最新10细菌的生理生化反应汇总
细菌鉴定中常见的生理生化反应
实验五细菌鉴定中常见的生理生化反应16111202班史政伟1120122681一、实验目的1)了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。
2)了解不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况。
3)了解细菌在不同培养基的不同生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义。
二、实验原理各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。
以此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。
1.糖（醇）类发酵试验不同的细菌含有发酵不同的糖（醇）的酶，因而发酵糖（醇）的能力各不相同，产生的代谢产物也不同：有的产酸产气，有的产酸不产气。
指示剂溴甲酚紫，pH5.2黄色—pH6.8紫色，当发酵产酸时，培养基将由紫变黄。
产气可由杜氏小管中有无气泡来证明。
2.甲基红试验（M.R试验）甲基红试验，pH4.4红色～pH6.2黄色，是用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。
有些细菌分解糖类产生丙酮酸，丙酮酸进一步反应形成甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH降低到4.2以下。
有些细菌在培养的早期产生有机酸，但在后期将有有机酸转化为非酸性末端产物，如乙醇、丙酮酸等，使pH升至大约6。
3.Voges-Proskauer试验（伏-普试验，V.P. 试验）伏-普试验是用来测定某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力。
某些细菌分解葡萄糖成丙酮酸，再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性条件下，被氧化为二乙酰，二乙酰与培养基中所含的胍基作用，生成红色化合物为V.P.反应阳性。
4.靛基质试验某些细菌，如大肠杆菌，能产生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质，靛基质与对二甲基氨基苯甲酸结合，形成玫瑰色靛基质。
5.硫化氢试验某些细菌能分解含硫的氨基酸，产生硫化氢，硫化氢与培养基中的铁盐反应，形成黑色的硫化铁沉淀，为硫化氢试验阳性。
细菌生理生化实验
细菌的生理、生化实验简介微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。
因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下：一、糖酵解试验不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管中，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。
接种后，置36±°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力，培养物可呈弥散生长。
本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力，从而进行各种细菌的鉴别，因而每次试验，常需同时接种多管。
一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫，溴百里蓝和An-drade指示剂。
二、淀粉水解试验某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。
试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20℃培育5天。
然后将碘试剂直接滴浸于培育表面，假设为液体培育物，那么加数滴碘试剂于试管中。
当即检视结果，阳性反映（淀粉被分解）为琼脂培育基呈深蓝色、菌落或培育物周围显现无色透明环、或肉汤颜色无转变。
阴性反映那么无透明环或肉汤呈深蓝色。
淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。
培养基pH必须为中性或微酸性，以最适。
淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。
三：V-P试验某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。
细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告
细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告细菌鉴定是微生物学中的一个重要分支，它是通过对细菌的形态、生理生化反应、生长特性等方面进行分析，来确定细菌种类的过程。
在细菌鉴定中，生理生化反应实验是一种常用的方法，它可以通过观察细菌在不同条件下的生长情况，来确定细菌的种类。
本文将介绍几种常用的生理生化反应实验。
