荧光定量分析仪

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常见荧光定量PCR仪汇总

常见荧光定量PCR仪汇总
上海浩然,达安基因,上海博尼,山东艾克韦,济南朋远,北京博凌,上海 众华,北京普生瑞等
优缺点:
LightCycler
检测通道:3通道 加热模式:离心式空气加热/冷却 升温:20℃/S 孔数:32孔 材料:玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格 实验成本:体系小,成本低 理论支持本公司PCR体系:20ul
体积大,价格贵,性能比上不如7500。
各孔板基座 96孔板
384孔
8联管
芯片板
优缺点:
ABI 7500
7500是ABI第三代PCR产品,目前ABI市场占有率最高,最成功PCR仪。 价格40万RMB,理论支持本公司PCR体系:40ul 检测孔数:兼容96孔和8联管。 检测通道:5通道,除去ROX后4通道。 加热模块:半导体加热模块,升温3℃/S 激发光源:齿钨灯。
ABI Step One / Step one plus
ABI Step one system
光源系统:LED激发+PMT扫描机制 检测孔数:48孔 检测通道:3通道 理论支持本公司PCR体系:30ul
ABI Step one plus system
检测孔数:96孔 检测通道:4通道 加热模块:半导体加热模块,升温3℃/S 具有独特的Veriflex TM 加块,控温效果大大提高 理论支持本公司PCR体系:30ul
代理公司:
达安基因,上海创萌北京鼎盛伟业等
优缺点:
ABI 7900
7900是ABI第二代PCR产品,目前最强PCR仪。价格70-80万RMB,理论
支持本公司PCR体系:40ul 1.检测孔数:支持8联管,96孔板,384孔板,Taqman 低密度表达谱芯片 2.激发光源:氩离子激光,全波长检测 3.进样时可以采用ABI自动机械臂,方便快捷 4.加热模块:半导体加热模块,升温3℃/S 缺点:

