总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性评估
总蛋白检测标准操作规程
利用Westgard多规则质控方法（12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
65-85g/L
11.检验结果的解释
仪器加样针、比色杯、管路等未清洗干净时可能对试验结果产生影响。
反应曲线异常时需进行确认，干扰物质超出限度时需进行确认。
高度溶血可导致结果偏高。
14.参考文献
14.1《全国临床检验操作规程》
14.2《试剂使用说明书》
14.3《校准品使用说明书》
14.4《临床生物化学检验质量管理与操作规程》
当发生以下情况时建议重新校准：变更试剂批号;质控值发生显著偏移;生化分析仪进行了较大维护。
9.质量控制程序
9.1质控品来源
BACKMAN质控品，上海市临检中心提供
9.2质控品浓度
低/中/高三个浓度
9.3储存条件
复溶后于-20℃冷冻保存可稳定1个月。
9.4使用方法
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温，轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
试剂
硫酸铜
3.0g/L
酒石酸钾钠
9.0g/L
氢氧化钠
0.6mol/L
碘化钾
5.0g/L
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
546nm
辅助波长
700nm
反应方法
终点法
反应方向
向上
反应温度
37℃
试剂
250ul
5.3注意事项
推荐选用血清，因为血浆含纤维蛋白，故肝素抗凝血浆的TP值一般比血清高。标本应避免溶血、脂血、黄疸。
蛋白质测定方法之双缩脲法(Biuret法)
双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。
在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。
凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。
测定范围为1~10mg蛋白质。
干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris 缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。
主要的缺点是灵敏度差。
因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。
（二）试剂与器材1.试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml 的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。
如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。
牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。
（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4•5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。
此试剂可长期保存。
若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。
2.器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。
（三）操作方法1.标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。
充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。
用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。
双缩脲法测定血清总蛋白的方法学评价
双缩脲法测定血清总蛋白的方法学评价吴文钦（广东医学院医学检验学院广东-东莞 523808）摘要：目的对双缩尿法测定血清总蛋白进行方法性能评价，达到提高分析方法质量的目的。
方法配制双缩脲试剂，并用所配制的双缩脲试剂与标准血清总蛋白进行批内重复性试验、回收试验以及线性范围评价试验，从而评价双缩尿法测定血清总蛋白的精密度、准确度和线性范围。
结果用分光光度计测定波540nm 处的吸光度A，进行相关数据分析，双缩脲法测定血清总蛋白的批内重复性试验的变异系数 CV%为2.36%，回收试验平均回收率为105%，线性范围评价试验R2为0.9980。
结论在严格规范操作下，双缩脲法测定血清总蛋白的精密度高，准确度以及线性范围较好，满足临床对血清总蛋白定量测定要求，是临床测定血清总蛋白的常规方法。
关键词：双缩脲法；血清总蛋白；方法学评价Biuret method was developed for the determination of protein evaluation methodologyAbstract Objective The purpose of the double reduction of urine protein determination of serum total performance evaluation methods, to improve the quality of analytical methods.Methods Biuret test preparation, and formulated with the biuret test standard serum total protein in the assay reproducibility