黄连内生真菌分离培养条件筛选
培养真菌所需要的条件
培养真菌所需要的条件
1.湿度：真菌生长所需的湿度通常在70-90%之间，可以通过保持适当的空气湿度和提供足够的水分来实现。
2. 温度：真菌生长的最适温度因物种而异，但通常在20-30摄氏度之间。
需要注意的是，温度过高或过低都会影响真菌的生长。
3. 光照：大多数真菌对光照并不敏感，一些物种甚至需要避光。
因此，在培养真菌时通常需要在暗处进行。
4. 营养物质：真菌需要碳源、氮源、矿物质和维生素等营养物质来生长。
这些营养物质可以通过添加特定的培养基来提供。
5. 氧气：真菌需要充足的氧气来进行呼吸和代谢。
因此，在培养真菌时需要提供足够的通气口和空气流通。
6. pH值：真菌生长的最适pH值因物种而异，但通常在5.5-8.0之间。
因此，在培养真菌时需要调整培养基的pH值。
7. 洁净度：真菌容易受到细菌和其他微生物的污染，因此在培养真菌时需要保持周围环境的洁净。
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黄连的分析实验报告
实验名称：黄连分析实验一、实验目的1. 了解黄连的化学成分和药理作用。
2. 掌握黄连提取、分离、鉴定和含量测定的方法。
3. 提高实验操作技能，培养严谨的科学态度。
二、实验原理黄连为毛茛科植物黄连（Coptis chinensis Franch.）、三角叶黄连（Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao）或云连（Coptis teeta Wall.）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、泻火解毒的功效，用于湿热泻痢、黄疸、高热神昏、心火亢盛、痈肿疮毒等症。
本实验主要采用以下方法对黄连进行分析：1. 提取：采用溶剂萃取法从黄连中提取有效成分。
2. 分离：采用薄层色谱法（TLC）对提取液进行分离。
3. 鉴定：通过比移值（Rf）和对照品进行鉴定。
4. 含量测定：采用紫外-可见分光光度法测定黄连中有效成分的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：黄连粉末、乙醇、正己烷、氯仿、甲醇、硅胶薄层板、对照品（盐酸小檗碱）、蒸馏水等。
2. 仪器：分析天平、超声清洗器、电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、紫外-可见分光光度计等。
四、实验步骤1. 提取：称取一定量的黄连粉末，加入适量乙醇，超声提取30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣用甲醇溶解，定容至一定体积。
2. 薄层色谱（TLC）分离：取适量上述溶液，点于硅胶薄层板上，用氯仿-甲醇（8:2）为展开剂，展开，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热显色。
3. 鉴定：将薄层板与对照品薄层板进行比对，观察Rf值。
4. 含量测定：（1）标准曲线绘制：精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇溶解，制成一定浓度的对照品溶液。
分别吸取不同体积的对照品溶液，加入一定量的显色剂，在510nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度（μg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。
（2）样品测定：精密吸取上述提取液，按照标准曲线绘制方法进行测定，计算黄连中有效成分的含量。
五、实验结果与分析1. 提取：通过超声提取法，从黄连中成功提取出有效成分。
黄连抗菌实验报告
一、实验目的本研究旨在探讨黄连的抗菌作用，并通过实验验证其对常见细菌的抑菌效果。
通过对黄连提取物的最低抑菌浓度（MIC）进行测定，为黄连在临床应用中的抗菌活性提供科学依据。
二、实验材料1. 实验菌株：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）等。
2. 黄连提取物：采用70%乙醇提取黄连粉末，浓度为100mg/mL。
