免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义
病理科免疫组化在临床上的应用及其意义
病理科免疫组化在临床上得应用及其意义免疫组化技术就是以免疫学得抗原抗体反应为其理论基础发展起来得一门方法学,在生物学领域尤其就是在医学得基础与临床研究中发挥重要得作用,对疾病尤其就是肿瘤得诊断、鉴别诊断及发病机制得研究提供了强有力得手段、免疫组化技术就是２0世纪70年代初Sｔeｒb Bergｅr 在酶标法得基础上发明得,80年代在外国开始应用于临床研究与诊断,90年代初在我国逐渐开始应用于疑难病例得诊断与鉴别诊断。
随着新技术得不断发展,抗体种类从研发开始得十几种发展到目前数百种抗体应用于临床科研得各个领域,我国在临床病理诊断上可用抗体293种。
由于抗体较昂贵,所以各院根据活检量与病种不同选择不同得抗体,这些抗体对大部分疑难病例得诊断起到重要得辅助作用、对病人得预后及指导治疗具有重要得意义。
一、目前常用得抗体分四大类１。
上皮性标记物:ＣＫhigh(AE3), CK loｗ,CＫ－paｎ,CK1９,ＣＫ7, CＫ20,EMＡ,CEA,－CA １5-３,SCLC , E—Ｃalｄeｈerin,CA125, Tg(甲状腺球蛋白) ,TTＦ—1ﻫAＦP。
这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于上皮组织,如果就是恶性肿瘤,就就是癌2ﻫ.间叶组织标记物:SMA ,Dｅsｍｉｎ,Ｖiｍｅｎtｉn,Lysｏzymｅ,AAＣT, CD68 MｙoD1,CＤ11７,这些抗体阳性,表明肿瘤组织起源于间叶组织,如果就是恶性肿瘤,就就是肉瘤、3ﻫ、神经及神经内分泌标记物:CgA ,Ｓｙnaptｏphyｓin,NSＥ,S－１00:NF (神经纤维丝蛋白),GFＡP,CD９9,CD56、4淋巴细胞标志物:T ceｌl标记物:CD3, CＤ45ＲＯ, CD43,CＤ5, CD8,ＣD4,ALK,GｒａｎmB , CD５6 。
ﻫＢｃell标记物:CＤ—20 ,CD79a,CD2３, ＣD10,Ｋappa ,Laｍｂｄa ＣD2１CD38 ,CyｃlinD1 ,Bcl—2。
免疫组化技术在病理诊断中的应用
免疫组化技术在病理诊断中的应用发布时间：2021-04-02T15:47:53.450Z 来源：《医师在线》2021年5期作者：崔晓雪[导读] 目的：分析病理诊断中免疫组化技术的应用效果。
崔晓雪黑龙江省鸡西市人民医院病理科黑龙江省鸡西市158100摘要：目的：分析病理诊断中免疫组化技术的应用效果。
方法：本次选择102例肿瘤患者为对象展开研究，按诊断技术将其分为对照组与观察组。
结果：观察组确诊率高于对照组，差异比较，存在统计学意义。
观察组阳性率92.15%，对照组阳性率72.54%，数据差异存在，存在统计学意义。
结论：在病理诊断中，采取免疫组化技术，可提高检测结果准确性，提高制片的质量水平，为疾病诊断提供依据。
关键词：免疫组化技术；病理诊断；应用；研究近年来我国医疗诊断技术逐渐优化发展，在病理诊断中免疫组化技术得到了广泛应用[1]，涉及诸多领域，如，肿瘤原发部位确定、肿瘤组织起源鉴别、未分化恶性肿瘤性质的判定，随着研究的不断深化，免疫组化技术在病理诊断中发挥出一定作用，可提升诊断的准确性[2]。
1.资料与方法1.1一般资料选取2017年1月~2018年1月我院收治的肿瘤患者102例为对象，根据诊断技术随机将全部患者分成51例对照组、51例观察组。
对照组患者平均（43.7±8.2）岁，采取常规技术诊断；观察组患者平均（45.1±9.5）岁，采取免疫组化技术诊断，比较两组基本资料，具有可比性。
1.2方法对照组采取常规技术诊断：根据患者病灶大小、位置及类型进行穿刺活检，将患者肿瘤组织取下，比较标准组织。
观察组采取免疫组化技术诊断：选择试剂包括：蒸馏水、透明液、脱水液、浸蜡液、树胶、甲醛固定液，在石蜡中置入样本，将其切片，厚度控制在2UM，随后进行免组染色，将其置于浓度为3%的过氧化氢液体中，浸泡100min，温度控制在37摄氏度左右，清洗采用蒸馏水，待孵育后DBA显色，采用树胶来封固[3]。
