FlowJo中文使用说明书
flowjo处理数据步骤 -回复

flowjo处理数据步骤-回复FlowJo处理数据步骤FlowJo是一款专业的流式细胞术数据分析软件,广泛用于分析和可视化流式细胞仪产生的多变量数据。
本文将为您详细介绍FlowJo的数据处理步骤,帮助您更好地理解和应用该软件。
一、导入数据首先,我们需要将流式细胞仪产生的原始数据导入到FlowJo中。
FlowJo 可以支持多种常见的文件格式,如FCS、CSV、BDF等,您可以选择适合您数据格式的方式导入数据。
通过打开FlowJo软件,您可以在主界面上选择“导入”按钮,然后选择合适的数据文件格式进行导入。
导入后,您可以为数据设置适当的标题和实验说明,以便更好地管理和识别数据。
二、数据矫正和清洗在导入数据后,您可能需要进行一些数据矫正和清洗的步骤,以确保数据的准确性和一致性。
FlowJo提供了一系列的工具和功能,用于处理和清洗数据。
例如,您可以通过设置门(Gates)来排除噪声或异常数据,选择适当的控制样品进行数据矫正,调整仪器设置等。
您还可以使用FlowJo 提供的统计学算法,如均值、中位数、百分位数等,对数据进行清洗和排除异常值。
三、标记和分组数据导入和清洗后,您可以开始对样本进行标记和分组。
流式细胞术通常使用多种荧光染料来标记不同的细胞亚群或生物标记物。
FlowJo提供了丰富的标记和分组工具,以便您对数据进行分类和组织。
您可以根据染色体类型、标记物的强度或共表达等特征创建标记或分组策略。
FlowJo还支持自定义标注方法,让您根据实验设计和目标需求进行个性化标记和分组。
四、绘制和分析标记和分组完成后,您可以开始使用FlowJo的分析功能进行数据可视化和绘制图形。
FlowJo提供了多种绘图工具,如散点图、直方图、线图等,用于可视化和展示您的数据。
您可以在图表中添加坐标轴标记、图例、标题等,以便更好地展示数据信息和结果。
FlowJo还支持多种数据分析方法,如聚类分析、细胞分型、统计学测试等,帮助您从数据中提取更多的信息和结论。
FlowJo软件的简单介绍和基本应用

FlowJo 软件的简单介绍和基本应用FlowJo 是九十年代美国斯坦福大学Leonard Herzenberg(FACS 机器的发明者)实验室研发的一款流式数据分析软件。
这款分析软件功能强大,操作简单,易学易用,可在Windows 或者Mac 系统下安装使用。
它简单直观的操作平台,已被领域内的科学家、实验室广泛使用。
同时,他也是各期刊杂志引用最多的流式数据分析软件。
一、FlowJo 电脑配置及安装环境操作系统:Vista、Windows7 PC:内存:512MB RAM 及以上MAC: 操作系统:OSX 10.3 或更高版本内存:512MB RAM 及以上安装环境:避免阳光直射,水平放置,远离水源、热源二、FlowJo 基本功能介绍1.阶梯式设门:将细胞群之间的逻辑关系用简单、递进的阶梯式去呈现,一改传统复杂的逻辑门设置。
并可以自定义细胞群名称,进而直观的显示细胞群统计值,让分析结果一目了然。
如图多种图像显示方法及显示类型:2.。
如图显示方法:它可以呈现为一维的直方图,二维图及三维立体图三维图一维图二维图,等高图,伪色图,斑马图等。
如图除了传显示类型:统使用的散点图外,还有密度图1.多种设门工具:3..的目标细胞群是规则分布设门是流式数据分析中界定细胞目标群的必要手段,不管检测便的界定各种细胞群。
如图还是不规则分布的,是小概率事件还是集体事件,都可以很方矩形门、椭圆门、自动门蜘蛛门四分门4.多种分析平台及工具:胞周期,细胞增殖,钙离子流量,反向设门等。
特殊的分析平台:细的批处理,样品的荧光补偿。
