在线固相萃取初步设计
固相萃取的实验步骤
固相萃取的实验步骤嘿，朋友们！今天咱来聊聊固相萃取这个有意思的实验步骤呀。
固相萃取呢，就好像是一场精细的筛选游戏。
你先得准备好你的“游戏道具”，也就是固相萃取柱啦。
这柱子就像是一个神奇的小盒子，里面藏着好多秘密呢。
然后呢，你得把要处理的样品溶液小心翼翼地倒进去。
这时候你就得想啦，可别手抖呀，不然不就前功尽弃啦。
接下来，让样品溶液慢慢地在柱子里流淌，就像小河流过山谷一样自然。
这时候那些我们想要的东西就会被柱子给抓住，而其他不相关的就流走啦，是不是很神奇？然后呢，你得给柱子洗个澡，把那些粘在上面不太相干的东西给洗掉，让我们的目标物更加纯净。
再然后呀，就是收获成果的时候啦。
用合适的溶剂把我们辛辛苦苦抓住的目标物给洗脱下来，就像是从宝藏盒子里拿出宝贝一样让人兴奋。
你说这固相萃取像不像一个小小的魔法过程？把乱七八糟的溶液变得干干净净，只留下我们最想要的东西。
这过程可不简单呢，需要我们细心、耐心，还得有那么一点点技巧。
就好比说选择柱子吧，那可得好好挑，就跟挑鞋子一样，得合脚才行呀。
不同的样品需要不同的柱子来对付呢。
还有溶剂的选择，这可不能马虎，要是选错了溶剂，那可就糟糕啦，就像做菜选错了调料一样。
而且在整个过程中，每一步都得认真对待，稍有疏忽可能就会影响结果哦。
这就像是搭积木，一块没搭好，可能整个就垮啦。
所以呀，做固相萃取实验可不能马马虎虎，得打起十二分精神来。
要像爱护宝贝一样对待那些仪器和试剂，这样才能得到准确可靠的结果呀。
总之呢，固相萃取是个很有趣但也很有挑战性的实验步骤。
只要我们用心去做，就一定能在这个小小的实验世界里发现大大的惊喜！这就是我对固相萃取实验步骤的理解啦，你们觉得呢？原创不易，请尊重原创，谢谢!。
在线固相萃取
第43 卷第 5 期2024 年5 月Vol.43 No.5722~730分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO（Journal of Instrumental Analysis）在线固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱测定地表水中90种药品及个人护理用品李珏*，徐巧，李剑，王天琦，杨继伟，俞晓峰（杭州谱育科技发展有限公司，浙江杭州311300）摘要：该研究建立了在线固相萃取（OSPE）/超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定地表水中90种药品及个人护理用品（PPCPs）的分析方法。
水样经过滤后直接进样注入OSPE柱中进行净化和富集，通过阀切换将目标物转移到分析柱中进一步分离分析。
采用Waters HSS T3 C18（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）色谱柱进行分离，以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相进行洗脱。
质谱采用正、负离子同时采集，多反应监测（MRM）模式检测，内标法定量。
在优化的色谱-质谱条件下，90种PPCPs呈良好的线性关系，相关系数（r2）均大于0.99，检出限为0.06~10.00 ng/L，定量下限为0.24~40.00 ng/L；在10、20、100 ng/L加标水平下，90种化合物的回收率为81.2%~120%，大多数化合物的相对标准偏差（n=7）小于10%。
该方法的分析效率、灵敏度高，运行稳定，可作为地表水中PPCPs的监测方法。
关键词：药品及个人护理用品；在线固相萃取；超高效液相色谱-串联质谱；地表水中图分类号：O657.7；X132文献标识码：A 文章编号：1004-4957（2024）05-0722-09Determination of 90 Pharmaceutical and Personal Care Products inSurface Water by Online Solid Phase Extraction with UPLC-MS/MS LI Jue*，XU Qiao，LI Jian，WANG Tian-qi，YANG Ji-wei，YU Xiao-feng（Hangzhou Puyu Technology Development Co.Ltd，Hangzhou 311300，China）Abstract：This study established an online solid phase extraction（OSPE）/ultrahigh performance liq⁃uid