奶粉中菌落总数实验培养基
乳粉中菌落总数的测量不确定度评定
乳粉中菌落总数的测量不确定度评定摘要：目的菌落总数是重要的卫生质量指标之一, 建立乳粉中菌落总数的测量不确定度评定方法具有非常重要的意义,可以有效客观判定产品卫生质量指标是否真正符合标准。
根据RB/T 151-2016 《食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南》、GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》作为依据，对乳粉中菌落总数的不确定度来源进行分析, 保证测试样品均匀，每个样品都含可计数的微生物。
[1]每个样品均做平行样，由同一操作员进行操作，测试完成后得到的测试结果取对数。
结果乳粉中菌落总数的扩展不确定度为 0.040(以对数计)。
关键词：乳粉；菌落总数；测量不确定度实验部分1.实验原理[2]食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g检样中形成的微生物菌落总数。
2.样品市售奶粉3.仪器设备恒温培养箱SPX-250，YXQ-LS-70A型高温蒸汽灭菌锅，生物安全柜BSC-1000IIA2，无菌均质器SCIENT-11L，电子天平YP120N4.培养基PCA，北京陆桥，2002245.方法与结果分析5.1菌落总数检验过程图，见图1。
图1 菌落总数检验过程图5.2不确定度来源分析不确定度的来源包括重复性(测试环境、培养时间、培养温度、修约、样品的均匀性、取样的重复性、人员的计数)、培养条件(培养时间允差、培养适度的允差)、取样(稀释体积、取样体积)等，根据RB/T 151-2016 《食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南》不考虑偏倚，采用统计学的方法评定测量不确定度。
5.3重复测量结果将10个样品的平行检验结果取对数后进行分析，结果见表1。
表1 检验结果及分析[3]5.4再现性标准差为：5.5扩展不确定度5.6报告结果当检测结果的扩展不确定度为 0.040，其样品菌落总数测试结果报告见表2。
【CN209537482U】一种适用于牛奶成品菌落总数快速检测的培养基【专利】
( 12 )实 用新型专利
(21)申请号 201920024533 .1
(22)申请日 2019 .01 .08
(73)专利权人 浙江一景乳业股份有限公司 地址 312400 浙江省绍兴市嵊州市经济开 发区普田大道555号
(72)发明人 李一清
(74)专利代理机构 北京艾皮专利代理有限公司 11777
本实用新型涉及一种培养基，尤其涉及一种 适用于牛奶成品菌落总数快速检测的培养基。要 解决的 技术问 题 ：提供一 种不需 要取出 、便于操 作的适用于牛奶成品菌落总数快速检测的培养 基。技术方案如下 ：一 种适 用于牛奶成品菌落总 数快速检测的培养基 ，包括有底座、机械箱、箱 门、滑动板、滑动块、固定箱、轴承座等；底座顶部 设置有机械箱，机械箱前侧设置有箱门 ，机械箱 内中部设置有滑动板 ，滑动板上设置有滑动块 ， 滑动块顶部设置有固定箱，固定箱右侧设置有轴 承座。本实用新型通过工作人员顺时针或逆时针 旋转螺杆 ，进而带 动固定箱向 左或向 右移动 ，继 而能够带动培养基进入培养区域和检测区域，便 于工作人员进行检测和培养。
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CN 209537482 U
说 明 书
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一种适用于牛奶成品菌落总数快速检测的培养基
技术领域 [0001] 本实用新型涉及一种培养基，尤其涉及一种适用于牛奶成品菌落总数快速检测的 培养基。
背景技术 [0002] 微生物是导致食品变质而菌落总数是一个重要的微生物指标。目前对食品中菌落 总数从而引发食品安全问题的重要因素，牛奶成品菌落的检测方法包括取样、培养、菌落计 数等，牛奶成品菌落的检测一般都需要将其取出，再进行检测，取出过程中容易会对菌落造 成污染，检测不精准，一定程度上降低了检测人员的工作效率。
菌落总数测定实验步骤
菌落总数测定实验步骤
菌落总数测定实验的步骤如下：
