最新CMVPP65抗原检测及临床意义汇总
非结核分枝杆菌病(临床病例讨论)
双肘关节疼痛，无明显红肿，但有双手肿胀、晨僵;伴
发热，体温最高为38℃，无寒战、盗汗，无肌痛、肌
无力、胸闷、四肢麻木等症状。曾于当地医院查肌酸
激酶(CK)236U/L，血沉(ESR)28mm/h，抗核抗体
(ANA)(+)1:140，抗双链DNA抗体(抗dsDNA)、抗
0(ASO)、类风湿因子(RF)、抗ENA均阴性，肌电图大
• 1.明确诊断 选药不仅要针对适应证还要排除禁忌证。 2.根据药理学特点选药 尽量少用所谓的“撒网疗 法”，即多ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ药物合用以防漏诊或误诊，这样不仅 浪费而且容易发生相互作用。
3.了解并掌握各种影响药效的因素 用药必须个体化， 不能单纯公式化。
4.对病人始终负责 开出医嘱、处方仅是治疗的开始， 必需严密观察病情反应，及时调整剂量或更换治疗 药物。要认真分析每一病例的成功及失败的关键因 素，总结经验教训，不断提高医疗质量，使用药技 术更趋合理化。
• 二氧化碳分压(paCO2)4.23kPa（31.73mmHg），氧 饱和度(SaO2)0.944。心电图提示:窦性心动过速。x 线胸片提示左肺野大片斑片状阴影，右肺中下野斑片 状阴影并小结节阴影，心影呈烧瓶状，双侧肋隔角变 钝。复查胸部CT:双侧胸腔积液，右肺多发结节，纵 隔多个淋巴结融合成块，心包积液。超声心动图 (UCG):中一大量心包积液，主要集中于左室面，内 可见絮状物，脏层心包可见絮状沉积物。
非结核分枝杆菌病 （临床病例讨论）
地点：门诊五楼电教室
•
患者男，21岁。因皮疹6个月，左拇趾皮肤破溃
伴间断发热3个月于2005一12一28入院。患者6个月前
无诱因突然出现双肘部伸侧、双手掌指关节(MCP)及
近端指间关节(PIP)伸侧、双眼内眦旁皮肤鲜红色红斑，
HCMV-pp65
• • • •
（二）阴性结果及细胞判定标准
• 阴性细胞判定标准：良好的细胞形态，细
胞核为圆形、肾形、（分叶状、杆状较少 见）细胞核无着色。 • 荧光显微镜下标本背景为暗红色或无明显 着色。
（三）阳性结果及细胞判定标准
阳性细胞判定标准： • 良好的细胞形态，细胞核为圆形、肾形、 （分叶状、杆状较少见）荧光照射呈暗绿 色或苹果绿色，细胞核周围呈暗红色或无 着色。 • 不典型阳性细胞判断标准 细胞形态欠佳，细胞核形态欠佳着色不清晰。
优势:
1. HCMVPP65抗原血症检测试剂采用快速、定量、简单、 2. 3. 4. 5.
敏感和易于读取结果的方法检测活性CMV感染。 比病毒分离快速培养和血清学方法敏感，对已经出现 临床症状的患者检测敏感度是100％。 疾病发作的几天到1周时间内抗原血症能够被检测出， 比快速培养法早2－25天。 当实验室不能进行细胞培养时可应用抗原血症检测。 采用的PP65单克隆混合抗体能够增加阳性样本细胞的 着色数量并且显示一个更加明亮的荧光场景
五、标本读片时视野较暗无法分辨细胞形态 时应注意以下问题：
• 制片过程最后蒸馏水冲洗不彻底；载玻片、盖玻
• •
片不洁净；封片剂用量过多。 应选择在暗室内读片，室内光线越暗越好。 荧光发生器功率应选择100W为宜，功率为50W的 荧光发生器不宜观察 调整荧光显微镜使其荧光位于视野中央易于观察 读片时应使用40倍物镜观察 调准细胞层面
检测人群：
• 用于诊断和跟踪心脏、肺脏、肝脏、肾脏
和骨髓移植接受者体内的HCMV感染 。
• 艾滋病患者体内的HCMV感染。
检验原理
• 采用混合单克隆抗体（IA6+4A8）标记不同
的抗原决定族结合位点表达在外周血白细 胞和单核细胞内的65－68kd磷酸蛋白（蛋 白激酶PP65） • 当病毒在血液散布期间混合单克隆抗体可 以识别存在于外周血受感染的分叶核白细 胞和单核白细胞的HCMV核蛋白内的2个抗 原决定族。
人巨细胞病毒pp65抗原检测
I gM
症状 1
症状 2
抗原血症 1
抗原血症 2
移植后时间 首 次 pp65 抗 原 血 症 出 现 于 移 植 后 59 天 ， 2 天 后 出 现 喘 憋 、 低 氧 血 症 ，经 更 昔 洛 韦 治 疗 13 天 后 症 状 消 失 ， 抗 原 血 症 转 阴 ， 此 时 I gM才 开 始 出 现 弱 阳 性 ， 此 后 I gM持 续 阳 性 。移 植 后 6 个 月 ，再 次 出 现 喘 憋 、低 氧 血 症 ，查 pp65 抗 原 血 症 转 阳 , 经更昔洛韦治疗 7 天后症状消失、抗原血症转阴。
阳性细胞数多少可以帮助判断和预测CMV症状性感染 CMV特异性IgM的阳性检出率非常低，
人巨细胞病毒pp65抗原检测
CMV感染的危险因素 CMV感染组DRI评分大多>20 合并细菌或感染 病程长、未正规治疗的狼疮
人巨细胞病毒pp65抗原检测
三 PP65检测在监测血液肿瘤化疗后和 再障病人中CMV感染中的应用
A 骨髓数量重建 B 配型完全符合者T细胞功能重建 C 配型不完全符合者T细胞功能重建
人巨细胞病毒pp65抗原检测
PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用 2 － 骨髓移植后CMV感染的危险因素
CD34＋细胞分选
GVHD(FK506)
TBI
