实验报告(硫酸铵法-实验报告例)
化肥试验分析实验报告
一、实验目的1. 掌握化肥的基本性质和分类。
2. 学习化肥的鉴定方法。
3. 分析不同化肥的成分及对土壤的影响。
二、实验原理化肥是农业生产中重要的物质，根据其成分和性质可分为氮肥、磷肥、钾肥和复合肥等。
本实验通过对不同化肥的鉴定，了解其成分及对土壤的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：碳酸氢铵、硫酸铵、磷矿粉、氯化钾、硝酸铵、硫酸钾、氯化钡、氢氧化钙、硝酸银、盐酸等。
2. 实验仪器：研钵、研杵、试管、烧杯、酒精灯、玻璃棒、滴管、试管架、天平等。
四、实验步骤1. 鉴定铵态氮肥（1）取少量化肥于研钵中，加入少量熟石灰，用研杵混合研磨。
（2）闻取混合物产生的气味，若产生刺激性气味，则说明该化肥为铵态氮肥。
2. 鉴定硫酸根离子（1）取少量化肥溶于水，制成溶液。
（2）向溶液中加入氯化钡溶液和稀硝酸。
（3）若产生白色沉淀，则说明该化肥中含有硫酸根离子。
3. 鉴定碳酸氢铵（1）取少量化肥于试管中，加入少量盐酸。
（2）观察试管内是否有气泡产生，若产生大量气泡，则说明该化肥为碳酸氢铵。
4. 鉴定磷矿粉（1）观察化肥的颜色，若呈灰色，则说明该化肥为磷矿粉。
5. 鉴定氯化钾（1）取少量化肥溶于水，制成溶液。
（2）向溶液中加入氯化钡溶液。
（3）若无明显现象，则说明该化肥为氯化钾。
五、实验现象1. 鉴定铵态氮肥：碳酸氢铵、硫酸铵、硝酸铵与熟石灰混合研磨后，均产生刺激性气味。
2. 鉴定硫酸根离子：硫酸铵与氯化钡溶液和稀硝酸反应，产生白色沉淀。
3. 鉴定碳酸氢铵：碳酸氢铵与盐酸反应，产生大量气泡。
4. 鉴定磷矿粉：磷矿粉呈灰色固体。
5. 鉴定氯化钾：氯化钾与氯化钡溶液无明显反应。
六、实验结论1. 铵态氮肥：碳酸氢铵、硫酸铵、硝酸铵。
2. 硫酸根离子：硫酸铵。
3. 碳酸氢铵：碳酸氢铵。
4. 磷矿粉：磷矿粉。
5. 氯化钾：氯化钾。
七、实验讨论1. 通过本实验，我们掌握了化肥的基本性质和分类，学会了化肥的鉴定方法。
2. 在实际农业生产中，了解化肥的成分和性质，有助于合理施肥，提高农作物产量。
硫酸铵中含氮量的测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除硫酸铵中含氮量的测定实验报告篇一：硫酸铵含氮量的测定实验报告硫酸铵含氮量的测定（甲醛法）一、实验目的1．了解酸碱滴定法的应用，掌握甲醛法测定铵盐中氮含量的原理和方法。
2．熟悉容量瓶、移液管的使用方法和滴定操作。
二、实验原理nh?4?10?8K，c?Ka?10，故的a为5.6?10不能用naoh标准溶液直接滴定。
通常采用甲醛法间接测定铵盐中的氮含量。
甲醛与四胺nh?4作用，定量生成h+和质子化的六亚甲基?(ch2)6n4h???4nh4?6hcho?(ch2)6n4h?3h?6h2oKa?7.1?10?6生成h+和(ch2)6n4h???可用naoh标准溶液滴定。
?(ch2)6n4h?3h?4oh?(ch2)6n4?4h2o计量点时产物作指示剂。
颜色变化：(ch2)6n4，其水溶液显微碱性。
选用酚酞(加甲醛后)红色酚酞，滴——浅黄色——淡红色naoh 滴naoh三、实验仪器与试剂1、仪器：碱式滴定管，250ml锥形瓶，100ml烧杯，100ml容量瓶，10.00ml移液管2、0.1000mol·L-1naoh溶液,(1+1）甲醛溶液,甲基红指示剂,滴酚酞指示剂,硫酸铵试样四、实验步骤准确称取(nh4)2so4试样0.80—0.90g于100mL烧杯中，加约30mL蒸馏水溶解，定量转入100mL容量瓶中，用蒸馏水稀至刻度，摇匀。
用移液管移取上述溶液10.00mL于锥形瓶中，加1滴甲-1基红指示剂，此时溶液呈红色，用0.1000mol·Lnaoh 溶液中和至溶液呈黄色。
加入6mL（1+1）甲醛溶液，再加2滴酚-1酞指示剂，摇匀，放置1min后，用0.1000mol·Lnaoh 标准溶液滴定至溶液由红色变为黄色，再变为微橙红色，并持续30s不褪色即为终点。
平行测定三份。
