全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪
临床检验仪器第十四章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题
第十三章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪一、名词解释1.荧光标记引物法：将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5′端，称为荧光标记引物法。
2.荧光标记终止底物法：将荧光染料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上，称为荧光标记终止底物法。
3.多色荧光标记引物法：是DNA测序反应常用的一种荧光标记方法。
将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5′端，当相同碱基排列的寡核苷酸链作为骨架分别被4种荧光染料标记后，便形成了一组（4 种）标记引物。
特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系。
4.多色荧光标记终止底物法：是D NA 测序反应常用的一种荧光标记方法。
将荧光染料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上。
反应中将4种d dNTP 分别用4种不同的荧光染料标记，带有荧光基团的ddNTP 在掺入DNA 片段导致链延伸终止的同时，也使该片段3′端标上了一种特定的荧光染料。
根据荧光颜色的不同来判断所代表的不同碱基信息。
5.Edman降解法：是检测蛋白质一级结构的方法。
在弱碱条件下，多肽链N末端N H2与P ITC 反应，生成PTC－多肽。
在无水强酸如三氟醋酸的作用下，可使PTC－多肽形成ATZ 衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽。
剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环。
如此不断循环，可依次使多肽链的氨基酸逐一降解，形成A TZ 衍生物。
ATZ 衍生物经水溶酸处理转化为稳定的P TH 氨基酸。
6.Sanger 双脱氧链末端终止法：是检测D NA 序列的一种方法。
其原理是利用P CR，但反应体系中除了dNTP 外，还有ddNTP。
ddNTP 可掺入到正在延伸的DNA 链中，但不能同后续的dNTP 形成磷酸二酯键，从而使正在延伸的DNA 链在此终止。
由于存在ddNTP 与dNTP 的竞争，生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段。
7.平板电泳型DNA测序仪：为D NA 测序仪的一种类型。
平板型电泳的凝胶灌制在两块玻璃板中间，聚合后厚度一般小于 0.4mm 或更少，因此又称为超薄片层凝胶电泳。
全自动dna测序仪的原理和应用
全自动DNA测序仪的原理和应用1. 前言DNA测序技术是现代生物学、医学研究中的重要工具之一。
随着技术的不断进步，全自动DNA测序仪在DNA测序领域占据重要地位。
本文将介绍全自动DNA测序仪的原理和应用。
2. 原理全自动DNA测序仪基于Sanger测序技术，通过离心分离、扩增和合成等步骤来获取DNA序列信息。
其原理主要包括以下几个步骤：2.1 模板制备全自动DNA测序仪需要将待测的DNA样品进行模板制备。
一般采用PCR（聚合酶链式反应）技术来扩增目标DNA片段，以增加其浓度和复制数目。
2.2 扩增产物净化PCR扩增产生的扩增产物中会包含引物和杂质，需要进行净化处理。
常用的方法是利用凝胶电泳分离扩增产物，并使用各类商业化学试剂盒进行提取和净化操作。
2.3 DNA片段测序将净化后的DNA片段进行测序。
全自动DNA测序仪采用Dye-termination测序方法，使用一系列特殊的引物，通过DNA链延伸过程中的不同颜色发光来标记每个碱基。
之后，仪器会通过激光扫描读取每个碱基的发光信号。
2.4 数据分析与测序结果全自动DNA测序仪会生成一系列的发光数据，这些数据需要进行分析和处理。
通常会使用相关软件进行碱基识别、序列拼接和测序结果的校正等步骤，从而获得准确的DNA序列信息。
3. 应用全自动DNA测序仪广泛应用于各个领域，例如：3.1 生物学研究在生物学研究中，全自动DNA测序仪可以用于基因组测序、转录组测序、蛋白质相互作用的研究等。
通过测序获得的DNA序列信息可以帮助研究者了解生物体的遗传信息、功能和相互关系。
3.2 医学领域在医学领域，全自动DNA测序仪可以用于诊断遗传性疾病、癌症等疾病的基因突变。
通过测序可以快速准确地分析患者的基因组信息，从而为临床医生提供准确的诊断和治疗方案。
3.3 农业和食品安全全自动DNA测序仪在农业和食品安全领域也有广泛的应用。
它可以用于鉴定转基因作物、检测食品中的基因改造成分、追溯食品来源，保证食品安全和品质。
化学仪器设备名称(中英文对照)
原子发射光谱仪Atomic Emission Spectrometer AES电感偶合等离子体发射光谱仪Inductive Coupled Plasma Emission Spectrometer ICP 直流等离子体发射光谱仪Direct Current Plasma Emission Spectrometer DCP紫外-可见光分光光度计UV-Visible Spectrophotometer UV-Vis微波等离子体光谱仪Microwave Inductive Plasma Emission Spectrometer MIP原子吸收光谱仪Atomic Absorption Spectroscopy AAS原子荧光光谱仪Atomic Fluorescence Spectroscopy AFS傅里叶变换红外光谱仪FT-IR Spectrometer FTIR傅里叶变换拉曼光谱仪FT-Raman Spectrometer FTIR-Raman气相色谱仪Gas Chromatograph GC高压/效液相色谱仪High Pressure/Performance Liquid Chromatography HPLC离子色谱仪Ion Chromatograph凝胶渗透色谱仪Gel Permeation Chromatograph GPC体积排阻色谱Size Exclusion Chromatograph SECX 