合并其他病原体感染
人巨细胞病毒pp65抗原检测
PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用3 －－治疗时间
人巨细胞病毒pp65抗原检测
研究目的
了解HCMVpp65抗原检测在免疫功能低下者临床
HCMV疾病预测或早期诊断中的价值。 了解HCMVpp65抗原检测在监测疾病活动性和指
导CMV““亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。
《中国实体器官移植受者巨细胞病毒感染诊疗指南》要点
《中国实体器官移植受者巨细胞病毒感染诊疗指南》要点一、前言巨细胞病毒（CMV）感染是实体器官移植（SOT）术后最为常见的病毒感染，临床表现多样。
未采取预防措施的SOT受者CMV感染率较高，在不同移植类型和不同患者人群中也存在明显差异。
CMV侵入人体，成为CMV 感染，可为静止性感染或活动性感染。
CMV侵袭肺、肝脏、胃肠道、肾上腺、中枢神经系统以及骨髓等多种器官组织并引起相应临床症状，称为CMV病。
CMV感染可对移植受者造成多方面损害，包括移植物功能丧失、受者死亡或医疗成本增加。
CMV感染与移植物急性排斥反应互有促进作用；并可增加或加重移植受者各种机会性感染，如CMV肺炎。
二、SOT受者CMV感染的主要危险因素（一）供、受者血清CMV状况接受血清CMV阳性供者的器官移植的CMV阴性受者（供者阳性/受者阴性，D+/R-）应视为CMV感染极高风险人群。
相对而言，D-/R-移植受者CMV感染的发生率最低（<5%）。
（二）移植器官的种类CMV感染风险与移植器官的种类相关：肺、小肠、胰腺移植受者比肾、肝移植受者危险性更高。
（三）其他危险因素其他危险因素包括受者的免疫力低下、合并其他病毒感染、急性排斥反应、高龄和器官移植物功能不全等；供者在重症监护病房（ICU）监护时间较长，面临多重感染的风险，移植后也可造成受者获得性感染风险增加。
推荐意见：1. 推荐所有器官移植供、受者术前均进行CMV血清学检测，参考风险分层，指导制定预防策略（1-B）。
2. 建议术后对受者进行CMV-IgG血清学检测（1-B）。
抗CMV-IgG 阳性或抗CMV-IgG呈4倍以上增高者为高危；结果为临界值或不确定时，可按阳性考虑（2-C）。
3. ABO血型不合器官移植、接受淋巴细胞清除性抗体治疗以及术前存在人类免疫缺陷病毒感染的受者均可视为高危患者（1-B）。
三、实验室诊断推荐意见：1. CMV的早期快速诊断，推荐外周血及尿液的CMV DNA核酸定量（QNAT）检测，或间接免疫荧光法（IFA）外周血白细胞的CMV-pp65抗原检测（1-A）。
患者手术前五种感染性指标的检测及临床意义
检 测 ， 电化 学发 光 法检 测 患者 的 乙肝 表 面 抗 原 （ ｓ ） 结 果 １ ５ 用 ＨＢ Ａｇ 。 ９８ ０例 被 检 对 象 中 ， ｓ 、 ＴＰ抗 体 、 ＨＣ 抗 体 、 ＨＢ Ａｇ 抗 抗 Ｖ 抗
意义 。
２ 结 果
液 、 接 触 等 方 式 传 播 ， 些 医 疗 行 为 如 手 术 、 刺 、 血 等 也 性 一 穿 输 会 引起 院 内感 染 ， 患 者 术 前 进 行 常 规 传 染 病 因 子 的 检 测 可 以 对
了 解 患 者 的 感 染 状 况 及 避 免 不 必要 的 医疗 纠 纷［ ］ １ 。笔 者 采 用 。
指 标 的检 测 ， 报 道 如 下 。 现 １ 资 料 与 方 法 １ １ 一 般 资料 为本 院 ２ ０ ． ０ ８年 １ Ｏ月 至 ２ １ ０ ０年 １ ２月 各 类 急 诊 及 择 期 手 术 患 者 ， １ ５ 共 ９ ８ ０例 ， 中 ６ 其 Ｏ岁 以上 的 患 者 为 老
［］ 宁夏 医 学 杂 志 ，０ ５ ２ （ ）５ ８ Ｊ． ２０ ，７ ８ ：３ ．
Ｅ ３ 顾 沈 阳 ， 浩 ， 业 华 ， ， 移 植 术 后 应 用 硫 唑 嘌 呤 致 急 性 再 生 ３ 姚 王 等 肾 障碍 性 贫 血 ５例 ［］ 江 苏 临 床 杂 志 ，０ ２ ６ ３ ：９— ９ ． Ｊ． ２ ０ ， （） １ ４１５ Ｅ ３ 薛 武 军 ， 勇 ， 文 楷 ， ． 移 植 术 后 应 用 硫 唑 嘌 呤 致 纯 红 细 胞 ４ 陈 王 等 肾
中国肾移植受者巨细胞病毒感染临床诊疗指南（2023_版）
· 指南与共识·中国肾移植受者巨细胞病毒感染临床诊疗指南（2023版）中华医学会器官移植学分会 中国医师协会器官移植医师分会 中国医疗保健国际交流促进会肾脏移植学分会 【摘要】 近几年在实体器官移植（SOT ）受者巨细胞病毒（CMV ）感染诊疗领域，无论是诊断方法还是新型抗CMV 药物都有了一些新的进展，对CMV 感染的诊治产生了积极的影响。
为了进一步规范中国肾移植术后CMV 感染的管理，中华医学会器官移植学分会组织了国内多个学科相关领域专家，参考《中国实体器官移植受者巨细胞病毒感染诊疗指南（2016版）》和国内外已发表的最新文献和指南，制定了《中国肾移植受者巨细胞病毒感染诊疗指南（2023版）》，新版指南更新了CMV 流行病学，CMV 感染的危险因素和普遍性预防的研究进展，新增CMV 感染定义，细化CMV 血症和CMV 病的诊断标准，并对新型抗CMV 药物进行了介绍。
