中国海洋大学2007年生物化学B
中国海洋大学等(还有农科院农大浙江大学等)分子生物学往年考博试题
中国海洋大学等（还有农科院农大浙江大学等）分子生物学往年考博试题中科院2002年分子遗传学（博士）三、目前已经有一些现成的软件用来预测基因组全序列中的基因。
为了设计这些软件，你觉得哪些关于基因和基因组的分子遗传学知识是必须的？请说明理由。
四、在真核生物中转座子可以分为几种类型？请分述每种类型的结构和特征。
如何利用转座子进行分子遗传学的研究和功能基因组的研究。
五、自从克隆的多利羊诞生以来，报界经常传播所谓克隆动物的缺陷，有一种说法是克隆动物会早衰，有人推测早衰的原因可能是：（1）被克隆的体细胞核的染色体端粒变短或（2）被克隆的体细胞核的基因表达程序已经处在发育上成熟的阶段。
现在请你从染色体DNA复制的角度作支持第（1）种可能的阐述，并从基因表达调控的角度做反对第（2）中可能的阐述。
中国海洋大学博士入学考试试题分子生物学2002年名词解释：基因组学基因组大小基因组复杂度基因表达正控制顺势调控元件开放阅读框架基因芯片内含子肽核酸内含肽问答题：1、叙述遗传中心法则，目前在用的重要分子生物学技术有哪些？请用中心法则解释这些技术的工作原理。
2、基因基本结构如何？（即含有基因的DNA区域具有什么结构能使基因遗传信息传递给蛋白质？）3、什么是遗传变异？变异的本质是什么？现在使用的分子标记系统各利用了哪些变异？都是如何利用的？4、用哪些方法可以获得一段DNA的大量拷贝？分子克隆是获得大量拷贝的技术之一。
请对历史上使用过的和目前仍在使用的分子克隆载体做评述（描述特点，比较异同）5、DNA测序的方法是什么？目前在用的方法和原始方法有什么不同？有一段100千碱基对的DNA片断（没有重复区段），请设计最佳测序策略。
6、分子标记连锁图、物理图、序列图各是什么？相互有什么关系？中国在人类基因组水稻基因组序列草图绘制上有什么贡献？请评价这些贡献的原创性。
7、如果我们测定了某生物的一段DNA序列，你认为通过哪些可能的途径可以了解此段序列的功能？比较一下DNA复制与PCR扩增有和异同？简述分子标记的种类。
荧光标记糖电泳在新琼寡糖定性和定量分析中的应用
参考文献(7条) 1.JACKSON P The use of polyacrylamide-gel electrophoresis for the highresolution separation of reducing saccharides labeled with the fluorophore 8-aminonaphthalene-l,3,6-trisulphonic acid 1990 2.张剑波;田庚云 糖类的高效毛细管电泳 1998 3.车发云;刘正宇;王克夷 毛细管电泳分离寡糖衍生物及其电泳行为研究 1998(05) 4.LI JINGBAO;HAN FENG;LU XINZHI A simple method of preparing diverse neoagarooligosaccharides with β-agarase 2007 5.MA CUIPING;LU XINZHI;SHI CHAO Molecular cloning and characterization of a novel betaagarase,AgaB,from marine Pseudoalteromonas sp.CY24[外文期刊] 2007(06) 6.KOBAYASHI R;TAKISADA M;SUZUKI T Neoagarobiose as a novel moisturizer with whitening effect[外文期 刊] 1997(1) 7.HU BIN;GONG QIANHONG;WANG YE Prebiotic effects of neoagaro-oligosaccharides prepared by enzymatic hydrolysis of agarose[外文期刊] 2006(5-6)
中国海洋大学2000-2009年生物化学B
中国海洋大学2000年生物化学B一、填空0.5’1.维生素（）可帮助钙质吸收，它是由皮肤中的（）经紫外线照射转变而来。
2.酶的（）抑制不改变酶促反应的Vmax，（）抑制不改变酶促反应的Km。
3.生物合成所需要的还原力由（）过程提供。
4.一分子葡萄糖在肝脏中完全氧化产生（）分子A TP，一分子软脂酸完全氧化产生（）分子ATP。
5.蛋白质的含氮重量百分比是（），依据该数据进行定氮的方法是（）。
6.精氨酸的pK1（COOH）=2.17，pK2（NH3）=9.04，pK3（胍基）=12.08，则其PI值=（）。
7.多肽链中（）氨基酸出现的地方会引起螺旋形构象中断。
8.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有三种活性，分别是（）、（）和（）。
9.Km值可以用来反映酶与底物（）的大小。
10.肽和蛋白质特有的颜色反应是（）。
11.Watson&Crick根据X射线晶体衍射数据提出的DNA的双螺旋结构模型，其螺旋直径为（），碱基平面间距为（），每一螺旋周期包含（）对碱基，这种结构为B型DNA，除此之外还有（）型DNA，对于表达调控有一定作用。
二、判断0.5’1．氨基酸与茚三酮反应均生成蓝紫色，是鉴定氨基酸的特征反应。
2．限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶。
3．磷脂双分子层构成生物膜的基本骨架。
4．辅酶NADH和NADPH所携带的H去向是不同的。
5．葡萄糖激酶就是己糖激酶。
6．别构酶就是寡聚酶。
（）7．脂肪酸的氧化降解总是从分子的羧基端开始的。
8．二硫键对于稳定蛋白质的三级结构具有重要作用。
9．若DNA双链之一股是pGpTpGpGpApC，则其互补链是pCpApCpCpTpG。
10．在大肠杆菌中转录和翻译是几乎同时进行的。
三．名词解释2’1.结构域2.冈岐片段3.PCR4.多酶体系5.别构效应6.操纵子7.酸败8.酵解9.电子传递体10.排阻层析四．英译汉0.5’1.pI2.α-helix3.peptide bond4.domian5.glucose6.lipid7.protein8.fatty acid9.ribozyme 10.Krebs cycle 11.Tm 12.cDNA 13.transcription 14.Pribnow box 15.exon16.plasmid 17.electrophoresis 18.CM-cellulose 19.IEF 20.SDS-PAGE五、简答1.解释蛋白质的一二三四级结构。
中国海洋大学生物化学B真题00-09答案
