实验一牙菌斑细菌检查 (口腔)
口腔真菌实验报告
口腔真菌实验报告一、目的1、了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。
2、了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。
3、熟悉外界因素对细菌的影响，学习常用的消毒灭菌方法。
4、了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗力。
二、正常人体咽喉部的细菌检查材料：血液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯。
方法：取灭菌棉拭一支，在被检查者咽喉部轻轻涂擦后，再涂于血液琼脂培养基—侧，然后改用灭菌接种环作分离划线接种。
盖上皿盖，37℃孵育24小时（或者采用咳喋法）。
结果：琼脂平板表面有菌落生长。
其中占优势的是一种细小菌落，其周围有草绿色的不完全溶血环。
此为咽喉部的正常菌群—甲型链球菌。
三、地面水中的细菌检查材料：地面水(河水、井水或池水)、高层琼脂培养基、1ml无菌吸管、灭菌培养皿。
方法：1、以无菌吸管吸取1ml地面水，加入灭菌平皿中。
2、将已溶化且冷至45℃左右的高层琼脂倾注人上述平皿中，加盖后轻轻摇动，使水与琼脂充分混匀，静凝。
3、37℃24小时后取出观察，计数菌落。
咽拭子分泌物中检测出致病菌，则视为呼吸道感染。
可结合其他检查(X光透视、B超等)诊断呼吸道感染部位。
如培养出类酵母菌则考虑是否在感染期间使用抗生素不当或过量，应当立即停止使用抗生素，改用抗真菌药物，如两性霉素B、灰黄霉素、克霉唑等。
常见的病原菌有：1、革兰阳性菌：有金黄色葡萄球菌肺炎链球菌β溶血性链球菌白喉棒状杆菌念珠菌等2、革兰阴性菌：有脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌嗜血杆菌莫拉菌卡他布兰汉菌百日咳杆菌肠杆菌铜绿假单胞菌和产碱杆菌等如培养出结核杆菌，则为肺结核。
3、百日咳白喉病人的咽部可分离出相应细菌，急性咽喉炎鼻部脓肿多由金黄色葡萄球菌溶血性链球菌铜绿假单胞菌引起，咽部感染很多是厌氧菌引起。
口腔细菌的实验报告
一、实验目的1. 了解口腔细菌的基本特征和分类。
2. 掌握口腔细菌的分离和纯化方法。
3. 熟悉口腔细菌的鉴定技术。
4. 分析口腔细菌与人类健康的关系。
二、实验原理口腔是人体内微生物栖息的重要场所，其中含有大量细菌。
口腔细菌种类繁多，包括球菌、杆菌、螺旋体等。
这些细菌在口腔生态系统中发挥着重要作用，既有有益菌，也有致病菌。
通过实验，我们可以了解口腔细菌的种类、分布和特性，为口腔疾病的预防和治疗提供依据。
三、实验材料1. 实验试剂：营养肉汤、琼脂、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯酚红、中性红等。
2. 实验仪器：无菌操作台、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜、接种环、无菌棉拭子等。
3. 样品：口腔拭子。
四、实验方法1. 口腔拭子的采集采集受试者的口腔拭子，要求在口腔前庭、牙龈、舌面等部位取样。
2. 细菌的分离和纯化（1）将采集的口腔拭子放入无菌生理盐水中，充分振荡混匀。
（2）取适量混合液，接种于营养肉汤中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
（3）观察肉汤浑浊情况，如有浑浊，则表明有细菌生长。
（4）将肉汤中的细菌接种于琼脂平板上，37℃恒温培养24小时，观察菌落形态。
3. 细菌的鉴定（1）根据菌落形态，初步判断细菌的种类。
（2）将纯化的细菌接种于不同的鉴定培养基，观察细菌的生长情况和颜色变化。
（3）根据细菌的生长情况和颜色变化，结合相关文献资料，确定细菌的种类。
五、实验结果1. 口腔拭子采集成功，样品中存在细菌生长。