3. 实验试剂：MHB肉汤、MHB琼脂、无菌生理盐水、无菌棉签、无菌滤纸等。
4. 仪器设备：恒温培养箱、生物安全柜、比浊仪、微量移液器、无菌试管等。
三、实验方法1. 菌株培养：将实验菌株分别接种于MHB肉汤中，37℃恒温培养24小时，备用。
2. 黄连提取物制备：将黄连提取物用无菌生理盐水稀释成不同浓度梯度（如：1mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、8mg/mL、16mg/mL等）。
3. 抑菌实验：取无菌试管，分别加入不同浓度的黄连提取物和MHB肉汤，混合均匀。
将培养好的实验菌株用无菌棉签均匀涂布于MHB琼脂平板上，然后将含有黄连提取物的试管倒置在平板上，37℃恒温培养24小时。
4. MIC测定：根据平板上抑菌圈的大小，确定黄连提取物对实验菌株的最低抑菌浓度（MIC）。
四、实验结果1. 黄连提取物对实验菌株的抑菌效果：黄连提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等实验菌株均表现出一定的抑菌效果，且随着浓度的增加，抑菌效果逐渐增强。
2. 黄连提取物的最低抑菌浓度（MIC）：黄连提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的MIC分别为4mg/mL、8mg/mL、16mg/mL、32mg/mL、64mg/mL。
18株植物内生真菌的分离纯化及鉴定
桃金娘科番樱桃属
月橘
Murraya paniculata
芸香科九里香属
半夏
Pinellia ternata
天南星科半夏属
青木
Aucuba japonica 桃叶珊瑚科桃叶珊瑚属
舟山新木姜子 Neolitsea sericea
樟科新木姜子属
水蜡树
Ligustrum obtusifolium
木犀科女贞属
number of isolation and screening to obtain valuable endophytic fungi，it can provide more sources for novel
natural products.In this study，12 kinds of plants were randomly picked.18 strains of endophytic fungi were isolated
山茶花
Camellia japonica
山茶科山茶属
主要功效及用途 清热降火、消肿解毒、活血化瘀 化湿清热、祛风通络，治痢疾、腰痛 药材、调味料，健胃、活血、散寒
叶片肥厚，主要用于观赏 有催吐功效，主要治疗痢疾 盆栽，果肉多汁可食，制作优质软糖 祛风除湿、行气活血、散瘀止痛 用于痰多咳喘，眩晕，呕吐反胃 园林装饰及盆栽，保护肝功能 平喘，抗心律失常，抗真菌
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
收稿日期： 2015－02－12 作者简介： 鲁群（ 1987－ ） ，女，博士，讲师，研究方向： 天然产物化学与食品功能因子，E－ mail： luqun@ 。 基金项目： 中国国家留学基金委资助。
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表 1 采集植物信息 Table 1 Information of plants
黄连化学成分的分离与鉴定
黄连化学成分的分离与鉴定黄连是一种中药，在中医学中被广泛应用于治疗各种疾病。
黄连的主要功效包括清热解毒、燥湿止泻、消炎止痛等。
黄连中含有丰富的化学成分，其中包括黄连素、蒽醌类、生物碱、黄酮类、苯丙酮类、黄酮类、黄酮苷类、挥发油等多种成分。
这些化学成分对黄连的药理作用起到了重要的作用。
本文将介绍黄连中主要的化学成分的分离与鉴定方法。
一、黄连素的分离与鉴定黄连素是黄连中的主要成分之一，具有很好的药理作用。
黄连素的提取方法可以采用超声波辅助提取法。
将黄连粉末与甲醇混合，置于超声波浴中进行提取，得到甲醇提取物。
然后将甲醇提取物过滤，去除杂质，再用旋转蒸发仪将溶液浓缩至一定程度。
最后，用硅胶柱层析法对甲醇提取物进行分离纯化，得到黄连素。
黄连素的鉴定方法可以采用高效液相色谱法（HPLC）。