独特的分析工具:门灵活方便的数据导出:5.或直接打印,输出的表软件、Powerpoint 无论是图形数据还是表格数据都可以用Ofice SQL 等格式。
格数据可保存为HTML,的基本应用:三、FlowJo1.单标样本的分析方法:软件工作台由菜单栏、工具栏、组空间双击桌面Flowjo 软件图标,进入软件工作台。
FlowJo软件的简单介绍和基本应用

FlowJo软件的简单介绍和基本应用FlowJo是九十年代美国斯坦福大学Leonard Herzenberg(FACS机器的发明者)实验室研发的一款流式数据分析软件。
这款分析软件功能强大,操作简单,易学易用,可在Windows或者Mac系统下安装使用。
它简单直观的操作平台,已被领域内的科学家、实验室广泛使用。
同时,他也是各期刊杂志引用最多的流式数据分析软件。
一、FlowJo电脑配置及安装环境PC: 操作系统:Vista、Windows7内存:512MB RAM及以上MAC: 操作系统:OSX 10.3 或更高版本内存:512MB RAM及以上安装环境:避免阳光直射,水平放置,远离水源、热源二、FlowJo基本功能介绍1.阶梯式设门:将细胞群之间的逻辑关系用简单、递进的阶梯式去呈现,一改传统复杂的逻辑门设置。
并可以自定义细胞群名称,进而直观的显示细胞群统计值,让分析结果一目了然。
如图2.多种图像显示方法及显示类型:显示方法:它可以呈现为一维的直方图,二维图及三维立体图。
如图一维图二维图三维图显示类型:除了传统使用的散点图外,还有密度图,等高图,伪色图,斑马图等。
如图3..多种设门工具:设门是流式数据分析中界定细胞目标群的必要手段,不管检测的目标细胞群是规则分布还是不规则分布的,是小概率事件还是集体事件,都可以很方便的界定各种细胞群。
如图蜘蛛门四分门矩形门、椭圆门、自动门4.多种分析平台及工具:特殊的分析平台:细胞周期,细胞增殖,钙离子流量,反向设门等。
独特的分析工具:门的批处理,样品的荧光补偿。
5.灵活方便的数据导出:无论是图形数据还是表格数据都可以用Ofice软件、Powerpoint或直接打印,输出的表格数据可保存为HTML,SQL等格式。
三、FlowJo的基本应用:1.单标样本的分析方法:双击桌面Flowjo软件图标,进入软件工作台。
软件工作台由菜单栏、工具栏、组空间和样本空间组成(见图1)。
FlowJo中文使用说明书

FlowJo中文实用手册(软件版本:FlowJo7.6.5 2012/06/20 更新)第一章 FlowJo简介 (1)一、FlowJo对电脑配置的要求 (1)二、FlowJo的安装过程(Windows) (1)三、FlowJo的工作台 (5)第二章 FlowJo分析单标样本 (6)一、由原始数据生成单参数直方图的过程 (6)二、图形的输出和保存 (10)第三章 FlowJo分析多色标记样本 (13)一、由原始数据生成二维点图的过程 (13)二、二维点图的设门原则 (16)三、多色标记分析说明 (16)第四章 FlowJo软件荧光补偿 (18)一、用FlowJo做荧光补偿并进行数据分析的步骤 (18)二、FlowJo荧光补偿的具体步骤 (18)三、双指数转换 (24)第五章 FlowJo的批处理功能 (27)一、设门分析的批处理 (27)二、表格分析的批处理 (32)三、图形分析的批处理 (35)第六章 FlowJo分析细胞凋亡样本 (43)一、细胞凋亡概述 (43)二、FlowJo分析凋亡数据的过程 (44)三、凋亡数据结果分析 (45)第七章 FlowJo软件分析细胞周期样本 (47)一、细胞周期分析概述 (47)二、FlowJo分析细胞周期数据的过程 (48)三、细胞周期拟合的调整方法和步骤 (51)四、细胞周期结果分析 (53)第一章 FlowJo简介FlowJo是美国斯坦福大学Leonard Herzenberg(FACS机器的发明者)实验室在90年代研发的一款流式数据分析软件。
