茶皂素提取

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从油茶籽饼中提取茶皂素的工艺研究

从油茶籽饼中提取茶皂素的工艺研究

从油茶籽饼中提取茶皂素的工艺研究
从油茶籽饼中提取茶皂素的工艺主要包括以下步骤:
1.预处理:将油茶籽饼粉碎至适当大小,以便后续的提取操作。

2.浸泡:将粉碎后的油茶籽饼浸泡在适量的溶剂中,使其充分软化。

常用的溶剂包括甲醇、乙醇、异丙醇等。

3.提取:在适当的温度和时间下,通过搅拌或超声波等方法,使茶皂素从油茶籽饼中溶解到溶剂中。

4.分离:将提取液进行过滤或离心,以除去其中的残渣和杂质。

5.纯化:采用适当的方法如重结晶、色谱分离等技术,进一步纯化茶皂素。

6.干燥:将纯化的茶皂素进行干燥处理,以便后续的应用或储存。

整个提取工艺需要严格控制温度、时间、溶剂浓度等参数,以保证茶皂素提取的效率和纯度。

此外,还需要注意安全操作,避免溶剂的泄漏和残留等问题。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是一种萃取自茶叶中的次生代谢产物,具有抗氧化、抗菌、抗癌等多种生物活性。

为了进一步研究和应用茶皂素,需要进行其分离纯化,以获得高纯度的茶皂素。

本文通过初步研究,探讨了茶皂素的分离纯化方法。

提取茶皂素。

茶皂素存在于茶叶的内部细胞中,需进行细胞破碎以释放茶皂素。

常用的提取方法有水提法、有机溶剂提法等。

水提法是将茶叶粉末与水进行浸泡和搅拌,然后经过过滤、浓缩等步骤,获得茶皂素提取液。

有机溶剂提法则是用有机溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等与茶叶粉末进行浸泡,利用溶剂萃取茶皂素。

通过比较两种方法的提取效果和茶皂素含量,选择较为适宜的提取方法。

茶皂素的分离纯化。

采用分离纯化方法将茶皂素与杂质分离开来,得到相对纯净的茶皂素。

常用的分离纯化方法有凝胶过滤、固相萃取、柱层析、高效液相色谱等。

凝胶过滤是将茶皂素提取液经过凝胶进行过滤分离,根据茶皂素的摩尔质量和孔径进行分离。

固相萃取是利用固相材料吸附茶皂素和杂质的不同性质进行分离。

柱层析是将茶皂素提取液经过柱层析进行分离,根据茶皂素的亲水性和疏水性进行分离。

高效液相色谱则是利用流动相和固定相的不同性质对茶皂素进行分离。

通过比较各种分离纯化方法的分离效果和茶皂素纯度,选择最适合的方法。

茶皂素的结晶。

当茶皂素的纯度达到一定程度后,可以采用结晶方法将茶皂素从溶液中结晶出来,以进一步提高其纯度和净度。

结晶方法包括冷结晶、溶剂结晶、浓度结晶等。

冷结晶是将茶皂素溶液放置在低温环境中,利用溶质溶解度的差异进行结晶分离。

溶剂结晶是向茶皂素溶液中加入适当的溶剂,调整溶液的浓度和温度,使茶皂素结晶出来。

浓度结晶是将茶皂素溶液进行浓缩,当浓缩度超过茶皂素的溶解度时,茶皂素会结晶出来。

通过比较各种结晶方法的结晶效果和茶皂素纯度,选择最适合的方法。

茶皂素的分离纯化方法包括提取、分离纯化和结晶三个步骤。

通过合理选择提取方法、优化分离纯化方法和适量选取结晶方法,可以获得高纯度的茶皂素。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素,即茶多酚皂素,是一种天然存在于茶叶中的多聚类黄酮类化合物。

