实验诊断学4-常用生化检查分析
常见的生化检测方法
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------常见的生化检测方法Western-blot 法 Western Blot 印迹法是把通过电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至一种固相支持物，通过抗体与附着于固相支持物的靶蛋白的抗原表位发生特异性反应进行检测。
Western Blot 既可以定性，又可以半定量，是初步鉴定靶蛋白表达的最方便也是最通用的方法。
1、试剂耗材的准备：⑴、转膜缓冲液（48 mM Tris-HCl， 39 mM 甘氨酸， 0. 037% SDS， 20%甲醇）：⑵、 10丽春红染液：⑶、 TBS 缓冲液：⑷、 TBST 缓冲液（含 20%Tween20 的 TBS 缓冲液）：⑸、封闭液（含 5%脱脂奶粉的 TBST 缓冲液）：⑹、一抗、二抗及抗体稀释液：参照说明书，以封闭液或 TBST 进行稀释。
⑺、底物显色液 ECL，4℃ 避光保存，现用现配。
⑻、显影液和定影液。
用水稀释 10-20 倍于铝盒中，可多次使用。
室温避光存放。
2、实验步骤：⑴、蛋白样品制备：1 / 15用细胞裂解液抽提蛋白，并测蛋白浓度。
⑵、取 1mg 蛋白进行 SDS-PAGE。
⑶、转膜：（转膜缓冲液4℃预冷备用，冷却装置于-80℃冰箱冷冻备用）。
⑷、将 2 张海绵垫、 2 张滤纸、转膜夹子及玻棒浸泡在盛转膜缓冲液的铝盒中。
⑸、戴上手套，剪一张与凝胶尺寸相近的 PVDF 膜（83 mm75 mm），左上角剪一缺口作为标记，浸泡在盛有 20mL 甲醇的平皿中约 15 sec，直到膜变半透明。
用纯水冲洗膜2 次。
浸泡在盛转膜缓冲液的铝盒中。
⑹、 SDS-PAGE 结束后，小心地剥下两块凝胶，一块用于考马斯亮兰染色观察电泳情况，另一块浸泡在转膜缓冲液中预平衡。
实验诊断学之临床血液学检验
临床血液学检验Ⅰ、血液一般检验----红细胞系统一、红细胞生成起源二、红细胞及血红蛋白增多1、男：RBC>6.0×1012/L,Hb>170g/L女：RBC>5.5×1012/L,Hb>160g/L2、红细胞及血红蛋白增多的【临床意义】⑴、相对增多：血浆容量减少血液浓缩⑵、尽对增多①继发性：非造血系统疾病，要紧环节是EPO增多代偿性增加：血氧饱和度低，组织缺氧所致生理性：新生儿、高原居民病理性：慢性心肺疾病、异常血红蛋白病非代偿性增加：无血氧饱和度低和组织缺氧肿瘤和肾病所致：肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、子宫肌瘤、肾盂积水、多囊肾等②原发性：真性红细胞增多症三、红细胞及血红蛋白减少1、贫血：男<120g/L,女<110g/L贫血程度：轻度：>90g/L中度：90-60g/L重度：60-30g/L极重度：<30g/L2、红细胞及血红蛋白减少的【临床意义】⑴、生理性减少：婴幼儿〔生长发育迅速〕，妊娠中、后期〔血容量增加，血液稀释〕，老人〔骨髓造血减少〕⑵、病理性减少①生成减少骨髓造血障碍造血干细胞异常：再障骨髓浸润：急性白血病等缘故不明或多种机制：慢性感染、肿瘤、肝病、内分泌病等伴发的贫血细胞分化和成熟障碍DNA合成障碍：巨幼细胞贫血血红蛋白合成障碍血红素合成障碍：IDA珠蛋白合成障碍：海洋性贫血②破坏过多红细胞内在缺陷〔遗传性〕：遗球、红细胞酶缺陷的溶贫、珠蛋白生成障碍性贫血、异常血红蛋白病、PNH 红细胞外在缺陷〔获得性〕：免疫性、机械性③失血急性失血慢性失血四、网织红细胞〔reticulocyte〕【定义】网织红细胞是晚幼红细胞到成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞，胞质中尚残存多少不等的核糖核酸等嗜碱性物质。
用煌焦油蓝或新亚甲蓝进行活体染色，这些嗜碱性物质被凝聚沉淀并着色，在胞浆中呈现蓝色细颗粒状，颗粒间又有细丝状联缀而构成网状结构，故称网织红细胞。
生化检验各项目参考范围及临床意义
生化检验各项目参考范围及临床意义目录一、生物化学检验 (2)1.1 血糖测定 (4)1.2 血脂测定 (5)1.3 电解质测定 (6)1.4 血清铁蛋白测定 (7)1.5 肌酐测定 (8)1.6 尿素氮测定 (9)1.7 胆红素测定 (10)二、免疫学检验 (11)2.1 肝功能检查 (12)2.2 乙肝病毒表面抗原测定 (13)2.3 丙肝病毒抗体测定 (14)2.4 甲状腺功能测定 (15)2.5 肿瘤标志物测定 (16)三、分子生物学检验 (17)3.1 基因检测 (18)3.2 药物代谢酶测定 (19)3.3 病毒抗体测定 (20)四、血液学检验 (22)4.1 血细胞计数 (23)4.2 出血时间测定 (24)4.3 血块收缩时间测定 (25)4.4 血小板计数 (25)五、尿液检验 (26)5.1 尿液常规分析 (27)5.2 尿沉渣分析 (29)5.3 尿液生化分析 (30)六、体液检验 (31)6.1 脑脊液检验 (32)6.2 精液检验 (34)6.3 阴道分泌物检验 (35)七、其他生化检验项目 (36)7.1 血清蛋白电泳 (38)7.2 免疫球蛋白测定 (39)7.3 血清酶学测定 (41)一、生物化学检验生物化学检验是指通过检测人体内的生化指标，如酶、蛋白质、糖类、脂质、电解质等，来了解人体生理功能和病理变化的一种检验方法。