1. 准备所需材料和试剂：琼脂培养基、试管、乳酸菌平板、移液器、消毒液等。
2. 将琼脂培养基溶解并熔化，待稍微冷却至37℃左右。
3. 取一定量的菌液，一般可采用10倍稀释法，将菌液加入含有适量琼脂培养基的试管中，彻底混合均匀。
4. 将加有菌液的琼脂培养基倒入乳酸菌平板中，待凝固。
5. 将已经凝固的乳酸菌平板倒置，放入孵化箱中，以37℃恒温培养。
6. 培养时间通常为24-48小时，视具体菌种而定。
7. 从孵化箱中取出培养好的乳酸菌平板，将菌落数目较多且分散的平板选取，以避免菌落过于密集而无法清楚计数。
8. 使用显微镜或肉眼观察，使用计数板或计数器，对菌落进行计数，记录下每个平板上的菌落总数。
9. 根据实验设计的需要，可以进行平均数的计算和数据的统计分析。
10. 实验结束后，用消毒液彻底清洗实验器材，并正确处置菌
液和培养平板。
注意事项：
- 操作过程中应注意无菌操作，避免外部污染。
- 实验室内需要保持清洁卫生，定期消毒工作台和实验室器材。
- 孵化过程中需要注意温度和时间的控制，避免过渡时间或温
度过高导致菌落生长异常。
- 菌落计数时需要仔细观察，避免漏计或重复计数。
- 实验结束后，遵守实验室规定的废弃物处理要求，确保安全
环保。
乳中菌落总数的测定(精)
• (2)用lmL灭菌吸管吸取1+10稀释液lmL，沿管壁徐徐注入含有 9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触
及管内稀释液)，振摇试管混合均匀，作成l+100稀释液。
• (3)另取lmL灭菌吸管，按上项操作顺序作十倍递增稀释液，如
此每递增稀释一次，即换用一支lmL灭菌吸管。
• (4)根据食品卫生标准要求或对样品污染情况的估计，选择2～ 3个适宜稀释度，分别在做十倍递增稀释的同时，即以吸取该 稀释度的吸管移lmL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个 平皿。
• (2)稀释度的选择 • ①应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告结果( 如表1例1)； • ②若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者之比如 何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数I若大于2．则报告其 中较小的数字(如表1例2及例3) • ③若所有稀释度的平均菌落数均大于300．则应按稀释度最高的平均菌落
以稀释倍数报告结果(如表1例7)。 • (3)菌落数的报告 • 菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二 位有效数字．在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法 计算。为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示(如 表1)。
• 表1稀释度选择及菌落数报告方式
• 五、菌落计数的报告
• (1)平板菌落数的选择 • 选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一 个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平 板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生
长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半
，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以 2代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明 显界线)若仅有一条链，可视为一个菌落，如果有不同来源的 几条链，则应将每条链作为一个菌落计。
菌落总数测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除菌落总数测定实验报告篇一：食品中菌落总数的测定蛋糕中菌落总数的测定【说明】蛋糕具有松软香甜，携带方便、食用简单等特点，因此成为人们居家生活特别是旅途中不可或缺的一种美食，深受人们的喜爱。