免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值分析
免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值分析随着医疗技术的不断进步，免疫组化技术在病理学领域中的应用越来越广泛。
免疫组化技术是一种在组织切片中应用抗体特异性与抗原相互作用的方法，通过对组织中一些特定分子的免疫活性成分进行定位和检测，从而得到更为精准的病理诊断结果。
本文将从技术原理、应用优势、应用领域和发展趋势等方面进行分析，探讨免疫组化技术在病理组织切片中的应用价值。
一、技术原理免疫组化技术是基于免疫学原理，通过特异性抗原与抗体之间的结合来检测组织切片中的蛋白质、细胞因子等生物大分子，从而对细胞及组织的结构、功能和病变进行定位和分析的方法。
其核心原理是利用抗体的高度特异性和亲和力，来实现对组织中特定蛋白或生物分子的识别。
免疫组化技术主要分为直接法和间接法两种。
直接法是将荧光标记或酶标记的抗体直接与待检测的抗原结合，然后通过显微镜观察标记物的位置和数量。
间接法则是将一种第一抗体与待检测抗原结合，然后用另一种标记有酶或者荧光素的第二抗体去识别第一抗体，最后通过显色反应或者荧光显微镜观察标记物的位置和数量。
这两种方法都能够实现对组织切片中特定蛋白质或生物分子的定位和检测。
二、应用优势1. 提高诊断的准确性：免疫组化技术通过对组织切片中特定抗原的检测，可以为病理医生提供更为精确的诊断信息，有助于区分病变类型和疾病分期，从而提高了病理诊断的准确性。
2. 发现新的生物标志物：通过免疫组化技术可以检测到组织中一些特定蛋白质的表达情况，进而发现新的生物标志物，帮助预测疾病进展和评估治疗效果，为临床治疗提供更为准确的依据。
3. 研究疾病发病机制：免疫组化技术可以帮助研究人员对疾病的发病机制进行深入研究，通过检测疾病相关蛋白的表达情况，揭示疾病的发生和发展过程，为疾病的治疗和预防提供理论依据。
4. 指导个性化治疗：通过检测组织中特定蛋白的表达情况，可以为临床治疗提供更为个性化的治疗方案，帮助临床医生制定更为合理的治疗方案，提高治疗效果。
免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值分析
免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值分析随着医学科学的不断发展，病理诊断成为了临床医学中不可或缺的一部分。
病理组织切片是一种常见的临床检测手段，可以通过镜下观察组织的结构和形态，帮助医生进行疾病的诊断和治疗。
而免疫组化技术则是在病理组织切片中起着重要作用的一种技术手段，它利用特定的抗体对组织中的特定分子进行标记，能够帮助医生进行更加准确的诊断和鉴别诊断。
本文将从应用价值的角度对免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用进行分析。
一、提高病理诊断的准确率免疫组化技术能够对组织中的特定分子进行标记，如细胞膜标记物、细胞核标记物、细胞质标记物等，通过观察这些标记物的表达情况，可以帮助医生对疾病进行准确的诊断和鉴别诊断。
在癌症的诊断中，免疫组化技术可以帮助医生鉴别肿瘤的来源、类型和分化程度，对于一些难以鉴别的疾病，免疫组化技术可以提供更加准确的诊断依据，从而提高病理诊断的准确率。
二、指导疾病治疗方案的制定除了对疾病进行准确诊断外，免疫组化技术还可以帮助医生对疾病的预后进行评估，这对于指导疾病的治疗方案制定非常重要。
在肿瘤的治疗中，免疫组化技术可以帮助医生对肿瘤的分子表达特征进行分析，从而指导精准治疗的制定，包括靶向治疗、免疫治疗等。
通过对疾病治疗的指导，可以使患者获得更加有效的治疗效果，减少治疗的不必要性和副作用。
三、研究疾病的发病机制和预后预测免疫组化技术在疾病的发病机制和预后预测中也发挥着重要作用。
通过对特定分子的表达情况进行分析，可以深入了解疾病的发病机制，揭示疾病发生、发展的规律，并为新药研发和个性化治疗提供理论依据。
免疫组化技术还可以帮助医生对患者的预后进行预测，对于一些预后不明确的疾病，可以通过免疫组化技术对患者的分子表达情况进行评估，为临床预后判断提供客观依据。
