【微生物学检验】知识点整理(第一部分)
微生物检验主要知识点总结
微生物检验主要知识点总结一、微生物检验的概念微生物检验是指利用现代生物学技术手段检验和鉴定食品、饮用水、药品、环境等物品中微生物的种类和数量的一种实验室检验方法。
微生物检验的主要目的是为了评估物品中微生物的数量及种类是否达到卫生标准，以保障人们的健康和安全。
二、微生物检验的重要性1. 保障公共卫生：微生物检验可以及时发现食品、饮用水、药品等物品中存在的微生物污染，有针对性地采取相应的措施，从而保障公共卫生。
2. 保障产品质量：微生物检验可以帮助企业检测产品是否受到微生物污染，保障产品的质量和安全。
3. 疾病预防：微生物检验可以检测出病原微生物，为疾病的预防和控制提供科学依据。
三、微生物检验的主要流程1. 采样：根据不同的检验对象，选择合适的采样方法和设备进行样品采集。
2. 样品处理：将采集的样品进行处理，以提取出微生物进行检测。
3. 细菌培养：将样品中的微生物分离培养，以获取单一的微生物种类。
4. 微生物鉴定：通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法对微生物进行鉴定。
5. 微生物计数：对样品中的微生物进行计数或定量。
6. 结果分析：根据检验结果，评估样品是否符合相关的卫生标准。
四、微生物检验中的常用方法1. 培养法：将样品涂在含有营养物质的培养基上，利用条件恰当的培养环境，使样品中的微生物进行生长。
2. 影像法：通过显微镜观察培养好的微生物，观察其形态特征，进行鉴定。
3. 生化鉴定法：根据微生物的代谢过程，通过一系列的生化反应，鉴别微生物属种。
4. 分子生物学方法：利用PCR、DNA测序等技术，对微生物进行鉴定。
五、微生物检验中的常见问题1. 选择合适的检验方法：不同的微生物污染可能需要不同的检测方法，需根据具体情况选择合适的方法。
2. 样品的处理和保存：样品的处理和保存条件对检验结果有着重要的影响，需要严格按照标准操作。
3. 检验结果的分析和判断：检验结果可能存在假阳性、假阴性等情况，需要结合其他信息进行分析和判断。
临床微生物学检验重点知识归纳
临床微生物学检验重点知识归纳
临床微生物学检验重点知识归纳：
1.细菌的基本结构有：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质。
2.细菌的特殊结构：荚膜（抗吞噬作用）、菌毛（细菌的黏附器官）、鞭毛（细菌的运动器官）、芽胞（细菌在不良环境中的存活方式）。
3.肽聚糖：为革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁的共同成分。
4.磷壁酸：为革兰阳性菌细胞壁特殊成分。
5.外膜层：为革兰阴性菌细胞壁特殊成分。
6.质粒：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞中，是小的双股闭合环状DNA分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。
7.细菌L型：是细胞壁缺陷型细菌。
8.细菌以“二分裂”方式繁殖。
9.细菌的生长曲线主要包括四期：延缓期、对数期（最佳研究时期）、稳定期、衰亡期。
10.细菌常见的遗传变异类型：
①转化（供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌）；
②接合（通过性菌毛互相连接，将遗传物质从供体菌转移给受体菌）；
③转导（以温和噬菌体为载体，将遗传物质从供体菌转移给受体菌）；
④S-R变异（细菌菌落由光滑型到粗糙型的变异）。
11.细菌非染色标本：检查细菌动力。
12.革兰染色：是细菌学中最经典、最常用的染色方法。
13.革兰染色步骤：初染（结晶紫）、媒染（碘液）、脱色（酒精）、复染（石炭酸复红）。
14.标本处理的一般原则：早期、无菌、适量、方法、安全。
15.培养基种类：基础培养基、选择培养基（SS培养基）、鉴别培养基（克氏双糖铁）、营养培养基（巧克力平板）、特殊培养基（细菌L型培养基）。
检验师微生物检验知识点集锦
检验师微生物检验知识点集锦微生物检验是现代医学中的重要检验项目之一，主要用于检测病原微生物的存在和种类，以及对药敏试验进行评估。
作为初级检验师，你需要掌握以下几个方面的知识点：1.微生物基础知识-微生物的分类和命名规则：包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等分类。
-微生物的形态和结构：掌握不同类别微生物的形态特征和结构组成，如细菌的形状、胞壁和胞质等。
-微生物的生长条件：了解微生物的生长条件，包括温度、湿度、pH值和营养物质等。
2.微生物检验方法-样品采集及处理：理解不同样品（如血液、尿液、分泌物等）的采集方法和处理步骤，以确保样品的准确性和可靠性。
-培养方法：熟悉不同微生物的培养方法，包括琼脂培养基的配制、接种方法和培养条件等。
-鉴定方法：了解常见微生物的鉴定方法，包括形态学鉴定、生化试验和分子生物学方法等。
-药敏试验：掌握药敏试验的原理和操作步骤，用于评估微生物对不同抗生素的敏感性，并为临床治疗提供参考。