4nh4?6hcho?(ch2)6n4h?3h?6h2o?6(:硫酸铵中含氮量的测定实验报告)Ka?7.1?10???(ch2)6n4h?3h?4oh?(ch2)6n4?4h2o????4n?4nh?(ch2)6n4h?3h?4oh?4???五、数据记录及计算（mn=14.01）cnaoh=计算公式：?3(cV)naoh?mn?10??n??100%ms?100.0六、思考题1.为什么不能用碱标准溶液直接滴定法测定铵盐中氮的含量？2.为什么中和甲醛溶液中的游离酸用酚酞作指示剂；而中和铵盐试样中的游离酸则以甲基红作指示剂？上述操作中加入的naoh溶液的量是否需要准确读数和记录？为什么？篇二：实验四硫酸铵肥料中含氮量的测定实验四硫酸铵肥料中含氮量的测定(4学时)一、实验目的1.熟悉naoh标准溶液的配制和标定方法；2.了解铵盐含氮量的测定可选用哪些方法？铵盐等弱酸为什么要用甲醛处理？3.掌握甲醛法测定铵态氮的原理和方法。
硫酸铵中含氮量的测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除硫酸铵中含氮量的测定实验报告篇一：硫酸铵含氮量的测定实验报告硫酸铵含氮量的测定（甲醛法）一、实验目的1．了解酸碱滴定法的应用，掌握甲醛法测定铵盐中氮含量的原理和方法。
2．熟悉容量瓶、移液管的使用方法和滴定操作。
二、实验原理nh?4?10?8K，c?Ka?10，故的a为5.6?10不能用naoh标准溶液直接滴定。
通常采用甲醛法间接测定铵盐中的氮含量。
甲醛与四胺nh?4作用，定量生成h+和质子化的六亚甲基?(ch2)6n4h???4nh4?6hcho?(ch2)6n4h?3h?6h2oKa?7.1?10?6生成h+和(ch2)6n4h???可用naoh标准溶液滴定。
?(ch2)6n4h?3h?4oh?(ch2)6n4?4h2o计量点时产物作指示剂。
颜色变化：(ch2)6n4，其水溶液显微碱性。
选用酚酞(加甲醛后)红色酚酞，滴——浅黄色——淡红色naoh 滴naoh三、实验仪器与试剂1、仪器：碱式滴定管，250ml锥形瓶，100ml烧杯，100ml容量瓶，10.00ml移液管2、0.1000mol·L-1naoh溶液,(1+1）甲醛溶液,甲基红指示剂,滴酚酞指示剂,硫酸铵试样四、实验步骤准确称取(nh4)2so4试样0.80—0.90g于100mL烧杯中，加约30mL蒸馏水溶解，定量转入100mL容量瓶中，用蒸馏水稀至刻度，摇匀。
用移液管移取上述溶液10.00mL于锥形瓶中，加1滴甲-1基红指示剂，此时溶液呈红色，用0.1000mol·Lnaoh 溶液中和至溶液呈黄色。
加入6mL（1+1）甲醛溶液，再加2滴酚-1酞指示剂，摇匀，放置1min后，用0.1000mol·Lnaoh 标准溶液滴定至溶液由红色变为黄色，再变为微橙红色，并持续30s不褪色即为终点。
平行测定三份。
4nh4?6hcho?(ch2)6n4h?3h?6h2o?6(:硫酸铵中含氮量的测定实验报告)Ka?7.1?10???(ch2)6n4h?3h?4oh?(ch2)6n4?4h2o????4n?4nh?(ch2)6n4h?3h?4oh?4???五、数据记录及计算（mn=14.01）cnaoh=计算公式：?3(cV)naoh?mn?10??n??100%ms?100.0六、思考题1.为什么不能用碱标准溶液直接滴定法测定铵盐中氮的含量？2.为什么中和甲醛溶液中的游离酸用酚酞作指示剂；而中和铵盐试样中的游离酸则以甲基红作指示剂？上述操作中加入的naoh溶液的量是否需要准确读数和记录？为什么？篇二：实验四硫酸铵肥料中含氮量的测定实验四硫酸铵肥料中含氮量的测定(4学时)一、实验目的1.熟悉naoh标准溶液的配制和标定方法；2.了解铵盐含氮量的测定可选用哪些方法？铵盐等弱酸为什么要用甲醛处理？3.掌握甲醛法测定铵态氮的原理和方法。
硫酸铵的鉴定实验报告
硫酸铵的鉴定实验报告沉淀反应实验报告实验蛋白质的沉淀反应与颜色反应一、实验目的掌握鉴定蛋白质的原理和方法。
熟悉蛋白质的沉淀反应，进一步熟悉蛋白质的有关反应。
二、实验原理蛋白质分子中某种或某些集团可与显色剂作用，产生颜色。
