食品微生物学实验技术思考题答案
食品微生物学检测技术思考题
⾷品微⽣物学检测技术思考题⾷品微⽣物学检测技术思考题1、试述微⽣物与⾷品安全的关系。
微⽣物引起⾷品腐败变质；微⽣物引起⾷物中毒；微⽣物制造⾷品、促进粮⾷⽣产。
2、对⾷品进⾏微⽣物检验有何意义？检验结果是衡量⾷品卫⽣质量的重要指标,也是判定被检⾷品能否⾷⽤的科学依据；可以有效地防⽌或减少⾷物中毒和⼈畜共患病的发⽣；保证产品的质量,避免不必要的损失。
3、⾷品微⽣物检验的范围包括哪些？⽣产环境的检验；原辅料的检验；⾷品加⼯、储藏、销售诸环节的检验；⾷品的检验。
4、⾷品卫⽣标准中的微⽣物指标有哪些？根据⾷品卫⽣要求,⾷品中需要检测的微⽣物种类、数量及其代谢产物的种类和数量称为⾷品卫⽣微⽣物学指标，是评判⾷品卫⽣质量的重要依据。
微⽣物学指标种类：菌落总数；⼤肠菌群数；致病菌；霉菌及其毒素；其他指标。
我国卫⽣部颁布的⾷品微⽣物指标最重要的是菌落总数、⼤肠菌群数和致病菌三项。
5、描述⾷品微⽣物检验的⼀般程序。
6、列表⽐较低倍镜、⾼倍镜及油镜在数值孔径、⼯作距离及镜头⼤⼩等⽅⾯的差别。
数值孔径（NA）⼯作距离镜头⼤⼩0.25 7-8mm 较⼤低倍镜0.65 0.4-0.5mm 中等⾼倍镜1.25 0.18-0.2mm 较⼩油镜7、要使视野明亮，除光源外，还可采取哪些措施？加⼤虹彩光圈,提升聚光程度.调节光圈⼤⼩,提升聚光器8、与普通光学显微镜⽐较暗视野显微镜和相差显微镜在结构和功能上有何特点？结构：暗视野显微镜聚光器下增加了环状光栅，观察⽬标是亮的，背影为暗的，提⾼观察物体的对⽐度；相差显微镜聚光器下增加了环状光阑和相位板，把透过标本的可见光的相位差（光程差）变成振幅差。
功能：暗视野显微镜可以观察活细胞的形态和运动性；相差显微镜可以观察活细胞的形态和运动性，以及活细胞内部结构相差显微镜：通过环形光阑和相位板把透过标本的可见光的相位差（光程差）变成振幅差，从⽽提⾼了各种结构间的对⽐度，使各种结构变得清晰可见。
9、简述监测⾼压蒸汽灭菌效果的⽅法及其特点。
食品微生物学实验思考题
实验一显微镜的使用和细菌简单染色六、思考题1.用油镜观察时应注意哪些问题？由于油浸镜的工作距离很短(0.19mm左右)，故使用时必须特别小心。
在低倍镜找到要观察的部位以后，将镜筒升起，在标本上加一滴香柏油，转换油镜头，从侧面注视，用粗调螺旋将镜筒小心下降，使油镜头浸入油滴，直到几乎与标本接触为止(注意切勿压在标本上，以免压碎玻片，甚至损坏油镜头)。
从目镜观察，先用粗调螺旋徐徐升起(只准上升镜筒，不能向下调节)，当视野中有模糊的标本物像时，改用细调螺旋调节，直到标本物像清晰为止，如转动粗调螺旋已使镜头离开油镜，应重新调节，直至调到看清物像为止。
3.什么是物镜的同焦现象？一般情况下，当五项在一种物镜中已清晰聚焦后，转动转换器将其它物镜工作时，物像基本保持在聚焦状态。
实验二革兰氏染色法六、思考题1．哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？菌龄、图片厚度、染色均匀度、脱色时间、脱色均匀度等。
其中脱色时间是关键。
2．革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老？为什么？菌龄太老，其中的部分细胞可能已经死亡或自溶，造成细胞壁的通透性增强，染色结果可能出现假阴性。
3．革兰氏染色时，初染前能加碘液吗？不能。
初染前加碘液的话就会先和染料结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞壁进入细胞质膜，达不到初染效果。
4.不经过复染，能否区别革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌？可以。
因为脱色后G+是紫色的而G-是无色的，所以已经可以区分了。
但是如果不经复染的话，镜检时看不清G-的细胞形态。
5.制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节？涂片、固定、脱色6.为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察？因为如果制片和油镜镜头之间有水层，透过载玻片的光线就会发生折射而不能完全进入镜头，从而降低视野的亮度；另外，由于水层的折射，会降低显微镜的分辨率，造成图像不清晰。
