第一次实验普通光学显微镜的使用和细菌三型的观察.
实验一 普通光学显微镜的使用和细菌形态观察
实验一普通光学显微镜的使用和细菌形态观察一、实验目的1．了解普通光学显微镜的构造和原理。
2．学习并掌握普通光学显微镜——油镜的使用方法。
3．利用油镜观察细菌的形态和构造。
二、实验原理微生物学研究用的普通光学显微镜通常有低倍物镜（16mm，10×）高倍物镜（4mm，40-45×）和油镜（1.8mm，95-100×）三种。
油镜常标有黑圈或红圈（或白圈），它是三者中放大倍数最大的。
使用油镜时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间，不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。
这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n＝1.52，与玻璃基本相同。
当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系；当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样视野的照明度就减低了（图Ⅰ-1）。
图Ⅰ-1油镜的原理图Ⅰ-2 镜口角利用油镜不但能增加照明度；更主要的是能增加数值口径。
因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度（称镜口角）的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积，可用下列公式表示：NA=nsinθ数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据；分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。
可分辨两点之间的最小距离=λ/2NA＝λ/2nsinθ式中λ：所用光源波长；θ：为物镜镜口角的半数，取决于物镜的直径和工作距离。
n：玻片与物镜间介质的折射率，空气（n=1.0）、水（n=1.33）、香柏油（n=1.52）、玻璃（n=1.52）等。
nSinθ：数值孔径（NA），是决定物镜性能的最重要指标。
由上述可知若n值和α角越大则NA越大或光波波长越短，则显微镜的分辨力越大（图Ⅰ-2）。
三、实验器材1．仪器：显微镜。
2．材料：标本片（大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、八叠球菌、炭菌杆菌的芽孢和荚膜、细菌三形涂片），香柏油，二甲苯，擦镜纸等。
实验一光学显微镜的使用与微生物观察
实验一光学显微镜的使用与微生物观察第一节普通光学显微镜的使用一、实验目的1、了解普通光学显微镜的基本构造和工作原理。
2、学习并掌握普通光学显微镜，重点是油镜的使用技术和维护知识。
3、在油镜下观察微生物的几种基本形态。
二、基本原理（一）普通光学显微镜的构造普通光学显微镜由机械系统和光学系统两部分组成（图1-1）。
1、机械系统机械系统包括镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器等。
（1）镜座：它是显微镜的基座，可使显微镜平稳地放置在平台上。
（2）镜臂：用以支持镜筒，也是移动显微镜时手握的部位。
（3）镜筒：它是连接接目镜（简称目镜）和接物镜（简称物镜）的金属圆筒。
镜筒上端插入目镜，下端与物镜转换器相接。
镜筒长度一般固定，通常是160mm。
有些显微镜的镜筒长度可以调节。
（4）物镜转换器：它是一个用于安装物镜的圆盘，位于镜筒下端，其上装有3～5个不同放大倍数的物镜。
为了使用方便，物镜一般按由低倍到高倍的顺序安装。
转动物镜转换器可以选用合适的物镜。
转换物镜时，必须用手旋转圆盘，切勿用手推动物镜，以免松脱物镜而招致损坏。
（5）载物台：载物台又称镜台，是放置标本的地方，呈方形或圆形。
载物台上装有压片夹，可以固定被检标本；有标本移动器，转动螺旋可以使标本前后和左右移动。
有些标本移动器上刻有标尺，可指示标本的位置，便于重复观察。
（6）调节器：调节器又称调焦装置，由粗调螺旋和细调螺旋组成，用于调节物镜与标本间的距离，使物像更清晰。
粗调螺旋转动一圈可使镜筒升降约10mm，细调螺旋转动一圈可使镜筒升降约0.1mm。
