红细胞计数的注意事项
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法血球计数板是一种常见的实验室设备，用于进行血液细胞计数。
本文将详细介绍血球计数板的计数方法，包括准备工作、样本处理、装载计数板、显微镜观察和计算结果等方面。
一、准备工作1.清洁：将血球计数板从存放位置取出，用酒精或去离子水擦拭干净，确保无灰尘和污垢。
2.检查：检查血球计数板是否完好无损，如有破损或变形应及时更换。
3.校准：使用前应进行校准，确保读数准确可靠。
二、样本处理1.采集样本：从受试者的静脉或指尖采集适量的血液样本，并将其加入到已经预先混合好的抗凝剂中。
2.混匀：轻轻摇动管子使其充分混匀，避免产生气泡。
3.稀释：将适量的稀释液加入到混合好的样本中。
通常情况下，白细胞需要进行稀释，而红细胞不需要稀释。
具体稀释倍数应根据实际情况而定。
三、装载计数板1.取出计数板：将血球计数板取出，放在干净的台面上，注意不要碰到玻璃面。
2.装载样本：使用移液器或吸管将稀释好的样本加入到计数板的样本槽中。
注意不要加过多，以免溢出。
3.震荡：轻轻震动计数板，使其充分混合。
四、显微镜观察1.调节显微镜：将显微镜调整到适当的倍率，并调节焦距，以便观察细胞。
2.观察细胞：在计数板上找到一个适当的视野，并开始观察细胞。
对于白细胞和红细胞，应分别选择不同的区域进行观察。
3.计数细胞：使用目镜和标尺，在每个小方格内逐一计数细胞。
对于白细胞和红细胞，应分别进行计数，并记录下来。
五、计算结果1.白细胞计算：根据已经记录下来的白细胞数量和稀释倍数，按照公式进行计算得出白细胞计数结果。
2.红细胞计算：根据已经记录下来的红细胞数量和稀释倍数，按照公式进行计算得出红细胞计数结果。
3.血红蛋白计算：根据已经记录下来的红细胞数量和血红蛋白浓度，按照公式进行计算得出血红蛋白计数结果。
4.其他指标计算：根据实验需要，可以进一步计算其他指标，如平均红细胞体积、平均血红蛋白含量等。
六、注意事项1.避免使用过期或损坏的血球计数板。
2.样本必须充分混匀，以确保稀释均匀。
实验报告_红细胞计数
一、实验目的1. 学习使用显微镜和计数板进行红细胞计数。
2. 掌握红细胞计数的原理和操作方法。
3. 了解红细胞计数在临床医学中的应用。
二、实验原理红细胞计数是通过计数显微镜下一定体积内的红细胞数量，进而计算出每升血液中的红细胞数量。
红细胞计数是临床血液学检查的重要指标之一，可以反映人体的健康状况。
红细胞计数原理基于红细胞在等渗溶液中的等渗性。
当血液稀释至一定倍数后，红细胞在等渗溶液中保持形态和大小不变，便于计数。
根据计数室中红细胞数量，计算出每升血液中的红细胞数量。
三、实验器材1. 显微镜2. 改良Neubauer计数板3. 血液采集器4. 生理盐水5. 红细胞稀释液6. 吸管7. 计数室盖玻片8. 计时器四、实验步骤1. 采集血液：用血液采集器采集外周血或抗凝血（EDTA抗凝）。
2. 稀释血液：将血液与红细胞稀释液按一定比例混合，使血液稀释至适宜倍数。
3. 充池：将稀释后的血液充入计数池中，静置3~5分钟，使红细胞沉淀。
4. 观察计数：将计数板置于显微镜下，调整至合适倍数，依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数量。
5. 计算红细胞数量：根据计数结果，计算每升血液中的红细胞数量。
五、实验结果与分析1. 实验结果（1）计数室每个中方格容积为0.1μl，共计8个中方格中红细胞数为50个。
（2）红细胞总数乘以8，得到红细胞总数为400个。
（3）血液的血红细胞数乘以稀释倍数（10倍），再乘以8，得到一升血中红细胞数为4000个。
2. 结果分析根据实验结果，该受试者的红细胞计数为4000个/μl。
正常成人红细胞计数范围为（4.0~5.5）×10^12/L。
该受试者的红细胞计数处于正常范围内，说明其血液中红细胞数量正常。
六、注意事项1. 保证计数板、载玻片、盖玻片的清洁，以防影响实验结果的准确性。
2. 一次性完成充池，避免气泡和碎片影响计数。
3. 压线的细胞，遵从数上不数下，数左不数右的计数原则。
各种检查正常值
各种检验检查的正常值和注意事项一、红细胞计数(简写RBC)1.正常值男性：4.0—5.5×1012/L；女性：3.5—5.0×1012/L；新生儿： 6.0—7.5×1012/L2.临床意义：红细胞计数最常用的是做为检查贫血的主要指标。
(1)红细胞增多：可以分为两种情况：a.相对增多：在剧烈呕吐，频繁腹泻、多汗时、多尿、长期不能进食者，由于血液浓缩，红细胞可以出现相对地增多。
