外用抗菌离子膜治疗细菌性毛囊炎的临床研究
［ ｙＷｏｄ ］ Ｆ ｌｃ ｌｉ； Ｂ ｃｅ ａ； Ａ ｔ ａｔ ｉ ｐａ Ｋｅ ｒ ｓ ｏ ｉ ｉｓ ｌ ｕ ｔ ａｔ ｌ ｉ ｒ ｎｉ ｃｅ ａ ｓ ｒ ｂ ｒｌ ｙ
［ 要 ］ 目的 ： 摘 观察外 用抗 菌离子 膜治 疗细 菌性 毛囊 炎 的临 床疗 效 。方 法 ： 门诊 筛 选 符合 入选 标 准 从 的２ ８例细 菌性 毛囊 炎患者 ， 抗菌离 子膜 外 喷 ， 日 ２次 ， 程 ２周 ， 予 每 疗 观察 临 床症 状 、 征和 治疗 前 后 体
（ ＜ ． ５ ，ｈ ｌａａｃ ａ ｆ ａｔ ｉ ｗ ｓ ８ ７ ％ ． ｈ ｌ ｉａ ｃ ｒｄｒｔ ａ ｄｅ ｃｃ ａｅ Ｐ ０ ０ ） ｔｅｃ ｒｎ ｅｒ ｅｏ ｃｅ ａ ａ ． ５ Ｔ ｅｃ ｎｃｌ ｕｅ ａ ｎ ｆ ａｙｒｔ ｅ ｔ ｂ ｒ ６ ｉ ｅ ｉ
ｗｅｅ ５ ５７％ ａ ｄ ９２ ８ ｒ ３． ｎ ． ６％ ｒｓ ｅ ｔｖ ｌ ｅ ｐ ｃ ｉｅｙ．ｗｈ ｌ ｈｅ ｔｔ ｌｃ ｒ ａｅ ａ ｄ ｅ ｃ ｃ ａｅ ｗｅ ｅ４６ ４ ｉ ｔ ｏａ ｕ ｅ ｒ ｔ ｎ ｆ ａ ｙ ｒ ｔ ｒ ． ３％ ｅ ｉ ａ ｄ ７ ０ ． ｉ ｅ ｅｆｃ ｓｏ ｓ ｒ ｅ ｎ ５． ％ Ｎ０ ｓｄ ｆｅ ｔｗａ ｂ ｅ ｖ ｄ． Ｃｏｎ ｌ ｓｏ ：ｔｉ ａｅ ａ ｄ ｅ ｃｅ ｔｔ ｐｐｙ ａ ｔｂ ｃ ｅ ｃ ｕ ｉ ｎ Ｉ ｓａ ｓ ｆ ｎ ｆ ｉ ｎ ｏ ａ ｌ ｎ ｉ ａ ｔ — ｉ ｒａ ｐ ａ ｏ ｉａ ｌ ｎ ｔｅ ｔｎ ａ ｔ ｒａ ｏｌｃ ｌ ｉ． ｉ ｌｓ ｒ ｙ ｔｐ ｃ ｌｙ ｉ ｒａ ｉ ｇ ｂ ｃｅ ｉｌｆ ｌ ｕ ｉ ｓ ｉ ｔ
1临床疗效评价标准各病例均在使用外用抗菌离子膜治疗中第7天时和治疗结束时判定疗效根据临床症状和体征消退情况计算tss差值疗前tss一疗后tss及tss变化率tss差值疗前tss根据tss变化率按照临床痊愈显效进步无效四级标准进行疗效评定
维普资讯
岭南皮肤性病科杂态 鱼生 至Ｑ
囊炎 。
［ 关键 词 ］ 毛囊 炎 ； 细 菌性 ； 抗 菌离 子膜
［ 中图分类 号 ］ Ｒ ５． ７３３
［ 文献标识 码 ］ Ａ
［ 文章编 号］ １０ — ９８ ２０ ）４— ２５— ３ ０９ ８６ （０６ ０ ０ ８ ０
Ｃ。ｎｉａｉＴｒａ ｆＡ ｎ ｉ ｃ ｅ ｉ ｉＳ ａｙ ｉ ｔ ｅ ｔ ｅ ｆＢａ ｔ ｒａ ｉｉｕｌ ｉ ｉ ｃ ｉｌｏ ｔｂａ ｔ ｒａ ｐｒ ｎ ｈｅ Ｔｒ ａ ｍ ｎｔｏ ｃ ｅ ｉ ｉＦｏ ｌｃ ｉ ｓ ｉ ｔ
Ｘ ｉｇ— ａ ｇ， Ｕ Ｎ ｕ ｉ ｉ ， ， Ｕ Ｑｎ ｆ ｎ Ｈ Ａ Ｇ Ｈ ａ —ｑ ｕ （ ｅａｔ ｅ ｔｆＤ ｒ ｔ ｏｙ ｔｅ Ｄｐｒ ｎ ｏ ｅ ｏ ｇ ， ｍ ｍａ ｌ ｈ
５ ０ ３ ， ｈｎ ） １６０ Ｃ ｉ ａ
，ｔ １ ｅ ａ．
Ａ ｌ ｔ ｏ ｉ ｔｌ Ｓ ｎ—Ｙ ｔ ｅ ｎｖｒ ｔ， ｕ ｎ ｚｏ ｉ ａ ｄ ｐａ ｏ ｆ ｉ ｅ Ｈ ｓ ｔ ａ ｕ ｆ ａ ｎＵ ｉ ｓｙ Ｇ ａ ｇｈ ｕ Ｓ ｅｉ
ｔｒａ Ｒｅ ｕｌｓ：Ａｆ ｒｔ ｅ ｓ，ｔ ｅ ｓ ｏ ｅ ｆｃ ｉｉ ａ ｉｎｓａ ｄ ｓ ｍｐ ｏ ｅ ｒ ａ ｅ ｉｎｉ ｃ ｎ ｌ ｅｉ． ｓ ｔ ｔ ｗｏ ｗｅ ｋ ｅ ｈ ｃ ｒｓ ｏ ｌ ｃ ｌｓｇ ｎ ｙ ｔ ｍｓ ｄ ｃ ｅ ｓ ｄ ｓｇ ｆ ａ ｔｙ ｎ ｉ
笪 三鲞箜 塑
２８ ５
外用抗 菌离 子膜 治疗 细菌性 毛囊 炎 的临床研 究
许 庆 芳 ， 黄 怀球 ， 赖 维 ， 陈 剑 ， 苏向 阳 ， 龚 子 鉴
（ 山 大 学 附属 第 三 医 院 皮 肤 科 ， 东指标 的变 化 。结果 ： 治疗 ２周后 ， 临床症 状 和体 征评 分 及脓疱 数 较 治疗 前 明显 下 降 （ ００ ） Ｐ＜ ．５ ；
细菌 清除 率达 ８ ．４ ； ２ １％ 临床疗 效痊 愈 率 、 效 率分 别 为 ５ ． ７ 、２ ８ ％ ； 有 ３ ５ ％ ９ ．６ 总体疗 效痊 愈率 、 有效 率分 别 为 ４ ．３ 、 ． ％ 。结论 ： ６４ ％ ７ ０ ５ 外用抗 菌离子膜 是一安全 有效 的 非抗 菌素 抗菌 剂 ， 能有 效地 治疗 细菌 性 毛
［ ｂ ｔａｔ Ｏ ｊｃｉｅ Ｔ ｖ ｌａ ｈ ｆｃｃ ｎ ａ ｔ ｏ ｎｉａｔｒ ｌ ｐａ ｎ ｔ ｐｃｌ Ａ ｓ ｃ］ ｂ ｅｔ ： ｏｅａ ｔ ｔｅｅ ａｙａ ｄｓｆ ｙ ｆａ ｔ ｃ ｉ ｒｙｉ ｈ ｔ ｉａ ｒ ｖ ｕｅ ｉ ｅ ｂ ｅａ ｓ ｅｏ
ｔｅ ｔ ｎ ｆｂ ｃ ｅ ａ ｏ ｌ ｕ ｉｉ． Ｍ ｅ ｈ ｄｓ： ａ ｅ ｆｂ ｃ ｅ ａ ｏｌｃ ｉ ｓ ｈ ｄ ｂ ｅ ｏｌ ｃｅ ｎ ｒ ａｍｅ ｔｏ ａ ｔｒ ｌｆ ｌｉ ｌｔ ｉ ｃ ｓ ｔｏ ２８ ｃ ｓ ｓ ｏ ａ ｔｒ ｌｆ ｌ ｕｌ ｉ ａ ｅ ｎ ｃ ｌｅ ｔ ｄ ｉ ｉ ｉ ｔ ｔ ｔ ｄ ． Ａｎ ｉ ａ ｔ ｒａ ｐ ａ ｓ ａ ｌ ｄ ｔｐｉａｌ ｏ ｔ ｅ ａｆｃ ｅ ｒ ａ ｗｉ ｅ ａ ｄ ｙ ｆ ｒ２ ｗｅ ｋ ． ｈｅ ｓｕ ｙ ｔｂ ｃｅ ｉｌｓ ｒ ｙ ｗａ ｐｐ ｉ ｏ ｃ ｌｙ ｔ ｈ ｆｅ ｔｄ ａｅ ｓ ｔ ｃ ａ ｏ ｅ ｓ ｅ Ｔ ｆ ｃ ｃ ｓｅ ａｕ ｔｄ ｂ ｃ ｒ ｓ ｏ ｌｎ ｃ ｌｓｇ ｓ ａ ｙ ｔ ｍｓａ ｄ ｔ ｌ ａ ａ ｃ ａｅ ｏ ａ — ｈｅ ｅ ａ ｙ ｗａ ｖ ｌ ａｅ ｙ ｓ ｏ ｅ ｆｃ ｉ ｉａ ｉｎ ｎｄ ｓ ｍｐ ｏ ｎ ｈｅ ｃｅ ｒ ｎ ｅ ｒ ｔ ｆｂ ｃ ｉ
课题 主要工作及科研经历
课题：我的主要研究课题是探索新型抗菌药物的开发和应用。
主要工作：1. 文献综述：我首先进行了广泛的文献调研，了解当前抗菌药物领域的最新进展和存在的问题。
通过阅读相关研究论文和医学期刊，我深入了解了不同类型的抗菌药物、耐药性机制以及临床上的挑战。
2. 分子设计和合成：基于对现有抗菌药物的分析和理解，我开始设计和合成一系列具有潜在抗菌活性的化合物。
这包括结构修饰、合成路线的优化和反应条件的优化等工作。
通过化合物的合成和表征，我进一步评估了它们的抗菌活性。
3. 生物活性评价：为了评估合成化合物的抗菌活性，我进行了各种体外和体内生物活性测试。
这涉及到细菌抑制实验、最小抑菌浓度测定、细胞毒性测试等。
通过这些实验，我能够确定哪些化合物具有较强的抗菌活性，并选择其中表现出最佳活性的化合物进行进一步研究。
科研经历：-本科阶段：在本科阶段，我参与了一个关于抗菌肽的研究项目。
我负责实验室中的分子生物学实验和细菌培养工作，并协助进行生物活性测试和数据分析。
这个项目加深了我对抗菌机制和药物开发的理解，并提高了我的实验技术。
-研究生阶段：在攻读硕士学位期间，我选择了抗菌药物领域作为我的研究方向。
我参与了一个针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的抗菌药物发现项目。
通过合作设计和合成新的化合物，我成功地发现了一种具有潜在抗菌活性的化合物，并对其进行了进一步的研究和评估。
-博士研究生阶段：我目前正在攻读博士学位，并专注于抗菌药物的优化设计和靶向治疗。
我已经发表了若干篇与我的课题相关的科研论文，并参与了国际学术会议的报告和交流。
在我的科研经历中，我积累了丰富的实验技术和科研能力，并不断扩展我的知识边界。
头孢米诺的体外抗菌作用研究
摘要 ： 目的 评 价 头 孢 米 诺 对 近期 临床 分 离 的肠 杆 菌科 细 菌 、 不 发 酵 糖 革 兰 阴性 杆 菌 和 厌 氧 菌 的 体 外 抗 菌 作 用 。 方 法 采
Ａｍｐ Ｃ酶 菌 株 的抗 菌 活性 和肠 杆 菌 属 、 沙雷菌属 、 枸橼 酸 杆 菌 属 细 菌 和 铜 绿 假 单 胞 菌 、 鲍 曼 不 动 杆 菌 等 不 发 酵 糖 革 兰 阴性 杆 菌 的抗菌活性差 ； 但头孢米诺对梭杆 菌属细菌有高度抗菌活性 ， ＭＩ Ｃ ｓ ｏ 和 ＭＩ Ｃ 。 ｏ 分 别 为 ≤０ ． ０ ６ ｍｇ ／ Ｌ和 １ ｍｇ ／ Ｌ， 对 其他 受 试 的厌
氧 菌 亦 具 有 良好 的 抗 菌 活 性 。结 论 头 孢 米 诺 对 不 产 酶 和单 产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ的 大肠 埃 希 菌 和 肺 炎 克 雷 伯 菌 ， 以及 变 形 杆 菌 属 细 菌 、
摩 根 摩 根 菌 和 厌 氧 菌 等 均 具 有 良好 的 抗 菌 活 性 。提 示 头 孢 米 诺 可 用 于 上述 敏感 菌 以 及 厌 氧 菌 所 致 感 染 的治 疗 。
