实验3：糖皮质激素的抗炎作用
糖皮质激素及其受体在细胞数量稳态调节方面的作用及机制
染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)是目前唯 一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法. 基本原理:在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复 合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染 色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀次复合 体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通 过对目的片段的纯化与检测,从而获得蛋白质 与DNA相互作用的信息. 该方法可以用来研究组蛋白的各种共价修饰 与基因表达的关系.
在以往研究GR对细胞增殖和凋亡调节的基础 上，选择了一些参与细胞增殖、凋亡和变形 运动的重要信号转导蛋白，研究了GC对它们 的表达/活性的影响，发现了以下一些表达受 GC调节的GR功能性靶基因。 小G蛋白RhoB
TGFβ1II型受体（TβRII） 信号调控蛋白（SIRPα）
1.小G蛋白RhoB
二、GC/GR通过调节基因表达发挥抑 制细胞增殖和抗细胞凋亡作用
作为转录调节因子，GR主要通过调节基因表 达介导GC的作用 GR促进或抑制基因表达的作用可以发生在转 录和转录后水平 目前了解比较多的是GR介导的转录调节。
Байду номын сангаас
（一）GC/GR调节基因转录的机制
迄今对GR调节基因转录的过程已有较深入的 研究，已证明没有与配体结合时GR主要存在 于胞浆，GC与GR结合可以导致其激活，激活 的GR转入核内，通过以下方式调节基因转录：
通过蛋白质－DNA相互作用直接调节靶基因转 录 通过蛋白质－蛋白质之间的相互作用间接调 节靶基因转录
1.通过蛋白质－DNA相互作用直接调节 靶基因转录
配体结合的GR在核内与靶基因启动子(promoter)中 具有增强子作用的糖皮质激素反应元件 （glucocorticoid response element, GRE ）结合， 在该部位募集转录辅因子（如共激活因子），对组 蛋白进行部位特异性的修饰，使染色质从紧密的抑 制状态转为疏散的易于转录的激活状态。 之后，核受体与RNA聚合酶II以及通用转录因子 （GTF）相互作用，直接促进基因的转录； 或者通过与负性的GRE（nGRE）结合，取代该部位 原有的转录因子，抑制靶基因的转录。
《围手术期糖皮质激素医-药专家共识》
围手术期糖皮质激素医-药专家共识外科手术创伤可刺激机体产生一系列应激反应，引起组织损伤、缺血缺氧、炎症反应等。
糖皮质激素（glucocorticoids，GCs）作为机体应激反应最重要的调节激素，在应激状态下分泌会增加。
围手术期加速康复外科（enhanced recovery after surgery，ERAS）的主要目的是优化围手术期的处理措施，降低手术应激反应，减少术后并发症，缩短住院时间，促进患者快速康复[1]。
在某些特定情况下给予机体外源性GCs是ERAS主要治疗措施之一。
GCs可以抑制术后炎症反应，提高机体对缺血缺氧的耐受能力，调节心肺功能，减少呼吸系统及各脏器的并发症。
但GCs的使用也增加术后感染风险、延缓伤口愈合、诱发应激性溃疡、高血糖、高血压等不良反应。
因此，GCs在围手术期的应用需要权衡利弊，严格把握适应证、规范用药、并注意监测不良反应。
2015年广东省药学会提出设立外科药师，2021年开始构建外科药师的知识体系——外科药学（surgical pharmacy），让外科药师全面管理围手术期用药。