b.绝对增多：在某些正常情况下因缺氧也可以出现红细胞增多，如：由平原移居高原生活或剧烈地体力劳动和体育运动以后及新生儿均可出现红细胞增多。
此外，红细胞增多还见于一些疾病，如：严重肺气肿、肺原性心脏病、先天性心脏病以及真性红细胞增多症等。
(2)红细胞减少：主要表现为贫血。
如：妊娠中、后期的贫血、缺铁性贫血、营养不良性贫血，再生障碍性贫血、失血性贫血以及溶血性贫血等。
二、血红蛋白测定(简写Hb)1.正常值：男性：120—160g/L；女性： 110—150g/L ；新生儿： 170—200g/L2.临床意义：血红蛋白测定常与红细胞计数同步进行，其增高与减少的临床意议与红细胞计数同。
白细胞总数及分类计数三、白细胞总数(简写WBC)1.正常值成人：4—10×109/L ；6个月至2岁婴儿：11—12×109/L ；新生儿：15—20×109/L2.临床意义：(1)增多：白细胞总数增多，是检查体内感染的主要指标之一，主要表现为急性感染，特别是化脓性感染。
在急性大出血、严重的损伤和急性中毒等也可见到。
还有白血病和某些恶性肿瘤, 白细胞均有增多。
此外，在某些正常情况下也可以见到白细胞增多，如：新生儿、妊娠5个月至分娩后4～5天，以及剧烈运动或劳动后，寒冷、饱餐或淋浴之后等等。
(2)减少：白细胞总数减少，临床上最常见于某些特殊感染，如病毒感染(流行性感冒病毒等)、伤寒，疟疾等。
在某些中毒、长期接触放射线、影响骨髓造血功能的药物、抗癌药物以及自身免疫性疾病等，也会出现白细胞总数的减少。
网织红细胞计数操作规程
1.目的：规范网织红细胞计数标准操作，保证实验数据的准确性。
2.原理：网织红细胞是未完全成熟的红细胞，包体较一般红细胞稍大，胞浆中尚有嗜碱性残存物质，可被煌焦油蓝等染成蓝色颗粒状和线状及网状结构物。
网织红细胞的数量可用百分率或每立方毫米血液中的绝对值数来表示。
3.材料：煌焦油蓝（灿烂甲酚蓝）、枸橼酸钠、生理盐水、香柏油、载物片（玻璃片）、推片（磨去边的玻璃片）、试管（2ml）毛细吸管或枪头（200微升）、光学显微镜。
4.操作规程：4.1染色液配制：煌焦油蓝0.4g、3.5%枸橼酸钠20ml,研磨溶解后加生理盐水至100ml，过滤备用，室温可保存6个月。
4.2血膜片制备：4.2.1染色：取试管一支，用毛细管或枪头于试管中加入染液2～5滴，然后再加入新鲜血液1滴轻摇混合，染色10～15min。
4.2.2制片：取载物片一片，用毛细管或枪头吸取血液染色液1小滴于载物片上，并用推片约45度角推制成舌型血膜片，自然干燥备用。
4.2.3观察：用显微镜观察，取血膜片滴入香柏油1滴，将血膜片置于显微镜载物台，用油镜观察网织红细胞。
4.2.4计数：取计数器在油镜下检查计数红细胞，即计数红细胞中网织红细胞的数量，检查计数1000个红细胞中网织红细胞的数量，并得出千分率再除以10即为百分率。
10计算公式：百分率＝------------------------------1000个红细胞中网织红细胞的数量5.注意事项：5.1载物片用前必须经过酸或碱液浸泡脱脂处理后方可使用；5.2血膜片制备需要反复练习推片，熟练推制血膜片的技巧；5.3血膜片的厚薄要适中，血膜片过厚过薄均无法进行观察；5.4室温低时血液染色时间要适当延长，其细胞着色更充分；5.5血膜片需在3天内检查计数，褪色后其网状结构不清晰。
实验一 红细胞计数 一、实验目的： 掌握红细胞计数原理及技术。 二
实验一红细胞计数一、实验目的：掌握红细胞计数原理及技术。
二、实验原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算示得每升血液内的红细胞数。
三、实验器材及试剂：显微镜、血红蛋白吸管、计数板、盖玻片、生理盐水。
四、实验操作：1、取试管1支，加稀释液3.98ml或1.99ml。
2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血10微升。
3、擦去管尖外部余血、轻轻注入红细胞稀释液底部，再吸取上层稀释液清洗吸管2-3次，立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。
6、静止2-3分钟，待经红细胞下沉后，用高倍镜或低倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。