2007年一、填空1、醇多羟基酸类甾醇2、磷酸戊糖途径3、双缩尿反应4、10.925、40 606、肌球蛋白肌动蛋白7、3.6 0.54 氢键β折叠片β转角（β凸起）8、磷酸化9、四氢叶酸（与氨基苯甲酸PABA竞争性结合二氢叶酸合成酶）10、亚麻酸11、糖异生作用12、低高13、32 106 14、DNA聚合酶引物15、DNA RNA 蛋白质二、判断1、肽链中Cα—N、Cα—C可以自由旋转，其他键均不可以2、20种氨基酸与茚三酮反应除Pro为黄色，其余呈紫色3、一般来说，蛋白质的一级结构决定空间构象5、胰蛋白酶专一的水解Lys，Arg等碱性氨基酸羰基侧链肽，胰凝乳蛋白酶专一的水解Phe，Tyr等芳香氨基酸羰基侧链6、血红蛋白对氧的结合具有协同效应，使其再氧分压很低时能有效的释放氧，氧分压高时能快速的结合氧7、乙烯的作用是降低植物生长速度，催促果实早熟8、维生素B1即硫胺素，常以硫胺素焦磷酸辅酶形式存在，常是脱羧酶的辅酶9、人体必须的氨基酸主要有Val Trp Thr Ile Met Phe Lys等10、蔗糖由葡萄糖和果糖构成，麦芽糖由葡萄糖构成，乳糖由半乳糖和葡萄糖构成（β）11、别构酶一般都是寡聚酶，通过次级键由多个亚基构成（所有别构酶都是寡聚酶）12、米氏常数是酶的特征常数，每个酶都有以个特定的Km值，随测定的底物、反应的温度、pH及离子强度而改变13、竞争性抑制Km变大，Vmax不变；非竞争性抑制Km不变，Vmax变小；反竞争性抑制Km、Vmax都变小14、核酶是一类具有催化活性的核酸，他的动力学方程符合米氏方程15、DNA分子变性时其紫外吸收迅速增加（对于纯样品，只要读出260nm处的A值就可以算出含量。
通常以A值为1相当于50ug/mL双链DNA或40ug/mL单链DNA或RNA）16、核酸中的稀有碱基（大多都是甲基化碱基）大多出现于tRNA中17、生物膜上的脂质主要是磷脂（还有胆固醇和糖脂）18、膜蛋白（膜内在蛋白和膜周边蛋白→不跨膜）跨膜区的二级结构一般是α螺旋（以单一α螺旋跨膜、以多段α螺旋跨膜、以蛋白质分子末端片段插膜、通过共价键结合的脂插膜→锚定在膜上）19、糖异生途径不是糖酵解途径的简单逆反应过程，其中有3步迂回措施：（1）丙酮酸【丙酮酸羧化酶、ATP】→草酰乙酸【磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶、GTP】→磷酸烯醇式丙酮酸；（2）果糖—1，6—二磷酸【果糖—1，6—二磷酸酶】→果糖—6—磷酸；（3）葡萄糖—6—磷酸【葡萄糖—6—磷酸酶】→葡萄糖。
中国海洋大学生物化学B00-09真题及答案教学教材
中国海洋⼤学⽣物化学B00-09真题及答案教学教材中国海洋⼤学⽣物化学B00-09真题及答案2007年⼀、填空1、维⽣素A是（）类化合物，维⽣素C是（）类化合物，维⽣素D是（）类化合物2、⽣物合成所需要的能量主要是由三羧酸循环和氧化磷酸化产⽣，还原⼒主要是由（）途径产⽣。
3、肽和蛋⽩质的特征颜⾊反应是（）4、精氨酸的PK1（COOH）=2.17，PK2（NH3）=9.04，PK3（胍基）=12.8，则PI=（）5、真核细胞的核糖体是由（）S亚基和（）S亚基组成6、肌⾁细胞中（）和（）两种蛋⽩质承担收缩和运动的功能7、Pauling提出的蛋⽩质的α螺旋结构，每圈由（）个氨基酸组成，螺距是（）。
维系其结构的主要作⽤⼒是（）。
除此之外，蛋⽩质⼆级结构还有2中基本类型是（）和（）8、激酶是⼀种催化（）反应的酶9、黄胺类药物通过竞争性抑制微⽣物的（）合成途径中的关键限速酶发挥其抑菌的作⽤10、⼈体必须的脂肪酸包括亚油酸和（）两种11、肌体将⾮糖的⼩分⼦物质合成糖的过程称为（）12、真核细胞中，细胞的Na+离⼦浓度⽐细胞外（），K+离⼦浓度⽐细胞外（）13、⼀分⼦葡萄糖在肝脏完全氧化产⽣（）分⼦ATP，⼀分之软脂酸完全氧化产⽣（）分⼦ATP14、PCR扩增DNA的反应体系中除了DNA模板，四中dNTP外，还应加⼊（）和（）15、Southern blot , Northern blot , Western blot分别对（）、（）、（）的印记转移技术三、选择题1、α螺旋遇到（）氨基酸时会中断2、为了将核糖核酸酶充分变性，除了使⽤巯基⼄醇外还应使⽤（）3、在接近中性PH的条件下，下列那种氨基酸具有最⼤的酸碱缓冲当量（）A Lys（）（）B Glu（）（）C Arg（）（）D His4、蛋⽩质可被碱⽔解，该反应可⽤来定量蛋⽩质中的（）5、⽣理状态下，⾎红蛋⽩与氧可逆结合的铁处于（）价6、丝氨酸蛋⽩酶包括（）7、⽤凝胶过滤层析分离蛋⽩质时（）A 分⼦量⼤的先被洗脱（）（）B 分⼦量⼩的先被洗脱C 与树脂带同种电荷的先被洗脱（）（）D 与树脂带不同电荷的先被洗脱8、常⽤于多肽链N末端测定的试剂是（）9、丙⼆酸对琥珀酸脱氢酶的抑制属于（）10、染⾊体DNA主要采取（）构型11、蛋⽩质是在（）合成的12、酶的⽐活⼒表征酶的（）A 纯度（）B 量（）C 催化能⼒（）（）D 蛋⽩量13、凝⾎因⼦的合成依赖于维⽣素（）14、要把膜蛋⽩完整的从膜上解离下来，可以使⽤（）15、⽣物分解途径中（）作为氧化还原反应的主要辅酶16、2，4—⼆硝基苯酚是氧化磷酸化的（）17、⼤肠杆菌DNA复制中起主要作⽤的DNA聚合酶是（）18、（）的发现开启了基因体外操作的可能，基因⼯程应运⽽⽣19、极微量的激素可以产⽣⾮常显著的⽣理作⽤，是因为（）四、汉译英Trypsin（）ribozyme（）substrate（）peptide bond（）open reading frame （）helix（）CM—cellulose（）domain（）electrphoreses（）SDS—PAGE（）fattyacid（）glucose（）exon（）lipid（）protein（）conformation（）plasmid（）IEF（）transcription（）gluconeogensis五、简单题1、区分以下概念：超⼆级结构，结构域，模体（motif）和亚基2、酶不同于其他催化剂的关键特点是其可被精细调控，请从蛋⽩质结构和功能的关系的⾓度解释并说明各种酶活调控的⽅式的原理3、对化学偶联假说和构想偶联假说进⾏评价4、根据复制、转录、翻译过程的有关知识说明遗传信息在传递过程中有哪些机制保证了其保真性5、根据三打营养物质代谢有关知识评价观点：只要严格限制糖的摄⼊，可以放开吃⾼蛋⽩⾼脂肪的⾷品任然可以达到减肥的⽬的2006年⼀、填空1、维⽣素D可以通过⽪下的（）经紫外线照射转化⽽来，其功能是（）2、蛋⽩质的含氮量百分⽐为（）依据该含氮量数据进⾏蛋⽩质含量测定的⽅法称为（）3、1926年sumner从⼑⾖中得到了（）酶结晶，从⽽第⼀次证明了酶的蛋⽩质本质4、磺胺类药物通过对（）酶竞争性抑制达到抑菌效果5、蛋⽩质⼆级结构的三种基本类型是（）、（）、（）6、脂肪酸再肝脏中初步氧化形成（）、（）、（）等产物称为酮体，酮体是肝脏运输能量的⼀种⽅式7、⼤肠杆菌启动⼦包含有（）、（）等关键元件8、DNA聚合酶1是DNA损伤修复过程中的关键酶，它具有（）、（）以及3’—5’外切等三种活性9、1分⼦的硬脂酸再线粒体经过（）次β氧化⽣成（）分⼦⼄酰辅酶A和（）对氢离⼦，⽣成的⼄酰辅酶A进⼊（）途径氧化⽣成⼆氧化碳并⽣成⼤量还原⼒，最终通过氧化磷酸化途径将还原⼒氧化三、名词解释Base