3.常见病原微生物-常见病原菌：学习常见病原菌的分类、形态和致病特点，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。
-常见病毒和真菌：了解一些常见的病毒和真菌的致病性和检测方法，例如流感病毒、念珠菌等。
-传染病的检测：学习不同传染病的检测方法，包括艾滋病、结核病和流行性感冒等。
4.质控和质量管理-质量控制：了解微生物检验中的质量控制措施，如内外质控、质量标准和质量评估等，确保结果的准确性和可靠性。
-安全措施：掌握微生物检验过程中的安全措施，如个人防护、试剂的正确使用和实验室的卫生管理等。
除了以上的基础知识，你还需要掌握实验中的仪器操作、数据分析和结果解读等技能。
微生物检验是一个综合性较强的检验项目，需要不断学习和实践，提高自己的技术水平和判断能力。
微生物检验技术知识点
微生物检验技术知识点1.培养方法：培养是微生物检验的基础，通过将样品接种到培养基上，使微生物在合适的环境中繁殖生长。
培养方法包括常规培养和不同培养手段。
常见的培养手段有液体培养、固体培养和胶体培养等。
2.鉴定方法：微生物的鉴定是判断其种属、属或是菌株的过程。
传统的鉴定方法包括形态学、生理生化特性和生物学特性等，而现代鉴定方法则应用了分子生物学等技术。
常用的鉴定技术有酶联免疫吸附试验（ELISA）、脱氧核糖核酸（DNA）杂交和聚合酶链反应（PCR）等。
3.纯化和分离方法：对于复杂的微生物种群，需要进行纯化和分离，以便对特定的微生物进行进一步的研究。
纯化和分离方法包括传统的分光技术、平板法和筛选法，以及最新的流式细胞术、脉冲场凝胶电泳（PFGE）和DNA测序技术等。
4.对微生物的抗生素敏感性检测：抗生素敏感性是指微生物对抗生素的反应情况。
抗生素敏感性检测可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗细菌感染疾病。
目前常用的抗生素敏感性检测方法包括纸片扩散法、E测试和微量稀释法等。
5.流行病学监测：微生物检验技术在流行病学监测中发挥着重要作用。
通过对微生物种群的监测和分析，可以及时发现并控制传染病的传播。
流行病学监测常用的技术包括病原体分子鉴定、序列分析和生物信息学分析等。
6.污染控制技术：微生物检验技术也在环境和食品安全方面发挥着重要作用。
通过对环境和食品中微生物的检验，可以评估污染程度，并采取相应的控制措施。
常用的污染控制技术包括灭菌消毒、高温杀菌和辐照等。
7.微生物基因工程：微生物基因工程是指利用基因工程技术对微生物进行改造，以生产有用的产物或者改善微生物的特性。
微生物基因工程的应用广泛，可以用于制药、农业、环境工程等领域。
常见的微生物基因工程技术包括基因克隆、基因敲除和基因转导等。
总之，微生物检验技术是一门广泛应用于医学、生物学、环境工程等领域的技术。
通过不断地研究和创新，微生物检验技术将为疾病诊断、污染控制和资源利用等问题提供更好的解决方法。
微生物检验基础知识点总结
微生物检验基础知识点总结微生物检验是临床诊断中的重要技术手段，通过对患者样本中的微生物进行分离、鉴定和药敏试验，可以确定感染性疾病的病原体及其对药物的敏感性，为临床治疗提供重要依据。
微生物检验涉及到许多基础知识点，下面将分别从微生物分类、微生物培养、微生物鉴定和药敏试验等方面来总结微生物检验的基础知识点。
一、微生物分类微生物是一种广泛分布于自然界中的生物体，包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。
而在临床微生物检验中，最常见的微生物主要是细菌和真菌。
下面将分别介绍细菌和真菌的分类。
1. 细菌的分类细菌是一类单细胞生物，其形态多样，包括球菌、杆菌、螺旋菌等。
从生物学特性上可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
（1）革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌直接在植物或培养基上形成蓝、紫色颗粒。
细胞壁是由聚糖和一种特殊的脂质组成。
革兰氏阳性菌包括葡萄球菌、链球菌等。
这类细菌能在治疗性的延续性用药下适度存活。
（2）革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌则是指革兰氏润湿的时候是红色的细菌，单层数细胞壁，比革兰氏阳性菌的致病能力更强，但是也更容易受到抗菌素或药物的影响。
这类细菌包括大肠杆菌、沙门氏菌等。
2. 真菌的分类真菌是一种含有真核细胞核的微生物，包括酵母菌和菌丝菌两类。
（1）酵母菌酵母菌是一种单细胞真菌，能在酵母天然的酵母营养生长，大部分为革兰氏染色阳性，不表现形成孢子的原始生长特性。
酵母菌包括念珠菌、假丝酵母等。
（2）菌丝菌菌丝菌是一类多细胞真菌，其细胞由菌丝组成，通常由菌落分离。
它们通常是真菌，因为它们在呼吸和生长条件下形成的真菌菌丝。
菌丝菌包括白色念珠菌、曲霉菌等。
二、微生物培养微生物培养是微生物检验中的重要环节，通过在适当的培养基上提供适当的温度、湿度、氧气和营养物质，使微生物在含有以上条件的环境中进行繁殖和生长。
1. 培养基的分类与特点培养基是一种含有适量营养成分的物质，用于微生物的生长和繁殖。
根据不同的需求和用途，培养基可分为富营养基、简单基、选择基和不同温度适应基等。