测定蛋糕中的菌落总数可以用来判定其被微生物污染的程度及卫生质量，它反映蛋糕在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价，菌落总数的多少在一定程度上标志着蛋糕产品质量的优劣，因此，测定蛋糕中的菌落总数具有重要意义。
目前应用于测定食品中菌落总数的方法有:纸片法、电阻抗法等。
本实验采用国标法(gb\T4789.2-20XX)对独立包装小蛋糕中菌落总数进行测定。
并与gb7099-20XX糕点、面包卫生标准中规定的冷加工糕点中菌落总数≤10000（cfu/g）的数据对比初步判断样品是否符合卫生要求。
一、实验目的1、学习并掌握测定蛋糕中菌落总数的方法及原理。
2、通过对比实验验证冷藏对蛋糕的保鲜及抑菌作用。
3、了解菌落总数测定在食品卫生学评价中的意义。
二、实验原理菌落总数即为食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
每种细菌都有它一定的生理特性，培养时应用不同的营养条件及其他生理条件（如温度、培养时间、ph、需氧性质等）去满足其要求才能将各种细菌都培养出来。
但在实际工作中，一般都只用一种常用的方法。
细菌菌落总数的测定，所得结果，只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温性需氧菌的菌落总数。
菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
三、实验设备与材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：3.1恒温培养箱：36℃±1℃，30℃±1℃。
乳粉中菌落总数测定规则及实例
项目二乳粉中菌落总数测定操作要点及训练一、乳粉取样规则（依据GB4789.18-2010）1、取样前将样品充分混匀，袋装奶粉应用75%酒精棉球涂擦消毒袋口，以无菌操作开封取样，称取检样25g，加入预热到45℃盛有225mL灭菌生理盐水等稀释液或增菌液的锥形瓶内（可使用玻璃珠助溶），振摇使充分溶解和混匀。
2、对于经酸化工艺生产的乳清粉，应使用Ph8.4±0.2的磷酸氢二钠缓冲液稀释，对于含较高淀粉的特殊配方乳粉，可使用α-淀粉酶降低溶液年度，或将稀释液加倍以降低溶液粘度。
二、乳粉取样量1、产品包装小于等于500g的，取最小销售包装内即可，取样量不少于5×25g；2、产品包装大于500g，使用无菌取样钻在大包装中取样，取样量不少于5×25g。
（附图：多层取样器或取样钻）三、平板菌落计数实例（依据GB4789.2-2010）：四、菌落总数计算实例五、检测报告的出具（依据GB19644-2010）（注释：n：取样的个数；c：检样中菌落总数在检测上下限值范围内的样品个数；；m：样品中待测成分的最低限值；M：样品中待测成分的最高限值；在判断结果时，当所有检测样品菌落总数低于n时，产品可接收；当检样中有≤c个样品中菌落总数在n-M范围内，则样品可接收；若果超过c个样品中超过n-M范围，则产品不予接收，若全部检样中菌落总数均超过M，则样品不予接收。
）例如：鸡肉中沙门氏菌标准为n=5、c=0、m=0.其中n=5即取样5个，c=0表示在该批检样中，不得有样品中检测出沙门氏菌，则样品可被接收，反之则不可接收。
六、练习1、已知在生食海产品鱼的副溶血弧菌标准为m=5、c=0、m=0。
判断该产品可接收与不可接收的条件并说明理由。
能力验证菌落总数测定结果不确定度评定
能力验证菌落总数测定结果不确定度评定作者：张虹仙来源：《中国食品》 2018年第11期一、材料与方法材料。
（1）样品：奶粉〔（CFAPA-230能力验证样品（菌落总数175）），由大连中实国实检测技术有限公司提供；（2）培养基：平板计数琼脂（规格：500g；批号：3104066），广东环凯微生物科技有限公司生产，所用培养基在有效期内，适用性检查结果符合要求。
（3）主要仪器：GHP-9270电热恒温培养箱、50KB-Ⅲ蒸汽压力灭菌器。
实验方法。
（1）样品溶液制备。
无菌开启西林瓶，立即（1分钟内）加入少量（2ml－4ml）稀释液进行溶解，待溶解后，吸出放入无菌瓶中，反复用余下的稀释液清洗西林瓶内壁，回收清洗液放入上述的无菌瓶中，合计用稀释液40ml。