中 国 感 染 与化 疗 杂 志 ２ ０ １ ３年 ５月 ２ ０日 第 １ ３卷 第 ３期 Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｊ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ Ｃ ｈ ｅ ｍｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ， Ｍａ ｙ ２ ０ １ ３， Ｖｏ １ ．１ ３ ， Ｎｏ ．３
２ ０１
・
论 著
・
头 孢 米 诺 的体 外 抗 菌 作 用 研 究
用 琼 脂 稀 释法 测定 头孢 米诺 对 ８ ８ ４ 株 临床分离的大肠埃希菌 、 肺 炎克雷伯菌 、 铜 绿 假 单 胞 菌 和厌 氧 菌 等 的 体 外 抗 菌 作 用 。 结 果 ３ １ ６株 大 肠 埃 希 菌 和 肺 炎 克 雷 伯 菌 中 不 产 酶 株 ９ ６株 （ ３ ０ ． ４ ） ， 单产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌ ｓ菌 １ ７ ３株 （ ５ ４ ． ７ ） ， 单 产 Ａｍｐ Ｃ 酶 菌 ６株
疾病学基础（病原微生物）复习资料
疾病学基础（病原微⽣物）复习资料病原微⽣物微⽣物的种类：种类特点举例⾮细胞型微⽣物最⼩的⼀类微⽣物。
⽆典型的细胞结构，⽆产⽣能量的酶系统，只能在活的敏感细胞内增殖。
病毒、亚病毒、朊粒原核细胞型微⽣物原始核呈裸DNA团块结构，⽆核膜、核仁，细胞器很不完善。
真细菌和古细菌真核细胞型微⽣物细胞核分化程度⾼，有核膜和核仁，细胞器完整。
真菌、黏菌和藻类细菌学掌握：1、细菌细胞壁的结构及与染⾊性、致病性和对药物敏感性的关系。
共有成分是肽聚糖。
⾰兰阳性菌：膜磷壁酸细胞壁壁磷壁酸聚糖⾻架肽聚糖四肽侧链五肽交联桥脂多糖⾰兰阴性菌：脂质双层外膜脂蛋⽩营养结合蛋⽩细胞壁孔蛋⽩聚糖⾻架肽聚糖四肽侧链⾰兰阳性菌和⾰兰阴性菌细胞壁结构⽐较：细胞壁⾰兰阳性菌⾰兰阴性菌厚度20~80nm 10~15nm强度较坚韧较疏松肽聚糖层数可达50层仅有1~2层肽聚糖含量占细胞壁⼲重50%~80% 5%~20% 磷壁酸+ —外膜—+肽聚糖组成聚糖⾻架、四肽侧链、五肽交联桥聚糖⾻架、四台侧链2、格兰染⾊的步骤、结果及意义步骤：碱性染料甲紫初染碘液媒染甲紫—碘复合物深紫⾊95%⼄醇溶液稀释复红或沙黄复染结果：可将细菌分为两类，不被⼄醇脱⾊仍保留紫⾊者为⾰兰阳性菌，被⼄醇脱⾊后复染成红⾊者为⾰兰阴性菌。
意义：该法在鉴别细菌、选择抗菌药物、研究细菌致病性等⽅⾯有着重要的意义。
3、细菌⽣长繁殖的条件和⽅式条件：营养物质：⽔、碳源、氮源、⽆机盐、⽣长因⼦（细菌⽣长必需⽽⾃⾝不能合成的⽣长因⼦）环境因素：营养物质、氢离⼦浓度（pH值）、温度、渗透压、⽓体⽅式：个体：⼆分裂⽅式群体：分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期4、特殊结构的功能或医学意义荚膜：（1）抗吞噬作⽤；（2）粘附作⽤；（3）抗有害物质的损伤作⽤；（4）鉴别细菌及细菌分型鞭⽑：（1）细菌的运动器官；（2）根据鞭⽑抗原（H抗原）对某些细菌进⾏鉴定、分型及分类；（3）与致病性有关5、消毒、灭菌、⽆菌、⽆菌操作的概念消毒：杀死物体上病原微⽣物的⽅法，但不⼀定能杀死含芽孢的细菌或⾮病原微⽣物。
脓肿分枝杆菌复合群药敏试验及耐药机制研究进展
脓肿分枝杆菌复合群药敏试验及耐药机制研究进展郭明日，朱彧△，孙海柏摘要：脓肿分枝杆菌复合群是非结核分枝杆菌病中最常见的快速生长型分枝杆菌之一，对大多数抗结核药物耐药，临床治疗难度大。
脓肿分枝杆菌复合群的3个亚种对多种抗生素的敏感性存在较大差异，临床实验室对其3个亚种的准确分型鉴定对于治疗药物的选择有重要价值。
中华医学会结核病学分会制定了非结核分枝杆菌病诊断与治疗指南（2020版），按照美国临床和实验室标准协会（CLSI ）分枝杆菌药敏试验标准（2018版）进行脓肿分枝杆菌药敏试验，建议根据药敏试验结果选用多药联合治疗方案。
现就脓肿分枝杆菌复合群药敏试验及对主要治疗药物的耐药机制的研究进展进行综述。
关键词：非结核分枝杆菌；微生物敏感性试验；抗药性，细菌；抗菌药；脓肿分枝杆菌复合群中图分类号：R446.5文献标志码：ADOI ：10.11958/20211209Research progress on drug sensitivity test and drug resistance mechanism ofMycobacterium abscessus complexGUO Ming-ri,ZHU Yu △,SUN Hai-bai Department of Clinical Laboratory,Haihe Hospital,Tianjin University,China Key Research Laboratory for Infectious DiseasePrevention for State Administration of Traditional Chinese Medicine,Tianjin 300350,China△ReviserE-mail:***************Abstract:Mycobacterium abscessus complex (MABC)is one of the most common fast-growing mycobacteria innontuberculosis mycobacterial diseases.Drug resistance to most of the antituberculosis drugs makes its clinical teratment very difficult.There are great differences in the sensitivity of the three subspecies of MABC to a variety of antibiotics.The accurate typing and identification of the three subspecies in clinical laboratory is of great value for the selection of therapeutic drugs.The tuberculosis branch of Chinese Medicine Association has formulated the guideline for the diagnosisand treatment of nontuberculosis mycobacterial disease (2020Edition),MABC susceptibility test should be carried out according to the standard of mycobacterium susceptibility test from Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)of theUnited States (2018Edition).It is suggested that multidrug combination therapy should be selected according to the results of drug sensitivity test.In order to provide reference for related research,this paper reviewed the progress of drug sensitivitytest of MABC and its resistance mechanism to main therapeutic drugs.Key words:nontuberculous mycobacteria;microbial sensitivity tests;drug resistance,bacterial;anti-bacterial agents;Mycobacterium abscessus complex基金项目：2020年度天津市卫生健康科技项目（ZC20102）；天津市津南区科技局科技项目（201805003）作者单位：天津市海河医院、天津大学海河医院检验科；国家中医药管理局传染病重点研究室（邮编300350）作者简介：郭明日（1982），男，硕士，副主任检验师，主要从事病原菌分子耐药及鉴定方面研究。
阿米卡星脂质体的研制及体外抑菌试验
杆菌 、金葡菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度 。
结果表明 :阿米卡星脂质体的包封率较高 ,达到 61. 8 % ,阿米卡星脂质体对大肠杆菌 、链球菌 、