2. 分离得到多种菌落，菌落形态各异。
3. 通过鉴定培养基的观察，初步确定分离得到的细菌种类。
六、实验分析1. 口腔是人体内微生物栖息的重要场所，含有大量细菌。
本实验成功分离出多种口腔细菌，表明口腔生态系统的复杂性。
2. 通过菌落形态和鉴定培养基的观察，初步确定了分离得到的细菌种类，为口腔疾病的预防和治疗提供了依据。
3. 口腔细菌的种类与个体差异、生活习惯、口腔卫生状况等因素有关。
牙医助理生物实验报告
实验名称：牙菌斑生物膜培养与观察实验目的：1. 了解牙菌斑生物膜的形成过程。
2. 掌握牙菌斑生物膜的显微镜观察方法。
3. 分析牙菌斑生物膜对口腔健康的影响。
实验时间：2023年4月10日实验地点：口腔医学实验室实验材料：1. 牙菌斑采集器2. 牙菌斑培养皿3. 细菌培养基（LB培养基）4. 微生物显微镜5. 显微镜载玻片、盖玻片6. 灭菌工具7. 牙菌斑样本实验步骤：1. 采集牙菌斑样本：使用牙菌斑采集器在实验者的牙齿表面采集牙菌斑样本。
2. 制备菌斑培养物：将采集到的牙菌斑样本置于无菌条件下，加入适量LB培养基，充分混匀后，将混合物倒入培养皿中，置于37℃恒温培养箱中培养。
3. 观察牙菌斑生物膜形成：每天观察培养皿中的牙菌斑生物膜形成情况，记录观察结果。
4. 制作临时切片：在显微镜下观察牙菌斑生物膜的生长状态，选取生长良好的样本，用无菌手术刀切取一小块，制作成临时切片。
5. 显微镜观察：将临时切片置于显微镜载玻片上，滴加适量染料，盖上盖玻片，使用显微镜观察牙菌斑生物膜的形态、结构及生长状态。
6. 数据分析：根据观察结果，分析牙菌斑生物膜对口腔健康的影响。
实验结果：1. 牙菌斑生物膜形成过程：在实验过程中，观察到牙菌斑生物膜在培养皿中逐渐形成，从单个细菌逐渐聚集成菌落，最终形成致密的生物膜。
2. 显微镜观察结果：通过显微镜观察，牙菌斑生物膜呈现出不同的形态和结构，包括菌丝状、球状、层状等。
生物膜中存在大量的细菌，且细菌之间存在紧密的连接。
3. 牙菌斑生物膜对口腔健康的影响：牙菌斑生物膜是口腔中常见的细菌群落，其形成与口腔疾病的发病密切相关。
牙菌斑生物膜可以产生毒素，导致牙齿表面侵蚀、牙龈炎、牙周病等口腔疾病。
实验结论：通过本次实验，我们了解了牙菌斑生物膜的形成过程、显微镜观察方法及其对口腔健康的影响。
牙菌斑生物膜是口腔中常见的细菌群落，其形成与口腔疾病的发病密切相关。
因此，预防和控制牙菌斑生物膜的形成对于维护口腔健康具有重要意义。
牙菌斑(专业知识值得参考借鉴)
牙菌斑(专业知识值得参考借鉴)一概述牙菌斑是指粘附在牙齿表面或口腔其他软组织上的微生物群。
它是由大量细菌、细胞间物质、少量白细胞、脱落上皮细胞和食物残屑等组成。
不能用漱口或用水冲洗的方法把它去除。
因此，现在把菌斑看成是细菌附着在牙石上的一种复杂的生态结构，其与龋病和牙周病的发生有密切的关系。
二病因1.菌斑与龋齿现代学者在描述菌斑与龋齿的关系时指出：“菌斑与龋齿有着较为密切的关系。
”并进一步说明，菌斑量多者患龋病率也较高。
菌斑中细菌种类不同，吸附在牙齿的不同部位，结果都引起各个部位的龋坏。
平滑面龋与菌斑中的变形链球菌有关；根面内菌斑中的链球菌和丝状菌有关；裂沟区的细菌75%～95%是链球菌，尤以血型链球菌为多。
关于变形链球菌致龋的动物实验证明：从龋齿损害中分离出变形链球菌，接种到纯培养的动物牙齿上可致龋坏，并能再次从龋坏中分离出变形链球菌。
2.菌斑与牙周病目前资料一致认为菌斑能够引起牙周病。
试验表明：在彻底清除菌斑后停止口腔的卫生措施，第10天开始出现牙龈炎；如果去除菌斑并恢复口腔卫生措施，1周后牙龄恢复正常。
三临床表现牙龈炎症和出血：牙龈鲜红或暗红色，肿胀，边缘变厚，龈乳头呈圆柱状，质地松软，很容易由于刷牙、吮吸、咬硬物或剔牙而出血；牙周袋形成：牙菌斑时，结合上皮遭到破坏，使牙龈与牙齿分离形成牙周袋；牙槽骨吸收：牙齿松动和移位。
四检查1.菌斑取样体外测定法体外测定菌斑是用精细器械刮取菌斑标本，经过适量稀释，用微型玻璃电极或锑电极直接测定菌斑标本的酸碱度(pH值)。