射线荧光光谱仪X-Ray Fluorescence Spectrometer XRFX 射线衍射仪X-Ray Diffractomer XRD同位素X 荧光光谱仪Isotope X-Ray Fluorescence Spectrometer电子能谱仪Electron Energy Disperse Spectroscopy能谱仪Energy Disperse Spectroscopy EDS质谱仪Mass Spectrometer MSICP-质谱联用仪ICP-MS ICP-MS气相色谱-质谱联用仪GC-MS GC-MS液相色谱-质谱联用仪LC-MS LC-MS核磁共振波谱仪Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer NMR电子顺磁共振波谱仪Electron Paramagnetic Resonance Spectrometer ESR极谱仪Polarograph伏安仪V oltammerter自动滴定仪Automatic Titrator电导仪Conductivity MeterpH 计pH Meter水质分析仪Water Test Kits电泳仪Electrophoresis System表面科学Surface Science电子显微镜Electro Microscopy光学显微镜Optical Microscopy金相显微镜Metallurgical Microscopy扫描探针显微镜Scanning Probe Microscopy表面分析仪Surface Analyzer无损检测仪Instrument for Nondestructive Testing物性分析Physical Property Analysis热分析仪Thermal Analyzer粘度计Viscometer流变仪Rheometer粒度分析仪Particle Size Analyzer热物理性能测定仪Thermal Physical Property Tester电性能测定仪Electrical Property Tester光学性能测定仪Optical Property Tester机械性能测定仪Mechanical Property Tester燃烧性能测定仪Combustion Property Tester老化性能测定仪Aging Property Tester生物技术分析Biochemical analysisPCR 仪Instrument for Polymerase Chain Reaction PCRDNA 及蛋白质的测序和合成仪Sequencers and Synthesizers for DNA and Protein 传感器Sensors其他Other/Miscellaneous20 升不锈钢自动发酵罐20-litre stainless automatic fermentor300 升不锈钢自动发酵罐300-litre stainless automatic fermentor80 升不锈钢自动发酵罐80-litre stainless automatic fermentorDNA 测序仪DNA sequencerDV800 核酸/蛋白分析仪Nucleic acid protein analyzerPCR 操作台PCR chamberPX2 多用途PCR 仪Multi-purpose PCR equipmentRCCS-批量式旋转细胞培养系统Rotary cell culture system氨基酸分析仪Amino acid analyzer氨基酸自动分析仪Auto amino acid analyzer比浊仪Turbidity comparator不锈钢板式滤器Stainless steel filter超级潜水电泳仪submarine electrophoresis unit超滤器Ultra filter and 4 pieces of filtration垂直电泳系统vertical electrophoresis system超声波细胞破碎仪Ultrasonic Cell Disruption System成像检测系统Chemiluminescent detection system程序降温仪Programmable controlled rate cell freezing system垂直电泳装置Clamping frame and electrode assembly for vertical electrophoresis 粗纤维测定仪Equipment for Raw Fiber determination单杯药物溶出仪Single cup diffusion meter蛋白纯化交换柱盒Protein purification sample set蛋白纯化系统Protein Purification System蛋白核酸分析仪Protein nucleic acid spectrophotometer蛋白快速纯化工作站Protein purification apparatus等电聚焦电泳仪Protein isoelectric system等电聚焦双向电泳系统Isoelectric focal bidirection electrophoresis电化学工作站Electrochemical workstation电击转化仪Pulse cell transfection system电激转化仪Electroporation instruments电洗脱电泳槽Electro-eluter电细胞融合仪Cell electro fusion device电泳槽Electrophoresis cells电泳系统Electrophoresis system电泳系统2-D electrophoresis apparatus电泳仪electrophoresis System电转膜系统Mini transfer tank for electrophoresis动物细胞培养反应器Animal cell bioreactor多肽合成仪Peptide synthesis apparatus多用蛋白电泳仪Horizontal vertical electrophoresis多用途PCR 仪Multifunctional PCR二维图象分析仪Spectral bio image system发酵罐Fermentation system防震台High performance lab table for microscope干胶仪Gle dryer核酸提取仪Nucleic Acid isolation machine基因扩增仪PCR基因枪Particle delivery system (PDS)近红外成分分析仪Near-infrared content analyzer拉制仪Glass Microelectrode puller连续黏度计continuous流式CELL 分析仪Flow cytometer脉冲电泳槽Pulse field electrophoresis cell脉冲电泳仪Pulse field electrophoresis spectrometer毛细管电色谱仪Capillary Electropharesis Spectramete毛细管电泳分析仪Capillary electrophoresis apparatus毛细管电泳系统Capillary electrophoresis system毛细管电泳仪Capillary electrophoresis.