7.如果图片未经热固定会出现什么问题？加热温度过高、时间过长又会怎样？实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察六、思考题1．酵母菌死活细胞观察中，美兰液有何作用？美兰的氧化态为蓝色，还原态为无色。
食品微生物学思考题和作业题-
《食品微生物学》课堂教学用思考题和作业题0 绪论本章作业题：教材P8的第1、6、9题：什么是微生物它包括那些类群微生物有哪五大共性其中最基本的是哪一个为什么什么是微生物学学习微生物学的主要任务是什么微生物学的基本实验技术有哪些试分别阐述之。
区别于其它生物，微生物有何特点你有何体会认真阅读教材的“绪论”和“结束语”，结合自己的亲身经历谈谈你打算怎样学好“微生物学”这门课程。
补充思考题：用具体事例说明人类与微生物的关系。
简述微生物学在生命科学发展中的地位，并描绘其前景。
为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人微生物学研究的基本方法和技术有哪些你现在了解哪些技术你认为微生物学的理论和技术有怎样的联系试从微生物的特点分析其分布比动植物更广泛的原因，为什么无菌操作技术是一切微生物学工作的基础一、微生物分类鉴定与命名本章作业题•教材P366-367的第4、5、6、7、8：什么是种什么是新种任何表示一个种和新种什么是学名什么是双名法熟悉一批学名对每个生命科学工作者有何重要性何谓菌株它如何表达正确理解菌株的涵义有何重要意义什么是模式菌株它和模式菌种有何关系概念：菌株、品系、克隆、无性繁殖系、毒株、菌落、菌苔、斜面、分离物、纯培养以及菌种等名词有何区别本章思考题•教材的第12、15、16题：试比较古生菌、细菌和真核微生物间的主要区别。
用于微生物鉴定的经典指标有哪些随着新的理化技术在微生物鉴定中等应用，经典的分类指标会被淘汰吗何故现代微生物鉴定技术队发展趋势如何试举例加以说明。
•教材第21题中微生物的学名(着重于勾画的)。
二、原核微生物1 观察细菌为何要用染色法，Gram染色法哪步最关键为什么如何保证结果的正确性2 研究芽孢有何重要的理论和实践意义3 放线菌的典型形态特征是怎样的4 会描绘原核细胞的构造模式图，并能说明各构造的重要特点和功能（思考题）三、真核微生物补充的思考题：1 霉菌的繁殖方式有哪些2 试比较发酵工业中常见常用霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉和红曲霉）的菌丝特点（指分枝分隔和核的数量）、子实体及特化菌丝名称和无性孢子、有性孢子名称等。
微生物学思考题答案
微生物学思考题答案1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。
事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。
整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。
许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。
根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。
根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。
微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。
没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。
植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。
土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。
微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。
奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。
泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。