pair（） restriction map（） hydrophilic（） DNA polymerase（）Edman degradation（） feedback inhibition（）glycoprotein（） dialysis （） endnuclease（） cloning vectors（） glucose（） domain（）Okazaki fragment（）collagen（） degeneracy（） electron transport（）covalent catalysis（） chemiosmotic coupling（） alpha-helix（） promoter （） chain-termination method（） oxidative phoshorylation（） proofreading （） exon（） sedimentation equilibrium（） polyribosome（） citric acid cycle（） fluid-mosaic model（） conformation（） nucleic acid（）四、名词解释PI（）蛋⽩聚糖（）⽣酮氨基酸（）酶活⼒单位（） PCR（） SDS-PAGE（）氧化磷酸化（）蛋⽩质组（）⼀碳单位（）岗崎⽚段（）别够效应（） G蛋⽩（） Na+-K+ATP酶（） motif（）质粒（）五、问答题1、以从猪肝中提取SOD酶为例，说明蛋⽩质分离纯化的⼀般原则和步骤2、结合丝氨酸蛋⽩酶的结构和功能特征，论述蛋⽩质结构和功能的关系3、解释氧化磷酸化偶联假说主要有哪些，并评价4、描述细菌乳糖操纵⼦调控基因表达的机制5、写出葡萄糖有氧氧化的关键调控步骤和氧化还原步骤，在次基础上计算以分⼦葡萄糖可产⽣多少ATP2005年⼀、填空题1、糖原合成酶可以催化（）糖苷键的⽣成2、糖酵解发⽣在细胞的（）限速步骤是（）三羧酸循环发⽣在细胞的（）限速步骤是（）唯⼀⼀步底物⽔平磷酸化是（）3、⽶⽒⽅程是（）竞争性抑制使Km（）4、氨基酸碳⾻架通过延胡索酸、⼄酰辅酶A、草酰⼄酸、（）和（）进⼊三羧酸循环5、真核细胞的mRNA5’往往有（）6、中英互译：Ala（）hnRNA（）核酶（）PAGE（）⼆、名词解释1、福林—酚反应（）2、⽆规则卷曲（）3、盐溶（）4、Z—DNA（）5、⽐活⼒（）6、Cori循环（）7、丙氨酸—葡萄糖循环（）8、外显⼦（）9、rRNA（）10、终⽌⼦（）11、HIV（）12、脂质体（）13、⼄醛酸循环（）14、反义链（）15、拓扑异构酶（）16、滞后链（）17、⼀碳单位（）18、磷酸戊糖途径（）19、别构酶（）20、脂多糖（）三、简答题1、说明酮体的合成与分解途径，⽣理意义及何种病理情况下酮体合成增加，对机体的影响2、说明氧化磷酸化的结构基础及有关解释其机理的假说，你认为每种假说的优缺点是什么3、蛋⽩质分离纯化的⼀般原则和⽅法4、⽐较说明软脂酸的氧化和合成途径5、叙述多肽合成后的加⼯和运输过程2004年⼀、填空题1、中英互译：凝胶电泳（）⾼效液相⾊谱（）核内⼩RNA（）聚合酶链式反应（）联酶免疫吸附测定（）proteome（）Leu（）dG（）NMR （）SOD（）2、细胞溶胶内的NADH通过（）穿梭途径或（）穿梭途径进⼊线粒体3、对于纯的RNA，A260为1相当于每毫升（）微克4、糖酵解、三羧酸循环和酮体合成的限速酶分别是（）、（）和（）三、选择题1、γ—氨基丁酸来源于（）2、Tm越⾼的DNA分⼦，其（）3、在离体肝线粒体悬液中加⼊氰化物，则1分⼦β—羟丁酸的P/O⽐值为（）4、肝外组织氧化利⽤酮体的酶主要在于（）5、肌糖原分解不能直接补充⾎糖的原因是肌⾁缺少（）6、甲亢病⼈，甲状腺分泌增⾼会出现（）7、有⼀种激素，溶于⽔，但与脂溶性激素⼀样需进⼊核内发挥作⽤，这种激素是（）A、胰岛素B、⼼纳素C、⽣长素D、肾上腺素E、甲状腺激素8、细菌被紫外线照射引起DNA损伤时，编码DNA修复酶的基因表达增强，这种现象是（）9、葡萄糖在合成糖原时，每加上⼀个葡萄糖残基需消耗（）⾼能磷酸键10、有关外显⼦核内含⼦，下列叙述正确的是A hnRNA上只有外显⼦⽽⽆内含⼦B 成熟mRNA有内含⼦C 除去外显⼦的过程称为剪接D 除去内含⼦的过程称为拼接11、真核⽣物DNA聚合酶α抑制剂是（）12、核蛋⽩体的受位和给位，可被下述霉素或抗⽣素鉴别出来的是A 红霉素B 氯霉素C ⽩喉霉素D 环⼄酰亚胺E 嘌呤霉素13、既是⽣糖氨基酸⼜是⽣酮氨基酸的是（）14、实际测得1分⼦丙酮酸完全氧化释放的能量低于理论值，约为（）15、⼈体内的嘌呤核苷酸分解代谢的主要终产物是（）16、⼈体内不能⾃⾝合成维⽣素C的原因是（）四、名字解释蛋⽩聚体（）酸值（）核酶（）转换数（）H—DNA（）Cori循环（）岗崎⽚段（）中⼼法则（）化学渗透学说（）别构酶（）五、简答题1、以⾎红蛋⽩和肌红蛋⽩为例说明蛋⽩质的结构和功能关系2、说明⼤肠杆菌DNA复制有关的酶和蛋⽩的作⽤3、⽐较脂肪酸氧化与合成途径4、从底物专⼀性与反应⾼效率两⽅⾯解释作⽤机理5、请说明Southern blotting的原理及流程6、体内脂肪酸可否转化为葡糖糖？为什么？2003年⼀、填空题1、由FAD或NAD+传递⼀对H经过电⼦传递链传递到氧，其P/O值分别是（）和（）2、核糖体上存在2个tRNA结合位点，分别是（）和（）3、1926年Summer从⼑⾖中得到了（）酶结晶，从⽽第⼀此证明了酶的本质是蛋⽩质4、胰凝乳蛋⽩酶专⼀性的切断（）和（）氨基酸的羧基形成的肽键5、糖蛋⽩上的糖基⼀般连接在蛋⽩质的（）、（）、（）氨基酸上6、凝集素能专⼀性识别和结合细胞表⾯的（）7、糖酵解途径的调控酶是（）、（）、（），TCA循环的调控酶是（）、（）、（）8、Watson&Crick根据X射线晶体衍射数据提出的DNA双螺旋结构模型，其螺旋直径为（）碱基平⾯间距为（）每以螺旋周期包含（）对碱基这种结构为B型DNA，除此之外还有（）型DNA9、⼀分⼦葡萄糖经过糖酵解途径⽣成（）分⼦ATP，TCA循环中⽣成（）分⼦ATP，完全氧化⽣成（）分⼦ATP三、翻译Cellulose（）self-assembly（）attenuator（）calvin cycle（）competitive inhibition（）freeradical（）genome（）semiconservative replication（）splicing（）proteinfolding（）operons（）chromategraphy（）CM-cellulose（）heta-oxidiation（）ketonebody（）superhelix（）denaturation（）D-loop（）plasmid（）peptide（）density gradient（）chymonypsm（）base