福际迈好成功第一步-核酸分离纯化
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➢ 线粒体、叶绿体DNA的提取 • 差速离心结合SDS裂解法
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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12
基因组DNA—CTAB 法提取缓冲液经典配方
组份
Tris-HCl EDTA （pH8.0） NaCl
（pH8.0）
终浓度
100 mM
20 mM
1.4M
CTAB
steroidogenesis and oncogenesis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA.
101(2): 621-6
CONTACT US
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5
Alan Garen
公司高级顾问。耶鲁大学终身 教授、美国国家科学院院士、美国 国家艺术与科学院院士、四川大学 特聘教授。
世界一流的集研发、生产、销售、技 术支持、技术服务为一体的生物技术
服务中心
公司。
研发中心（基础）
返回
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3
人才优势
❖公司拥有一支实力雄厚的研发队伍，主要研发人员均具有多年海外名校工作经 验，在Science、Nature、Lancet、Molecular Cell、N.Engl J Med、PNAS等杂志发表 过数十篇论文，具有广阔的国际视野和较强的产品设计开发能力。 ❖技术顾问有来自哈佛、耶鲁等名校的美国国家科学院院士、教授等知名学者。 ❖现有研究人员30人，90%具有硕士及以上学历。未来公司将继续扩大研发团队
CONTACT US 规模，预计到2014年将达到100人以上，其中85%以上具有硕士或博士学位。
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4
公司首席技术官。四川大学博导，A级岗位二级教授，
国家自然科学基金生命科学部基因表达调控与表观遗传学
评审专家。主要从事长非编码RNA及抗肿瘤药物研究。
发表文章：
Xu Song, et al. (2005) Roles of PSF protein and VL30 RNA in
编辑ppt
2
公司简介
成都福际生物技术有限公司坐落于成都高新孵化园内，由耶鲁大学留学
回国的知名学者创办, 主营方向为研发、生产和销售生命科学科研及临床所用
的试剂及试剂盒。现已推出各种DNA 纯化试剂盒及直接PCR系列产品。
未来，福际将进一步加大研发投
管理 行政中心
入，丰富产品种类，致力于发展成为
销售中心
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
编辑ppt
10
DNA提取方法简介
基因组DNA的提取 ➢ CTAB法
➢ SDS法 ➢ 其他方法
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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11
非基因组DNA的提取
➢ 质粒DNA的提取 • 碱裂解法 • 煮沸法
13
CTAB 法提取缓冲液改进配方
组
Tris-HCl
份 （pH8.0）
终
浓
100 mM
度
EDTA （pH8.0）
20 mM
NaCl
CTAB
1.4M 3%(W/V)
PVP40 β-巯基乙醇
5%(W/V)
2%（V/V） 使用前加
入
➢PVP（聚乙烯吡咯烷酮）是酚的络合物，能与多酚形成一种 不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染；同 时它也能和多糖结合，有效去除多糖。
β-巯基乙醇
2%(W/V)
0.1%（V/V） 使用前加入
➢ CTAB溶解细胞膜，并结合核酸，使核酸便于分离； ➢ β-巯基乙醇是抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌，避免褐 变，使酚容易去除，当酚类物质被氧化后就会和核酸不可逆 的结合。
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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14
植物材料
植物CTAB法流程图
裂解液
酒精沉淀
液氮研磨
抽提
离心洗涤
DNA溶液
细胞裂解
上层溶液
干燥溶解
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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15
基因组DNA—SDS 法提取缓冲液配方
Tris-HCl
组份
EDTA （pH 8.0 ） NaCl
SDS
（pH8.0）
终浓度
10 mM
20 mM
0.4M
2%
•SDS是一种阴离子去垢剂，在高温（55～65℃）条件下能 裂解细胞，使染色体离析，蛋白变性，释放出核酸； •提高盐(KAc或NH4Ac)浓度并降低温度（冰浴），使蛋白质 及多糖杂质沉淀，离心后除去沉淀；
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8
前言
核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信 息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核 酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基 本的操作 。
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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9
内容
DNA提取方法简介 DNA提取常见问题、原因分析及其对策 RNA提取方法简介 RNA提取及其RT-PCR常见问题、原因分析及其 对策 Foregene基因组DNA纯化方案 Foregene基因组DNA纯化实例 Foregene产品简介
reversible gene regulation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 102(34):
12189-93. (封面文章)
Xu Song, et al. (2004) Binding of mouse VL30 retrotransposon
宋旭
RNA to PSF protein induces genes repressed by PSF: Effects on
迈好成功第一步
—核酸分离提取新思维
福际生物技术有限公司专场技术讲座系列
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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1
主要内容
❖公司概况 ❖核酸分离提取技术交流
中 国 福 际 World’s Foregene
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
率先发现蛋白质编码的三个终 止密码子，为现代分子生物学研究 的主要开拓人之一。现主要从事配 体靶向抗肿瘤药物研究及原癌基因 的发现与鉴定工作。
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6Байду номын сангаас
生物学、医学实验室
服务对象
生物技术公司、科研机构
海关、质检部门
医院、疾控中心、血站
法医、刑侦
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更多行业
……
7
核酸分离提取技术交流
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
EXPERT IN NUCLEIC ACID EXTRACTION
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基因组DNA—CTAB 法提取缓冲液经典配方
组份
Tris-HCl EDTA （pH8.0） NaCl
（pH8.0）
终浓度
100 mM
20 mM
1.4M
CTAB
steroidogenesis and oncogenesis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA.
