临床检验仪器第十四章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题
临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点
临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点1、问答题简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的主要用途。
正确答案：激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，使用（江南博哥）紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。
另外在其载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。
激光扫描共聚焦显微镜具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。
在医学领域主要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH值和其它离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。
2、名词解释电负性组分正确答案：即是具有亲负性离子的中性分子，或对电子具有较大亲和力易捕获电子的物质。
3、单选世界上最早的自动生化分析仪是（）。
A.分立式自动生化分析仪B.离心式自动生化分析仪C.干化学式自动生化分析仪D.袋式自动生化分析仪E.管道式自动生化分析仪正确答案：E4、问答题简述自动生化分析仪常用性能评价指标。
正确答案：自动生化分析仪常用性能评价指标有精密度、波长的准确性和线性、与其他仪器的相关性等。
精密度包括：批内重复性、总精密度以及与厂商估计的精密度或临床要求的精密度比较是否合格。
波长的准确性和线性应符合要求。
不同仪器系统的测定结果存在差别，为了取得一致的结果，有必要进行仪器之间的相关性校正。
5、单选多层化学涂层技术所用的干片中，生成一种可以定量且与待测物含量直接成比例的产物，这一反应进行是在（）。
A.支持层B.指示剂层C.试剂层D.扩散层荧光E.遮蔽或净化剂层正确答案：B6、问答题分析型超速离心机的工作原理是什么？正确答案：其工作原理与一个普通水平转子相同。
分析室有上下两个平面的石英窗，离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质，可以通过对紫外光的吸收（如对蛋白质和DNA.或折射率的不同对沉降物进行监测。
临床检验仪器第十四章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题
临床检验仪器第十四章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题第十三章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪一、名词解释1.荧光标记引物法：将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5′端，称为荧光标记引物法。
2.荧光标记终止底物法：将荧光染料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上，称为荧光标记终止底物法。
3.多色荧光标记引物法：是DNA测序反应常用的一种荧光标记方法。
将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5′端，当相同碱基排列的寡核苷酸链作为骨架分别被4种荧光染料标记后，便形成了一组（4 种）标记引物。
特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系。
4.多色荧光标记终止底物法：是D NA 测序反应常用的一种荧光标记方法。
将荧光染料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上。
反应中将4种d dNTP 分别用4种不同的荧光染料标记，带有荧光基团的ddNTP 在掺入DNA 片段导致链延伸终止的同时，也使该片段3′端标上了一种特定的荧光染料。
根据荧光颜色的不同来判断所代表的不同碱基信息。
5.Edman降解法：是检测蛋白质一级结构的方法。
在弱碱条件下，多肽链N末端N H2与P ITC 反应，生成PTC－多肽。
在无水强酸如三氟醋酸的作用下，可使PTC－多肽形成ATZ 衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽。
剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环。
如此不断循环，可依次使多肽链的氨基酸逐一降解，形成A TZ 衍生物。
ATZ 衍生物经水溶酸处理转化为稳定的P TH 氨基酸。
6.Sanger 双脱氧链末端终止法：是检测D NA 序列的一种方法。
其原理是利用P CR，但反应体系中除了dNTP 外，还有ddNTP。
ddNTP 可掺入到正在延伸的DNA 链中，但不能同后续的dNTP 形成磷酸二酯键，从而使正在延伸的DNA 链在此终止。
由于存在ddNTP 与dNTP 的竞争，生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段。