五、计算N(五个中方格内RBC数)×5×10×106×200=N×1012个/升×5：表示5个中方格内RBC数换算为1个大方格内RBC数× 10：1个大方格容积、0.1ul、换算为1ul内RBC数× 106：1ul换算为1升内红细胞数× 200：稀释倍数六、正常参考值正常参考值：成年男性：4.00-5.50×1012/升成年女性：3.50-5.00×1012/升新生儿： 6.00-7.00×1012/升实验二血红蛋白测定一、实验目的：掌握氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。
二、实验原理：血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与CNˉ结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋（HicN）。
HicN最大吸收峰540nm，最小吸收波谷504nm，在特定的条件下，毫摩尔消光系数为44L.mmol-1 .cm-1 ，因此根据标本的吸光度，即求得血红蛋白浓度。
三、实验操作：1、取指血20ul，加到5ml血红蛋白转化液中，混匀，静止5分钟。
实验一 红细胞和白细胞计数
红细胞和白细胞计数
临检教研室
一、红细胞计数
掌握显微镜手工计数的方法。 目的 掌握显微镜手工计数的方法。 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数， 原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，冲 入计数池后， 入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红 细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。 细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。
一、红细胞计数
（一）器材： 显微镜、改良计数板、试管、 器材： 显微镜、改良计数板、试管、
微量吸管、移液管、 微量吸管、移液管、洗耳球
（二）试剂： 生理盐水 试剂： 标本： EDTA盐抗凝血 （三）标本： EDTA盐抗凝血
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（四）操作
1.加稀释液: 取小试管1 加稀释液2.0ml 2.0ml。 1.加稀释液: 取小试管1支，加稀释液2.0ml。 加稀释液 2.加血： 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl 10μl， 2.加血： 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl， 加血 擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部， 擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻 吸上清液清洗吸管2 立即混匀。 吸上清液清洗吸管2～3次，立即混匀。 3.充池： 3.充池： 混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数 充池 室温下平放3 分钟， 池，室温下平放3～5分钟，待细胞下沉后于显微镜 下计数。 下计数。 4.计数： 用高倍镜依次计数中央大方格内4 4.计数： 用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正 计数 个中方格内的红细胞数。 中5个中方格内的红细胞数。 5.计算： RBC/L=N×25/5×10×201× 5.计算： RBC/L=N×25/5×10×201×106 计算 =N/100× ≈N×1010 =N/100×1012
二、白细胞计数
1.目的： 掌握显微镜白细胞计数的方法。 目的： 掌握显微镜白细胞计数的方法。 目的 2.原理： 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数， 原理： 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数， 原理 同时破坏溶解红细胞。 同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数 池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数， 池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数， 经换算求出每升血液中的白细胞数。 经换算求出每升血液中的白细胞数。