茶皂素具有多种生理活性,如抗氧化、抗癌、抗病毒、降血脂等,因而在医药、保健食品等领域有广泛的开发和应用前景。

为了实现对茶皂素的客观研究和应用,需要进行有效的分离纯化。

目前,已有多种茶皂素的分离纯化方法,如萃取、溶剂分配、高速离心、柱层析等。

本文就对茶皂素的分离纯化方法进行初步研究,以期为茶皂素的研究提供参考。

1. 萃取法萃取法是茶皂素分离纯化的常用方法,其主要原理是利用茶皂素的极性和溶解度与萃取溶剂的差异,将茶皂素从茶叶中分离出来。

常用的萃取溶剂有水、乙醇、甲醇等。

但萃取法的效果受多种因素影响,如萃取时间、温度、茶叶研磨程度等,需根据具体情况进行优化。

2. 溶剂分配法溶剂分配法是一种基于茶皂素的极性不同于其他杂质的原理进行分离的方法。

将茶皂素和其他杂质按比例混合后,添加适量的溶剂,使两者在溶剂中的溶解度不同,然后再进行分离。

常用的溶剂有乙酸乙酯、正丁醇等。

3. 高速离心法高速离心法是利用离心力将茶皂素与其他杂质分离的方法。

将茶皂素与茶叶浸泡后,用适当的离心力离心,使茶皂素沉淀于离心管底部,然后将上层液体倒掉,最后通过洗涤和干燥等步骤得到纯化的茶皂素。

4. 柱层析法柱层析法是一种基于茶皂素的极性和分子大小差异进行分离的方法。

将样品溶解于适当的溶剂中,然后通过硅胶柱、Sephadex柱等进行分离纯化。

其中,硅胶柱适用于茶皂素的初步分离,而Sephadex柱适用于高效纯化。

总之,茶皂素的分离纯化方法各有特点,需根据具体情况选择。

此外,分离纯化过程中需注意环境卫生和操作规范,以确保实验结果准确可靠。

茶皂素的提取历史与现状

茶皂素的提取历史与现状

茶皂素的提取的历史与现状茶皂素(Tea saponin)又称茶皂苷或茶皂甙,山茶科(Theacease)山茶属(Cameuia )各种植物中含量极其丰富,主要有油茶(Camellia oleifera )、茶(C. sinensis )、茶梅(C.sasanqua )、尖叶山茶(C. cuspidatd )等。