四、开启个性化医疗的新时代随着精准医学的不断发展，个性化医疗成为了医学发展的新趋势。
而免疫组化技术的应用为个性化医疗提供了重要的技术支持。
免疫组化技术在病理诊断中的应用
免疫组化技术在病理诊断中的应用
免疫组化技术是一种用于病理诊断的重要方法，它利用抗体与细胞或组织中的特定分子结合，从而检测、定位和定量这些分子。
免疫组织化学技术可以用于肿瘤学、感染性疾病、自身免疫性疾病、神经病理学等领域的病理诊断。
在肿瘤学中，常用的免疫组化技术有肿瘤标记物检测、肿瘤分型和分级，以及预后指标的检测。
例如，通过检测细胞分裂素Ki-67的表达水平，可以评估肿瘤的增殖指数，从而判断肿瘤的生长速度和恶性程度。
在感染性疾病中，免疫组化技术可以用于检测病原体的存在和分布。
例如，通过检测病毒抗原或病原菌抗原的表达，可以确定感染的类型和感染程度。
在自身免疫性疾病中，免疫组化技术可以用于检测自身抗体的存在和分布。
例如，通过检测ANA（抗核抗体）的表达，可以确定病人是否患有系统性红斑狼疮。
在神经病理学中，免疫组化技术可以用于检测神经元标记物的表达。
例如，通过检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达，可以确定脑肿瘤细胞是否来源于神经元。
总之，免疫组化技术在病理诊断中有着广泛的应用，它可以增强诊断的准确性和可靠性，为病人的治疗提供更好的指导。
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免疫组化在临床诊断中的应用
免疫组化在临床诊断中的应用在临床病理诊断中，免疫组织化学（IHe）是一种很重要的技术和手段，从20世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。
但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一些局限性。
深入研究免疫组化原理和技术，必须熟悉各种抗体真阳性反应部位，实现实验室间免疫组化标准化，使免疫组化在病理诊断中发挥最大的辅助作用。
在病理诊断中，随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现，免疫组化在肿瘤诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。
由于免疫组化技术也存在一些局限性，因此，深入研究免疫组化原理和技术，并努力实现规范化的操作，才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床治疗中的作用。
1.免疫组化技术观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况，对抗原进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学，由于抗原与抗体特异性结合，因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂（酶、荧光素、同位素、金属离子等等）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）。
IHC所用标本主要为两大类:组织标本和细胞标本，其中制作组织标本最常用、最基本的方法是石蜡切片。
石蜡切片对于组织形态保存好，有利于各种染色对照观察，而且能长期保存；石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
2.免疫组化技术在临床诊断中的作用目前免疫组化技术应用于临床主要有以下几个方面：2.1肿瘤良恶性的判断对于反应性增生还是肿瘤性增生，可用免疫球蛋白（Ig）的轻链抗体检测B淋巴细胞增生的单克隆或多克隆性来区别。
在滤泡反应性增生时，滤泡反应中心的细胞不表达细胞凋亡蛋白（bc1-2）,be1-2阴性；而在滤泡性淋巴瘤中，由于90%以上肿瘤性滤泡细胞有bc1-2的高表达，bc1-2阳性。
免疫组化技术在临床病理诊断中的应用
免疫组化技术在临床病理诊断中的应用第一章绪论免疫组化技术是现代生物医学研究中的一项重要技术。