临床医学检验：临床检验仪器题库考点
临床医学检验：临床检验仪器题库考点1、多选快速血糖仪质控物测定的目的是OOA.检查血糖仪是否正常工作B.自动校准血糖仪C.血糖试纸有否失效D.消除背景干扰E.排除故障正确答案：A,C2、名词解（江南博哥）释生物传感器技术正确答案：利用离子选择电极，底物特异性电极，电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。
3、问答题简述双向凝胶电泳（二维电泳）的工作原理。
正确答案：第一维采用等电聚集电泳。
当把蛋白质加人到含有PH梯度的载体时，如果蛋白质所在位置的PH值与其等电点不同，则该蛋白质会带一定量的正电荷或负电荷，在外加强电场的作用下，蛋白分子就会分别向正极或负极泳动，直到PH值与其等电点相等的位置，蛋白质不再泳动，而浓缩成狭窄的区带。
第二维采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE.。
蛋白质的电泳迁移率取决于各种蛋白质所带的静电荷、分子量的大小以及形状的不同。
SDS-PAGE就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。
蛋白质样品经过双向凝胶电泳两次分离后，其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状。
4、单选生物安全等级4级（P4）的媒质是指OoA.普通无害细菌、病毒等微生物B.条件致病性细菌、病毒等微生物C.一般性可致病细菌、病毒等微生物D.烈性/致命细菌、病毒等微生物，但感染后可治愈E.烈性/致命细菌、病毒等微生物，感染后不可治愈正确答案：E5、多选自动生化分析仪的技术指标评价包括OoA.精密度B.准确度C.波长校正D.相关性E.线性检查正确答案：A,C,D,E6、多选血气分析仪的气路系统供气方式是OoA.外配气方式B.内配气方式C.蠕动泵供气方式D.真空泵供气方式E.压缩机供气正确答案：A,B7、单选外界空气需经高效空气过滤器过滤后才进入安全柜内，其主要目的是OOA.保护试验样品B.保护工作人员C.保护环境D.保护试验样品和环境E.保护工作人员和试验样品正确答案：A8、单选以空气为加热介质的PCR仪是OOA.金属板式实时定量PCR仪B.96孔板式实时定量PCR仪C.离心式实时定量PCR仪D.各孔独立控温的定量PCR仪E.荧光实时定量PCR仪正确答案：C9、填空题毛细管粘度计不适合检测Oo正确答案：全血10、单选紫外-可见分光光度计的工作原理主要依据（）。
dna自动测序基本原理概论试题及答案
dna自动测序基本原理概论试题及答案一、选择题1. DNA自动测序技术中，常用的测序方法是（）。
A. Sanger测序B. Maxam-Gilbert测序C. 质谱测序D. 所有选项答案：D2. 在Sanger测序法中，使用的终止核苷酸是（）。
A. dNTPsB. ddNTPsC. rNTPsD. aNTPs答案：B3. DNA测序中，用于标记DNA链的荧光染料通常附加在（）。
A. 引物B. 模板DNAC. 终止核苷酸D. 酶答案：C二、填空题1. DNA自动测序技术能够快速准确地测定DNA序列，其基本原理是通过使用带有不同荧光标记的终止核苷酸来确定DNA链的________。
答案：末端碱基2. 在自动测序过程中，DNA聚合酶在模板DNA上合成新的DNA链，当遇到终止核苷酸时，合成停止，此时的终止核苷酸对应的荧光标记会被________。
答案：检测三、简答题1. 简述Sanger测序法的测序原理。
答案：Sanger测序法的原理是利用DNA聚合酶在模板DNA上合成新的DNA链，同时使用四种不同荧光标记的终止核苷酸（ddNTPs），每种终止核苷酸对应一种碱基。
当DNA聚合酶遇到终止核苷酸时，合成停止，根据荧光标记的不同，可以确定该位置的碱基类型。
2. 在DNA测序中，为什么需要使用终止核苷酸？答案：使用终止核苷酸的目的是为了在DNA合成过程中，在特定的位置终止链的延伸，从而产生一系列长度不同的DNA片段。
这些片段的末端碱基由终止核苷酸决定，通过检测这些终止核苷酸的荧光标记，可以确定DNA序列。
四、论述题1. 论述DNA自动测序技术在生物医学研究中的应用。
答案：DNA自动测序技术在生物医学研究中有着广泛的应用。
首先，它可以用于基因组测序，帮助科学家了解生物体的遗传信息和基因结构。
其次，在疾病诊断和治疗方面，通过测序技术可以识别与疾病相关的基因突变，为个性化医疗提供依据。
此外，测序技术还可以用于遗传病的筛查、病原体的鉴定、以及药物靶点的发现等。
临床医学检验：临床检验仪器真题
临床医学检验：临床检验仪器真题1、问答题常用的离心方法分几类？正确答案：常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。
2、问答题简述蛋白质测序仪的主要应用。
正确答案：蛋白质测序仪（江南博哥）获得的蛋白质序列信息主要应用在以下三个方面。
（1）新蛋白质的鉴定：在凝胶电泳中出现的未知条带可以利用蛋白质测序仪来测定其序列，为探索蛋白质的功能提供线索。
（2）分子克隆探针的设计：是蛋白质序列信息的基本用途之一。
用蛋白质序列信息设计PCR引物和寡核甘酸探针。
可以利用这些探针进行cDNA文库或基因组文库的筛选。
（3）抗原的人工多肽合成：由合成多肽免疫产生的抗体常用来证实和纯化新发现的蛋白质。
此外，合成的多肽类似物能够揭示蛋白质重要结构特征和提示蛋白质的功能特性。