该40ml液体即为待测原液，即10o。
以无菌吸管吸取25mL待测原液置盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶中充分混匀，制成1:10的样品匀液。
（2）样品溶液稀释。
用1mL无菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中，混匀，依次制成1:103、1:104、1:105、1:106、1:107的稀释液备用。
在稀释的同时吸取1mL样品匀液于无菌平皿内。
1:104、1:105、1:106的稀释液做10个平皿，其它稀释度做2个平皿。
同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
（3）培养。
在平皿内倾注15mL左右46℃平板计数琼脂培养基，并转动平皿使其混合均匀。
待琼脂凝固后将平板翻转，36℃培养箱内培养48h。
（4）计算菌落总数。
选取菌落数在30CFU-300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数进行报告，计算样品中菌落总数。
二、不确定度的分析一是建立数学模型：Y=κX/V。
其中，Y——样品的菌落总数，cfu/ml；κ——稀释倍数；X——某稀释度检测平板上的菌落数，cfu；V——某稀释度下取样体积，ml。
二是不确定度来源分析。
能力验证乳粉样品中双歧杆菌计数培养基的选择探究
1.4 分析方法 实验结果采用重复性限、再现性限 [14] 进行分析。重复
作者简介：劳嘉倩（1990—），女，汉族，广东佛山人，本科，助理工程师。研究方向：食品微生物检测技术。 通 信 作 者： 蒋 佳 希（1992—）， 女， 汉 族， 广 东 广 州 人， 本 科， 助 理 工 程 师。 研 究 方 向： 食 品 微 生 物 检 测 技 术。 E-mail:364558774@。
随 着 食 品 行 业 的 快 速 发 展， 消 费 者 对 食 品 的 安 全 性 和质量要求越来越高，我国食品微生物标准《食品安全国 家标准 婴儿配方食品》（GB 10765—2010）和《食品安全 国家标准 较大婴儿和幼儿配方食品》（GB 10767—2010） 中明确规定添加活性菌种的产品其活性益生菌的数量要≥ 106 CFU/mL，但要准确测定食品中双歧杆菌的含量，通常 受测试环境、样品保存条件、样品均匀性、稀释体积、取 样体积、培养时间、培养温度、观察计数等多方面因素的影 响 [4-8]。因此，科学、准确地测定产品中双歧杆菌等益生菌 的数量十分关键。
关键词：能力验证；双歧杆菌；培养基
双歧杆菌（Bifidobacterium）是一类严格厌氧的革兰氏阳 性杆菌，广泛存在于人和动物体内，具有抗菌、抗感染、 免疫调节、降低胆固醇、抗肿瘤等多种生理功能 [1-4]，是人 体内重要的益生菌。目前，双歧杆菌在医学、功能性食品、 保健食品等方面有较深入的研究，被广泛应用于各种乳制 品中。
操作者进行的 2 次独立试验结果取以 10 为底的对数后，绝对 值差值不大于 0.45（即再现性限，r=0.45）。 2 结果与分析
样品使用 BBL 培养基和 MRS 培养基经（36±1）℃厌氧 培养 48 h 后，双歧杆菌数计数结果及计算见表 1。
奶粉微生物的测定实验报告
奶粉微生物的测定实验报告实验目的：测定奶粉中的微生物总数，并评估其卫生质量。
实验原理：奶粉微生物的测定主要采用菌落计数法。
将奶粉样品溶解于适当的培养基中，通过稀释平板法将接种溶液均匀地涂布在平板上，培养一定时间后，观察并统计在培养基上形成的菌落数量，根据菌落数量来计算微生物的总数。
实验步骤：1. 准备工作：a. 准备好所需的培养基和培养器具。
b. 对奶粉样品进行样品准备，称取适量的奶粉样品。
c. 准备适宜浓度的细菌接种液。
2. 样品处理：a. 在无菌条件下，将奶粉样品加入适量的生理盐水中，并进行充分搅拌均匀。
b. 取适量的稀释液进行适当稀释，通常采用十倍稀释法进行稀释。
3. 平板法接种：a. 取适量的稀释液，用无菌滤纸擦拭平板，然后将细菌接种液均匀地平铺在平板上。
b. 用无菌的杯针将细菌接种液均匀地涂布在平板上，并用三角棒进行扩散，确保细菌均匀分布。
4. 培养与计数：a. 置于恒温培养箱中，在适当的温度条件下培养一定时间（通常约为24-48小时）。