pairing（）association（）disulfide bond（）coenzyme（）molecularsieve（）flavoprotein（）configuration（）transposon（）四、名词解释等电点（）双螺旋结构（）核酶（）Tm值（）操纵⼦（）Pribnow box （）排阻层析（）岗崎⽚段（）协同效应（）级联放⼤效应（）酵解途径（）电⼦传递链（）脂质体（）第⼆信使（）端粒酶五、问答题1、简述乳糖操纵⼦调控机制2、请综述糖、脂肪、蛋⽩质的代谢途径及其相互关系2002年⼀、填空题1、精氨酸的PK1（COOH）=2.17，PK2（NH3）=9.04，PK3（胍基）=12.08，则其PI值=（）2、维⽣素（）可以帮助钙的吸收，它可以由⽪肤中的（）经紫外线照射转变过来3、酶的（）抑制不改变酶促反应的Vmax，（）抑制不改变酶促反应的Km4、⼀分⼦葡萄糖在肝脏完全氧化才⽣（）分⼦ATP，⼀分⼦软脂酸完全氧化产⽣（）分⼦ATP5、2，4—⼆硝基苯酚是氧化磷酸化的（）剂6、脂肪酸在肝脏不完全氧化形成（）、（）、（）等产物称为酮体7、⽣物合成所需要的还原⼒由（）过程提供8、Watson&Crick根据X射线晶体衍射数据提出的DNA的双螺旋结构模型，其螺旋直径为（），碱基平⾯间距为（）nm，每以螺旋周含（）对碱基，这种构型为B型DNA，除此之外还有⼀种（）型DNA9、真核细胞的核糖体由（）亚基和（）亚基组成，其中（）亚基含有mRNA的结合位点10、⼤肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有三种活性，分别是（）、（）、（）三、名词解释1、凯⽒定氮法（）2、抗体酶（）3、中⼼法则（）4、化学渗透学说（）5、外显⼦（）6、端粒酶（）7、氧化磷酸化（）8、限制性内切酶（）9、流动镶嵌模型（）10、分⼦筛层析（）四、问答题1、请说明操纵⼦学说2、现在要从动物脏器中纯化SOD酶，请设计⼀套实验路线3、请举出2种⽣物化学新技术，并说明原理与应⽤4、请计算⼀分⼦三软脂酸⽢油在体内完全氧化⽣成的ATP数2001年⼀、填空题1、已知Glu的PK1（COOH）=2.19，PK2（NH3）=9.67，PKR（侧链）=4.26，则其PI=（），Glu在PH=5.58的缓冲液中电泳时向（）极移动，所以Glu属于（）氨基酸2、酶的可逆抑制有（）、（）和（）三种，对酶促反应动⼒⾎参数影响分别是（）、（）和（）3、糖酵解的关键控制酶是（）、（）、（），TCA循环的调控酶是（）、（）4、α螺旋是蛋⽩质种常见的⼆级结构，酶螺旋含（）个氨基酸，沿轴前进（）nm，在（）氨基酸出现地⽅螺旋中断形成结节5、每分⼦葡萄糖通过酵解产⽣（）ATP，若完全氧化产⽣（）ATP6、细胞中由ADP⽣成ATP的磷酸化过程有两种⽅式，⼀种是（），⼀种是（）⼆、名词解释1、Tm值（）2、中间产物学说（）3、中⼼法则（）4、凯⽒定氮法（）5、超⼆级结构（）6、电⼦传递链（）7、PCR（）8、启动⼦（）9、糖异⽣（）10、多聚核糖体三、问答题1、简述蛋⽩质⼀、⼆、三、四级结构的概念2、写出软脂酸完全氧化的⼤体过程及ATP的⽣成3、简述磷酸戊糖途径及其⽣理意义4、请说明操纵⼦学说5、从⼀种真菌中分离得到⼀种⼋肽，氨基酸分析表明它是由Lys、Lys、Phe、Tyr、Gly、Ser、Ala、Asp组成，此肽与FDNB作⽤，进⾏酸解释放出DNP—Ala，⽤胰蛋⽩酶裂解产⽣两个三肽即（Lys、Ala、Ser）和（Gly、Phe、Lys）以及⼀个⼆肽，此肽与胰凝乳蛋⽩酶反应即放出⾃由的天冬氨酸，⼀个四肽（Lys、Ser、Phe、Ala）及⼀个三肽，此三肽与FDNB反应随后⽤酸⽔解产⽣DNP—Gly，试写出此⼋肽的氨基酸序列6、化学渗透是怎样来解释电⼦传递与氧化磷酸化的偶联的？你认为这个学说有什么缺陷、不完善之处，你能提出什么想法2000年⼀、填空题1、维⽣素（）可帮助钙质吸收，它可由⽪肤中的（）经紫外线照射转变⽽来2、对酶的（）抑制不改变酶促反应的Vmax，（）抑制不改变酶促反应的Km3、⽣物合成所需要的还原⼒由（）过程提供4、⼀分⼦葡萄糖在肝脏完全氧化产⽣（）分⼦ATP，⼀分⼦软脂酸完全氧化产⽣（）ATP5、蛋⽩质的含氮量百分⽐是（），依据该数据进⾏定氮的⽅法是（）6、精氨酸的PK1（COOH）=2.17，PK2（NH3）=9.04，PK3（胍基）=12.08，则其PI=（）7、多肽链中（）氨基酸出现的地⽅会引起螺旋型构象的中断8、⼤肠杆菌DNA聚合酶的三种活性分别是（）、（）、（）9、Km值可以⽤来反应酶与底物（）的⼤⼩10、肽和蛋⽩质特有的颜⾊反应是（）11、Watson&Crick根据X射线晶体衍射数据提出的DNA的双螺旋结构模型，其螺旋直径为（），碱基平⾯间距为（）nm，每以螺旋周含（）对碱基，这种构型为B型DNA，除此之外还有⼀种（）型DNA三、名词解释1、结构域（）2、岗崎⽚段（）3、PCR（）4、多酶体系（）5、别构效应（）6、操纵⼦（）7、酸败（）8、酵解（）9、电⼦传递链（）10、排阻层析四、英译汉PI（）alpha-helix（）peptide bond（）domain（）glucose（）lipid （）protein（）fatty acid（）ribozyme（）Krebs cycle（）Tm（）cDNA（）transcription（）Pribnow box（）exon（）plasmid（）eletrophoreses（）CM-cellulose（）IEF（）SDS-PAGE（）五、简答1、解释蛋⽩质的⼀、⼆、三、四级结构2、简述酮体及其⽣理意义3、简述真、原核⽣物核糖体结构的异同4、简述化学渗透学说是怎样来解释电⼦传递与氧化磷酸化的偶联的5、请列举2中⽣物新技术，简要说明其原理和应⽤六、问答1、⼀分⼦17碳饱和脂肪酸⽢油在有氧的情况下在体内完全氧化需要经过怎样的氧化途径，产⽣多少ATP2、有⼈认为RNA是最早出现的⽣物⼤分⼦，你能对此提出何种⽀持或反对的理由，并试对上述说法进⾏评价3、现在要从动物肝脏中提纯SOD酶，请设计⼀套合理的实验路线2008年⼀、填空题1、蛋⽩质的平均含氮量为（）%，是凯⽒定氮法的理论依据2、蛋⽩质⼆级结构的三种基本类型是（）、（）和（）3、⾎红蛋⽩具有四级结构，它是由（）个亚基组成的，每个亚基中含有⼀个（）辅基4、蛋⽩质的可逆磷酸化修饰是重要的功能调控⽅式，磷酸化时需要（）酶催化，⽽去磷酸化需要（）5、⼈体必需的脂肪酸有（）和（）6、植物激素（）具有促进⽣长的作⽤，⽽（）可以促进果实成熟7、糖酵解途径中的三个调节酶是（）、（）和（）8、线粒体外的NADH经磷酸⽢油或苹果酸经穿梭后进⼊呼吸链氧化，其P/O ⽐分别是（）和（）9、1分⼦⼄酰辅酶A经TCA循环⽣成（）分⼦NADH，（）分⼦FADH2和（）个CO2，脱下的氢通过电⼦传递链彻底氧化，可⽣成（）分⼦ATP 10、原核⽣物核糖体为70S，它由⼤⼩2个亚基构成，其⼤⼩分别是（（））和（（））11、肌⾁细胞中（）和（）两种蛋⽩承担收缩和运动的功能⼆、判断（正确以“+”表⽰，错误以“—”表⽰。