1. 氧气需求实验氧气需求实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的氧气需求量。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同氧气浓度的培养基中，然后观察细菌的生长情况。
如果细菌只能在氧气充足的条件下生长，那么它就是一种需氧菌；如果细菌只能在氧气缺乏的条件下生长，那么它就是一种厌氧菌；如果细菌既能在氧气充足的条件下生长，也能在氧气缺乏的条件下生长，那么它就是一种兼性厌氧菌。
2. 糖类发酵实验糖类发酵实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌对不同糖类的发酵能力。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同糖类的培养基中，然后观察培养基的酸碱度变化。
如果培养基的酸碱度发生了变化，那么说明细菌对这种糖类进行了发酵。
通过这个实验，我们可以确定细菌对哪些糖类具有发酵能力，从而进一步确定细菌的种类。
3. 氧化还原实验氧化还原实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的氧化还原能力。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同氧化还原剂的培养基中，然后观察培养基的颜色变化。
如果培养基的颜色发生了变化，那么说明细菌对这种氧化还原剂具有反应能力。
通过这个实验，我们可以确定细菌的氧化还原能力，从而进一步确定细菌的种类。
4. 酶活性实验酶活性实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的酶活性。
在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同底物的培养基中，然后观察底物的变化情况。
如果底物发生了变化，那么说明细菌对这种底物具有酶活性。
通过这个实验，我们可以确定细菌的酶活性，从而进一步确定细菌的种类。
细菌鉴定中的生理生化反应
细菌鉴定中的生理生化反应实验六细菌鉴定中常用的生理生化反应一、实验目的1、了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常用的生理生化反应的测定方法。
2、通过不同细菌对不同含碳、含氮化合物分解利用情况，了解细菌碳、氮代谢类型的多样性。
3、了解细菌在培养基中的生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义。
4、学习各种接种技术。
二、实验原理各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。
以此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。
1、糖（醇）类发酵实验不同的细菌含有发酵不同的糖（醇）的酶，因而发酵糖（醇）的能力各不相同，产生的代谢产物也不同：有的产酸产气，有的产酸不产气。
指示剂溴甲酚紫【pH 5.2（黄色）~ pH 6.8（紫色）】，当发酵产酸时，培养基将由紫变黄。
产气可由杜氏小管中有无气泡来证明。
2、甲基红实验（M.R.实验）甲基红【pH 4.4（红色）～pH 6.2（黄色）】实验，是用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。
有些细菌分解糖类产生丙酮酸，丙酮酸进一步反应形成甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH 降低到4.2 以下。
有些细菌在培养的早期产生有机酸，但在后期将有有机酸转化为非酸性末端产物，如乙醇、丙酮酸等，使pH 升至大约6。
3、Voges-Proskauer 实验（伏-普实验，V.P. 实验）伏-普试验是用来测定某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力。
某些细菌分解葡萄糖成丙酮酸，再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性条件下，被氧化为二乙酰，二乙酰与培养基中所含的胍基作用，生成红色化合物为 V.P.反应阳性。
4、靛基质（吲哚）实验某些细菌，如大肠杆菌，能产生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质，靛基质与对二甲基氨基苯甲酸结合，形成玫瑰色靛基质（红色化合物）。
微生物生理生化鉴定
2021/10/10
3
糖发酵试验
大肠杆菌：产酸产气
大肠杆菌分解糖类产生多种有机酸，使培养液呈 酸性；产生的甲酸在酸性条件下可进一步裂解生 成H2和CO2
发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂由紫色(pH6.8)变为 黄色(pH5.2)；气体的产生可由倒置的德汗氏小管 中有无气泡来证明。
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乳糖发酵试验
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结果观察