【关键词】 肾移植；实体器官移植；巨细胞病毒；感染；病毒血症；巨细胞病毒病；普遍性预防；抢先治疗【中图分类号】 R617, R373 【文献标志码】 A 【文章编号】 1674-7445（2024）03-0001-20Clinical diagnosis and treatment guidelines for cytomegalovirus infection in kidney transplant recipients in China (2023edition) Branch of Organ Transplantation of Chinese Medical Association, Branch of Organ Transplantation Physician of Chinese Medical Doctor Association, Branch of Kidney Transplantation of China International Exchange and Promotive Association for Medical and Health Care. *The First Affiliated Hospital of Xi 'an Jiaotong University , Xi 'an 710061, China Correspondingauthors:DingXiaoming,Email:***************.cnXueWujun,Email:******************.cn【Abstract 】 In recent years, there have been significant advances in the diagnosis and treatment of cytomegalovirus (CMV) infection in solid organ transplant (SOT) recipients, including diagnostic method and anti-CMV drugs. These advancements have had a positive impact on the management of CMV infection in SOT recipients. To further standardize the management of CMV infection after kidney transplantation in China, Branch of Organ Transplantation of Chinese Medical Association organized a multidisciplinary group of experts in relevant fields. They referred to the ‘Diagnosis and Treatment Guidelines for Cytomegalovirus Infection in Solid Organ Transplant Recipients in China (2016 edition)’ and the latest published literature and guidelines, resulting in the development of the ‘Clinical Diagnosis and Treatment Guidelines for Cytomegalovirus Infection in Kidney Transplant Recipients in China (2023 edition)’. The updated guideline includes CMV epidemiology, research progress on the risk factors and universal prevention of CMV infection, the definition for CMV infection, detailed diagnostic criteria for CMV viremia and CMV disease, as well as an introduction to new anti-CMV drugs.【Key words 】 Kidney transplantation; Solid organ transplantation; Cytomegalovirus; Infection; Viremia;Cytomegalovirus disease; Universal prevention; Preemptive therapyDOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2024096基金项目：国家自然科学基金（82370802、82170766、82270789、81970646）；陕西省卫生健康肾脏移植科研创新平台（2023PT-06）执笔作者单位： 710061 西安，西安交通大学第一附属医院（丁小明）；首都医科大学附属北京友谊医院（林俊）；首都医科大学附属北京朝阳医院（胡小鹏）；复旦大学附属中山医院（戎瑞明）；西安交通大学第一附属医院（郑瑾）通信作者：丁小明，Email ：***************.cn ；薛武军，Email ：******************.cn第 15 卷 第 3 期器官移植Vol. 15 No.3 2024 年 5 月Organ Transplantation May 2024 巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）是一种全球传播广泛的β-疱疹病毒，原发感染之后在体内会呈潜伏状态，当人体的免疫功能下降时病毒会被再激活。