生物化学检验在临床诊断中具有重要的参考价值，可以帮助医生判断患者的病情、制定治疗方案以及评估治疗效果。
酶是生物体内催化生化反应的重要物质，其活性水平的异常可能反映出机体的病理变化。
常见的酶类指标包括：谷丙转氨酶(ALT):主要存在于肝细胞，当肝细胞受损时，ALT会释放到血液中，其水平升高提示肝损伤。
谷草转氨酶(AST):同样主要存在于肝细胞，当肝细胞受损时，AST 也会释放到血液中，其水平升高也提示肝损伤。
乳酸脱氢酶(LDH):存在于各种组织细胞中，其水平升高可能与组织坏死、缺氧、炎症等有关。
常用生化检查
第四篇
实验诊断学
第七章
临床常用生物化学检查
（一）肌酸激酶及同工酶测定 肌酸激酶（creatine kinase，CK）主要存在于骨骼肌和心肌，在细胞质中 有三种同工酶，MM（肌型）、BB（脑型）、MB（心肌型）。 【参考区间】 速率法（37℃）男 37～174U/L 女 26～140U/L 【临床意义】 1. CK升高可见于急性心肌梗死（AMI）、进行性肌萎缩、皮肌炎及其他肌 肉损伤的病人。 2. CK和CK-MB是心肌梗死早期诊断指标之一，CK-MB对AMI早期诊断的灵 敏度、特异性明显高于总CK。
第四篇
实验诊断学
第七章
临床常用生物化学检查
（四）心肌肌钙蛋白测定 心肌肌钙蛋白（cardiac troponin，cTn）是心肌内的调节蛋白复 合物，有三种亚单位，分别为TnT、TnI和TnC，心肌肌钙蛋白I（ cTnI）和心肌肌钙蛋白T（cTnT）被用来诊断AMI。
【参考区间】 ELISA法 cTnT为0.02～0.13μg/L，＞0.2μg/L为 诊断临界值，＞0.5μg/L可以诊断急性心肌梗死；cTnI ＜0.2μg/L ，＞1.5μg/L为诊断临界值。 【临床意义】
第四篇
实验诊断学
第七章
临床常用生物化学检查
（三）胰岛素测定 胰岛素（insulin）是由胰岛β细胞分泌的多肽类激素。胰 岛素测定是检查胰腺内分泌功能的试验，可作为糖尿病分 型及低血糖原因分析的诊断指标。
【参考区间】 空腹胰岛素 10～20mU/L
【临床意义】 正常时血糖上升伴随胰岛素增加，二者分泌曲线平行。 1型糖尿病人给糖后胰岛无反应或反应低下。 2型糖尿病人给糖后胰岛素释放迟缓。
清总铁结合力降低主要见于上述各种引起血清铁降低的慢性疾病等。
生化反应鉴定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解生化反应在微生物鉴定中的重要性。
2. 掌握常见生化反应的原理和方法。
3. 通过实验，对给定的微生物进行鉴定。
二、实验原理生化反应是指微生物在生长过程中，通过酶的催化作用，将营养物质转化为自身所需的物质，同时产生一些代谢产物。
这些代谢产物可以用来鉴定微生物的种类。
常见的生化反应包括糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。
- 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂等。
- 试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水等。
- 仪器：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管等。
2. 仪器：- 酒精灯- 接种环- 超净工作台- 恒温培养箱- 高压灭菌锅- 试管- 移液枪- 滴管四、实验方法1. 菌种培养：将菌种接种于葡萄糖蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
2. 糖发酵试验：- 将培养好的菌种接种于糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖），置于恒温培养箱中培养24小时。
- 观察培养基颜色变化，记录发酵结果。
3. 吲哚试验：- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入吲哚试剂，观察颜色变化，记录结果。
4. 甲基红试验：- 将培养好的菌种接种于蛋白胨水培养基，置于恒温培养箱中培养24小时。