3、问答题第三代自动血培养仪有哪些性能特点？正确答案：（1）培养基营养丰富；（2）以连续、恒温、振荡方式培养，细菌易于生长；（3）培养瓶多采用不易碎材料制成，提高了使用的安全性；（4）采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式，避免标本交叉感染，且无放射性污染；（5）自动连续监测，缩短了检测时间，阳性标本检测可快速、准确；（6）结果报告及时，85%以上的阳性标本能在48小时内被检出；（7）培养瓶多采用双条形码技术，只需用电脑上的条码阅读器扫描报告单上的条码，就可直接查询到病人的结果及生长曲线；（8）培养瓶可随时放入培养系统，并进行追踪检测；（9）数据处理功能较强，数据管理系统随时监测感应器的读数，依据数据的变化来判定标本的阳性或阴性，并可进行流行病学的统计分析；（10）设有内部质控系统，可保证仪器的正常运转；（11）可进行血液及所有无菌体液的细菌培养检测。
4、单选库尔特原理中血细胞的电阻与电解质溶液电阻的关系是OoA.相等B.大于C.小于D.大于或等于E.小于或等于正确答案：B5、问答题电泳技术根据分离原理如何分类？正确答案：根据分离原理可分为移界电泳、区带电泳、等速电泳、等电聚焦、免疫电泳等。
临床医学检验：临床检验仪器题库考点(题库版)
临床医学检验：临床检验仪器题库考点（题库版）1、问答题如何对BCA进行分类？正确答案：按自动化程度分半自动血细胞分析仪、全自动血细胞分析仪、血细胞分析工作站、血细胞分析流水线；按检测原理分电容型、光电型、激光型、电阻抗（江南博哥）型、联合检测型、干式离心分层型、无创型；按对白细胞的分类水平分二分群、三分群、五分群、五分群+网织红BCA。
2、多选制备型超速离心机主要用途包括（）。
A.细胞器和病毒分离纯化B.生物大分子分离纯化C.能使亚细胞器分级分离D.可用于测定蛋白及核酸的分子量E.分离细胞碎片正确答案：A, B, C, D3、单选下列不属旋转式黏度计维护的是（）。
A.每次测试完毕后均应进行冲洗B.清洗剪血板C.清除毛细管污染D.清洗剪液锥E.清除测试头严重污染物正确答案：C4、单选鉴别良、恶性肿瘤的特异指标为（）。
A.非特异性酯酶含量测定B.胞质抗原含量测定C.DNA含量测定D.过氧化物酶含量测定E.DNA倍体含量测定正确答案：E5、单选与RIA比较，IRMA最突出的特点是（）。
A.IRMA的反应速度更慢B.非竞争结合，使IRMA灵敏度更高C.抗体用量较少，但对K值要求更高D.反应参数与待测抗原含量成反比E.单位点IRMA采用固相抗体分离法正确答案：B6、多选生物芯片检测仪器是一种多学科高度结合的精密仪器，学科包括（）。
A.光学B.机械C.电学D.计算机E.现代分子生物学正确答案：A, B, C, D, E7、问答题简述Ⅲ级生物安全柜的性能特点。
正确答案：Ⅲ级生物安全柜是完全密闭、不漏气结构的通风安全柜。
工作空间内为经HEPA过滤器净化的无涡流的单向流空气。
安全柜正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作口。
在安全柜内的操作是通过与安全柜相连接的橡皮手套进行的。
安全柜应维持至少120Pa的负压，方可确保人体与柜内物品完全隔绝。
进入气流经数个HEPA过滤器过滤后送入安全柜，排出气流应经双层HEPA过滤器过滤或通过HEPA过滤器过滤和焚烧来处理。
临床医学检验：临床检验仪器试题及答案
临床医学检验：临床检验仪器试题及答案1、填空题双磁路磁珠法中，随着纤维蛋白的产生增多，磁珠的振幅逐渐（）。
正确答案：减弱2、单选毛细管电泳的特点（）。
A.容易自动化，操作繁杂，环境污染小B.容易自动化（江南博哥），操作简便，环境污染大C.容易自动化，操作繁杂，环境污染大D.不易自动化，操作简便，环境污染小E.容易自动化，操作简便，环境污染小正确答案：E3、问答题尿液分析仪是如何进行分类的？正确答案：尿液分析仪按工作方式可分为湿式尿液分析仪和干式尿液分析仪。
其中干式尿液分析仪主要着眼于自动评定干试纸法的测定结果，因其结构简单、使用方便，目前临床普遍应用。
尿液按测试项目的数量可分为8项尿液分析仪、9项尿液分析仪、10项尿液分析仪、11项尿液分析仪和12项尿液分析仪。
检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C和浊度。
尿液分析仪按自动化程度可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。
4、问答题常用的离心方法分几类？正确答案：常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。
5、名词解释光学显微镜正确答案：简称光镜，是利用日光照明将小物体形成放大影像的精密光学仪器，由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。
光学系统由物镜和目镜组成，其核心是物镜和目镜中的两组透镜，其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像，再由目镜进一步放大成虚像，最后在人眼中形成实像。
6、单选下述哪项不是毛细管黏度计优点（）。
A.测定牛顿流体黏度结果可靠B.能直接检测在一定剪切率下的表观黏度C.速度快D.操作简便E.价格低廉正确答案：B7、多选能发射波长范围150nm～400nm的紫外线的光源是（）。
A.氢灯B.卤钨灯C.氘灯D.汞灯E.钨灯正确答案：A, C8、单选UF-100型尿沉渣分析仪使用的荧光染料是（）。