b. 观察培养基上形成的菌落数量，并进行计数。
c. 根据扩散、稀释的系数以及菌落数量，计算奶粉样品中的微生物总数。
实验结果和数据处理：根据实验步骤获得的菌落数量，可以计算奶粉样品中的微生物总数。
根据微生物总数及相关标准，评估奶粉的卫生质量。
实验注意事项：1. 实验过程中需要严格遵守无菌操作，以防止外界污染。
2. 实验仪器和培养基需经过高温高压灭菌处理。
3. 实验过程中需要注意个人防护，如戴手套、口罩和实验服等。
4. 实验结束后，培养皿和装置需要进行无菌处理，以防止微生物污染。
实验结论：根据实验结果，可以评估奶粉的卫生质量，判断其是否符合相关标准要求。
若奶粉中微生物超标，则表明其卫生质量较差，不宜使用。
若微生物数低于标准要求，则表示奶粉卫生质量良好，可放心使用。
乳粉中菌落总数能力验证与质量控制分析
对样品的相关处理操作可以参考说明指导书。在
作者简介：胡金玲（1988—），女，本科，助理工程师；研究方向为食品检验。 204 / 现代食品 Testing 分析检测
题和事项，这几项工作完成后便可以出具相关的数据 报告，确保食品安全执法落到实处。
1 材料与方法
1.1 测试样品 样品 1：来源于中国检疫鉴定研究院组织的乳粉
价食品样品的卫生状况。若人体摄入的食物中含有的 菌落总数较多，甚至超过一定的标准，那么长此以往 便很容易出现胃部和肠道方面的疾病 [2]。所以测定菌 落总数是一个重要的环节，不仅能为之后更加深入的 研究和分析奠定良好的基础，同时也可以为后续的实 际操作提供参考价值，这是检测食品微生物的基础环 节，要求参与检验的相关人员应当具备足够的专业知 识技能。若要准确评估实验室所具备的检测能力和所 应用的技术是否达到较为先进的水平，可以采取实验 室能力验证计划，此外，它也能评估实验室所制定的 质量管理体系是否能在未来一段时间持续发挥其功能 作用 [3]。本文以乳粉为研究对象，采取合理恰当的方 法评价其菌落总数测定能力，并对其得出的结果进行 汇总整理，然后分析该过程中应当注意哪些方面的问
分析检测 Analysis and Testing
doi:10.16736/41-1434/ts.2020.16.057
乳粉中菌落总数能力验证与质量控制分析
Ability Verification and Quality Control Analysis of Total Bacterial Count in Milk Powder
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胰蛋白胨
胰酪胨
又称胰酪蛋白胨（Casein Tryptone）、胰酶消化酪蛋白胨（Pancreatic digest of casein），是一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等，可配制各种微生物培养基，用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定，以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。在本实验中用于对制作LST生物培养基，用于对大肠杆菌的培养。
磷酸盐缓冲液
磷酸盐缓冲液是由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成的溶液，在本实验中用于对样品的稀释，优点：PH稳定，渗透压和离子浓度通常与人体pH相近。
无菌生理盐水
用于对样品的稀释，用生理盐水处理细菌细胞时通常采用的方法在一定温度下进行震荡，因为细菌本身具有活性，因此震荡后会从滤料中游离出来，进入到等渗的溶液中，接下来就可以采用绝迹稀释法等对细菌进行定性定量的分析了。优点：更好保存大肠杆菌细胞活性。
氯化钠
无色立方结晶或白色结晶。溶于水、甘油，微溶于乙醇、液氨。不溶于盐酸。在空气中微有潮解性。将其加入肉汤中可以提供营养元素Na+，Cl-，同时可以维持渗透压。在本实验中用于LST,VRBA肉汤的制作，以及生理盐水的制作。（提供渗透压、氯离子、抑制杂菌）
乳糖
性状为白色的结晶性颗粒或粉末；无臭，味微甜。在水中易溶，在乙醇、氯仿或乙醚中不溶。在本实验中因为肠杆菌能分解乳糖而产生酸，使培养基的pH降低（指示剂变色），从而检测出样品中是否含有大肠杆菌