中 ,精密称取阿米卡星和 VC 适量溶于 10 mL p H 7. 2的 PBS 液中 ,两者混合 ,超声至形成稳定 W/ O 型 ,减压旋转 蒸发 ,达胶态后 ,滴加 30 mL PBS 液洗膜 ,继续减压旋转 蒸发除去残余有机溶剂 ,得阿米卡星脂质体。
计数法测定其生长浊度 ,然后将菌液稀释至 106～107个 / mL 备用 。 1. 2. 3. 2 最低抑菌浓度 (MIC) 和最小杀菌浓度 (MBC)
的测定 采用微量稀释法[4] 。阿米卡星脂质体和阿米卡
器厂) ,UV2754 分光光度计 (上海精密科学仪器有限公 星分别配制成浓度为 8. 76 g/ mL 和 16 g/ mL ,用微量可 司) ,H Y25 回旋震荡器 (常州华谱达科技有限公司) ,电 调移液器依次加入用培养基倍比稀释的药物溶液于经灭
and free AM K
菌株 St rains
阿米卡星脂质体 MBC/ (μg·mL - 1)
AM K liposome
游离阿米卡星 MBC/ (μg·mL - 1)
Free AM K
大肠杆菌
1. 10
4. 0
E. coli
链球菌
1. 10
4. 0
S t reptococcus
巴氏杆菌
4. 38
8. 0
文献标识码 :A
文章编号 :100725038 (2004) 0620097202
摘 要 : 为研究阿米卡星脂质体的体外抑菌效 菌 ,均购自湖南省微生物研究所 。
果 ,采用逆相蒸发法制备阿米卡星脂质体 ,利用 1. 2 方法
皮肤科用药及其他外用药处方药资料
皮肤科用药及其他外用药一、抗感染药红霉素软膏【制剂规格】软膏剂：10g【药动学】本品局部用药后很少吸收入血。
【适应症】寻常痤疮。
【用法用量】涂于患处，一日2次。
【不良反应】最常见的不良反应是局部烧灼感，也可有干燥、发痒、红斑，偶见荨麻疹样反应。
【禁忌症】对红霉素过敏者禁用。
【注意事项】请勿接触眼、鼻、口。
莫匹罗星[基]（百多邦）【制剂规格】软膏剂：5g【适应证】革兰氏阳性球菌引起的皮肤软组织的感染，如脓疱疮、疖、毛囊炎等原发性感染以及湿疹、皮炎、溃疡、外伤等皮肤病的继发感染。
【不良反应】偶见局部烧灼感、刺痛感及搔痒等，一般不需停药。
【用法用量】外用涂于患处，每日2～3次。
阿米卡星洗剂【制剂规格】洗剂：25ml：62.5mg【药理毒理】本品为半合成氨基糖苷类抗生素外用水溶液,对耐药菌株所产生氨基糖苷类钝化酶稳定。
用于耐药的铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠杆菌等引起的感染性疾病。
它能切断耐药菌的氨基酰化酶对药物的破坏作用,对临床耐药菌的有效率高,当喷涂于伤口局部时,可防止细菌感染,对于伤口无刺激。
在已感染的伤口,当细菌接触药物时,迅速被杀死,使伤口加速愈合。
本品对各种敏感菌引起的感染有效。
【适应症】用于敏感菌引起严重外伤感染。
【用法用量】外用。
喷涂于患处,一日2～3次或遵医嘱。
【注意事项】1.本品为外用药品,禁止内服。
2.请将药品放在儿童不能接触之处。
3.本品不应往耳内喷涂。
4.深部感染应注意清除创面脓块后使用。
阿昔洛韦软膏【制剂规格】软膏：10g【药理作用】本品为嘌呤核苷类抗病毒药。
其作用机制是干扰病毒DNA多聚酶而抑制病毒的复制，对单纯疱疹病毒、水痘带状疱疹病毒、巨细胞病毒等具有抑制作用。
【适应症】用于单纯疱疹或带状疱疹感染。
【用法用量】涂患处。
成人与小儿均为白天每2小时1次，一日6次，共7日。
【注意事项】1、本品仅用于皮肤黏膜，不能用于眼部。
2、涂药时应戴指套或手套。
3、对本品过敏者禁用。
4、涂布部位如有灼烧感、瘙痒、红肿等，应停止用药，洗净。
革兰氏阴性细菌外膜蛋白耐药功能及其抑菌策略研究进展
革兰氏阴性细菌外膜蛋白耐药功能及其抑菌策略研究进展李碗芯;孙莉娜;林向民【摘要】The emergence of bacterial resistance to drug use has posed serious problem worldwide. Generally, the drug resistance ca-pability of gram-negative bacteria is stronger than that of gram-positive, which is partially attributed to the antibiotics resistance of the outer membrane proteins ( OMPs) . It is well known that the specific OMPs efflux antibiotics out or inhibits uptakes of antibiot-ics, while the regulation mechanism remains uncertain. With the development of modern science and technology, especially the ap-plication of structure biology, molecular biology and proteomics, many progressive studies have unveiled the mechanisms underlying the antibiotic resistance of OMPs. This review focuses on the recent advances in the structure and antibiotic resistance mechanisms of OMP, which provides helpful insight into manufacture of new OMPs-targeting antimicrobial drug.%当前细菌耐药的形势日益严峻,已引起全世界的广泛关注.革兰氏阴性细菌的耐药性普遍比革兰氏阳性细菌强,这与镶嵌或锚定在革兰氏阴性细菌外膜上的蛋白耐药功能密切相关.目前已知外膜蛋白能够阻碍抗生素通过外膜以及将抗生素排出胞外等方式使细菌产生耐药性,但具体的耐药与调控机制还有待进一步研究.近年来,随着现代科学技术的不断发展,特别是结构生物学、分子生物学与蛋白质组学在该领域的充分运用,有关外膜蛋白功能的研究和技术取得了很大的进步.本文对近年来国内外在细菌外膜蛋白的结构与耐药机理、耐药新功能及新机制等方面的研究进展进行了概述,为揭示革兰氏阴性菌耐药形成机制奠定基础.【期刊名称】《福建农林大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(044)006【总页数】6页(P561-566)【关键词】外膜蛋白;耐药机制;药物主动转运系统;抑菌策略【作者】李碗芯;孙莉娜;林向民【作者单位】福建省农业生态过程与安全监控重点实验室,福建农林大学;福建省高校作物生态与分子生理学重点实验室,福建福州 350002;福建省农业生态过程与安全监控重点实验室,福建农林大学;福建省高校作物生态与分子生理学重点实验室,福建福州 350002;福建省农业生态过程与安全监控重点实验室,福建农林大学;福建省高校作物生态与分子生理学重点实验室,福建福州 350002【正文语种】中文【中图分类】Q93-3由于抗生素的误用与滥用 ,细菌的耐药性正逐渐成为制约世界卫生健康和经济发展的重要因素之一 ,这受到国内外研究学者的广泛关注.从1983年至1987年 ,美国食品药品监督管理局(Food and Drug Ad-ministration ,FDA)共批准16种抗生素上市 ,而1998年至2002年仅批准7种 ,2008年至2012年只批准了2种 ,抗生素的研发明显慢于耐药细菌产生的速度.2013年McKenna[1]报道 ,碳青霉烯类抗生素曾被认为是人类抵抗耐药菌的最后一道防线 ,但目前已在全世界范围内发现了针对此抗生素的超级耐药菌株.因此 ,细菌耐药机制的研究与新型药物作用靶点的筛选迫在眉睫 ,其已成为新型抗生素开发的重要研究领域 ,是当今科学研究的热点问题. 革兰氏阴性细菌的耐药性能普遍比革兰氏阳性细菌强 ,其中一个很重要的原因在于革兰氏阴性细菌多了一层外膜 ,外膜上的蛋白具有控制营养物质或如抗生素等小分子进出的功能 ,称之为外膜蛋白(outer membrane protein ,OMP).除了部分锚定在外膜内部或外部的脂蛋白以外 ,大部分外膜蛋白均由8－22个跨膜链 ,以反向平行方式通过相邻链间的氢键作用形成β-桶状结构(β-barrel).跨膜链的数量决定了外膜蛋白的拓扑结构 ,从而导致孔径的不同[2].