可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。
微生物在能源生产方面也起着重要作用。
天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。
光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物――生物量。
废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废料等通过微生物转化微生物燃料――甲醇和乙醇。
利用微生物清理被人类活动污染的大气――生物整治。
利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。
通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。
利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。
在自然界中，它无限小，但作用无限大。
2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。
1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。
微生物学实验原理及思考题答案
微生物学实验原理及思考题答案第一篇：微生物学实验原理及思考题答案油镜便于观察的原理是什么?用油镜观察时在油镜与载玻片之间加入了和玻璃折射率相近的香柏油，使进入透镜的光线增多，视野亮度增强，使物象明亮清晰。
1.细调节器每旋转一周使镜筒上升或下降0.1mm.一。
培养基的配制原理：微生物的生长发育都有一定的营养需要，培养基即人工培养物，为其生长发育提供所需营养的基质。
培养基配制好以后必须经过灭菌方能用于分离培养微生物实验。
一次培养基的配制和灭菌是微生物实验室中最基本的操作，通过本次实验学习微生物实验室中常用培养基的配制方法和灭菌方法。
1.称药品的钥匙不要混用称完药品应及时盖紧瓶盖，因为某些成分如蛋白胨极易吸水潮解调PH时要小心操作，避免回调。
配制培养基应注意哪些问题？要选定合适的培养基;培养基成分要称量准确；PH要适宜；灭菌要严格。
培养基配制完成后为什么要立即灭菌？已灭菌的培养基如何进行无菌检查？防止细菌污染培养基一旦细菌污染了培养基，由于培养基有丰富的营养物质，细菌会段时间内大量产生这样子就会跟培养物争夺营养物质，另一方面，细菌生长过程中会产生有毒物质致使培养物死亡。
放在37℃的恒温箱中一两天后，培养基上没有生长任何微生物的就可以使用（若有微生物则是以菌落出现的肉眼可以看见）二。
细菌的单染色技术原理：单染色法师利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。
在中性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。
碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易于带负电荷的细菌结合而使细菌着色。
制备染色标本时的注意事项？选择合适菌龄的细菌；固定时避免火焰直接烘烤破坏细菌形态；染色时间要适宜；水洗时水不能直接冲在涂片处。
制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察？油和水之间会分层，油就不能与标本接触还有光会发生折射等等原因，这样不利于油镜观察三。
细菌的革兰氏染色法原理：细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，为G+，有的可被脱去，为G-.1.革兰氏染色成败的关键是乙醇脱色。
《食品微生物学》思考题和作业题-
《食品微生物学》课堂教学用思考题和作业题0 绪论本章作业题：⏹教材P8的第1、6、9题：什么是微生物？它包括那些类群？微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？什么是微生物学？学习微生物学的主要任务是什么？⏹微生物学的基本实验技术有哪些？试分别阐述之。
⏹区别于其它生物，微生物有何特点？你有何体会？⏹认真阅读教材的“绪论”和“结束语”，结合自己的亲身经历谈谈你打算怎样学好“微生物学”这门课程。
补充思考题：⏹用具体事例说明人类与微生物的关系。
