脱毒苗培养
《脱毒苗的培育》课件
细胞微取技术
在极小的范围内取材，确保无污 染和高成活率，从而缩短繁殖周 期。
冷冻保藏技术
在低温条件下，将植物材料保存 起来，以备不时之需。
植物愈伤组织培养技术
通过外植体的处理和营养培养基 的调制，形成适宜的组织和细胞， 促进植物繁殖。
脱毒苗的筛选
内酯类激素的应用
内酯类激素是一种促进植物 生长和繁殖的植物激素，在 脱毒苗的筛选中发挥重要作 用。
脱毒苗的产业化
产业化项目 水稻脱毒苗 玉米脱毒苗
果树脱毒苗
现状 已在某些地区推广应用 示范推广较为广泛
部分地区实现了规模化生产
前景
市场需求大，发展潜力巨大
能够满足市场需求，有利于玉 米产业升级
有望成为果树产业发展的绝佳 支持
结语
1 脱毒苗的未来发展方向
脱毒苗可以进一步提高品质和生长速度，减 少成本，对保障我国农产品安全、提高农民 收入、促进农业可持续发展具有重要意义。
《脱毒苗的培育》PPT课 件
脱毒苗是一种先进的植物繁殖技术，通过细胞培养、脱毒处理和筛选等技术， 提高了植物的存活率、繁殖速度和抗病能力。本课件将介绍脱毒苗的培育原 理、技术和应用，以及其在农业生产中的重要性。
脱毒苗的培育原理
细胞培养技术
在无菌条件下，利用细胞分裂和 再生的特性，形成丰富的植物种 质资源。
鉴定方法
通过生化和分子生物学技术 等手段，鉴定脱毒苗的纯度 和品质。
繁殖方法
通过不同的繁殖方法，如组 培、芽爆炸繁殖等，扩大脱 毒苗的规模。
脱毒苗的应用
谷子脱毒苗的应用
玉米脱毒苗的应用
脱毒谷子苗可以有选择地提高产 量和品质，防止农田中的病虫害， 提高作物的适应性。
脱毒玉米苗可提高玉米产量，缩 短生长周期，增加抗旱、抗病能 力，改善品质。
第5章 脱毒苗的培育
之为快繁
3、生产无病毒种苗，防止品种退化
受病毒危害严重的作物： 大田作物：马铃薯、甘薯、甘蔗、烟草 蔬菜：白菜、大蒜、葱、番茄、箩卜
果树：柑橘、苹果、草莓、香蕉
花卉：香石竹、各种菊花、天竺葵、紫罗兰
4、节约耕地，提高农产品的商品率
块根、块茎、鳞茎为繁殖器官的作物， 每年产品用留作种的比例：
◆大蒜：留种量占产量的五到八分之一 ◆马铃薯：留种量占产量的十分之一 ◆贝母：留种量占产量的三分之一
其效果
• 香石竹（康乃馨）在38℃～40℃下经两个 月处理可除去全部病毒。
马铃薯在37℃下处理10～20天能除去卷叶 病毒。
2.组织培养脱毒法 包括微茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱 毒、珠心组织培养脱毒。
（1）微茎尖培养脱毒法 脱毒效果好 后代遗传稳定 使用最广泛的一种方法
1）原理及依据 病毒在植物体内分布不均，茎尖处含量最 少 病毒DNA分子与细胞分裂蛋白质合成竞争
黄瓜病毒病
辣椒病毒病
黄瓜病毒病
一串红病毒病
菜豆细菌性病害
危害一些植物的病毒数目
物种
菊花 康乃馨 水仙 唐菖蒲
感染病毒 种类 19
11 4 5
物种
矮牵牛 百合 马铃薯 大蒜
感染病毒 种类 5
6 17 24
物种
苹果 柑橘 葡萄 草莓
感染病毒 种类 36
23 26 24
风信子 月季
3 10
豌豆 樱桃
微体嫁接法(micrografting)
脱除病毒的关键：
①要求剥离技术很高； ②需要考虑砧木和接穗对营养 组成的不同要求； ③与接穗的取材季节有密切关 系（苹果4~6月取材嫁接成 活率较高。）
四、植物脱毒苗的鉴定
脱毒苗培养
2、指示植物鉴定法：利用特定的易于感染某些 病毒的指示植物的特征进行病毒鉴定。
指示植物
CMV病毒感染的植株叶片
3、抗血清鉴定法：利用抗原和抗体的特异性反应原理 进行病毒鉴定。用已知病毒的抗血清（antiserum）鉴 定未知病毒。
近年来又在此基础上发展出酶联免疫法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA），方法是将抗 原固定在支持物上，加入待检血清，然后加入酶（过氧 化物酶或碱性磷酸酶）标记的抗体，使待检血清与对应 抗原的特异性抗体结合，最后用分光光度计进行诊断。
