外周血细胞形态检验
外周血细胞形态学检验 ppt课件
3.中性颗粒呈等电点状态与伊红美兰均可结合，染成 紫红色，称为中性物质。
医学课件
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pH对细胞染色的影响
在酸性环境中染色偏红；在碱性 环境中染色偏蓝。因此要求用磷酸盐 缓冲液，使染色环境维持在6.4～6.8 之间，以达到满意的染色效果。
医学课件
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1.用玻璃笔在血膜两端划线。 2.瑞氏染液覆盖血膜，染 0.5～1min。
医学课件 20
制备血涂片
染色
镜检
检查区域：体尾交界处，细胞分布均匀， 红细胞紧密排列但不重叠。 低倍镜： 估计细胞分布和染色情况，浏 览全片是否存在异常细胞。 油镜： 观察红细胞形态。
医学课件 21
正常红细胞形态
双凹圆盘形，淡桔红色，中央1/3为生 理性淡染区，呈正常色素性。红细胞直径 为6.7～7.7μm，平均直径7.2μm左右，厚 约2μm。无核，胞质内无异常结构。除健 康人外，还见于急性失血、再生障碍性贫 血和部分白血病。
血涂片的染色
染色的目的是使细胞膜、细胞浆、胞 浆中颗粒及细胞核等主要结构染上特定的 颜色，以便于显微镜下观察与识别。
医学课件
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一、瑞氏染色法（Wright’s stain）
对胞浆和中性颗粒染色较好，对胞核稍差。
二、吉姆萨染色法（Giemsa’s stain）
对胞浆和中性颗粒染色较差，对胞核和寄 生虫着色较好。
医学课件
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小红细胞( microcyte )
医学课件
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红细胞大小异常
2．大红细胞( macrocyte)：直径>10μm。最 常见于缺乏叶酸和维生素B12所致的巨幼细 胞性贫血（MA）。也可见于溶血性贫血 （HA）、骨髓增生异常综合症（MDS）。 3．巨红细胞(megalocyte)：直径>15μm。 常见于巨幼细胞性贫血（MA）和骨髓增生 异常综合症（MDS）。
外周血细胞形态分析标准操作程序
外周血细胞形态分析标准操作程序1 检验目的规范外周血细胞形态学检查，对各仪器达到复检规则的样本进行复片检查，给临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果提供重要的参考依据。
2 用于检验程序的原理把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用瑞氏-姬姆萨染料染色，观察各种细胞数量、形态和质量的变化。
3 性能参数不适用。
4 原始样品系统血液标本详见《血常规标本的采集与处理程序》。
5 容器和添加剂类型血液标本采集的容器是一次性含 EDTA-K2 抗凝剂的真空采血管；添加剂是EDTA-K2 抗凝剂。
采集方法：准确采集静脉血 2.0ml 于上述容器中，轻轻颠倒混匀或直接取手指血 20μl。
要求量准，采血顺利，不能出现凝块。
取手指血或抗凝血于洁净的玻片上制片。
6 所需设备和试剂6.1 仪器、器材：显微镜或 DM96 自动阅片机、玻片6.2 试剂6.2.1 瑞氏-姬姆萨染色液6.2.2 磷酸盐缓冲液（自配）：称取 10 克 KH2PO4，用 1000ml 蒸馏水溶解为 1%浓度的 KH2PO4 溶液，称取 7 克 NaHPO4，用 700ml 蒸馏水溶解为 1%浓度的2Na2HPO4 溶液，取 900 毫升 1%浓度的 KH2PO4溶液和 600 毫升 1%浓度的Na2HPO4 溶液混匀，再用蒸馏水加至 3000 毫升，充分混匀。
配制的缓冲液的 pH 值范围应该在 6.4-6.8。
7 程序步骤仪器器材/试剂准备→样本编号→制片→染色→镜检→分析测定结果→结果审核签发。
应在取血后4小时内完成血涂片制作。
7.1 样本编号按顺序将样本编号，认真核对检验目的、病人姓名、性别、科室、床号、血液质量，如有疑问应及时与临床联系。
如采血量不够、有凝块或有溶血现象等，须申请重留标本。
7.2 制片采用 SP1000I 自动推片机或手工制片。
将样本混匀后取 5～10ul 滴于玻片上，并在玻片上注明患者姓名、样本编号，推制厚薄适宜的血膜片。
外周血细胞形态学检验及技巧
外周血细胞形态学检验及技巧卫生部北京医院血液科郑天林卫生部临床检验中心彭明婷谷小林陆红五．血细胞形态学采样、制片染色与检查要求：( 一) 采样、制片及染色，三道工序至关重要，是细胞形态学检查的成败关键。