⏹简述微生物学在生命科学发展中的地位，并描绘其前景。
⏹为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人?⏹微生物学研究的基本方法和技术有哪些？你现在了解哪些技术？你认为微生物学的理论和技术有怎样的联系？试从微生物的特点分析其分布比动植物更广泛的原因，为什么无菌操作技术是一切微生物学工作的基础？⏹一、微生物分类鉴定与命名本章作业题•教材P366-367的第4、5、6、7、8：什么是种？什么是新种？任何表示一个种和新种？什么是学名？什么是双名法？熟悉一批学名对每个生命科学工作者有何重要性？何谓菌株？它如何表达？正确理解菌株的涵义有何重要意义？什么是模式菌株？它和模式菌种有何关系？概念：菌株、品系、克隆、无性繁殖系、毒株、菌落、菌苔、斜面、分离物、纯培养以及菌种等名词有何区别？本章思考题•教材的第12、15、16题：试比较古生菌、细菌和真核微生物间的主要区别。
用于微生物鉴定的经典指标有哪些？随着新的理化技术在微生物鉴定中等应用，经典的分类指标会被淘汰吗？何故？现代微生物鉴定技术队发展趋势如何？试举例加以说明。
•教材第21题中微生物的学名(着重于勾画的)。
二、原核微生物1 观察细菌为何要用染色法，Gram染色法哪步最关键？为什么？如何保证结果的正确性？2 研究芽孢有何重要的理论和实践意义？3 放线菌的典型形态特征是怎样的？4 会描绘原核细胞的构造模式图，并能说明各构造的重要特点和功能（思考题）三、真核微生物补充的思考题：1 霉菌的繁殖方式有哪些？2 试比较发酵工业中常见常用霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉和红曲霉）的菌丝特点（指分枝分隔和核的数量）、子实体及特化菌丝名称和无性孢子、有性孢子名称等。
微生物实验思考题参考答案及知识要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。
因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
美蓝浓度高了，代谢不太活跃的活细胞也会被染色，从而使观察到的死细胞较多，活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝，不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。
二. 细菌的简单染色和革兰氏染色1. 革兰氏染色中那一步是关键?为什么？你是如何操作的？革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。
如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。
脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。
2. 固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。
固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。
3. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？能。
在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰氏阴性菌。
最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。
4. 涂片为什么要固定，固定适应注意什么问题？a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上；b 增加其对染料的亲和力。
固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。
三. 霉菌、放线菌的形态观察1. 镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到横隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。
食品微生物检验技术习题及参考答案
