小鼠的急性毒性试验

表2 联合急性毒性实验中各组合农药的浓度设置
农药组合
0.2+0.8
浓度组合（mg/L） 0.4+0.6 0.5+0.5 0.6+0.4
0.8+0.2
甲氰菊酯+百草枯
甲氰菊酯+乐果
甲氰菊酯+敌敌畏
甲氰菊酯+草甘膦
百草枯+乐果
百草枯+敌敌畏
百草枯+草甘膦
乐果+敌敌畏
乐果+草甘膦
敌敌畏+草甘膦
1.4毒性评价标准
情况,分别找出五种农药对小鼠经口染毒的大致致死剂量范围(即死亡率0% ～100%的剂量范
围) ,确定小鼠的正式试验剂量、组数和组间剂量比值，观察小鼠反应，统计小鼠死亡时间。
1.3.2单一农药对小鼠的急性毒性实验
通过预实验求出小鼠都不死亡的最高浓度以及全部死亡的最低浓度，在这区间按等对数间距
设置7个浓度组，和一个对照组（不含农药），每组做三个重复。试验前小鼠隔夜禁食、不
禁水,分别对小鼠以单纯随机方法分配到各剂量组，每组10只小鼠。于第2天上午染毒,各实
验组剂量由预试验确定,同时设立对照组(生理盐水) ,给药体积0.2 ml·(10 g) - 1体重。给
药后观察24h,记录动物中毒表现和死亡情况以及体重变化情况。对死亡动物和试验结束时的
存活动物处死解剖。用概率单位法计算PQ的LD50及其95%可信区间。
1.2试验药物
甲氰菊酯( 山东大成农药厂生产) 、百草枯( 山东滨农科技有限公司生产) 、乐果( 杭州庆
丰农化有限公司生产) 、敌敌畏( 南通江山农药化工有限公司生产) 和草甘膦( 镇江江南化
工有限公司生产)
1.3实验方法
1.3.1预实验
分别以组间剂量比值为3.0和1.5进行预试验,通过预试验初步观察到小鼠的毒性反应和死亡
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小鼠的单一和联合急性毒性效应，来评价各种农药的的毒性强弱以及对环境的危害。
1 材料与方法
1.1动物
SPF 级昆明小鼠， 雌雄各半，体重18～22 g，通过腹腔注射药物给药，给药后密切观察小
鼠的反应，观察4小时。给药前禁食不禁水十二小时。
小鼠按20g体重给药0.4mL，，用药物水溶液灌胃。
五种农药对小鼠的急性毒性试验
绪论 随着现代农业的飞速发展，农药的应用越来越广泛，在农林作物的病虫防治中,农药一直发 挥着巨大作用,尤其是本世纪60-70年代,人们大量使用农药,几乎使粮食产量增长一倍,但随 着农药长期的、大量的、不合理的使用,导致了对环境的严重污染并对人体健康产生极大的 影响。它们对动、植物和人类的危害越来越严重。一方面它们可以直接进入生物体内引起急 性、慢性中毒和畸变，同时还通过径流、排污、挥发等途径进入土壤、大气和水体，引起各 种生态环境下生物的死亡，并通过食物链的富集影响人类的食品安全。 目前，因农药使用 与管理失控而引发的一系列水域环境污染以及食品安全等问题，已引起政府相关部门和业内 学者的广泛重视。当前，随着有机氯农药的禁用，菊酯类和有机磷类等成为我国目前使用较 广泛的农药。 《中华人民共和国农药管理条例》指明，农药是指用于预防、消灭或者控制危害农业、林业 的病、虫、草和其他有害生物以及有目的地调节植物、昆虫生长的化学合成物或者几种物质 混合物及其制剂。农药残留是指农药使用后残存于环境、生物体和食品中的农药及其衍生物 和杂质的总称。动植物在生长期间、食品在加工和流通中均可受到农药的污染，导致食品中 农药残留。 相关报道表明，农药利用率一般为10%，约90%的残留在环境中，过多地使用农药，大量未被 利用的农药经过降雨、农田渗滤和水田排水等进入水体，同时，还有大量散失的农药挥发到 空气中，最后汇入水域，沉降积淀在土壤中，通过农作物吸收和食物链进入人体进行累积， 并对人体健康造成危害。目前中国一些食品，如茶叶、大米、肉、蛋等食品中农药残留量常 超过规定标准，过多的残留量对人体健康会造成危害。为此，论述农药残留对人体健康的危 害效应及其毒理机制和防治措施，以期对防治食品中农药残留对人体健康的危害提供理论依 据。 在哺乳类实验动物中，由于小鼠个体小，饲养管理方便，生产繁殖快，质量控制严格，价廉 可以大量供应，又有大量的具有各种不同特点的近交品系，突变品系，封闭群及杂交一代动 物，小鼠实验研究资料丰富参考对比性强；更重要一点乃是全世界科研工作者均用国际公认 的品系和标准的条件进行试验，其实验结果的科学性、可靠性、重复性高，自然会得到国际 认可。 本文以百草枯、甲氰菊酯、乐果、草甘膦和敌敌畏五种常用农药为实验材料, 检测了它们对
表1 单一急性毒性实验中各农药的浓度设置
农药
浓度设置（mg/L）
甲氰菊酯
百草枯
乐果
敌敌畏
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草甘膦
1.3.3五种农药对小鼠的联合急性毒性实验
通过各种单一农药对小鼠的急性毒性实验，计算出各种农药对小鼠的24h的半致死浓度
（LC50），以加和等毒性强度方式设置两种农药的联合毒性浓度梯度， 共10种农药组合，每
表3农药急性经口毒性标准
级别
经口 LD50（mg/Kg）
剧毒
高毒
中毒
低毒
1.5观察指标 全面观察中毒的发生、发展过程和规律以及中毒特点和毒作用的靶器官。观察的系统包括： 1、 中枢神经系统和神经肌肉系统：体位异常、叫声异常、不安、呆滞、痉挛、抽搐麻痹、
运动失调、对外反应过敏或迟钝
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； 2、 植物神经系统：瞳孔扩大或缩小、流涎或流泪； 3、 呼吸系统：鼻孔流液、鼻翼煽动、呼吸深缓、呼吸过速、蜂腰； 4、 泌尿生殖系统：会阴部污秽、有分泌物、阴道或乳房肿胀； 5、 皮肤和毛：皮肤充血、紫绀、被毛蓬松、污秽； 6、 眼：眼球突出、结膜充血、角膜混浊； 消化系统：腹泻、厌食。
2结果与分析 2.1单一农药对小鼠急性毒性 2.1.1中毒症状
2.1.2实验结果与分析
表4单一急性毒性实验前后小鼠体重变化
农药
浓度设置（mg/L）
组再分为5 个处理组( 以单一农药24h 半致死浓度LC50作为1 个毒性强度单位) . 每次实
验分别取相应的2 种农药的单一对照组和5 个处理组, 每处理组设3 个重复. 给药后观察
24h,记录动物中毒表现和死亡情况以及体重变化情况。对死亡动物和试验结束时的存活动物
处死解剖。用概率单位法计算PQ的LD50及其95%可信区间。