POX染色方法

过氧化物酶(P e r o x i d a s e,P O X)染色

联苯胺法

一.原理:粒细胞及一部分单核细胞胞浆内的颗粒含有过氧化酶.此酶能将过氧化氢中的氧释放出来,而把联苯胺氧化成氧化联苯胺,后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝色颗粒,沉着于细胞质中．

二.试剂配制:

1.复方联苯胺（Washburn）染液：联苯胺0.3克，95％乙醇99ml，36％亚硝基铁氰化钠1ml，此染液可保存10月或更久．

2.过氧化氢溶液：3％过氧化氢1滴，蒸馏水5ml．此液用时需新鲜配制．三．染色步骤：

1.于新鲜涂片滴加复方联苯胺染液3～8滴，使之盖满涂片．

2.1～2分钟后加入等量过氧化氢溶液．

3.8～10分钟后用水冲洗．

4.在空气中晾干后直接观察，或用瑞氏染液复染后进行观察．瑞氏染液复染时间为20分钟．

四.注意事项：

3％过氧化氢溶液需保证质量．其稀释液必须应用时新鲜配制．

联苯胺具有致癌性，染色时需加注意．

五．临床意义：

1.正常细胞反应：POX主要存在于粒系细胞中，除早期原粒细胞外，晚期原粒细胞及其后各阶段细胞均呈阳性反应，细胞越成熟，其阳性反应越强．原单细胞为阴性反应，幼稚和成熟单核细胞呈弱阳性反应．淋巴细胞系／巨核细胞系／红细胞系各阶段细胞均呈阴性反应．

2.急性白血病类型鉴别：急性粒细胞白血病时，其原幼细胞多呈阳性反应；急性单核细胞白血病时，其原幼细胞多呈弱阳性或阴性反应；急性淋巴细胞／巨核细胞性白血病时，因原幼细胞多呈阴性反应．