高温胁迫对香菇菌丝生长及其抗哈茨木霉能力的影响
γ-氨基丁酸和海藻糖对高温胁迫香菇菌丝胞外酶活性的影响
γ-氨基丁酸和海藻糖对高温胁迫香菇菌丝胞外酶活性的影响目前,我国香菇栽培基本上依靠传统农业菇棚,经常受到高温胁迫伤害,菌丝生长和子实体发育受到影响,进而导致产量下降,品质下滑。
因此,提高高温环境下菌丝抗逆性,探索施加外援物质缓解菌丝高温胁迫伤害的生物学作用机制,对食用菌逆境生理具有重要的学术价值和生产应用前景。
当生物体受到高温、盐胁迫、干旱等非生物胁迫时,生物体内源性GABA和海藻糖大量合成并积累。
GABA和海藻糖应对非生物胁迫的重要应激作用,受到广大研究人员越来越多的关注。
但是,有关GABA和海藻糖的抗逆境胁迫研究主要是针对植物和酵母菌作为主要的研究对象,而在食用菌抗逆境胁迫方面研究甚少。
因此,本试验通过以高温型香菇菌株XX03和低温型香菇菌株XN68为材料,研究高温胁迫下施用外源不同浓度的GABA和海藻糖对香菇胞外酶酶活大小及变化趋势的影响。
研究结果如下:高温胁迫下,添加一定浓度的外源GABA和海藻糖能够显著增加菌丝内源性GABA和海藻糖含量,以提高菌丝对高温逆境的应激能力。
不同的是,正常生长条件,施加外源GABA对香菇菌丝内源性GABA含量也有明显的促进作用,而添加外源海藻糖对菌丝内源性海藻糖含量没有明显促进效应。
外源添加一定浓度的GABA对香菇菌丝不同胞外酶活性影响不同。
施加外源GABA对高温胁迫下香菇菌株胞外淀粉酶和漆酶活性有明显的促进效应,对CMC酶和蛋白酶有一定的促进效果,对半纤维素酶活性基本无促进效应。
外源添加高浓度(20mM)的GABA对香菇菌丝胞外酶活性整体促进作用为佳。
外源添加一定浓度的海藻糖对香菇菌丝不同胞外酶活性影响不同。
施加外源海藻糖对高温胁迫下香菇菌株胞外淀粉酶、CMC酶和漆酶活性有明显的促进效应,对蛋白酶和半纤维素酶活应促进效应有限。
外源添加高浓度(50mM、1OOmM)海藻糖对香菇菌丝胞外酶活性整体促进效应更持久。
间歇高温条件下4种食用菌生长势的变化及抗高温能力研究
（ｘｒｍｅｈｇ ｍｐ ｒｔｒ ｓ ｔｎ ｎ ｅｏ ｔ ｌｅ ｐ ｒｔｒ） Ｉ ｎｅｍｉｅｔ ｉｈｔｍｐ ｒｔｒ ｉ ｕ ｔｎ ｅ ｅｔｅ ｉｈｔ ｅａ ｅｒ ｉ ａｔ ｄｔ ｐｉ ｍ ｅａｕｅ．ｎｉｔｒ ｔ ｎ ｇ ｅ ｅａ ｅｃ ｃｍｓａ ｃ， ｅ ｕ ｅｓ ａ ｈ ｍａ ｔ ｔ ｈ ｕ ｒ
ＹＵ６ ａ ｄ ８ ）ｗｅ ｅｓ ｌｃｅ ｏｐ ｏ ｅ ｓｉ ｌ ａｔｒ ｔ ｉｈ ａ ｄｌｗ ｅ ｅａｕ ｅａ ｄｍｕｔ－ｉｃ ｌｔｖ ｒ ｃ ｓ ｉｇ ｎ ３ １ ｒ ｅｅ ｔｄ ｔ ｒ ｃ ｓ ｎａｌ ｌｅｎａｅｈｇ ｎ ｏ ｔｍｐ ｒｔ ｒ ｎ ｌ ｃｒｕａｉｅｐ ｏ ｅ ｓｎ ｉ
摘
要 ：通 过 选 用 ４种 常 用 食 用 茵 菌 种 （ 菇 Ｂ １ ５ ，平 菇 豫 ６ ３ ） 香 Ｏ 、８ ６ 、８ １，在 高 低 温 （ 热极 限 温 度 和 最 适 培 耐
养 温度） 交替 的 多循环 处理条件 下 ，比较 ４种 菌种 的茵丝体 生长 势的 变化 及其 抗 高温能力 。结果发现 ．处理 过 的 ４种食 用菌的 菌丝体在 恢复正 常温度后 均 出现 了不 同天数的停 止 生长期 ，香菇 随着生 长停 止期 时间的