- 加入甲基红试剂，观察颜色变化，记录结果。
五、实验结果与分析1. 糖发酵试验：- 大肠杆菌：发酵葡萄糖、乳糖，不发酵蔗糖。
- 金黄色葡萄球菌：不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 枯草芽孢杆菌：不发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
- 变形杆菌：发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖。
2. 吲哚试验：- 大肠杆菌：吲哚试验阳性。
- 金黄色葡萄球菌：吲哚试验阴性。
- 枯草芽孢杆菌：吲哚试验阴性。
- 变形杆菌：吲哚试验阳性。
实验诊断学4常用生化检查分析PPT课件
2020/11/14
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（二)甘油三酯（TG）测定 TG测定标本必须在空腹12~16小时后静
脉采取。TG测定方法主要有化学法和酶法两 大类，目前酶法测定为推荐方法。 【参考值】 大约为0.56~1.7mmol／L。 【临床意义】 1．TG增高 2．TG减低
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口服葡萄糖耐量试验(OGTT) 适应证 ①无糖尿病症状，随机血糖或空腹血糖异常，
以及有一过性或持续性糖尿者。 ②无糖尿病症状，但有明显的糖尿病家族史。 ③有糖尿病症状，但空腹血糖未达到诊断标准
者。 ④妊娠期、甲状腺功能亢进症、肝脏疾病时出
现糖尿者。 ⑤分娩巨大胎儿或有巨大胎儿史者。 ⑥原因不明的肾脏损害或视网膜病变者。
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二、脂质和脂蛋白的检测
(一)血清总胆固醇（TC）测定 【参考值】 我国成人TC 合适水平：＜5.20mmol／L； 边缘水平：5.23~5.69mmol／L； 升高：＞5.72mmol／L。 【临床意义】 作为诊断指标，TC不够敏感和
特异。 1．TC升高 2．TC减低
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【临床意义】 1．GHb是糖尿病诊断和监控的重要指标。 2．GHb对鉴别糖尿病性高血糖及应激性
高血糖有价值。 3、预测血管并发症。
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第二节 脂代谢相关检查
脂质检验分析主要应用在： ①动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）和高脂
血症 ②作为健康普查指标 ③对少见的遗传性脂蛋白异常性疾病进行诊断。
第七章 临床常用生物化学检查
一、血糖及其代谢产物检测 二、血脂及脂蛋白 三、心肌酶谱及心肌蛋白 四、其它血清酶
常用生化检测项目分析方法与参数设置
常用生化检测项目分析方法及参数设置一、常用生化检测项目分析方法举例1．终点法检测常用的有总胆红素（氧化法或重氮法）、结合胆红素（氧化法或重氮法）、血清总蛋白（双缩脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、总胆汁酸（酶法）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、总胆固醇（胆固醇氧化酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白胆固醇（直接测定法）、钙（偶氮砷Ⅲ法）、磷（紫外法）、镁（二甲苯胺蓝法）等。
以上项目中，除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外，其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法，包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用。
2．固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。
3．连续监测法对于酶活性测定一般应选用连续监测法，如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。
一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等，也可用连续监测法。
