实验二 沉降法检测空气中微生物数量

环境科学与工程学院 生物工程10（1）班 叶智源 3110007848

实验二 沉降法检测空气中微生物数量

（一） 实验目的

1．学习并掌握用沉降法检测空气中的微生物

2．了解空气中微生物的分布状况 （二）实验原理

在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。空气中也不例外。虽然空气不是微生物栖息的良好环境。但由于气流、灰尘和水沫的流动，人和动物的活动等原因，仍有相当数量的微生物存在。当空气中个体微小的微生物落到适合于它们生长繁殖的固体培养基的表面时，在适温下培养一段时间后，每一个分散的菌体或孢子就会形成一个个肉眼可见的细胞群体即菌落。观察大小、形态各异的菌落，就可大致鉴别空气个存在的微生物的种类。（三)实验器材

1． 试剂

牛肉蛋白胨培养基配方：

牛肉膏 5.0g, 蛋白胨 10.0g ，NaCl 5g, 水1000ml ，pH 7.2~7.4 马铃薯培养基配方：

马铃薯 200g, 蔗糖 20g, 水1000ml ， pH 7.2 高氏一号培养基配方：

淀粉 20g, 硝酸钾 1.0g, 磷酸氢二钾 0.5g, 硫酸镁0.5g, 氯化钠0.5g, 硫酸亚铁0.01g, 水1000ml, pH 7.2~7.4 2. 仪器及其他用品

高压灭菌锅，操作工作台，三角瓶，培养皿，酒精灯，培养箱等 （四）实验方法

1．倒平板：按常法配置上述培养基，分装于三角瓶中，高压灭菌备用。临用前将培养基熔化，冷却至50℃左右，各倒16个平板备用。 2．暴露取样

在指定的地点草地，一层楼，三层楼，七层楼各放4皿，将平板皿盖打开，在空气中暴露5min 和10min,时间一到，立即合上皿盖。

3． 培养观察： 细菌置于37℃培养，放线菌培养基平板和真菌培养基平板置于28℃培养。细菌培养48h ，真菌和放线菌培养4-6天。计数平板上的菌落，观察各种菌落的形态、大小、颜色等特征。

4.计算1m 3空气中微生物的数目

奥梅染斯基（Омелянский）曾建议：如面积为100㎝2的平板培养基，暴露在空气中5分钟，置于37℃培养24小时后所生长的菌落数，相当于10L 空气中的细菌数。

X=

X ：每m 3空气中的细菌数

N ：平板暴露5分钟，置37℃培养24小时后生长的菌落数 r ：平皿底半径（㎝）

N ×100×100

πｒ2

（五）实验结果

1．列表比较不同放置地点空气菌落种类以及数量的差异？

用沉降法计算1m 3空气环境中所含菌数。

（六）思考题

1．对沉降测定法的结果，进行分析。

分析：从沉降测定法的结果看出，空气中的细菌数是从低到高呈现逐渐减少的趋势。当然，由于实验组数较少的原因，实验结果不太理想。

菌落平均数 环境

菌落数

细菌数/m 3 1楼 5min 3 472 1楼 5min 4 629 3楼 5min 2 314 3楼 5min 2 314 5楼 5min 0 0 5楼 5min 0 0 7楼 5min 2 314 7楼

5min