茶皂素是皂素中的一类,是从山茶科植物种子或者其种子经榨油后的产物中提取出来的一种糖甙化合物,广泛存在于各种茶类植物中,其基本结构包括配基、糖体及有机酸。

茶皂素属于五环三萜类,此类结构的化合物较多,它们具有β-香树素骨架,也可为齐墩果烷的衍生物,具有多氢蒎五环。

茶皂素具有良好的乳化、分散、发泡、湿润等功能,并且具有消炎、镇痛、抗渗透等药理作用。

广泛应用于生物农药、医药、洗涤剂、食品添加剂、起泡剂、发泡剂、脱脂剂、分散剂等。

近年来,各国对茶皂素提取与应用研究越来越重视,提出各种不同提取方法及工艺且对茶皂素生物功能进行深入研究。

本文就目前茶皂素提取方法及其应用研究进展作一综述。

一、茶皂素提取研究进展(一)水提法水浸法是较早开发的提取茶皂素的方法,主要是将茶麸破碎用H2O浸出,然后澄清,过滤,浓缩,脱色,再浓缩,脱色后烘干得到粉料。

其生产工艺与生产设备简单,但生产水处理量大,常规分离困难,产品纯度低,能耗大,渣处理困难[2]。

因此,在此基础上又改进得到多种水提法。

1、稀碱液提取法冯志明[3]研究出:茶壳用0.5%氢氧化钠溶液煮沸半小时,冷却后过滤得滤液和残渣。

残渣用相同方法再浸提2次,将3次滤液合并得到浸提液.。

此法的产率为7%~11% ,而用热水浸提产率为5%~9%。

2、水提-沉淀法先用热水提取,再过滤,滤液中加入沉淀剂沉淀。

此法有3种,一是用絮凝剂沉淀除杂:茶粕∶水= 1∶5,水温30~35℃,浸提2h,第二次浸提液用作下一次浸提第一次浸提液。

离心,上清液中加入絮凝剂配成的水溶液,加热搅拌至一定温度后,静置。

茶皂素的提取工艺研究

茶皂素的提取工艺研究

茶皂素的提取工艺研究茶皂素是从茶叶中提取的一种天然物质,具有很高的药用和保健功能。

茶皂素的提取工艺对于提高茶皂素的提取率和纯度至关重要。

本文将对茶皂素的提取工艺进行研究,并提出一种简便、高效的提取方法。

1.茶皂素的提取方法2.提取工艺参数的选择在茶皂素的提取过程中,工艺参数的选择对提取效果有着重要的影响。

工艺参数包括提取温度、提取时间、溶剂种类及浓度、茶叶粉末颗粒度等。

我们需要通过实验确定最佳的工艺参数。

3.茶皂素提取工艺的研究进展我们需要对茶皂素提取工艺的研究进展进行综述,包括各种提取方法的优缺点,提取工艺参数对茶皂素提取率和纯度的影响等。

这将有助于我们确定最佳的提取工艺。

4.实验设计与结果分析我们需要设计实验来验证提取工艺的可行性,并对实验结果进行分析。

实验可以通过正交设计或单因素实验进行,以确定最佳的提取工艺参数。

实验结果分析可以采用统计学方法,如方差分析等。

5.研究中的挑战与解决方案6.提取工艺的优化在实验结果的基础上,我们需要对提取工艺进行进一步优化。

优化可以包括工艺参数的进一步调整、反复实验确定最佳工艺参数,或者引入新的辅助技术来提高提取效果。

7.提取工艺的应用前景茶皂素具有很高的药用和保健功能,提取工艺的研究应用前景广阔。

我们需要对提取工艺的应用前景进行展望,并提出相应的应用建议,如茶皂素的制剂开发、茶皂素的应用领域拓展等。

茶皂素的提取工艺研究对于茶叶的综合利用和茶叶产品的开发具有重要意义。

通过优化提取工艺,我们可以提高茶皂素的提取率和纯度,为茶叶的加工利用提供有力支持。

同时,茶皂素的应用前景广阔,有望成为茶叶产业的新的增长点。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是一种天然的生物活性物质,具有抗氧化、抗菌和抗炎的作用。

它被广泛应用于医药、保健品和化妆品等领域,因此对茶皂素的提取纯化方法进行研究具有重要意义。

本文将对茶皂素的分离纯化方法进行初步研究,以期能够为茶皂素的产业化生产提供参考。

茶叶中的茶皂素主要存在于茶叶的表面和内部的表皮细胞中,因此要想提取茶皂素,首先需要将茶叶中的茶皂素与其他组分进行有效分离。

目前,常用的茶叶提取方法包括水提取、有机溶剂提取和超临界流体提取。

本文将采用有机溶剂提取的方法进行茶叶中茶皂素的提取。

有机溶剂提取是通过有机溶剂与茶叶中的茶皂素进行物理或化学作用,使茶皂素从茶叶中转移到有机溶剂中,从而实现茶皂素的提取。

在选择有机溶剂的时候,需要考虑其对环境的影响和提取效果。

一般来说,乙醇是一种常用的有机溶剂,它既具有较高的提取效果,又对环境影响较小,因此本文将选择乙醇作为有机溶剂进行茶叶的提取。

在实验中,首先将茶叶粉末与乙醇进行浸泡,使茶叶中的茶皂素充分溶解到乙醇中。

然后通过离心等手段,将茶叶渣和乙醇进行分离,得到含有茶皂素的乙醇提取液。

接下来,通过蒸发乙醇,得到茶皂素的粗提取物。

得到茶皂素的粗提取物后,接下来就需要对其进行纯化。

目前,茶皂素的纯化方法主要包括硅胶柱层析法、凝胶层析法和高效液相色谱法。

本文将采用硅胶柱层析法对茶皂素的粗提取物进行纯化。

硅胶柱层析法是一种通过硅胶对混合物进行分离的方法,其原理是通过混合物中各成分与硅胶的亲和性差异来实现分离。

在进行硅胶柱层析时,首先将硅胶填充到玻璃柱中,并采用合适的流动相来实现混合物中各成分的分离。

通过不同成分对硅胶的亲和性差异,从而实现对目标物质的纯化。

通过上述实验方法,我们将得到纯化后的茶皂素样品。

接下来,可以通过质谱、红外光谱等手段对其进行分析,确认其纯度和结构。

通过对茶皂素的分离纯化方法的初步研究,我们可以为茶皂素的产业化生产提供参考,为其在医药、保健品和化妆品等领域的应用打下基础。

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究

茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是茶叶中所含的一种重要成分,具有抗氧化、抗菌和抗炎等多种生物活性,因此受到了广泛的关注。

