PH试纸等。
（五）实验方法与注意事项1. 芦丁的提取（2）方法二（水提取法）称取槐米粗粉20g，在研钵中研碎后放入500ml烧瓶中，（注意小心沿侧边放入磁子），加水200ml，用磁力加热搅拌器加热煮沸30min，（设定温度为105°C，当加热到103°时，观察到：液体开始沸腾，有气味，有泡沫产生。
芦丁的提取分离及鉴定
2.1 取芦丁 3mg 加乙醇 5ml 溶解，分成 3 份做以下试验。
2.2 取上述溶液 1～2ml，加少许镁粉，再 加 2 滴浓盐酸。试管内颜色为红色。
2.3 取上述溶液 1～2ml，滴加 2%的 ZrOCI2 的乙醇溶液，颜色变为无色，再继续加 2%柠 檬酸乙醇溶液，颜色变为黄色。
2.4 取上述溶液 1～2ml，然后加等体积的 10%2-荼酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴加硫 酸，两液界面出现棕色环。
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医药与保健
芦丁的提取分离及鉴定
张国华 赵玉新 （哈药集团制药总厂，黑龙江 哈尔滨 150086）
摘 要： 目的：研究芦丁的提取分离及鉴定方法。方法：采用碱提取酸沉淀法对芦丁进行提取分离，并对其进行定性鉴定，利用液相色谱 法对其进行含量测定。结果：通过此方法获得的芦丁，质量合格。结论：此方法易制得芦丁且测定方法简单、迅速、灵敏度高。
3 分析与讨论 3．1 提取时加硼砂的目的是因能与芦丁结 合，起到保护邻二羟基不被氧化破坏的作用， 使芦丁的质量提高。 3．2 提取时加入碳酸钙既可达到碱溶解提 取芦丁的目的，又可除去槐花米中大量的多糖
类粘液质，但 PH 不能过高，否则钙能与芦丁 形成螯合物而沉淀析出，煮沸时间不可过长， 因其可导致芦丁的降解。
1 芦丁的提取分离 1.1 仪器和试剂 仪器：旋转蒸发仪 RE-52A （上海亚荣生 化仪量厂）。 SHB-B 型循环水式多用真空泵 （郑州长 城科工贸有限公司）。 电热恒温水浴锅 DIKW-4 （北京光明医疗 仪器厂）。 试剂：槐花米、硼酸、盐酸、碳酸钙、乙 醇。 1.2 提取分离的操作过程 1.2.1 于旋转蒸发仪中加入 300ml 水，1g 硼砂加热至沸，投入槐花米粗粉 20g，直火煮 沸 2~3 分钟，小心加入碳酸钙，调 PH 至 8.5~ 9，保持微沸 30 分钟，趁热过滤。 1.2.2 将滤液放冷至室温，在 60～70℃下用 浓盐酸调 PH 至 4，静置 6 小时以上，析出沉 淀，抽滤，用蒸馏水洗沉淀 1～2 次至中性。所 得沉淀为芦丁粗品。 1.2.3 将沉淀悬浮于蒸馏水中，加热煮沸 15 分钟，趁热过滤。滤液充分静止，不再析 出沉淀，过滤，所得沉淀于 60~70℃干燥，得 芦丁精制品。 2 芦丁的定性鉴定
芦丁性质鉴定实训报告
一、实验目的1. 理解和掌握芦丁的理化性质。
2. 学习芦丁的提取、分离与鉴定方法。
3. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理芦丁（Rutin），又称芸香苷，是一种广泛存在于植物中的黄酮醇类化合物，具有多种生物活性。
本实验通过提取槐米中的芦丁，并对其进行分离、鉴定，以了解芦丁的理化性质。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米、石灰乳、硼砂、浓盐酸、无水乙醇、甲醇、蒸馏水等。
2. 实验仪器：烧杯、玻璃棒、漏斗、抽滤瓶、烘箱、紫外-可见分光光度计、分析天平等。
四、实验步骤1. 芦丁提取（1）将槐米粉末加入烧杯中，加入适量水，煮沸2-3分钟。
（2）加入石灰乳，调节pH值至8.5-9.0，继续煮沸30分钟。
（3）趁热过滤，得到滤液。
2. 芦丁分离（1）将滤液加入浓盐酸，调节pH值至4.0，静置6小时以上。
（2）抽滤，用蒸馏水洗涤沉淀，弃去滤液。
（3）将沉淀溶解于适量热水中，冷却至室温。
（4）过滤，弃去滤渣。
3. 芦丁鉴定（1）取适量芦丁溶液，用紫外-可见分光光度计测定其在特定波长下的吸光度。
（2）比较芦丁溶液的吸光度与标准溶液的吸光度，确定芦丁含量。
五、实验结果与分析1. 芦丁提取实验成功提取了槐米中的芦丁，滤液呈淡黄色。
2. 芦丁分离实验成功分离了芦丁，得到淡黄色沉淀。
3. 芦丁鉴定通过紫外-可见分光光度计测定，芦丁溶液在特定波长下的吸光度与标准溶液的吸光度基本一致，说明实验成功鉴定了芦丁。
六、实验结论1. 芦丁是一种广泛存在于植物中的黄酮醇类化合物，具有多种生物活性。
2. 本实验成功提取了槐米中的芦丁，并对其进行了分离与鉴定。
3. 通过实验，掌握了芦丁的理化性质和提取、分离与鉴定方法。