体外测定菌斑使用的设备简单，简便易行，适用于大批标本调查使用，其结果可靠，重复性好。
2.埋藏电极遥测法是将一个微型玻璃电极埋入离体的牙釉质小块，然后放在受试者的假牙中，使电极的敏感面向着基牙。
埋藏法适用于观察菌斑形成过程中的酸碱度(pH值)的动态变化。
3.显示剂检查法使用菌斑显示剂，在牙菌斑着色的同时测量染色宽度或染色范围。
目前显示剂种类有如下几种；1%或2%碱性复红液，5%红溴汞溶液，5%赤鲜红(四碘荧光素)溶液，1%～2.5%孔雀石绿溶液，4%酒石黄溶液，荧光菌斑显示剂。
实验一牙菌斑细菌检查 (口腔)
【实验方法】
(1) 标本采集 用牙纤挑取牙菌斑(牙缝接近牙龋处)的牙垢。
(2) 刚果红负性染色法
载玻片上滴加2%刚果红溶液2滴 加入标本37%)蒸汽上熏，呈蓝色即可
油镜观察
[实验结果]
油镜下可见背景呈蓝(黄)色、细菌及其它微 生物呈光亮的白色,形态清晰,呈不同的形态： 球状、杆状、螺旋状等。
[注意事项]
(1) 一定要将菌斑与染液混匀，否则就不能将细菌 分散。 (2) 用HCL蒸汽熏时，皮肤一定不要接触浓HCL， 否则会被烧伤。
2.牙菌斑细菌培养
[实验材料] 1.牙纤、牙垢、硫乙醇酸盐稀释液(分装成1ml)、 厌氧血平板、产气袋、金属钯、厌氧罐。
2.生理盐水、革蓝染色液, 显微镜、载玻片、 接种环、牙纤、香柏油、二甲苯。
口腔生物学实验
基础医学院病原生物学教研室 杨致邦
2010.1
教材
高等医学院校基础医学实验教学系列教材 ≪病原生物学实验≫
科学出版社，2008年6月 主编
杨致邦 叶彬
实验内容及安排
实验课内容
学时 显微镜 录像 数
1 牙菌斑细菌检查 5
需要
2 ELISA法检测血清 5 HBsAg
需要
3 饮用水氟含量测定 4
[实验方法]
1.厌氧菌培养
用牙纤挑取少许牙垢 在塑料离心管中加入0.5 ml硫乙醇酸盐稀释液
震荡1-2分钟 用稀释液对倍稀释为1:10、1：20、1：40 取1：20、1：40稀释液各2-3环接种厌氧血平板
在厌氧罐中放入产气袋，加约10ml水 将接种后的厌氧血平板放入厌氧罐中，迅速盖好
37℃培养3天后观察
[实验报告]
记录牙菌斑刚果红负性染色检查试验结果， 讨论牙菌斑对龋病形成的影响。
口腔微生物实验报告
口腔微生物实验报告摘要：本实验旨在探究口腔微生物的分布情况及其在各种口腔疾病中的作用。
通过对100名健康人和100名患有口腔疾病的患者进行采样实验，我们发现口腔微生物在患有口腔疾病的患者中数量明显多于健康人群中的数量。
常见的口腔微生物包括牙菌斑菌、龋齿助碱菌等。
这些微生物可能导致龋病、牙周病等口腔疾病的发生。
因此，正确的口腔卫生和预防口腔疾病是保持口腔微生物平衡的关键。
实验方法：选取100名健康人和100名患有口腔疾病的患者，并向他们发放含有生理盐水的塑料袋以供采样。
实验者先在采集样本前消毒双手，然后用消毒液消毒采样器，取得足够的口腔微生物样本。
随后，将样本放置于一个含有营养液的培养皿中，并在恒温条件下培养出口腔微生物。
实验结果：通过实验我们发现，患有口腔疾病的患者的口腔微生物数量明显多于健康人群中的数量。
例如，龋齿助碱菌、牙菌斑菌等微生物在患有龋齿和牙周病的患者口腔中的数量要高于健康人群中的数量。
这说明口腔微生物与口腔疾病的发病密切相关。
此外，我们还发现，在口腔微生物中存在许多可能导致口臭等口腔疾病的细菌。
讨论：口腔微生物在人类的口腔中存在很长时间，且数量巨大，而这些微生物又与许多口腔疾病如龋病、牙周病等密切相关。
因此，保持良好的口腔卫生是预防口腔疾病的关键。
定期刷牙、使用牙线、定期口腔检查等都是非常重要的，可以有效预防口腔疾病和维持口腔微生物的平衡。
结论：通过实验我们发现，口腔微生物在患有口腔疾病的人群中数量显著增加，同时，这些微生物也是口腔疾病的主要原因之一。
因此，正确的口腔卫生和预防口腔疾病是保持口腔微生物平衡的关键。
我们建议大家养成定期口腔检查和清洁的好习惯，以保持口腔健康。
牙周病学实验指导.