4．透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目，多数属免疫比浊法，载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗"O"、类风湿因子，以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。
二、分析参数设置分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等，其程序均已经固化在存储器里，用户不能修改。
各种测定项目的分析参数（analysisparamete）大部分也已设计好，存于磁盘中，供用户使用；目前大多数生化分析仪为开放式，用户可以更改这些参数。
生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道，由用户自己设定分析参数。
因此必须理解各参数的确切意义。
一、分析参数介绍（一）必选分析参数这类参数是分析仪检测的前提条件，没有这些参数无法进行检测。
1．试验名称试验名称（testcode）是指测定项目的标示符，常以项目的英文缩写来表示。
2．方法类型（也称反应模式）方法类型（assay）有终点法、两点法、连续监测法等，根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。
生化检验知识点总结
生化检验知识点总结一、生化检验概述生化检验是临床医学中一项重要的检验手段，通过对患者血液、尿液、体液等样本进行化学成分和功能状态的检测，可以帮助医生判断疾病的诊断、疾病的发展和治疗效果，为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。
二、生化检验的临床意义1. 疾病的诊断：生化检验可以帮助医生确定患者是否患有某些疾病，如心脏病、糖尿病、肝病、肾病等。
2. 疾病的分析：通过生化检验可以分析患者的病情，了解疾病的类型、程度以及影响范围，有助于医生制定治疗方案。
3. 治疗效果的评估：生化检验可以评估治疗效果，了解患者是否已经康复，是否需要调整治疗方案。
4. 预防和健康体检：生化检验可以帮助人们及早发现潜在的健康问题，预防疾病的发生。
三、生化检验的常见项目生化检验的常见项目包括血液生化指标、尿液生化指标、体液生化指标等。
1. 血液生化指标（1）血糖：血糖是人体能量的重要来源，血糖的检测可以帮助医生诊断糖尿病、低血糖等疾病。
（2）肝功能：肝功能指标包括谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、直接胆红素等，可以反映肝脏的功能状态。
（3）肾功能：肾功能指标包括肌酐、尿素氮、尿酸等，可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能。
（4）血脂：血脂指标包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等，可以反映血液中脂质的代谢状况。
2. 尿液生化指标（1）尿酸：尿酸是人体代谢产生的一种废物，尿酸过高可以导致痛风等疾病。
（2）尿蛋白：尿蛋白可以反映肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能的异常。
3. 体液生化指标（1）血清蛋白：血清蛋白是人体液体中的一种重要成分，可以反映患者的蛋白质代谢状态。
（2）电解质：电解质包括钠、钾、氯等，可以反映患者的酸碱平衡和水盐代谢状态。
四、生化检验的常见异常及意义1. 血糖异常：血糖异常可以导致糖尿病、低血糖等疾病，严重影响患者的生活质量和健康状况。
2. 肝功能异常：肝功能异常可以导致肝炎、肝硬化、肝癌等疾病，严重影响患者的生活质量和寿命。
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特异。 1．TC升高 2．TC减低
（二)甘油三酯（TG）测定 TG测定标本必须在空腹12~16小时后静
脉采取。TG测定方法主要有化学法和酶法两 大类，目前酶法测定为推荐方法。 【参考值】 大约为0.56~1.7mmol／L。 【临床意义】 1．TG增高 2．TG减低
（三）高密度脂蛋白胆固醇测定
HDL分为新生HDL、HDL2和HDL3。临床一般 以测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量来反映 HDL水平。
（二）血浆脂蛋白分类及其特点
脂质
载脂蛋白
表7-2 血清脂质组成
脂质名称
英文名称
英文缩写
总胆固醇
total cholesterol
TC
游离胆固醇（占30%） free cholesterol
FC
胆固醇酯（占70%） cholesterol ester
CE
甘油三酯
triglyceride
TG
磷脂 游离脂肪酸
血症 ②作为健康普查指标 ③对少见的遗传性脂蛋白异常性疾病进行诊断。