test, recovery test and linear range of evaluation test to evaluate the double reduction of urine assay precision of serum total protein, accuracy and linear range.Results A spectrophotometer absorbance at 540nm wave, the associated data analysis, determination of intra-assay coefficient of variation of total serum protein test reproducibility CV% was 2.36%, the average recovery recovery test 105% biuret method, linear evaluation test range R2 is 0.9980.Conclusion In the strictly regulate the operation, biuret serum total protein, high precision, accuracy and linearity better meet the clinical requirements for quantitative determination of total serum protein, serum total protein conventional methods of clinical measurement.Key words Biuret method; Total serum protein; Evaluation Methodology为满足临床医疗对实验室检验的不断要求，实验室需要不断引进新方法或者改进原有的方法。
蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验报告[整理]
![蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验报告[整理]](https://img.taocdn.com/s3/m/8630d7ff541810a6f524ccbff121dd36a32dc405.png)
生物化学实验报告姓名：学号：专业年级：组别：生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称蛋白质含量测定——双缩脲试剂法实验日期实验地点合作者指导老师评分教师签名批改日期1、实验目的1.1.掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作；1.2.掌握双缩脲试剂的配制；1.3.熟悉血清总蛋白的临床意义；1.4.了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。
二、实验原理2.1.两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子内含有两个邻接的肽键，在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应，生成紫红色络合物。
2.2.蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键（-CO-NH-），同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应，生成的紫红色络合物，且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10～120g/L范围内有良好的线性关系。
三、材料与方法：3.1.实验材料：3.1.1.实验试剂：①小牛血清；②6.0mol/LNaOH溶液；③双缩脲试剂:硫酸酮、酒石酸钾钠、碘化钾；④蛋白质标准液（70g/L）；⑤0.9%NaCl；⑥蒸馏水。
3.1.2.实验器材：①试管；②烧杯；③容量瓶；④加样枪；⑤刻度吸管；⑥玻璃棒；⑥1100分光光度计；⑦电子天平；⑧水浴锅。
3.2.实验步骤四、结果与讨论：4.1.实验现象：①选取三支洁净无损的试管，从左往右依次加入0.9%氯化钠溶液、蛋白质标准液、相应的小牛血清各0.5ml，分别命名为B试管、S试管和U试管，再分别向三支试管内加入4ml 的双缩脲试剂，溶液均成蓝色透明状。
②将三支试管放入37℃水浴锅中加热20min ，取出后，B 试管呈淡蓝色，S 试管和U 试管均成浅紫色，且S 试管的颜色比U 试管的颜色深。
（如图一）图一 水浴后三支试管颜色 图二 分光计读数U 0.1520.151 0.152 0.1517结果计算：代入公式：血清总蛋白（g/L)=(Au/As)X 蛋白质标准液浓度（g/L)，得出结果：血清总蛋白=57.493g/L 。
双缩脲法测定血清总蛋白实验报告
双缩脲法测定血清总蛋白实验报告实验报告：双缩脲法测定血清总蛋白摘要：本实验采用双缩脲法测定血清总蛋白浓度。
通过对比实验组和对照组样本的比色反应，得出了血清总蛋白的浓度。
实验结果表明，该方法简便、可靠、准确，适用于血清总蛋白的浓度测定。
实验目的：1.掌握双缩脲法测定血清总蛋白浓度的基本原理和方法。
2.了解比色法在实验中的应用及操作技巧。
3.验证双缩脲法测定血清总蛋白浓度的可靠性和准确性。
实验方法：1.取不同浓度的血清标准品6个，分别标注不同浓度和编号。
2.取待测样品6个，标注不同编号。
3.将标准品和待测样品加入10ml离心管中，每个管中各加入1ml蒸馏水。
4.在离心管中分别加入1ml蛋白试剂A和B，摇匀，并放置15分钟。
5.加入1ml无水乙醇摇匀。
6.在1ml离心管中加入1ml0.1mol/L NaOH溶液，使溶液转为蓝色。
7.在250nm处比色计测定吸光度（对照组样本的吸光度为0）。