牙周病学实验指导实验一牙周病的检查和病历书写[目的和要求] 认识健康和病理状态牙周组织的临床表现，初步掌握牙周病的检查方法和病历书写。
[实验内容]1 教师讲解和示教牙周检查的内容和方法。
2 观看录像《牙周病的检查和诊断》（西安交通大学口腔医院录制）3 同学互相检查[实验用品]1 口腔检查盘（包括口镜、镊子、尖探针）2 牙周探针。
3 菌斑显示剂。
4 牙周炎患者X线片(全口牙根尖片、曲面断层片)[方法和步骤]（一）病史采集通过问诊获得病史。
1 牙周病史（1）主诉：主要症状+部位+时间牙周病常见的主述症状有：“牙龈出血”、“牙齿松动”、“牙齿移位出现间隙”，“牙龈肿胀”，“牙龈肿痛”，“咀嚼无力”，“咀嚼疼痛”，“牙龈烧灼感”，“口臭”等。
（2）现病史：从发病到本次就诊时疾病的发生、发展及变化的全过程。
包括起病情况、主要症状的特点、病情的发展、伴随症状、诊断和治疗经过及效果，以及其他情况。
应注意询问以下症状：①牙龈出血；②牙床肿胀、脓肿或疼痛；③牙松动、牙移位、牙脱落情况，有无咀嚼无力；④有无口臭症状；⑤其他：有无食物嵌塞，是否有夜磨牙、紧咬牙习惯，晨起时是否感觉牙或咀嚼肌酸痛或不适，是否吸烟、咬指甲、咬其他异物的习惯等。
除上述这些症状外，还应注意询问：是否进行过牙周治疗，进行的是何种治疗及疗效如何；刷牙习惯如刷牙的频率、方法、所用牙刷及牙膏的种类；是否用其他的控制菌斑方法：牙线、牙签、牙间隙刷、含漱剂等。
2 口腔病史：除上述牙周病史外，还应询问口腔病既往史，记述口腔内以往健康情况。
例如：有无脓肿、溃烂等病史；是否进行过正畸治疗过程，正畸治疗时间的长短，正畸治疗终止的大概时间；曾否拔牙，拔牙的原因；曾否作过手术等等。
3 系统病史患者的全身系统病史对牙周病的诊断治疗非常重要，它有助于诊断系统病在口腔的表现，有助于发现牙周组织疾病的全身因素。
并且发现那些在牙周治疗中需特别小心或需改变治疗方案的全身因素。
应特别注意询问是否有血液病，糖尿病、高血压、冠心病；风湿热、风湿性心脏病或先天性心脏病、肝炎、肾病等，并询问目前正在接受何种治疗，治疗已有多长时间。
口腔牙菌斑实验报告
一、实验背景牙菌斑是口腔中一种常见的生物膜，主要由细菌、细胞间物质、少量白细胞、脱落上皮细胞和食物残屑等组成。
牙菌斑是口腔中细菌生长、繁殖、代谢的场所，也是口腔疾病（如龋病、牙周病）的主要原因。
为了研究牙菌斑的形成、结构及其与口腔疾病的关系，我们进行了口腔牙菌斑实验。
二、实验目的1. 观察牙菌斑的形成过程；2. 分析牙菌斑的组成成分；3. 研究牙菌斑与口腔疾病的关系。
三、实验材料1. 实验对象：10名健康志愿者，年龄18-25岁；2. 实验仪器：显微镜、牙菌斑测试仪、牙菌斑定量检测仪、牙菌斑定量检测软件；3. 实验试剂：牙菌斑染色液、牙菌斑定量检测液、生理盐水。
四、实验方法1. 实验对象选择：选择10名健康志愿者，年龄18-25岁，性别不限；2. 牙菌斑收集：采用牙菌斑测试仪，在实验对象刷牙后30分钟内，分别在口腔左右两侧牙齿的唇面和舌面采集牙菌斑样本；3. 牙菌斑观察：采用显微镜观察牙菌斑的形成过程，记录牙菌斑的形态、结构等特征；4. 牙菌斑定量检测：采用牙菌斑定量检测仪，对采集的牙菌斑样本进行定量检测，记录牙菌斑的数量；5. 牙菌斑组成分析：采用牙菌斑染色液对牙菌斑样本进行染色，通过显微镜观察并分析牙菌斑的组成成分；6. 口腔疾病调查：对实验对象进行口腔检查，记录口腔疾病情况。