微生物学各章知识点总结
微生物学各章知识点总结第一章：微生物的概念和分类体系1. 微生物的概念微生物是指肉眼不可见的微小生物体，包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。
它们在自然界中广泛分布，对生态系统的循环和平衡起着重要作用。
2. 微生物的分类体系微生物按照生物学特征可以分为原核生物和真核生物两大类，其中原核生物包括细菌和蓝藻，真核生物包括真菌和原生动物。
此外，病毒是一种非细胞生物，通常被单独归类。
第二章：微生物的结构和形态1. 细菌的结构和形态细菌是单细胞微生物，其主要结构包括细胞壁、细胞膜、胞质和遗传物质。
细菌的形态多样，包括球菌、杆菌和螺旋菌等。
2. 真菌的结构和形态真菌是多细胞或单细胞微生物，其主要结构包括菌丝、分生子、孢子和细胞壁等。
真菌的形态多样，包括酵母菌、霉菌和子囊菌等。
3. 病毒的结构和形态病毒是非细胞微生物，其主要结构包括蛋白质外壳、遗传物质和蛋白质套等。
病毒的形态多样，包括线状、球状和多棱体等。
第三章：微生物的生长和繁殖1. 细菌的生长和繁殖细菌的生长是指细胞的增加和分裂过程，主要包括营养摄取、分裂和排泄等。
细菌的繁殖有二分裂、分裂和梭孢子等方式。
2. 真菌的生长和繁殖真菌的生长是指菌丝的延伸和分支过程，主要包括分生子的产生和分裂等。
真菌的繁殖有无性生殖和有性生殖两种方式。
3. 病毒的生长和繁殖病毒的生长是指在寄主细胞内复制遗传物质和合成蛋白质，主要包括吸附、穿透和复制等。
病毒的繁殖有裸核和包膜两种方式。
第四章：微生物的代谢和营养1. 细菌的代谢和营养细菌的代谢包括异养和自养两种方式，同时也可根据在氧气的存在下进行厌氧和需氧代谢。
细菌的营养包括糖类、氨基酸和脂肪等多种。
2. 真菌的代谢和营养真菌的代谢包括异养和自养两种方式，同时也可根据生长温度进行低温菌和高温菌。
真菌的营养包括糖类、氨基酸和无机盐等多种。
3. 病毒的代谢和营养病毒是非细胞生物，因此没有自身代谢和营养循环，其复制和生长需要依赖寄主细胞的物质和能量。
第一章微生物检验基本知识
第一章微生物检验基本知识包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。
接种、分离纯化和培养技术一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
１、接种工具和方法接种和分离工具1．接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀常用的接种方法有以下几种：１）划线接种这是最常用的接种方法。
即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。
常用的接种工具有接种环，接种针等。
在斜面接种和平板划线中就常用此法。
２）三点接种在研究霉菌形态时常用此法。
此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。
除三点外，也有一点或多点进行接种的。
３）穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。
做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。
用的培养基一般是半固体培养基。
它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
４）浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。
待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。
５）涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。
６）液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。
７）注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。
８）活体接种活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。
微生物学检验重点知识总结
微生物学检验重点知识总结微生物学是研究微生物的结构、生理、生化、生态以及与人类和环境的关系的一门学科。
在微生物学检验中，掌握以下重点知识是非常重要的。
1.微生物分类学：微生物可以分为原核生物和真核生物。
原核生物包括细菌和古细菌，真核生物包括真菌、原生动物和线虫等。
了解微生物的分类和命名体系，对于正确识别和鉴定微生物是至关重要的。
2.微生物培养技术：微生物的培养是检验微生物的基础。
掌握常见的微生物培养方法，如液体培养、平板培养和深层培养等，并了解培养基的配制和消毒操作的方法。
3.微生物的生长特性：微生物的生长特性包括生长曲线、生长速率、最适生长温度和最适生长pH等。
了解微生物的生长特性对于选择合适的培养条件和进行微生物检验是非常重要的。
4.微生物的鉴定方法：微生物的鉴定是微生物学检验的重点。