《炎症性肠病合并机会性感染专家共识意见》要点
《炎症性肠病合并机会性感染专家共识意见》要点IBD是一种慢性非特异性肠道疾病，主要包括CD和UC。
IBD呈慢性病程、迁延不愈，严重影响患者生命质量。
IBD的治疗经历了3个时期的演变，20世纪50年代引入糖皮质激素，60年代开始使用免疫抑制剂，而当今已进入生物制剂时代。
随着治疗的进展和不断规范化，IBD的治疗效果有了长足的进步，患者并发症和病死率明显下降。
然而这些药物单独或联合治疗会改变患者的免疫状态，从而带来相应的问题，特别是增加了机会性感染的风险。
机会性感染是指对健康人体致病能力有限或无致病能力的微生物，当疾病（如艾滋病）或治疗因素诱发机体免疫功能低下时，则可致病而引发感染。
IBD患者是机会性感染的高风险人群。
首先，疾病本身可导致患者营养状况下降；其次，应用糖皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂可严重抑制患者的免疫力，因此机会性感染发生率显著增加，需要予以关注和重视。
我国各类传染病较西方国家相对高发，故积极预防、早期诊断和及时控制机会性感染是改善我国IBD患者预后的前提。
一、IBD合并巨细胞病毒（CMV）感染1. IBD患者CMV血清IgG抗体阳性率高于健康对照者，UC合并CMV 结肠炎者多于CD。
2. 重度UC出现糖皮质激素抵抗者建议临床除外CMV活动性感染。
3. CMV IgM抗体阳性和（或）CMVpp65抗原血症（每150000个白细胞中CMV 阳性细胞数≥1）和（或）血浆CMV DNA实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测阳性，提示CMV活动性感染。
4. CMV结肠炎的诊断金标准是结肠黏膜组织HE染色阳性伴免疫组织化学染色（IHC）阳性，和（或）结肠黏膜组织CMV DNAqPCR阳性。
5. 若外周血CMV DNAqPCR检测阳性＞1200拷贝/mL者可考虑行抗病毒治疗。
6. 结肠镜检查发现特殊内镜表现可提示CMV结肠炎，应常规行活组织检查并进行鉴别诊断。
7. 发生糖皮质激素抵抗的重度UC患者若合并CMV结肠炎，建议及时给予抗病毒治疗。
人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒临床应用及初步评价
人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒临床应用及初步评价王述莲;邓中平;呼建民;戴立忠;黄基容;王军;艾颖娟【摘要】目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）核酸定量检测试剂（PCR‐荧光探针法）的临床使用及初步评价。
方法：用浓缩一步法试剂与煮沸法试剂对192例临床收集的样本进行HCMVDNA检测并对比其结果，同时，将两种试剂的检测结果分别与HCMV‐pp65抗原检测结果进行对比。
结果：新型人巨细胞病毒核酸检测试剂与煮沸法试剂的阳性一致性百分比98．06％，阴性一致性百分比95．51％，总一致性百分比96．88％；对6例不符样本进行测序复核，并对复核后的结果进行Kap‐pa检验一致性分析，结果Kappa值＝1．000，表明新型试剂的检测结果与煮沸法试剂及复核检测的结果具有很好的一致性。
在与HCMV‐pp5抗原检测结果的对比中，两种试剂均表现出较好的准确性。
结论：人巨细胞病毒核酸检测试剂与煮沸法试剂检测结果具有很好一致性，操作简单快速，减少污染环节，并具有内标控制假阴性，结果准确，符合临床检测要求，具有较高的应用价值。
%Objective:The goal of this study is to evaluate the clinical application of a new Human Cyto‐megalovirus DNA Diagnostic Kit (refer to as concentrated one‐step method hereafter) .Methods:A total of 192 clinical specimens were detected by concentrated one‐step method and another kind of fluorescence diagnostic kit u‐sing boiling method ,The results were analyzed a nd compared .Simultaneously ,HCMV‐pp65 antigenemia test re‐sults of these 192 specimens were gathered