二、脱毒方法：
（一）茎尖分生组织培养脱毒： 1. 脱毒原理：病毒在植物体内的分布不均匀，越靠近
顶端区域，带毒越少，顶端分生组织（0.2-0.5 mm）不带 病毒或含病毒量极低。因此，分离分生组织细胞进行培 养，可以获得无病毒种苗。
2. 茎尖分生组织培养脱毒的基本程序：
一般包括培养基选择和制备、带脱毒材料的表面、灭 菌、茎尖分生组织分离、接种和培养、诱导芽分化和小 植株增殖、诱导生根、驯化移栽等环节。 茎尖分生组织的分离需要在超净工作台上借助体视显 微镜进行。茎尖放在培养皿内进行解剖，一只手用镊子 固定，另一手用解剖针将叶片和叶原基层层剥掉，当露 出半圆形顶端分生组织时，将分生组织切下，接种与培 养基上。
（四）其他脱毒方法：
1. 花器官培养脱毒：由植物的花器官培养脱分化形成愈伤 组织，然后再分化不定芽，可以获得无毒苗。如草莓花 药培养。 2. 珠心胚培养脱毒：柑橘类珠心胚与微管组织没有联系，一 般不带毒，可以利用珠心胚进行培养获得。
3.化学脱毒:采用病毒唑等试剂处理材料或添加到培养基中可 以钝化病毒，达到一定的脱毒效果。
（2）茎尖嫁接：在超净工作台上，将幼苗的上胚轴和子叶去掉， 根系截短，在离上胚轴顶端越0.5cm处斜向下切一深达木质 部，长2-3cm的切口，在斜切口末端横切一刀，用去掉切下 部分。在体视显微镜下，从待脱毒样品上切取0.2mm的茎尖 分生组织，小心放于切口的水平面上，切面向下并与砧木切 口形成层组织紧密贴合，然后接于培养基上。
培养脱毒苗用什么技术,为什么取茎尖
培养脱毒苗用什么技术，为什么取茎尖回答一般会用组织培养技术来培养脱毒苗，组织培养技术是在无菌的环境下，将从植物体中分离出的组织接种在有各种营养物质的培养基上进行培养，通过培养后就会有再生的完整植株。
因为植物感染了病毒后会导致农作物品质衰退，所以为了获得高产，就必须要培养出无病毒的苗木。
一、培养脱毒苗用什么技术
1、培养脱毒苗的技术
常用组织培养技术来培养脱毒苗，组织培养技术是从植物体中分离出符合需要的组织、器官或者细胞以及原生质体等，并通过无菌操作，在无菌条件下把植物接种在含有各种营养物质以及植物激素的培养基上进行培养，通过培养后会获得再生的完整植株或者生产具有经济价值的其他产品的技术。
2、脱毒苗的概念
（1）据研究表明，导致农作物品质衰退的原因是因为植物感染了病毒，而为了获得高产，就必须要培养出无病毒苗木，既脱毒苗木。
（2）脱毒苗因为施用植物组培技术培养植物幼嫩芽等部位所获得的小苗，因为新长小苗未受到母本病毒感染，所以叫脱毒苗。
二、脱毒苗为什么取茎尖
1、取茎尖的原因
因为相对于根尖来说，茎尖的更容易大量的持续获得，对植株的损伤也较小，而且茎尖通常也不带病毒，所以常用茎尖培养脱毒苗。
和培养其他器官一样，在进行茎尖培养时，首要需要表面不带病原菌的外植体，而茎尖分生组织由于有彼此重叠的叶原基的严密保护，只要仔细解剖，无须表面消毒就能够得到无菌的外植体。
2、脱毒苗的应用
脱毒苗技术运用到了花卉、果树、魔芋等农业生产中，从而生产出优质无毒的花卉球种、无病毒果树苗木等植物。
脱毒红薯苗的培育方法
脱毒红薯苗的培育方法
有些种植红薯苗的农户，怕是担心问题红薯不增产，中薯率不提高，利用红薯茎尖培育茎尖苗是解决红薯脱毒的唯一途径。
培养出脱毒苗可增产30%以上中薯率提高10%，出干率提高2%-3%，对红薯黑斑病、黑痣病和其他病害的抵抗性明显增强。
脱毒薯增产潜力大，繁殖快，出芽率高。
在生产中推广前景广阔。
培育脱毒薯苗的技术方法有以下几种：
1、切段快繁：在无菌条件下，将茎尖苗每叶切段一节扦插于1/2ms无激素培养基中，30天左右长成5-7片叶的幼苗。
2、繁微型薯：从无茵苗圃上连柄取下叶片，叶柄端部用杀菌剂溶液消毒，扦插于疏松营养土中，行、株距均为10厘米。