苯丙氨酸镁配合物对磷酯键的水解作用
第52卷 第2期 2007年1月论 文苯丙氨酸镁配合物对磷酯键的水解作用汪东风 耿 娟 孙继鹏 张 宾 张 莉 徐 杰 薛长湖(中国海洋大学食品科学与工程学院, 青岛 266003. E-mail: wangdf@)摘要 合成了苯丙氨酸镁配合物, 并就该配合物对磷酯键的水解作用进行了研究. 结果表明该配合物对磷酸对硝基苯酯的表观水解速率常数达7.45×10−2 min −1; 能将质粒DNA 水解成不同分子量的片段; 对某些有机磷农药也有很好的水解效果, 在48 h 内对氧乐果的水解率可达100%, 甲胺磷、敌敌畏和乐果的水解率分别为71.11%, 55.34%和49.05%. 因此, 苯丙氨酸镁配合物在农业上的应用不仅有利于提高产量, 还将有助于减少有机磷农药的残留.关键词 苯丙氨酸 镁 磷酯键 水解 残留2006-08-17收稿, 2006-12-11接受山东省自然科学基金重点项目(批准号: Z2004D05)和青岛市科技发展项目(批准号: 05-2-NS-21)我国地少人多, 如何保障食物数量及质量安全是长期而艰巨的任务. 为此, 我国农业生产中采取了多种有效措施, 如高级稻的选育、氨基酸微量元素配合物微肥[1]的应用等. 氨基酸微量元素配合物微肥在农业生产中的应用表明, 该微肥对农作物具有增加产量、提高品质和防病等作用, 已成为多种作物增产提质的有效措施之一.有机磷农药的使用已有70多年的历史, 并仍被广泛使用. 我国有机磷农药的产量约占全世界总量的1/3, 占全国农药总量的77.76%[2]. 就农作物来说, 它们的生长旺季也多是病虫害发生旺季, 现阶段为提高农作物的产量和质量, 农业生产还需要用有机磷农药防治病虫害. 据报道使用农药每年减少直接经济损失约300亿元[3]. 有机磷农药大多为磷酸三酯类或硫代磷酸三酯类, 在食物中不易降解, 长期大规模生产和使用有机磷农药, 不仅对环境造成严重污染, 在食物及饲料中残留对人及养殖动物也构成安全隐患. 目前可促进有机磷农药降解的主要方式有化学降解、光化学降解、生物降解等[4], 但这些方式目前还难于在农业上推广应用. 因此, 研制既能促进作物增产, 又能降解有机磷农药的应用技术是十分必要的.本文以农作物必需的镁元素和苯丙氨酸为原料, 制备出了苯丙氨酸镁配合物(Phe-Mg), 分别以磷酸对硝基苯酯(p -nitrophenylphosphate, PNPP)作为磷酸单酯键、质粒DNA 及5′-AMP 作为磷酸二酯键和有机磷农药作为磷酸三酯键的目标物, 研究了Phe-Mg 对上述目标物的水解作用. 结果发现Phe-Mg 对磷酯键有很好的水解作用. 这一结果提示氨基酸微量元素配合物微肥在农业上应用不仅有利于提高产量, 还将有助于减少有机磷农药的残留, 为保障食物生产过程中的数量安全和质量安全提供新技术, 同时也为我国丰富的含蛋白质资源废弃物的开发利用提供新途径.1 材料与方法(ⅰ) 试剂和仪器. 磷酸对硝基苯酯(p -nitro-phenylphosphate, PNPP), 购自北京拜尔迪公司(进口分装); 250 mg/mL pBR322DNA 为宝生物工程(大连)有限公司生产; 5′-腺嘌呤核苷酸(5′-AMP)为美国sigma 产品; 其他试剂均为分析纯. HP6890气相色谱仪及Agilent1100高效液相色谱为美国Agilent 公司生产.(ⅱ) 苯丙氨酸镁配合物(Phe-Mg)的合成. 在重蒸水中加入苯丙氨酸和碱式碳酸镁(Phe Mg 2+ = 1 0.35), 90℃磁力搅拌8 h, 整个反应在氮气保护下进行. 产物离心取上清液, 旋转蒸发至有颗粒晶体出现, 放置过夜待晶体慢慢析出. 析出完全后过滤, 用乙醇和丙酮(1 2)的混合液洗涤3次, 真空干燥, 放置到干燥器中保存备用[5,6].用质谱仪(Water Q-TOF), 以3.0 kV 的ESI 为电离源, 流速10 µL/min, 对刚制备的Phe-Mg 配合物进行正离子模式下的质谱(FTICR-MS)测定, 结果表明, 1个Mg 可与3~6个Phe 形成配合物.(ⅲ) Phe-Mg 对含磷酸单酯键的PNPP 的水解作论 文第52卷 第2期 2007年1月用. PNPP 在生物化学中是酸性或碱性磷酸酯酶分析的色原基质, 其水解而释放出的对硝基苯酚为黄色产物, 在405 nm 处有强吸收, 可用分光光度法定量[7]. 因此通过测定其吸光值的大小可反映Phe-Mg 对PNPP 的水解能力. Phe-Mg 对PNPP 的水解: 3 mL 5 mmol/L PNPP 加入1.0 mL 1.6 g/L 的Phe-Mg, 恒温25℃反应4 h, 每24 min 测定一次吸光值(3次重复).(ⅳ) Phe-Mg 对含磷酸二酯键的质粒DNA 的裂解作用. (1) 不同浓度的Phe-Mg 对质粒DNA 的裂解: pBR322 DNA, 1 µL; pH 8.0, 10 mmol/L Tris-HCl 配制成的5 g/L Phe-Mg, 分别加入0, 0.6, 4.0, 6.0, 8.0, 10, 12和16 µL; 用Tris-HCl 补至20 µL. 放置厌氧培养箱中, 恒温37℃反应4 h [8]. 用琼脂糖凝胶(Agrose- gel)电泳分析质粒 DNA 的裂解情况. (2) Phe-Mg 对5′-腺嘌呤脱氧核苷酸(5′-AMP)的水解切断作用: 在pH 7.2, 0.05 mol/L 的Tris-盐酸缓冲溶液25.0 mL 中, Phe-Mg(3.54 g/L)和5′-AMP(0.2 mmol/L)50℃下反应10 h, 同条件不加Phe-Mg 为对照[9]. 用HPLC 测定Phe-Mg 对5′-AMP 的水解作用.(ⅴ) Phe-Mg 对含磷酸三酯键的有机磷农药的水解作用. 配制混合有机磷农药的水溶液(敌敌畏、乐果、氧乐果、对硫磷、甲胺磷、毒死蜱), 每种农药的浓度为1 mg/kg, 取60 mL, 加入0.02 g Phe-Mg. 反应48 h 后, 取20 mL 用GC 测定, 不加Phe-Mg 的农药溶液为空白对照(3次重复). 反应液中各种有机磷农药含量的测定同前文报道的方法[10].2 结果2.1 Phe-Mg 对磷酸单酯键化合物PNPP 的水解效果从Phe-Mg 及镁离子对PNPP 的催化水解, 以及PNPP 自发水解的比较可以看出(图1), Phe-Mg 对PNPP 有明显的催化水解作用.图1 PNPP 水解的A-t 曲线以图1结果为基础, 根据公式ln[(A ∞−A t )/(A ∞− A 0)] = −K obsd t 线性拟合得表观速率常数K obsd . PNPP 自发水解、Mg 2+催化PNPP 水解以及Phe-Mg 催化PNPP 水解的表观速率常数分别为: K (PNPP)obsd =1.03×10−4min −1, K (Mg 2+)obsd = 3.57×10−4 min −1, K (Phe-Mg)obsd = 7.45×10−2 min −1. 