如大肠埃希氏菌(Escherichia coli)的OmpA、OmpF、TolC和OmpW等蛋白的结构与功能具有代表性和特殊性.Nikaido et al[3]认为 ,外膜蛋白可以通过启动细菌主动药物转运系统(efflux pump systems)和改变细胞外膜的通透性而诱导细菌耐药特性的形成.1.1 细菌主动药物转运系统主动药物转运系统又称外排(efflux) ,可以通过外膜蛋白与周质空间蛋白和内膜蛋白组成的复合物系统 ,将抗菌药物泵出细胞外.在目前已知的与抗生素抗性有关的外膜蛋白中 ,TolC是一个广泛报道的参与外排广谱性抗生素药物的多功能外膜蛋白.1996年Nikaido[4]和Fralick[5]几乎同时发现TolC与周质空间蛋白ArcA和内膜蛋白ArcB形成的复合物具有重要的多重药物外排功能；随后在产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、猪布鲁氏杆菌(Brucella suis)等革兰氏阴性细菌中相继发现 ,TolC的同源蛋白也具有外排抗生素的功能[6－7],形成如铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的MexA-MexB-OprM和MexC-MexD-OprJ、副溶血性弧菌(Vibrio Parahemolyticus)的VmeA-VmeB-TolC等复合物 ,统称为多重耐药外排系统[8].结构生物学研究显示 ,TolC可形成特殊的三聚体结构 ,3个亚基在外膜处由12条β折叠链共同组成一个β-桶状结构 ,并在周质空间处由12个α-螺旋形成内空的通道[9].TolC长桶状的结构使其容易在Ar-cA的协助下与AcrB结合 ,形成连接细胞内外物质运输的特殊通道 ,在质子动力势的作用下将抗生素排出胞外[10－11].此外 ,TolC可以与主要易化子(major facilitator superfamily ,MFS)家族和ABC超家族(ATP bind-ing casssette superfamily)相互作用.目前已知的与抗生素抗性相关的大肠埃希氏菌外膜蛋白复合物 ,大部分与TolC相关 ,包括AcrAB、AcrAD、AcrEF、MdtEF、MdtABC和MacAB等系统[5 ,12－14],可以外排如疏水性溶剂以及β-内酰胺类、萘啶酮酸和氨基糖苷类等多种抗生素.由于TolC蛋白在细菌耐药中的重要作用 ,缺失tolC基因的菌株对广谱性抗生素的敏感性显著下降[15]. 1.2 改变细胞外膜的通透性从20世纪90年代至今 ,研究人员从蛋白的结构、功能以及基因组序列预测等方面对涉及泵外排系统的外膜蛋白进行了系统的研究 ,并取得重大进展.但多数研究集中在外膜蛋白空间结构和孔径大小与抗生素的相互作用方面 ,有关这些蛋白的耐药功能与调控机制的研究并不多.研究比较透彻的涉及抗生素摄取的外膜蛋白为OmpC 和OmpF超家族 ,这是大肠埃希氏菌细胞外膜上的2个主要孔道蛋白 ,对一定大小的亲水性小分子物质具有非特异通道的属性.这2个蛋白具有很高的同源性 ,结构和功能也相似.但是通过对多种不同分子大小的有机分子的渗透率的研究发现 ,OmpF 的孔道半径比OmpC至少大6倍 ,使得β-内酰胺类抗生素、胆酸等有毒物质更易从OmpF的通道通过；而OmpC可以允许分子质量小于600 u的亲水性溶质或离子通过[16].这2个外膜蛋白对不同抗生素有不同的敏感性 ,ompF基因缺失可显著增强菌株对氟诺沙星、四环素、头孢菌素、先锋霉素、氨苄青霉素和头孢西丁的耐药性 ,轻微提高对氯霉素的耐药性；ompC缺失则可增强菌株对头孢菌素和头孢西丁的耐药性 ,而对氟诺沙星、氯霉素和四环素不敏感[17－18].但是 ,OmpC与OmpF并不仅是简单的抗生素通道 ,细菌还可以根据外界环境的变化 ,调节其表达以维持外膜通透性的动态平衡.例如 ,在高渗透压或高温环境下 ,OmpC表达升高 ,而OmpF表达降低 ,从而减少分子质量相对大的溶质分子进入细胞[19].深入研究发现 ,这一对外膜蛋白受细菌双调节系统(two-component regulatory sys-tem ,TCS)OmpR/EnvZ和CpxR/CpxA的综合调控.Lin et al[20]发现 ,这2对双调节系统在金霉素和萘啶酮酸抗生素刺激下 ,OmpC和OmpF的表达呈现不同的调节模式.其中 ,在金霉素作用下 ,双调节系统综合调控导致OmpC和OmpF的表达均降低；在萘啶酮酸作用下 ,OmpC表达明显升高 ,而OmpF表达降低.除了OmpC和OmpF家族蛋白 ,还有一些外膜蛋白参与了细菌对抗生素摄入的控制 ,如结核杆菌(My-cobacterium tuberculosis)的CpnT以及铜绿假单胞菌的OprD等 ,但在这些方面的研究相对较少[21－22].1.3 新耐药相关外膜蛋白的发现细菌外膜蛋白可以通过增加抗生素的外排和减少抗生素的进入使细菌产生耐药特性 ,但有关外膜耐药蛋白的种类、功能和特点还需要深入系统的研究.以大肠埃希氏菌为例 ,外膜蛋白的基因注释至少有82个 ,而目前报道具有耐药功能的却不多 ,这与有些外膜蛋白属于低丰度蛋白或只在特定条件下表达等因素有关；此外 ,抗生素的不同抑菌机制也对研究造成了一定难度.运用定量蛋白质组学技术研究细菌耐药机制 ,使大规模寻找抗生素作用靶点和耐药功能蛋白成为可能.我国学者利用基于2DE的外膜蛋白亚蛋白质组学技术对耐不同抗生素细菌的外膜蛋白功能进行了系统的研究,发现在大肠埃希氏菌中,除了TolC、YhiU、OmpC和OmpF等常见耐药功能蛋白以外 ,FimD、OmpT、Tsx、YfiO、OmpW、LamB、NlpB和FadL等多个外膜蛋白也与钠啶酮酸、链霉素、金霉素、氨苄青霉素和四环素的耐药性相关[23－25].Peng et al[26]对抗氨苄青霉素、卡那霉素和四环素的铜绿假单胞菌外膜蛋白组分进行比较 ,发现了11个耐药相关外膜蛋白 ,其中10个外膜蛋白为以往报道.此外 ,国内外学者还运用蛋白质组学方法鉴定了如溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的OmpU、OmpN、VPA1644和VPA0526 ,鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)的OmpA、CarO和OmpW等耐药相关外膜蛋白[27－28].1.4 外膜蛋白的其他耐药功能外膜及外膜蛋白常常被形容为进出革兰氏阴性细菌的一扇“门” ,通过进入和外排系统使细菌产生耐药性.然而 ,近年来学者们发现外膜蛋白还可能存在其他的耐药途径.Lin et al[23]对外膜蛋白LamB的耐药功能进行了深入研究 ,发现大肠埃希氏菌的外膜蛋白LamB在耐药菌株中的表达普遍下调 ,缺失lamB导致金霉素在细胞内积聚 ,菌株耐药性升高4倍以上 ,其补救菌株可恢复到野生菌株的耐药能力.报道显示 ,LamB除了是抗生素的非特异通道外 ,还可能介导一个重要的负调耐药机制 ,该蛋白有可能与其他蛋白相互作用而行使耐药功能.Lin et al[29]通过免疫共沉淀及免疫印迹方法 ,成功发现了一个LamB的复合物蛋白Odp1.该蛋白是丙酮酸脱氢酶复合体E1的组成部分 ,在调控糖酵解、TCA循环以及ATP生成等体内重要生化代谢途径中起限速酶的作用.在利用iTRAQ定量标记研究大肠埃希菌应对金霉素以及嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)应对土霉素应激时,也发现LamB相关蛋白、Odp1以及能量生成相关基因表达下降的现象 ,进一步证实LamB在耐药中的负调作用可能普遍存在于自然进化的耐药菌中 ,且具有多物种、多重耐药的特性[30－31].前人研究结果说明LamB是细菌体内的耐药关键蛋白.其与Odp1相互作用 ,很可能通过限制糖类进入细胞并参与能量代谢效应的负调控 ,降低细菌体内的能量代谢与NADH浓度 ,最终导致细菌耐药.综上所述 ,外膜蛋白除了改变细胞外膜的通透性和启动主动药物转运系统以外 ,还可能有很多新的耐药功能等待探索.由于抑制TolC、OmpC及OmpF等外膜蛋白耐药作用的新药物不断出现 ,人们一度认为抗生素耐药的问题已得到解决 ,但事实并非如此.研究发现 ,即使是缺失tolC基因的菌株 ,在亚致死抗生素浓度下传代培养一定代数后 ,又可以迅速获得药物抗性.Li et al[25]对该现象进行了系统的分析 ,发现细菌在耐药过程中 ,并不只是几个外膜蛋白发生了变化 ,而是形成了蛋白相互作用的动态平衡网络 ,即当一个重要外膜蛋白被抑制后 ,细菌为了生存 ,将调节外膜上的其他蛋白表达 ,形成一个耐药相关外膜蛋白相互作用网络 ,最终导致细菌耐药.例如 ,在缺失tolC的大肠杆菌耐链霉素菌株中 ,OmpW和Dps表达升高 ,而OmpT和LamB表达下降；而在缺失lamB 的耐药菌株中 ,OmpW表达上升 ,FadL、OmpT和Dps表达均下降.