将黄连素样品与标准品进行比较，通过检测样品中黄连素的峰面积和保留时间，确定黄连素的含量和纯度。
此外，还可以采用红外光谱法（FTIR）和质谱法（MS）进行黄连素的鉴定。
二、蒽醌类的分离与鉴定蒽醌类是黄连中的另一类重要成分，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等作用。
蒽醌类的提取方法可以采用超声波辅助提取法或微波辅助提取法。
将黄连粉末与乙醇混合，置于超声波浴或微波炉中进行提取，得到乙醇提取物。
然后将乙醇提取物过滤，去除杂质，再用旋转蒸发仪将溶液浓缩至一定程度。
最后，用硅胶柱层析法对乙醇提取物进行分离纯化，得到蒽醌类。
蒽醌类的鉴定方法可以采用高效液相色谱法（HPLC）。
将蒽醌类样品与标准品进行比较，通过检测样品中蒽醌类的峰面积和保留时间，确定蒽醌类的含量和纯度。
此外，还可以采用红外光谱法（FTIR）和质谱法（MS）进行蒽醌类的鉴定。
三、生物碱的分离与鉴定生物碱是黄连中的一类重要成分，具有镇痛、抗炎、抗菌等作用。
生物碱的提取方法可以采用乙酸乙酯-正丁醇-水三相分配法。
将黄连粉末与乙酸乙酯混合，加入正丁醇和水，进行三相分配，得到生物碱的乙酸乙酯层。
分离植物内生真菌操作流程
分离植物内生真菌操作流程1.材料准备：植物样本、剪刀、镊子、70%乙醇、3%次氯酸钠（本实验用4%84）、酒精灯、计时器、平板、锥形瓶，无菌水，离心管（带盖，灭菌）、打开无菌操作台灭菌30min。
（1）植物样本的采集：选取生长状态良好，不要有病斑或者枯枝烂叶，每种植物采取三株标本，要带有叶子、叶柄和枝条及其他部位，将样本名字写在小纸条上放在装标本的袋子里，采下来的标本与写有名字的纸条一同拍照，样本上有脏东西时，请用纸轻轻擦掉，若不清楚植物名字，请将整棵植物拍照留用于鉴定，并做好相关记录。
（2）制作PDA固体培养基，在无菌操作台中倒平板，每瓶250ml的培养基大概倒15个板，待其凝固后用于接种。
2.清洗：认真用清水将标本洗净，洗去标本表面的灰尘，去除枯叶，备用。
3.取样：（1）在叶片的左上、右上、左下，右下和正中五个部位进行取样，剪取5mm*5mm的叶片，如果是叶柄或枝干，则剪取5~10mm，若是比较粗的枝干或圆圆的果实之类的，总之比较大的，则将它切开，再剪取样本，样本不要剪的太大或太小。
（2）每种植物的叶子，叶柄，枝干等其他部位，每种部位接种两块板，大板每个要接种五个样本即左上、右上、左下，右下和正中，小板每个接种四个样本即左上、右上、左下，右下，计算好所要剪的样本数，尽量多剪几个，以免后面的表面灭菌中冲洗时被冲掉。
（3）若植物标本有剩余，且是没有洗过的，重新装好，放到冰箱里，备用，洗过的扔掉。
（4）每种植物标本所剪的样本放在一个50ml的离心管中，放在试管架上，并且每个离心管上要标好所对应的植物标本。
4.表面灭菌：在无菌操作台中进行（1）先向各离心管内倒入适量（10~20ml）70%乙醇，拧紧盖子，用计时器开始计时1min,每10秒钟晃动离心管几次，使其充分灭菌。
（2）1min后，拧松盖子，将乙醇倒入事先准备的锥形瓶中，注意不要将管中样本倒出，倒出的样本不要再放入其中，也不要用手碰到样本，样本不可以接触到除了离心管以外的东西。
植物内生菌的筛选及其抗性测定
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3.1.2、植株生理指标测量：将菌株的 SNB 发酵液拌土，每克土接种量约为 108cfu〃g-1，采取花盆育苗，第 1 片真叶 展平后进行移栽，30d 后重复浇灌发酵菌 液。60d 后开始取样，测定植株的地上部 株高以及植物的鲜重和干重等，分析待测 菌对盆栽青稞的促生效果。
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3.1.3、叶绿素含量测定：取 0.1g 新鲜青稞 绿色叶片，在无菌研钵中剪碎，加入少量 石英沙及 0.5mL 丙酮进行研磨，后再加 10mL 80%丙酮继续研磨。过滤提取液用 80%丙酮 25mL 定容。CK：80%丙酮溶液， 分别在 645、652、663 和 470nm 时的光 密度，计算叶绿素 a、b 和胡萝卜素的浓度 （mg〃L-1）以及叶绿体色素含量。