七、实验讨论1. 实验过程中，应注意控制pH值，以保证芦丁的提取效果。
2. 在分离过程中，应选择合适的溶剂和条件，以提高芦丁的纯度。
3. 在鉴定过程中，应选择合适的波长和仪器，以保证实验结果的准确性。
八、实验拓展1. 研究芦丁在人体内的代谢过程。
芦丁提取实验方案
芦丁提取实验方案引言芦丁是一种天然的植物营养素，具有很强的抗氧化和抗炎作用。
为了进一步研究芦丁的功效，我们需要开展芦丁的提取实验。
本文档将介绍芦丁提取的实验方案，包括所需材料、实验步骤和实验结果的分析。
材料•干燥的芦丁植物材料•无水乙醇•醇水溶液•蒸馏水•醇提设备（例如漏斗和烧杯）•旋转蒸发仪实验步骤1.准备工作–将芦丁植物材料加工成细粉状，并放置于密封容器中。
–准备好所需的实验器材和试剂。
2.芦丁的醇提–取一定量的芦丁植物材料，加入适量的无水乙醇中。
通常，建议取1克芦丁材料和10毫升的无水乙醇。
–将混合物置于漏斗中，并进行充分搅拌，确保芦丁与乙醇充分接触。
–在常温下，用自然流动的方式将乙醇溶液过滤出来，并收集过滤液。
–将过滤液保存起来，即得到芦丁的醇提液。
3.醇提液的浓缩–将得到的芦丁醇提液置于旋转蒸发仪中。
–设定适当的转速和温度，通常在50°C左右进行浓缩。
–在旋转蒸发过程中，观察溶液的浓缩情况，直到溶剂完全蒸发，得到芦丁的浓缩物质。
4.芦丁的纯化–将得到的芦丁浓缩物溶于一定量的醇水溶液中。
通常，建议取10毫升的醇水溶液溶解1克的芦丁浓缩物。
–进行搅拌，确保芦丁溶于醇水溶液中。
–对混合溶液进行过滤，以除去杂质。
–收集过滤液，并将其放置于旋转蒸发仪中进行浓缩，获得纯化后的芦丁提取物。
结果分析通过以上实验步骤，我们成功地提取到了芦丁。
得到的芦丁提取物可以应用于进一步的研究，如药物活性评估、生物活性实验等。
此外，我们还可以对提取过程中的各个步骤进行优化，以提高提取效率和纯度。
结论本文档介绍了一种芦丁提取实验方案。
通过该方案，我们可以得到高纯度的芦丁提取物，为进一步研究芦丁的功效打下基础。
通过不断优化提取过程，我们可以提高提取效率和纯度，为芦丁的应用研究提供更多可能性。
实验二 槐花米中芦丁的提取与检识
实验二槐花米中芦丁的提取与检识一、实验目的1. 通过芦丁提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。
2. 掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮甙的检识方法。
二、主要化学成分的结构及性质芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现发现芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。
尤其以槐花米（为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料，芦丁是由槲皮素（Querecetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）脱水而成的甙类化合物。
芦丁为淡黄色粉末或针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为177-178℃。
芦丁略溶于热水（1：200），难溶于冷水（1：8000），溶于热甲醇（1∶7）、冷甲醇（1∶100）、热乙醇（1∶30）、冷乙醇（1∶650），难溶于醋酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。
O OHOHO ORHOOH芸香苷R=－葡萄糖－鼠李糖槲皮素R=H三、实验原理由槐花米中提取芦丁的方法很多，目前我国多采用碱提酸沉的方法，其原理是：根据芦丁分子中具有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，向此盐溶液加入酸，调节pH 值，则芦丁又重新游离析出，从而获得粗制芦丁。
除此方法外，还可以采用沸水提取或醇提取法。
四、实验器材与试剂器材：铁架台，烧杯，电炉，烘箱、水浴锅、三角烧瓶，布氏漏斗，滤纸，试管，层析槽，石棉网，毛细管等。
试剂：芸香苷标准品，生石灰，HCl，乙醇，甲醇，镁粉，醋酸镁，AlCl3，氯仿，铁氰化钾等。
五、实验内容1、实验操作流程图2、具体操作步骤（1）芦丁的提取称取槐花米20g，置于干燥的研磨中用钵棒挤压成粗粉。
称取1-1.5g石灰粉（生石灰），置于干净的小研钵中加入10ml水后研成乳液备用。
将粉碎的槐花米置于500ml 的烧杯中，加水300ml，在搅拌下加入石灰乳，调节pH至8-9，加热微沸，维持pH 值至30min，趁热抽滤。