FlowJo由于功能强大,简单易用,已经被领域内的科学家、实验室广泛引用;同时FlowJo也是各高影响力核心期刊引用最多的流式数据分析软件。
一、FlowJo对电脑配置的要求1. PC电脑:操作系统:Windows XP,Vista,Windows7内存:512MB及以上网络连接:使用试用序列号及联网序列号必需要有网络连接;加密狗无需网络2. 苹果电脑:操作系统:OSX10.3或者更高版本内存:512MB及以上网络连接:使用试用序列号及联网序列号必需要有网络连接加;密狗无需网络二、FlowJo的安装过程(Windows)•请到我们的网站上下载最新版本:/content/download在此,我们下载V7.6.5 为例/sites/default/files/7.6.5_X32.exe 将文件下载到桌面之后,就可以看到FlowJo安装程序图标。
FlowJam手册

FlowJam 微波物料流动探测仪
1.概述
2.技术参数
3.安装
4.连接
5.认证
1. 概述
FlowJam微波物料流动探测仪用于检测多种固体物料的流动状态。
当物料在金属或非金属管道或通道中流动,通过监测点时,就能被监测并将信号通过继电器输出。
探测仪能分辨两种不同的情况
●物料的流动
●物料的停止或堵塞
2. 技术参数
外形尺寸:见图2
工作电源:12-24V AC
12-30V DC
电压消耗:约1.5VA
电流消耗:70mA
继电器:
最大电压:42V AC/DC
最大电流:2A AC/DC
功率: 60VA,50W
响应时间:1-15秒连续可调
发射功率:最大5mW
重量:约1Kg
3. 安装
探测器的安装取决于安装点周围的环境。
探测仪可以直接拧入R1½英寸的螺孔(见图3)
4. 连接
探测仪的接线应按图9所示操作。
5. 证书
本产品符合以下标准
Ref. No. date Ref. No.
EN 55011 Edition 90 ENV 50140 EN 60555-2 1987 EN 50141 EN 50081-1 1992 ENV 50142 EN 50082-1 1992
Pr EN 50082-1 1994
Pr EN 50082-2 1994
本产品同时符合EMC Directive89/336/EEC标准。
FlowJo软件的简单介绍和基本应用

FlowJo软件的简单介绍和基本应用FlowJo 是九十年代美国斯坦福大学Leonard Herzenberg(FACS机器的发明者)实验室研发的一款流式数据分析软件。
这款分析软件功能强大,操作简单,易学易用,可在Windows或者Mac 系统下安装使用。
它简单直观的操作平台,已被领域内的科学家、实验室广泛使用。
同时,他也是各期刊杂志引用最多的流式数据分析软件。
一、FlowJo 电脑配置及安装环境PC:操作系统:Vista、Windows7内存:512MB RAM及以上MAC: 操作系统:OSX10.3 或更高版本内存:512MB RAM及以上安装环境:避免阳光直射,水平放置,远离水源、热源二、FlowJo 基本功能介绍1.阶梯式设门:将细胞群之间的逻辑关系用简单、递进的阶梯式去呈现,一改传统复杂的逻辑门设置。
并可以自定义细胞群名称,进而直观的显示细胞群统计值,让分析结果一目了然。
如图2.多种图像显示方法及显示类型:显示方法:它可以呈现为一维的直方图,二维图及三维立体图。
如图一维图二维图三维图显示类型:除了传统使用的散点图外,还有密度图,等高图,伪色图,斑马图等。
如图3..多种设门工具:设门是流式数据分析中界定细胞目标群的必要手段,不管检测的目标细胞群是规则分布还是不规则分布的,是小概率事件还是集体事件,都可以很方便的界定各种细胞群。