荧光定量pcr仪原理

荧光定量pcr仪原理

荧光定量pcr仪原理
荧光定量PCR仪是一种用于测量PCR反应过程中荧光信号的仪器。

其原理基于PCR反应中的DNA扩增过程以及荧光染料的发射和检测。

PCR是一种通过使用DNA聚合酶酶和特定引物,在适当的温度下连续进行反复的DNA复制过程。

PCR反应通常包含三个基本步骤:变性(解旋DNA双链),退火(引物结合到模板DNA上),和延伸(DNA聚合酶沿引物扩增目标序列)。

此过程会导致目标DNA序列数量的指数性增加。

荧光定量PCR仪中,DNA的扩增过程通常伴随着一种荧光染料的加入。

这种荧光染料会在扩增过程中与新合成的DNA结合,产生荧光信号。

荧光定量PCR仪通过在PCR反应过程中记录荧光信号的强度来测量PCR反应的进程。

仪器中的光学系统会周期性地激发荧光信号,并通过检测器检测信号的强度。

荧光定量PCR仪可以记录每一个PCR循环的荧光信号,然后使用计算机软件分析这些信号的特征,例如峰值高度或面积。

通过与已知浓度的标准样品进行比较,可以利用荧光信号的强度来定量PCR反应中的目标DNA的初始浓度。

荧光定量仪操作指南

荧光定量仪操作指南

荧光定量仪操作指南1.准备工作在使用荧光定量仪之前,需要进行一些准备工作:-打开仪器电源,并接通仪器的电源线。

-启动仪器,并等待其自检完成。

-检查仪器所需的配件是否齐全,如荧光管、滤光片等。

2.校准仪器在进行荧光定量测量之前,需要对仪器进行校准,以确保测量结果的准确性。

校准通常包括两个步骤:-波长校准:使用标准荧光溶液,根据其发射波长设置仪器的激发和发射波长。

-亮度校准:使用标准荧光溶液,根据其知名的荧光强度设置仪器的亮度。

3.准备样品在测量样品之前,需要进行一些准备工作:-根据测定要求,选择合适的荧光染料,并将其溶解在适当的溶剂中。

-在样品舱中选择合适的载体,如荧光底板或石英反射板,并将样品涂覆在载体上。

4.进行测量在开始测量之前,需要进行一些操作:-打开样品舱盖,并将载体放置在样品舱中。

-选择适当的激发波长和发射波长,并将它们设置到仪器上。

-调节仪器上的曝光时间,以确保荧光强度在仪器的线性范围内。

5.数据分析测量完成后,需要对数据进行分析:-使用仪器上的软件导出数据,并存储到计算机中。

-对数据进行统计分析,如计算平均值、标准差等。

-通过比较样品间的荧光强度,得出相应的结论。

6.清洁和维护在使用荧光定量仪完成实验后,需要进行仪器的清洁和维护工作:-关闭仪器电源,并拔下电源线。

-将使用过的载体和滤光片取下,并进行清洗。

-清洁仪器的外壳和光学系统,可以使用干净的纸巾或专门的清洁剂。

注意事项:-避免直接接触荧光管,以免对其造成损坏。

-在测量荧光强度之前,应先调节仪器的对比度和亮度,以获得清晰的图像。

-在测量过程中,尽量避免光线干扰,可在实验室内提供充足的遮光条件。

总结:以上是荧光定量仪的操作指南。

正确操作荧光定量仪是确保实验结果准确的重要步骤,希望本文对您在实验中使用荧光定量仪时有所帮助。

实时荧光定量PCR仪介绍

实时荧光定量PCR仪介绍

实时荧光定量PCR仪介绍 | QPCR的国际标准---MIQE | 联系我们仪器名称实时荧光定量PCR仪英文名称Real-Time QPCR System国产/进口进口产地/品牌美国品牌,德国制造型号Mx3000P/Mx3005P实时荧光定量PCR仪【性能参数】美国安捷伦Stratagene公司实时荧光定量PCR仪Mx3000P/Mx3005PMx3000P系统性能指标:激发光源:石英卤钨灯检测器:扫描光电倍增管(PMT)多重检测:四个光学通道,并提供用户选择的滤光系统加热系统:Peltier的热循环加热模块内置芯片在断电或连接中断时自动保存数据样品量:96孔高通量平台,反应体系10-100ul外形尺寸:33cm(宽) x 46cm(长) x 43cm(高),重量:20kgMx3000P系统参数配置:动力学范围:10个数量级激发光范围:350—750nm发射光范围:350—700nm温度均一性:+/- 0.25℃温度精确性:+/- 0.25℃升降温速率:2.5℃/秒兼容所有常规荧光染料:FAM、SYBR Green I 、Texas Red、ROX、TET 、Cy3、Cy5、HEX、JOE、VIC 、TAMRA、ALEXA Fluor 350等标准配置的滤光片组为:Cy5,HEX,FAM,ROX具有快速QPCR功能(反应时间在50分钟内)Mx3000P软件功能:•分析功能强大:通过一台计算机可连接和控制6台QPCR仪;可同时分析12个独立的96孔板;也可以在同一块板上进行和分析不同的实验•设置和运行简单:根据实验目的和方法不同,可选择多种实验设置:(多重)绝对定量PCR、相对定量PCR、Sybr Green定量及熔解曲线分析、SNP分析、Molecular Beacon熔解曲线分析等使用简便:实验条件设置、反应过程监控、数据显示分析三大功能模块从同一界面链接,直观简便•实时观测和数据分析:反应过程中可实时监测和收集荧光信号,在实验还未结束的情况下便可对现有数据进行分析提供多种数据显示模式:用户可根据自己需要选择:扩增曲线模式、熔解曲线模式、标准曲线模式、原始荧光信号模式、最终定量结果模式等•多种数据传输格式:所有结果可以原始数据的形式显示,也可输出到Excel 中作进一步分析,曲线和表格等结果可直接用于PowerPoint、Text等文档中。