chromatography tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）method for the determination of 90 pharmaceutical and personal care products（PPCPs） in surface water. After filtration，the water sam⁃ple was directly injected into the OSPE column for purification and enrichment，and the target sub⁃stances were transferred to the analysis column for further separation and analysis through valve switching. Using a Waters HSS T3 C18（100 mm×2.1 mm，1.8 μm） chromatographic column for sep⁃aration，with 0.1% formic acid aqueous solution and acetonitrile as the mobile phase for elution. The analytes were detected in multiple reaction monitoring（MRM）mode through positive and negative electrospray ionization（ESI），and quantified with internal standard method. Under optimized chro⁃matography-mass spectrometry conditions，90 PPCPs showed good linear relationships with the cor⁃relation coefficients（r2）more than 0.99.The detection limits reached 0.06-10.00 ng/L，and the quantitation limits reached 0.24-40.00 ng/L.The recoveries in actual samples analyzed at spiked concentrations of 10，20，and 100 ng/L were between 81.2% and 120%，with relative standard devi⁃ations（n=7） of most compounds less than 10%. This method has high analysis efficiency，sensitivity，and stable operation，and could be used as a monitoring method for analyzing PPCPs in surface water samples.Key words：pharmaceutical and personal care products（PPCPs）；online solid phase extraction （OSPE）；UPLC-MS/MS；surface water近年来，水体污染已成为世界性关注的环境问题，其中药品及个人护理用品（PPCPs）应用广泛、潜在危害大，日益受到关注［1］。
固相萃取基本过程
固相萃取基本过程固相萃取啊，这可是个很有意思的过程呢！就好像是一场奇妙的化学之旅。
你看啊，固相萃取就像是在一个大宝藏里寻宝。
首先呢，得有个合适的“筛子”，也就是固相萃取柱啦。
这柱子就像是一个特别的小房子，里面有好多小小的“房间”，专门等着那些我们想要的宝贝进去呢。
然后呢，把我们的样品溶液倒进去，就像是把一群小伙伴放进了这个特别的房子里。
那些我们想要的东西，就会被柱子里的“小房间”给抓住，其他不相关的就溜走啦。
这是不是很神奇呀！接下来，得把那些抓住宝贝的“小房间”给清洗一下，把一些不太纯的东西给洗掉，就像是给宝贝们洗个澡，让它们更干净更漂亮。
最后，就是把真正的宝贝给弄出来啦。
用合适的溶剂去把它们冲出来，就像是把宝贝们从它们的小窝里请出来一样。
这时候，我们就得到了我们心心念念的纯净的东西啦。
你说这固相萃取像不像一个魔法过程呀？它能把复杂的混合物变得简单明了，能把我们需要的东西准确地分离出来。