它通过特异性抗体与组织样本中潜在的分子相互作用，从而在显微镜下定位、鉴定并定量分析特定的细胞和分子。
在病理学中，它已经成为一种最为有效的辅助诊断和筛查技术之一。
当前，病理学、肿瘤学和临床生化学等领域广泛应用免疫组化技术进行临床病理诊断和分子病理学研究。
第二章免疫组化技术的基本原理免疫组化技术的基本原理是通过特异性的抗体结合组织中的相应分子。
这些抗体分子与特定细胞类型或某些疾病状态的细胞产生的分子特异性结合，并产生一种细胞水平上的可视化标记。
通过将抗体标记与荧光物或染色剂一起使用，可以间接地分析和定量细胞分子的表达和定位。
使用免疫组化技术，可以在细胞水平上观察特定基因的表达，并通过增加对亚细胞结构和它们出现的联系的理解，解决特定细胞和组织的生物学性质中的疑点。
第三章免疫组化技术在肿瘤病理学中的应用在病理学中，免疫组化技术是一种常用的辅助诊断方法。
它可以评估细胞变异，对肿瘤的类型、分级、预后和预后预测有重要意义。
免疫组化技术已经用于对肿瘤组织的类型进行分类，如：鳞状细胞癌和腺癌。
它还可以检测代表一定细胞表面的抗原以确定肿瘤组织来源，例如使用CD20抗体进行B细胞Lymphoma的诊断，使用CD31抗体检测肿瘤血管的形成。
此外，免疫组化技术还用于肿瘤标志物的诊断和治疗。
某些肿瘤标志物可以作为肿瘤进展监测的指标。
例如，使用鳞状细胞癌抗原（SCC Ag）或癌胚抗原（CEA）等肿瘤标志物对肺癌的诊断和进展进行监测。
第四章免疫组化技术在免疫病理学中的应用免疫病理学是一种依靠遗传技术和分子生物学技术来改进临床诊断水平和治疗方法的病理学分支。
它研究自身免疫性疾病、感染疾病、变态反应及组织移植等领域，通过免疫组化技术实现对疾病的鉴定和随访。
在自身免疫性疾病中，免疫组化技术有利于检测存在于组织中针对自身组织分子的自身抗体。
在Februus Syndr来临现象中，免疫组化技术可以识别出成堆的IgG和C3沉积组织中的分子和细胞类型，从而诊断皮肌炎。
免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值分析
免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值分析免疫组化（Immunohistochemistry，简称IHC）是一种通过特异性抗体和染色方法，在病理组织切片中检测蛋白质表达的技术。
免疫组化技术在病理学领域中具有广泛的应用，对于病理诊断、预后预测、分子机制研究等具有重要的意义。
本文将从几个方面来分析免疫组化技术在病理组织切片制作中的应用价值。
免疫组化技术能够帮助诊断病理，提高病理诊断的准确性。
免疫组化技术通过特异性抗体对特定蛋白标记进行染色，可以明确肿瘤组织的发生来源，判断是否存在异位组织或转移性瘤，并对肿瘤类型、分级、分期等进行定量分析，从而为临床治疗选择和预后预测提供重要依据。
免疫组化技术可以评估肿瘤的生物学行为和预后。
通过检测一些与肿瘤生长、分化、侵袭和转移相关的蛋白标记，如Ki-67、p53、HER2等，可以评估肿瘤的增殖指数、转移潜力和预后，为患者提供个体化的治疗方案。
免疫组化技术在肿瘤治疗的监测中有着重要的作用。
通过检测肿瘤细胞对药物的靶点表达情况，如EGFR、HER2等，可以指导靶向治疗的选择和监测疗效。
免疫组化技术还可用于检测免疫相关标志物的表达，如PD-1、PD-L1等，判断患者对免疫治疗的敏感性和预后。
免疫组化技术在研究肿瘤发生机制、调控机制以及新靶点的发现等方面也具有重要的应用价值。
通过对一些与肿瘤相关的信号转导通路、细胞凋亡、细胞周期调控等蛋白的表达进行定位和分析，可以揭示肿瘤发生发展的分子机制，为肿瘤的精准治疗和新药研发提供理论基础和实验依据。
免疫组化技术在制作病理组织切片中具有重要的应用价值。
通过对蛋白标记的定位和分析，可以提高病理诊断的准确性，评估肿瘤的生物学行为和预后，指导治疗策略的选择和调整，以及揭示肿瘤发生发展的分子机制等。
随着技术的不断进步和应用范围的扩大，免疫组化技术在病理学研究和临床实践中的价值将会进一步体现。
免疫组化技术在病理诊断中的应用