作为ERAS管理措施应用药物之一，GCs的合理使用需要临床、药学等多学科共同管理。
本专家共识拟通过医师、药师的共同讨论，结合最新研究进展，对GCs在肾上腺皮质功能正常患者的围手术期应用进行总结归纳，以期为外科医师和外科药师合理应用GCs提供参考，并作为药师进行合作药物治疗管理的协议样本。
1 糖皮质激素的药理作用GCs的靶细胞分布于全身各个组织脏器器官，作用广泛而复杂，其影响随应用剂量不同而异。
主要的药理作用包括以下几个方面。
1.1对代谢的影响（1）糖代谢：①促进糖原异生；②减慢葡萄糖分解；③减少机体组织对葡萄糖的利用。
（2）脂质代谢：大剂量长期应用可升高血浆胆固醇，促使皮下脂肪分解和脂肪的重新分布，表现为向心性肥胖。
（3）蛋白质代谢：加速蛋白质分解代谢，造成负氮平衡。
（4）水和电解质代谢：有较弱保钠排钾作用；还能促进尿钙排泄，长期用药将造成骨质脱钙。
糖皮质激素的药理作用及副作用
糖皮质激素的药理作用及副作用☞药理作用药理作用备注抗炎糖皮质激素有强大的抗炎作用，能对抗下述各种原因引起的炎症：①物理性损伤，如烧伤、创伤等；②化学性损伤，如酸、碱损伤, ③生物性损伤，如细菌、病毒感染，④免疫性损伤，如各型变态反应，⑤无菌性炎症，如缺血性组织损伤等。
在各种急性炎症的早期，应用糖皮质激素可减轻炎症早期的渗出、水肿、毛细血管扩张、白细胞浸润和吞噬等反应，从而改善炎症早期出现的红、肿、热、痛等临床症状；在炎症后期，应用糖皮质激素可抑制毛细血管和成纤维细胞的增生，抑制胶原蛋白、粘多糖的合成及肉芽组织增生，从而防止炎症后期的粘连和瘢痕形成，减轻炎症的后遗症。
但必须注意，炎症反应是机体的一种防御功能，炎症后期的反应也是组织修复的重要过程，故糖皮质激素在抑制炎症、减轻症状的同时，也降低了机体的防御和修复功能，可导致感染扩散和延缓创口愈合。
免疫抑制与抗过敏糖皮质激素对免疫反应有多方面的抑制作用，能缓解许多过敏性疾病的症状，抑制因过敏反应而产生的病理变化，如过敏性充血、水肿、渗出、皮疹、平滑肌痉挛及细胞损害等，能抑制组织器官的移植排异反应，对于自身免疫性疾病也能发挥一定的近期疗效。
糖皮质激素免疫抑制作用与下述因素有关：①抑制吞噬细胞对抗原的吞噬和处理；②抑制淋巴细胞的DNA、RNA和蛋白质的生物合成，使淋巴细胞破坏、解体，也可使淋巴细胞移行至血管外组织，从而使循环淋巴细胞数减少。
③诱导淋巴细胞凋亡。
④干扰淋巴细胞在抗原作用下的分裂和增殖；⑤干扰补体参与的免疫反应。
动物实验表明，小剂量糖皮质激素主要抑制细胞免疫；大剂量可干扰体液免疫，可能与大剂量糖皮质激素抑制了B细胞转化成浆细胞的过程，使抗体生成减少有关。
近年研究还认为糖皮质激素可抑制某些与慢性炎症有关的细胞因子(IL-2，IL-6和TNF-α等)的基因表达。
抗休克超大剂量的糖皮质激素已广泛用于各种严重休克，特别是中毒性休克的治疗。
其作用可能与糖皮质激素的下列机制有关：①稳定溶酶体膜(membrane of lysosome)，阻止或减少蛋白水解酶(proteinase)的释放，减少心肌抑制因子(myocardio-depressant factor，MDF)的形成，避免或减轻了由MDF引起的心肌收缩力下降、内脏血管收缩和网状内皮细胞吞噬功能降低等病理变化，阻断了休克的恶性循环。
激素类药物的抗炎作用
第__1_次课 第__2_次课 第__3_次课 课程名称
教员
药理实验 刘霞
授课时间__2007-12-24_
教案完成时间：2007-12-20
授课时间__2007-12-25
授课时间__2008-01-24
年级
05 级 04 级
专业、层次
军海麻 05 级 八年制 04 级
专业技术
职务
讲师
授课方式 实验课 学时
3
授课题目
激素类药物的抗炎作用
基本教材或主要参考书