关键 词 ：平菇 ；香菇 ；高温 ；生长势 中图分 类号 ：Ｑ８ ４ Ｑ ２ １ ；Ｔ ９ ５ 文 献标 志码 ：Ａ 文 章 编号 ：１ ７ — ３ ６２ ｌ） ５ ０ ４ — ３ ６ ４ ３ ２ （０ ０ ０ — ０ ４ ０
Ｓ ｕ ｙ ｏ ａ ｇ ｓｏ ｏ ｈ Ｖｉ ｏ ｎｄ Ｈｉ ｈ Ｔｅ ｐｅ ａ ｕ ｅ ｔ ｄ ｎ Ｃｈ ｎ ｅ ｆＧｒ ｗｔ ｇ ｕｒａ ｇ ｍ ｒ ｔ ｒ Ｒｅ ｉｔｎ ｐａ ｉ ｔ ｎ ｅ ｍｉｔ ｎ ｉ ｈ Ｔｅ ｐ ｒ ｔ ｅ ｓｓ ｉ ｇ Ｃａ ｃ ｔ ｗｉｈ Ｉ ｔ ｒ ｔｅ ｔＨ ｇ ｍ ｅ ａ ｕｒ ｙ ｉ ｕ ｉ ｌ ｕ ｈ ｏ ｍ ｓ ｎ Ｆｏ ｒＥｄ ｂ ｅＭ ｓ ｒ ｏ
当前香菇菌袋要严防高温
香菇菌袋要严防高温烧菌
进入6月份，气温将会明显升高，白天最高气温要超过35℃以上，夜间温度也在20℃以上，进入高温烧菌的危险期。
我县香菇生产不同程度的存在着接种时间较晚，菇棚建设滞后等现象，对香菇生产会更加不利。
高温会使菌丝的活力大大降低，影响产量，严重的会烧死菌丝，造成不出菇、绝收等后果。
为此，提请菇农朋友要高度重视，做好降温工作，现提出几点要求：
一是目前尚未建好菇棚的，要加快速度建设，及早为菌袋准备充裕的发菌和越夏空间。
在建棚的同时，要兼顾菌袋的温度，及早疏散菌袋，降低菌袋温度。
二是要保证发菌环境的最高温度不要超过30℃。
通过选择阴凉地方、遮盖遮荫网、加强夜间通风等多种措施，切实把发菌环境的温度降下来。
三是切实做好菌袋疏散工作。
菌袋“井”字形或三角形摆放的高度不要超过5层，单排摆放，每排距离大于30厘米。
有条件的，尽量单层、单袋摆放，但要注意严格遮光。
四是认真做好菌袋温度的检测工作。
每天至少测定菌袋温度3次，发现温度高于30℃的，要积极采取相应措施，对于刚刺孔或刺孔时间不长的菌袋，更要特别注意。
陕县农业局
2011年5月27日。
高温季节谨防香菇菌棒烧菌
食药用菌·种植
燥。
将干燥后的蛹虫草按照长度、粗细、色泽不同分级包装。
包装好的蛹虫草应放在干燥通风、避光洁净的架子上贮藏。
五、病虫害防治
1.病害防治。
青霉病防治：接种室、培养室用菌室喷烟雾消毒剂，喷后密闭24～48小时，接种时，接种室要保持干燥、低温；菌种和栽培瓶或栽培盒发现污染立即弃除，并喷洒40％多菌灵200倍药液；控制适宜的培养室温、湿度，加强通风换气。
木霉病防治：除采用青霉的防治方法外，当出现木霉污染时要及时处理污染源，并喷洒石灰水。
2.虫害防治。
螨类：螨类主要为害菌丝，可用虫螨净喷杀。
果蝇类：保持培养室内外的清洁卫生，随时清除废料；培养室的通风口和门窗要安装防虫纱窗；培养料要灭菌彻底；接种室、培养室使用前要熏蒸；黑光灯诱杀。
（据《食用菌》郭尚徐莉娜李艳婷周伟陈楠张生万李银生/文）
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/NONGCUN XINJISHU/农村新技术。
香菇生产过程中主要杂菌污染及其防治
袋口的星点橘红色孢子会变成大团的分生孢子堆。链孢霉菌丝 侵染香菇子实体后，能在短期内覆盖子实体，造成子实体腐烂。 链孢霉的菌丝纤细，生长致密，颜色较白，本身不分泌毒素。主要 依靠其极强的生活力．迅速生长，快速传播ｔ６１。 青霉菌前期症状与链霉菌相似，但是很快青霉菌就会出现 淡绿色的分生孢子，气生菌丝较少，只在菌袋中生长，一般不长 到棉塞上。