从表观速率常数结果看, Phe-Mg 对PNPP 的催化水解, 比PNPP 自发水解速率提高了两个数量级. Mg 2+对PNPP 也有一点催化水解作用, 但是相对于Phe-Mg 来说少了20多倍, 说明当Phe 与Mg 形成配合物后对磷酸一酯键有很好的水解作用. 2.2 Phe-Mg 对含磷酸二酯键的生物大分子质粒DNA 的裂解效果由图2可知, 当Phe-Mg 的浓度大于1 µg/µL 时(7~9泳道), 出现典型的3条水解带. Phe-Mg 使超螺旋型(CCC)DNA 裂解至缺口开环型(OC), 进而产生线型(Linear)[11]. 当浓度>2.000 µg/µL 时(10~12泳道), DNA 水解断裂效果变得更为显著. 说明该配合物对DNA 有很强的裂解作用. 但在相同的实验条件下, 除Mg 2+ + Phe 的混合物对质粒DNA 有非常弱的裂解作用(4泳道)外, 单独的Phe 和Mg 2+基本上无此作用(2, 3泳道). 由此可见, 在该实验条件下, Phe-Mg 对磷酸二酯键也有很好的裂解作用. 2.3 Phe-Mg 对5′-AMP 的水解切断效果为了进一步了解Phe-Mg 对磷酸二酯键的裂解作用, 以5′-AMP 为底物测定了Phe-Mg 对其水解作用. 结果表明(图3), Phe-Mg 对5′-AMP 也有很好的水解作用, 其水解产物仅为Ad(5′-腺嘌呤核糖核苷), 没有破坏核酸的戊糖环结构, 提示反应过程只断裂磷酸酯键. Phe-Mg 50℃下水解5′-AMP 10 h 的水解率为43.2%.2.4 Phe-Mg 对磷酸三酯键化合物有机磷农药的水 解效果有机磷农药大多为磷酸三酯类或硫代磷酸三酯类, 如常见有机磷农药敌敌畏[O-(2,2-二氯乙烯基)O,O-二甲基膦酸酯]具有典型磷酸酯键结构, 氧乐果[O,O-二甲基-s-(N-甲基氨基甲酰甲基)硫代磷酸酯]和甲胺磷[O-甲基-S-甲基-硫代磷酰胺]具有硫(醇)代磷酸酯键结构, 对硫磷[O,O-二乙基-O-(4-硝基苯基)硫代磷酸酯]和毒死蜱[O,O-二乙基-O-(3,5,6-三氯-2-吡啶基)硫代磷酸酯]具有硫(酮)代磷酸酯键结构, 乐果[O,O-二甲基-S-(N-甲基氨基甲酰甲基)二硫代磷酸酯]具有二硫(酮、醇)代磷酸酯键结构等[12].第52卷第2期 2007年1月论文图2 不同浓度的Phe-Mg裂解pBR322 DNA的琼脂糖电泳图1, pBR322 DNA; 2, pBR322DNA + 2.000 µg/µL Phe; 3, pBR322DNA+2.000 µg/µL Mg; 4, pBR322DNA+2.000 µg/µL Phe + 2.000 µg/µL Mg;5~12, pBR322 DNA+Phe-Mg, Phe-Mg的浓度分别为: 0, 0.150, 1.000, 1.500, 2.000, 2.500, 3.000和4.000 µg/µL图3 5′-AMP 水解后的HPLC图1, Phe-Mg水解切断5′-AMP的HPLC图; 2, 5′-AMP自动水解的HPLC图有机磷农药常被用作农作物的杀虫剂, 虽然它比有机氯农药较易降解, 残留期较短, 但有机磷农药毒性也较高, 如果残留在水果、蔬菜等作物上的农药或进入环境的农药进入生命体, 大部分对生物体内胆碱酯酶有失活作用. 但一旦有机磷农药中的磷酸酯键被水解, 其毒性将大大降低, 如对硫磷, 当磷酸酯键被水解后其毒性降低为原来的百分之一[12].考虑到有机磷农药在水溶液中会发生水解, 本试验以农药在水溶液中的自水解为空白对照, 检测了Phe-Mg对有机磷农药的催化水解作用(图4). 从图4可知Phe-Mg对有机磷农药水解效果最好的是含硫(醇)代磷酸三酯键的氧化乐果和甲胺磷, 48 h水解率分别是100%和71.11%, 其次对含磷酸三酯键的敌敌畏和含二硫(醇、酮)代磷酸三酯键的乐果, 分别达到55.34%, 49.05%; 而对含硫(酮)代磷酸三酯键的毒死图4 Phe-Mg对6种农药的催化降解1, 敌敌畏; 2, 甲胺磷; 3, 氧化乐果; 4, 乐果; 5, 毒死蜱; 6, 对硫磷蜱和对硫磷在48 h之内基本没有水解作用, 提示Phe-Mg对有机磷农药水解有一定的选择性.3讨论自20世纪90年代以来, 人们发现镧系离子及其配合物具有催化核酸水解的作用, 尤其是Ce4+及其配合物是目前发现的人工模拟酶中水解磷酸酯键速率最高的物质[13~15], 但由于镧系金属离子不是生命体的必需元素, 如果用于生命体内, 超过一定的限量会对细胞产生潜在的危害.镁和苯丙氨酸都是生命体必需的成分, 但单独的镁和苯丙氨酸, 或将2.000 µg/µL的镁和苯丙氨酸同时与质粒DNA反应, 对质粒DNA基本上都无裂解作用, 然而将镁和苯丙氨酸在90℃下反应8 h后, 所制得的Phe-Mg配合物对磷脂键则有较强的裂解作用.用KBr压片法测定了苯丙氨酸及Phe-Mg配合物在400~4000 cm−1的光谱图, 结果表明, 苯丙氨酸和镁论 文第52卷 第2期 2007年1月离子形成配合物后, 苯丙氨酸的一些主要吸收峰与Phe-Mg 配合物相比, 发生了明显的位移, 证实镁离子与苯丙氨酸发生了配位作用. 根据Phe-Mg 配合物的质谱(FTICR-MS)测定结果表明, 以ESI 为电离源, 用刚制备的Phe-Mg 配合物, 在正离子模式下测得的Phe-Mg 配合物是3, 4, 5或6个苯丙氨酸与一个镁形成配合物的混合物.在较低浓度染色剂EB(溴化乙锭)(如, 0.5 µg/mL)情况下, 一般超螺旋型移动最快, 线型其次, 缺口最慢. 但较高浓度EB 会影响3种形式DNA 的顺序[16].为得到较好的染色效果, 本次EB 浓度为0.7 µg/mL, 结果线型最快. 在相同的实验条件下用Eco R Ⅰ(限制性内切酶, 只将质粒DNA 水解断裂成线型)作用该DNA, 证实了这种现象.参 考 文 献1 许立和. 以鸡羽毛为原料制取氨基酸微肥. 科研与开发, 2002,24—252 伍宁丰, 梁果义, 邓敏捷, 等. 有机磷农药降解酶及其基因工程研究进展. 生物技术通报, 2003, (5): 9—123 中国统计年鉴2001. 北京: 中国统计出版社, 2002. 4784 邓敏捷, 伍宁丰, 梁果义, 等. 一种新的有机磷降解酶基因ophc2的克隆与表达. 科学通报, 2004, 49(11): 1068—10725 钟国清. 甘氨酸锌螯合物的合成与结构表征. 精细化工, 2001,18(7): 391—3976 Yang P, Ren R, Guo M, et al. Double-strand hydrolysis of DNA bya magnesium (Ⅱ) complex with diethylenetriamine. J Biol Inorg Chem, 2004, 9: 495—5067 焦奎, 孙伟, 王海玉. 