荧光定量pcr仪的组成

荧光定量pcr仪的组成

荧光定量pcr仪的组成
荧光定量PCR仪主要由两部分组成:PCR系统和荧光检测系统。

1.PCR系统:主要由基因扩增热循环组件、微量荧光监测光学系统、
为电路控制系统、计算机及应用软件组成。

定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的,对于定量PCR系统来说,重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等,更重要的还在于样品孔之间的均一性,以避免微小的差别被指数级放大。

2.荧光检测系统:多色多通道检测是当今的主流趋势,仪器的激发
通道越多,仪器适用的荧光素种类越多。

荧光检测系统可以弥补背景荧光的差异,并设定域值水平,这是分析荧光数据的水平。

此外,实时荧光定量PCR仪还包括光路系统、检测器、热循环模块和分析软件等部分。

总之,荧光定量PCR仪是用于监测循环过程的荧光仪器,能够进行实时分析和数据处理,是生物学和医学研究的重要工具。

常见荧光定量PCR仪汇总

常见荧光定量PCR仪汇总

常见荧光定量PCR仪汇总常见的荧光定量PCR仪(Fluorescence Quantitative PCR Instrument)主要有以下几种:1. Applied Biosystems 7500 Fast System:该系统是ABI公司旗下产品之一,具有优秀的性能和稳定性。

其特点包括快速准确的PCR结果、高通量PCR样品处理能力以及灵活的试剂和探针选择。

该系统可应用于基因表达分析、SNP检测、病毒定量等多个领域。

2. Bio-Rad CFX96 Touch System:这个PCR仪是Bio-Rad公司的产品之一,具有高精度的温控技术和可靠的荧光检测系统。

它支持多种共轭染料和探针,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、蛋白质分析和病毒检测等多个应用领域。

3. Roche LightCycler 480 System:这是一款高通量的PCR仪,可同时处理多达384个孔的样品,适用于高通量基因表达分析和蛋白质研究。

该系统具有高分辨率荧光检测和精确的温度控制能力,可提供更准确和一致的PCR结果。

4. Thermo Fisher QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System:该PCR仪具有灵活多样的探针和染料选择,可以满足不同的研究需求。

它具有宽广的检测动态范围和高灵敏度,适用于基因表达分析、SNP分型和病毒定量等多个应用领域。

5. Qiagen Rotor-Gene Q:这是一款高通量PCR仪,可同时处理多达72个样品。

它具有快速高效的PCR扩增速度和精确的荧光检测能力,适用于基因表达分析、基因突变检测和染色体融合分析等多个研究领域。

6. Stratagene Mx3000P/QPCR System:这是Agilent Technologies旗下的产品,具有高精度和稳定性的特点。

它支持多种探针和染料,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、非编码RNA研究和表观遗传学研究等多个领域。

全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求

全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求

全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求
一、全自动荧光免疫分析仪技术要求
1、检测方法:荧光免疫层析法
2、检测时间:≤15min
★3、检测项目:N末端-B型钠尿肽原(NT-PrOBNP)、降钙素原(PCT)。

4、样本类型:全血,血清,血浆
5、样本最小用血量W75u1.
★6、检测通道,20通道,各通道能同时开展项目检测。

★7、试剂仓位:24个。

★8、加样方式:原始采血管穿刺取样(无需拔帽,无需TIP头)。

9、检测通量2100测试/小时。

10、检测参数的升级:可通过外部U盘或联网升级软件,使用新的测试卡即可完成,无需增加模块
11、内置计算机:仪器自带彩色电容式液晶触摸屏
12、连接管理:支持USB接口、RS232、RJ45接口
13、结果存储:主机存储检测数据数量,IOoOo条
二、配套试剂
三、售后服务要求:。

荧光定量pcr仪实验报告

荧光定量pcr仪实验报告

荧光定量pcr仪实验报告近年来,在不断的学习和实践中,我们有了自己的实验经验。

荧光定量 pcr仪是根据 PTI (Principle Time Agent Imaging)理论设计开发的一种测量方法,它利用荧光探针在光化学发光条件下产生具有荧光特性的光束,然后通过软件自动调整光强以计算出浓度。