A.铬黑T和靛蓝B.菲啶和羧花氰C.铬黑T和菲啶D.羧花氰和铬黑TE.菲啶和铬黑T正确答案：B9、名词解释压缩机PCR基因扩增仪正确答案：属于第二代PCR基因扩增仪，由压缩机自动控温，金属导热。
临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点真题
临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点真题1、名词解释常液洗脱正确答案：是在样品的分离过程中从始至终采用相同的流动相和相同的流量来帮助样品的分离。
2、多选采用葡萄糖氧化酶生物传感器技术的手持式血糖仪所使用的（江南博哥）试纸顶层，由亲水层、粘附层、酶层、绝缘层、碳层、塑料支撑层等组成，其中关于各层的主要作用，下面的说法中正确的是（）。
A.酶层内含葡萄糖氧化酶B.绝缘层可以限定电极的大小C.碳层内包括工作电极和参考电极D.顶层是透明的，便于确认血量E.亲水层和粘附层则有助于控制和引导小样品的血样正确答案：A, B, C, D, E3、问答题简述毛细管等速电泳的工作原理。
正确答案：同等电聚焦电泳一样，等速电泳在毛细管中的电渗流为零，缓冲系统由前后两种不同浓度的电解质组成。
毛细管内首先导入具有比被分离各组分高电泳淌度的前导电解质，然后进样，随后再导入比各分离组份低电泳淌度的尾随电解质，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中发生分离。
4、多选红外和远红外分光光度技术用于制作多种无创检测仪器，包括（）。
A.无创伤自测血糖仪B.血红蛋白检测仪C.无创（经皮）胆红素检测仪D.血小板聚集仪E.无创全血细胞测定仪正确答案：A, B, C, E5、单选离子选择性电极法测得的是血清样本中离子的（）。
A.电位差B.浓度C.电量D.数量E.电流正确答案：B6、单选密度梯度离心法又称为（）。
A.分离离心法B.组份分离法C.区带离心法D.低速离心法E.高速离心法正确答案：C7、多选下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，正确的是（）。
A.毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.DNA分子在毛细管中泳动的动力来自于两级间极高的压力差D.电极为电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本正确答案：A, B, E8、单选生物安全柜内的空气需经HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，其主要目的是（）。
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第十三章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪一、名词解释1.荧光标记引物法：将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5′端，称为荧光标记引物法。
2.荧光标记终止底物法：将荧光染料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上，称为荧光标记终止底物法。
3.多色荧光标记引物法：是DNA测序反应常用的一种荧光标记方法。
将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5′端，当相同碱基排列的寡核苷酸链作为骨架分别被4种荧光染料标记后，便形成了一组（4 种）标记引物。
特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系。
4.多色荧光标记终止底物法：是D NA 测序反应常用的一种荧光标记方法。
将荧光染料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上。
反应中将4种d dNTP 分别用4种不同的荧光染料标记，带有荧光基团的ddNTP 在掺入DNA 片段导致链延伸终止的同时，也使该片段3′端标上了一种特定的荧光染料。
根据荧光颜色的不同来判断所代表的不同碱基信息。
5.Edman降解法：是检测蛋白质一级结构的方法。
在弱碱条件下，多肽链N末端N H2与P ITC 反应，生成PTC－多肽。
在无水强酸如三氟醋酸的作用下，可使PTC－多肽形成ATZ 衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽。
剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环。
如此不断循环，可依次使多肽链的氨基酸逐一降解，形成A TZ 衍生物。
ATZ 衍生物经水溶酸处理转化为稳定的P TH 氨基酸。
6.Sanger 双脱氧链末端终止法：是检测D NA 序列的一种方法。
其原理是利用P CR，但反应体系中除了dNTP 外，还有ddNTP。
ddNTP 可掺入到正在延伸的DNA 链中，但不能同后续的dNTP 形成磷酸二酯键，从而使正在延伸的DNA 链在此终止。
由于存在ddNTP 与dNTP 的竞争，生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段。
7.平板电泳型DNA测序仪：为D NA 测序仪的一种类型。
平板型电泳的凝胶灌制在两块玻璃板中间，聚合后厚度一般小于 0.4mm 或更少，因此又称为超薄片层凝胶电泳。