以对硝基磷酸苯酯为底物电化学分析法检测碱性磷酸酯酶. 分析化学, 2001, 10(29): 1174—11778 Ren Rui, Yang Pin, Zheng W, et al. A simple copper (Ⅱ)-L-his-tidine system for efficient hydrolytic cleavage of DNA. Inorg Chem, 2000, 39: 5454—54639 康玉专, 沈鹤柏, 胡岗, 等. 稀土金属离子对5′-AMP 和3′, 5’-cAM P 的水解切断作用. 稀土, 2000, 21(6): 10—1310 杜德红, 汪东风, 孙继鹏, 等. 茶叶多糖及其铈配合物对质粒DNA 及有机磷农药的降解作用. 中国稀土学报, 2005, 23(1): 118—12111 余四旺, 刘长林, 李东风. 双锌配合物Zn 2(DTPB)C14水解DNA.无机化学学报, 2002, 18(11): 1113—111712 伍宁丰, 梁果义, 邓敏捷, 等. 有机磷农药降解酶及其基因工程研究进展. 生物技术通报, 2003, (5): 9—1213 高飞, 阴彩霞, 杨频. 核酸酶催化磷酸二酯键水解断裂作用的配位化学模拟. 科学通报, 2004, 15(49): 1471—148114 Rammo J, Hettich R, Roigk A, et al. Catalysis of DNA cleavage byLanthanide complexes with nucleophilic or intercalating ligands and their kinetic characterization. Chem Commun, 1996, 105—107 15 沈鹤柏, 夏静芬, 杨海峰, 等. Ce 离子水解断裂Oligomers DNA中磷酸二酯键. 中国科学B 辑: 化学, 2001, 31(2): 178—184 16 王镜岩, 朱圣庚, 徐长法, 等. 生物化学. 第三版. 北京: 高等教育出版社, 2002. 516·书 讯·《功能高分子》作者: 潘才元等出版: 科学出版社 2006年8月定价: 50元功能高分子是高分子学科中的一个重要分支, 它强调的是高分子的功能. 本书论述了功能高分子的各个领域, 包括高分子催化剂; 吸附分离高分子; 高分子分离功能膜; 高分子试剂; 生物医用高分子; 光敏高分子; 液晶高分子和能量转换高分子等的制备、表征、功能和应用. 对功能高分子的设计思想和研究课题作了探讨, 比较系统地论述了功能高分子的基础理论知识, 同时也介绍了最新研究成果.本书可作为高分子专业研究生和高年级本科生的教学用书或参考书; 对于从事功能高分子研究和开发的科技人员具有重要的参考价值.。
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2、试述人类基因组计划的内容、意义，以及后基因组计划的研究方向。
3、以操纵子理论说明：细菌如何利用乳糖作为碳源？当葡萄糖与乳糖共存时，如何调节？4、1分子葡萄糖子体内完全氧化生成38个ATP：（1）各个途径以及其中的能量生成？（2）NADH进入线粒体的途径？（3）NADH的呼吸链组成？5、试述血浆脂蛋白分类及作用，载脂蛋白的含义，作用。
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海洋生命学院2007年硕士研究生入学考试试题(生物化学)
中国海洋大学2007年硕士研究生入学考试试题科目代码：612 科目名称：生物化学A-----------------------------------------------------------------------------------------一、名词解释（共10题，每题2分，共20分）1、别构酶；2、呼吸链；3、化学渗透学说；4、乙醛酸循环；5、酸碱催化；6、同工酶；7、透析；8、P/O比（P/O ratio）；9、柠檬酸转运系统；10、信号肽二、判断题（共20题，每题1分，共20分）1、CoA和ACP都是酰基的载体。
2、磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶。
3、原核细胞新生肽链N端第一个残基为fMet，真核细胞新生肽链N 端第一个氨基酸残基为Met。
4、DNA半不连续复制是指复制时一条链的合成方向是5’→3’，而另一条链方向是3’→5’。
5、细胞的区域化在代谢调节上的作用，除了把不同的酶系统和代谢物分隔在特定的区间，还通过膜上的运载系统调节代谢物、辅酶和金属离子的浓度。
6、蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中，将向阴极移动。
7、麦芽糖是由葡萄糖和果糖构成的双糖。
8、氧化磷酸化的解偶联剂都是质子载体。
9、葡萄糖是生命活动中的主要能源，糖酵解和三羧酸循环都是在线粒体中进行的。
10、逆流分溶和纸层析这两个分离氨基酸的方法是基于同一原理。
11、盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离和纯化。
12、柠檬酸循环是分解和合成的两用途径。
13、葡萄糖激酶对葡萄糖的专一性强，亲和力高，主要在肝脏用于糖原合成。
14、从乙酰CoA合成1分子棕榈酸，必须消耗8分子ATP。
特别提醒：答案必须写在答题纸上，若写在试卷或草稿纸上无效。
15、参与尿素循环的酶都位于线粒体内。
16、嘧啶合成所需要的氨甲酰磷酸合成酶与尿素循环所需要的氨甲酰磷酸合成酶是同一个酶。
17、DNA聚合酶Ⅰ不是参与大肠杆菌DNA复制的主要聚合酶，因此它的任何突变不可能是致死型的突变。
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中国海洋大学200７年生物化学B
一、填空１＇
1.维生素Ａ是——类化合物，维生素Ｃ是——类化合物，维生素Ｄ是——类化合物。
2.生物合成所需要的能量主要由三羧酸循环和氧化磷酸化产生，还原力主要由——图寄给产生。
3.肽和蛋白质的特征颜色反应时——。
4.精氨酸的pK1（COOH）=2.17，pK2（NH3）=9.04，pK3（胍基）=12.08，则其PI值=（）。
5.真核细胞的核糖体由（）S亚基与（）S亚基组成。
其（）S亚基含有mRNA的结合位点。
6.在肌肉细胞中——和——两种蛋白质承担收缩和运动功能。
7.Ｐａｕｌｉｎｇ提出的蛋白质的α螺旋结构，每圈螺旋由——个氨基酸组成，螺距是——，维系其结
构的主要作用力是——。
除此之外，蛋白质二级结构还有两种基本类型是——和——。
8.激酶是一类催化——反应的酶。
9.磺胺类药物通过竞争性抑制微生物的——合成途径中的关键酶，发挥其抑菌作用。