五、实验结果1. 牙菌斑形成过程：实验结果显示，牙菌斑的形成是一个动态过程，从刷牙后30分钟开始大量形成，随着时间的推移，牙菌斑数量逐渐增加；2. 牙菌斑组成成分：牙菌斑主要由细菌、细胞间物质、少量白细胞、脱落上皮细胞和食物残屑等组成。
通过染色观察，发现牙菌斑中的细菌主要包括链球菌、乳酸杆菌、放线菌等；3. 牙菌斑数量：实验结果显示，牙菌斑的数量与口腔疾病的发生密切相关。
牙菌斑数量越多，口腔疾病的发生风险越高；4. 口腔疾病情况：实验结果显示，10名志愿者中，5人患有龋病，2人患有牙周病，3人未发现口腔疾病。
六、实验讨论1. 牙菌斑的形成过程：牙菌斑的形成是一个动态过程，受到多种因素的影响，如口腔卫生状况、饮食习惯、遗传因素等。
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[实验方法]
1.厌氧菌培养
用牙纤挑取少许牙垢 在塑料离心管中加入0.5 ml硫乙醇酸盐稀释液
震荡1-2分钟 用稀释液对倍稀释为1:10、1：20、1：40 取1：20、1：40稀释液各2-3环接种厌氧血平板
在厌氧罐中放入产气袋，加约10ml水 将接种后的厌氧血平板放入厌氧罐中，迅速盖好
37℃培养3天后观察
[实验报告]
记录牙菌斑刚果红负性染色检查试验结果， 讨论牙菌斑对龋病形成的影响。
请班干部 填写实验运行记录， 安排做好清洁卫生。
谢谢！
2.耐氧试验 观察培养3天后的厌氧血平板,将不同菌落编号
后,同时分别接种两个厌氧血平板,1个置培养箱中 常规培养, 1个置厌氧培养,3天后观察。
3. 厌氧菌鉴定 以厌氧培养生长，而常规培养不生长的细菌
判为厌氧菌。若两者均生长判为兼性厌氧菌， 有条件可作进一步鉴定。
[注意事项]
1.确保厌氧罐不漏气。 2. 产气袋加入水后会很快产生氢气,需迅速盖好厌氧罐。
【实验方法】
(1) 标本采集 用牙纤挑取牙菌斑(牙缝接近牙龋处)的牙垢。
(2) 刚果红负性染色法
载玻片上滴加2%刚果红溶液2滴 加入标本，用牙鉴将标本与染液混匀
推片
自然干燥
置浓HCL(37%)蒸汽上熏，呈蓝色即可
油镜观察
[实验结果]
油镜下可见背景呈蓝(黄)色、细菌及其它微 生物呈光亮的白色,形态清晰,呈不同的形态： 球状、杆状、螺旋状等。
有
实验一
牙菌斑细菌检查(P161)
[实验目的]
1.掌握牙菌斑涂片的刚果红负性染色法； 2.熟悉口腔细菌的形态，染色性； 3.了解口腔厌氧菌培养方法。
【实验内容】
1.牙菌斑刚果红负性染色检查法 2.牙菌斑细菌培养
1.牙菌斑刚果红负性染色检查法
[实验材料] 牙纤、牙垢、2%刚果红、37%的浓HCL、 显微镜、载玻片、香柏油、二甲苯。
[注意事项]
(1) 一定要将菌斑与染液混匀，否则就不能将细菌 分散。 (2) 用HCL蒸汽熏时，皮肤一定不要接触浓HCL， 否则会被烧伤。
2.牙菌斑细菌培养
[实验材料] 1.牙纤、牙垢、硫乙醇酸盐稀释液(分装成1ml)、 厌氧血平板、产气袋、金属钯、厌氧罐。
2.生理盐水、革蓝染色液, 显微镜、载玻片、 接种环、牙纤、香柏油、二甲苯。
口腔生物学实验
基础医学院病原生物学教研室 杨致邦
2010.1
教材
高等医学院校基础医学实验教学系列教材 ≪病原生物学实验≫
科学出版社，2008年6月 主编
杨致邦 叶彬
实验内容及安排
实验课内容
学时 显微镜 录像 数
1 牙菌斑细菌检查 5源自需要2 ELISA法检测血清 5 HBsAg
需要
3 饮用水氟含量测定 4