４－５９／ｍ３。
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・３１・
盘墨圈固
３．２把好原料关：确保所用的原料新鲜，不霉变，兀结块．配制前 暴晒３—４天；料中添加２％石灰粉，提高料的ｐＨ养料碳氮比要适 ’白：；培养料含水量要适中．拌料时，培养料含水量以６０％左有为 宜，含水量过高．易致病害。 ３－３灭菌要彻底：培养料灭菌彻底是消灭杂菌初侵染源的根本措 施：严格规范灭菌，不能一边装袋一边上灶一边加热，以免菌棒在 灶内焖烤：开始灭菌时火力一定要猛，争取在最短的时间内让灭 菌灶里的温度达到１００℃．当灶内温度达到１００℃时火力要均匀． 并须保温２０小时以上或压力达到１．４７ｘ１０５Ｐａ（料袋温度１２６％左 有）高压灭菌３小时，做到灭菌彻底？灭菌结束，注意烘烤棉塞，避 免棉塞潮湿：当灶内温度低于８０℃时要及时出灶，边出灶边装入 套膜并在袋ｎ打结后搬运至干净场所冷却二菌棒必须严格冷却至 ２８℃以下严格按尤菌操作工艺接种．以切断污染途径 ３．４菌种：①选择适龄优质菌种，保证菌种具有旺饯的生活力：用 于生产的一级种保藏期以一个月内使用为佳，二级种和三级种保 藏期以２０天内使用为最好：菌龄越长，菌丝生活，Ｊ越弱，污染的 机率也越大＝②接种时，适当增加接种量，也能有效减少杂菌污染 的机会。③增加栽培品种，在香菇与杂菌之间也仔住类似于植物 病原菌中的生理小种的现象［８Ｉ，某个区域长期种植单一香菇品种， 在客观上对某种对香菇菌株侵染性较强的杂菌进行了定向选择， 导致该菌株越来越多，达到一定程度在条件适宜时，便可能大规 模爆发：而在栽培年数较少的场所，这种现象就很少见，因此从长 远看应该提高埘香菇育种的重视，在同一香菇种植区选育推广多 个适宜栽培的香菇品种。 ３．５温湿度控制：避开高温期．菌种生产要避开闷热、潮湿的夏季 高温期，如确实不能避开，就要采取降温措施，高温胁迫引起香菇 菌丝抵抗哈茨木霉能力下降１８１，共至死亡，最终导致香菇菌棒腐烂 病发生；香菇与杂菌生长所需要的最佳温湿度并不相同［９１，利用这 一特点，创造有利于香菇子实体生长的条件、而不利于竞争性杂 菌发生的环境，可以减少杂菌污染． ３．６管理：经常检查菌袋，及时清除杂菌污染的菌袋．防止重复侵 染．｜发现被杂菌侵染的菌袋，立即用０．１％高锰酸钾浸湿的双层纱 斫ｊ包裹，装入塑料袋．远离香菇栽培场所深埋或烧掉 时清理菇根和碎菇，清除污染源，降低污染率＝ ３．７药剂处理：培养料配制时，在培养料中加入占干料重量０．２％ 的２５％多菌灵可湿性粉剂或０．１％的７５％甲基硫菌灵可湿性粉 剂，可抑制培养料中残存的或发菌期侵入的病原分牛．孢子二袋口、 颈罔、报纸上污染的，去掉污染颈圈，并用０．１％高锰酸钾或０．１％ 克霉灵溶液洗净袋ＶＩ，换上经消毒的颈圈、报纸，继续发菌：袋内 ｍ现杂菌，可用５００倍甲醛液或５％口Ｔ湿性甲基托布津液．用注射 器注入感染部位后用胶布封住针孑Ｌ，可控制蔓延， 采收后，及
高温胁迫对香菇菌丝生长及其抗哈茨木霉能力的影响
高温胁迫对香菇菌丝生长及其抗哈茨木霉能力的影响拮抗和接种试验表明，胁迫温度及其处理时间共同影响香菇（Lentinula edodes）菌丝生长及其抵抗哈茨木霉（Trichoderma harzianum）侵染的能力，3个供试菌株Q7、L607和Y2对高温胁迫的耐受能力不同，37～42 ℃短时间胁迫处理对菌丝生长及其抗哈茨木霉能力没有明显影响。