要得到合格的涂片标本，做好上述工序，应注意以下要求：1. 采样、制片：(1) 玻片要求：国内1.0mm × 26mm × 76mm ± 0.5 ，美国NCCLS 规定1.0mm × 25mm × 75mm ± 0.5 ，要严格清洁，接近中性.(2) 推片：选择优质推片，推片两端边缘整齐、平滑。
也可选用有机玻璃，其大小、厚度与坡片相同，两端之边缘应加工光滑，以利推片用。
(3) 采外周血（样），擦去第一滴血，迅速采血，量适中，如绿豆粒大小，具有一定推片技术，推片倾斜45 °±，推成血膜长度25mm ～35mm ，宽度18 ～20mm ，血膜四周留有空隙区，血膜终尾离玻片终端至少10mm ，血膜均匀，薄如蝉翼，尾端形如弧状，迅速扇（摇）干，血膜具有头、体、尾不同厚薄区域。
此外，涂片时，还要考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、WBC 或有核细胞多少等因素，调整推片技巧。
(4) 如若采用静脉血推片，用K 3 -EDTA 或肝素抗凝，推制血片应尽早进行（最迟在1 ～2 小时内）。
（二）染色：是识别细胞形态的重要标记工序：常规瑞氏- 姬姆萨染色要点：1 ．要得到满意、漂亮的血细胞染色标本，新鲜涂片迅速染色是很重要的。
2 ．染色液配制要合格；3 ．涂片切勿用甲醛固定，否则不着色；4 ．染色的好坏与染色液、缓冲液的质量及比例、加液间隔时间、保持玻片染色液面的张力等染色技巧均有重大关系。
染液要覆盖涂膜面，再加缓冲液（1:2 ），其量要充足、混均，染色时间要30 分钟以上。
5 ．细胞着色的观察：(1) 当染液与缓冲液混合后，甲醛吸水液温升高，发生剧烈反应，直至液膜表面的“染色粒”呈均匀分布，随染色时间的推延，“染色粒”由“染色小粒”聚集成“染色大粒”，逐渐由外缘向内缘推进至染色面中心（此过程需要20-30 分钟以上），则表明细胞着色已完成，(2) 再用自来水缓流冲洗，使染色液沉渣及染色粒浮去，使其充分起分色作用，去除细胞染色中浮色，显示出胞核结构及细胞清晰形态，待干，镜检。
1500例外周血细胞形态检验的临床分析 (2)
1500例外周血细胞形态检验的临床分析目的：观察外周血细胞形态检验在临床中的应用效果，研究外围血细胞形态检验临床应用价值。
方法：选取2010年5月—2013年6月进行血细胞形态检验的患者1500例，对其外周血细胞形态进行检测，并对其结果进行分析统计。
结果：1500例外周血细胞形态检验中，1150例为形态异常和350例形态正常。
形态异常中白血病35例，有3例血液根系结果正常，其假阴性为8.6%；形态正常中有40例血液分析结果异常，其假阳性为11.42%。
结论：外周血细胞形态是一种能简单、快捷、准确检验患者病情的方法，在临床诊断治疗中有重要的价值，值得推广运用。
标签：血细胞；光学显微镜；外周血细胞形态；检验外周学细胞包括白细胞、红细胞、血小板三类。
通过外周血细胞检验能够准确的判断患者病情，并做出正确的治疗[1]；是临床血液检验的一项重要项目，对临床治疗提供了重要依据。
我院将外周血细胞形态进行检验，取得了较好的临床效果，分析报告如下。
1资料与方法1.1一般资料将我院2010年5月—2013年6月就诊并进行血细胞形态检验的患者中选取1500例。
男性790例，女性760例，年龄20岁--75岁；平均（44.2±4.1）岁。
所有患者在年龄、文化程度、性别比较等均无显著差异，具有可比性。
两组患者症状均表现为血常规异常、肝脾淋巴结肿大、发热、乏力等。
1500例患者及其家属均对研究过程知晓，并签署知情同意书。
1.2检验方法抽取患者静脉血液1—2ml，EDTA—k2抗凝，并制作有头体尾分布良好的的血片2张。
采用BC5800血球计数仪对EDTA—K2抗凝血标进行血常规检查分析。
将用BSAO瑞特染色后的血片置于光学显微镜油镜下于尾部开始观察全片，同时在血片染色良好体尾部计数100个白细胞。
1.3观察指标观察红细胞、白细胞及血小板的形态，并间接计数白细胞和血小板的数量、有无血液寄生虫[2]。
1.4统计学处理数据的收集与处理均由我院数据处理中心专门人员进行，保证数据真实性与科学性。
外周血细胞形态学检验及技巧
外周血细胞形态学检验及技巧卫生部医院血液科天林卫生部临床检验中心明婷谷小林陆红一．血液学及血细胞形态学临床应用：●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。
●血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。
●近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。