1、《药理学实验》上海第二军医大学出版 刘建国等主编 2、《药理实验方法学》人民卫生出版社第二版 徐叔云等主编
3、《药理学》 人民卫生出版社第六版 杨宝峰主编
教学目的与要求： 1、了解制备大白鼠炎症模型的一种方法。 2、观察药物的抗炎作用。
大体内容与时间安排，教学方法：
实验步骤： 1．动物麻醉： 大白鼠 2 只，秤重，标记
2．激素给药： 一只腹腔注射氢化考的松（30mg/kg），另外一只注射同体积的 40％生理盐水作为对照
3．正常关节排水量测定：皮尺量 2 只大鼠的踝关节周长，作为基础值
4．炎症模型制备：激素给 要后半小时，从大 白鼠左后足掌部向 踝关节皮下注 射新鲜鸡蛋清 0.1ml
年月日
第1页 共4页
基 本内容 实验名称 ：激素类药物的抗炎作用
实验目的 ：1．了解制备大白鼠炎症模型的一种方法。 2．观察药物的抗炎作用。 3．掌握糖皮质激素抗炎作用的机制
（教案续页） 辅助手段和 时间分配
实验原理：
1．致炎原理： 致炎物质注入大白鼠的踝关节处，由于异性蛋白反应引起大白 鼠踝关节处发炎肿胀。
5．于注射蛋青后 15min，30min，60min 测量踝关节周长，作为踝关节排水量。
非甾体抗炎药和糖皮质激素
1. 胃肠道损害
• 临床表现：胃十二指肠糜烂、溃疡及威胁生命的 胃肠穿孔和出血，也可引起上腹疼痛、恶心消化 不良、食管炎及胶原性结肠炎。
• 出血相关的高危因素, 即:高龄、同时使用皮质激 素、消化性溃疡病史、大剂量使用NSAIDs、胃 肠道功能低下、同时使用抗凝剂、喝酒等 。
每年因NSAIDs引起消化道溃疡而住院的患者约11万人， 其中死亡1.6 万人。
6
历史回顾
➢ 1763年：Stone描述爆竹柳皮浸出液治疗发热和间日疟 ➢ 1860年：合成了水杨酸 ➢ 1899年：德国拜耳公司Hoffman合成了乙酰水杨酸 ➢ 1952年：保泰松问世，开始使用NSAIDs名称 ➢ 1960年：吲哚乙酸类药物—吲哚美辛上市 ➢ 1971年：John Vane等发现NSAIDs抑制COX，使PGs产生减
➢ 根据其对环氧酶(Cyclooxygenase，COX)、脂氧酶的作用强度分为 COX抑制剂、COX/脂氧酶抑制药。
➢ 根据其对COX-1和COX-2的作用的不同将其分为选择性COX-1抑 制剂(如低剂量阿司匹林)、非选择性COX-1抑制剂(如吲哚美辛、 吡罗昔康、双氯芬酸等)、选择性COX-2抑制剂(如尼美舒利、美 洛昔康等)及高度选择性COX-2抑制剂(塞来昔布、罗非昔布等)。
0.0015 1.6 0.028 4.8 0.082 0.214 1.57 9.5 7.0 >10
15 0.018 > 30
0.906 277.0 1.680 72.8 0.102 0.171 1.10 5.0 1.0 0.07 0.04 0.0015 0.007
600 173
68 15.16 1.25 0.08 0.70 0.58 0.143 < 0.07 0.0027 < 0.0013 < 0.0002
药理学课程教学大纲安徽医科大学基础医学院
一、课程简介（一）课程代码：（二）课程名称（含英文名称）：药理学实验（）（三）课程类别：专业基础课（四）修读对象：生物技术和生物科学专业（五）总学时与学分：其中实验27学时，1.5学分。
（六）相关课程：（七）内容提要本课程涵盖了药理学部分的模拟实验及经典实验项目，以大量的实验尤其是动物实验为基础，复制疾病动物模型，研究用药后的生物体功能活动变化及其规律，以巩固药理学及相关基础理论知识，进一步强化实验操作技术，提高动手能力，培养分析问题和解决问题的能力。
二、教学目的和教学方法（一）教学目的1 •加强学生的药理学基本理论、基本知识和基本技能的训练，培养理论联系实际和独立开展科学研究的能力。