101(2): 621-6
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Alan Garen
公司高级顾问。耶鲁大学终身 教授、美国国家科学院院士、美国 国家艺术与科学院院士、四川大学 特聘教授。
世界一流的集研发、生产、销售、技 术支持、技术服务为一体的生物技术
服务中心
公司。
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人才优势
❖公司拥有一支实力雄厚的研发队伍，主要研发人员均具有多年海外名校工作经 验，在Science、Nature、Lancet、Molecular Cell、N.Engl J Med、PNAS等杂志发表 过数十篇论文，具有广阔的国际视野和较强的产品设计开发能力。 ❖技术顾问有来自哈佛、耶鲁等名校的美国国家科学院院士、教授等知名学者。 ❖现有研究人员30人，90%具有硕士及以上学历。未来公司将继续扩大研发团队
CONTACT US 规模，预计到2014年将达到100人以上，其中85%以上具有硕士或博士学位。
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公司首席技术官。四川大学博导，A级岗位二级教授，
国家自然科学基金生命科学部基因表达调控与表观遗传学
评审专家。主要从事长非编码RNA及抗肿瘤药物研究。
发表文章：
Xu Song, et al. (2005) Roles of PSF protein and VL30 RNA in
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公司简介
成都福际生物技术有限公司坐落于成都高新孵化园内，由耶鲁大学留学
回国的知名学者创办, 主营方向为研发、生产和销售生命科学科研及临床所用
的试剂及试剂盒。现已推出各种DNA 纯化试剂盒及直接PCR系列产品。
未来，福际将进一步加大研发投
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入，丰富产品种类，致力于发展成为
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DNA提取方法简介
基因组DNA的提取 ➢ CTAB法
➢ SDS法 ➢ 其他方法
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非基因组DNA的提取
➢ 质粒DNA的提取 • 碱裂解法 • 煮沸法
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CTAB 法提取缓冲液改进配方
组
Tris-HCl
份 （pH8.0）
终
浓
100 mM
度
EDTA （pH8.0）
20 mM
NaCl
CTAB
1.4M 3%(W/V)
PVP40 β-巯基乙醇
5%(W/V)
2%（V/V） 使用前加
入
➢PVP（聚乙烯吡咯烷酮）是酚的络合物，能与多酚形成一种 不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染；同 时它也能和多糖结合，有效去除多糖。
β-巯基乙醇
2%(W/V)
0.1%（V/V） 使用前加入
➢ CTAB溶解细胞膜，并结合核酸，使核酸便于分离； ➢ β-巯基乙醇是抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌，避免褐 变，使酚容易去除，当酚类物质被氧化后就会和核酸不可逆 的结合。
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植物材料
植物CTAB法流程图
裂解液
酒精沉淀
液氮研磨
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DNA溶液
细胞裂解
上层溶液
干燥溶解
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基因组DNA—SDS 法提取缓冲液配方
Tris-HCl
组份
EDTA （pH 8.0 ） NaCl
SDS
（pH8.0）
终浓度
10 mM
20 mM
0.4M
2%
•SDS是一种阴离子去垢剂，在高温（55～65℃）条件下能 裂解细胞，使染色体离析，蛋白变性，释放出核酸； •提高盐(KAc或NH4Ac)浓度并降低温度（冰浴），使蛋白质 及多糖杂质沉淀，离心后除去沉淀；
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前言
核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信 息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核 酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基 本的操作 。
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9
内容
DNA提取方法简介 DNA提取常见问题、原因分析及其对策 RNA提取方法简介 RNA提取及其RT-PCR常见问题、原因分析及其 对策 Foregene基因组DNA纯化方案 Foregene基因组DNA纯化实例 Foregene产品简介
reversible gene regulation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 102(34):
12189-93. (封面文章)
Xu Song, et al. (2004) Binding of mouse VL30 retrotransposon
宋旭
RNA to PSF protein induces genes repressed by PSF: Effects on
迈好成功第一步
—核酸分离提取新思维
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1
主要内容
❖公司概况 ❖核酸分离提取技术交流
中 国 福 际 World’s Foregene
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率先发现蛋白质编码的三个终 止密码子，为现代分子生物学研究 的主要开拓人之一。现主要从事配 体靶向抗肿瘤药物研究及原癌基因 的发现与鉴定工作。
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生物学、医学实验室
服务对象
生物技术公司、科研机构
海关、质检部门
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