荧光定量 pcr仪有很大的应用潜力,目前在许多研究领域都有广泛需求。

例如:农业科学、材料科学、环境生态、食品工业、化学、物理和化学工程等领域都有着广泛的应用空间。

本文将介绍荧光定量 pcr仪的工作原理和光化学发光法测水平之间的关系,分析使用荧光定量 pcr仪进行分析方法的适用性和局限性。

同时利用这一特性可以确定不同检测对象中不同浓度水平上相应分子量所对应关系,为研究不同分子及各分域之间分子量关系提供了重要工具。

一、荧光定量 pcr仪的工作原理荧光定量 pcr仪工作原理是将荧光探针在特定波长和光谱范围内(1-100 nm)发光,利用紫外光泵浦发光二极管产生一定波长的光,然后通过软件自动调节光强来计算出荧光值。

通过比较不同波长下的荧光强度,可得到样品中特定物质浓度的变化趋势,从而得出样品中特定物质的浓度。

它能有效地分析样品中各种物质的含量,但因波长不同,测得的数据精度也不相同。

这种方法在分子分析方面特别适用于生物样品,可以用来测定微生物以及其代谢产物或毒性物质的生物浓度;也可以用来测定某些物质中特定分子或生物受体、基因表达、蛋白质组成以及分子量的变化。

荧光定量 pcr仪可以通过监测荧光激发物发出的光来反映未知物质存在或不存在以及各种化合物在某一特定波长范围内在该特定波长范围内具有的发光强度,然后计算出各浓度水平上这些化合物各自不同的量值。

它采用一种较简单和容易操作的方法而被广泛用于检测样品中各个常见化合物到其浓度变化曲线之间关系,它不仅能精确测量样品中特定物质浓度,而且可以通过计算机软件自动计算出各组分分子量。

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D-二聚体阳性结果的解释
• <0.5ug/mL ,结合验前概率评估,中、低风险的疑似患者可排除 DVT和PE,无需再做进一步检查。 • >0.5ug/mL,不能排除静脉栓塞性疾病,应结合临床表现和其他 检查综合评估血栓性疾病的风险,必要时进行动态观察。 • 结合病人群建立 D-二聚体检测的医学决定水平(反映某一病种患 者罹患血栓的风险程度),如:孕妇、老年人 • 动态监测 短期内重复测定D-D不仅对诊断有益,而且可窥测病 情的演变。
FXIII
FXIIIa 交联纤维蛋白
X ′,Y′, D,E等碎 片
凝固
纤溶
DD,DXD, DD/E,YXD等 复合物
D-二聚体临床意义
• • • • • • 静脉血栓栓塞的排除性诊断 弥漫性血管内凝血的诊断 脑梗死的辅助诊断及预后判断 外科手术、溶栓治疗的监测 妊娠高血压综合征高凝状态的诊断及检测 ACS、肝脏疾病、恶性肿瘤的辅助诊断及预后判 断
外科手术后) 及其恢复期的筛检、监测、病情评估与疗效 判断
(准确的检测低水平的 CRP和微小变化,更 敏感)
hsCRP主要用于诊断和预测
心血管事件的发生、发 展,新生儿感染
0.5~200mg/L 全程CRP=hsCRP+常规CRP
(增强了临床高CRP标本的检测能力,同时也提高了低值的灵敏性,更利于动态监
– 由5个完全相同的非糖基化单体以 非共价键联接形成
– 每个单体每个含206个氨基酸残基( 相对分子质量23017)
C—反应蛋白( c-reactive protein ,CRP)