图1-1 普通光学显微镜的构造1. 镜座2. 镜臂3. 镜筒4. 转换器5. 载物台6. 压片夹7. 标本移动器8. 粗调螺旋9. 细调螺旋 10. 目镜 11. 物镜 12. 虹彩光阑（光圈）13. 聚光器14. 反光镜2、光学系统光学系统包括目镜、物镜、聚光器、反光镜等。
（1）目镜：它的功能是把物镜放大的物像再次放大。
实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察PPT课件
对未来学习的展望
01
深入学习微生物学
本次实验让我对微生物学产生了浓厚的兴趣，未来我将深入学习微生物
学的相关知识，了解更多关于细菌、病毒等微生物的特性、分类和应用。
02
探索微生物在自然界中的作用
微生物在自然界中发挥着重要作用，未来我将进一步探索微生物在生态
系统中的作用和意义，了解其在环境保护、生物防治等方面的应用。
分析并记录观察结果。
02
CHAPTER
普通光学显微镜的使用
显微镜的基本结构
物镜
将观察物象放大，同样有多种 倍率可选，如4X、10X、40X 等。
聚光镜
常有5X、 10X、40X等倍率选择。
载物台
放置和固定观察样本。
调焦旋钮
调节焦距，使物象清晰。
显微镜的操作方法
显微镜应存放在干燥、通风的 地方，避免阳光直射和高温。
03
CHAPTER
细菌三形的观察
细菌的形态分类
01
02
03
球菌
呈球形或近似球形，直径 一般在1μm左右。
杆菌
呈杆状或近似杆状，长度 一般在2-3μm，宽度在 0.5-1μm。
螺旋菌
呈弯曲的杆状或螺旋状， 长度一般在2-6μm，宽度 在0.3-0.6μm。
细菌的染色与观察
染色原理
利用染料与细菌细胞壁结 合，使细菌着色，以便在 显微镜下观察。
常用染色法
革兰氏染色、抗酸染色等。
观察方法
将染色后的细菌涂布在载 玻片上，盖上盖玻片，用 显微镜观察其形态和染色 情况。
细菌三形的观察实例
球菌
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等。
杆菌
大肠杆菌、结核分枝杆菌等。
实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察
实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察引言：显微镜是一种重要的生物学工具，能够放大物体，使我们能够观察到细小的结构。
其中，光学显微镜是最常见和广泛使用的显微镜之一、在本实验中，我们将学习使用普通光学显微镜，并观察细菌的三种形态。
材料和方法：1.准备细菌涂片。
准备一份细菌涂片，将其放在显微镜载片上。
2.放置载片。
将细菌涂片置于载片上，用显微镜夹子固定。
3.调整镜头。
在显微镜上选择合适的目镜和物镜，通常在使用40倍至100倍的物镜进行观察。
将镜头调整到最低位置，然后慢慢向上调整，直到能够看到细菌。
4.调整光源。
用光源照亮样品，然后通过调整光源的亮度和方向，使样品清晰可见。
5.调整焦距。
通过转动焦点调整器，使细菌变得清晰。
如果观察中出现模糊或扭曲的图像，重新调整焦距。
6.观察并拍照。
使用目镜和物镜逐步放大细菌，并观察它们的形态特征。
如果需要，可以使用相机拍摄细菌的图像以作进一步分析和记录。
结果：经过实验观察发现，细菌的形态分为以下三种：1.球形（球菌）：球形菌又称为球菌，其形状近似一个圆球。
球菌通常呈现出单个细胞独立生长的特点，例如葡萄球菌。
2.杆形（杆菌）：杆菌是一类细菌，其形状呈长棍状。
杆菌通常呈现出链状生长的特点，例如大肠杆菌。
3.螺旋形（螺旋菌）：螺旋菌的形状呈螺旋状。
螺旋菌有时会呈现出较长或较短的螺旋形态，例如鼠疫杆菌。
讨论：本实验使用普通光学显微镜观察了细菌的三种形态，即球形、杆形和螺旋形。
这些形态特征对于鉴定和分类细菌非常重要，因为形态可以反映细菌的生态和代谢特征。
球形细菌通常是在湿润的环境中生长并繁殖。
由于其小尺寸和圆滑的表面，球形细菌对于机体的作用较小，通常是人体正常菌群的一部分。
此外，一些病原细菌如葡萄球菌等也具有球形。
球形细菌在显微镜下通常呈圆形或椭圆形，并且可以在荧光显微镜下染色以增强可见性。
杆菌是一类常见的细菌，其形状与一根棍子类似。
杆菌通常生活在土壤、水体和生物体的表面。
微生物学实验报告