茶皂素的分离纯化对于深入研究其生物活性及应用具有重要意义。

本文通过初步的实验研究,总结了关于茶皂素分离纯化的方法,以期为茶皂素的应用提供参考。

一、茶皂素的提取茶叶中含有丰富的茶皂素,为了提取茶皂素,首先需要对茶叶进行初步的处理。

一般来说,茶叶经过粉碎、加热等步骤,将茶叶中的茶皂素释放出来。

然后采用有机溶剂如乙醚、丙酮等进行提取,将茶叶中的茶皂素与其他成分分离。

提取操作一般会重复多次,以确保茶皂素的完全提取。

提取得到的混合物中含有大量的杂质和其他成分,因此需要进行进一步的分离。

在此过程中,可以采用硅胶柱层析、凝胶色谱层析或高效液相色谱等技术,通过选择合适的分离柱和溶剂,将茶皂素与其他成分进行有效分离。

这一步需要根据实际情况进行优化,以获得高纯度的茶皂素。

分离得到的茶皂素通常还会包含一定量的杂质,因此需要进行进一步的纯化。

可以采用结晶、再结晶或凝胶电泳等方法,将茶皂素与杂质进行进一步的分离。

通过对纯化条件的优化,可以获得高纯度的茶皂素。

经过分离纯化的茶皂素可以进行进一步的鉴定和分析。

可以采用紫外-可见光谱、质谱、核磁共振等技术,对其结构和性质进行深入的研究。

通过鉴定可以确定茶皂素的纯度和结构,为后续的研究和应用提供参考。

总结:通过以上实验研究,我们初步探讨了茶皂素的分离纯化方法。

通过对茶叶的提取、茶皂素的分离、茶皂素的纯化和茶皂素的鉴定等步骤的研究,可以获得高纯度的茶皂素。

这对于深入研究茶皂素的生物活性及其应用具有重要的意义。

在实际操作中还需要根据具体情况进行进一步的优化,以获得更好的分离纯化效果。

希望我们的研究能够为茶皂素的应用提供一定的参考价值。

【2000字】。

设计实验 茶皂素的提取和测定

设计实验 茶皂素的提取和测定

设计性实验探究茶皂素的提取和测定实验小组成员:袁国明王蓉一、实验目的1、掌握水提---醇萃法提取茶皂素的原理、方法和一般步骤。

2、探究不同液料比对水提---醇萃法提取茶皂素的影响。

3、探究提取茶皂素的最佳溶剂热水、含水乙醇、正丁醇及冰醋酸。

4、掌握用紫外分光光度法测定茶饼中茶皂素的含量。

二、实验原理茶皂素难溶于冷水、无水甲醇、无水乙醇,不溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚等有机溶剂,稍溶于温水,易溶于热水、含水甲醇、含水乙醇、正丁醇及冰醋酸,根据以上特性,本次实验来探究提取茶皂素的最佳溶剂。

水提---醇萃法又是在以上基础上,根据茶皂素易溶于热水和95%的乙醇,不溶于冷水性质,用热水浸提茶饼,然后于浸提液中加入絮凝剂 Al 2(SO4 )3,沉降除杂冷却后,再用95%的乙醇转萃提纯一种方法。

茶皂素与香草醛在浓硫酸作用下表现呈色反应,茶皂素的含量和吸光度值成线性关系,本文利用此性质对茶皂素的分析方法进行研究。

三、实验材料1、实验试剂:95%乙醇;Al 2(SO4 )3;活性炭;NaOH;蒸馏水;香草醛;硫酸;含水乙醇、正丁醇及冰醋酸2、实验材料:油茶饼粕3、实验仪器:电子天平、高速万能粉碎机、电热恒温水浴锅、蒸发器、电热恒温鼓风干燥箱、紫外可见分光光度计、三角锥形瓶、纱布、抽滤瓶、滤纸、分液漏斗、烧杯、表面容器、容量瓶、具塞刻度试管四、实验步骤1、茶皂素的提取操作(1) 油茶饼粕的处理取一定量的油茶饼粕放入高速万能粉碎机中粉碎成油茶饼粕粉末,但不可过细(不利于下一步的过滤),一般粉碎粒度在 l~3 mm为宜。

(2) 探究提取茶皂素的最佳溶剂称取1g的油茶饼粕粉末4份分别加入到三角锥形瓶中,分别加入热水、含水乙醇、正丁醇及冰醋酸按1:7比例,标记,置入温度为90℃的恒温水浴锅中处理1.5h,得到茶皂素浸取液。