糖发酵试验：产酸：指示剂使培养基由紫色（pH6.8）
转变为黄色（pH5.2）；产气：倒置的德汉氏小管内 有气泡产生。
吲哚试验：在培养液中加入乙醚约1 ml，充分振荡，
使吲哚溶于乙醚中。静置片刻，待乙醚层浮于液面后 形成明显的乙醚层，再沿管壁加入吲哚试剂8-10滴。 如有吲哚存在，则乙醚层呈现玫瑰红色，为阳性反应。
2021/10/10
15
操作步骤
编号：用记号笔在各试管上分别标明培养基名称和所 接种的菌名。
接种：取盛有葡萄糖发酵培养基和乳糖发酵培养基试 管各3支，分别按编号1支接种大肠杆菌，另1支接种 普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。再将大肠杆 菌和产气肠杆菌分别接种于2支蛋白胨水培养基、2支 葡萄糖蛋白胨水培养基和2支柠檬酸盐斜面培养基中。
10
伏-普试验原理
产气杆菌： V.P.试验阳性 大肠杆验
大肠杆菌：– 产气杆菌：+
阳性 阴性
2021/10/10
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IMViC 试验
柠檬酸盐试验：用来检测细菌利用柠檬酸的 能力。有些细菌能分解柠檬酸形成CO2，由 于培养基中钠离子的存在而形成碳酸钠，使 pH升高，当用溴麝香草酚蓝作为指示剂时， 培养基颜色发生变化。溴麝香草酚蓝变色范 围为，pH6.0-7.6呈绿色，pH＞7.6时呈蓝色。
微生物鉴定的生理生化反应汇总
微生物鉴定的生理生化反应各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。
用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。
利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。
生物化学试验的方法很多，主要有以下几类。
一、碳水化合物的代谢试验1．糖（醇、苷）类发酵试验（1）原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分解某种糖（醇、苷）类，其代谢产物可因菌种而异。
检查细菌对培养基中所含糖（醇、苷）降解后产酸或产酸产气的能力，可用以鉴定细菌种类。
(2)方法：在基础培养基中（如酚红肉汤基础培养基pH7.4）加入0.5~1.0％（w/v）的特定糖（醇、苷）类。
所使用的糖（醇、苷）类有很多种，根据不同需要可选择单糖、多糖或低聚糖、多元醇和环醇等，见表6-4-1。
将待鉴定的纯培养细菌接种入试验培养基中，置35℃孵育箱内孵育数小时到两周（视方法及菌种而定）后，观察结果。
若用微量发酵管，或要求培养时间较长时，应注意保持其周围的湿度，以免培养基干燥。
(3)结果：能分解糖（醇、苷）产酸的细菌，培养基中的指示剂呈酸性反应（如酚红变为黄色），产气的细菌可在小倒管（Durham小管）中产生气泡，固体培养基则产生裂隙。
不分解糖则无变化。
(4)应用：糖（醇、苷）类发酵试验，是鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验，不同细菌可发酵不同的糖（醇、苷）类，如沙门菌可发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖，大肠埃希菌则可发酵葡萄糖和乳糖。
即便是两种细菌均可发酵同一种糖类，其发酵结果也不尽相同，如志贺菌和大肠埃希菌均可发酵葡萄糖，但前者仅产酸，而后者则产酸、产气，故可利用此试验鉴别细菌。
表6-4-1 常用于细菌糖发酵试验的糖、醇类单糖四碳糖：赤藓糖, 五碳糖：核糖核酮糖木糖阿拉伯糖, 六碳糖：葡萄糖果糖半乳糖甘露糖双糖蔗糖（葡萄糖＋果糖）乳糖（葡萄糖＋半乳糖）麦芽糖（两分子葡萄糖）三糖棉子糖（葡萄糖＋果糖＋半乳糖）多糖菊糖（多分子果糖）淀粉醇类侧金盏花醇卫茅醇甘露醇山梨醇非糖类肌醇2．葡萄糖代谢类型鉴别试验(1)原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。
细菌 的生化反应
6.V-P试验
• 结果：数分钟内出现红色为阴性，如无红 色且35℃4h后仍不变为阴性 。
• 应用：常与甲基红试验一起使用，因为前 者为阴性，后者通常为阴性。
2、氧化-发酵试验（O/F试验）
• 结果：均无变化为产碱型或不分解糖型， 均产酸为发酵型，仅不加石蜡的培养基产 酸为氧化型。
• 应用：主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌 的鉴别，前者均为发酵型，而后者通常为 氧化型或产碱型。也可用于葡萄球菌与微 球菌的鉴别。
3、β-半乳糖苷酶（ONPG试验）
• 结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般 在20-30分钟内显色。
• 应用：主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细 菌的鉴定。变形杆菌属，肺炎克雷伯菌属， 摩根菌属，普罗威登斯菌属，幽门螺杆菌 和结肠耶尔森菌阳性，而斯氏和产碱普罗 威登菌阴性。
苯丙氨酸脱氨酶试验
• 结果：出现绿色为阳性。应立即观察结果， 反应时间过长会褪色。