由此表明 ,研究这些耐药相关外膜蛋白在不同抗生素中的变化方式、相互作用网络及其复杂的调控机制 ,对深入阐明细菌的耐药新机制具有重要意义.面对当前严峻的细菌耐药形势 ,旧抗生素和同类型抗生素已达不到抑菌的效果 ,人们亟需开发新型抑菌机制的药物.鉴于细菌外膜蛋白在耐药中的重要作用 ,近年来开发了以多种外膜蛋白为药物靶点的抗耐药菌药物.3.1 增强细菌外膜蛋白通透性的药物研究证实 ,许多药物在还未进入细菌内部就被细菌外膜蛋白通道挡在作用靶点之外 ,一些诸如多黏菌素、氨基糖苷类和大环内酯类的抗生素可以通过增加外膜蛋白的通透性达到抗菌作用.一些小分子物质也具有类似功能 ,如精胺可以抑制大肠杆菌OmpF的通道 ,尸胺通过抑制离子通道降低细菌对氨苄青霉素和头孢菌素Ⅱ的耐药性[32－33].3.2 抑制细菌外排泵功能的药物近年来发展了一系列抑制外排泵功能的药物.根据其作用机理分为以下几类. (1)干扰外排泵组装的抑制剂.外排泵系统一般由外膜、质膜和周质空间蛋白复合物组成.抑制外排泵上相关蛋白的合成或占据其功能位点,外排系统就无法行使其功能.例如 ,Globomycin可以抑制结核杆菌AcrAB-TolC中AcrA前体的形成 ,从而阻断了外排泵的功能[34].(2)阻断外排泵能量来源的抑制剂.除ABC型外排泵是依赖ATP水解驱动外 ,其余外排泵系统均是由质子动力势驱动 ,因此破坏质子动力势的来源可以使外排系统崩溃.羰基氰化氯苯腙(CCCP)可以破坏跨膜电化学梯度 ,是体外试验常用的强电子解偶联剂 ,对NepAB、EmrAB、MexAB、AcrAB以及SdeAB等复合物均有抑制作用[35－36].但是由于其副作用较强 ,临床上选用与其作用机制相同且毒性较小的奥美拉唑(omeprazole)和兰索拉唑(lansoprazole)为质子泵抑制剂[37].(3)直接抑制或竞争外排泵系统的抑制剂.苯丙氨酸－精氨酸－β－萘酰胺(PAβN)是常见的广谱性外排泵抑制剂 ,其可以与抗生素竞争RND家族外排泵 ,使抗生素集聚在细胞内 ,达到杀菌效果.此类抑制剂还包括抑制铜绿假单胞菌AcrB和MexB的MC-207、110及其衍生物 ,以及抑制产气肠杆菌等细菌AcrAB的喹啉衍生物等[38－39].(4)抑制药物特异外排泵的药物.Tet泵是由质粒编码,表达在细菌膜上的特异外排泵.研究发现 ,13-CPTC是米诺环素衍生物 ,可以与四环素竞争结合Tet外排泵 ,并堵塞该泵 ,从而提高四环素在胞内的浓度[40].(5)特异性抗体抑制外排泵的药物.如上所述 ,革兰氏阴性细菌的外膜蛋白是细菌多重耐药系统的重要组成部分 ,如果以该蛋白作为靶点 ,利用特异性抗体与靶点的结合 ,可对耐药细菌起到明显的抑制作用. Li et al[25]研究发现 ,当TolC抗体靶向耐链霉素或氯霉素的大肠埃希菌外膜TolC后 ,明显提高了细菌对抗生素的敏感性 ,与缺失该蛋白的表现结果相似.以上研究说明 ,特异外膜蛋白靶点的抗体配合低浓度抗生素可以有效抑制耐药菌 ,是一种潜在的抑菌药物 ,具有广阔的应用前景.(6)适配体靶向抑制药物.适配体(aptamer)是人工合成的一段随机DNA、RNA或肽 ,其在足够长的序列下 ,理论上可以形成任何三维结构.因此 ,经过几次筛选后 ,可以找到与靶点特异性结合的核酸或肽段序列.相比抗体 ,适体技术可以高效、大规模筛选和生产特异靶点序列 ,且这些分子更容易进入细胞 ,药效更稳定持久.该技术已被应用于新型抑菌药物的开发、特异配体序列的寻找以及生物大分子结构与功能研究等多个领域[41].例如 ,Li et al[42]设计了与致病大肠杆菌K88 pili特异结合的DNA适配体 ,使病原菌鞭毛蛋白无法结合到宿主表面的受体 ,进而不能入侵宿主 ,并且已经在体外取得显著效果.此外 ,陈伶利等[43]利用适配体技术筛选出23个与TolC特异结合的DNA序列 ,可作为外排泵的抑制剂.3.3 新型抑菌策略根据外膜蛋白是多种必需营养物质进出通道的特性 ,可将抗生素与细菌生存必需物质偶联,“骗”过外膜屏障到达细胞内 ,从而增加胞内抗生素浓度 ,该新型抑菌策略称为“特洛伊木马”策略.例如 ,铁离子是细菌生命活动必需的金属元素 ,革兰氏阴性细菌只能靠从外界环境摄取可以螯合铁离子的铁载体 ,并通过外膜蛋白特异通道运输到细胞内.含铁蛋白缺乏会导致细菌死亡 ,细菌很难进化出阻挡该类物质进入胞内的机制.事实上 ,这种方法早已在自然界中存在 ,一些细菌可以分泌与铁离子螯合物共价结合的抗生素 ,通过特异外膜蛋白通道进入胞内从而起到杀菌作用 ,如白霉素等[44].根据此原理 ,科研人员将抗生素或纳米杀菌材料与铁载体人工偶联在一起 ,研发出高效新型抗生素 ,这将是今后该领域发展的一个重要方向[45].综上所述 ,由于全球细菌耐药的形势日益严峻 ,了解细菌耐药与调控新机制 ,设计药物新靶点和抑菌新策略 ,已成为当前科学研究的热点问题.现有研究发现 ,革兰氏阴性细菌的外膜蛋白具有重要的耐药功能.外膜蛋白可以通过控制外膜通道孔径大小限制抗生素进入细胞 ,还可以通过单体或复合物的方式形成外排系统将已进入胞内的抗生素泵出细胞外 ,前者的典型代表为OmpC和OmpF家族 ,后者有TolC家族及其复合物TolC-AcrAB.但是 ,很多外膜蛋白的耐药功能及其调控机制还有待进一步研究.目前 ,通过高通量的组学技术发现了更多的耐药相关差异蛋白及其调控机制 ,但这些蛋白是否具有耐药功能 ,还需要进一步验证.因此 ,分子生物学技术与多“组学”方法结合 ,特别是代谢组学的发展 ,将是今后细菌耐药机制研究的重要方向.此外 ,外膜蛋白介导的其他耐药新机制以及耐药导致外膜蛋白形成差异表达平衡调控网络的发现 ,使有关细菌耐药的内在机理更加清晰 ,这揭示今后的耐药治疗更倾向于多种药物的协同作用[46].现有的外膜蛋白耐药理论知识 ,为新型抗耐药菌药物的研发奠定了基础.目前已研发出各种抑制耐药外排系统和增加外膜通透性的药物；但是 ,该领域的研究还面临诸多问题 ,如药物的理化性质、溶解性、特异性 ,特别是对哺乳细胞的毒性问题 ,都未得到很好的解决 ,因此多数药物仍然处于科学研究阶段 ,无法用于临床[47].总之 ,细菌耐药过程是一个复杂的生物学过程 ,细菌采取进化突变的策略快速产生耐药性 ,但还有很多耐药机制和复杂调控网络有待进一步研究.【相关文献】[1]MCKENNA M.Antibiotic resistance:the last resort[J].Nature ,2013 ,499:394－396.[2]SOLOVEVA T F,NOVIKOVA O D,PORTNYAGINA O Y.Biogenesis of beta-barrel integral proteins of bacterial outer mem-brane[J].Biochemistry Biokhimiia ,2012 ,77(11):1221－1236.[3]NIKAIDO H,PAGES J M.Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of Gram-negative bacteria[J]. FEMS Microbiology Reviews,2012,36(2):340－363.[4]NIKAIDO H.Multidrug efflux pumps of gram-negative bacteria[J].Journal of Bacteriology,1996,178(20):5853－5859.[5]FRALICK J A.Evidence that TolC is required for functioning of the Mar/AcrAB efflux pump of Escherichia coli[J].Journal of Bacteriology,1996,178(19):5803－5805.[6]GHISALBERTI D,MASI M,PAGES J M,et al.Chloramphenicol and expression of multidrug efflux pump in Enterobacter aerogenes[J].Biochemical and Biophysical Research Communications,2005,328(4):1113－1118.[7]POSADAS D M,MARTIN F A,SABIO Y,et al.The TolC homologue of Brucella suis is involved in resistance to antimicrobial compounds and virulence[J].Infection and Immunity,2007,75(1):379－389.