食品微生物检验技术习题及参考答案一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1、菌种衰退的本质原因有A、传代过多B、营养条件不适C、环境不适应能力下降D、基因突变正确答案：D2、三糖铁琼脂斜面属于（）培养基A、鉴别B、营养C、基础D、选择正确答案：A3、肉汁培养基一般用于培养A、放线菌B、酵母菌C、霉菌D、细菌正确答案：D4、血清培养基用流通蒸汽加热灭菌，通常温度不超过100℃，应每日（）灭菌A、1次B、3次C、2次D、4次正确答案：A5、对外界抵抗力最强的细菌结构是（）A、细胞壁B、鞭毛C、芽孢D、核糖体正确答案：C6、常用的巴氏消毒法采用（）条件进行牛奶或者酒类的消毒A、62℃ 15minB、72℃ 15-30sC、62℃ 15-30sD、72℃ 30 min正确答案：B7、糖发酵实验中加入杜氏发酵管的作用为（）A、指示酸碱度的变化B、指示糖的减少C、指示微生物数量D、指示气体的产生正确答案：D8、巴氏消毒法能杀死物体中A、大部分细菌B、全部细菌C、非芽孢病原菌D、芽孢菌正确答案：C9、干燥箱的温度上升到（），维持2小时即可达到灭菌目的A、160℃B、70℃C、80℃D、100℃正确答案：A10、无菌室的熏蒸消毒主要采用（）熏蒸消毒法A、甲醛B、甲醇C、高锰酸钾D、酒精正确答案：A11、琼脂在培养基中的作用是（）A、氮源B、凝固剂C、碳源D、生长调节剂正确答案：B12、显微镜的构造有机械和光学部分，机械部分不包括下面的( )A、镜座B、光圈C、反光镜D、升降调节器正确答案：C13、引起蛋白质分解而使食品腐败变质的微生物主要是A、曲霉B、细菌C、酵母菌D、青霉正确答案：C14、真菌的繁殖分无性繁殖和有性繁殖，主要以（）生殖A、出芽B、孢子C、菌丝D、分裂正确答案：B15、食品中加入苯甲酸或苯甲酸钠，可抑制酵母和霉菌生长，但pH必须在（）以下的食品中才有作用。
A、4.5B、6.5C、5D、6正确答案：A16、球菌在一个平面上连续分裂后，连成三个或三个以上的或长或短的链状，这种细菌称（）A、双球菌B、葡萄球菌C、四联球菌D、链球菌正确答案：D17、糖发酵实验中加入杜氏发酵管的作用为A、指示气体的产生B、指示糖的减少C、指示酸碱度的变化D、指示微生物数量正确答案：A18、使用油镜时，通常在油镜与载波片之间加入（）来增加显微镜的分辨力A、香柏油B、果胶C、机油D、石蜡正确答案：A19、在乳酸菌分离培养基中，常加入醋酸盐，这主要是为了（）A、这些都是B、促进乳酸菌的生长C、为形成透明圈D、抑制某些细菌的生长正确答案：D20、检验操作过程的无菌操作正确是的A、可以走来走去B、接种用具在使用前后都必须灼烧C、可以说话D、可以在火焰侧面进行操作正确答案：B21、致病性乙型溶血性链球菌，能产生（）A、尿素酶B、蛋白酶C、链激酶D、转氨酶正确答案：C22、下列微生物能通过细菌滤器的是（）A、病毒B、细菌C、酵母菌正确答案：A23、微生物最小的分类单位是（）A、属B、种C、型D、届正确答案：B24、豆奶出现变质菌落总数超标的主要原因为（）造成A、水质B、包装污染C、杀菌不彻底D、配料污染正确答案：C25、溶血性链球菌是（）球菌A、嗜碱性B、革兰氏阳性C、嗜中性D、革兰氏阴性正确答案：B26、以下繁殖方式中那种属于无性孢子繁殖（）A、孢囊孢子繁殖B、卵孢子繁殖C、接合孢子繁殖D、子囊孢子繁殖正确答案：A27、关于大肠菌群的特点的描述中，不正确的是A、革兰氏阳性无芽孢杆菌B、产酸产气C、需氧和兼性厌氧D、发酵乳糖正确答案：A28、在分离培养时，我们不可以采用以下哪种接种方法A、倾注法C、划线法D、涂布法正确答案：B29、微生物学的奠基人是（）A、巴斯德B、列文虎克C、柯赫D、布赫纳正确答案：A30、以下属于碱性染色剂的是（）A、苯胺黑B、结晶紫C、刚果红D、伊红正确答案：B31、使用显微镜观察细菌的实验程序，正确的是A、安置—调光源—调目镜—调聚光器—低倍镜—油镜—高倍镜—擦镜—复原B、安置—调光源—调目镜—调聚光器—高倍镜—低倍镜—油镜—擦镜—复原C、安置—调光源—调物镜—调聚光器—低倍镜—高倍镜—油镜—擦镜—复原D、安置—调光源—调目镜—调聚光器—低倍镜—高倍镜—油镜—擦镜—复原正确答案：D32、下列哪种微生物具有典型细胞核结构（）A、葡萄球菌B、大肠杆菌C、桔青霉菌D、沙门氏菌正确答案：C33、无微不至、无孔不入说明微生物具有（）的特点A、生长旺、繁殖快B、吸收多、转化快C、适应强、易变异D、体积小、分布广正确答案