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1.2、复筛拮抗菌
具体步骤：对初筛后的优良内生菌，用打孔器打成 4mm 菌饼，将 3 块接种于 150ml 的液体培养基内，28℃， 180r/min 培养 60h，后于冷冻离心机上 8000r/min 离心 20min，上清液既为待测发酵液。将上述处理后的内生菌 发酵液 3ml 与 20ml 的培养基充分摇匀混合制平板，待培 养基冷却后在平板中央接种直径为 4mm 各植物致病菌菌 块，以加灭菌水的 PDA 培养基为对照。试验设 3次重复， 28℃暗培养 3d，观察测量并记录菌落直径。记录结果并 计算抑制率。
黄连中生物碱的提取分离及检识
黄连中生物碱的提取分离及检识标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]黄连中生物碱的提取分离及检识（杨翊涵中药学一班 1302010138）【摘要】黄连为多年生草本植物,是我国传统中药,在我国中西部地区分布广泛,具有清热燥湿,泻火解毒等功效,其根、茎味极苦,苦味源于所含的多种生物碱。
本文总结整理了黄连中小檗碱提取分离实验过程的步骤方法，注意事项，并且整理了黄连中生物碱的有效成分、存在形式，生物碱的溶解性规律，以及实验过程中各种提取液，添加试剂的目的、原理与效果。
【关键词】黄连生物碱小檗碱提取分离检识1.1黄连有效成分黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
1.2小檗碱小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
2.1实验原理生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。
它们是人类对植物研究得最早最多的一类有效成分,现已分离出有六千余种。
这些生物碱在植物体内一般均与有机酸或无机酸结合成盐而存在,只有弱碱性生物碱往往呈游离状态,还有一些是与糖结合成苷而存在。
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黄连内生真菌分离培养条件筛选摘要：本试验采用压贴法通过对黄连根、茎、叶在不同次氯酸钠浓度及不同表面消毒时间的PDA培养基上的培养，选出黄连内生真菌的适宜培养条件；在获得适宜培养条件后重新培养所有部位，待其长菌后挑选菌落边缘菌丝再培养，如此反复，直到获得纯培养物为止。
通过培养筛选在主根、须根、叶柄、叶片四个部位共获得了60多种菌株，并对分离出的菌株进行保种，为后续的菌株鉴定、菌株抗菌活性的测定做准备。
关键词：黄连，内生真菌，分离条件，培养条件Endophyticfungi of Coptis separation and culture conditions screeningAbstract: The test select the suitable cultivation condition of endophytic fungi ,using pressure stick method cultivate roots, stems and leaves on PDA medium at different concentrations of sodium hypochlorite and different surface sterilization time.Recultivate all parts after acquising suitable cultivation,then select ege colonies and recultivate when they grow fungi,then circulate the procedure,until get pure culture.By cultivating and selecting the roots,fibrous roots,petiole and leaves, more than 60 kinds of fungi are found ,and isolated strains are breed,which is preparation for subsequent strains of identification, the determination of strains antimicrobial activity. Keywords:Coptis, Endophytic fungi, Separation conditions, Culture conditions黄连（Coptis chinensis Franch）是我国名贵中药材之一，含有大量的异喹啉类生物碱[1]（小蘖碱、黄连碱、甲基黄连碱、小蘖红碱、药根碱、阿魏酸等）。