常见的微生物鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、免疫学检测和分子生物学检测等。
掌握常用的微生物鉴定方法和技术，可以准确快速地鉴定微生物。
5.微生物与人类健康的关系：微生物在人类健康中起着重要作用。
了解微生物对人类健康的影响，如微生物的致病机制、致病微生物的鉴定和抗微生物药物的应用等，有助于预防和治疗微生物引起的疾病。
6.微生物在环境中的作用：微生物在环境中起着重要的生态作用。
了解微生物在土壤、水体和大气中的功能和影响，对于环境保护和资源利用具有重要意义。
7.微生物学检验方法：微生物学检验方法包括微生物计数、微生物培养、抗微生物药敏试验、细菌鉴定和病毒检测等。
掌握常见的微生物学检验方法和技术，能够准确、快速地检测微生物。
8.检验结果的解读和分析：对于微生物学检验结果的解读和分析是非常重要的。
了解常见的微生物学检验参数和阈值，能够根据检验结果判断微生物的致病性和药物敏感性等。
总结起来，微生物学检验的重点知识包括微生物的分类和命名、微生物培养技术、微生物的生长特性、微生物的鉴定方法、微生物与人类健康的关系、微生物在环境中的作用、微生物学检验方法以及检验结果的解读和分析等。
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【微生物学检验】知识点整理（第一部分）简述致病菌引起全身感染后，常见的几种类型？答：①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症试述构成细菌侵袭力的物质基础。
答：①荚膜②黏附素③侵袭性物质简述病原菌感染机体后，机体如何发挥抗菌免疫功能？答：首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构，血脑屏障，胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。
7-10 天后，机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌简述细菌耐药性产生的主要机制。
答：①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力，在这种压力的作用下，原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来，并不断扩大。
举例说明细菌命名的原则。
答：细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。
一个细菌种的学名由两个拉丁字组成，属名在前，用名词，首字母大写；种名在后，用形容词，首字母小写；两者均用斜体字。
中文译名种名在前，属名在后。
如 Mycobaterium tuberculosis （结核分枝杆菌）。
属名亦可不将全文写出，只用第一个大写字母代表，如 M. tuberculosis如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。
答：①直接镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报告疑为葡萄球菌，需进一步分离培养鉴定。
②分离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需连续观察 7 天，并以血平板确定有无细菌的生长。
脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37 C过夜，可形成直径约 2-3mm、产生不同色素的菌落。
金葡菌菌落周围有透明溶血环。
③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定， SPA 检测。
致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性，甘露醇发酵试验阳性，耐热核酸酶试验阳性，SPA 检测有 A 蛋白的存在。
什么是不耐热肠毒素（LT）?它的物理性质、基本结构、致病机理及与霍乱毒素（ CT）的关系如何。
答： LT 是肠产毒型大肠杆菌产生的致病物质，因对热不稳定，故称为不耐热肠毒素。
其65 C 30min 可被破坏。
LT分为LT- I和LT- n, LT- H与人类疾病无关，LT- I是引起人来胃肠炎的致病物质。
其结构包括1个A亚单位和5个B亚单位，其中A亚单位是毒素的活性部分。
B 亚单位与肠粘膜上皮细胞表面的 GM1 神经节苷脂结合后，使 A 亚单位穿越细胞膜与腺苷环化酶作用，令胞内 ATP 转变为 cAMP 。
胞质内 cAMP 水平增高后，导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同时钠的吸收减少，导致可持续几天的腹泻。
LT- I与霍乱肠毒素两者间的氨基酸的同源性达75%，他们的抗原高度交叉。
什么是 O157 ： H7 大肠杆菌?其致病物质和所致疾病是什么?答： O157 ：H7 为肠出血性大肠杆菌的一个血清型，为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。