C-反应蛋白(CRP)的生成
• 由肝细胞在IL6、IL2、TNF刺激下 合成,炎症局部巨噬细胞也可少量 产生。 正常合成率1-10mg/d,急性炎症时 每天合成>1g。 半衰期19h,不耐热,65℃30min 破坏。 不能通过胎盘,在体内分布甚广, 除血液外,胸水、腹水、心包液、 关节液中均可测出。
响(肝脏发育不全或肝功能严重受损则会影响CRP的合成)
4.能关联疾病活动性:CRP 上升速度、幅度及持续时间与病情 及组织损伤的严重程度密切相关
常规CRP、hsCRP 、全程CRP的区别
5~160mg/L 0.5~5mg/L
hsCRP
常规CRP(低水平区灵敏度较差) 主要用于细菌感染、各种炎症过程、组织坏死与组织损伤(如
慢性肾病(CKD)是全球性的公共卫生事件 —— “冰山一角”
近些年肾透析病人数(单位:万人)
400 350 300 250 200 150 100 50 0
360
200 101 48.5
215.8
2002
☺ ☺ ☺
花费 80年代 2000亿美元/年 2008 2010 2011 2020E 90年代 4500亿美元/年 2010年(估) 超过1万亿美元 全球1/3的尿毒症其原发病是糖尿病肾病;肾小球肾炎仍是CKD的首位病因 中国CKD 发病率约为9.7 %,上海社区CKD发病率为11.8 % 中国CKD 知晓率不到10 %,至少20%的患者就诊时已到肾病晚期
• • •
C-反应蛋白(CRP)的生理作用
• 引发对侵入细胞的免疫调节和吞噬作用,与配体结合,激活补体,调 理吞噬功能,促使内源性或外源性配体物质(载有配体的病理物质或 病原体)的清除,表现为炎症反应 – 在Ca2+存在下与磷酸胆碱、DNA、组蛋白等结合 • 与凋亡坏死细胞膜脂质双层结构破坏时暴露的磷脂或外部侵入的细菌 、真菌、寄生虫的细胞壁磷酸胆碱结合
单胎妊娠hCG数值(单位:mIU/ml)
5 -50 5 - 426 18 - 7,340 1,080 - 56,500 7,650 - 229,000 25,700 - 288,000 13,300 - 254,000 4,060 - 165,400 3,640 - 117,000
注:1.上述参考范围是基于正常月经周期的孕妇,建议动态监测,以观察其递增速度。 2. 在怀孕的头4周内,βhCG水平几乎每2天翻一番,到6-7周时,大约每84个小时翻一番。 3. β –hCG 4000-6000 mIU/mL,Β-超可见胚囊
正常参考值:hs CRP:<1 mg/L; CRP:<10 mg/L
线性范围:0.5~200 mg/L
尿微量白蛋白 人绒毛膜促性腺激素HCG
正常参考值:<20 mg/L 线性范围: 5~300 mg/L
正常参考值:<10 mIU/mL
线性范围:10 mIU/mL~200000 mIU/mL
D-二聚体
CRP
细菌
巨噬细胞
CRP的生物学特点
1.反应快速,增量大,随着恢复下降也快;敏感!

感染、创伤、手术等情况下 快速上升,6~10hr 明显改变 48hr(24~72 hr)到高峰,102~103倍的 变化 半衰期6~7hr,较快反映病情的变化 例图:术后CRP等变化