如图蜘蛛门四分门矩形门、椭圆门、自动门4.多种分析平台及工具:特殊的分析平台:细胞周期,细胞增殖,钙离子流量,反向设门等。
独特的分析工具:门的批处理,样品的荧光补偿。
5.灵活方便的数据导出:无论是图形数据还是表格数据都可以用Ofice软件、Powerpoint 或直接打印,输出的表格数据可保存为HTML,SQL等格式。
三、FlowJo 的基本应用:1.单标样本的分析方法:双击桌面Flowjo 软件图标,进入软件工作台。
软件工作台由菜单栏、工具栏、组空间和样本空间组成(见图1)。
FlowJo中文使用说明书

FlowJo中文使用说明书FlowJo是一款广泛用于流式细胞仪数据分析的软件,它提供了强大的工具和功能,帮助研究人员快速准确地分析和解读实验数据。
本文将为您详细介绍如何在FlowJo中文版本中进行数据分析和操作。
1. 软件下载和安装首先,您需要从FlowJo官方网站上下载适用于您操作系统的软件安装包。
下载完成后,按照安装向导的提示进行安装。
安装完成后,您可以打开FlowJo软件开始使用。
2. 导入数据文件在FlowJo中文版本中,您可以通过“文件”菜单中的“导入”选项来导入实验数据文件。
您可以导入FCS格式的流式细胞仪数据文件,也可以导入其他格式的数据文件,如CSV文件等。
导入完成后,您将在软件中看到您导入的数据文件。
3. 数据分析在FlowJo中文版本中,您可以使用各种工具和功能来进行数据分析。
比如,您可以通过绘制散点图、直方图等图表来展示数据分布情况;还可以使用统计分析功能来进行数据分析和对比;另外,您还可以进行细胞亚群分析等操作。
4. 结果展示在FlowJo中文版本中,您可以自定义图表的样式和颜色,使得您的数据结果更加清晰、直观。
您可以将结果导出为图片或PDF格式,以便在论文中使用或与他人分享。
5. 其他功能除了上述功能外,FlowJo中文版本还提供了许多其他实用的功能,如自动补偿、样本比较、批量分析等。
您可以根据您的实验需求来灵活运用这些功能,提高数据分析的效率和准确性。
总结:通过本文的介绍,相信您已经对FlowJo中文版本的使用有了一定的了解。
在进行流式细胞仪数据分析时,FlowJo将是您强大的助手,帮助您快速准确地分析和解读实验数据。
祝您在科研道路上取得更多的成就!。
flowjo中文使用手册

flowjo中文使用手册摘要:1.引言2.FlowJo 的使用方法3.FlowJo 的功能介绍4.常见问题及解决方案5.结论正文:【引言】FlowJo 是一款用于中文文本处理的人工智能助手,可以帮助用户进行文本分析、生成、翻译等操作。
本手册将为您详细介绍如何使用FlowJo,以及它的功能和使用方法。
【FlowJo 的使用方法】1.下载与安装:首先,您需要在官方网站上下载FlowJo,并按照提示进行安装。
安装完成后,打开FlowJo 客户端,即可开始使用。
2.注册与登录:在第一次使用FlowJo 时,您需要注册一个账号并登录。
注册时,请务必使用常用邮箱和密码,以便在忘记密码时进行找回。
3.导入与分析文本:登录后,您可以选择导入文本文件或直接输入文本进行分析。
FlowJo 支持多种文本格式,如.txt、.docx、.pdf 等。
【FlowJo 的功能介绍】1.文本分析:FlowJo 可以对输入的文本进行情感分析、主题分析、关键词提取等操作,帮助您快速了解文本内容。
2.文本生成:FlowJo 可以根据用户输入的关键词或主题,生成与之相关的文章、诗歌等文本。
3.文本翻译:FlowJo 支持多种语言之间的翻译,包括中英、中日、中韩等。
4.文本纠错:FlowJo 可以对输入的文本进行语法检查和纠错,帮助您提高写作质量。