8.计算出样品的血清总蛋白浓度。
实验结果：对照组样本吸光度为0，实验组6个样本的吸光度如下表：编号吸光度S1 0.163S2 0.344S3 0.516S4 0.688S5 0.860S6 1.032标准品的吸光度如下表：编号吸光度浓度G1 0.163 0.7g/LG2 0.344 1.4g/LG3 0.516 2.0g/LG4 0.688 2.8g/LG5 0.860 3.4g/LG6 1.032 4.1g/L通过双缩脲法测定，我们计算出每个实验组样本的血清总蛋白浓度。
编号浓度（g/L）S1 0.7S2 1.4S3 2.0S4 2.8S5 3.4S6 4.1实验结论：1.通过双缩脲法测定血清总蛋白，准确地测定了实验组样本的血清总蛋白浓度。
2.双缩脲法测定血清总蛋白浓度的方法简便、可靠、准确，适用于血清总蛋白浓度测定。
总蛋白测定(双缩脲法)SOP
q 总蛋白测定（双缩脲法）SOP1.原理：所有蛋白质分子都含有肽键。
在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色的化合物。
蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系，依次可以计算蛋白质的含量。
2.方法：双缩脲法3.试剂：总蛋白试剂其含量为氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mol/L碘化钾20mol/L硫酸铜12mol/L4.储存条件及有效期：（1）原包装试剂在2℃-8℃避光贮存，有效期36个月。
（2）试剂开盖后在2℃-8℃避光保存，稳定期30天。
5. 样本要求：（1）样本种类：新鲜无溶血血清。
（2）样本采集：取空腹静脉血 3.0ml，置于带分离胶试管中，标本采集后，3000r/min离心5min，分离血清，立即密封送检。
（3）样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。
（4）样本保存：密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。
6. 检验步骤：（1）开生化仪见生化仪的SOP。
（2）操作步骤：参数设置；试剂装载；校准；质控；样本装载；测定；结果审查；报告。
a.参数设置b.试剂装载每天在生化仪上进行试剂检查，检测的样本数，如发现量不多或不能满足当天需要，则需要加试剂，注意同一批号，不同批号的不能混用。
c.校准换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。
d.质控在做样本之前每天做质控，质控符合要求才可以做样本，不符合要求需要做校准，做完校准后，用校准品当样本来测，做质控。
e.样本装载样本符合要求，放在试管架上，编号，上机检测。
f.测定g.结果审查h.报告7. 参考值55-85g/L8 .临床意义：+(1) 血清总蛋白浓度增高a.血清中水分减少，而使总蛋白浓度相对增高。
凡体内水分的排出大于水分的摄入时，均可引起血浆浓缩，尤其是急性失水时（如呕吐，腹泻，高热等）变化更为显著，血清总蛋白浓度有时可达100-150 g/L。
单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的对比分析
单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的对比分析发布时间：2022-01-25T07:22:16.075Z 来源：《中国科技人才》2021年第29期作者：蒋炳姣[导读] 国际临床化学协会(IFCC)建议，在严格控制条件下，推荐使用双缩脲法测定血浆总蛋白，这也使得该检测方法在临床中广泛应用。
广西冠峰生物制品有限公司广西南宁 530299摘要:目的：探究在对血浆总蛋白进行测定时，应用单试剂与双试剂双缩脲法测定的结果对比。
方法：随机选择我公司血浆标本100例，分为70例脂浊标本以及30例正常血浆标本，分别采用单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白，并将结果进行对比分析。
结果：单试剂双缩脲法测定中，对正常血浆组标本与4.00 <TG<10.00 mmoL/ L组、TG >10 .03 mmoL/ L组标本测定结果比较，存在明显差异（P＜0.05），双试剂双缩脲法测定中，对正常血浆组标本与4.00 <TG<10.00 mmoL/ L组、TG >10 .03 mmoL/ L组的标本测定结果比较，存在明显差异（P＜0.05）。
但是单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的结果比较，三组均不存在明显差异（P＞0.05）。
结论：总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒的检测结果无明显偏差，为体现检测结果表达更完整，建议实验室使用双试剂盒检测血浆样本。
关键词:单试剂；双试剂；双缩脲法；血浆总蛋白国际临床化学协会(IFCC)建议，在严格控制条件下，推荐使用双缩脲法测定血浆总蛋白，这也使得该检测方法在临床中广泛应用。
既往研究表明，对于脂浊标本，通过双试剂双缩脲法测量其血浆总蛋白的干扰是已知的，并且脂质混浊度越显著，干扰越大[1]。
另外如果应用单试剂双缩脲法测定时，由于标本中存在黄疸、油腻浑浊、溶血的影响，不适合自动分析，同时也存在样品空白干扰的情况。
而有条件的实验室，通过双试剂双缩脲法评估血浆蛋白质的含量，可以有效地提高对报告结果的准确性[2]。
总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)
总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)简介：总蛋白(T otal Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成。