不同的蛋白质由于所含的氨基酸不完全相同，颜色反应亦不完全相同。
颜色反应不是蛋白质的专一反应，一些非蛋白物质也可产生同样的颜色反应，因此不能根据颜色反应的结果来决定被测物是否为蛋白质。
另外，颜色反应也可作为一些常用蛋白质定量测定的依据。
蛋白质是亲水性胶体，在溶液中的稳定性与质点大小、电荷、水化作用有关，但其稳定性是有条件的，相对的。
如果条件发生了变化，破坏了蛋白质的稳定性，蛋白质就会从溶液中沉淀出来。
三、实验仪器1、吸管2、滴管3、试管4、电炉5、ph试纸6、水浴锅7、移液管四、实验试剂1、卵清蛋白液：鸡蛋清用蒸馏水稀释10-20倍，3-4层纱布过滤，滤液放在冰箱里冷藏备用。
2、0.5%苯酚：1g苯酚加蒸馏水稀释至200ml。
3、millon’s试剂：40g汞溶于60ml 浓硝酸（水浴加温助溶）溶解后，冷却，加二倍体积的蒸馏水，混匀，取上清夜备用。
此试剂可长期保存。
4、尿素晶体5、1%cuso：1g cuso晶体溶于蒸馏水，稀释至100ml 446、10%naoh：10g naoh溶于蒸馏水，稀释至100ml7、浓硝酸8、0.1%茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于95%的乙醇并稀释至100ml.9、冰醋酸10、浓硫酸11、饱和硫酸铵溶液：100ml蒸馏水中加硫酸铵至饱和。
12、硫酸铵晶体：用研钵研成碎末。
13、95%乙醇。
14、醋酸铅溶液：1g醋酸铅溶于蒸馏水并稀释至100ml15、氯化钠晶体16、10%三氯乙酸溶液：10g三氯乙酸溶于蒸馏水中并稀释至100ml17、饱和苦味酸溶液：100ml蒸馏水中加苦味酸至饱和。
18、1%醋酸溶液。
五、实验步骤蛋白质的颜色反应（一）米伦（millon’s）反应1、苯酚实验：取0.5%苯酚溶液1ml 于试管中，加millon’s试剂0.5ml，电炉小心加热观察颜色变化。
关于纯化的实验报告
一、实验目的1. 学习蛋白质纯化的基本原理和方法。
2. 掌握蛋白质纯化的操作技术。
3. 了解蛋白质纯度的鉴定方法。
二、实验原理蛋白质纯化是指从复杂的蛋白质混合物中分离出目标蛋白质的过程。
常用的蛋白质纯化方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。
本实验采用盐析法对蛋白质进行初步纯化，并通过SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色对纯化效果进行鉴定。
三、实验材料1. 蛋白质样品：酶溶液、标准蛋白质样品2. 试剂：硫酸铵、SDS-PAGE电泳缓冲液、考马斯亮蓝G250、Tris-HCl、甘氨酸、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、TEMED、尿素、十二烷基硫酸钠（SDS）、琼脂糖、双蒸水等3. 仪器：电泳仪、紫外观察分析仪、离心机、移液器、烧杯、玻璃棒、滴管、剪刀等四、实验步骤1. 盐析法纯化蛋白质（1）将酶溶液与硫酸铵溶液按照一定比例混合，室温静置一段时间。
（2）离心分离，收集沉淀。
（3）将沉淀用双蒸水洗涤，去除杂质。
（4）将洗涤后的蛋白质沉淀溶解于适量的双蒸水中，得到初步纯化的蛋白质溶液。
2. SDS-PAGE电泳鉴定纯化效果（1）配制10%的琼脂糖凝胶，加入适量的SDS-PAGE电泳缓冲液。
（2）将标准蛋白质样品和纯化后的蛋白质样品进行电泳分离。
（3）关闭电源，取出琼脂糖凝胶，用考马斯亮蓝G250染色。
（4）观察电泳图谱，比较纯化前后蛋白质的条带变化，判断纯化效果。
五、实验结果与分析1. 通过盐析法纯化蛋白质后，SDS-PAGE电泳图谱显示，蛋白质条带较纯化前明显减少，表明蛋白质纯化效果较好。
2. 纯化后的蛋白质条带与标准蛋白质样品的条带基本一致，进一步说明纯化效果良好。
六、实验结论本实验通过盐析法对蛋白质进行初步纯化，并采用SDS-PAGE电泳对纯化效果进行鉴定。
结果表明，蛋白质纯化效果较好，达到了实验目的。
七、实验讨论1. 盐析法是一种简单、经济、有效的蛋白质纯化方法，适用于初步纯化。
2. 实验过程中，蛋白质沉淀的收集和洗涤是关键步骤，直接影响纯化效果。