• 应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变 形杆菌属，普罗威登斯菌属和摩根菌属为 阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。
细菌的生化反应
1、糖（醇，苷）类发酵试验
• 结果：若能分解糖（醇，苷）类产酸时， 培养基的指示剂呈酸性反应。若产气可使 液体培养基中倒管内或半固体培养基内出 现气泡，固体培养基内有裂隙等现象。若 不分解，培养基中除有细菌生长外，无任 何其他生长变化。
• 应用：鉴定细菌最主要和最基本的试验， 特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。
1、明胶液化试验
• 结果：培养基呈液化状态为阳性。 • 应用：肠杆菌科细菌的鉴别，如普通变形
细菌的常用生化试验
应用：主要用于厌氧菌的鉴别。类杆菌属中的中间类杆 菌产生脂酶，其他类杆菌则阴性；芽胞梭菌属中产芽胞 梭菌、肉毒梭菌和诺维梭菌也有此酶，而其他梭菌阴性。
5.卵磷脂酶试验
原理：有的细菌产生卵磷脂酶（α-毒素），在钙离子存 在时，此酶可迅速分解卵磷脂，生成浑浊沉淀状的甘油 酯和水溶性磷酸胆碱。
方法：将被检菌划线接种或点种于卵黄琼脂平板上，于 35℃培养3～6h。
普罗威登菌和摩根菌为阳性，而斯
氏和产碱普罗威登菌阴性
5.苯丙氨酸脱氨酶试验
原理 方法：将被检菌浓厚接种于苯丙氨酸琼脂培养基斜面上， 于35℃培养l8～24h，滴加10%三氯化铁试剂3～4滴，自 斜面上方流下。 结果：出现绿色为阳性。应立即观察结果，延长反应时 问会引起褪色。 应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变 形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属细 菌均为阳性，肠杆菌种中其他细菌均为阴 性。
原理
由于细菌各自具有不同的酶系统，对糖的分解能 力不同，有的能分解某些糖产生酸和气体，有的 虽能分解糖产生酸，但不产生气体，有的则不分 解糖。据此可对分解产物进行检测从而鉴别细菌。
具体试验有：①糖类发酵试验；②葡萄糖代谢类 型鉴别试验；③七叶苷水解试验；④淀粉水解试 验；⑤甲基红试验；⑥V-P试验；⑦β-半乳糖苷 酶试验（ONPG试验）。
1.明胶液化试验
原理 方法：将被检菌穿刺接种于明胶培养基，于22℃培养7d， 逐日观察结果。 结果：培养基呈液化状态为阳性。 应用：肠杆菌科细菌的鉴别，如沙 雷菌、普通变形杆菌、奇异变形杆 菌、阴沟杆菌等可液化明胶，而其 他细菌很少液化明胶。有些厌氧菌 如产气荚膜梭菌、脆弱类杆菌等也 能液化明胶。另外多数假单胞菌也 能液化明胶。
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1 试管标记 :取装有蛋白胨水培养液的试管2支，分别标记大
肠杆菌、产气肠杆菌。
2 接种培养 :以无菌操作分别接种少量菌苔到以上相应试管中，
置37℃恒温箱中培养24～48h。
结果观察
取出以上试管，在培养液中加入乙醚1～2ml，经充分振荡使吲哚萃取 至乙醚中，静置片刻后乙醚层浮于培养液的上面，此时沿管壁缓慢加入 5～10滴吲哚试剂（加入吲哚试剂后切勿摇动试管，以防破坏乙醚层影 响结果观察）。 如有吲哚存在，乙醚层呈现玫瑰红色，此为吲哚试验阳性反应，否则为 阴性反应，阳性用“＋”、阴性用“－”表示。
培养基 同V.P试验
步骤 同V.P试验
1 标记试管:取2支装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，分别标记大
肠杆菌、产气肠杆菌。
2 接种培养 :以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中。
置37℃恒温箱中，培养24～48h。
结果观察
取出以上试管，各加入2～3滴甲基红指示 剂，注意沿管壁加入，仔细观察培养液 上层。
材料
菌种：大肠杆菌、变形杆菌
培养基： H2S试验培养基（固体）
步骤
1 试管标记:取装有H2S试验固体培养基的试管2支，分别标记大肠
1 试管标记
取分别装有葡萄糖和乳糖发酵培养液试管各2支，每种糖发酵 试管中均分别标记大肠杆菌、普通变形菌。
2 接种培养
以无菌操作分别接种少量菌苔至以上各相应试管中。置37℃ 恒温箱中培养，培养24h-48h，观察结果。
结果观察
与对照管比较，若接种培养液保持原有颜色，其反应结果为阴 性，表明该菌不能利用该种糖，记录用“－”表示；如培养液 呈黄色，反应结果为阳性，表明该菌能分解该种糖产酸，记录 用“＋”表示。
（五）柠檬酸盐试验
原理
有些细菌能够利用柠檬酸钠作为碳源，如产气肠杆菌；而另一些细菌则不能 利用柠檬酸盐，如大肠杆菌。细菌在分解柠檬酸盐后，产生碱性化合物， 使培养基的pH升高，当培养基中加入1%溴麝香草酚蓝指示剂时，就会由绿 色变为深蓝色。（溴麝香草酚蓝的指示范围为：pH小于6.0时呈黄色，pH 在6.0~7.6时为绿色，pH大于7.6时呈蓝色。）
产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes） 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养液 步骤