想象一下，如果没有固相萃取，我们要从一堆乱七八糟的东西里找到我们想要的那一点点，那得有多难呀！就好像在大海里捞针一样。
但有了固相萃取，就像是有了一个超级厉害的工具，一下子就把问题变得简单多啦。
在实际操作中啊，可得细心点哦。
要选对柱子，就像选对工具一样重要。
不同的柱子适合不同的情况，要是选错了，那可就麻烦啦。
而且在操作的每一步都要认真，不能马虎，不然宝贝可能就偷偷溜走啦。
固相萃取就是这样，既有趣又实用。
它让我们的化学实验变得更加精彩，让我们能更轻松地得到我们想要的结果。
怎么样，是不是觉得固相萃取很了不起呀！反正我是这么觉得的呢！。
固相萃取步骤
固相萃取步骤固相萃取步骤固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）是一种常用的样品前处理技术，其主要作用是将复杂的样品中所需分离的化合物从其他杂质中提取出来。
SPE技术具有选择性好、灵敏度高、重现性好等优点，被广泛应用于环境分析、食品检测、药物代谢动力学等领域。
下面将详细介绍固相萃取的步骤。
一、样品预处理在进行固相萃取之前，需要对待测样品进行预处理。
这一步骤通常包括样品研磨、溶解或提取等操作。
对于不同的样品类型，预处理方法也会有所不同。
二、选择适当的SPE柱根据待测化合物的特性和所需分离纯度要求，选择适当的SPE柱非常重要。
通常情况下，SPE柱可以分为正相柱和反相柱两种类型。
正相柱适用于极性化合物的富集和纯化，如酚类、羧酸类化合物；反相柱适用于非极性化合物富集和纯化，如脂肪族化合物。
三、条件调试在进行固相萃取之前，需要对SPE柱的条件进行调试。
主要包括洗脱剂的选择和浓度、样品溶液的pH值和盐度等。
四、样品处理将经过预处理的样品加入SPE柱中，通过吸附和洗脱等步骤，将目标化合物从其他杂质中分离出来。
具体步骤如下：1.样品加载：将处理好的样品加入SPE柱中，使其与固相材料接触。
2.洗脱：用适当的溶剂或溶液对SPE柱进行洗脱，去除非目标化合物。
3.吸附：用适当的溶剂或溶液对SPE柱进行吸附，将目标化合物富集在固相材料上。
4.洗脱：用适当的溶剂或溶液对SPE柱进行再次洗脱，将富集在固相材料上的目标化合物洗脱下来。
五、浓缩和进一步纯化经过固相萃取后得到的目标化合物通常需要进一步浓缩和纯化。
常用方法包括旋转浓缩法、氮吹法、溶剂萃取法等。
六、检测经过浓缩和纯化后的目标化合物可以进行分析检测。
常用的检测方法包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）、质谱（MS）等。
总结固相萃取是一种重要的样品前处理技术，在环境分析、食品检测、药物代谢动力学等领域有着广泛的应用。
其步骤主要包括样品预处理、选择适当的SPE柱、条件调试、样品处理、浓缩和进一步纯化以及检测等。
固相萃取操作流程
固相萃取操作流程1. 简介固相萃取（Solid-Phase Extraction，简称SPE）是一种常用的分离和富集技术，广泛应用于化学、生物、环境和食品等领域。
它通过将待测物从溶液中吸附到固定相材料上，并通过洗脱步骤将待测物从固定相中释放出来，实现样品的富集和纯化。
本文将详细介绍固相萃取的操作流程，并包括以下几个主要步骤：1.选择合适的固定相材料2.准备SPE柱或盘3.条件处理（conditioning）4.样品加载（sample loading）5.洗脱（elution）6.浓缩/洗脱溶剂去除7.分析前处理2. 操作流程2.1 选择合适的固定相材料根据待测物的性质和分析目的，选择合适的固定相材料。
常见的固定相材料包括聚合物、硅胶、活性炭等。
不同的固定相具有不同的亲疏水性、极性和功能基团，可以选择特定的固定相以实现对待测物的选择性富集。
2.2 准备SPE柱或盘在进行固相萃取之前，需要准备好SPE柱或盘。
SPE柱通常由一根空心柱体和两个层次分明的过滤膜组成，而SPE盘则是一个带有孔洞的塑料盘。
根据样品量和操作需求选择合适的柱体容量或盘孔数。
2.3 条件处理（conditioning）条件处理是为了去除固定相上的杂质，并使固定相达到适当的亲疏水性。
一般情况下，使用适当的溶剂（如甲醇、乙醇等）对SPE柱或盘进行条件处理，将溶剂通过固定相材料中，以去除可能影响分析结果的杂质。
具体操作步骤如下： 1. 将待使用的SPE柱或盘放入一个收集瓶中。
2. 使用适当溶剂（如甲醇）预洗收集瓶。
3. 将预洗液倒入SPE柱或盘中，直至固定相完全被润湿。
4. 倒掉多余溶剂，将SPE柱或盘放回收集瓶中，准备进行样品加载。
2.4 样品加载（sample loading）样品加载是将待测物从溶液中吸附到固定相材料上的过程。