红细胞计数的实验报告
1. 掌握红细胞计数的原理和方法。
2. 了解红细胞计数在临床医学中的意义。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理红细胞计数是血液学检验中的一项基本指标，通过计数单位体积血液中的红细胞数量，可以了解人体的血液状况。
本实验采用改良Neubauer计数板和RBC稀释液进行红细胞计数，通过显微镜观察红细胞数量，进而计算出每升血液中的红细胞数量。
三、实验器材与试剂1. 器材：显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板、小试管、生理盐水、EDTA抗凝血。
2. 试剂：RBC稀释液（NaCl、Na2SO4、HgCl2、枸橼酸钠甲醛盐水溶液）、生理盐水。
四、实验步骤1. 准备工作：将RBC稀释液加入小试管中，充分摇匀。
2. 采血：用微量吸管吸取EDTA抗凝血10μl，轻轻吹入装有RBC稀释液的小试管中，使血液与稀释液充分混合。
3. 充池：将混合后的血液充入改良Neubauer计数板的计数室，静置3-5分钟。
4. 观察计数：在显微镜下，使用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。
5. 计算红细胞数量：根据计数室每个中方格的容积和计数结果，计算出每升血液中的红细胞数量。
五、实验结果1. 计数室每个中方格容积为0.1mm³。
2. 中央大方格内4角和正中5个中方格内红细胞总数为A个。
3. 每升血液中的红细胞数量为A × 100 × 10⁶个。
1. 红细胞计数结果：根据实验数据，计算出每升血液中的红细胞数量为B个。
2. 结果讨论：与正常红细胞计数范围进行比较，分析实验结果是否在正常范围内。
七、注意事项1. 确保计数板、载玻片、盖玻片的清洁，以免影响实验结果的准确性。
2. 一次性完成充池操作，避免气泡和碎片影响计数结果。
3. 压线的细胞应遵从数上不数下、数左不数右的计数原则。
4. 血涂片制作要求厚薄均匀，注意涂片的量和时间。
八、实验总结本实验通过观察红细胞数量，掌握了红细胞计数的原理和方法。
红细胞计数实验报告
红细胞计数实验报告实验目的，通过本次实验，我们旨在了解红细胞计数的基本原理和方法，掌握红细胞计数的实验操作技能，以及掌握红细胞计数的结果分析和临床意义。
实验原理，红细胞计数是指在一定容积的血液中，红细胞的数量。
通过显微镜计数室和计数板，将血液稀释后装入计数板中，再在显微镜下进行计数。
通过计算出单位体积血液中红细胞的数量，从而得出红细胞计数值。
实验仪器和试剂，显微镜、计数板、横纹管、生理盐水、1%甲醇溶液、琼脂、血液标本。
实验步骤：1. 取一定量的横纹管，用生理盐水稀释血液标本，使红细胞适当稀释。
2. 在计数板中加入适量的稀释后的血液标本，使红细胞均匀分布在计数板的小格中。
3. 将计数板放入显微镜下，调节到适当倍数，用显微镜目镜直接观察。
4. 在显微镜下，选择计数板的一个小方格，计数红细胞的数量，根据标准计数板的格数和深度，计算出红细胞的数量。
5. 重复计数3-5个小方格，取平均值作为红细胞的计数值。
实验结果分析，根据实验数据，我们可以得出红细胞计数的结果。
通过比较正常值范围，可以判断出被检测者的红细胞计数是否正常。
红细胞计数值的异常与一些疾病有一定的关联，如贫血、失血、骨髓增生异常等。
实验注意事项：1. 实验操作要细致，避免气泡和污染。
2. 显微镜调节要准确，观察要仔细。
3. 稀释血液标本要均匀。
4. 计数板的清洁和消毒工作要做好。
实验总结，本次实验通过红细胞计数的操作，我们对红细胞计数的原理和方法有了更深入的了解。
同时，也掌握了红细胞计数的实验操作技能，以及红细胞计数结果的分析和临床意义。
通过本次实验，我们对红细胞计数有了更加全面的认识，为今后的学习和工作打下了良好的基础。
在实验中，我们也发现了一些问题，如实验操作中的细节问题、结果分析中的不足之处等，这些都需要我们在今后的学习和实践中加以改进和完善。
希望通过不断的学习和实践，我们能够更好地掌握红细胞计数的相关知识和技能，为将来的临床工作做好充分的准备。
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红细胞计数的注意事项：（1）计数和计算：在2ml红细胞稀释液中加血10μl，混匀后，充入计数池，静置3～5min后，在高倍镜下，计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。