Q7在37 ℃处理24 h或39 ℃处理18 h和24 h，Y2在39 ℃处理24 h和48 h，菌丝体转移至PDA中正常温度（25 ℃）均能继续生长，但已失去了抵抗哈茨木霉侵染的能力。
但L607在39 ℃处理不超过30 h时，保持了对哈茨木霉的抗病力。
高温胁迫处理时间过度延长可导致香菇菌丝死亡。
栽培试验表明，25 ℃室内培养的香菇菌棒没有发生腐烂病，而在缺乏控温条件的栽培棚内，菌棒腐烂率达到76%。
温度测定表明，当秋栽香菇制袋时间提前至7月中旬时，7月下旬至8月上旬栽培棚内菌丝体受到了40～43 ℃高温胁迫。
本研究表明，高温胁迫引起香菇菌丝抵抗哈茨木霉能力下降，甚至死亡，最终导致香菇菌棒腐烂病发生。
香菇；哈茨木霉；抗性；高温胁迫；菌丝生长；菌棒腐烂高温胁迫导致包括食用菌在内的各种生物体的活性氧氧化生物膜，产生多种具有伤害作用的不饱和醛酮产物，使蛋白质变性，破坏细胞膜稳定性，造成一系列生理紊乱，是生理学研究的重要领域之一[12]。
食用菌对高温胁迫的耐受性是影响其正常生长发育的重要特性[3]。
哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是香菇菌丝培养期间最为常见的木霉种类[45]，前人已经注意到香菇菌丝生长及存活能力与环境条件及木霉菌存在某种关系；TOKIMOTO研究了碳氮源对木霉和香菇菌丝互作的影响[6]，BADHAM 研究了环境和栽培条件对哈茨木霉和香菇的长速和竞争性影响[7]。
香菇菌棒腐烂病在生产中时有发生，但其发生原因研究多基于现场调查与经验判断，将其归结于气候异常、通风散热差、木霉菌感染或高温烧菌等原因，尚未见系统的研究[89]。
花菇栽培技术不同生长因子与环境因素的影响分析
花菇栽培技术不同生长因子与环境因素的影响分析花菇（Pleurotus ostreatus）是一种常见的食用菌，具有丰富的营养成分和独特的口感，受到了广大消费者的喜爱。
为了提高花菇的产量和质量，栽培技术变得越来越重要。
而生长因子和环境因素是影响花菇生长和产量的重要因素之一。
本文将对花菇栽培技术中不同生长因子和环境因素对其生长和产量的影响进行分析。
一、温度对花菇的影响温度是花菇生长的重要环境因素之一，对其生长和产量有着显著影响。
一般来说，花菇对温度的要求较为宽广，适应范围在12°C-30°C之间。
在花菇的不同生长阶段，温度对其影响也各不相同。
1. 孢子发芽和菌丝生长阶段在孢子发芽和菌丝生长阶段，较低的温度（10°C-20°C）有利于孢子发芽和菌丝生长的速度和强度，有利于形成致密的菌丝网络。
然而，温度过低或过高都会对花菇的生长产生负面影响，降低菌丝生长速度和发芽率。
2. 菌褶伸展和子实体形成阶段这个阶段，适宜的温度为18°C-25°C，温度过低会导致花菇的菌褶无法正常展开，产生低雅的外观，影响产量和品质。
而温度过高则会造成花菇快速生长，减少产量。
因此，在花菇的不同生长阶段，需要根据不同的温度要求进行调控，以获得更好的生长和产量。
二、湿度对花菇的影响湿度是花菇生长的关键环境因素之一，对花菇的产量和品质有着重要影响。
花菇对湿度的要求较高，一般在80%-90%之间为宜。