：D34、下列哪种方法可以检测发酵液被噬菌体污染A、噬菌斑法B、这些都是C、发酵液离心法D、发酵液染色涂片法正确答案：B35、在分离培养时，我们不可以采用以下哪种接种方法：（）A、倾注法B、涂布法C、划线法D、穿刺法正确答案：D36、在乳酸菌分离培养基中，常加入醋酸盐，这主要是为了A、促进乳酸菌的生长B、抑制某些细菌的生长C、这些都是D、为形成透明圈正确答案：B37、制成后的培养基应（）A、保持原有物质的营养价值B、证实无微生物生长C、在规定的PH范围内D、以上都是正确答案：D38、最常见引起细菌性食物中毒的细菌是A、金黄色葡萄球菌B、产毒霉菌C、沙门氏菌D、致病性大肠杆菌正确答案：C39、大肠菌群是由几个属的细菌组成的，那么这些细菌是A、产碱杆菌、克雷伯氏菌属的细菌、大肠埃希氏菌属的细菌、柠檬酸杆菌属的细菌B、大肠埃希氏菌属的细菌、柠檬酸杆菌属的细菌、阴沟杆菌属的细菌C、克雷伯氏菌属的细菌、大肠埃希氏菌属的细菌、柠檬酸杆菌属的细菌、阴沟杆菌属的细菌D、产碱杆菌、克雷伯氏菌属的细菌、大肠埃希氏菌属的细菌正确答案：C40、在细菌分类鉴定中，利用免疫血清学技术，测定细菌的A、形态B、结构抗原C、化学成分D、结构正确答案：B二、多选题（共20题，每题1分，共20分）1、配置培养基的基本原则（）A、培养基中原料的选择B、适当的PHC、根据微生物对营养的要求D、根据营养物质的浓度及配比正确答案：ABCD2、能杀灭细菌芽孢的的方法()A、流通蒸汽消毒法B、间歇蒸汽灭菌法C、高压蒸汽灭菌法D、煮沸法正确答案：BCD3、蜡样芽孢杆菌食物中毒，在临床上一般可分为( )A、腹泻型B、呕吐型C、重笃型D、脑膜炎型正确答案：AB4、属于细菌特殊结构的是A、核质B、菌毛C、鞭毛D、荚膜正确答案：BCD5、下列属于细菌基本结构的是（）A、细胞膜B、核质C、芽胞D、细胞壁正确答案：ABD6、微生物污染食品后，是否会在其中生长繁殖，受( )因素的影响A、环境因素B、微生物自身特性C、食品营养组成与理化性质D、大气压正确答案：ABC7、目前，已知的产毒霉菌主要有( )A、青霉属B、曲霉属C、镰刀菌属D、D毛霉属正确答案：ABC8、可用于空气除菌的方法有（）A、乙醇B、甲醛C、过氧乙酸D、滤过正确答案：BCD9、食品的生物性污染包括( )A、微生物污染B、防腐剂污染C、昆虫污染D、寄生虫污染正确答案：ACD10、根据营养物质的跨膜运输过程是否需能量可分为A、被动运输B、单纯扩散C、主动运输D、促进扩散正确答案：AC11、微生物生长繁殖过程中氮源的生理作用（）A、合成微生物细胞成分B、调节微生物代谢C、作为能量来源D、以上三个都不选正确答案：ABC12、志贺氏菌的致病力主要决定于( )因素A、毒素B、侵袭力C、表面抗原D、O-抗原正确答案：ABD13、细菌细胞质中不决定菌体嗜碱性的物质是（）A、蛋白质B、脂类C、质粒D、核糖核酸正确答案：ABC14、微生物基因突变类型（）A、抗药性突变型B、形态突变型C、营养缺陷型D、条件致死突变型正确答案：ABCD15、真菌毒素中不属于极毒级别的毒素是( )A、桔青霉素B、黄天精C、黄曲霉毒素D、T-2毒素正确答案：ABD16、关于细胞壁的功能，下列正确的是（）A、是细菌外层结构，比较坚韧，且具有高度弹性B、维持细菌固有状态C、决定细菌的分裂D、与细胞内外的物质交换有关正确答案：ABD17、肉毒毒素进入机体的方式有( )A、创伤感染B、吸入C、食物媒介D、肠道感染正确答案：ABCD18、金黄色葡萄球菌可引起（）A、猩红热B、食物中毒C、化脓性炎症D、假膜性肠炎正确答案：ABCD19、常用的分离纯化方法A、单细胞挑取法B、稀释混合平板法C、平板划线法D、稀释涂布平板法正确答案：ABCD20、常用的纯种分离方法（）A、稀释分离法B、划线分离法C、组织分离法D、孢子分离法正确答案：ABC三、判断题（共40题，每题1分，共40分）1、细菌通过革兰氏染色后，呈红色的被称为阳性菌A、正确B、错误正确答案：B2、酵母菌发酵糖时，通常会产生二氧化碳。
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食品微生物学实验技术思考题答案
1. 用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用？
答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比.