计数时需遵循一定方向逐格进行，以免重复或遗漏，对压线细胞采用数左不数右、数上不数下的原则。
（2）清洁：应保证计数板和盖玻片清洁。
操作时，勿接触计数板表面，以防污染。
使用后，依次用95%乙醇、蒸馏水棉球、清洁绸布擦净.（3）充池：需一次完成充池，如充池过少、过多或有气泡、继续充液，应重新操作，充池后不能移动盖玻片。
红细胞在计数池中若分布不均，每个中方格间相差超过20个应重新充池，两次红细胞计数相差不得超过5%. （4）计数板：改良牛鲍计数板每年要鉴定1次，以免影响计数结果的准确性。
（5）白细胞影响：通常白细胞总数较少，仅相当于红细胞的1/500～1/1000，对结果影响很小，可以忽略不计。
但白细胞过高者（WBC>100×10 9/L），红细胞计数结果应进行校正。
方法有两种：一是直接将患者红细胞数减去白细胞数，二是在高倍镜下观察勿将白细胞计入，白细胞体积常比红细胞略大，中央无凹陷，细胞核隐约可见，无黄绿色折光。
（6）红细胞稀释液：传统稀释液（Hayem液）由NaCl（氯化钠，调节渗透压）、Na2S04·10H2O（结晶硫酸钠，提高比密防止细胞粘连）、HgCl2.（氯化高汞，防腐）和蒸馏水组成。
枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠（抗凝和维持渗透压）、甲醛（防腐和固定红细胞）、氯化钠（调节渗透压）和蒸馏水组成。
普通生理盐水或加1%甲醛生理盐水。
瑞士染色的注意事项：（1）血涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。
（2）冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，以防染料沉着在血涂片上。
冲洗时间不能过久，以防脱色。
如血涂片上有染料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。
（3）染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。
染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。
（4）瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR级以上）和甘油组成，Ⅱ液为磷酸盐缓冲液（pH6.4～pH6.8）。
血涂片的注意事项：（1）玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24小时,然后再彻底清洗。
用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1小时,然后擦干或烤干备用。
使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面;,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。
（2）细胞染色对氢离子浓度十分敏感,在染色过程中玻片必须化学清洁,配制瑞氏染液必须用优质甲醇,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。
（3）一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。
血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。
（4）血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分干燥.（5）染色时间与染液浓度,室温高低,细胞多少有关.染液越淡,室温越低,细胞越多,所需染色时间越长或应适当增加染液量,因此染色时间应视具体情况而定.特别是更换新染料时必须经试染,摸索最佳染色条件.（6）染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.（7）冲洗时应用流水将染液冲去.不能先倒掉染液,以免染料沉着于血片上.（8）染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染,必须复染时,可将染液先稀释好再复染.（9）染色时应注意保护血膜尾部细胞,不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.。