10.人体的必须脂肪酸包括亚油酸和——两种。
11.机体将非糖的小分子物质合成糖的过程成为——。
12.真核生物中，细胞内的Ｎａ＋离子浓度比细胞外——，Ｋ＋比细胞外——。
13.一分子葡萄糖在肝脏完全氧化产生——分子ＡＴＰ，一分子软脂酸完全氧化产生——分子ＡＴＰ。
14.ＰＣＲ扩增ＤＮＡ的反应体系中除了ＤＮＡ模板、四种ｄＮＴＰ外，还应加入——和——。
15.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有三种活性，分别是５‘－３’外切以及——和——。
16.Southern blot，Northern blot，Western blot是分别对——，——和——进行印渍转移的技术。
二、判断１＇
1.肽链中除Ｃ＝Ｏ键不能自由旋转外，其他键均可自由转动，这是蛋白质形成复杂空间构象基础。
2.２０种氨基酸与茚三酮反应呈紫色是氨基酸的特征颜色反应。
3.一般来说，蛋白质的一级结构决定其空间构象。
4.一小肽结晶经酸水解后纸层析分析得１０个斑点，可以确定此肽为十肽。
5.胰蛋白酶专一性水解Lys、Arg等氨基酸氨基端肽键。
6.血红蛋白对样的结合具有协同效应，使其在氧分压很低时能有效地释放氧，氧分压高时快速结合样。
7.乙烯是一种植物激素，具有促熟的作用，在农业生成中广泛使用。
8.维生素Ｂ１即硫胺素，是羧化酶的辅酶。
9.人体的必须氨基酸主要有ValＴｒｐLeu Ile Met Phe Lys等。
10.麦芽糖是由葡萄糖和果糖构成的双糖。
11.所有别构酶都是寡居蛋白。
12.米式常数Ｋｍ是酶的特征常数，每个酶都有一个特定的Ｋｍ值，与底物种类无关。
13.非竞争性抑制剂不影响酶对底物的Ｋｍ。
14.核酶是一类具有催化活性的核酸，但其催化动力学并不符合米式方程。
15.DNA分子的变形时其紫外吸收迅速增加。
16.核酸中的稀有碱基大多出现于ｔＲＮＡ中。
17.生物膜上的脂质主要是磷脂。
18.膜蛋白跨膜区的二级结构一般为α螺旋。
19.糖异生途径是酵解途径的简单逆向反应过程。
20.葡萄糖激酶就是己糖激酶。
21.辅酶ＮＡＤＨ和ＮＡＤＰＨ所携带的Ｈ去向是不同的。
22.解偶联剂可以破坏氧化磷酸化的欧联，电子传递产生的能量将以热的形式释放。
23.线粒体内膜对离子是严格不可透的。
24.脂肪酸的氧化降解一般是从分子的羧基端开始的，例如除常见的β－氧化、ω－氧化。
25.层析是蛋白质分离的常用技术，一个层析系统的理论塔板数越高，系统的分离能力越好。
26.肽链合成时首先由甲酰蛋氨酰tRNA（ｆｍｅｔ－ｔRNAｆｍｅｔ）进入核糖体Ａ位识别启始密码子AUG。
27.中心法则指出了生物体中信息流的单向性，即信息从DNA传递到RNA再到蛋白质，任何逆向的传递
都是不存在的。
28.Ser、Thr、Tyr是蛋白质磷酸化的常见位点。
29.在大肠杆菌中转录和翻译是几乎同时进行的。
30.限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶。
三、选择１＇
1.α－螺旋遇到（）氨基酸是会中断ＡLysＢLeuＣProＤAsn
2.为了将核糖核酸酶充分变性，除使用巯基乙醇外还应使用（）
Ａ过甲酸Ｂ二硫苏糖醇Ｃ尿素Ｄ１ｍｏｌ／ｌ盐酸
３．在接近中性ｐＨ条件下，下列哪种氨基酸具有最大的酸碱缓冲当量（）
ＡLysＢGluＣArgＤHis
４.蛋白质可被碱水解，该反应可用来定量蛋白质中的（）
ＡＴｒｐＢSerＣCysＤThr
５.生理状态下，血红蛋白与氧可逆结合的铁处于（）
Ａ３价Ｂ２价Ｃ结合氧时为３价，去氧后为２价Ｄ结合氧时为２价，去氧后为３价
６.下列水解酶中（）属于丝氨酸蛋白酶。
Ａ氨肽酶Ｂ溶菌酶Ｃ胰蛋白酶Ｄ木瓜蛋白酶
７.用凝胶过滤层析分离蛋白质时（）
Ａ分子量大的先被洗脱Ｂ分子量小的先被洗脱
Ｃ与树脂带同种电荷的先被洗脱Ｄ与树脂带不同电荷的先被洗脱
８.常用于多肽链Ｎ末端测定的试剂是（）
Ａ羧肽酶ＢPCl５ＣPITCＤ乙醇
９.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制属于（）
Ａ竞争性抑制Ｂ非竞争性抑制Ｃ反竞争性抑制Ｄ使酶变性失活
１０.染色体中DNA主要采取（）构型
ＡＡ型；ＢＢ型；ＣＺ型；ＤＨ型
１１.蛋白质是在（）细胞器上合成的
Ａ核糖体Ｂ高尔基体Ｃ溶酶体Ｄ线粒体
１２.酶的比活力表征酶的（）
Ａ纯度Ｂ量Ｃ催化能力Ｄ蛋白量
１３.许多凝血因子的合成依赖于维生素（）
Ａ维生素ＡＢ维生素ＤＣ维生素ＥＤ维生素Ｋ
１４.要把膜蛋白完整的从膜上解离下来，可以使用（）
Ａ蛋白水解酶Ｂ糖苷水解酶Ｃ纤维素酶Ｄ去污剂
１５.生物分解途径中（）作为氧化还原反应主要的辅酶
Ａ：FADＢ：ＦＭＮＣ：ＮＡＤ＋Ｄ：ＮＡＤＰ＋
１６．２，４－二硝基苯酚是氧化磷酸化的（）
Ａ激活剂Ｂ抑制剂Ｃ解偶联剂Ｄ调节剂
１７.大肠杆菌DNA复制中起主要作用的DNA聚合酶是（）
ＡＫｌｅｎｏｗ酶ＢDNA聚合酶ⅠＣDNA聚合酶ⅡＤDNA聚合酶Ⅲ
１８.（）的发现开启了基因体外操作的可能，基因工程应运而生。
ＡRNA聚合酶Ｂ反转录酶Ｃ限制性内切酶ＤDNA聚合酶Ⅰ
１９.极微量的激素即可产生非常显著地生理作用，是因为（）
Ａ细胞膜系统的分区定位Ｂ受体对信号的传导作用Ｃ酶催化的高效性Ｄ级联放大作用
２０.２００６年诺贝尔化学奖授予罗杰·科恩博格以表彰他在（）领域做出的重大贡献。
ＡＧ蛋白在信号传导中的作用Ｂ真核转录的分子基础ＣDNA双螺旋结构ＤHox基因在发育中的作用
四、英译汉０.５＇
１.trypsin
2.ribozyme
3.substrate
4.peptide bond
5.Open Reading Frame
6.α-helix
7.CM-cellulose
8.domian
9.eletrophoresis
10.SDS-PAGE
11.fatty acid
12.glucise
13.exon
14.lipid
15.protein
16.conformation
17.plasmid
18.IEF
19.transcription
20.gluconeogenesis
五、问答题
1.区分下列概念：超二级结构，结构域（domain），模体（motif）和亚基（subunit）。
８＇
2.酶不同于其他催化剂的关键特点是其可被精细调控，请从蛋白质结构和功能关系的角度解释并说明各
种酶活调控的方式的原理。
１０＇
3.有一些解释氧化磷酸化偶联机制的假说，虽然不十分成功但也包含着一些合理的思想，请对化学偶联
假说和构象偶联假说进行介绍和评价。
８＇
4.请根据复制、转录和翻译过程的有关知识说明遗传信息在传递过程中有哪些机制保证了其保真性。
８＇
5.２００３年美国畅销书diet revolution提出一个观点认为，只要严格限制糖的摄入，可以放开是高蛋
白高脂肪的食品而仍然可以达到减肥的目的。
请根据三大营养物质代谢的有关知识对上述观点进行讨论。
１４＇。