根据待测物的性质和分析需求，选择适当的样品溶剂和体积，并控制样品的pH值和离子强度等因素。
具体操作步骤如下： 1. 将条件处理后的SPE柱或盘放入一个干净的收集瓶中。
固相萃取基本原理与操作
固相萃取基本原理与操作固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）是一种常用的样品前处理技术，用于从复杂的样品基质中富集和纯化目标化合物。
它在环境监测、食品安全、药物分析等领域得到广泛应用。
固相萃取的基本原理是利用固定在固相材料上的吸附剂选择性地吸附目标化合物，然后通过洗脱过程将目标化合物从吸附剂上解吸下来。
固相萃取操作一般包括以下几个步骤：1.准备固相柱：将固相柱安装在固相萃取仪器上，并根据需要装填合适的固相填料（如吸附剂）。
常用的吸附剂有C18矽胶、环烷基、聚合物和细碳纤维等。
2.样品预处理：将样品通过一系列的预处理方法，如过滤、离心浓缩、酸碱调节、转化、净化等，进行初步的处理，以去除杂质和提高目标化合物的浓度。
3.样品加载：将经过预处理的样品通过进样装置加载到固相柱中，将目标化合物以及其他可能的干扰物吸附在固相填料上。
4.洗脱：根据目标化合物和干扰物的亲水性和疏水性差异，选择适当的洗脱溶液进行洗脱，将目标化合物从固相填料上洗脱下来。
洗脱过程中通常使用有机溶剂，如乙腈、甲醇等。
5.浓缩和回溶：将洗脱液浓缩到一定体积，以提高目标化合物的浓度。
通常使用氮气吹扫、蒸发浓缩等方法进行浓缩。
浓缩后，可以选择适当的溶剂进行回溶，以获得满足实验要求的样品溶液。
固相萃取的基本原理包括如下几点：1.吸附选择性：固相柱上所选用的吸附剂可以根据目标化合物的亲水性或疏水性选择，从而将目标化合物吸附在固相填料上，不同的吸附剂对目标化合物和干扰物的选择性有所差异。
2.大体相分离：固相柱中的固相填料具有较大的比表面积，可以有效地与待吸附化合物进行物质交换，并将目标化合物从溶液中吸附到固相填料上，实现目标化合物和其他组分的分离。
3.清洗淋洗：通过选择适当的洗脱溶液，可以有效地去除吸附剂上非目标化合物的残留，提高目标化合物的纯度。
4.吸附静态平衡：吸附剂对目标化合物的吸附速度和平衡时的吸附量是固相萃取过程的一个重要参数，需要通过实验调整吸附时间和洗脱溶剂的体积，以达到最佳的吸附效果。
固相萃取操作指南
固相萃取操作指南引言：固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）是一种常用的样品前处理技术，广泛应用于化学、环境、食品、生物医药等领域。
其主要原理是通过吸附剂（固相萃取柱）对目标物进行选择性吸附，而非吸附物质则通过洗脱步骤去除。
本文将为您介绍固相萃取操作的基本步骤和注意事项。
一、准备工作：1. 萃取柱选择：根据实验所需选择合适的固相萃取柱。
常见的固相萃取柱包括正相、反相、芳烃相、离子交换相以及混合相柱等。
2. 样品处理：根据要分析的样品类型和目标物性质选择合适的样品前处理方法，例如萃取、浓缩、溶解等。
3. 洗脱溶剂选择：根据目标物的亲水性或疏水性选择合适的洗脱溶剂，确保能够有效地洗脱目标物。
二、操作步骤：1. 准备样品：将待处理的样品根据需求进行前处理，例如使用离心机将样品离心沉淀，得到上清液。
2. 柱条件调节：根据柱的要求，将固相萃取柱放置在流动相中，并使用适当的溶剂进行条件调节。
例如，正相柱常用的溶剂是甲醇或醋酸乙酯，而反相柱则使用水等。
3. 样品加载：将经过前处理的样品注入固相萃取柱，控制流速使样品逐渐渗透到固相萃取柱中。
4. 清洗步骤：通过使用洗脱溶剂进行清洗，去除干扰物，保留目标物质。
注意，清洗溶剂的选择应根据不同固相柱的要求进行。
5. 目标物洗脱：选择适当的洗脱溶剂，并将其通过固相萃取柱进行洗脱，使目标物质从固相吸附相中洗脱出来。
6. 浓缩步骤：将洗脱溶剂中的目标物质进行浓缩处理，以便后续的分析检测。
可以使用旋转蒸发仪、氮吹仪等设备进行浓缩。
7. 实验结果分析：对浓缩后的目标物样品进行分析检测，例如使用色谱仪、质谱仪等仪器进行定量或定性分析。
三、操作注意事项：。
DGLC-02在线固相萃取技术-高效液相色谱同时分析
图1 在线固相萃取-双梯度液相色谱分析原理图（A ：上样，清洗，萃取；B：洗脱，分离，分析）DGLC-02在线固相萃取技术-高效液相色谱同时分析饮用水中的9种有机物及农残关键词：在线固相萃取；农药残留；饮用水DGLC-02 Determination of nine pesticide residues in drinking water by online SPE-high performanceliquid chromatographyKey words: Online-SPE, pesticide residue, drinking water引言饮用水中有机物的分析非常具有挑战性。