药理学实验可以帮助学生验证药理学理论知识，巩固和加强对药理学理论的掌握；促进学生对药理学一些抽象概念的理解；了解药理学研究的一些基本方法，培养学生药理学实验设计和科研能力；初步掌握药物研究的基本技能，并且通过科研模拟实验加强学生的创新思维能力的培养。
2•药理学实验主要以学生在教师指导下自己动手操作为主，少量示教实验为辅，并且配合课堂讨论和多媒体等方法，达到既验证理论，巩固和加强药理学理论知识学习的目的，又要做到培养学生科研能力和创新思维的开发。
（二）教学方法采用课堂讲授、现场指导、模拟实验、双语教学、自主设计、病例讨论和课外训练等多种教学手段相结合的教学方法。
三、实践教学学时分配四、选用教材和主要教学参考书1. 陈志武,董六一，《药理学实验指导》,中国协和医科大学出版社，2013年10月2. 孔德虎，《医学机能学实验教程》，科学出版社，2009年2月。
五、实验教学内容实验一、动物捉拿及各种药方法（录像）主要讲授内容：介绍动物捉拿及各种给药方法教学时数：3 学时重点与难点：1. 小鼠、大鼠和家兔的捉拿方法。
2. 小鼠、大鼠和家兔常见的给药方法实验二、小鼠戊巴比妥钠50 和50 的测定主要讲授内容：50 及50的概念，其测定方法和小鼠腹腔注射的方法教学时数：4 学时重点与难点：1. 小鼠腹腔注射的方法。
糖皮质激素知识点
糖皮质激素知识点一、知识概述《糖皮质激素知识点》①基本定义：糖皮质激素呢，就是身体里一种很厉害的化学物质，就像身体里的小卫士一样。
它们是由肾上腺皮质分泌的。
简单来说，就像是身体自己制造的一种特殊药物，对很多身体机能有调节作用。
②重要程度：在医学里那可是相当重要哦。
在很多疾病的治疗上，它就像一把万能钥匙，能派上大用场呢，像抗炎、抗过敏、抗休克之类的都离不开它。
就比如治疗严重的过敏，没有它可能就搞不定了。
③前置知识：要了解糖皮质激素，你最好先知道一些基本的人体生理学知识，像内分泌系统大概是咋回事，肾上腺在身体哪个位置，起着什么样的基本作用。
不然的话，很容易听得云里雾里的。
④应用价值：在临床上可应用的场景太多啦。
比如说有个病人烧伤了很严重，身体炎症反应很强烈，这时候糖皮质激素就能帮着减轻炎症反应，减少身体的痛苦，有助于恢复。
再比如，那些有哮喘病老是发作的患者，糖皮质激素也能改善他们的症状。
二、知识体系①知识图谱：在医学学科里，糖皮质激素的知识属于内分泌和药理学这一块内容的重要部分。
可以说是联系体内调节和药物治疗的一座桥梁。
②关联知识：它和肾上腺素能药物、免疫抑制剂等知识都有联系呢。
就像在一个大家庭里，和很多兄弟姐妹都有关系。
比如说免疫抑制剂，有时候跟糖皮质激素一起配合，能更好地治疗像类风湿性关节炎这种自身免疫性疾病。
③重难点分析：掌握起来有点难的地方就是它适用的病症太多太杂了，要分清每个病症的具体用药方法和剂量可不容易。
关键点就是要理解它的作用机制，根据不同病症合理地使用。
④考点分析：在医学考试里很重要哦。
考试可能会问它的作用机制、典型病症的用药剂量、与其他药物的配伍等等。
像出个选择题，问糖皮质激素治哪种疾病的时候是禁忌的。
三、详细讲解【理论概念类】①概念辨析：糖皮质激素就是肾上腺皮质束状带分泌的一类甾体激素。
这里的甾体激素就像是一种有着特殊结构的化学物质。
它们在身体里就像小指挥官一样，对身体的生理功能、代谢等都有指挥调节作用。
抗炎药物及作用机理最新研究进展
抗炎药物及作用机理最新研究进展王棋文;宋德荣;李剑勇;于远光【摘要】抗炎药主要包括非甾体类抗炎药、甾体类抗炎药和中药.由于传统的抗炎药选择性较差,副作用明显,临床应用受到很大限制.近年来,随着人们对炎症机制认识的不断深入及分子生物学技术的广泛应用,一些疗效好、副作用小的新型抗炎药相继问世,应用于临床.作者主要对上述3种抗炎药物及其作用机理在近几年来的研究进展作一探讨分析.