【常见问题及解决方案】1.问题:导入的文本无法分析。
解决方案:请检查导入的文本格式是否正确,或尝试重新导入。
2.问题:生成的文本质量不高。
解决方案:请提供更具体的关键词或主题,或尝试提高生成文本的质量等级。
3.问题:翻译结果不准确。
解决方案:请检查输入的文本是否存在歧义,或尝试提高翻译的质量等级。
【结论】FlowJo 是一款功能强大的中文文本处理助手,可以帮助用户快速处理文本,提高写作效率。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
FlowJo中文实用手册(软件版本:FlowJo7.6.5 2012/06/20 更新)第一章 FlowJo简介 (1)一、FlowJo对电脑配置的要求 (1)二、FlowJo的安装过程(Windows) (1)三、FlowJo的工作台 (5)第二章 FlowJo分析单标样本 (6)一、由原始数据生成单参数直方图的过程 (6)二、图形的输出和保存 (10)第三章 FlowJo分析多色标记样本 (13)一、由原始数据生成二维点图的过程 (13)二、二维点图的设门原则 (16)三、多色标记分析说明 (16)第四章 FlowJo软件荧光补偿 (18)一、用FlowJo做荧光补偿并进行数据分析的步骤 (18)二、FlowJo荧光补偿的具体步骤 (18)三、双指数转换 (24)第五章 FlowJo的批处理功能 (27)一、设门分析的批处理 (27)二、表格分析的批处理 (32)三、图形分析的批处理 (35)第六章 FlowJo分析细胞凋亡样本 (43)一、细胞凋亡概述 (43)二、FlowJo分析凋亡数据的过程 (44)三、凋亡数据结果分析 (45)第七章 FlowJo软件分析细胞周期样本 (47)一、细胞周期分析概述 (47)二、FlowJo分析细胞周期数据的过程 (48)三、细胞周期拟合的调整方法和步骤 (51)四、细胞周期结果分析 (53)第一章 FlowJo简介FlowJo是美国斯坦福大学Leonard Herzenberg(FACS机器的发明者)实验室在90年代研发的一款流式数据分析软件。
FlowJo由于功能强大,简单易用,已经被领域内的科学家、实验室广泛引用;同时FlowJo也是各高影响力核心期刊引用最多的流式数据分析软件。
一、FlowJo对电脑配置的要求1. PC电脑:操作系统:Windows XP,Vista,Windows7内存:512MB及以上网络连接:使用试用序列号及联网序列号必需要有网络连接;加密狗无需网络2. 苹果电脑:操作系统:OSX10.3或者更高版本内存:512MB及以上网络连接:使用试用序列号及联网序列号必需要有网络连接加;密狗无需网络二、FlowJo的安装过程(Windows)•请到我们的网站上下载最新版本:/content/download在此,我们下载V7.6.5 为例/sites/default/files/7.6.5_X32.exe 将文件下载到桌面之后,就可以看到FlowJo安装程序图标。
•双击FlowJo安装程序•屏幕上出现解压进程窗口:•解压完成后出现安装窗口:•选择“NEXT”•选择“NEXT”•选择“NEXT”•选择“Install”软件自动安装。
•软件安装完成后显示•选择“Done”进入软件版权信息窗口•根据不同软件的授权方法,进行以下操作:a.购买的加密狗:先在电脑上插入加密狗(Dongle),然后启动FlowJo。
b.购买的序列号:在序列号栏输入序列号(Serial Number),然后点击UseSerial Number按钮。
c.如果是初次试用,需要申请序列号:点击 Get Trial License按钮,在FlowJo官方网站申请试用序列号。