在花菇的菌褶伸展和子实体形成阶段，较高的湿度能够保持菌褶的张力，使其完全展开，形成规整的外观。
而低湿度会导致菌褶干燥、收缩，影响外观的美观度。
然而，过高的湿度也会造成花菇菌褶过度展开，品质下降。
因此，在花菇生长的过程中，保持适宜的湿度是非常重要的。
三、光照对花菇的影响光照是花菇生长的重要生长因子之一，对其形态发育、品质和产量有着重要影响。
花菇是光慢反应菌类，它偏爱弱光环境，对光照的要求不高。
高温胁迫对糙皮侧耳菌丝生理生化特性的影响
高温胁迫对糙皮侧耳菌丝生理生化特性的影响研究40 ℃高温胁迫对糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）新831菌丝生理生化特性的影响。
与25 ℃对照相比，40 ℃处理24 h菌丝丙二醛含量升高，超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性升高，可溶性蛋白质和游离脯氨酸含量均增加，菌丝漆酶和纤维素酶活性下降。
高温胁迫下，酯酶同工酶条带明显缺失或减弱。
糙皮侧耳；高温胁迫；生理生化特性食用菌在生长发育过程中，温度胁迫会导致菌丝生长停滞甚至死亡，这与不适宜的温度引起食用菌细胞组织结构损伤和生理代谢紊乱有关[1]。
温度胁迫下，生物细胞内活性氧类增加，导致细胞结构损伤，多种保护系统的酶如过氧化物酶和超氧化物歧化酶等发生应激变化，用以缓解温度胁迫造成的伤害[2]。
目前有关逆境胁迫下植物细胞活性氧代谢机制已有很多报道，但在食用菌上研究较少[3]。
食用菌能产生分解纤维素、半纤维素和木质素等胞外酶系，酶量和酶活因食用菌利用的基质和所处的生理发育阶段的不同而有差异[4]。
同工酶几乎存在于包括食用菌在内的所有生物中[5]。
同工酶酶谱的表现形式不仅受遗传因子的控制，还受生理因素的影响，不同环境条件下同工酶酶谱的条带有差异[6]。
温度是影响糙皮侧耳生长发育的重要条件之一，通过温度调节可以控制菌丝生长和子实体发育。
糙皮侧耳菌丝生长温度范围为5～35 ℃，25 ℃为最适生长温度，如果超过40 ℃，菌丝生长就会受到抑制甚至死亡。
为深入研究高温胁迫对糙皮侧？Pleurotus ostreatus）菌丝的影响，笔者对40 ℃胁迫24 h后其菌丝生理生化指标的变化进行研究。
1材料与方法1.1供试菌株糙皮侧耳（P. ostreatus）新831，河南农业大学生命科学学院应用真菌研究室保藏。
1.2培养方法培养料及制作方法同参考文献[7]，栽培袋（22 cm×45 cm×0.004 cm）接种后，放入培养室培养至菌丝期（约发满袋2/3），以25 ℃为对照、40 ℃处理24 h取样。
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高温胁迫对香菇菌丝生长及其抗哈茨木霉能力的影响拮抗和接种试验表明，胁迫温度及其处理时间共同影响香菇（Lentinula edodes）菌丝生长及其抵抗哈茨木霉（Trichoderma harzianum）侵染的能力，3个供试菌株Q7、L607和Y2对高温胁迫的耐受能力不同，37～42 ℃短时间胁迫处理对菌丝生长及其抗哈茨木霉能力没有明显影响。
Q7在37 ℃处理24 h或39 ℃处理18 h和24 h，Y2在39 ℃处理24 h和48 h，菌丝体转移至PDA中正常温度（25 ℃）均能继续生长，但已失去了抵抗哈茨木霉侵染的能力。