对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。
目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。
Leagene 总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。
可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm 。
双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 取1ml 蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准(BSA)中，充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
2、 样本处理：血清、血浆样本直接取50μl 检测。
对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水=1：9比例，加入9倍体积的生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，2500g 离心10min ，取50μl 上清待检。
3、 TP 测定操作，按下表依次加入试剂：编号 名称TC0547100T TC0547200T Storage试剂(A): 双缩脲试剂 250ml 500ml 4℃ 试剂(B): 蛋白标准(BSA) 20mg 20mg RT 试剂(C): 蛋白标准配制液 1.5ml 1.5ml RT 试剂(D): 双缩脲空白试剂 50ml 100ml 4℃ 试剂(E): ddH 2O 1ml2mlRT使用说明书1份空白管 标准管 待测管ddH 2O(ml)0.05 蛋白标准溶液(如1mg/ml)(ml) 0.05 待检样品(血清、血浆、组织)(ml)0.05双缩脲试剂(ml) 2.5 2.5 2.54、混匀, 37℃孵育。
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总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性评估目的探讨总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒检测结果的一致性。
方法参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）EP9-A2文件的要求，以双试剂盒为参比方法、单试剂盒为待评方法，使用患者新鲜血浆标本进行方法比对及偏倚评估。
结果回归方程Y=1.0064X+0.2168，相關系数r=0.9984，不同医学决定水平处的偏倚均小于我国卫生行业标准《WS/T 403-2012 临床生物化学检验常规项目分析质量指标》所规定的总允许误差的1/2。
结论总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒的检测结果具有良好的一致性，差异临床可接受，其检测报告可使用相同的参考区间，但仍建议临床实验室使用双试剂盒检测患者样本。
Abstract：Objective To investigate the consistency of the results of the total protein biuret method single kit and double kit.Methods According to the requirements of the American Society for Clinical and Laboratory Standards（CLSI）EP9-A2 document，the double kit were used as the reference method，the single kit was used as the method to be evaluated，and the patient’s fresh plasma samples were used for method comparison and bias evaluation.Results The regression equation Y=1.0064X+0.2168，the correlation coefficient r=0.9984，the bias at different medical decision levels is less than the total specified in China’s health industry standard “WS/T 403-2012 Clinical Biochemical Inspection Conventional Project Analysis Quality Index”.Allow 1/2 of the error.Conclusion The results of single kit and double kit of total protein biuret method were in good agreement with each other，the difference was acceptable in clinic.The same reference range could be used for the test report，but it was still recommended that the clinical laboratory should use double kit to detect the patient sample.Key words：Total protein；Biuret method；Bias assessment；Consistency总蛋白（total protein，TP）是血清或血浆所含各种蛋白质的总称，临床上常通过双缩脲法（biuret method）检测血清或血浆TP含量及其组分，用以评价患者的营养状态、消化功能及肝脏合成功能等。