其致病物质是其表达的志贺毒素。
如何根据 O 抗体和 H 抗体的变化特点判断肥达试验的结果？答：若 O 、H 凝集效价均超过正常值，则肠热症的可能性大，若两者均低，肠热症的可能性小，若 O 不高 H 高，可能预防接种或非特异性回忆反应，若 O 高 H 不高，则可能感染早期或与伤寒沙门菌 O 抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。
对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么？答 :根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。
肠热症第1、2 周取外周血，第 2、3周取粪便、尿液，全程可取骨髓分离培养细菌。
简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规及快速方法。
答：常规鉴定：①初步鉴定②最后鉴别③鉴别试验④血清学鉴定⑤非典型菌株可用传代法及毒力试验进行鉴定。
快速诊断：①直接凝集②免疫荧光菌球法③协同凝集试验④乳胶凝集试验⑤分子生物学方法幽门螺杆菌与空肠弯曲菌的异同？答： 1. 尿素酶试验 2.产生大量尿素酶 3. 婴幼儿腹泻霍乱患者为什么会出现剧烈腹泻及严重脱水的症状？答：霍乱弧菌可产生致泻性极强的霍乱肠毒素，该毒素由 1 个 A 亚单位和 5 个相同的B 亚单位组成， B 亚单位使毒素分子与真核细胞上的受体结合， A 亚单位具有酶活性功能。
A 亚单位进入细胞后，激活腺苷环化酶，令胞内 cAMP 水平增高，导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同时钠的吸收减少，导致严重的腹泻和呕吐。
假单胞菌属的代表菌种是何菌？其生物学性状有何特点？v答：铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种。
其生物学特性主要有 4 C不生长，而42 C生长。
在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成 5 种不同形态的菌落，在普通培养基上可产生多种色素。
非发酵菌鉴定原则及初步分群试验答：分群依据：①氧化酶试验②葡萄糖氧化发酵③动力④麦康凯培养基上生长情况。
假单胞菌的概念及其共同特点答：假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性菌，氧化酶试验阳性，多为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。
其共同特点是：革兰阴性、直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞、有荚膜，多数有鞭毛，专性需氧，生长温度范围广，最适生长温度35 C,少数能在4 C或42 C生长。
生长中可产生各种水溶性色素。
简述铜绿假单胞菌的检验方法答：①标本的采集：按疾病和检查目的，采取不同的标本。
②标本直接检查：直接显微镜检查；抗原检测；核酸检测。
③分离培养和鉴定。
简述白喉棒状杆菌的致病过程。
答：白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜，有时皮肤、结膜等部位也可见到。
传染源为患者及带菌者，细菌多随飞沫或污染的物品传播，感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素，引起局部炎症和全身中毒症状。
白喉杆菌在侵犯局部增殖，产生外毒素致病。
简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法及结果判断。
答：①琼脂平板毒力试验。
将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中，每只平皿10ml , 50 C冷却，在凝固之前，将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内，制成平板（Elek 平板）。
在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种，划线宽度约6-7mm ，两端与皿壁连接。
同时，与之相距 10mm 处平行划线接种一标准产毒菌株，作为阳性对照。
37 C培养24-48 小时，若菌苔两侧出现斜向外延伸的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则为产毒株。
② SPA协同凝集试验：将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上，再加入待检菌培养物上清液。
若有白喉外毒素，则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。
③对流电泳：将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中，电泳30min 后，若两孔之间出现白色沉淀线，表明待检菌为产毒株。