微生物学实验报告实验一普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察第一部分：显微镜的使用一、目的要求1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。
3．了解各种显微镜的主要特征。
二、实验原理（一）光学显微镜的构造微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。
1、机械部分普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。
（二）放大倍数标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。
显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。
分辨距离即透镜所能分辨的两个物点之间的最小距离，分辨距离愈小，透镜的分辨力愈高，物像也就愈清晰。
因此常以分辨距离来衡量显微镜的分辨力。
R=0.61λ/N.A式中：R-----分辨距离；λ------作用光的波长；N.A------数值口径。
一些介质的折射率介质折射率空气水玻璃香柏油1 13 55 1.56三、实验内容（一）材料：显微镜，香柏油，擦镜纸。
（二）方法：细菌很小，须使用油镜方可观察到。
油镜是显微镜上最重要的部件之一，观察时与玻片非常接近，稍不小心即可压碎玻片，更严重的是损坏镜头，故必须极其仔细地学习油镜的使用方法：1、为使低倍镜取得最适之光源，可将低倍镜头调节到离载物台约1cm的高度，将聚光器提高，光圈完全打开，然后调节电压旋钮至视野最合适。
2、滴一滴香柏油，固定于载物台上，用推动器调节到载物台正中。
在双目侧视下，下旋粗调节器，使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。
然后眼睛从目镜观察（如光线不足，可适当增大电源电压），徐徐上旋粗调节器至看到模糊物像之后，再用细调节器调节以使物像清晰。
实验一普通光学显微镜的使用与细菌三形的观察
实验一普通光学显微镜的使用与细菌三形的观察摘要：本实验使用普通光学显微镜观察细菌的三种形态，包括球状细菌、杆状细菌和螺旋形细菌。
首先，通过镜片清洗和调焦操作，使显微镜准备就绪。
然后，通过移动物镜和镜身，找到适合观察的细菌样本。
最后，使用1000倍的放大倍数观察细菌样本，并记录下观察结果。
实验结果表明，普通光学显微镜可以有效地观察细菌的不同形态，并提供有关细菌结构的详细信息。
引言：显微镜是观察微小物体的重要工具之一、在生物学研究中，显微镜被广泛应用于观察细胞和微生物等微观结构。
本实验旨在使用普通光学显微镜观察细菌的三种形态，即球状细菌、杆状细菌和螺旋形细菌，并记录下观察结果。
方法和材料：本实验使用以下设备和试剂进行观察：1.普通光学显微镜：用于观察细菌样本。
2.清洗液：用于清洗显微镜镜片。
3.导轨：用于移动显微镜物镜和镜身。
实验步骤：1.清洗显微镜镜片：首先，取适量清洗液滴在镜片上，用棉纸轻轻擦拭，直到镜片干净为止。
2.调焦：将样本架置于显微镜平台上，调节光源的亮度，使用低倍物镜对准样本。
通过调节焦距，使样本清晰可见。
3.移动物镜和镜身：使用导轨移动物镜，找到适合观察的细菌样本。
然后，在适当位置上调整镜身，以便获得清晰的图像。
4.观察和记录：使用高倍放大倍数（1000倍）观察细菌样本。
注意细菌的形状、大小和结构，并记录下观察结果。
结果与讨论：本实验观察到了三种常见的细菌形态：球状细菌、杆状细菌和螺旋形细菌。
球状细菌：球状细菌是一种常见的细菌形态，其形状类似于小球。
观察时，可以看到多个球状细菌聚集在一起形成一个群体。
球状细菌的直径大约为1至2微米，通常由一个或多个细胞组成。
在高倍放大倍数下，可以通过显微镜清晰地观察到球状细菌的细胞壁和细胞质。
杆状细菌：杆状细菌是一种长形的细菌，其形状类似于棍子或柱子。
观察时，可以看到杆状细菌在显微镜视野中以不同的方向排列。
杆状细菌的长度通常为2至5微米，直径为0.5至1微米。
实验一、普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察
实验一、普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察实验目的：
实验原理：
普通光学显微镜是一种透镜光学系统，通过对样本中的光线进行聚焦，放大细菌的图像。
显微镜的主要部分包括物镜、目镜、调焦机构、光源等。