浸取液要趁热用纱布过滤。

(2) 探究一定固液比下恒温热水浴浸提称取1g的油茶饼粕粉末3份分别加入到三角锥形瓶中,分别加入蒸馏水和固体的比例为1:6、1:7、1:8,置入温度为90℃的恒温水浴锅中处理1.5h,得到茶皂素浸取液。

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茶皂素的提取1 绪论1.1 茶皂素简介茶皂素又称茶皂苷、茶皂甙,是山茶科植物(如茶、山茶、油茶)中含有的一类天然糖甙化合物,广泛存在于山茶科植物的根、茎、叶、花、果之中[1]。

由七种配基(C30H50O6) (Sapgening)、四种凸糖体(Aglyevn)和二种有机羧酸组成的一种齐墩果烷型五环三萜类皂苷化合物。

图1-1 茶皂素的分子结构我国油茶林面积和产量均居世界首位,全国现有油茶总面积约5500万亩,油茶是我国特有的一种木本油料资源,每年的茶籽产量在65万吨左右,约生产15万吨茶油以及50万吨的茶籽饼粕,油茶饼粕中含有多种经济价值较高物质,如含脂肪5%、蛋白质l5%、粗纤维6%、糖类40%、灰分6%、皂素l0%~l4%、单宁2%、咖啡碱0.95%,但长期以来没有得到合理利用,大部份饼粕当燃料烧掉,或廉价出口到日本、东南亚等国家,造成资源的极大浪费,更为严重的是积压的油茶饼粕发霉生虫污染环境,这种局面应该得到改观。

油茶主要产区在我国南方丘陵山区,近年来,对茶籽饼开发利用已日益引起各地高度重视,而茶籽饼利用,首先是回收茶籽饼中残余茶油,再从中提取茶皂素,残余物可用作蛋白饲料或作有机肥料。

因此如何从茶籽饼中提取茶皂素这一类用途广泛、性能优异天然表面活性剂,对解决茶籽饼综合利用尤为重要,同时也是解决三废问题的有效手段,具有十分积极的意义。

茶皂素市场前景看好,仅就洗发香波这一行业来说,我国洗发香波年总产值约l0万吨,其中一半需加调理剂,共需调理剂1000吨,如果市场占有率达10%,年可销调理剂l00吨,年产值450万元。

1.2 茶皂素的性质1.2.1 茶皂素的理化性质纯茶皂素是白色微细柱状结晶体,吸湿性强,对甲基红明显酸性,难溶于冷水、无水甲醇、无水乙醇,不溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚等有机溶剂,稍溶于温水,易溶于热水、含水甲醇、含水乙醇、正丁醇及冰醋酸,在稀碱水溶液中溶解度明显增加[2]。

茶皂素的配基部分在受热时易发生焦糖化,与萘酚反应可生成紫色物质,其甙键可被酸、碱或酶水解生成糖与皂甙单元。

茶皂素溶液对斐林试剂没有还原能力,只有在硫酸或盐酸中加水水解后才有还原能力;在水溶液中茶皂素能被醋酸铅、盐基醋酸铅和氧化钡所沉淀,但不会被氯化钡和氧化铁所沉淀。

表1-1 茶皂素主要理化常数分子量分子式元素分析值(%)熔点(℃)pH值1203 C57H90O26 C=59.93,H=7.09 223~224 6.21.2.2 茶皂素的表面性质茶皂素分子具有亲水性的糖体和疏水性性的配基,是一种天然非离子型表面活性剂,具有良好的乳化、分散、湿润、发泡、稳泡及去污等性能。

《本草纲目》也有记载:“条籽捣仁洗农除油腻”。

对蛋白质、纤维素无损伤,特别对丝、毛、羽绒的洗涤效果良好。

茶皂素亲水亲油平衡值(HLB值)为16,是制备水包油型(O/W)乳液的良好乳化剂,对固体微粒分散作用明显。

起泡力几乎不受水质硬度的影响,在pH4~10范围内发泡正常且泡沫稳定持久,具有较好的湿润性。

茶皂素与水振荡后产生蜂窝状泡沫,据报道,0、05%茶皂素水溶液,振荡后产生的泡沫可以保持 30min而不消散,而优等肥皂 0.06%的水溶液振荡后产生的泡沫在 14min内就消散了。