尤其是小蘖碱对人体病原细菌和皮肤真菌[2]具有广谱的抗菌活性，在医药中被广泛应用；同样，小蘖碱对许多植物病原真菌和细菌也有显著的抑制作用。
Hirano, H.等用硫酸小蘖碱处理大麦种子减轻了大麦条纹花叶病毒病（BBMV）的发生[3]。
黄连的药理研究主要以小蘖碱和黄连解毒汤为重点，主要包括抗微生物作用（抗菌、抗病毒）[4]、镇静作用、止泻作用、健胃作用[5]、对心脏心率[6]和心律作用等[7]。
黄连及复方临床应用常用于治疗痢疾、急性肠胃炎、慢性腹泻、呼吸道感染、白喉、百日咳、结核性胞膜炎、萎缩性鼻炎、流行性结膜炎、化脓性中耳炎、口疮、牙周炎、萎缩性胃炎、胃炎、胃及十二指肠溃疡、慢性胆囊炎等，近年来还研究发现黄莲具有较强的抗癌和降血糖功效。
黄连药效作用广泛，历来为医家常用药材，而无节制的开放，野生资源已经枯竭，黄连栽培条件苛刻，生长周期长，难以满足医药生产的需要[8]。
因此迫切需要寻找开发新的资源。
大量的研究发现[9, 10]，内生真菌能够产生与宿主植物相同或相似的次生代谢产物，是新化合物、新药物的潜在资源。
开发和利用植物内生真菌在保护植物物种资源、探索新的产物和新的活性以及提高活性成分的生产效率等方面都具有重要的价值。
从目前已经研究过的植物来看，未发现没有分离到内生真菌的，因此可以推断出内生真菌在植物内是普遍存在的。
内生真菌-植物共生体[11]能产生多种次生代谢产物，用来抵御自然界的虫害，吸引有益微生物和传粉者，竞争阳光和营养等。
内生真菌在植物体与外界环境的交流中发挥着重要的作用，为了增加对病原微生物的抵抗，他们产生新的抗菌素[12]，这些抗菌素具有环保，高效的特征，是新抗菌素的主要来源，也是生物控制的一个重要手段。
将有益的内生真菌接种于药用植物无菌苗的体内，能够缩短组织培养周期，对植株的生长发育和生理代谢进行综合调节，促进宿主药用植物活性成分的合成和积累，提高有效成分的含量。
此外，还可以将有益的内生真菌进行合理的优化组合，获得相应的“内生真菌集群”[13]。
目前，国内外未见对黄连内生真菌研究的报道，故笔者预研究我国黄连主产区——XX 石柱的黄连的内生真菌分离培养条件及菌株保存，为寻找含有与黄连相似或相同化合物的菌株打下基础。
1 材料与方法1.1试验材料新鲜无可见病斑的石柱黄连（C. chinensis Franch）的主根、须根、叶柄、叶片。
1.2试验试剂青霉素；硫酸链霉素；75%乙醇；次氯酸钠溶液（9%、4.5%、2.25%）（浓度以有效氯含量计）；1.3 培养基的配置PDA培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂；不同浓度PDA双抗培养基：以马铃薯20%、葡萄糖2%为基础，分别稀释为12.5%、25%、50%、75%、100%后，再加入琼脂2%，灭菌后稍加冷却，然后加入120ug/mL青霉素和100ug/mL硫黄霉素。
1.4仪器设备托盘天平、烧杯、量筒、剪刀、培养皿、注射器、酒精灯、镊子电热蒸馏水器：WS2-226-77 HS･Z11-5型，长安科学仪器厂电子万用炉：220V･AC 1000W XX泰斯特仪器XX电热恒温鼓风干燥箱：DHG-9108A型，XX精宏试验设备XX立式自动电热压力蒸汽灭菌器：LDZX-40SAI型，XX申安医疗器械厂超净工作台：SW-CJ-2F，苏净集团安泰公司制造电热恒温培养箱：DNP-9082，XX三发科学仪器XX光照培养箱：MGC-250，XX一恒公司1.4试验方法1.4.1表面灭菌方法筛选自来水将整株黄连彻底冲洗干净晾干后，分别取下主根、须根、叶柄、叶片，切割成较大的块，再按下面的方法对试验组及对照组进行处理：CK1：无菌操作的全过程中将5皿打开盖子的PDA的培养皿放于超净工作台。
在试验组处理完后以相同方式培养。