1 标记试管 :取2支装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，分别标记大肠杆
菌、产气肠杆菌。
2 接种培养 :以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中。置37℃
恒温箱中，培养24～48h。
结果观察
取出以上试管，振荡2min。加入等量V.P试剂；振荡试管，以使 空气中的氧溶入，置37℃恒温箱中保温15～30min。
(一) 糖类发酵试验
原理 可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为
鉴定菌种的依据。是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂， 经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气，可在发酵 培养基中放入倒置杜氏小管观察。
材料 菌种：大肠杆菌、变形杆菌 培养基：葡萄糖发酵培养液、乳糖发酵培养液试管 步骤
3.2 培养基 糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖）、葡萄糖蛋白胨水培养基、
基蛋白胨水培养基、淀粉培养基、H2S试验培养基、柠檬酸盐培养
3.3 试剂 V. P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂、乙醚、1.6%溴甲酚紫指示剂、 碘液。 3.4 器具 恒温培养箱、试管、移液管、杜氏小管。
四、步骤
(一) 糖类发酵试验 （二） 乙酰甲基甲醇试验(V．P试验) （三） 甲基红试验（M.R.试验） （四） 吲哚试验 （五） 柠檬酸盐试验 （六） 硫化氢试验 （七） 淀粉水解试验
➢若培养液呈红色，记录为V.P.试验 阳性反应（用“＋”表示）；
➢若不呈红色，记录为V.P.试验阴性 反应（用“－”表示）。
（三） 甲基红试验（M.R.试验）
原理 肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮 酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀 酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基pH值下降至pH4.2 以下，使甲基红指示剂变红。 材料 菌种 同V.P试验
培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应，表明该菌分解糖能 产酸并产气，记录用“＋”表示；如杜氏小管内没有气泡为阴 性反应，记录用“－”表示。
（二） 乙酰甲基甲醇试验(V．P试验)
原理 某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养液中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮 酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化 为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V.P（+）反 应。 材料 菌 种 : 大肠杆菌（Escherichia coli）、
材料
菌种：同V．P试验 培养基：柠檬酸盐培养基（固体斜面）
步骤 1 试管标记 取装有柠檬酸盐培养基固体斜面的试管2支，分别标记大肠杆菌、产气肠杆 菌。 2 接种培养 以无菌操作分别接种少量菌苔到以上相应试管斜面上做“之”字形划线， 置37℃恒温箱中培养24～48h。
结果观察
（六）硫化氢试验
原理
有些细菌能分解含硫的有机物，如胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸等 产生硫化氢，硫化氢一遇培养基中的铅盐或铁盐等，就形成黑色的 硫化铅或硫化铁沉淀物。
10细菌的生理生化反应
二、 原理
各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异。 不同微生物因具有不同的酶系统，分解利用 糖类、脂肪类和蛋白类物质的能力不同，其 发酵的类型和产物也不相同。细菌的生理生 化反应在菌株的分类鉴定中有很大作用。
三、 材料
3.1 菌种 ✓ 大肠杆菌（Escherichia coli） ✓ 产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes） ✓ 普通变形杆菌（Proteus vulgaris） ✓ 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的斜面菌种
若培养液上层变成红色，即为阳性反应， 用“＋”表示；
若仍呈黄色，则为阴性反应，用“－” 表示。
（四）吲哚试验
原理 :有些细菌含有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成 吲哚。吲哚本身没有颜色，不能直接看见，但当加入吲哚试剂 （对二甲基氨基苯甲醛试剂）时，该试剂与吲哚作用，形成红 色的玫瑰吲哚。 材料