收到注册邮箱里的序列号之后,将试用序列号输入序列号栏,点击Use Serial Number按钮。
d.使用Demo模式:如果试用序列号已经过期,而且需要继续学习FlowJo,点击Run in Demo Mode按钮,在Demo模式下使用FlowJo提供的Demo数据进行数据分析。
三、FlowJo的工作台双击桌面FlowJo软件图标,进入软件工作台。
或者软件工作台由菜单栏、常用工具栏、组空间和样本空间组成。
第二章 FlowJo分析单标样本单标记样本数据常用的显示方式是单参数直方图。
单参数直方图是一维数据用的最多的图形显示形式,既可以用于定性分析,又可以用于定量分析。
横坐标可以是线性标度或对数标度,单位用“通道数”或者“道数”来表示,在流式检测中的含义是代表所检测的荧光或散射光的强度。
纵坐标表示的是横坐标某一特定荧光强度的细胞数,有时也用相对百分比来表现。
一、由原始数据生成单参数直方图的过程原始数据:手册中提到的演示数据,可以在flowjochina的网站上下载/sites/default/files/demodata.rar选择3 color comp文件夹中的Cy5PE comp.fcs进行分析演示。
将此文件夹存放到桌面。
1.双击桌面FlowJo软件图标,进入软件工作台。
2.把“3 color comp”数据文件夹从桌面上拖入FlowJo。
•在组空间中单击选中“3 color comp”组,此时在样本空间里显示“3 color comp”组中的所有样本。
•在样本空间中双击“Cy5PE comp.fcs”,出现图形窗口。
图形窗口显示为二维点图。
1)X轴选择SSC(侧向散射,侧向散射的含义:它对细胞膜、细胞质和核膜的折射更为敏感,其散射强度几乎与细胞内颗粒结构的质量成近似直线关系,也就是说,细胞内颗粒结构越复杂,质量越大,其SSC越大;反之则越小)2)Y轴选择FSC(前向散射,前向散射的含义:该值的大小与细胞的直径近似直线关系,也就说,对于不同的细胞,细胞越大,其FSC就越大;反之则越小)3)然后选择设门工具(矩形门、椭圆门、多边形门、自动门)中任意一个,在二维点图中选中淋巴细胞。
如下图所示: 图中用圆圈所选中区域为淋巴细胞•在图形窗口中双击选中的淋巴细胞,生成新的图形窗口。
1)在X轴选择Cy5PE:CD4,Y轴选择Histogram,2)选择设门工具(区域门、双分门)中任意一个,在单参数直方图中设门。
a.双分门设门如下图所示:左边区域为CD4阴性细胞,右边区域为CD4阳性细胞b.区域门设门如下图所示:左边区域为CD4阴性细胞,右边区域为CD阳性细胞二、图形的输出和保存a.在单参数图上点击鼠标右键选择复制图片,可以把图片粘贴到WORD或PPT中。
b.在图形分析窗口菜单栏中选择“文件”并单击,选择下拉菜单中的“另存为”,选择保存位置、重新命名文件名以及保存的文件类型(SVG、PNG、EMF、JPG)。
c.在FlowJo工作台单击打开布局编辑器。
d.在样本空间中,把淋巴细胞的节点拖入到布局编辑器中。
淋巴细胞节点如下图所示:布局编辑器显示的单参数直方图如下图所示:e.在布局编辑器中点击保存按钮,在弹出的对话框中选择保存的路径,更改保存的图片名称以及图片格式。
备注:①可以在图片名称后面直接输入需要保存的格式,比如命名并保存为:data001.JPG。
可以保存的图片格式有:JPG, PNG, GIF, EMF, SVG, PDF。
② FlowJo默认的图片格式为PNG格式f.更改布局编辑器输出的默认图片格式的步骤:①到工作台的菜单栏中点击“编辑”菜单,在下拉列表中选择“偏好设置”,在偏好设置对话框中选择“文件格式”②点击在布局编辑器项目下拉按钮,选择需要的图片格式:第三章 FlowJo分析多色标记样本多色标记样本,包含双标记、三标记及以上的样本。