一、脂代谢概述
（一）脂质组成及生理功能
血脂是血浆中所有脂质的总称，受饮 食、环境和机体生理状态等因素的影 响，但由于神经体液的调节，人体血 脂组成和含量正常情况下是在一定范 围内变动的。血浆脂质的组成十分复 杂，其主要成分见表7-1。
耐糖现象 血糖浓度暂时升高 刺激胰岛细胞分泌胰岛素增多 血糖在短时间内即降至空腹水平。 耐糖异常或糖耐量减低 血糖明显升高或升高不明显 在短时间内不能降至原有水平。
口服葡萄糖耐量试验(OGTT) 适应证 ①无糖尿病症状，随机血糖或空腹血糖异常，
以及有一过性或持续性糖尿者。 ②无糖尿病症状，但有明显的糖尿病家族史。 ③有糖尿病症状，但空腹血糖未达到诊断标准
4．鉴别低血糖 (1)肝源性低血糖：
空腹血糖常低于正常 服糖后血糖水平超过正
常 2h后仍不能降至正常 尿糖出现阳性
(2)功能性低血糖
空腹血糖正常 服糖后血糖高峰时间及
峰值在正常范围内 2~3h可发生低血糖
三、血清糖化蛋白检测
糖化蛋白（GHb）是指通过非酶促作用 将糖基加到氨基酸基团上而形成的蛋白质 不受短时间内血糖水平波动的影响。因此， 测定血清糖化蛋白可为较长时间段的血糖 浓度提供回顾性评估，主要用于了解血糖 控制效果。
醇(LDL-C)的含量来反应LDL的量。LDL的主要功能是将 内源性胆固醇从肝脏运向周围组织。 【参考值】 升高为>3.64mmol／L。 【临床意义】 LDL-C增高见于TC增高的各种情况。
／L，不超过11.1mmol／L； 2h血糖≤7.8mmol／L； 3h血糖应恢复至空腹血糖水平。各时间尿糖均为阴性。
【临床意义】 糖耐量试验结果常见类型可参见图7-1 1．糖尿病
2．糖耐量减低
3．葡萄糖耐量
曲线低平
常见于胰岛B 细胞瘤、腺垂 体功能减退症、 肾上腺皮质功 能减退症等。
【参考值】 GHA1c（电泳法，按照占总 Hb的百分比计算）占4～6%
【临床意义】 1．GHb是糖尿病诊断和监控的重要指标。 2．GHb对鉴别糖尿病性高血糖及应激性
高血糖有价值。 3、预测血管并发症。
第二节 脂代谢相关检查
脂质检验分析主要应用在： ①动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）和高脂
第七章 临床常用生物化学检查
一、血糖及其代谢产物检测 二、血脂及脂蛋白 三、心肌酶谱及心肌蛋白 四、其它血清酶
第一节 葡萄糖代谢相关检测
一、调节血糖的激素 胰高血糖素、生长素、甲状腺素、肾上
腺素与肾上腺糖皮质激素、胰岛素。 二、血糖－肝糖原、脂肪的相互转化。
一、空腹血糖测定
空腹血糖（FBG）所采用的标本有： 静脉血清（浆） 静脉全血 毛细血管全血（主要为快速血糖仪采用） 血糖检测标本采集后应立即送检，否则因细胞等的
消耗会使结果偏低。 【参考值】 （空腹血浆）葡萄糖氧化酶法：3.9～6.1mmol／L
【临床意义】
1．增高 ①生理性增高 ②胰腺疾病 ③其他内分泌疾病 ④严重的肝病变 ⑤应激性状态 ⑥药物影响
2．减低 ①生理性降低 ②胰岛素过多 ③对抗胰岛素的激
素分泌不足 ④严重肝病
二、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)
phospholipid
PL
free fatty acid (non-esterifed fatty acid)
FFA (NEFA)
(三)载脂蛋白及其功能
载脂蛋白（apo）是决定脂蛋白性质的重 要组分，参与血浆脂质的代谢和转运等。 载脂蛋白的主要功能有：
①构成并稳定脂蛋白的结构；
②修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的 活性；
者。 ④妊娠期、甲状腺功能亢进症、肝脏疾病时出
现糖尿者。 ⑤分娩巨大胎儿或有巨大胎儿史者。 ⑥原因不明的肾脏损害或视网膜病变者。
检测方法： 1、空腹采血测定血糖 2、口服葡萄糖 3、间隔时间测定血糖及尿糖 【参考值】 空腹血糖<6.1mmol／L； 服糖后0.5~1h血糖升高达峰值，一般在7.8~9.0mmol
【参考值】
我国成人大致为1.03~2.07mmol／L，
＜0.91mmol／L为HDL-C减低。
【临床意义】 1．可导致HDL-C水平升高的因素 2．可导致HDL-C水平降低的因素 3．HDL与TG呈负相关
（四）低密度脂蛋白胆固醇测定 低密度脂蛋白又称β-脂蛋白，常用低密度脂蛋白胆固
③通过与特异性受体的结合，来调节脂 质在血浆与细胞间的转运。
（四）脂质代谢相关酶及蛋白 脂质及脂蛋白代谢过程中涉及到许多种酶与调节蛋白，
以下主要介绍LPL、LCAT和CETP。 1．脂蛋白脂肪酶(LPL) 2．卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT) 3．胆固醇酯转移蛋白(CETP)
二、脂质和脂蛋白的检测