但L607在39 ℃处理不超过30 h时，保持了对哈茨木霉的抗病力。
高温胁迫处理时间过度延长可导致香菇菌丝死亡。
栽培试验表明，25 ℃室内培养的香菇菌棒没有发生腐烂病，而在缺乏控温条件的栽培棚内，菌棒腐烂率达到76%。
温度测定表明，当秋栽香菇制袋时间提前至7月中旬时，7月下旬至8月上旬栽培棚内菌丝体受到了40～43 ℃高温胁迫。
本研究表明，高温胁迫引起香菇菌丝抵抗哈茨木霉能力下降，甚至死亡，最终导致香菇菌棒腐烂病发生。
香菇；哈茨木霉；抗性；高温胁迫；菌丝生长；菌棒腐烂高温胁迫导致包括食用菌在内的各种生物体的活性氧氧化生物膜，产生多种具有伤害作用的不饱和醛酮产物，使蛋白质变性，破坏细胞膜稳定性，造成一系列生理紊乱，是生理学研究的重要领域之一[12]。
食用菌对高温胁迫的耐受性是影响其正常生长发育的重要特性[3]。
哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是香菇菌丝培养期间最为常见的木霉种类[45]，前人已经注意到香菇菌丝生长及存活能力与环境条件及木霉菌存在某种关系；TOKIMOTO研究了碳氮源对木霉和香菇菌丝互作的影响[6]，BADHAM 研究了环境和栽培条件对哈茨木霉和香菇的长速和竞争性影响[7]。
香菇菌棒腐烂病在生产中时有发生，但其发生原因研究多基于现场调查与经验判断，将其归结于气候异常、通风散热差、木霉菌感染或高温烧菌等原因，尚未见系统的研究[89]。
通常情况下，湖北省随州市及其周边地区香菇栽培在8月下旬至9月中旬制袋，秋冬季及翌年春季棚内出菇，称之为秋栽模式。
2012年以来，由于劳动力资源不足，为了错开制袋高峰期，部分农户将秋栽制袋时间提前至7月中下旬，香菇菌丝在培养期间遭遇高温，导致菌棒腐烂病在湖北省大面积发生，每年烂棒达到2000万棒以上，造成了十分严重的经济损失。
笔者在验证了香菇菌棒腐烂病与菌棒石膏含量、刺孔次数、补水时间及补水方式等不具有相关性的基础上，研究了高温胁迫对香菇菌丝生长及其抗哈茨木霉能力的影响，明确了秋栽香菇菌棒腐烂病的发生原因。
1 材料与方法1.1供试菌株香菇供试菌株秋栽7号（Q7）、L607和雨花2号（Y2）菌株均由华中农业大学菌种实验中心提供。
哈茨木霉（T. harzianum）菌株系笔者自湖北省随州市随县香菇腐烂菌棒上分离，经过形态学和ITS序列鉴定，保存于华中农业大学应用真菌研究所。
1.2病害症状观察2012～2014年笔者在湖北省随州市随县草店镇、殷店镇和三里岗镇等秋栽香菇产区进行了现场调查。
观察了香菇菌棒腐烂病的症状特征及变化规律，对发病菌棒表面和横切面特征进行了观察，调查了不同栽培棚中香菇菌棒生产管理措施及发病情况，分析了解菌棒腐烂病发生规律。
1.3高温胁迫处理Q7菌丝与哈茨木霉的对峙培养将培养料（79%木屑，20%麸皮，1%石膏）装入200 mm×20 mm的双头开口玻璃管中，橡皮塞封口，灭菌；用直径8 mm的打孔器从PDA上取供试菌株Q7经过活化的菌丝片，每支玻璃管一端接3块菌丝片；25 ℃下培养20 d之后，分别置于37 ℃条件下处理6 h和24 h作为高温胁迫处理，以25 ℃培养相同时间为对照。
在高温胁迫处理之后，在玻璃管另一端接入同样大小和数量的哈茨木霉菌丝片，25 ℃下培养，观察香菇菌丝与哈茨木霉菌丝相互接触时的对峙反应。