酶标仪Micro plate spectrophotometer酶标仪Automatic microplate reader酶标仪Micro plate reader膜片钳系统Patch clamp system凝胶成相系统Gel imaging system凝胶染色系统Gle stainer system凝胶渗透色谱仪Gel permeation chromatograph抛光仪Microforge切片转移装置Section transfer system全波长扫描酶标仪Pan-wavelength micro plate reade全湿电转移装置Tank transfer unit全自动DNA 测序仪(配套软件) DNA sequencer 全自动DNA 遗传分析仪Genetic analyzer全自动氨基酸分析仪Automatic Amino acid analyzer全自动多功能化学发光分析系统Automatic multifunction chemiluminescent analysis system全自动多功能酶标仪Automatic microplate reader全自动发酵罐Automatic fermenter全自动固相萃取系统Automatic solid phaseextract system全自动菌落计数仪Colony Counter全自动凝胶成像分析系统Gel image analyzing system染色体自动识别分析测试系统Genetic workstation三升六联自动发酵罐3-litre hexa-automatic fermentor实时荧光定量PCR 系统Real-time Fluorescence实验常用电泳仪electrophoresis System视频导电仪Electroencephalograph数码凝胶成像分析系统Digital gel image analysis system双相电泳槽Protein 2-D electrophoresis双向电泳系统Isoelectric Focusing system双向电泳仪Double-direction electrophoresis spectrometer水平程序控制电极拉制器Horizontal programmed puller索式抽提仪Soxhlet extractor梯度PCR 仪Gradient thermal cycler(PCR)通用酶标仪Universal microplate reader微电极操纵器Pulse motor 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station for electric chemistry电化学分析系统（恒电位仪）Electrochemical Analysis System (potentiostat / galvanostat) 电动搅拌机Agitator电泳仪Electrophoresis电热恒温培养箱Electro- thermal incubator电热恒温鼓风干燥箱Electro- thermostatic blast oven电热鼓风干烘箱Lab Oven电感耦合等离子体发射光谱仪Simultaneous Inductively Coupled Plasma Atomic Emission Spectrometer(ICP—OES)石墨炉原子化器Graphite furnace atomizer光谱仪用灯Spectrum Instrument Lamp全功能型稳态瞬态荧光光谱仪Combined Time Resolved&Steady State Fluorescence Spectrometer全自动生化分析仪Automatic biochemical analyzer全自动免疫组化染色系统Autostainer Universal Staining System全自动界面张力仪Automatic tension apparatus全自动遗传分析系统（遗传分析系统）Automated Genetic Analysis System全自动酶标检测仪Auto ELISA detecter冰箱（无霜）Refrigerator (Frost Free)同步热分析仪Simultaneous Thermal Analysis扫描探针显微镜Scanning probe microscope红外干燥箱Infrared Oven红外分光光度计Infrares spectrophometer红外快速煤质分析仪Computer Ir Celerity coal Analysis Instrument自动双重纯水蒸馏器Automatical Double Pure Water Distillatory自动电位滴定仪Automatic Titrimeter自动血球计数仪automatic Blood Cell Counter血液生化分析仪blood biochemical analyzer行星式和膏机Material mixer低速大容量离心机Low Speed Large Capacity Centrifuge事件相关诱发电位仪Event related evoked potentials equipment事件相关诱发电位仪Event related evoked potentials equipment实验室用制冰机Ice Machine for Laboratory昆虫触角电位测量系统Insect tactile electromagnetic wave