免疫组化技术在病理诊断中的应用摘要：目前，免疫组化技术作为研究当今生物医学的主要工具，其最大特点便是能够显示组织细胞中具有抗原性的物质，因而被广泛应用于临床科研以及临床病理诊断中。
而免疫组化技术在病理诊断中的应用，对于肿瘤疾病的诊断分类及预后具有重大的影响，在某种程度上提升了人们对肿瘤疾病与其他疾病的发病原因、临床表现以及检查预防措施的认识。
本文从免疫组化技术原理角度出发，分析讨论免疫组化技术在病理诊断过程中产生的诸多问题，并针对性的提出有效解决措施。
关键词：免疫组化技术；病理诊断；应用自20世纪下半叶以来，随着研究人员的不断改良与完善，使得免疫组化技术得到广泛应用，其应用范围深达医学领域中的各个学科。
病理诊断作为医学学科的一个分支专业，主要研究人类不同疾病类型的发病原因、发病机制以及发病过程中的机体形态，免疫组化技术在病理诊断中的应用，主要为了提高医疗人员病因诊断的正确率，尽量减少错误诊断，特别是在诊断判定肿瘤疾病中具有至关重要的作用，是目前生命科学工作者必须熟悉掌握的一种新型技术形式。
因此，加强对免疫组化技术的研究，使之应用操作过程不断规范、完善，最大限度的发挥免疫组化技术在发病原因、病情机制中的诊断判定作用以及指导临床治疗中的作用。
一免疫组化技术原理免疫组化技术（又被成为免疫细胞化学），简而言之就是一种通过对抗体结合组织中一些特殊抗原进行特别的染色，用标记的特异性抗体对组织内抗原的分布进行组织和细胞原位检测的技术，其中与这些抗体相结合的酶元素能够显示特异性抗体和组织内抗原的相互结合，这些抗体抗原的相互结合往往是以与这些抗体相结合的酶元素来进行显示。
主要是因为没有着色物质的特性，它跟抗体的结合使得一些有色物质在特性抗体与组织内抗原相结合的位置进行沉淀。
此外，甲醛在进行组织固定的时候对蛋白组织产生影响，促使蛋白凝固交联，使得蛋白质在此过程中发生了结构性变化，但是对特异性抗体的结构影响不大。
在利用蛋白酶进行消化，将抗原决定镞中的一些杂蛋白进行清除，从而使其打开交联，在通过使用高压锅和微波等热抗原的修复工具，使抗原决定镞发生最大程度的暴露。
免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义
者经免疫组化检 查确诊 结果显 示出有５ ７ 例 患者检 测成 功 ，成功率 为９ ６ ． ６ １ ％（ ５ ７ ／ ５ ９），其 中淋巴肿瘤转移者 ４ ５ 例 ，原发性 淋 巴肿瘤者 １ ２ 例 ；其 余２ 例 为检 测失败 ，需进 一步进行 全面诊断 。结论 本研 究探 讨 了免疫组 化在病理诊 断 中的应用情况 ，该技术可有效提升转移性肿瘤检测 率及肿瘤确诊情 况，为临床的治疗 恶性肿瘤 提供 了可靠的病理 学理论参考 ，具有 重要 的临床应 用价值。 【 关键词 】免疫组化检 查 ；病理诊 断；应 用 【 中图分类号】Ｒ ７ ３ ０ ． ４ 【 文献标识码 】Ｂ 免疫 组化是应用免疫基本 原理Ⅲ，通过化学反应促 使荧
光 素 、 酶 、 金 属 离 子 或 同位 素 等 显色 剂 将 标 记 抗 体 显 色 而
【 文章编号 】Ｉ Ｓ Ｓ Ｎ． ２ ０ ９ ５ ． ８ ２ ４ ２ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ５ ． ９ ０ ９ ． ０ ２
１ ． ３ ． ２应 用 范 围
目前 ，免疫组 织检查 可应用 于恶性 肿瘤诊 断及鉴 别诊
２ ０ １ ７年 第 ４卷 第 ５期
２ ０ｌ ７ Ｖｏ １ ． ４ Ｎ ｏ ． ５
临床医药文献杂志
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ １ ｏ ｆ Ｃｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ １ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ
免 疫 组 化 检 查 在 病理 诊 断 中的应 用 及 其 意义
热米拉 ・ 阿不都克力木 ，葛春 呜 （ 新疆伊犁州新华医院病理科 ，新疆 伊犁 ８ ３ ５ ０ ０ ０ ）