收获期收获微型薯。
3、大棚速繁：将长出5-7片叶的脱毒苗移入防虫大棚中炼苗5-6天，栽入土中，行距30厘米，株距20厘米，勤施肥浇水，20天左右可剪苗扦插春薯。
每隔 10天剪苗1次，后持续剪苗栽夏薯，（6月1日到7月中旬）所育苗可继续在防虫条件下繁殖，或直接繁殖脱毒原种薯。
脱毒红薯温水浸种技术：
1、取开水和凉水若干，按“三开一凉”即3份开水、1份凉水的比例简单对制成温水。
2、用温度计测量水温。
水温达54度即可，用100克甲基托布津或100克多菌灵兑水700倍即可，以达到杀菌效果。
3、把薯种放入缸内，计时。
来回上下翻动几次，使薯种受热均匀。
4、10分钟后将薯种捞出、晾干，大小分类后再进行苗床排薯。
草莓脱毒苗的培育技术
草莓脱毒苗的培育技术
1 草莓脱毒苗概述
草莓是我们常见的水果之一，品种上有不同的选择。
然而在种植
草莓时，病毒是极难避免的问题。
为了解决这个问题，草莓脱毒苗技
术应运而生。
2 草莓脱毒苗的原理
草莓脱毒苗是以植物白化病毒或其它草莓病毒作为污染源，获得
的参考对照苗为基础，通过进行无菌培养及药物处理、抑制、消毒等
多项技术，获得毒素完全清除的健康常规苗。
3 草莓脱毒苗的优点
草莓脱毒苗和传统草莓苗相比具有许多优点。
草莓脱毒苗生长快，移栽后生长周期也比传统草莓苗短。
草莓脱毒苗需要的温度和湿度比
传统草莓苗更低，也更适宜人工培育。
在种植季节富有市场倾向或流
行趋势某特定草莓品种，草莓脱毒苗可以确保大批量且高质量地进行
生产。
4 草莓脱毒苗的培育技术
草莓脱毒苗的培育需要进行无菌技术，确保生产的苗不受任何细
菌感染。
草莓的组织培养和无菌苗获得的技术主要应用于草莓繁殖和
脱毒苗的产生。
有两种主要的草莓无菌繁殖方法：第一，草莓茎尖经
化学处理后进行无菌培养，新株的形成经两个月左右时间；第二，草莓叶片经抗生素处理后进行切片培养，初步体系管理可另立新苗。
草莓脱毒苗的田间移植有生长适应期，有利于图谋在线运（苗期60-90天），并获得了果实产量的显著提高效果，获得的健康常规苗无需进行特别的防护管理，成年期果实品质也相应提升，草莓繁殖和脱毒苗的培育技术因此具备很大的发展前景。
脱毒种苗培育技术
脱毒种苗培育技术
脱毒种苗培育技术是一种将植物繁殖材料从病毒、细菌或其他病原体中进行清除的技术。
其基本流程包括选材、消毒、去除外植体和消毒外植体、培养筛选、繁殖等步骤。
下面是脱毒种苗培育技术的具体步骤：
1. 选材：选择健康的母株作为繁殖材料，避免携带病原体。
2. 消毒：将繁殖材料浸泡在消毒剂中，如含氯消毒剂或酒精溶液，一段时间后进行漂洗，以杀灭附着在材料表面的病原体。
3. 去除外植体：将选好的繁殖材料分解成小的外植体，如叶片、茎段等，并通过消毒剂或高温消毒处理，以杀灭植物体内潜伏的病原体。
4. 消毒外植体：将外植体在含有适宜培养基的培养皿中培养，同时添加抗生素和植物生长调节剂，以阻止细菌和真菌的生长，促进外植体的生长和分化。
5. 培养筛选：将培养好的外植体进行筛选，去除有病原体感染的外植体，保留健康的外植体。
6. 繁殖：通过组织培养技术，将健康的外植体进行再生，得到一批具有一致性的健康苗。
脱毒种苗培育技术可以应用于各种农作物和果树的繁殖，保证
种苗的规模化生产和健康性，促进农作物产量的提高和病害防控工作的开展。
植物脱毒方法
植物脱毒方法
1、茎尖培养脱毒:病毒在植物体内的分布并不均匀,越靠近茎端的病毒的感染深度越低,生长点则几乎不含或含病毒很少。
2、愈伤组织培养脱毒法:通过植物的器官和组织的培养,脱分化诱导产生愈伤组织,然后从愈伤组织再分化产生芽,长成小植株,可以得到无病毒苗。
3、珠心胚培养脱毒:病毒一般不通过种子传播,由珠心细胞发育成的胚再生的植株是无毒的,并具有与母本相同的遗传特性。
4、茎尖微体嫁接:将实生苗砧木在人工培养基上种植培育,再从成年无病树枝上切取0.4—1.0mm茎尖,在砧木上进行试管微体嫁接,以获得无病毒幼苗。