analyzer表面吸附仪Surface and aperture meter表面活性测定仪Exterior Live Determiner便携式脑电图机32ch Digital EEG System哈氏可磨性指数测定仪Milling Exponent Determiner差热热重同步分析仪TG/DTA meter恒温振荡培养器Thermostatic oscillation incubator荧光分光光度计Spectrofluorometer荧光分光光度计Fluorescence Spectrophotometer荧光光度计Fluorescence Photometer荧光酶标仪Microplate System原子吸收分光光度计Atomic Absorption Spectrometer火焰分光光度计Flame Emission Spectrophotometer核酸蛋白纯化系统Nucleic Acid Auto-purification System核酸提取仪6100 Nucleic Acid PrepStation真空干燥箱Vacuum Drying Apparatus机械真空泵Vacuum Pump真空磁悬浮熔炼炉Vacuum induction levitation melting furnace真空磁控溅射系统Vacuum evaporative sputtering machine胶质量指数测定仪Colloid Quality Exponent Determiner高效毛细管电泳仪High Efficiency Capillary Electrophoresis高速冷冻离心机high-speed refrigerated centrifuge(used for the laboratory)偏振赛曼原子吸收分光光度计Polarization Atomic Absorption Spectrophotometer超低有机物型超纯水机Ultrapure Water Machine二氧化碳培养箱CO2 INCUBATORS高速冷冻多功能离心机High speed refrigerated multifunction centrifuge吹扫气体发生器FT-IR Purge Gas Generator制冰机System ice model旋转蒸发器Rotary Evaporators傅立叶变换红外光谱仪FTIR spectrometer喷雾干燥机Spray Dryer循环水式多用真空泵Vacuum Pump with Circulated Water System智能灰熔点测试仪Intellectual Ash Melting Point Test Instrument智能液化硫测定仪Fludified Sulfur Determiner温冰箱Low temperature refrigerator焦炭反应性测定仪Coke Reaction Determiner紫外/可见/近红外分光光度计UV-Visible-NIR Spectrophotometer紫外分光光度计UV Spectrophotometer紫外可见分光光度计UV/VIS spectrophotometer紫外光栅分光光度计VIS Spectrophotometer超级恒温水浴Super ThermostaticWater-bath超声波细胞粉碎机Ultrasonic Cell Crusher超纯水系统Ultra Purified Water System超纯水系统Hyperpure water system超滤装置（含超滤膜）Ultrafilaer Instrument微孔板液闪发光计数仪Gradient Thermal Cycler微机控压密闭消解系统Microvave Digestion System微颗粒测定仪Micro particulate monitor数字图象分析系统Micro-image analysis system数字显示旋转蒸发仪（垂直冷凝）Digital rotary evaporators (vertical condenser)瑞士梅特勒电位滴定仪（全自动多管电位滴定仪）Potential Titrator (Flexible Dual Driver General Autotitrator)熔点仪Melting Point Apparatus磁力恒温搅拌器Stirring hot plate精密电子天平Precision electronic balance精密型便携式电导仪Conductivity Meter膜片钳微操纵器Patch-Clamp Micromanipulators膜片钳灌流系统Patch Clamp Bath Perfusion System酶标仪Microplate Reader酸度计pH Meter膳食纤维测定仪Dietary Fiber Determination System薄层色谱扫描分析仪Thin-layer chromatogram流动分析与过程分析Flow Analytical and Process Analytical Chemistry 气体分析Gas Analysis基本物理量测定Basic Physics样品处理Sample Handling金属/材料元素分析仪Metal/material elemental analysis环境成分分析仪CHN Analysis发酵罐Fermenter生物反应器Bio-reactor摇床Shaker离心机Centrifuge超声破碎仪Ultrasonic Cell Disruptor超低温冰箱Ultra-low Temperature Freezer恒温循环泵Constant Temperature Circulator超滤器Ultrahigh Purity Filter冻干机Freeze Drying Equipment部分收集器Fraction Collector氨基酸测序仪Protein Sequencer氨基酸组成分析仪Amino Acid Analyzer多肽合成仪Peptide synthesizerDNA 测序仪DNA SequencersDNA 合成仪DNA synthesizer紫外观察灯Ultraviolet Lamp分子杂交仪Hybridization OvenPCR 仪PCR Amplifier化学发光仪Chemiluminescence Apparatus紫外检测仪Ultraviolet Detector电泳Electrophoresis酶标仪Microplate Reader 或(ELIASA)CO2 培养箱CO2 