确 定 组 织 细 胞 内 抗 原 ， 进 而 对 组 织 来 源 进 行 定 位 、 定 性 和 断 ；定 位转移 性恶性肿 瘤 ；进 一步对肿 瘤病 理分型 ；多种 定 量 等 精 确 分 析 ］ 。现 本 文 报 告 如 下 ： 标志物 鉴别诊 断软组 织肿瘤 ；及时检 测 出微 小转移灶 ，指 １ ． ４ 阳性 判 定 标 准 １ ． １ 临 床 资 料 阳性 免疫 特征 ：弱 （ ＋）、 中 （ ＋ ＋ ） 、强 （ ＋ ＋ ＋ ）三 选 取２ Ｏ ｌ ５ 年７ 月 ～２ ０ １ ６ 年９ 月 间我院 门诊收入 的５ ９ 例淋 级 。免 疫 荧 光 法 则 出现 浅 绿 色 、 显 绿 色 和 耀 眼 亮 绿 色 的 荧 巴肿瘤 患者 的病 例档案 ，其 中男性３ ４ 例 ，女性２ ５ 例 ；年 龄 光 ；而 免疫酶标 记则为 淡黄 色细颗粒 、棕黄 色颗粒和 褐黄 ３ ６ ． ６ ９ 岁，年龄均值 （ ４ ２ ． ３ ４ ±３ ． ２ １ ）岁。５ ９ 例 患 者 均 因颈 部 色 粗颗 粒 ， 后者 耀 眼 易见 。 淋 巴结 肿 大 且 无 痛 性 、 食 欲 减 退 、 发 热 、 盗 汗 及 易 疲 劳 等 阳性细 胞学特 征：胞 膜型 、胞核型 、胞质 型 、微 绒毛 症 状 到 院进 行 诊 治 。 型、复合 型五种 。 １ ． ２ 方 法 阳 性 组 织 学 特 征 ： 局 灶 型 、 弥 漫 型 、 片 块 型 、 网 状 本 组５ ９ 例 患者均采 用免疫 组化技 术进行 病理检 测 。结 型、腺 管型 、腔缘型 、菊 团型等。
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免疫组化检查在病理诊断中得应用及其意义免疫组化就是利用抗原与抗体特异性结合得原理,通过化学反应使标记抗体得显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽与蛋白质),对其进行定位、定性及定量得研究,称为免疫组织化学。
免疫组化实验中常用得抗体为单克隆抗体与多克隆抗体。
实验所用主要为组织标本与细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片与组织芯片)与冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片与细胞涂片。
其中石蜡切片就是制作组织标本最常用、最基本得方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定得影响,但可进行抗原修复,就是免疫组化中首选得组织标本制作方法。
石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。
所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成得交联破坏,而恢复抗原得原有空间形态。
常用得抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用得修复液就是pH6、0得0、01 mol/L得柠檬酸盐缓冲液。
免疫组化常用得染色方法根据标记物得不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲与组织化学法,后者就是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础得检测方法。
这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平得定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记AE1/AE3最常用,胞浆阳性着色,细丝状,与低、中分子量角蛋白反应,肝细胞为阴性,而胆管细胞阳性,用于确定肿瘤为上皮源性;CAM5、2胞浆阳性着色,细丝状,包含CK8 与CK18,主要染色神经内分泌细胞与腺上皮,正常鳞状上皮阴性,用于染小细胞癌、胸腺瘤与梭形细胞癌、肝细胞癌:AE1/AE3 CAM5、2 (+),用于乳腺外得Paget’s病;CK34BE胞浆阳性着色,鳞状上皮与鳞状细胞癌阳性,用于染前列腺得基底层细胞,鉴别浸润癌,染涎腺肿瘤得肌上皮,用于染Mallory小体;EMA细胞膜/细胞浆阳性着色,上皮标记得替代品,浆细胞阳性,很好得内对照,用于染滑膜肉瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、L&H 富于淋巴细胞得结节状何杰金、脑膜瘤EMA(+)AE1/AE3(–)、浆细胞瘤;CK7与CK20胞浆阳性着色,两者联合应用可鉴别很多种癌得原发部位,CK7 常常在胃肠道得癌为阴性,CK20 只有胃肠道癌与Merkel 细胞癌阳性。
