微生物酵素美白抗衰老功效研究

香料香精化妆品 2008年 6 月第 3期
FLAVOUR FRAGRANCE COSMETICS June, 2008, NO1 3
研究报告
微生物酵素 是以新鲜蔬菜、水果为原 料, 经 多 种益生菌发酵而产生的, 含有丰富的酶、维生素、矿 物质和次生代谢产物的微生物制剂。
本实验采用体外实验和人体实验, 对微生物酵 素的美容功效进行评价, 包括酵素的美白功效和抗 衰老功效。 1 材料与方法 1. 1 仪器和试剂 1. 1. 1 主要仪器
分光光度计, 型号 UV2300, 上海天美科学仪器 有限公司; 皮肤黑素和血红素测试仪, 型号 Mexam2 et er MX18, 德国 CK 电子公司; Skin Visiometer, 型 号 SV600, Courge+ Khazaka Cologne Ger many。 1. 1. 2 主要材料和试剂
DPP H 清除率= 100% @[ 对照- ( 样品- 空白 + 水) ] / 对照。 1. 5 人体皮肤纹理度实验
测试对象与测试方法同 1. 3. 3, 受试者使 用凝 胶为 1. 3. 2 中配制成的酵素凝胶。受试者在连续使 用酵素凝胶一周、两周、三周、四周、五周、六周、七 周和八周后, 使用皮肤图像分析系统( Skin Visiom2 et er SV600) 测拍实验部位涂抹化妆品前后的 皮肤
Abstr a ct T his experiment was to evaluate the skin2whit ening and anti2aging efficacy of microbial ferment thr ough vit ro exper i2 ment and human exper iment. The micr obial ferment t yrosinase act ivit y inhibit ion exper iments proved that the paste micr obial ferment had a stronger inhibition to tyrosinase. T he t yrosinases inhibitory rates of 1% , 2% , and 5% paste microbial fer ment wer e 88. 41% , 96. 35% , and 99. 87% r espectively, and the t yrosinase inhibitor y rates of powdery micr obial ferment were nega2 t ive. M easure the smear site with the measur ement instrument s ever y week to show the change of the melanin. The r esults show that both of them have the skin2whitening efficacy, but the paste microbial fer ment's efficacy is better than t he powdery microbial ferment. Antioxidation experiment proved the paste micr obial ferment was a good antioxidant. The skin vein exper i2
表 1 酪氨酸酶抑制实验体系加样表
试剂 P BS
C1 / mL 2
C2/ m L 2. 5
T 1/ mL 1
T2 / mL 1. 5
样品
0
0
1
1
L2 酪氨酸
1
1
1
1
酪氨酸酶液
0. 5
0
0. 5
0
酪氨酸酶抑制率= ( 空白对照吸光度值- 样品 吸光度值) / 空白对照吸光度值 @100% 1. 3 酵素美白功效人体实验
关键词
微生物酵素 美白 抗衰老 化妆品
Evaluation of Skin2whitening and Anti2aging Efficacy of Micr obial Ferment REN Qi ng 1 YU X ia oya n1 P AN Yan1 LI U J ie2 H U Yingj ie2 DON G Yi nmao1 ( 1. Beijingபைடு நூலகம்Key Laborat ory of Plant Resources Research and Development, Beijing Technology and Business Uni2 versity, Beijing 100037, China; 2. Polo Biology Science Park Co. , Ltd. , Beijing 101113, China)
1. 2. 2 实验操作 实验方法基本按照参考文献[ 1] 进行, 稍加改动。
具体为: 在各试管中分别加入磷酸缓冲液( pH 6. 8, 0. 1 mol/ L) 、样品液、酪氨 酸溶液。置于 37 e 水浴 中 10min, 然后加入酪氨酸酶, 再于 37 e 水浴中反应 10min, 在 475nm 下测吸光度值。实验体系设计见 表 1, C1 为空白 对照, C2 用于空 白调零, T1 为 样品 管, T 2 用于样品调零。
四周、五周、六周、七周和八周后, 使用皮 肤黑素和
血红素测试仪测试皮肤颜色的变化。
½ 受试者将涂抹部位洗净, 由测试者使用皮肤
黑素和血 红素测 试仪测 定涂 抹部位 的黑 素含 量。
每点测五次, 取平均值。
¾ 统计受试者实验部位每次测得的数值, 分析
其皮肤黑素和血红素变化规律。
1. 4 酵素的抗氧化功效评价
人体实验一般以人体前臂皮肤为受试部位, 以 避免光照对于皮肤 色度的影响。将美白剂涂于 人
体皮肤上, 用皮肤颜色测定仪观察涂敷美白剂前后
肤色的变化, 评价美白效果。皮肤肤色的测定可使
用 Mexamet er MX18 皮肤 黑素血红素检 测仪进行
检测。
1. 3. 1 粉状酵素预处理
由于粉状酵素中含有不溶于水的成分, 所以在