Incubators倒置显微镜Inverted Microscope超净工作台Bechtop流式细胞仪Flow Cytometer微生物自动分析系统Automatic Analyzer for Microbes生化分析仪Biochemical Analyzer血气分析仪Blood-gas Analyzer电解质分析仪Electrolytic Analyzer尿液分析仪Urine Analyzer临床药物浓度仪Analyzer for Clinic Medicine Concentration血球计数器Hematocyte Counter菌落计数仪Colony counters恒温·干燥器/恒温恒湿器Drying Ovens/Humidity Chambers送风定温恒温器Forced Convection Constant Temperature Ovens惰性气体恒温器Inert Gas Ovens精密恒温器Precision Constant Temperature Ovens洁净恒温器Clean Ovens送风定温干燥器Forced Convection Constant Temperature Drying Ovens 空气幕送风定温恒温器Forced Convection Ovens With Air Curtain定温干燥箱Constant Temperature Drying Ovens角形真空定温干燥器Vacuum Drying Ovens恒温恒湿器Constant Temperature and Humidity Chambers流水线设备In-Line System for Underfill Adhesive and Encapsulation恒温培养器Constant Temperature Incubators---可程式低温培养器Low Temperature Program Type Incubators低温培养器Low Temperature Incubators低温稳定性培养器Low Temperature Stability Incubators培养器IncubatorsCO2 培养器CO2 Incubators振荡培养器Shaking Incubators冻结干燥器Freeze Dryers---冻结干燥器Freeze Dryers离心形冻结干燥器Centrifugal Freeze Dryers灭菌器Sterilizers---干热灭菌器Drying Sterilizers高压灭菌器Autoclaves Sterilizers低温等离子灭菌器Low Temperature Plasma Sterilizers环形燃烧管灭菌器Loop Cinerator纯水制造装置Water Purifiers---纯水制造装置Water Stills超纯水制造装置Ultra-pure Water Purifiers简易纯水制造装置Water Purifiers超纯水制造装置系统Ultra-pure Water Purifier System大容量纯水制造装置Water Purifiers System洗净器Washers---实验室玻璃器皿清洗机Laboratory Glassware Washers超声波清洗机Ultrasonic Cleaners大型超声波清洗机Aqueous Ultrasonic Cleaning Systems超声波试管清洗机Ultrasonic Pipet Washers超声波清洗机Ultrasonic Cleaners恒温液槽Constant Temperature Baths---投入式恒温装置Constant Temperature Devices油槽Oil Baths振荡式低温水槽Low Constant Temperature Shaking Baths深槽形恒温水槽Constant Temperature Water Baths粘度测定槽Kinematic Viscosity Baths液压式恒温水槽Constant Temperature Water Baths精密低温恒温水槽Precision Low Constant Temperature Water Baths低温恒温水槽Low Constant Temperature Water Baths试验管加热板Heating Blocks冷却液体循环器Cooling Liquid Circulators冷却水循环器Cooling Water Circulators便携式冷却器Immersion Cooler寒流捕获器Cooling Trap冷却水外部循环器Cooling Water Circulators试验槽Thoughs高温炉High Temperature Furnaces Heating Apparatus---马弗炉Muffle Furnaces超高温电气炉Ultra-High Temperature Electric Furnaces高温电气炉High Temperature Electric Furnaces真空气体置换炉Gas Replacement Vacuum Furnaces造粒干燥装置Granulating and Drying Apparatus for Wet Powder Body and Liquid--- 喷雾干燥器Spray Dryer有机溶剂喷雾干燥器Spray Dryer生产线喷雾干燥器Spray Dryer for Product Line浓缩器Evaporators---旋转蒸发仪Rotary Evaporators溶媒回收装置Solvent Recovery Unit乳化·搅拌·振荡器Homogenizers, Stirrers, Shakers---磁力搅拌器Magnetic Stirrers加热板Hot Plates振荡器Shakers送液·减压·加压装置Aspirators, Pumps, Compressors搅拌器Stirrers实验室自动乳钵Laboratory Mill/Universal Ball Mill粉碎器Cutting Mills生命科学关连仪器Life-Science Related Instruments生物技术关连仪器·食品分析仪器Bio-Technology Related Instruments, Food Analysises Instruments—形态观察分析系统Mapping Analyzer生物分子间相互作用分析系统Biomioleculer Interaction Analysis System高速液相色谱仪LC-CE/CEC