CK2：取适量最后一次漂洗液涂布于PDA培养基中，涂布2皿CK3：取材料压入PDA培养基中，待0.5h后取出材料，重复10次。
主根：在75%乙醇中处理40 s，然后放入9%、4.5%、2.25%三种浓度的次氯酸钠溶液中分别处理2 min、4 min、6 min、8 min、10 min；叶柄：在75%乙醇中处理30 s，然后放入9%、4.5%、2.25%三种浓度的次氯酸钠溶液中分别处理2 min、4 min、6 min、8 min、10 min；叶片：在75%乙醇中处理20 s，然后放入9%、4.5%、2.25%三种浓度的次氯酸钠溶液中分别处理1 min、3 min、5 min；须根：在75%乙醇中处理10s，然后放入9%、4.5%、2.25%三种浓度的次氯酸钠溶液中分别处理0.5 min、1 min、3 min；将经过以上消毒处理的材料材料接种于PDA培养基中，重复10次。
置于25℃中培养，未接种材料的皿培养7天后观察是否有菌长出。
接种材料的皿观察菌长出的时间，生长速度、长出菌量。
1.4.2分离培养条件筛选将黄连的主根、须根、叶柄、叶片以前面筛选出的表面消毒时间处理后，接种于不同浓度PDA培养基中，分别于15℃、25℃的培养条件下倒置培养。
各材料接种20皿，每变量放置2皿。
观察生长出真菌的时间、生长出的数量、生长速度。
1.4.3内生真菌的分离纯化培养7天后取各个菌落边缘的菌块接种于PDA培养基上，培养4天后再次取菌落边缘菌丝接种，如此反复多次，直到获得纯培养物为止。
1.4.4保种用水浴保种的方法对纯化所得的菌株进行保种。
用灭菌的大头针挑取纯化的菌落的一部分，放入1.5mL的无菌EP管中，加入无菌水至淹没菌种，密封保存。
2结果与分析2.1表面消毒条件筛选2.1.1主根表面消毒的筛选表1 主根在次氯酸钠各浓度不同时间表面消毒后长菌率Table 1The percentage of growing fungi on root at different times of the surface concentration in sodiumhypochlorite disinfecting次氯酸钠浓度（%）次氯酸钠时间（min）第4日长菌率（%）第7日长菌率（%）第10日长菌率（%）对照是否长菌9 6 17 50 83 - 8 0 0 0 - 10 0 0 0 -4.5 2 0 100 100 - 4 0 20 90 - 6 0 33 83 - 8 40 80 80 - 10 0 17 17 -2.25 2 20 100 100 + 4 0 60 100 + 6 17 33 67 + 8 33 67 83 + 10 33 100 100 +注：“-”表示未长菌，“+”表示长菌，下同。
通过表1数据可以发现在次氯酸钠浓度为2.25%时，对照组有菌长出，说明浓度过低；在浓度为9%时，对照组未长菌，但试验组几乎无菌长出，表明浓度过高；在浓度为4.45时，比较发现4min、6min的消毒时间为最佳时间，故选择次氯酸钠浓度为4.5%和消毒时间4min作为最佳筛选条件，既达到消毒水平也最节约时间。
2.1.2须根表面消毒的筛选表2 须根在次氯酸钠各浓度不同时间表面消毒后长菌率Table 2 The percentage of growing fungi on fibrous root at different times of the surface concentration insodium hypochlorite disinfecting次氯酸钠浓度（%）次氯酸钠时间（min）第4日长菌率（%）第7日长菌率（%）第10日长菌率（%）对照是否长菌9 0.5 13 25 50 -1 13 25 50 - 3 13 25 25 -4.5 0.5 50 75 100 -1 38 75 88 - 3 0 0 13 -2.25 0.5 38 75 88 +1 38 75 63 - 3 38 88 63 +对表2数据分析发现：在次氯酸钠浓度为2.25%时，对照组不仅有真菌长出还有细菌长出，说明浓度太低；在浓度为9%时，对照组未长菌，但试验组的长菌率只有50%，偏小不适合；在浓度为4.5%时，0.5min、1min的消毒时间较好，考虑试验过程的方便性，选择消毒时间1min为最佳时间，故须根的表面消毒筛选条件为：在4.5%的次氯酸钠中1min。