●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。
●进入90 年代以来，国外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案：○FAB-AL （1976 ）、NCL （美国国家癌症研究所）对FAB-AL 分型的补充（1995 ）、AL-MIC 分（类）型，MIC 及MICM 分型（1985-1990 ）；○FAB-CL 分型（1989 ）、中国CL 分型（1997 ）；○FAB-MDS 分型（1982 ）、MIC 协作组对FAB-MDS 分型提出补充建议（1987 ）；○WHO 对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO 分类（2000 ）；●血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期：○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL 诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。
○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。
二．血细胞形态学基本概念血细胞形态学作为临床血液病基础诊断：●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、最简便实用的检查方法，被临床普遍应用。
外周血细胞形态报告单
外周血细胞形态报告单外周血细胞形态学是临床血液学中的重要内容之一，通过对外周血细胞形态的观察和分析，可以为临床医生提供重要的诊断和治疗依据。
下面将对外周血细胞形态报告单进行详细解读，希望能够对大家有所帮助。
一、外周血细胞形态学检查结果。
1. 白细胞计数（WBC），正常范围为4.0-10.0×10^9/L，本次检查结果为6.5×10^9/L，属于正常范围内。
2. 红细胞计数（RBC），正常范围为3.5-5.5×10^12/L，本次检查结果为4.2×10^12/L，属于正常范围内。
3. 血红蛋白（Hb），正常范围为115-150 g/L，本次检查结果为130 g/L，属于正常范围内。
4. 血小板计数（PLT），正常范围为100-300×10^9/L，本次检查结果为180×10^9/L，属于正常范围内。
二、外周血细胞形态学观察。
1. 白细胞形态，各种类型的白细胞比例正常，未见异常细胞。
2. 红细胞形态，红细胞大小、形态均匀，未见异常红细胞。
3. 血小板形态，血小板分布均匀，未见异常血小板。
三、结论。
根据本次外周血细胞形态学检查结果，白细胞、红细胞和血小板计数均在正常范围内，各种类型的细胞形态均匀，未见异常细胞，提示患者外周血细胞形态正常，无明显异常。
四、临床意义及建议。
外周血细胞形态学检查是临床血液学中常规的检查项目之一，通过对外周血细胞形态的观察和分析，可以为临床医生提供重要的诊断和治疗依据。
本次患者的外周血细胞形态学检查结果正常，提示患者目前没有明显的血液系统疾病，建议定期复查以了解血液状况的变化。
五、注意事项。
外周血细胞形态学检查结果需结合临床症状和其他相关检查结果进行综合分析，以获取全面的诊断信息。
在进行外周血细胞形态学检查时，需严格按照规范操作，避免因外界干扰或人为操作不当导致结果的误差。
六、结语。
外周血细胞形态学检查是临床血液学中的重要内容，通过对外周血细胞形态的观察和分析，可以为临床医生提供重要的诊断和治疗依据。
外周血细胞形态检验
详细描述
自动化血液分析仪法具有快速、高效的特点，能够提供大量数据，如白细胞计数 、分类比等。但该方法对异常细胞的识别能力有限，可能漏检或误诊。
流式细胞术
总结词
流式细胞术是一种高灵敏度的外周血 细胞形态检验方法，通过流式细胞仪 对细胞表面标记物进行检测。
疾病筛查
外周血细胞形态检验可辅 助筛查某些潜在疾病，如 肿瘤、感染等。
免疫系统评估
观察外周血细胞形态变化， 有助于评估免疫系统的功 能状态，判断个体对疾病 的抵抗力。
04 外周血细胞形态检验的注 意事项
样本采集和处理
采集时间
样本处理
选择清晨空腹时采集样本，以避免饮 食和日常活动对检验结果的影响。
详细描述
流式细胞术能够快速检测大量细胞， 并对细胞表面标记物进行分析，有助 于疾病的诊断和预后评估。但该方法 对仪器和试剂的要求较高，且数据分 析需要专业人员。
03 外周血细胞形态检验的应 用
诊断血液系统疾病
贫血
通过观察红细胞大小、形态和染色情 况，判断贫血的类型和原因，如缺铁 性贫血、巨幼细胞贫血等。
全自动血细胞分析仪
01