System血管壁细胞混合培养系统Dynamic Coculture System动植物破碎机基因检查仪器Genopattern AnalyzerATP 测定器ATP Measuring Instrument分光光度计Microplate Spectrophotometer细胞培养·发酵用自动分析系统Automated Chemistry Analyzer for Monitoring Cell Cultureand Fermentation Processes细胞生死判别系统Cell Vital Analyzer细胞计数分析装置Cell Scaler/Analyzer2 元电泳仪荧光Spot Cutter高速冷却离心机High Speed Refrigerated,Centrifuges微量高速离心机High Speed micro-Centrifuges液体中微生物简单测试仪Simple Germ Test Kit “simple Tester”试料混合器Blender防爆冷藏柜Explosion proof Freezer and Refrigerator杀菌水生成系统Sterilization Water Production Device膜式脱气装置Filter-type Air Extractor抗酸化机能水制造装置Acid-Resistant Water Purifier高性能净水器反渗透式高性能净水器分析仪器Analytical Instruments---分光光度计Spectrophotometer元素分析装置Atomic Absorption SpectrophotometerICP 发光分光分析ICP Atomic Emission SpectrophotometerX 线光分析计X-Ray Fluorescence Analysis气体分析计Gas Analyzers回折/散乱式粒度分布测定装置Analyzer,Particle Size Distribution Laser Diffraction Device低真空走查电子显微镜Scanning Probe Micro Scope高速液相色谱仪Liquid Chromatograph滴定装置Automatic Titration大塚电子制品电位计膜厚计散乱光光度计LCD 测定·评价装置热量计天平Balances物性试验·测定器Physical Properties Measuring Apparatus, Testing, and Measuring Apparatus---近红外分析装置Fourier Transform Near Infrared Spectrometer融点测定仪Melting Point Measuring Instrument热分析系统Thermo System自动反应装置Automatic Reactor水分计Moisture Analyzer引张压缩试验机Tester,Tension and Compression数字粘度计Digital Viscometer振动式粘度计Vibro Viscometer浸透压测定装置Osmotic Pressure Meters超临界水酸化系统Small SCWO Systems重金属排液处理装置Heavy Metal Eliminator简易水质检查试验纸Water Quality Tester StripsPH 计Phmeter导电率计Conductivity Meters湿度计Hygrothermometers过滤器Filter试验研究设备Laboratory Design and Engineering---通风柜Fume Hoods排风机Blowers实验台Laboratory Furniture保管柜Storage Cabinets实验台用附属器具Carts and Laboratory Table Attachments环境制御设施Research Facilities, Product Lines, Environment control Devices---生物安全柜Biohazard Safety Equipment废水处理系统Waste Water Treatment试验动物饲养室Bio Clean Room for Animal experiment环境实验设施Research Facilities, Product Lines, Environment Experiment Facilities--- 电磁波室隔音室恒温室/恒温恒湿室Constant Temperature and Humidity Facilities低温室Constant Low Temperature Facilities人工气候室Artificial Atmospheric Phenomena Simulator动物研究用高压蒸汽灭菌装置Sterilization Systems, for Animal Research。
临床医学检验：临床检验仪器真题
临床医学检验：临床检验仪器真题1、问答题常用的离心方法分几类？正确答案：常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。
2、问答题简述蛋白质测序仪的主要应用。
正确答案：蛋白质测序仪（江南博哥）获得的蛋白质序列信息主要应用在以下三个方面。
（1）新蛋白质的鉴定：在凝胶电泳中出现的未知条带可以利用蛋白质测序仪来测定其序列，为探索蛋白质的功能提供线索。
（2）分子克隆探针的设计：是蛋白质序列信息的基本用途之一。
用蛋白质序列信息设计PCR引物和寡核甘酸探针。
可以利用这些探针进行cDNA文库或基因组文库的筛选。
（3）抗原的人工多肽合成：由合成多肽免疫产生的抗体常用来证实和纯化新发现的蛋白质。
此外，合成的多肽类似物能够揭示蛋白质重要结构特征和提示蛋白质的功能特性。
3、问答题第三代自动血培养仪有哪些性能特点？正确答案：（1）培养基营养丰富；（2）以连续、恒温、振荡方式培养，细菌易于生长；（3）培养瓶多采用不易碎材料制成，提高了使用的安全性；（4）采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式，避免标本交叉感染，且无放射性污染；（5）自动连续监测，缩短了检测时间，阳性标本检测可快速、准确；（6）结果报告及时，85%以上的阳性标本能在48小时内被检出；（7）培养瓶多采用双条形码技术，只需用电脑上的条码阅读器扫描报告单上的条码，就可直接查询到病人的结果及生长曲线；（8）培养瓶可随时放入培养系统，并进行追踪检测；（9）数据处理功能较强，数据管理系统随时监测感应器的读数，依据数据的变化来判定标本的阳性或阴性，并可进行流行病学的统计分析；（10）设有内部质控系统，可保证仪器的正常运转；（11）可进行血液及所有无菌体液的细菌培养检测。