间皮细胞标记Calretinin细胞核与细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需,间皮强阳性,Sertoli与肥大细胞阳性,用于鉴别间皮瘤(+)与腺癌,常加CEA,鉴别梭形细胞间皮肉瘤(+)与其她得浆膜腔肉瘤,鉴别胸、腹水中得癌细胞与间皮细胞,确定为间皮细胞,如大网膜内陷入得一团细胞或腺瘤样瘤,神经元分化标记,如中枢神经细胞瘤,帮助确诊心脏粘液瘤,几乎全为(+)。
白细胞标记非何杰金淋巴瘤大致分类CD20(L26),CD3怀疑T 细胞淋巴瘤者加UCHL1(CD45RO),怀疑浆细胞瘤者LCA(CD45RB),CD79a, CD138,小B 细胞淋巴瘤者,CD79a, CD43(MT1);LCA(CD45RB)几乎所有得白细胞(+),有些淋巴母细胞淋巴瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、外周T 细胞淋巴瘤( ),经典Hodgkin 得RS 细胞,以往浆细胞瘤,现(+),HE 下明确得淋巴瘤不必要染LCA。
B细胞相关标记CD20(L26)胞膜阳性着色,浆阳者不可判为阳性,各阶段B 细胞阳性,除了原始得前B 与非常成熟得浆母、浆细胞,用于染B 细胞淋巴瘤,除了小细胞、淋巴母细胞(不恒定)与浆细胞瘤常,梭形细胞胸腺瘤(+);CD79a胞浆阳性着色,有/无核周聚集,全B 细胞标记,包括浆母与浆细胞,标记滤泡中心比mantle与滤泡间B要弱,比CD20贵得多,用于鉴别淋巴母细胞淋巴瘤/白血病,弥漫性小B 细胞淋巴瘤/白血病,浆细胞瘤常CD20(–)而CD79a >50% (+)。
T细胞相关标记CD3(polyclonal)胞浆阳性着色,核周凝聚,有时高尔基体也阳性,极好得T 细胞标记,与CD43 不同,髓系细胞与组织细胞不着色,极好得T 细胞与NK 淋巴瘤标记,虽然有些大细胞型T 细胞淋巴瘤阴性;CD43 (MT1)只有膜阳性才能判为阳性,T 细胞、T 细胞淋巴瘤、真性组织细胞肿瘤、粒细胞肉瘤阳性,一部分浆细胞瘤阳性,小 B 细胞淋巴瘤阳性,这一特点可辅助表明增生得小淋巴细胞为肿瘤性！EBV 感染得B 细胞阳性;UCHL1(CD45RO)细胞膜阳性着色,有时Golgi 阳性,弥漫性胞浆阳性者非真阳性,阳性:正常/ 反应性得T 细胞,组织细胞、粒细胞肉瘤与T 细胞淋巴瘤,罕见情况下B 细胞淋巴瘤阳性;CD5细胞膜阳性着色,T 细胞阳性,但极少B 细胞也阳性,尤其用于慢性淋巴细胞性白血病与Mantle 淋巴瘤,而MALToma 与Marginal Zone 淋巴瘤阴性,用于鉴别胸腺癌(CD5+)与其她癌瘤。
与激活相关得标记CD30(KiI,BerH2)只有膜染色与Golgi体染色才就是真阳性,正常淋巴滤泡周单个得大细胞为阳性,激活得淋巴细胞阳性:如传单、弓浆虫感染、Kikuchi淋巴结炎等、浆细胞也阳性,用于大细胞分化不良性淋巴瘤、一些传统得大细胞淋巴瘤、外周T与B细胞淋巴瘤中得一些单个大细胞、经典何杰金病中得RS细胞,但非L&H细胞、淋巴瘤样丘疹病等皮下CD30+得淋巴增生疾病、一些浆细胞瘤、胚胎性癌。
组织细胞标记CD68(PGM1)胞浆内颗粒状阳性着色,较好得组织细胞与单核细胞(包括浆样单核细胞)及其肿瘤得标记,有些非组织细胞也可阳性,包括:肾小管、粒细胞肉瘤、恶黑、血管瘤样恶纤组等,髓系细胞标记;Myeloperoxidase胞浆阳性着色,常呈颗粒状,髓系细胞及其肿瘤得高度特异且敏感得标记,奇怪得就是在Kikuchi 淋巴结炎与狼疮性坏死性淋巴结炎中,其中得组织细胞myeloperoxidase 也为阳性。