临床上对疑似的炭疽患者怎样鉴定病原。
答：若从标本中检出革兰阳性大杆菌，两端平截、呈竹节状排列，并有明显荚膜，在人工培养基上生长可产生芽孢，呈卵圆形，小于菌体，位于菌体中央；在普通琼脂平板上形成灰白色、扁平、干燥、无光泽的菌落；动力阴性，牛乳凝固试验、噬菌体裂解试验、串珠试验和青霉素抑菌试验均为阳性，则可报告：“检出炭疽芽胞杆菌” 。
有条件者可应用 DNA 探针，其敏感性高，特异性强。
其他鉴定试验作为参考指标，可根据具体情况酌情选做。
同时应注意与其它芽胞杆菌相鉴别。
简述结核菌素试验的原理、方法及结果分析和实际应用。
答：（ 1 ）原理：结核菌素试验属于迟发型超敏反应，用结核菌素试剂作皮肤试验，感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者，一般都出现阳性反应。
（2 ）方法：取 5UPPD 或 OT0.1ml 注射于前臂掌侧皮下，经 48— 72h 检查反应情况。
应特别注意局部有无硬结，不能单独以红晕为标准。
（3）结果分析：①阳性注射部位硬结、红肿直径 0 • 5 — 1 . 5cm之间。
这表明机体曾感染过结核，出现超敏反应，但不表示正患结核病；②强阳性硬结直径超过1 • 5cm 以上，表明可能有活动性结核，应进一步检查；③阴性注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于0 • 5cm，说明无结核感染，但应考虑下述情况：如受试者处于原发感染的早期，或正患有其他传染病（如荨麻疹等）、霍奇金病、结节病、艾滋病。
（4）应用：①选择 BCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCG:②结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用；③可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查；④可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。
结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高，这一特点有何意义？答：结核分枝杆菌胞壁含脂质多，与其染色性、抵抗力、生长速度及致病性等特性有密切关系，脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性；细胞壁含大量脂质，可防止菌体内水分的丢失，故对干燥的抵抗力特别强；同时影响营养物质的吸收，故生长缓慢，且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。
简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。
答： 1．显微镜检查 (1)直接涂片染色镜检：是一种临床常用的简易快速的检查方法。
直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀(3000r ／ min ， 20min) 的尿沉淀物 2— 3 接种环涂片，涂片要厚。
经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色，或作金胺“o ”荧光染色。
前法用油镜检查，后法用荧光显微镜高倍镜检查。
镜检时应仔细查遍整个涂片或观察至少 100 个视野。
结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色，其它细菌和细胞为蓝色。
经荧光染色的结核分枝杆菌，在黑色背景中呈亮黄色。
涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌''或“未找到抗酸性杆菌” ，而不能报告“找到结核分枝杆菌” 。
(2) 浓缩集菌涂片检查法：如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌，应采用浓缩集菌涂片检查法，以提高结核杆菌的检出率。
所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心，取沉淀涂片，或是采用漂浮集菌法，集菌后标本经反复多次使涂层加厚，一般取 3— 4个接种环，涂抹面积大约直径在 15mm 即可，干燥固定后染色镜检。
2．核酸检测用 PCR 法快速诊断结核分枝杆菌感染。
设计结核分枝杆菌特异 rRNA 片段的引物进行扩增，然后用结核分枝杆菌rRNA 序列特异的 DNA 探针与之杂交。
PCR技术的特异性与敏感性均大于 95 %。
3 .抗PPDIgG的检测用ELISA法检测患者血清中抗 PPDIgG ，可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一。
肺结核病人的血清阳性率为 80%— 90%。
简述抗酸染色的步骤及结果，并举出两种抗酸菌。
答：①初染：石炭酸复红加温染 5min②脱色：3%的盐酸酒精脱色1min③复染：美兰染 1min 结果：抗酸菌为红色，非抗酸菌为蓝色。