and compared with the results from the one step and Boiling method kits . Results :The two kits showed excellent agreement The Positive consistency was 98 .06% ,the negative consistency was 95 .51% and the total consistency was 96 .88% ;6 cases ofdiscrepant samples were sequenced review ,then the results were performed with the Kappa consistency analysis ,The value ofKappa=1 .000 ,showed good consistency between the two methods .In addition ,compared with HCMV‐pp65 antigenemia test results ,the two reagents both showed good accuracy .Conclusion :The one step method showed good consistency compared with the conventional boiling method ,In this method ,the nucleic acid targets extracted by lysis buffer all went into the PCR reaction .This avoids laboratory contaminations which occur often during routine DNA extraction process .And the PCR detection system uses an internal positive control (internal control) to avoid a false negative result .With a simple procedure , precise results ,this new diagnostic kit is suitable for routine clinical lab usage .【期刊名称】《陕西医学杂志》【年(卷),期】2014(000)011【总页数】3页(P1542-1544)【关键词】巨细胞病毒感染;脱氧核糖酸酶类/分析;荧光免疫测定;聚合酶链式反应;试剂盒,诊断;煮沸法【作者】王述莲;邓中平;呼建民;戴立忠;黄基容;王军;艾颖娟【作者单位】武警北京市总队第三医院检验科北京100141;湖南圣湘生物科技有限公司;武警北京市总队第三医院检验科北京100141;湖南圣湘生物科技有限公司;武警北京市总队第三医院检验科北京100141;湖南圣湘生物科技有限公司;湖南圣湘生物科技有限公司【正文语种】中文【中图分类】R446人类巨细胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）亦称细胞包涵体病毒，为疱疹病毒科β属的双螺旋DNA病毒，由于感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体，所以称为巨细胞病毒。
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CMV三种感染方式
• CMV是导致胎儿先天性感染的最常见的病原体， 占约整个出生新生儿的0.5-2.5%。
• 分娩时胎儿通过产道可感染CMV，但该感染不 遗留后遗症。
• CMV产后感染大多数发生在婴幼儿及童年时期， 通常是无症状，感染途径大多是与CMV排毒者 的密切接触，如各种体液如唾液、尿液、乳汁、 泪液、血液、生殖道分泌物等。少数CMV PP65阳性治疗
• 更昔洛韦，ganciclovir
标本的采集
• EDTA-K3抗凝的静脉血2－5ml(白细胞过 低患者，如 200个/mm3，需要采集5－ 10ml抗凝的静脉血。
• 时间：周1或周4送标本(检验科病毒室， 新楼3段2层)。
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CMV感染的最重要的形式
• CMV先天性感染。 • 在免疫抑制患者的感染，包括艾滋病、
肿瘤化疗患者(尤其是白血病和淋巴瘤)以 及器官移植受者。
巨细胞病毒抗原血症(CMVpp65)检测的操 作步骤(CMV BriteKit，MCA Development, The Netherlands)
• 基本原理是检测分子量65KD的基质磷蛋白 (pp65)，该蛋白位于外周血白细胞的核仁内。
• 分离白细胞(EDTA-K3抗凝的静脉血2－5ml) • 细胞计数即浓度调整，3.0106/ml • 细胞离心涂片及固定。 • 染色，IIF法，第一抗体是抗CMVpp65单抗，
第二抗体是羊抗鼠免疫球蛋白荧光抗体。 • 读片及结果判断
CMVPP65阳性
CMV PP65阳性意义
• CMV活动性感染，并可在出现临床症状 前检测到。