5、花药培养脱毒。
6、热处理脱毒:一些病毒对热不稳定,在高于常温的温度下(35-40°C),即钝化失活。
7、化学处理:抑制或杀死病毒。
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5. 5. 合并热处理、茎尖培养或微嫁接脱毒：采用多种方法 同时处理可以达到更好的脱毒效果。
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二、病毒检测方法：
1、形态鉴定： 根据植株的生长状态鉴定是否 脱毒，但不准确。
3. （2）茎尖嫁接：在超净工作台上，将幼苗的上胚轴和子叶 去掉，根系截短，在离上胚轴顶端越0.5cm处斜向下切一深 达木质部，长2-3cm的切口，在斜切口末端横切一刀，用去 掉切下部分。在体视显微镜下，从待脱毒样品上切取0.2mm 的茎尖分生组织，小心放于切口的水平面上，切面向下并与 砧木切口形成层组织紧密贴合，然后接于培养基上。
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2. 茎尖分生组织培养脱毒的基本程序：
一般包括培养基选择和制备、带脱毒材料的表面、 灭菌、茎尖分生组织分离、接种和培养、诱导芽分化和 小植株增殖、诱导生根、驯化移栽等环节。
茎尖分生组织的分离需要在超净工作台上借助体 视显微镜进行。茎尖放在培养皿内进行解剖，一只手用 镊子固定，另一手用解剖针将叶片和叶原基层层剥掉， 当露出半圆形顶端分生组织时，将分生组织切下，接种 与培养基上。
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（3）热处理脱毒：
通过热处理可以由受病毒侵染的个体得到无病毒植株， 其原理是利用病毒与植物的耐热性不同，在高于常温的环 境下，植物组织中的病毒受热后可被部分或全部钝化或失 去活性，而寄主植物组织很少或不会受到伤害。或高温下 植物生长快，而病毒增殖慢而使植物新生部分不带病毒。
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1.热处理脱毒方法： 可以通过温汤浸渍或热空气处理法脱毒，前者对休眠
4. （3）嫁接苗培养：将嫁接苗置于光下培养，光照时数16h， 嫁接1周后形成愈伤组织，2-3周愈合，5-6周后接穗发育为 新梢。
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2. 微体嫁接脱毒的关键：
影响微体嫁接成活率的主要因素为接穗大小和取样时 间。与接穗大小呈正相关，而无病毒植株获得与接穗茎尖 的大小呈负相关。茎尖分生组织小于0.2mm可以脱除多数 病毒，春季取材嫁接的成活率高于其他季节。
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（二）微体嫁接脱毒：
微体嫁接是在无菌条件下，将极小(<0.2mm）的茎尖嫁 接到试管内的无菌实生苗砧木上，经培养，待接口愈合发 育为完整植株而达到脱毒的效果。该方法已在柑橘、苹果、 葡萄、山茶等园艺植物中应用。
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微体嫁接
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1. 微体嫁接的方法：
2. （1）试管砧木的准备:将无病毒种子表面灭菌后接种与MS培 养基，黑暗条件下培养15d使其发芽。
脱毒技术主要应用于各种无性繁殖植物，如草莓、马 铃薯、甘薯、苹果、香蕉、甘蔗等。
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二、脱毒方法： （一）茎尖分生组织培养脱毒： 1. 脱毒原理：病毒在植物体内的分布不均匀，越靠近