( 1) 测试对象
受试者是平均年龄为 23 岁的在校大学生, 其中
男生 20 名, 女生 16 名, 共 36 名。所有受试者测试
部位均为无红斑 或色素斑等影响判断结 果的健康
皮肤。
( 2) 测试方法
¹ 选择受试者左、右手臂内侧距 手掌基部 10
公分处为实验部位, 左手臂内侧距手掌基部 15 公分
处为对照空白部位。
º 首先使用皮肤黑素和血红素测试仪测定实
验部位涂抹化妆品前的黑素含量。每点测五次, 取
平均值。
» 受试者在左手臂实验部位涂抹膏状酵素凝
胶, 右手臂实 验部位涂抹粉状酵 素凝胶, 每天早晚
涂抹两次; 空白部 位不涂抹化妆品。实验期间, 受
试者在实验部位不能涂抹其它任何化妆品。
¼ 受试者在连续使用化妆品一周、两周、三周、
纹理的变化, 记录拍照。每次测试时受试者将涂抹
表 2 抗氧化实验体系加样表
部位洗净。最后观察受试 者实验部位每 次的测试
样品
抗氧化剂 0. 1
H 2O 0. 9
DP P H 2
照片, 分析其皮肤纹理的变化规律。 2 结果与分析
空白
0. 1
2. 9
0
对照
0
1
2
常 温 静 置 45min, 然 后 在 520nm 下 测 其 吸 光度。
配制化妆品之前要先将粉状酵素进行预处理, 目的
是除去其中的不溶性成分。粉状酵素预 处理流程
为: 于去离子水中加入一定量酵素, 放 入 37 e 水浴
搅拌 10min, 然后在 8000 r/ min 下离心 10min, 便得
到粉状酵素预处理液。
1. 3. 2 酵素凝胶的配制
分别把膏状酵素和粉状酵素配制成凝胶, 配制
2. 1 酪氨酸酶抑制实验 采用吸光光度法测定 膏状酵素和粉 状酵素对
酪氨酸酶的抑制率。从表 3 的实验结果可以看出, 膏状酵素对酪氨酸酶的抑制率都高于 80% , 而且随 着浓度的升高而升高, 5% 膏状酵素对酪 氨酸酶的 抑制率接近 100% , 说明膏状酵 素能有效地阻断黑 素的形成。不同浓度的粉 状酵素对酪氨 酸酶的抑 制率测得为负值或很小( 多次测量结果稍有差别) 。 将粉状酵素分次称量, 慢慢溶解, 37 e 下恒温 16 个 小时, 进行活化, 离心后取上清液测定, 效果仍然不 好, 抑制率仍为负值。因此推断粉状酵素本身可能 含有酪氨酸酶, 其美白机理有待进一步研究。
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微生物酵素美白抗衰老功效研究
作者
1. 北京工商大学植物资源研究开发重点实验室, 北京 100037; 2. 北京保罗科技发展有限公司, 北京 101113
……………………………………………………………… 任 清1 于晓艳1 潘 妍1 刘 杰2 胡英杰2 董银卯1
流程为: 称取 2% 的膏状酵素( 或 2% 的粉状酵素预
处理液) 、4% 甘油、3% 丙二醇、0. 3% 水 溶霍 霍巴
油, 加入去离 子水至 98% , 搅 拌 10min 后, 再 加入
0. 5% LGP 和 1. 5% AVC, 搅拌至所有物质混合均
匀, 即得凝胶。
1. 3. 3 人体测试方法
采用 DP PH 法, 检测酵素的总抗氧化能力, 按
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照参考文献[ 2] 的方法稍加改动。具体方法为:
膏状酵素和粉状酵素, 由北京保罗科技发展有 限公司提供; 酪氨酸酶, 购于美国 sigma 公司; DP2 P H , 以无水乙醇作溶剂, 浓度为 0. 1777mol/ L。其 它试剂为常规试剂。 1. 2 酪氨酸酶抑制实验 1. 2. 1 样品处理
分别配制浓度为 1% 、2% 和 5% 的膏状酵素和 粉状酵素溶液, 其中 膏状 酵素水 溶性 好可 直接 溶 解, 粉状酵素水溶 性不好, 经 搅拌、混 匀、离心等 处 理后吸取澄清部分待测。
皮肤中同样也含有多种酵素, 它们能促进表皮 细胞的新陈代谢, 消化 分解老化细胞, 加速其正 常
收稿日期: 2007211205
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的脱落过程, 以及促进真皮纤 维的再生和皮 脂腺、 汗腺的分 泌。酵素既 可清洁皮肤、去除油脂、消除
青春痘、淡化皱纹, 也能彻底改善肌肤状况, 使其紧 实、细致、有光泽。更重要的是, 酵素能为皮肤细胞 带来活力, 加快其新陈代谢, 对污垢、死细胞也有分 解去除作用。对于老化或病变的皮肤, 酵素能起到 复活作用, 可赋予细胞活力, 加速血液循环, 并使肌 肤长时间保持湿润。随着年龄的增大, 酵素会相对 减少, 这时, 就会出现皮肤问题。因此, 酵素成为一 类新兴的化妆品功效添加剂。
ment proved both of them had the ability of anti2aging. Key wor ds microbial fer ment skin2whit ening anti2aging cosmetic
酵素( enzyme) , 又称为/ 酶0, 是生物体内 的催 化剂。人体内 有许多种酵素, 它们互 相协同, 使 人 体的新陈代谢、能量摄 取、成长和 繁殖等生命现 象 能够有条不紊地进 行。所以身体 中酵素的多少 及 其活性高低, 对人体的青春、健康、衰老及疾病有重 要影响。
作者简介
任清( 19692) , 男( 汉) , 河北康保 人, 讲师, 博士, 联系电话: 010268984940
摘要
本实验通过体外实验和人体实验两种方法, 对酵素 的美白抗衰老功效进行研究。酵素酪氨酸酶抑制 实验中, 浓度为 1% 、 2% 和 5% 的膏状酵素酪氨酸酶抑制率分别为 88. 41% 、96. 35% 和 99. 87% , 粉状 酵素对 酪氨酸 酶的抑制 率为负 值; 利 用黑色 素和血红素测定仪定期测定受试者涂抹区域黑色素变化, 实验 证明, 添加 膏状酵 素和粉状 酵素凝 胶均有 美白作 用, 且 膏状酵 素美白作用优于粉状酵素。 抗氧 化实 验证 明 膏状 酵素 有 好的 抗氧 化 能力。 皮肤 纹理 度 实验 说明 二 者都 有一 定 的抗 衰老 能力。