月桂基硫酸钠
用于抑制革兰氏阳性球菌
BGLB煌绿乳糖胆盐肉汤
蛋白胨
蛋白胨是有机化合物。蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。蛋白胨富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类。（能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。它可以作为微生物培养基的主要原料）
溴甲酚紫
酸碱指示剂，也可以用作乳酸乳球菌的培养基制备时的指示剂，其pH变色范围5.2(黄色)～6.8(紫色)；吸附指示剂；乳糖胆盐发酵培养液是进行大肠杆菌检测的常规培养液，因为大肠杆菌是一种产酸产气的细菌，所以在它产酸过程中能使溴甲酚紫变色，产气能使小导管出现气泡，从而能判断是否存在大肠杆菌（乙醇和稀碱来溶解）
VRBG
VRBG固体培养基，方便菌群计数
磷酸氢二钾
白色结晶或无定形粉末。易溶于水，水溶液呈微碱性。微溶于醇。有吸湿性。灼烧后成焦磷酸盐。磷酸氢二钾用于医药、发酵、细菌培养及制取焦磷酸钾等
磷酸二氢钾
无色四方晶体或白色结晶性粉末。熔融后成透明液体，冷却固化后为不透明的玻璃状物质偏磷酸钾。有吸湿潮解性。在本实验中用于供给培养基营养，提供钾，磷元素
NaOH
NaOH呈碱性，在本实验中用于提高液体ph值
HCL
HCL呈酸性，在本试验中用于降低液体PH值
总结：三种培养基作用：都具有培养作用，BGLG，VRBA有抑制杂菌的作用
名称
特点
LST
LST是温养型，选择性不强，用于对菌种的修复和培养，如果有受损菌种，可以在LST里面变好，变强。
BGLB
BGLB有较强选择性，将在LST中呈阳性菌种接种进BGLB，仍然产气，则确定样品内有大肠杆菌
琼脂
琼脂不溶於冷水，能吸收相当本身体积20倍的水。易溶於沸水，稀释液在42℃(108℉)仍保持液状，但在37℃凝成紧密的胶冻。琼脂为细胞壁的组成成分，含有复杂的碳水化合物、钙与硫酸盐。琼脂配制的固体也不致将培养物烫死。因此，琼脂是制备各种生物培养基中应用最广泛的一种凝固剂。琼脂的浓度，通常是液体培养基的1～1.5％。在本实验中用于培养基的凝固，凝固的培养基操作简便，对培养物的支持、通气较易解决，便于经常观察。
牛胆粉
本品为牛科动物牛胆汁的干燥品。取牛胆汁，滤过，干燥，即得，在本实验中用于对杂菌的抑制
猪胆盐
经实验观察，猪、牛、羊三种胆盐对大肠菌群的检验效果无明显、差异，当其他胆盐不好买到时，可互相替代，在本实验中胆盐用以抑制杂类细菌的生长。
煌绿水溶液
煌绿，又名亮绿,金黄色闪光结晶，可溶水和乙醇，为三苯甲烷染料，其抗菌防腐作用与甲紫类似。添加有煌绿的培养基，可用于食品、水中大肠菌群的证实试验。煌绿可抑制非肠杆菌科细菌。
在LST肉汤中用于胰蛋白胨的替代品。胨的解释：胨是蛋白质水解过程中生成的一种物质，细菌培养中作为细菌需要的氮源而广泛使用。根据其来源（如肉蛋白、乳蛋白、酪蛋白、植物蛋白等）和消化酶（胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等）的不同而名称不同，形状和成分也有所不同。胰蛋白酶是消化水解所得的胨。胰酪胨来源于酪朊（酪蛋白），胰蛋白胨来源于肉蛋白。
VRBA结晶紫中性红胆盐琼脂
酵母膏
酵母膏是以新鲜酵母乳液经酶解、分离、浓缩得到的纯天然制品，富含均衡的各种人体必需氨基酸、B族维生素、核甘酸、多肽及微量元素，是各种微生物所必需的生长元素和一种营养功能性复合调味基料。酵母膏是棕黄色浓厚粘稠液体产生，具有特殊的臭味，但无腐败气味。能溶于水，溶解呈黄色至棕色，反应呈弱酸性。在本实验中蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素。（用称量纸称后直接放入器皿中，溶化后迅速取出称量纸或直接称到器皿中）
胆盐和三号胆盐
在本实验中胆盐用以抑制杂类细菌的生长。
中性红
细胞活体染色和酸碱性指示剂的一种碱性吩嗪染料。在本实验中中性红是酸碱指示剂，用以检测细菌能否分解培养基中的乳糖，如分解乳糖则菌落呈酸性，中性红变红色，即菌落是红色的，不分解乳糖则菌落是无色或黄色的。
结晶紫
结晶紫是一种医药名称，有较好的杀菌作用，且无刺激性及毒性。在本实验中结晶紫和胆盐一样都是抑菌剂，主要抑制革兰阳性杆菌和粪链球菌。