它具有样品判读序列长（600bp～900bp）、一块凝胶板上可同时进行多个样品测序的优点。
8.毛细管电泳型DNA测序仪：为D NA 测序仪的一种类型。
将凝胶高分子聚合物灌制于毛细管中（内径50m～100m），在高压及较低浓度胶的条件下实现D NA 片段的快速分离。
9.缩微生物处理器：是一种新型D NA 自动测序装置。
其基本结构为3层玻璃薄片和一层聚二甲基硅氧烷薄片，各层间紧密粘合形成圆盘状，直径仅 10 厘米。
在这些薄片之间有各种反应小室、毛细管电泳通道和微瓣膜，可完成纳升级标本的S anger DNA 测序。
二、选择题【A型题】1.DNA的一级结构是指（B）A.DNA空间构象B.核苷酸序列C.碱基序列D.氨基酸序列E.DNA双螺旋结构2.下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（C）A.加入的核苷酸单体为2’-脱氧核苷三磷酸B.低温退火时，引物与模板形成双链区C.沿着3’-5’的方向形成新链D.DNA聚合酶结合到DNA双链区启动DNA的合成E.形成的新生连与模板完全互补配对3.双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（E）A.DNA聚合酶不同B.dNTP的种类不同C.dNTP的浓度不同D.引物不同E.双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4.下述荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应放在同一管中完成而不影响测序结果的是（D）A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法5.下述那一荧光标记法，必须将A、T、C、G四个测序管分管进行，但可以合并在一个泳道内电泳（C）A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法6.毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因是由于（B）A.电极弯曲B.电泳缓冲液蒸发使液面降低C.毛细管未浸入缓冲液中D.毛细管内有气泡E.测序样本为注入毛细管中7.毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧，主要原因是（C）A.电泳缓冲液漏出B.电泳缓冲液配置有误C.电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D.测序样本纯化不完全，含有盐性成分E.加热温度过高8.全自动DNA测序仪的主要应用范围，不包括（E）A.人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B.法医的亲子鉴定和个体识别C.生物工程药物的筛选D.动植物杂交育种E.新蛋白质的鉴定9.蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（A）A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法10.蛋白质测序仪主要检测（D）A.核苷酸序列B.核糖核酸序列C.碱基序列D.氨基酸序列E.脱氧核糖核酸序列11.下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中，不正确的是（D）A.其基本原理是利用DNA的体外合成过程B.反应体系中需加入dNTP和ddNTPC.ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D.dNTP掺入后导致新合成链在不同的位置终止E.生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12.下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中，不正确的是（E）A.需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B.标记和终止过程在同一时间完成C.A/T/C/G四种反应可以在同一管中完成D.可在一个泳道内完成电泳测序E.荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两段13.下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中，不正确的是（A）A.用于测序的产物绝大多数应为单链B.DNA片段上的荧光基团可吸收光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C.两极间的电势差推动DNA片段从正极向负极泳动并达到相互分离D.不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E.测序结果中，纵轴表示荧光波长种类和强度14.下列有关Edman降解法基本原理的叙述中，错误的是（C）A.PTC-多肽的生成是在弱碱性条件下B.PTC-多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C.在无水强碱的作用下，可使靠近PTC基的氨基酸环化，形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D.剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E.ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15.毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因为（C）A.缓冲液配置错误B.毛细管内有气泡C.电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两段D.加热板温度过高16.在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中，广泛应用的原理是（B）A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法17.双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用（B）A.RT-PCRB.PCRC.Western BlotD.Southern BlotE.水解法18.测序仪反应体系中加入的酶为（C）A.限制性内切酶B.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.DNA水解酶E.反转录酶19.在普通的体外合成DNA反应体系中，加入的核苷酸单体为（C）A.dAMP,dCMP,dGDP,dTMPB.dADP,dCDP,dGDP,dTDPC.dATP,dCTP,dGTP,dTTPD.DdATP,ddCTP,ddGTP,ddTTPE.DdADP,ddCDP,ddGDP,ddTDP20.双脱氧末端终止法测序反应中除PCR反应体系成分外，还加入了（D）A.DNA聚合酶B.dNTPC.dNDPD.ddNTPE.ddNDP21.在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是（E）A.色素染料B.同位素C.电化学发光物质D.酶E.荧光素22.下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中，正确的是（A）A.四种标记引物的序列相同，但5’端标记的荧光染料颜色不同B.四种标记引物的序列相同，但3’端标记的荧光染料颜色不同C.四种标记引物的序列不同，其5’端标记的荧光染料颜色也不同D.四种标记引物的序列不同，其3’端标记的荧光染料颜色也不同E.四种标记引物的序列不同，但2’端标记的荧光染料颜色也不同23.下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，不正确的是（D）A.需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5’端B.四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C.A、T、C、G四个测序反应必须分管进行D.上样时需分别在不同泳道内电泳E.特定颜色荧光标记的引物与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24.一般来说，DNA测序图的横坐标和纵坐标的意义是（D）A.横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表时间B.横坐标代表荧光波长种类和强度，纵坐标代表时间C.横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类D.横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类和强度E.横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表荧光波长强度25.下列有关DNA自动测序仪进样器区功能的叙述中，不正确的是（D）A.毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D.电极为电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本26.下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，不正确的是（A）A.电泳时缓冲液阀关闭B.电极为电泳的正性电极C.在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D.注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E.玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27.平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（A）A.600~900bpB.400~600bpC.200~400bpD.900~1000bpE.300~500bp28.毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（E）A.600~900bpB.400~600bpC.200~400bpD.900~1000bpE.300~500bp【X型题】1.目前DNA测序仪的工作原理，主要是利用（BC）A.Edman降解法B.双脱氧链末端终止法C.化学降解法D.氧化-还原法E.水解法2.下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，正确的是（BCE）A.