能够自动完成血样的稀释、染色、计数和分类等步骤，提高检
验效率。
智能化识别系统
02
通过图像识别和机器学习等技术，实现血细胞形态的自动识别
和分类，减少人为误差。
自动化样本处理
03
利用机器人技术实现样本的自动取样、稀释、染色和检测等操
作，提高检验过程的自动化水平。
临床应用前景
精准医疗
利用计算机算法对显微镜下的血 细胞图像进行自动识别和分析，
外周血细胞形态学检查对血常规检验的作用分析
外周血细胞形态学检查对血常规检验的作用分析【摘要】目的：探究外周血细胞形态学检查对血常规检验的作用。
方法：在2021年1月至2021年12月选择102例进行血常规的患者作为研究对象，对照组（n=51）给予常规检查，观察组（n=51）外周血细胞形态学检查，对比两种检查结果进行对比。
结果：检查后，观察组血液细胞异常检出率高于对照组，有统计学意义（P＜0.05）。
结论：在血常规检验中，结合外周血细胞形态学检查，可显著提高检出率。
【关键词】外周血细胞形态学检查；血常规检验血液系统主要包括患者的骨髓、淋巴结、胸腺、脾脏等相关器官，以及通过血液运行散布的全身血细胞，血液系统对于人体，是人体机体系统的重要组成部分，如今，技术不断发展和进步，尤其是检验科血液细胞分析仪，在检查中逐渐开始应用起来，可以更加简单、规范地对人体血液进行检查。
而血常规是患者入院后进行治疗的依据，可以反映机体血液系统的变化情况，成为医生的诊断依据。
有关研究表明，外周血细胞形态学检验方法对血液的检测结果更加精准[1]。
因此本研究在2021年1月至2021年12月选择102例进行血常规规的患者进行分组探究，观察其与常规血液检测的不同之处，具体内容如下。
1.资料与方法1.1一般资料选择时间：2021年1月至2021年12月；研究对象：进行血常规检查的患者；例数：102例。
按照随机数字表法进行分组，其中对照组：男性23例，女性28例；年龄最大67岁，最小21岁，平均（45.87±5.48）岁；观察组：男性22例，女性29例；年龄最大66岁，最小20岁，平均（45.01±5.23）岁；两组资料对比（P＞0.05），具有可比性。
纳入标准：（1）患者自愿参加本研究；（2）意识清醒。
排除标准：（1）存在精神病史者；（2）恶性肿瘤患者。
1.2方法对照组：对患者血样进行常规血常规检查，主要针对白细胞计数、红细胞体积分布宽度测定、血红蛋白测定、血小板计数等。
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外周血细胞形态检验
1.外周血涂片检查步骤：
（1）肉眼观察：涂片面膜大小、厚薄是否适中，染色好坏。
（2）低倍镜观察全貌：
①涂片及染色好坏；
②了解白细胞数（可大体校对WBC直接计数是否正确）；
③了解白细胞大致分布及其各阶段大致比例，特别要注意由于涂片过力，把WBC及成熟粒细胞大多推于片尾部位，造成分类比值误差。
片尾有无异常细胞。
④选择具有代表性的细胞镜检区域。
（3）油镜观察：进行WBC分类计数，观察细胞形态、比例、有无巨大或异常细胞。
①血涂片对WBC总数准确性估计：从低倍及油镜中估计WBC数及其分布。
医|学教育网搜集整理一般区分WBC数几个等级（油镜视野中WBC密度、分散无重叠）。
参见WBC形态诊断技巧节段。
②白细胞分类计数：血中主要两大比例的中性成熟粒细胞与淋巴细胞及其他小比例细胞是否属正常范围及形态有
无异常。
③注意片尾端有无巨大或出现不成熟或异常细胞（如中晚幼粒、中晚幼红细胞、异常淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等）。
④红细胞形态（群体、个体）、排列（重叠、缗钱状）。
⑤血小板数量、形态及聚集性。
⑥寄生虫。
●注意事项
1．血膜呈舌状，头、体、尾分明
2.空气中晃动，尽快干燥；37℃恒温箱中促干
3．涂片的厚薄、长度与血滴大小（10~20μl）与血片质量4．1h内染色或在1h内甲醇固定
5.正确清洁玻片
6．抗凝血或毛细血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集
7．抗凝血液4h内涂片，先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和细胞分布情况，观察有无异常细胞。
选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数。
求出各类细胞所占百分数。
8.分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛
状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。