实验表明,茶皂素能够显著地降低液体的表面张力,在浓度为 0.01%~1、00%的范围内,加茶皂素水溶液的表面张力即从 76mN/m下降到46mN/m。

在水质硬度为 0-146.94retool的范围内,加茶皂素水溶液的表面活性几乎不受水质硬度影响。

以茶籽皂素软化石蜡,其乳化力强,分散性良好,乳液颗粒度在 1.54 m左右,稳定性好,能在室温下长时间存放而不分层。

1.3 茶皂素的应用近些年来,茶皂素应用开发及工业产品系列化等方面都有较大的发展,应用领域已拓展到轻工、化工、建材、纺织、农业及水产养殖,以及医药保健等行业[3]。

现主要介绍一下茶皂素在日化行业的应用情况:茶皂素是天然产物,在日化行业是难得的表面活性剂。

与人工合成的表面活性剂相比,尽管茶皂素的起泡力不强,但其泡沫稳定性极强,而且起泡力不受水的硬度变化影响,发泡性能较好,故可用于制造洗涤剂、起泡剂和乳化剂[4]。

生产出来的茶皂素复配洗发香波,伸长弹性和摩擦系数等技术指标要优于其他产品,实际应用时,具有发松、光滑、去头屑、止痒等优点,有洁发、护发之功效,且对皮肤无毒害和致敏作用。

另外,茶皂素还具有头发生长促进剂的作用。

茶皂素也可用于洗涤衣物,可降低水的表面张力,产生持久的泡沫,有分散、去污性能,并且不受水硬度的影响,洗涤衣物时不会产生脱色、损伤,是毛纺品、丝织品、棉纺品、羽绒等的优良洗涤剂。

本实验利用油茶饼粕为原料, 用热水浸提、乙醇转萃来研究茶皂素提取的最佳条件,并将茶皂素应用于洗发香波中,制备茶皂素洗发香波,然后试验它的应用效果。

2 材料与方法2.1 材料与试剂油茶饼粕(市场购买);95%乙醇、Al 2(SO4 )3、活性炭、NaOH,以上均为分析纯;蒸馏水,香草醛、硫酸、K12-A、AES-A、6501、M-550、珠光浆、香料(以上所用原料均为工业级)。

2.2 主要实验仪器仪器型号生产商FW100高速万能粉碎机天津市泰斯特仪器有限公司DK-S24型电热恒温水浴锅上海森信实验仪器有限公司JA2003N电子天平上海精密科学器皿有限公司KQ-C气流烘干器巩义市予华仪器有限公司TDL-5-A低速台式大容量离心机(飞鸽牌)上海安亭科学仪器厂SHZ-III型循环水真空泵上海亚荣生化有限公司RE52-99旋转蒸发器上海亚荣生化仪器厂DHG-9101-2 电热恒温鼓风干燥箱上海三发科技有限公司BCD-185F/HC容声冰箱广东科龙电器有限公司UV-2600双光束/紫外可见分光光度计北京瑞利分析仪器公司2.3茶皂素的提取实验方法2.3.1 茶皂素提取及含量测定方法的选择茶皂素提取方法很多,但总体上以水浸提法、有机溶剂法和吸附法三种方法为基础[5],不少研究者综合其优点,克服缺点,发展了一些新的提取纯化工艺,比如水提沉淀法、水提---醇萃法、水提醇沉法、超滤膜法、沉淀释放法、水提发酵法等等。

我们根据实验室的具体条件结合茶皂素的理化性质,最终选定水提---醇萃法来进行茶皂素的提取。

水提---醇萃法是目前较为理想的提取茶皂素的方法,具有工艺简单、产率和纯度较高的特点。

水提---醇萃法是根据茶皂素易溶于热水和95%的乙醇,不溶于冷水性质,用热水浸提茶饼,然后于浸提液中加入絮凝剂Al 2(SO4 )3,沉降除杂冷却后,再用95%的乙醇转萃提纯一种方法。

茶皂甙为多糖萜类化合物,与香草醛在浓硫酸作用下表现呈色反应,茶皂素的含量和吸光度值成线性关系,且在一定浓度范围内符合比耳定律,本文利用此性质对茶皂素的分析方法进行研究。

2.3.2 水提--醇萃法提取茶皂素方法2.3.2.1茶皂素提取工艺流程图2-1茶皂素提取工艺流程图2.3.2.2 茶皂素提取步骤(1)油茶饼粕的预处理由浸取的原理可知,破坏植物的细胞壁有利于提高浸取速率,但如果全部的细胞壁遭到深度破坏,则一些分子量较大的物质也被浸取出来,使杂质增多,造成后续操作困难。