4、单选库尔特原理中血细胞的电阻与电解质溶液电阻的关系是OoA.相等B.大于C.小于D.大于或等于E.小于或等于正确答案：B5、问答题电泳技术根据分离原理如何分类？正确答案：根据分离原理可分为移界电泳、区带电泳、等速电泳、等电聚焦、免疫电泳等。
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分子生物学实验室简介
分子生物学实验室简介分子生物学实验室是一个专门从事分子生物学研究的实验室，致力于通过对生物分子的研究，揭示生命现象的本质和机制。
分子生物学实验室通常配备了一系列先进的仪器设备和技术，为研究人员提供了一个理想的工作环境，推动了分子生物学领域的发展。
本文将介绍分子生物学实验室的设备和研究内容，并讨论其在科学研究和医学领域中的重要性。
一、实验室设备1. 基础设施分子生物学实验室通常拥有一系列基础设施，包括干净的实验台和工作台、恒温培养箱、高速离心机、特定生物样本的防护罩等。
这些设备为研究人员的实验提供了一个严谨和稳定的工作环境，保证了实验结果的可靠性。
2. 分子生物学实验仪器分子生物学实验室还配备了一系列先进的分子生物学实验仪器，如PCR仪、DNA测序仪、蛋白质电泳仪、核酸纯化仪等。
这些仪器利用生物样本中的DNA、RNA和蛋白质等分子，进行分析和研究。
它们的使用使得研究人员能够更准确地描述生物分子的结构和功能，为研究提供了强有力的实验手段。
二、研究内容1. 基因研究分子生物学实验室主要进行基因研究，该领域关注基因是如何操控生物体的生长、发育和功能的。
实验室通过克隆、表达和纯化特定基因，研究基因的结构、功能和调控机制。
此外，还利用基因工程技术对基因进行改造，探索基因在疾病治疗、农业生产和生物工程等方面的应用潜力。
2. 蛋白质研究蛋白质是生物体内执行各种生物学功能的重要分子。
分子生物学实验室通过对蛋白质的表达、纯化和结构分析，研究蛋白质的结构和功能。
实验室还利用蛋白质工程技术，对蛋白质进行改造，寻找新的生物学功能和药物设计的靶点。
3. DNA和RNA研究DNA和RNA是生物体内遗传信息的携带者，也是分子生物学研究的关键对象。
实验室通过DNA和RNA的提取、放大、测序和基因组分析等技术手段，深入研究基因组、转录组和蛋白质组的结构和功能。
这些研究对于理解遗传信息的传递和转录调控机制非常重要。
三、重要性1. 科学研究分子生物学实验室是推动科学研究的关键力量。
DNA测序仪的测序原理和操作规程
DNA测序仪的测序原理和操作规程DNA测序仪DNA序列测定分手工测序和自动测序,手工测序包括sanger双脱氧链终止法和maxam-gilbert化学降解法。
自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。
美国pe abi 公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪,其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。
本实验介绍的是abi prism 310型DNA测序仪的测序原理和操作规程。
原理abi prism 310型基因分析仪(即DNA测序仪),采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,生成的pcr产物则是相差1个碱基的3''''末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物,使得四种荧光染料的测序pcr产物可在一根毛细管内电泳,从而避免了泳道间迁移率差异的影响,大大提高了测序的精确度。
由于分子大小不同,在毛细管电泳中的迁移率也不同,当其通过毛细管读数窗口段时,激光检测器窗口中的ccd(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测,激发的荧光经光栅分光,以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光,并在ccd摄影机上同步成像,分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列,从而达到DNA测序的目的。
分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。
它是一台能自动灌胶、自动进样、自动数据收集分析等全自动电脑控制的测定DNA片段的碱基顺序或大小和定量的高档精密仪器。
pe公司还提供凝胶高分子聚合物,包括DNA 测序胶(pop 6)和genescan胶(pop 4)。
这些凝胶颗粒孔径均一,避免了配胶条件不一致对测序精度的影响。
它主要由毛细管电泳装置、macintosh 电脑、彩色打印机和电泳等附件组成。
常用的五种基因测序仪器的比较
四、测序仪之——ROCH-454
SOLID的双碱基编码矩阵
两个碱基共同决定一 个颜色，可以极大的 提高测序的准确率
五轮测序反应反应后，按照第0、1位，第1、2 位... …的顺序把对应于模板序列的颜色信息连起来， 就得到由“0，1，2，3…”组成的SOLiD原始颜色序 列。
2. ABI SOLID的特性
• 无以伦比的通量 目前SOLiD 3系统单次运行能产生50 GB的人基因 组序列数据，相当于基因组的17倍覆盖度，这显 然是其他任一台新一代测序系统都无法达到的
测序仪器 3730XL
所采用测序技术
鸟枪Sanger测 序法 毛细管 电泳技术
校错方法
高通量
主要用于KB～MB 级别的测序
ABI SOLiD 微乳液PCR扩增 双碱基编码
连接酶法测序
技术
最高可达180 GB
优势方面
常规测序， 高准确度
第二代测 序仪中准 确度最高
Solexa GA
桥式PCR技术 合成测序法
加入DNA聚合酶和带有4种荧光标记的dNTP。 每个循环掺入单个碱基。用激光扫描反应板表 面，读取所聚合上去的核苷酸种类。之后，将 这些基团化学切割，恢复3′端粘性，继续聚合第 二个核苷酸。如此继续下去，直到每条模板序 列都完全被聚合为双链。这样，就可以得知每 个模板DNA片段的序列。
桥式PCR
2. Illumina GA的特性
上市时间
2002年 2007年 1月
2007年