需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的3’端B.四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C.A、T、C、G四个测序反应必须分管进行D.上样时需分别在不同泳道内电泳E.特定颜色荧光标记的引物须与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系3.下列哪些荧光标记物必须将A、T、C、G四个测序反应分管进行（ABC）A.单色荧光标记引物法B.单色荧光标记终止底物法C.多色荧光标记引物法D.多色荧光标记终止底物法E.多色荧光标记法4.下列有关单色荧光标记法原理的叙述中，正确的是（ABC）A.需将A、G、C、T四管分管进行B.上样时需在不同泳道电泳C.可用于标记ddNTP,也可用于标记引物D.有可能因泳道间迁移率不同而影响测序精度E.仅适用于标记ddNTP，而不能标记引物5.平板电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流可能原因有（ABCD）A.电极导线未接好或损坏B.电泳缓冲液配置不正确C.正极或负极铂金丝断裂D.正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E.倒胶时有气泡形成6.采用荧光标记终止底物法的测序反应体系中，包含（ABCD）A.DNA模板B.引物C.dNTPD.ddNTPE.水解酶7.毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，可能原因有（ABCD）A.电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两段B.毛细管内有气泡C.毛细管未浸入缓冲液中D.电极弯曲而无法浸入缓冲液中E.加热板温度过高8.导致毛细管电泳型DNA测序仪电极弯曲的原因有（ACD）A.测序时未进行电极定标操作就直接执行电泳命令B.自动进样器上有灰尘沉积C.运行前未将样品盘归位D.进行电极定标操作时X/Y轴归位尚未结束就运行Z轴归位E.凝胶干燥而阻塞毛细管9.平板电泳型DNA测序仪电泳时显示无电流，可能原因有（ABCD）A.电泳缓冲液配置不正确B.电极导线未接好或损坏C.正极或负极铂金丝断裂D.正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E.电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端10.S anger双脱氧末端终止法和Max-Gilbert化学降解法的共同点包括（BCDE）A.反应体系中均有ddNTPB.都是在某一固定的点开始核苷酸链的延伸，随机在某一个特定的碱基处终止C.均产生A、T、C、G四组不同尺度的一系列核苷酸链D.均在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进行片段的分离和检测E.均可检测DNA的一级结构11.在Sanger双脱氧末端终止法测序反应体系中，ddNTP和dNTP的异同点有（BDE）A.ddNTP在脱氧核糖的5’位置上缺少一个羟基B.ddNTP在脱氧核糖的3’位置上缺少一个羟基C.DNA链在掺入dNTP的位置终止链的延伸D.均可与正在延伸的DNA链的末端脱氧核糖3’-OH发生反应E.ddNTP不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键12.下列有关Sanger双脱氧末端终止法测序反应体系的反应原理的叙述中，正确的是（ABDE）A.加入的核苷酸单体包括dNTP和ddNTPB.低温退火时，引物与模板形成双链区C.沿着3’-5’的方向形成新链D.DNA聚合酶结合到DNA双链区上，启动DNA的合成E.形成的新生链与模板完全互补配对13.下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，正确的是（ACE）A.毛细管进入样品盘标本孔进样时，依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.DNA分子在毛细管中泳动的动力来自于两级间极高的压力差D.电极未电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本14.下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，正确的是（ACDE）A.电泳时缓冲液阀打开B.电极未电泳的负性电极C.在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D.注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E.玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力15.下列有关缩微生物处理结构和功能特点的叙述中，正确的是（BDE）A.基本结构为2层玻璃薄片和2层聚二甲基氧烷薄片B.其形状为圆盘状，直径仅10cmC.可完成纳升级标本的Sanger DNA测序D.微瓣膜的功能是在热循环反应时封闭反应小室，为反应提供封闭的空间E.毛细管电泳通道由上下来回迂回的U型管道构成，总长度为30cm三、简答题1.简述双脱氧末端终止法测序原理。