[8]BLAIR J M,RICHMOND G E,PIDDOCK L J.Multidrug efflux pumps in Gram-negative bacteria and their role in antibiotic resistance[J].Future Microbiology,2014,9(10):1165－1177.[9]LIEUTAUD A,GUINOISEAU E,LORENZI V,et al.Inhibitors of antibiotic efflux by AcrAB-TolC in Enterobacteraerogenes [J].Anti-Infective Agents,2013,11(2):168－178.[10]ELKINS C A,NIKAIDO H.3D structure of AcrB:the archetypal multidrug efflux transporter of Escherichia coli likely captures substrates from periplasm[J].Drug Resistance Updates,2003,6(1):9－13.[11]OPPERMAN T J,KWASNY S M,KIM H S,et al.Characterization of a novel pyranopyridineinhibitor of the AcrAB efflux pump of Escherichia coli[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy ,2014 ,58(2):722－733.[12]KOBAYASHI N,NISHINO K,YAMAGUCHI A.Novel macrolide-specific ABC-type efflux transporter in Escherichia coli[J]. Journal of Bacteriology,2001,183(19):5639－5644. [13]NAQAKUBO S,NISHINO K,HIRATA T,et al.The putative response regulator BaeR stimulates multidrug resistance of Escherichia coli via a novel multidrug exporter system,MdtABC[J].Journal of Bacteriology,2002,184(15):4161－4167.[14]SAIER M H J,TAM R,REIZER A,et al.Two novel families of bacterial membrane proteins concerned with nodulation,cell division and transport[J].MolecularMicrobiology,1994,11(5):841－847.[15]ZHOU X,JIA F,LIU X,et al.Total alkaloids of Sophorea alopecuroides-induced down-regulation of AcrAB-TolC efflux pump reverses susceptibility to ciprofloxacin in clinical multidrug resistant Escherichia coli isolates[J].Phytother Research,2012,26(11):1637－1643.[16]VOSTRIKOVA O P,ISAEVA M P,LIKHATSKAYA G N,et al.OmpC-like porin from outer membrane of Yersinia enteroco-litica:molecular structure and functionalactivity[J].Biochemistry Biokhimiia,2013,78(5):496－504.[17]MORTIMER P G,PIDDOCK L J.The accumulation of five antibacterial agents in porin-deficient mutants of Escherichia coli [J].The Journal of AntimicrobialChemotherapy,1993,32(2):195－213.[18]MOYA-TORRES A,MULVEY M R,KUMAR A,et al.The lack of OmpF,but notOmpC,contributes to increased antibiotic resistance in Serratiamarcescens[J].Microbiology,2014,160(9):1882－1892.[19]HASEGAWA Y,YAMADA H,MIZUSHIMA S.Interactions of outer membrane proteins O-8 and O-9 with peptidoglycan sac-culus of Escherichia coli K-12[J].Journal of Biochemistry,1976,80:1401－1409.[20]LIN X,WANG C,GUO C,et al.Differential regulation of OmpC and OmpF by AtpB in Escherichia coli exposed to nalidixic acid and chlortetracycline[J].Journal of Proteomics,2012,75(18):5898－5910.[21]KHATUA B,VAN V J,CHOUDHURY B P,et al.Sialylation of outer membrane porin protein D:a mechanistic basis of anti-biotic uptake in Pseudomonasaeruginosa[J].Molecular＆Cellular Proteomics,2014,13(6):1412－1428.[22]DANILCHANKA O,PIRES D,ANES E,et al.The Mycobacterium tuberculosis outer membrane channel protein CpnT confers susceptibility to toxic molecules[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy,2015,59(4):2328－2336.[23]LIN X M,YANG J N,PENG X X,et al.A novel negative regulation mechanism of bacterial outer membrane proteins in re-sponse to antibiotic resistance[J].Journal of Proteome Research,2010,9(11):5952－5959.[24]LIN X M,LI H,WANG C,et al.Proteomic analysis of nalidixic acid resistance in Escherichia coli:identification and func-tional characterization of OM proteins[J].Journal of Proteome Research,2008,7(6):2399－2405.[25]LI H,LIN X M,WANG S Y,et al.Identification and antibody-therapeutic targeting of chloramphenicol-resistant outer mem-brane proteins in Escherichia coli[J].Journal of Proteome Research,2007,6(9):3628－3636.[26]PENG X,XU C,REN H,et al.Proteomic analysis of the sarcosine-insoluble outer membrane fraction of Pseudomonas aerugino-sa responding to ampicilin,kanamycin and tetracycline resistance[J].Journal of Proteome Research,2005,4(6):2257－2265.