与淋巴瘤相关得标记ALK1(Anaplastic lymphoma kinase1)胞核+ 胞浆阳性着色用于大细胞分化不良性淋巴瘤,不能证实ALK1+ 与良好预后有关,一种罕见得大B 细胞细胞瘤,ALK1 阳性而CD20 阴性,但IgA 阳性;Bcl2在核周围区阳性着色,在正常淋巴结,生发中心阴性,但mantle 与滤泡间细胞强阳性,在滤泡性淋巴瘤,(>80% 病例)生发中心强阳性,阴性不能排除滤泡性淋巴瘤,也用于鉴别单核样B 细胞增生与单核样B 细胞淋巴瘤(+),有人用于诊断孤立性纤维性肿瘤;CyclinD1核阳性着色,主要用于Mantle 区淋巴瘤,几乎所有病例均为阳性,有些可能为弱阳性。
与分化阶段相关得标记Tdt细胞核阳性着色,不成熟得T或B淋巴细胞标记,前T前B细胞,用于诊断淋巴母细胞淋巴瘤/ 白血病,诊断胸腺瘤(富于不成熟得T细胞)。
肌原性标记Desmin胞浆阳性着色,平滑肌/ 骨骼肌及其肿瘤得良好标记,肌纤维母细胞有时也阳性,但肌上皮阴性,一些间皮瘤阳性,desmoplastic small cell tumor;MSA(Musclespecific actin)胞浆阳性着色,极好得肌源性标记,用于平滑肌、骨骼肌及其肿瘤,肌纤维母细胞及相关肿瘤(恶纤组、结节性筋膜炎等),肌上皮及其肿瘤,血管周细胞肿瘤,一些间皮瘤。
血管原性标记CD31细胞膜阳性着色,内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性,有时浆细胞/ 浆细胞瘤阳性,主要用于诊断血管性肿瘤:特异且敏感,识别骨髓中不正常得巨核细胞,巨核细胞系白血病;CD34细胞膜+/细胞浆阳性着色,血管内皮/巨核细胞/血小板+,很好得血管标记,但特异性差,多种肿瘤CD34阳性。
血管原性标记Factor VIII related antigen (FVIII) 胞浆阳性着色,常为颗粒状,内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性,主要用于血管原性肿瘤,特异性好,敏感性差,神经、神经内分泌及神经外胚层;Syn 细胞浆阳性着色,就是神经与神经内分泌细胞很好得标记,特异性与敏感性均好,包括:Paraganglioma、Pheochromocytoma、Neuroblastoma、Olfactory neuroblastoma、Ganglioneuroma、Ganglioneuroblastoma、PNET等;CgA胞浆内颗粒状着色,染神经内分泌细胞得分泌小泡,因此神经元与神经节细胞阴性,神经内分泌非常特异性指标,敏感性较差,阳性信号取决于瘤细胞内神经内分泌颗粒得多少,小细胞癌:信号少,类癌、Merkel细胞癌、甲状旁腺腺瘤等强阳性,神经性肿瘤可阳可阴;GFAP(Glial fibrillary acidic protein)胞浆阳性着色,星形细胞、室管膜细胞阳性,一些肌上皮阳性,星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、室管膜瘤与脉络丛乳头状瘤阳性,少突胶质细胞瘤常阴性;一些外周神经鞘瘤可阳性,涎腺多形性腺瘤常可阳性,乳腺得肌上皮有时也可阳性;S100细胞核+/细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需,用处非常多;HMB45胞浆内颗粒状着色,恶性黑色素瘤与交界痣,而正常得痣细胞常为阴性,肾与肝得血管平滑肌脂肪瘤、肾被膜瘤,肺得淋巴管肌瘤病、糖瘤;MelanA胞浆内颗粒状着色,阳性表达得细胞包括:黑色素细胞、肾上腺皮质、性索(Leydig, granulosa),用于黑色素瘤、支持间质细胞瘤与颗粒细胞瘤、血管周细胞瘤、肾上腺皮质肿瘤。
与乳腺癌相关得抗体ER细胞核阳性着色;PR细胞核阳性着色; Ki67细胞核阳性着色,G1, S, G2 and M phases of the cell cycle 阳性,Ki67 index: 阳性细胞所占比例;P53细胞核阳性着色。
正常细胞因P53蛋白很快降解故阴性,而恶性肿瘤中因突变或存在使P53稳定得因素,故可阳性;CerBb2细胞膜阳性着色。