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2010(037)003【总页数】4页(P211-214)【关键词】非甾体类抗炎药;甾体类抗炎药;中药;抗炎机理【作者】王棋文;宋德荣;李剑勇;于远光【作者单位】毕节学院草业生态研究所,毕节,551700;贵州省毕节地区畜牧兽医科学研究所,毕节,551700;中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,兰州,730050;甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070【正文语种】中文【中图分类】S859.79炎症是具有血管系统的生物机体对损伤因子所发生的复杂的防御反应(李玉林,2004)。
当致炎因子作用于机体时,机体通过炎症反应消除致炎因子,这是一个损伤和抗损伤的过程。
许多常见疾病(如自身免疫性疾病、动脉粥样硬化、创伤修复等)都属于炎症范畴。
抗炎药是临床上仅次于抗感染药物的第2大类药物。
凡能消除炎症的药物统称为抗炎类药物,它能够阻断炎症介质的产生或释放,抑制炎性反应。
目前临床上应用抗炎药物大致可以分为3大类。
近年来,随着人们对炎症机制认识的不断深入及分子生物学技术的广泛应用,抗炎药物的研究已从“器官-组织”水平逐渐发展到细胞、分子水平,逐渐呈现出涉及药物品种更多、范围更广、水平比以往更高的局面。
因此通过对抗炎药物及其作用机理和毒性反应进行分析探讨,更加深入的了解炎性反应发生发展过程,对临床上治疗炎症、降低炎症的发生率具有积极的意义。
作者就近年来出现的抗炎药物及其作用机理的研究进展作一简要综述。
1 非甾体抗炎药非甾体抗炎药(NSAIDs)具有解热、镇痛、抗炎、抗风湿的作用。
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4、在各鼠 ip 药 、 分钟后， 物15分钟后，从右后 分钟后 足掌心向掌跖关节方 向皮下注射新鲜蛋清 0.1ml。 。
5、在注射蛋清后20min、 、在注射蛋清后 、 40min、 60min 、 80min ， 、 分别测量右后足的体积， 分别测量右后足的体积，记 录溢出液体的ml数 录溢出液体的 数。各鼠 致炎以后的体积减去正常的 体积， 体积，即为各个时间右后足 肿胀度。 肿胀度。
实验方法
3、将1号、2号两鼠右踝 、 号 号两鼠右踝 关节以下的突起点处用圆珠笔划 一圈作标志， 一圈作标志，依次将各鼠右后足 放入容积测量器内， 放入容积测量器内，使右后肢暴 露在筒外， 露在筒外，浸入的深度以划圈处 刻度重合为度。 与20ml刻度重合为度。该足进入 刻度重合为度 液体以后，液面升高， 液体以后，液面升高，液体自侧 管溢出，流入注射器中， 管溢出，流入注射器中，记录溢 出液体的ml数 出液体的 数。
鼠号 体重 药物 正常体积 致炎后的肿胀度 （g） ） （ ml ) 20min 40min 60min 80min
思考题
结合本次 实验结果， 实验结果，讨 论氢化可的松 的抗炎作用。 的抗炎作用。
实验三
糖皮质激素的抗炎作用
实验目的
观察蛋清的 致炎作用和糖皮 质激素的抗炎 作用。 作用。
实验材料
大鼠、 大鼠、大鼠后 足容积测量器、 足容积测量器、注 射器、新鲜蛋清、 射器、新鲜蛋清、 氢化可的松溶液、 氢化可的松溶液、 生理盐水等。 生理盐水等。
1、取大鼠 只，标记，称重，分 、取大鼠2只 标记，称重， 下列药物， 号鼠 号鼠： 别 ip下列药物，1号鼠：生理盐水 下列药物 1ml/kg , 2号鼠： 氢化可的松溶液 号鼠： 号鼠 15mg/kg (0.5%溶液 溶液3ml/kg)。 溶液 。 2、取带有侧管的大鼠后足容积 、 测量器（如图）， ），将注射器与侧管相 测量器（如图），将注射器与侧管相 盛入水， 处平齐。 连,盛入水，使液面与 盛入水 使液面与20ml处平齐。 处平齐