[27]XIONG X P,WANG C,YE M Z,et al.Differentially expressed outer membrane proteins of Vibrio alginolyticus in response to six types of antibiotics[J].MarineBiotechnology,2010,12(6):686－695.[28]YUN S H,CHOI C W,PARK S H,et al.Proteomic analysis of outer membrane proteins from Acinetobacter baumannii DU202 in tetracycline stress condition[J].Journal of Microbiology,2008,46(6):720－727.[29]LIN X M,YANG M J,LI H,et al.Decreased expression of LamB and Odp1 complex is crucial for antibiotic resistance in Escherichia coli[J].Journal of Proteomics,2014,98:244－253.[30]LIN X,KANG L,LI H,et al.Fluctuation of multiple metabolic pathways is required for Escherichia coli in response to chlor-tetracycline stress[J].Mol Biosyst,2014,10(4):901－908.[31]LIN X M,LIN L,YAO Z J,et al.An integrated quantitative and targeted proteomics reveals fitness mechanisms of Aeromonas hydrophila under oxytetracyclinestress[J].Journal of Proteome Research,2015,14(3):1515－1525.[32]BASLE A,DELCOUR A H.Effect of two polyamine toxins on the bacterial porinOmpF[J].Biochemical and Biophysical Re-search Communications,2001,285(2):550－554.[33]MANUEL J,ZHANEL G G,DE K T.Cadaverine suppresses persistence to carboxypenicillins in Pseudomonas aeruginosa PAO1[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy,2010,54(12):5173－5179.[34]GAVRISH E,SIT C S,CAO S,et ssomycin,a ribosomally synthesized cyclic peptide,kills Mycobacterium tuberculosis by targeting the ATP-dependent protease ClpC1P1P2[J].Chemistry Biology,2014,21(4):509－518.[35]HRICOVA K,KOLAR M.Bacterial efflux pumps-their role in antibiotic resistance and potential inhibitors[J].Klinicka Mik-robiologie a Infekcni Lekarstvi,2014,20(4):116－120. [36]LIU H,XIE parative genomics of Mycobacterium tuberculosis drug efflux pumps and their transcriptional regulators[J]. Critical Reviews in Eukaryotic Gene Expression,2014,24(2):163－180.[37]CASSIANO N M,OLIVEIRA R V,BERNASCONI G C,et al.Enantioselective disposition ofomeprazole,pantoprazole,and lansoprazole in a same Brazilian subjectsgroup[J].Chirality,2012,24(4):289－293.[38]VARGIU A V,RUGGERONE P,OPPERMAN T J,et al.Molecular mechanism of MBX2319 inhibition of Escherichia coli AcrB multi-drug efflux pump and comparison with other inhibitors[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy,2014,58(10):6224－6234.[39]MARCHETTI M L,ERRECALDE J,MESTORINO N.Effect of 1-(1-naphthylmethyl)-piperazine on antimicrobial agent susceptibility in multidrug-resistant isogenic and veterinary Escherichia coli field strains[J].Journal of Medical Microbiology,2012,61(6):786－792.[40]RAMIREZ M S,TRAGLIA G M,PEREZ J F,et al.White and blue light induce reduction in susceptibility to minocycline and tigecy-cline in Acinetobacter sp.and other bacteria of clinical importance[J].Journal of Medical Microbiology,2015,64(5):525－537.[41]OZALP V C,BILECEN K,KAVRUK M,et al.Antimicrobial aptamers for detection and inhibition of microbial pathogen growth[J].Future Microbiology,2013,8(3):387－401. [42]LI H,DING X,PENG Z,et al.Aptamer selection for the detection of Escherichia coliK88[J].Canadian Journal of Microbi-ology,2011,57(6):453－459.[43]陈伶利,李杰,张晓青,等.以大肠埃希菌tolC蛋白为靶标的适配体的筛选及结构分析[J].北京大学学报:医学版,2014,46(5):698－702.[44]WENCEWICZ T A,LONG T E,MOLLMANN U,et al.Trihydroxamate siderophore-fluoroquinolone conjugates are selective sideromycin antibiotics that target Staphylococcus aureus[J].Bioconjugate Chemistry,2013,24(3):473－486.[45]GORSKA A,SLODERBACH A,MARSZALL M P.Siderophore-drug complexes:potential medicinal applications of the‘Tro-jan horse’strategy[J].Trends in Pharmacological Sciences,2014,35(9):442－449.[46]GILL E E,FRANCO O L,HANCOCK R E.Antibiotic adjuvants:diverse strategies for controlling drug-resistant pathogens [J].Chemical Biology Drug Design,2015,85(1):56－78.[47]KUETE V,ALIBERT F S,EYONG K O,et al.Antibacterial activity of some natural products against bacteria expressing a multidrug-resistant phenotype[J].International Journal of Antimicrobial Agents,2011,37(2):156－161.。