顶端区域，带毒越少，顶端分生组织（0.2-0.5 mm）不 带病毒或含病毒量极低。因此，分离分生组织细胞进行 培养，可以获得无病毒种苗。
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（四）其他脱毒方法：
1. 花器官培养脱毒：由植物的花器官培养脱分化形成愈伤 组织，然后再分化不定芽，可以获得无毒苗。如草莓花 药培养。
2. 2. 珠心胚培养脱毒：柑橘类珠心胚与微管组织没有联系， 一般不带毒，可以利用珠心胚进行培养获得。
3. 3.化学脱毒:采用病毒唑等试剂处理材料或添加到培养基 中可以钝化病毒，达到一定的脱毒效果。
第二节 脱毒种苗生产及病毒检测技术
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一、脱毒的意义：
无性繁殖作物长期营养繁殖，易受病毒侵染，而使 病毒在体内积累，导致种性退化，造成产量下降或品质降 低甚至死亡，给农业造成巨大损失。
通过茎尖培养获得无病毒种苗，对退化品种进行提 纯复壮。提高产量和品质，如马铃薯脱毒可提高产量3060%,提高了经济效益。此外，由于减少农药使用，可以保 护生态环境。
2、指示植物鉴定法：利用特定的易于感染某些 病毒的指示植物的特征进行病毒鉴定。
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指示植物
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CMV病毒感染的植株叶片
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3、抗血清鉴定法：利用抗原和抗体的特异性反应原理 进行病毒鉴定。用已知病毒的抗血清（antiserum）鉴 定未知病毒。
近年来又在此基础上发展出酶联免疫法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA），方法是将抗 原固定在支持物上，加入待检血清，然后加入酶（过氧 化物酶或碱性磷酸酶）标记的抗体，使待检血清与对应 抗原的特异性抗体结合，最后用分光光度计进行诊断。
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2. 热处理脱毒条件： （1）温度和持续时间：因病毒种类而异，有些33-34℃处 理28-33d即可脱毒，而有些必须在39-42 ℃处理50-60d， 耐热杆状病毒热处理脱毒效果差。在植物的耐热范围内， 温度越高，脱毒效果越好。一般采用35-38 ℃.尤其37℃恒 温处理30±2天为普遍。也可采用高低温处理减少对植物的 损伤。如马铃薯40 ℃ （4h）+16-20 ℃（20h）。 （2）湿度和光照：湿度以70-80%为适宜。光照以自然光最 好。 （3）前处理：27-35 ℃ 1-2周。
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3. 脱毒效果与茎尖大小的关系：
脱毒效果和茎尖分生组织大小直接相关，茎尖分生 组织越小，脱毒率越高，但生长速度慢。如草莓茎尖切 取0.2-0.3mm时，脱毒率达到100%，而切取1.0mm时，脱 毒率为50%。因此，脱毒培养时，需要兼顾脱毒率、成活 率及茎尖发育成完整植株的能力。既要脱除病毒，也要 使茎尖分生组织迅速生长发育。一般茎尖分生组织大小 以0.2-0.5mm为适宜。
芽效果较好，后者对活跃生长的茎尖效果较好。 热空气处理即把旺盛生长的植物移入热疗室，在35-
40℃下处理一定时间（几分钟到数周）热处理后将茎尖切 下嫁接于无病毒砧木或进行组织培养。热处理温度应逐步 升高，直到要求温度。
温汤浸渍的材料常用50-55 ℃处理10-50min或35 ℃温 水处理30-40min。