细菌是一类微生物，形态多样，通常为单细胞生物，通过不同的染色方式和光学显微镜观察，可以看到不同形态的细菌。
实验器材：
普通光学显微镜、平片、细胞培养液、革兰染色试剂、蒸馏水、酒精、碘液、碱性蓝溶液
实验步骤：
1. 取一片平片，用无菌锉子在中心处轻轻划十字，用烧杯将片子消毒并放入培养液中。
2. 从细菌培养物中取出一小团菌落，在平片的交叉点处将其划成一个小圆圈，放入蒸馏水中。
3. 用无菌镊子夹取一滴细胞液，在平片的交叉点处加上一滴，然后在上方盖上一片盖片。
4. 将样品放入显微镜的标本台上，调整镜头至最佳位置，适当调整光源亮度和对比度等参数，观察细菌的形态特征。
5. 移动物镜或调整焦距，可以观察到更大或更小的细胞形态。
6. 取另一张平片，准备革兰染色试剂，将样本放入试剂中，反复洗涤，用显微镜观察识别细菌的形态，进行分类。
实验结果：
观察到细菌呈长梭形，直杆形，圆球形、螺旋形等形态，且在革兰染色后，长梭形的细菌为革兰阳性菌，圆球形的细菌为革兰阴性菌。
结论：
通过使用普通光学显微镜，成功观察了细菌的形态特征。
并通过革兰染色试剂进行分类，为后续的生物学研究提供了基础。
油镜使用实验报告范文
油镜使用实验报告范文微生物学实验报告微生物学实验报告实验一普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察第一部分：显微镜的使用一、目的要求1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。
3．了解各种显微镜的主要特征。
二、实验原理（一）光学显微镜的构造微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。
1、机械部分普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。
（二）放大倍数标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。
显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。
分辨距离即透镜所能分辨的两个物点之间的最小距离，分辨距离愈小，透镜的分辨力愈高，物像也就愈清晰。
因此常以分辨距离来衡量显微镜的分辨力。
R=0.61λ/N.A式中：R-----分辨距离；λ------作用光的波长；N.A------数值口径。
一些介质的折射率介质空气水玻璃香柏油折射率1 13 55 1.56三、实验内容（一）材料：显微镜，香柏油，擦镜纸。
（二）方法：细菌很小，须使用油镜方可观察到。
油镜是显微镜上最重要的部件之一，观察时与玻片非常接近，稍不小心即可压碎玻片，更严重的是损坏镜头，故必须极其仔细地学习油镜的使用方法：1、为使低倍镜取得最适之光源，可将低倍镜头调节到离载物台约1cm的高度，将聚光器提高，光圈完全打开，然后调节电压旋钮至视野最合适。
2、滴一滴香柏油，固定于载物台上，用推动器调节到载物台正中。
在双目侧视下，下旋粗调节器，使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。
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实验报吿的写作規范
目的要求 实验原理
仪《与材料
姓名、学号.按学号顺序養理后交上来.
微生物学实验的学习材料
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五、 六、 操作步》
实验结果
思考题
实验二普通光学显微镜的使用和细菌三型的观察
—、目的要求
1、学习并掌握油镜的原理和使用方法•
2、复习普通台式显微镜的结构.各部分的功能和使用方法.
二、实验原理
D-Z/2NA NA=n • sina
显微镜概述；
显微鏡是现集细胞的主¥工具.根据光》不同，可分为光学显徽镜和电子显徽钱两大类.前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光》,后者则以电子東为光《・
1•光学显《镜
普通生物显徽钱由3部分构成：
①照明系统：包括光》和«光《.
②光学放大系统：由物镜和目镜组成，
是显微镜的主体.
®机械装*:用于固定林料和观察方便，
包括镜台（«物合）・调节器和.
物镜转换g （祓转器）等.