试验设3次重复。
1.4高温胁迫处理对Q7菌丝生长能力的影响在18 mm×180 mm的单头开口试管中装入香菇栽培的培养料，灭菌，按1.3方法分别接入Q7的菌种；25 ℃下培养至菌丝长满试管，再分别置于30、33、36、39、42 ℃五个温度梯度下，分别处理6、12、18、24、30、36、42、48 h，以25 ℃条件下培养相同时间为对照。
之后从试管中挑出黄豆大小的培养物接种于PDA平板，25 ℃培养观察菌丝生长情况。
采用十字交叉法，测量培养7 d后不同处理下香菇菌落直径，每个处理设5个重复，采用SPASS 20.0进行差异显著性分析。
1.5高温胁迫处理对3个供试菌株菌丝存活及抗哈茨木霉能力的影响参照1.4的方法，对3个供试菌株（Q7、L607和Y2）长满培养料的菌丝体，在39 ℃条件下胁迫处理18、24、30、36、42、48 h，在42 ℃条件下胁迫处理6、12、18 h，以25 ℃条件下培养相同时间为对照。
之后从试管中挑出黄豆大小的培养物，接种于PDA平板，25 ℃培养观察菌丝生长状况。
参考1.3方法，在试管中已胁迫处理的香菇菌丝表面接入哈茨木霉菌丝片，25 ℃下培养，观察哈茨木霉侵染香菇菌丝的情况。
1.6香菇菌棒培养温度及其腐烂病发生情况试验在随州市随县殷店镇秋栽香菇生产基地进行。
2014年7月20日接种香菇栽培菌株Q7共600个栽培袋，其中300袋置于室内（25 ℃）培养，另300袋置于栽培棚进行培养（栽培棚采用白色塑料薄膜和黑色遮阳网各一层进行覆盖，菌袋分别置于栽培棚第1～6个层架上，菌袋之间保持4～5 cm距离）。
7月28日进行菌袋第一次刺孔，同时开始对栽培棚内气温和菌袋内部温度进行抽样测量。
室内培养（25 ℃）的菌袋于10月15日转入同一个栽培棚中，在层架上随机摆放。
采用常规方法对菌棒进行转色和出菇管理，观察菌棒腐烂病发生情况。
曹现涛，等：高温胁迫对香菇菌丝生长及其抗哈茨木霉能力的影响2 结果与分析2.1病害症状与发生情况香菇菌棒腐烂病一般在当年秋冬季至翌年4月发生。
在第一潮菇采收之后，菌袋表面出现零星的灰白色菌落，之后菌落扩大，菌落中央出现绿色或淡绿色分生孢子堆，并散发出强烈的霉味；被感染的菌棒深褐色，水浸状，松软，腐烂；菌棒横断面上腐烂部位深褐色，感病部位与正常菌丝之间有红褐色拮抗线；病斑可以逐渐向菌棒表面及内部的正常菌丝部位扩展，直至完全感染整个菌棒，致使菌棒腐烂松散，易折断（封三图1）。
调查表明，香菇菌棒腐烂病在随州市及周边各个种植区域均有发生，但以桐柏山南侧低丘河谷地带种植区发生最严重，而大洪山及周边丘陵山区发生较轻。
菌丝培养场所对发病率有明显影响，砖房室内培养菌丝时发病率明显较低，而栽培棚中培养菌丝时发病率较高。
随着采收次数增加，菌棒发病率迅速上升，至第四潮菇时发病率达到60%～80%，个别菇棚可以达到90%以上，原因是前期高温胁迫使菌丝活力衰退，抗木霉能力下降，每次出菇后菌丝营养被进一步消耗，浸水补水时菌棒被更多的木霉孢子感染，加快菌棒腐烂病传播速度。