2005年 2008年
2月
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第三代测序 以纳米孔单分子测序技术为 代表，无需要PCR
第一代测序 以化学降解法和末端终止法， 具有片段长，准确性高的优 点，代表公司ABI，贝克曼
第二代测序 目前应用广泛，通量高，代 表公司Illumina以及 Thermo Fisher
第一代测序
一、第一代测序技术
❖ 测序
Sanger双脱氧链末端终止法 Maxam-Gilber化学降解法 优点：操作简单、安全、快速、准确
一旦链入DNA中，其后就不能再继续连接
毛细管电泳 谁终止，碱基就是谁
PCR后产物的检测仪器 一种PCR技术
全自动DNA测序仪
五、荧光标记底物自动测序仪
❖ 平板型电泳的凝胶灌制在两块玻璃板中间，聚合后厚 度一般小于0.4mm或更少，因此又称为超薄片层凝胶 电泳
❖ 毛细管电泳技术将凝胶高分子聚合物灌制于毛细管中 （内径50m～100m），在高压及较低浓度胶的条 件下实现DNA片段的快速分离
主流
六、自动测序仪的结构
310 3130 3130xl 3500 3500xl 3730 3730xl
计算
主机
机
分1 析
4
16 8 24
48 96
软件
耗材
检测区
凝胶区块
Anode
Buffer(+)
自动进
(-)
样器
Pump assembly
计算机分析测序数据
CCD 相机记录所有通道信号
毛细管
电泳方向
5’
Cycle 1: 第一个碱基结合 检测光信息 切掉终止子和染料
Cycle 2-n: 循环 (Repeat)
3’ 5’
DNA (0.1-1.0 ug)
Library preparation
Cluster generation
AG C
A T
C G
A T CG
T
T G C
T A C G A
T A C C C G A
NGS
NGS
NGS
一、半导体测序法(Ion Torrent测序)
芯片上千万个DNA 片段同时 读取序列信息
检测流程
复杂的生物信息学分析
第二代测序之边合成边终止法
边合成边测序
3’ 5’
A
C GTCATG A
T
G
C
T G C T A C G A T A C C C G A T C G A T
高压电源
激光激发所有通道
七、自动测序仪的结果
八、毛细管电泳型DNA测序仪的常见故障及维护
电泳时仪器显示无电流
❖电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管 ❖电极弯曲而无法浸入缓冲液中 ❖毛细管未浸入缓冲液中 ❖毛细管内有气泡等 电极弯曲
❖安装、调整或清洗电极后未进行电极定标操作就直接执行电泳命令， 电极不能准确插入各管中
01 DNA测序仪及其应用 02 蛋白质测序及其应用
DNA测序的发展历程
DNA测序用于确定目标DNA上片断上的碱基排列顺序； DNA测序是分子生物学过程一项非常重要的内容，在疾病 诊断、基础研究的过程中起着非常重要的作用； 人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)完成后， 测序技术已经成为现代医学的基础。
❖ 电泳缓冲液配制不正确 ❖ 电极导线未接好或损坏 ❖ 正极或负极铂金丝断裂 ❖ 正极或负极的胶面未浸入缓冲液中
传热板粘住胶板
❖ 主要原因为上方的缓冲液室漏液
第二代测序之半导体测序法
Single Gene
Whole Genome
Whole Exome
Multi-Gene
Complexity
Sanger Sequencing
❖运行前未将样品盘归位、或虽然执行了归位操作，但X/Y轴归位尚未 结束就运行Z轴归位等
电泳时产生电弧
❖ 主要原因是电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积
其他
❖ 测序结束后应将毛细管负极端浸在蒸馏水中，避免凝 胶干燥而阻塞毛细管
❖ 定期清洗泵块 ❖ 定期更换电极缓冲液、洗涤液和废液管
电泳时仪器显示无电流
1
Lieration 生成DNA簇
3 Sequencing 测序
4 Data Analysis 数据分析
第三代测序-pacbio
https:///huangshujia/p/3233693.html
NH2
酯键 N
N
O
5'
N
9 N
HO P O CH2 OHH
O 2'H1'H
OH OH
腺苷酸
糖苷键
5’ O O O 3’ H
无3’ OH的ddNTP阻止下一个dNTP的掺入
5’
O 3’ OH
DNA模板
A 延伸/终止
变性 引物
退火
测序酶 dNTPs
AG TC
ddNTP
▪ ddNTP 被加到正在合成的链上，由于它的3’-OH已被氧化，下一个 dNTP的5’-磷酸基团不能与之形成磷酸二酯键，使合成终止
▪ 测序反应的延伸阶段，ddNTP在不同位置掺入产生一系列不同长度的 新的DNA片段
二、第一代测序技术检测方法
电泳法
1
放射自显影
2
荧光标记法
3
三、荧光标记测序法
三、荧光标记测序法
荧光染料 标记法
荧光标记引物法 单色荧光标记法
荧光标记终止底物法
多色荧光标记法 荧光标记引物法 荧光标记终止底物法
感染性疾病的分子诊断和研究 遗传性疾病的分子诊断和研究 恶性肿瘤的分子诊断和研究 在分子生物学其他领域的应用
四、荧光标记底物法测序法
DNA模板
A
延伸/终止
变性 引物
退火
测序酶 dNTPs
AG TC
荧光标记的ddNTP
确定一条染色体片断上的碱基顺序，是金标准。
Sanger法：
在PCR时加入荧光标记的复制终止剂，比如ddA,ddT,ddC,ddG（相 应于4种碱基）
ddX的两个作用：
可以当作正常碱基参与复制
DNA/蛋白质测序仪
• 45岁，女性，乳腺癌，双侧 • ER,PR阴性 • HER-2阴性
如何确定BRCA基因上的碱基排列？
• 确诊为HOBC • 对亲属进行相关的风险评估
C目录 ONTENTS
01 背景 02 DNA测序仪及其应用 03 蛋白质测序及其应用
static
dynamic
C目录 ONTENTS
T C G A
T
5’
Sequencing
123456 789
TGCTACGAT…
Image acquisition
Base calling
A
C
G
T
ASCII Character Q-score
Sequence
PF (0,1)
Read # Index # Y-coord X-coord
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