实验二普通光学显微镜的使用和细菌三型的《察
五、实验结果
分别绘出你在低倍镜、高倍镜和油镜下观察到的细 菌的三种形态，包括在三种情况下视野中的变化，同时注 明物镜放大倍数和总放大率•
实验二普通光学显微镜的使用和细菌三型的《娱
六、思考题
(1)用油镜观察时应注意哪些问题?在载玻片和镜头之 间加《什么油?起什么作用？
(2) 试列表比较低倍镜.高倍镜及油镜各方面的差异. 为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节《的 误《作？
(3) 义？
⑷ ⑸ 大
小，选择不同的物镜进行有效的观察.
什么是物镜的同焦现象?它在显微镜观察中有什么意 影响显微镜分辨率的因素有哪些？
根据你的实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的
实验十六牛肉膏《白|»培养基的制备
一、目的要求
K明确培养基的配制原理・
2、通过对基础培养基的配制.拿握配制培养基的一般
实验十六牛肉膏蛋白》培养基的制备
二、实验原理
牛肉膏蛋白豚培养基的配方如下:
牛肉膏 3. Og
蛋白腺10.0 g
NaCl 5. Og
水lOOOnl
.6
实验十六牛肉膏《白|»培养基的制备
pH7. 4 " 7
.6
实验十六牛肉膏《白联培养基的制备
实验十六 牛肉膏《白》培养基的制备
5、分装
(1) 液体分装
分装高度以试管高度的1/4九右为宜.分装三角瓶的虽则根 据需婪而定，一般以不超过二处瓶容积的一半为宜，
(2) 固体分装
分装试粋.此装就不超过管|儒的1/h 灭菌后制成斜血。
分 装二角烧m 的®以不超过二角烧瓶笄积的■半为宜。
(3) 半固体分装
试符一般以试管高度的1/3为ft,灭菌后垂克待凝.
8、灭菌
将上述培养基以O.IO3MPa, 121 *0, 20nilii 高压蒸气灭菌。
四、操作步骤
1、称量
3、调pH
5、分装
7. 包扎 9、搁a 斜面
2、溶化 4、过滤 6. 加S 8、灭菌
10、无菌检査
实验十六牛肉膏竇白联培养基的制备
五・思考题
(1)培养基配好后，为什么必須立即灭菌？如何检査灭菌后的培养基是无®的?
(2)在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题？为什么?
消毒与灭菌
—2
「压力蒸汽灭菌 I 间歇灭菌 煮沸灭菌 I 巴斯德消毒
r 干热法
火焰烧灼 热空气灭菌 干热灭菌
电烤箱
-A d 湿热法
实验IMEltirwed)
过滤除菌
许多材料，如血清、糖溶液等，用一般加热消毒灭菌方法，均会被热破坏，应采用过滤除菌。
应用最广的过滤器有蔡氏（Seita＞过滤器和膜过滤器。
实验原跻Etinued)
须用一张新滤板。
S 过滤器的结构与蔡氏过滤器相似，只
是滤膜是一种多孔纤维素.孔径一般为
0.45um,过滤时，液体和小分子物质通过,
蔡氏过滤器分上、下两节,
过滤时，用螺旋把石棉板
紧紧地夹在上、下两节滤
器之间，然后将溶液置于
滤器中抽滤，每次过滤必
JpA
实鲨内#及实验步農(continued)
实 ^ai«*W*inued)
紫外线灭菌
紫外线波长在200-300 nm,具有杀菌作用,
其中以265-266 nm 杀菌力最强。
无菌室或无菌接种箱空气可用紫外线灯照射灭 菌。
实鲨内#及实验步SI (continued)
干热灭菌
1、 装入待
火菌物品 2、 升温 3、 ftiffl
4、 降温
5. 开箱収物 待烤箱温度降到7(rc 以卜•以后 方可打开箱门，取出物品。
箱内温度髙丁•7crc, 切勿门行打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。
接通电源，加热升温至160-170-Cc
保持160-170r 2小时》 切断电源，
门然降温。
压力蒸汽灭菌
1、检責水位，放入物品°
2、加盖、拧紧对称用力
3、加热升温
4、排冷空气等压力升至0・5kg/cm2时，打开排气阀.排净冷空气•
5、升fi、保压等绸内压力升至所需数值(通常为
1.03kg/cm2).保持压力20・30分钟.
6、降压、取物。