2. 列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。
为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作答：使用高倍镜和油镜时镜头距离标本较近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。
一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。
3. 什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？
答：在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦的状态，这种现象称为物镜的同焦。
利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。
4. 影响显微镜分辨率的因素有哪些？
答：物镜的NA 值（物镜的数值孔径）与照明光源的波长
5. 根据你的实验体会,谈谈应如何根据所观察微生物的大小,选择不同的物镜进行有效地观察
答：细菌用油镜，真菌用高倍镜。
都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度。
答：放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大40 倍的物镜就可以看了，细菌小，要用放大1000 倍的物镜看，感觉还很小。
病毒那就要用电子显微镜看了。
6. 哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？
答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节
7. 进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题?
答：着色不均，染色效果不好。
阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌
8. 革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?
答：不可以。
因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁，对
实验结果造成影响。
脱色后复染前，革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色。
9. 不经过复染这一步，能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？
答：不行。
在复染之前，革兰氏阴性菌是无色透明的，
在显微镜下很难观察到；或者脱色过度，也会造成阳性菌脱色，不经过复染，无法进一步区别。
10. 你认为制备细菌染色标本时,应该注意哪些环节? 答:1、
11. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?
答:1、若未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头。
镜头非常精密,被污染后不利于下次观察；2、若未完全干燥，水滴会影响油与玻璃之间折光率，造成视野不够清晰。
12. 如果涂片未以热固定,将会出现什么问题?加热温度过高、时间太长，又会怎么样呢？答:如果没有加热固定的话，水分蒸发太慢或者在染色时菌体会被冲洗掉；如果加热时间过久，菌体变形或形态破坏，无法染色。
13. 制备培养基的一般程序是什么？
答：称量——溶解—调PH 值—融化琼脂—过滤分装—包扎标记——灭菌——倒平板
14. 做过本次实验后，你认为在制备培养基时要注意些什么问题？
答：溶解配料的水要适量；PH 要调到7.3 左右；要小心手提式高压锅的使用；倒平板时要防止培养基被污染
15. 灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义？
答：防止培养基被污染；防止杂菌影响实验结果
16. 试述高压蒸汽灭菌的操作方法和原理。
答：高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。
在0.1MPa 的压力下，锅内温度达121℃。
在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
操作方法：加水——装料、加盖——排气——升压、保压、和降压——取料
17. 高压蒸汽灭菌时应注意哪些事项？
答：第一，无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。
第二，布类物品应放在金属类物品上，否则蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。
阻碍蒸汽进入包裹中央，严重影响灭菌效果。
第三，定期检查灭菌效果。
18. 如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养？请写出实验的主要步骤。
答：通过观察菌落特征；单个菌落再次划线分离。
19. 试述如何在接种中，贯彻无菌操作的原则?
答：保持操作台的无菌状态与在无菌室操作；操作前，要进行手的消毒；接种环要加热灭菌；接种物品要标记。
20. 以斜面上的菌种接种到新的斜面培养基为例说明操作方法和注意事项。
21. 为何要用乳酸-石炭酸溶液作霉菌水浸片?