A：菌棒表面腐烂呈褐色；B：菌棒横切面出现红褐色拮抗线；C：菌棒表面出现淡绿色分生孢子堆A，Brown rot on log surfaces；B，Redbrown antagonistic streak in log transsection；C，Cluster of light green conidia on log surface图1 香菇菌棒腐烂病的症状Fig.1 Symptoms of log rot inL. edodes图2 Q7菌丝37℃胁迫处理后与哈茨木霉菌丝的对峙培养结果Fig.2 Antagonistic reaction between L. edodes Q7 mycelia treated at 37 ℃and T. harzianum mycelia2.2高温胁迫处理Q7菌丝与哈茨木霉对峙培养的拮抗反应在试管培养料中，当Q7菌丝在37 ℃处理6 h时，它与哈茨木霉菌丝接触部位产生明显的黄褐色拮抗线，表明香菇菌丝抵抗哈茨木霉的能力强，且与对照处理（25 ℃）一致（封三图2）。
当香菇菌丝在37 ℃处理24 h之后，菌丝迅速被哈茨木霉菌丝覆盖，表明其失去了抵抗哈茨木霉感染的能力。
2.3高温胁迫处理对Q7生长能力的影响与对照相比，受高温胁迫后恢复生长的香菇菌丝，其长速快于处理前。
高温胁迫可导致香菇菌丝抗逆性迅速减弱，超过一定阈值会使香菇菌丝死亡。
在香菇菌丝未致死的条件下，这种高温胁迫是可逆的，在适宜条件下能恢复生长活力，甚至生长速度加快（表1），未观察到菌落形态有明显变化。
**不同温度处理相同时间存在极显著差异；不同大写字母表示相同温度不同时间处理存在极显著性差异（P 0.01）；/表示菌丝死亡Values are the means （mm/d）±SD （n=5）；* indicates a significant difference （P 0.01）among different temperature treatments for the same time period；different higher case letters indicate a significant difference （P 0.01）among different time treatments at the same temperature；（/）nonviable mycelium2.4高温胁迫处理对3个供试菌株存活及抗哈茨木霉能力的影响G：Growth；D：Nonviable；+：Resistant；-：Sensitive从表2可以看出，在39 ℃下处理不超过24 h，3个供试菌株菌丝转管至25 ℃后均能恢复正常生长。
但39 ℃条件下Q7处理达到30 h，以及L607处理达到36 h时，菌丝均无法恢复生长，但雨花2号处理48 h菌丝仍然可以恢复生长。
在42 ℃条件下，秋栽7号和L607在处理6 h后，菌丝可以恢复生长，但3个供试菌株在其它处理条件下均已死亡，不能恢复生长（表3）。
在39 ℃高温下胁迫处理菌株Q7 18 h和24 h、胁迫处理菌株Y2 24 h和48 h，两个菌株（Q7，Y2）菌丝体虽然还能继续生长，但已失去了抵抗哈茨木霉感染的能力（表2）。
哈茨木霉菌丝能迅速感染受39 ℃高温胁迫处理24 h的菌株Q7的菌丝体。
但在39 ℃高温胁迫处理时间不超过30 h时，L607既能继续生长，又保持了对哈茨木霉的抗性。
3个供试菌株对42 ℃高温胁迫的耐受能力存在明显差异。
在42 ℃下处理6 h时，Q7和L607菌丝生长和抗哈茨木霉能力均没有受到显著影响，但Y2菌丝已死亡，而3个供试菌株处理12 h以上菌丝均全部死亡。