CRP的生物学特点
二聚体与FDP同时检测可提高诊断效率
• 手术前D-二聚体高不是手术禁忌指标,应综合分析 • 一般情况下,3.0ug/mL以上可作为临床干预的医学决定水平,因引起
D-二聚体升高的疾病较多,需结合症状、体征及其它检查综合判断
• 妊娠妇女和健康老人排除静脉栓塞性疾病的D-二聚体cutoff值高于其它 人群
CRP与疾病的活动性及检测的临床意义
鉴别细菌或病毒感染(首选指标) 监测病情(CRP升高的程度反映炎症组织和感 染的范围.严重程度和活动性)。 监控感染(术后.产后) 抗生素疗效观察,指导和监测治疗(急性感染 性疾病时抗生素治疗的最适化,避免抗生素滥 用和耐药性) 心血管疾病的风险评估和指导治疗(独立于脂 类之外的危险因子,广泛应用于临床)
为什么要检测尿微量白蛋白 ?
微量白蛋白尿是早期肾病唯一的临床征象,尿微 量白蛋白检测是提示早期肾病十分有效的手段。 微量白蛋白尿代表糖尿病肾病尚处于经过治疗可 以避免发展为进展期肾病的早期阶段。
大量研究证明微量白蛋白尿是心血管疾病、原发 性高血压以及1、2型糖尿病发生早期心血管死亡 事件的重要、独立的风险因素。
尿肌酐与尿量有极好的相关性,且不受肾脏基底膜病变的影响, 用尿肌酐做校正可消除尿量对尿白蛋白排泌量的影响,因此ACR (尿微量白蛋白/尿肌酐及比值)能更为准确地反映肾功能状态 。
AJKD. 2007, 49 (2 ); Suppl 2: S13-S154 Diabetes Care. 2009, 32; Supp 1: S1-S61
CRP优势
标本面广,可适用于全血、血浆、血清样本的检测 反应时间短,3 分钟 即可出结果 先进的免疫荧光系统,与美国 DADE BEHRING BN 100 全自动特定蛋白仪进行比对,相关性好,相关系数R=0.9992 一卡双项(超敏+常规),线性范围广(0.5-200 mg/L), 可全面满足临床需求 正常参考值:hsCRP< 1 mg/L; CRP < 10 mg/L
在微量白蛋白尿阶段,积极联合治疗,包括良好 的血糖控制,使用ACEI 和其他抗高血压药,可 防止疾病进展为显性肾病或肾衰。
如何检测尿微量白蛋白?
24小时尿蛋白定量检测繁琐,没有增加预测价值和准确性,患 者依从性差,尿量收集亦时有误差。 某一时点的尿微量白蛋白检测易受尿量和其他因素干扰,导致假 阴性或假阳性结果。
• 不同试剂(检测系统)检测结果可比性低
• 标本溶血、凝固、放置时间对DD的测试结果影响较大,因此测定血浆 D-二聚体应避免溶血、凝固而且需及时送检标本和测定。
什么是微量白蛋白尿?
微量白蛋白尿是指尿液中血浆白蛋白排泌量 的轻度升高,在20 mg/min~200 mg/min或20 mg/L~200 mg/L之间(晨尿) 。 血浆白蛋白、尿微量白蛋白分子量均为 66000,且结构相同。 “微量”是指排泌到尿液中的白蛋白的“数 量”少,而非指泌到尿液中的白蛋白是一些 特殊类型的、“小”分子量的白蛋白。
来源:美国妊娠协会
PCT概述
• 降钙素原(procalcitonin, PCT) 是无激素活性的降钙素( calcitonin, CT) 的前肽物质 • 由116个氨基酸组成的糖蛋白、分子质量为13000。 • 半衰期为25~30h,在体内、外稳定性很好。 • 血清PCT的升高与细菌感染密切相关,在全身系统性严重 感染中PCT早期即可升高,经抗生素治疗使感染控制后血 中PCT会下降 • 在病毒感染及局部细菌感染而无全身表现的患者PCT仅轻 度升高 • PCT已被用作全身严重感染或败血症时的一个重要的观察 指标。 • 不受机体免疫抑制状态的影响。
2.病毒感染没有标志性升高:病毒主要在细胞内进行复制,一般不破坏
细胞膜,暴露CRP结合点,所以病毒感染时 CRP一般不超过 25mg/L 。在 成人,革兰氏阴性菌感染时 CRP 可高达 500mg/L, 革兰氏阳性菌和寄生虫 感染时通常可引起CRP中度升高,多为100mg/L左右。
3. 受影响因素少:不受生理活动的影响,不受化疗、放疗和激素治疗的影
D-Dimers 局限性
局限性: 特异性在50%左右 – 如果D-dimers实验结果为阳性, 其中50%病例为血栓症
– 另外50%病例为其它临床症状
• • - 炎症, - 癌症,

• •
- 血肿,
- 术后, - 出血,


- 怀孕,
- 老年人 ...
20
小结
• D-二聚体升高是继发性纤溶亢进的标志,但不是血栓形成的标志,D-
测) 三者检测血中相同的物质 (物质的唯一性,仅是检测方法和范围的差异)
常规炎症严重程度判断
常规 CRP
病毒或细菌感染 CRP 10-20 mg/L 一般细菌感染 CRP 20-50 mg/L 严重细菌感染 CRP >50 mg/L
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