答：用乳酸-石炭酸的优点是可使细胞不变形，具有杀菌、防腐作用；不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子四处飞散。
22. 比较霉菌菌丝与假丝酵母菌丝的区别
答：假丝酵母是指能形成假菌丝、
不产生子囊孢子的酵母。
假菌丝没有横隔。
各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状，在分隔处缢缩。
霉菌的菌丝大多有横隔，整个菌丝的直径粗细一致，且分枝与主干的直径一致。
菌丝顶端常呈钝圆形。
相连细胞间的横隔面积与细胞直径一致,呈竹节状的细胞串。
假菌丝与真菌丝明显不同处在于其两细胞间有一细腰，而不象真正菌丝横隔处两细胞宽度一致。
23. 细菌与酵母菌的菌落有何区别
答：细菌菌落光滑，易于基质脱离；酵母菌菌落较细菌菌落大而厚且酵母菌的菌落较湿润
24. 为什么随着显微镜放大倍数的改变，目镜测微计每格相对的长度也会改变？能找出这种变化的规律吗？
答：因为目镜测微尺所测量的是微生物细胞经地显微镜放大之后所成像的大小；规律是刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变。
25. 根据测量结果，为什么同种酵母菌的菌体大小不完全相同？
答：菌株之间的生长期不同；受环境的影响；遗传的基因表达不完全一致。
26. 能否用血球计数板在油镜下进行计数？为什么？
答：不能。
计数时滴在血球计数板上的是菌悬液，相当于在镜头和计数板直接加了一层水。
水层会降低视野的亮度和显微镜的分辨率，造成菌体和网格线不清晰。
27. 根据自己体会，说明血球计数板计数的误差主要来自那些方面？如何减少误差？答：误差主要来自试剂误差、方法误差、仪器误差；减少误差有保持样品的纯净、细胞溶液必须震荡均匀、样品浓度要适中、血球计数板要整洁清晰。
28. 菌种保藏中，石蜡油的作用是什么？
答：作用是密封。
防止空气进入，降低菌种的生理活性。
29. 经常使用的细菌菌株，使用哪种保藏方法比较好？
答：用甘油冷冻保藏方法保存，在液体培养基中加入百分子十五的甘油，然后低温冷冻（-7 度）左右。
30. 食品检验为什么要测定细菌菌落总数？
答：测定细菌菌落总数是检验食品纯度程度的指标。
也是判断其保存能力的指标。
31. 实验操作如何使数据可靠?
32. 食品中检出的菌落总数是否代表该食品上的所有细菌数？为什么？答：不能代表该食品上所有细菌数。
因为在实验过程中会造成细菌的损失或死亡、食品上的细菌包括了各种各样的微生物。
33. 为什么营养琼脂培养基在使用前要保持地（46±1）℃的温度？因为营养琼脂温度若温度高于（46±1）容易将验样中的菌烫死；℃，若温度低于（46±1）℃，则营养琼脂会凝固，影响培养效果。
34. 大肠菌群检验中为什么首先要用乳糖胆盐发酵管？答：因为乳糖胆盐发酵管中的
成分有溴甲酚紫，中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，如果颜色不变（呈蓝紫色），说明无产酸的大肠菌群；如果颜色变黄色，说明可能出现能分解乳糖产酸的大肠菌群；胆盐可以抑制其它细菌生长繁殖；看杜氏小管中是否有气体，判断是否为分解乳糖产酸产气的大肠菌群。
35. 做空白对照实验的目的? 答：目的是检验培养基是否受到污染，验证无菌操作。
36. 为什么大肠菌群的检验要经过复发酵才能证实
答：初发酵是样品的发酵结果，不是大肠菌群纯菌的发酵试验，有可能受其它杂菌影响判断结果。
进行证实试验避免假阳性结果。
37. 复发酵为什么使用乳糖发酵管但不需加胆盐?
答：胆盐能抑制革兰氏阳性菌等杂菌生长.在初发酵，培养基已经加入胆盐抑制革兰氏阳性菌生长，并在EMB 培养基上进行分离培养，因此复发酵培养时无需乳糖发酵管，以免大肠菌肠受到抑制。
38. 制作甜酒酿的关键操作是什么?
答：糯米饭不能太软、不能沾油、酒糟米饭比例要合适、不能用有细菌的生水(要用纯净水) 5 拌匀6 密封（要以天气温度决定开封时间）
39. 发酵期间为什么要进行搅拌? 答：使酵母菌与原料充分接触、使发酵的温度均匀。