使用双三元（DGLC ）的在线固相萃取技术和液相色谱法检测，使在实验室很容易实现饮用水标准检验方法的检出限要求，大大精简了GB/T 5750中规定的复杂的样品前处理流程，如水体的富集和净化，而且使用常规的紫外和荧光检测发即可获得极高的灵敏度，使得在饮用水水质控制方面更加简单易控。
测试条件仪器：Ultimate DGP 3600系列，包括有带在线脱气单元的双三元梯度泵；配有2500 µL 半制备进样组件的自动进样器；带有一个六通阀的柱温箱，紫外检测器，荧光检测器。
分析柱：Acclaim PA Ⅱ120, 3 µm 3×150 mm富集柱：Acclaim PA Ⅱ120, 3 µm 3×33 mm 柱温：40 ℃紫外检测器：210nm, 220nm, 238nm, 280nm应用文集图2 混合标准品的色谱图谱图（UV ）1: 238nm ；2:220nm ；3:280nm ；4:210nm图3 苯并芘标准谱图（FLD ）6.110.020.022.301251234250375450minmAU-50微囊藻毒素呋喃丹莠去津甲萘威百菌清2,4,6-三氯酚五氯酚溴氰菊酯6.010.020.030.0200400600800min mV-100苯并芘荧光检测器：激发波长290 nm ，发射波长410 nm 进样量：2.5 mL 流速：0.7 mL/min流动相： A ：0.05%磷酸 B ：水 C ：乙腈 梯度洗脱条件：见表1表1 流动相条件、阀位置及切换时间时间(min)富集泵(B%) 时间(min) 分析泵(B%) 分析泵(C%)时间(min)阀位置 0 95 0 70 30 0 10-1 4 95 5 70 30 4 1-2 4.1 0 6 50 50 2510-125 0 8 50 50 28 95 10 40 60 35 95 13 40 60 14 0 60 15 0 75 19.5 0 75 22.5 0 100 26 0 100357030样品前处理方法将采集的水样用0.22 µm 滤膜过滤至10mL 进样小瓶中直接进样。
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固相萃取-HPLC联用（在线）初步设计
在线固相萃取仪将萃取净化和HPLC 和LC/MS 分析结合进行, 可用于样品的直接分析。
采用离线萃取, 样品只有约1-2%可以注入HPLC。
而采用在线萃取, 样品可灵活注入HPLC。
因此在线萃取可以达到高灵敏度级别。
另外, 通过减少人为干预, 分析数据的质量也会显著提高。
仪器工作原理示意图
在线固相萃取仪通过自动进样器将样品引入萃取柱, 通过循环泵配合切换阀执行活化、淋洗操作，洗脱步骤中利用计量泵完成收集步骤，推入固定体积样品进入HPLC 分析柱。
在上述配置中, 只有液相泵和检测器为HPLC 的模块, 其它部件都来自在线固相萃取仪。
以下是在线固相萃取的常用工作步骤:
1) 活化和平衡萃取柱
2) 将样品引入萃取柱
3) 清洗萃取柱
4) 进样
5) 触发仪器分析
6) 开始处理下一个样品
产品特点：
平行进样
可以和色谱仪器并行工作。
当色谱仪在分析样品时,在线固相萃取仪就可以萃取下一个样品。
这样样品处理基本上不额外占用分析时间。
多种样品萃取
由于采用自动进样方式，可完全按照程序设定全自动操作完成。
容易和HPLC或LC-MS同步
大多数情况下可以使用自带的方法和序列运行, 不需要在电脑上安装软件。
仪器通过遥控信号和色谱仪器同步。
色谱仪器只要有遥控信号输入接口, 就可以和在线固相萃取仪同步。
项目离线固相萃取在线固相萃取分析时间每个样品需40分钟以上,
其中包括萃取500~1000 毫
升水样, 将样品浓缩后定
容至0.5~1 毫升,再进行仪
器分析
每个样品需10~15 分钟。
通
过重叠进样, 样品前处理
不额外占用时间。
材料成本每个样品需要一个SPE 萃
取柱, 人民币15元; 30-50
毫升高纯度溶剂,人民币
10元。
一个SPE 萃取柱可处理
50~100 个样品, 每个样品
的成本为人民币0.5元。
每
个样品需高纯度溶剂3~5
毫升, 人民币1.2元。
数据质量在ppb 级的误差通常大于
5%
通过简化步骤和自动控制,
甚至在ppt级的误差也可在
5%以下。
产品指标
样品数每批？个
样品体积1~？毫升
淋洗溶剂？种
输液泵重复性(C.V.%) < 1.5
与溶剂接触材料不锈钢、聚四氟乙烯、和惰性玻璃控制电脑或仪器控制屏
电源？
重量？
外部尺寸？。