为了使油茶饼粕中的茶皂素很快接触到浸取剂,将茶叶放入高速万能粉碎机中粉碎,打成茶叶粉末,但不可过细,不利于下一步的过滤。

一般茶籽饼的粉碎粒度在l~3 mm为宜。

(2)浸提剂的选择根据茶皂素难溶于冷水而易溶于热水和的性质(特点),我们选用蒸馏水作为提取茶皂素的浸提试剂。

(3)恒温热水浴浸提按一定的料液比,即称取一定的茶粕粉末,加入一定比例蒸馏水,置入不同温度下的恒温水浴锅中,每次浸泡一定的时间,一定浸泡次数,过滤,得茶皂素浸取液。

浸提得到的滤液要趁热用纱布过滤(茶皂素难溶于冷水,放置冷却后将导致产率下降),将滤渣继续加蒸馏水再次进行恒温水浴浸提,然后趁热用纱布过滤,反复操作三次,将得到的滤液合并。

(4)加絮凝剂(Al 2(SO4 )3)除杂絮凝剂可以将浸提液中鞣质、蛋白质、蜡质等不稳定杂质除去,而对于茶皂素的溶解则不会产生影响。

(5)抽滤抽滤可以将上述的杂质与茶皂素滤液迅速分离。

(6)减压恒温蒸发浓缩将抽滤除杂后的滤液置于RE 52-99 旋转蒸发其中进行减压恒温蒸发浓缩至稠状,温度80~90 ℃。

减压恒温(80~90 ℃)蒸发,既可以使滤液快速浓缩,又使得茶皂素不会遭到高温破坏。

(7)乙醇转萃将上述稠状液体置于分液漏斗中,加适量的95%乙醇萃取三次,取上层萃取液,合并三次的萃取液。

茶皂素在95%乙醇中的溶解度很高,而在冷水中的溶解度较低,所以茶皂素转入乙醇中。

而其它杂质在乙醇中溶解度较低,就留在下层液中。

(8)脱色将转萃后的液体置于烧杯中,加入少量活性炭进行脱色处理。

为了增强脱色效果,可将烧杯中液体加热煮沸,并不断搅拌两三分钟,然后用过滤的方法除去活性炭。

(9)蒸发乙醇将脱色后的滤液置于RE 52-99 旋转蒸发其中进行减压恒温蒸发乙醇,温度55℃,蒸发至稠状时停止。

(10)恒温干燥将上述稠状物置于表面容器中,放入电热恒温鼓风干燥箱进行干燥,温度50~60 ℃。

(11)称重,得到粗茶皂素(产品见图2-2)图2-2 粗茶皂素产品2.3.4 茶皂素含量的测定方法2.3.4.1 最大吸收波长的确定茶皂素标准品溶液与香草醛一硫酸显色[6],以定容空白液为参比液,在uV—2800紫外可见分光光度计上扫描,其吸收曲线下图所示。

由图可以看出,在波长为545 nm时吸光度最大,因此茶皂素的测定波长为545 nm.图2-2 吸收波长曲线2.3.4.2 标准溶液的配置称取0.1 g ( 精确到0.0001 g )茶皂素标准品,用95%乙醇溶解后置入100 mL容量瓶,并用95%乙醇定容。

分别吸取0.9,1.8,2.7,3.6,4.5mL于10 mL容量瓶中,用蒸馏水定容,则得含茶皂素0.09、0.18、0.27、0.36、0.45 mg/mL五种不同浓度的标准溶液。

2.3.4.3 标准曲线的制作在最大吸收波长545 nm 处测定不同浓度的茶皂素标准液的吸光度,以茶皂素含量为横坐标,吸光度为纵坐标,作标准曲线(如图2-3),并计算回归方程为:A=0.0008 x+0.0257,相关系数r = 0.9993,由R20.9987开方而得。

图2-3 茶皂素标准工作曲线(香草醛一硫酸显色)2.3.4.4 茶皂素含量的测定准确称取1g茶皂素粗产品,用95%乙醇完全溶解,定容至100 ml,得1 mg/ml 的茶皂素粗产品溶液。

吸取供试液5mL,置50 mL容量瓶中,加香草醛一硫酸显色,充分混匀,用95%乙醇定容,以定容空白液作参比,于545nm处测定吸光度(A)。

根据茶皂素标准工作曲线,计算出茶皂素含量。

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