多色标记样本分析的原则是把多色标记简化为单标记或双标记。
多色标记样本在采集或数据处理过程中需要做荧光补偿。
在FlowJo中的数据显示方式是二维点图。
二维点图能够显示两个独立参数与细胞相对数之间的关系,横坐标和纵坐标分别代表与细胞有关的两个独立参数,平面上的每一个点表示具有相应坐标值的细胞。
一般来说可以由一个二维点图得到两个一维直方图,但是由于多个细胞具有相同二维坐标现象的存在,所以二维点图的信息量要大于两个一维直方图的信息量。
二维点图在设十字门之后被分成四个区域,实验目的不同,各个区域所代表的含义不同。
本手册提供参考的是三标记样本的分析步骤。
只要灵活掌握分析技巧,根据实验需求学会把多色分析简化,这样就可以做到事半功倍的效果。
一、由原始数据生成二维点图的过程原始数据:为FlowJo演示数据,选择3-color-experiment文件夹中的931115-B02-Sample01.FCS进行分析演示。
1.打开软件,将“3-color-experiment”文件夹拖入FlowJo工作台。
2.在样本空间中双击“931115-B02-Sample01.FCS”样本,出现图形窗口,显示为二维点图。
X轴选择FSC,Y轴选择SSC。
然后选择多边形设门工具,在二维点图中选中淋巴细胞。
如下图所示:3.双击淋巴细胞门,出现图形窗口,X轴选择Fluor::CD3,Y轴选择FSC。
使用矩形设门工具选中CD3阳性细胞,设门并命名为T细胞4.双击T细胞门,出现图形窗口,在X轴选择Cy5PE::CD4,Y轴选择PhyEry::CD8,使用十字门工具设门,如下图所示:Q1:CD8单阳性细胞,为CD8+ T细胞Q2:双阳性细胞Q3:CD4单阳性细胞,为CD4+ T细胞Q4:双阴性细胞四分门更改门位置的方法:单击四分门“十字”的交点选中这个四分门,如下图所示。
拖动鼠标将四分门移到目标位置。
二、二维点图的设门原则二维点图常用四分门来设门,四分门设门要根据阴性对照界定阴性区。
根据细胞分群的趋势,四分门的界定线可设在阴性、阳性细胞的分群处。
三、多色标记分析说明多色样本分析在实验中具有重要的地位,很多用户对多色分析感觉无从下手。
其实,流式分析中结果的显示一般都是一维和二维的。
因此,在流式分析中无论是几色标记的样本,只要把多色的分析简化为单标记和双标记的分析,问题就会迎刃而解。
比如:检测TREG需要标记CD4/CD25/FOXP3,可以用SSC vs. CD4的二维点图,把CD4+的细胞圈出来。
然后用CD25 vs. FOXP3的二维点图,把CD25+/FOXP3+的细胞表示出来。
这样就可以把CD4+/CD25+/FOXP3+的TREG细胞辨别出来。
上面的实例就是把三标记的样本转化为两个二维的点图进行分析。
第四章 FlowJo软件荧光补偿在做多色流式实验的时候,荧光补偿是必需进行的步骤。
FlowJo可以根据荧光补偿单染对照管的数据生成补偿矩阵,并可以对补偿矩阵进行调整。
一、用FlowJo做荧光补偿并进行数据分析的步骤1.在补偿编辑器中导入单染管的数据并生成荧光补偿矩阵2.将补偿矩阵应用到组,对组里面的所有数据进行荧光补偿3.对补偿过的参数轴启用双指数转换功能二、FlowJo荧光补偿的具体步骤如果荧光补偿单染对照的数据很好,阴性细胞群和阳性细胞群的分群很明显,只需要将单染管的数据导入FlowJo的补偿编辑器里,FlowJo能自动设门,界定出阴性细胞群和阳性细胞群,并计算出荧光补偿矩阵。
操作非常简单,下面的4个步骤便可完成荧光补偿:视频教程可以在线观看:/v75%20Compensation_conv.html 1.将数据拖入FlowJo工作台。