相关文献表明，该方法对肝脏疾病、肾脏疾病、出血性疾病和免疫性疾病等的诊疗和愈后判断具有重要价值[1-3]。
随着技术的不断发展，试剂盒的性能水平不断提高，部分厂家在TP测定单试剂盒的方法基础上开发了双试剂盒，以减小标本质量对检测结果的干扰，保障检测结果的准确性。
本文参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）颁布的EP9-A2文件[4]要求，使用患者新鲜血浆标本对单试剂盒和双试剂盒进行方法比对和偏倚，探讨了两试剂盒检测结果的一致性，现报道如下。
1 材料与方法1.1仪器与试剂日立7600全自动分析仪；总蛋白双缩脲法测定单试剂盒与双试剂盒均由四川迈克提供，批号为1117041，仪器检测参数均严格按照试剂说明书设置；配套生化复合校准品由四川迈克提供，批号为0518061，量值严格溯源至YY/T1195-2011血清总蛋白参考测量方法。
低、中、高三水平液体生化多项质控品由美国伯乐提供，批号为45771～45773。
1.2标本随机选择2018年8月1日～10日于遂宁市中心医院就诊的80例门诊患者，并以成都瑞琦公司生产的肝素钠抗凝真空采血管采集患者静脉血 3 ml，充分混匀后以4000 rpm的参数离心5 min，及时分离血浆。
所有标本均无溶血、黄疸和脂浊，其检测结果均在线性范围内，且至少50%标本的检测结果处于参考区间之外。
1.3方法1.3.1标本检测参照EP9-A2文件[4]的要求，以双试剂盒为参比方法、单试剂盒为待评方法，使用患者新鲜血浆标本进行方法比对及偏倚评估。
标本检测前对仪器常规保养和校准，且3个浓度水平的室内质控均在控。
每天以1～8和8～1的顺序检测8份新鲜标本，连续检测10 d，共检测80份样本。
所有标本均于采样后2 h内完成检测。
1.3.2离群值检验按照EP9-A2文件进行方法内及方法间离群值检验[5]。
1.3.3两试剂盒检测结果的比较及线性回归分析计算两试剂盒所有标本双份测定的均值，并对其进行配对资料t检验比较分析；然后以双试剂盒每份标本双份测定的均值为X轴、单试剂盒每份标本双份测定的均值为Y轴绘制散点图，从而得到两试剂盒间检测结果的线性回归方程（Y=bX+a）及其相关系数（r）；并以双试剂盒每份标本双份测定的均值为X轴、两试剂盒每份标本双份测定的均值差为Y轴绘制偏倚图。
当r≥0.975则表示X取值范围合适，可用直线回归分析来评估斜率（b）和截距（a）；若r<0.975则需扩大X取值范围，增加样本量后再重新分析全部数据[4，5]。
1.3.4偏倚评估根据线性回归方程计算单试剂盒在45 g/L、60 g/L和85 g/L 这3个浓度水平处的预期偏倚（SE%）[5，6]，SE%={（b-1）×X+a}×100/X，然后以卫生行业标准WS/T 403-2012[7]中TP的总允许误差（TEa）的1/2 为临床可接受水平（即SE%≤1/2TEa），表示两试剂盒检测结果具有一致性。
TP的TEa 为靶值±5%。
1.4统计学方法使用SPSS 19.0统计软件及Excel2007软件进行数据分析处理。
计量资料以（x±s）表示，组间比较采用配对资料t检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果2.1离群值检验经检验，所有标本方法内均未见离群值；而方法间的离群值检验时仅发现1份样本存在离群值，经分析确认为甘油三酯过高所致，删除此标本检测数据后增加标本继续分析。
2.2两试剂盒检测结果的比较及线性回归分析单试剂盒TP检测结果为（65.94±14.41）g/L，双试剂盒TP检测结果为（65.30±14.29）g/L，两试剂盒间检测结果差异具有统计学意义（t=6.920，P＜0.05）。
经线性回归分析，其回归方程为Y=1.0064X+0.2168，r=0.9984，见图1、图2。
2.3两试剂盒检测结果的一致性单试剂盒在45 g/L、60 g/L和85 g/L这3个Xc的SE%分别为1.12、1.00和0.90，均小于1/2TEa。
这说明单试剂盒的SE%临床可接受，两试剂盒检测结果具有良好的一致性。
3 讨论TP检测具有国际公认的参考方法及参考物质，从而促进了TP检测的标准化工作，保障了不同厂家试剂间检测结果的准确性和一致性。
但在临床工作中发现，使用双缩脲法单试剂盒检测血清或血浆TP时，其检测结果容易受到标本质量的影响，如溶血、脂浊等将使检测结果假性增高。
为解决这一影响因素，部分厂家研发了双试剂盒，即加标本后立即加入试剂R1，混匀并孵育5 min再以空白管调零后测定吸光度A1，然后加试剂R2，再次孵育5 min后测定吸光度A2，根据A2与A1的吸光度差值和校准曲线计算标本中TP的浓度，从而明显减小了标本质量对检测结果的影响。
因双试剂盒的成本比单试剂盒高，目前大部分实验室仍使用单试剂盒，故本文参照EP9-A2文件的要求进行方法比对及偏倚评估，以双试剂盒为参比方法、单试剂盒为待评方法，研究结果显示，单试剂盒的检测结果显著高于双试剂盒（t=6.920，P＜0.05），相关系数r=0.9984，直线回归方程为Y=1.0064X+0.2168，从图2可见偏倚点随双试剂盒双份测定均值呈随机分布，但有倾斜的趋势，斜率为0.064，截距为0.2168，在45 g/L、60 g/L和85 g/L这3个Xc的SE%均小于《WS/T 403-2012 临床生物化学检验常规项目分析质量指标》行业标准中所规定的总允许误差的1/2，说明两种试剂盒的检测结果具有一致性，差异临床可接受，其检测报告可使用相同的参考区间。
综上所述，总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒的检测结果具有良好的一致性，但仍建议临床实验室使用双试剂盒检测患者标本。
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