莫匹罗星水凝胶缓释贴抗菌粘附性能测试与应用研究
莫匹罗星水凝胶缓释贴抗菌粘附性能测试与应用研究作者：李鹏程琴付晓莹来源：《粘接》2024年第02期doi：10.3969/j.issn.1001-5922.2024.02.011摘要：以氧化锌和莫匹罗星为原料，采用铸造和溶剂蒸发相结合的工艺，设计并制备了氧化锌/莫匹罗星（ZnO/SA）双层水凝胶缓释贴薄膜。
对双层水凝胶缓释贴薄膜的溶胀性、抗菌性能和体内伤口愈合能力进行了评价。
结果表明，制备ZnO/SA双层水凝胶缓释贴薄膜具有较高的透明度、适当的吸湿性、良好的溶胀性和良好的力学强度。
随着莫匹罗星含量的增加，ZnO/SA缓释贴膜的抑菌率呈逐渐增加的趋势，当莫匹罗星含量为0.04%时，ZnO/SA膜的抑菌率最高可达68.4%，且ZnO/SA双层水凝胶缓释贴薄膜具有较强的体内伤口愈合能力。
关键词：莫匹罗星；水凝胶；缓释贴；伤口愈合中图分类号：TQ427.2+5 文献标志码：A 文章编号：1001-5922（2024）02-0038-04Testing and application of antimicrobial adhesion properties of mupirocin hydrogel sustained-release patchesLI Peng1，CHENG Qin2，FU Xiaoying1（1.Cangzhou Medical College，Cangzhou 061000，Hebei China;2.Cangxian Hospital of Hebei Province，Cangzhou 061000，Hebei China）Abstract：Zinc oxide/mupirocin （ZnO/SA） double-layer hydrogel sustained-release film was designed and prepared using zinc oxide and mupirocin as raw materials in a combination of casting and solvent evaporation processes.The swelling properties，antibacterial properties and in vivo wound healing ability of the double-layer hydrogel sustained-release film were evaluated.The results showed that the ZnO/SA double-layer hydrogel sustained-release film had high transparency，appropriate hygroscopicity，good swelling and good mechanical strength.With the increase of mupirocin content，the antibacterial rate of ZnO/SA sustained release patch showed a gradual increasing trend，and when the content of mupirocin was 0.04%，the antibacterial rate of ZnO/SA film could reach up to 68.4%，and ZnO/SA double-layer hydrogel sustained-release film had a strong wound healing ability in vivo.Key words：mupirocin;hydrogel;slow release patch;wound healing为了实现大面积伤口愈合，已经开发了各种生物活性伤口缓释贴，其中，聚合物水凝胶因其类似于细胞外基质的软/湿特性而被广泛认可。
一例皮肤软组织感染合并中枢神经系统感染患者的抗菌药物使用分析
一例皮肤软组织感染合并中枢神经系统感染患者的抗菌药物使用分析一、案例背景知识简介皮肤软组织感染种类繁多，常见的化脓性感染主要有毛囊炎、疖、痈、急性蜂窝织炎、脓肿、丹毒、急性淋巴管炎，临床多表现为红肿、皮温增高、压痛、硬结、硬块或向心性蔓延的红痛条状物等。
轻者可能无须治疗，重者则可引起其他并发症甚至危及生命，需根据病情给予局部治疗并酌情选用针对性抗菌药物。
本案例拟通过1例皮肤软组织感染播散至中枢神经系统的病例，探讨抗菌药物在皮肤软组织感染中的应用指征、品种选择、疗程及血脑屏障和药物渗透性的关系、细菌性中枢神经系统感染的治疗和抗菌药物选择等相关问题。
二、病例内容简介患者，男性，70岁。
2011年2月8日无明显诱因出现左足踝部肿胀疼痛，发热，体温39℃，伴畏寒，无寒战，无咳嗽、咳痰、气短及呼吸困难，经抗感染治疗3天（具体药物不详），仍发热，左踝部肿胀、疼痛逐渐加重，先后给予中药，青霉素、头孢替安、甲硝唑等药物治疗及左踝部引流，期间左踝部肿胀、疼痛时有反复，伴间断发热，体温波动于38.5～39.8℃。
5月1日突然出现表情淡漠，神志不清，言语不畅，对答不切题，大小便失禁，行头颅磁共振提示异常改变，为进一步诊治于2011年5月8日收入院。
2010年12月行右侧腹股沟直疝修补术。
无家族遗传病及传染病史，否认药物、食物过敏史。
无吸烟、饮酒史。
入院查体：体温38.8℃，呼吸18次/分，脉搏100次/分，血压115/70mmHg，神志不清，对答不切题。
左踝关节局部红肿、皮温高，无搏动感。
局部纱布覆盖。
各表浅淋巴结不肿大，双肺呼吸音清晰，未闻及干湿性啰音。
心率100次/分，律齐。
辅助检查：左踝部CT（2011年4月2日）：左踝关节软组织肿胀，左踝关节骨质疏松，左内踝及距骨部分骨质吸收。
左踝关节组织病检（2011年4月12日）：炎性肉芽组织及出血坏死。
头颅MRI（2011年5月4日）：左额叶皮髓质交界区小结节状异常信号，右基底节下部脉络膜囊肿可能性大，左基底节区及双侧半卵圆中心腔隙灶。
氮化硼纳米膜可防止细菌和真菌感染
氮化硼纳米膜可防止细菌和真菌感染NUST MISIS材料科学家提出了基于氮化硼的抗菌纳米涂层，该涂层对微生物病原体非常有效(高达99.99%)。
由于它们没有典型的不良副作用，它们可以成为种植学中常用抗生素的安全替代品。
这项工作的结果颁发在国际科学杂志ACS Applied Materials&Interfaces上。
如今，由于全世界外科手术数量的显着增加，科学家们正在解决由植入物引起的微生物感染的问题。
这在整形外科和牙科手术中尤其严重。
众所周知，由于抗生素的特性以及高剂量，伴随药物治疗植入物周围的炎症通常会导致副作用。
来自NUST MISIS的一组年轻科学家通过研究抗药性革兰氏阴性细菌大肠杆菌(E.coli)与由结构化氮化硼表面组成的纳米膜之间的彼此作用，提出了一种非标准解决方案。
结果表白，这种涂层在24小时后使100%的细菌细胞失活。
“六角形硼氮化物具有复杂的独特的物理化学和机械性能的作为实验的结果，我们已发现，氮化硼纳米颗粒的特殊具体结构提供了杀菌效果比得上的抗生素：细菌死亡，结果直接与纳米膜的特殊针状表面物理接触。
同时，在人体组织上没有典型的抗生素副作用，并且氮化硼本身不会引起细胞毒性。
” Gudz，该研究的合著者，NUST MISIS无机纳米材料实验室的研究员。
研究人员走得更远，并用抗生素庆大霉素填充了氮化硼薄涂层的微孔。
结果是由于在短的初始时间内药物的完全释放而产生了抗菌作用。
并且，它的剂量比常规注射小一个数量级。
“考虑到患者的平均体重为60千克，他的每日抗生素剂量约为180毫克;前提是植入物的面积为30 cm 2，并且考虑到要研究的纳米涂层从中释放出55微克的抗生素，第一天，事实证明，所建议的方法所含抗生素比标准注射少100倍。
”克里斯蒂娜·古兹(Christina Gudz)补充说。
按照开发人员的说法，将基于氮化硼纳米粒子的抗菌膜应用于植入物可将由于表面本身的物理特性以及在进行抗生素修饰的情况下引起的细菌污染风险降至最低。