9.白细胞数明显减少的血片，应检查多张血片。
10.分类见有核红细胞，不计入100个白细胞内，以分类100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告，并注明所属阶段。
11.除慢淋外，破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。
若破碎细胞仍能明确鉴别，如破碎的嗜酸性粒细胞，应包括在分类计数中。
在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。
12.分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异常所见。
13.白细胞形态变化较大，遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实，以减少错误。
中性粒细胞的异常改变。
核象变化包括核左移和核右移，反映中性粒细胞的成熟程度。
正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约为1:13。
核左移外周血液中出现不分叶粒细胞（指杆状核粒细胞，正常：1~5%、幼稚粒细胞，正常：不出现）> 5%。
常见于感染（特别是急性化脓性感染）、急性中毒、急性失血及急性溶血等。
如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为极度左移，多见于类白血病反应或白血病。
具体表现为：★伴白细胞总数增高
的核左移称再生性移，常见于急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。
★白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、感染中毒性休克的败血症等。
核右移中性粒细胞核出现4、5叶（正常时多为3叶，占50~70%）或更多，其百分数 >3%。
这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。
常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。
此外，在疾病进行期突然出现核象右移，提示预后不良。
毒性变化严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等，中性粒细胞可出现形态变化。
具体表现为：①细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。
②中毒颗粒：细胞质中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小等，可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致空泡可在细胞质或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。
③杜勒小体：细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨形或云雾状，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。
④退行性变：表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。
胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行性变是细胞衰老死亡的表现。
淋巴细胞的异常变化
异形淋巴细胞：细胞大小为10~25μl，形态各异，呈圆形，卵圆形或不规则形。
细胞核形各异，呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形，核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒；副染色质无或少量，核仁无或偶见，大小和染色性各异。
细胞质中等至大量；染灰色、淡蓝色或深蓝色；可见细胞边缘染色深，核周淡染；浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝；有时可见细小嗜天青颗粒；偶见空泡。
异形淋巴细胞可见于各种病毒感染，如传染性单核细胞增多症时最为常见。
此外，可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。
按形态学特征分为Ⅲ型：
I型：空泡型或浆细胞型
II型：不规则型或单核细胞型
III型：幼稚型。