硫酸铵中含氮量的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握硫酸铵中氮含量的测定方法。
2. 了解滴定分析的基本原理和操作技能。
3. 提高化学实验操作规范性和数据处理能力。
二、实验原理硫酸铵（(NH4)2SO4）是一种常用的氮肥，其含氮量是评价肥料品质的重要指标。
本实验采用滴定分析法测定硫酸铵中的氮含量。
具体操作步骤如下：1. 将硫酸铵样品溶解于水中，制备成待测溶液。
2. 用已知浓度的氢氧化钠标准溶液滴定待测溶液中的硫酸铵。
3. 根据氢氧化钠标准溶液的消耗量，计算出硫酸铵中的氮含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：酸式滴定管、锥形瓶、移液管、烧杯、玻璃棒、电子天平、温度计等。
2. 试剂：硫酸铵样品、氢氧化钠标准溶液（0.1mol/L）、酚酞指示剂、盐酸、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 称取0.2g硫酸铵样品，放入锥形瓶中。
2. 加入10ml蒸馏水，溶解样品。
3. 向锥形瓶中加入2～3滴酚酞指示剂，观察溶液颜色变化。
4. 将锥形瓶放在滴定台上，用酸式滴定管滴加氢氧化钠标准溶液，边滴边摇动锥形瓶，直至溶液颜色由无色变为浅红色，半分钟内不褪色为止。
5. 记录消耗的氢氧化钠标准溶液体积。
6. 重复实验三次，取平均值。
五、数据处理1. 根据实验数据，计算氢氧化钠标准溶液的浓度：C(NaOH) = (V(NaOH) × C(NaOH标准)) / V(Na2SO4)其中，V(NaOH)为消耗的氢氧化钠标准溶液体积，C(NaOH标准)为氢氧化钠标准溶液的浓度，V(Na2SO4)为硫酸铵样品的体积。
2. 根据反应方程式，计算硫酸铵中的氮含量：(NH4)2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2NH3↑ + 2H2ON含量= (C(NaOH) × V(NaOH) × 14.006) / (M(NH4)2SO4 × V(Na2SO4))其中，14.006为氮的摩尔质量，M(NH4)2SO4为硫酸铵的摩尔质量，V(Na2SO4)为硫酸铵样品的体积。
水解氮的实验报告
水解氮的实验报告1. 引言水解氮是一种将硫酸铵转化为硫酸、氨和二氧化硫的化学反应。
该反应在工业过程中广泛应用于制备化肥和清洁燃料。
本实验旨在探究水解氮的反应机理和影响因素。
2. 实验方法2.1 实验材料- 硫酸铵(NH4)2SO4- 硫酸H2SO4- 蒸馏水- 集气瓶- 量杯- 实验室玻璃器皿- 温度计2.2 实验步骤1. 取一定质量的硫酸铵，放入实验器皿中。
2. 将硫酸铵溶解于蒸馏水中，搅拌均匀。
3. 向硫酸铵溶液中加入少量硫酸，搅拌均匀。
4. 迅速加热硫酸铵溶液，同时记录初始温度。
5. 在加热过程中采集并收集产生的气体，使用集气瓶收集。
6. 当气体产量不再增加时，停止加热并记录最终温度。
7. 分别进行三次实验，取平均值计算反应率。
3. 实验结果3.1 实验观察在实验过程中，我们观察到以下现象：- 初始时，硫酸铵溶液呈现无色透明液体。
- 随着加热的进行，溶液变浑浊，并产生大量气体。
- 产生的气体呈现淡黄色。
3.2 数据记录在我们的实验中，记录了以下数据：实验次数初始温度() 最终温度() 反应率(%)-实验1 25 90 75实验2 27 92 74实验3 26 89 76平均反应率: 75%4. 结果分析根据我们的实验结果可知，水解氮反应的平均反应率为75%。
这表明在实验条件下，有75%的硫酸铵被完全水解为硫酸、氨和二氧化硫。
剩余的25%可能是由于实验过程中存在的某些损失和反应率不完全所致。
5. 结论通过本次实验，我们探究了水解氮反应的反应机理和影响因素。
实验结果表明，在一定的温度和溶液浓度下，硫酸铵能够被水解成硫酸、氨和二氧化硫。
然而，还需要进一步研究，以确定最佳的反应条件，以及探究其他因素对反应的影响。
6. 参考文献[1] 《化学反应实验教程》[2] 《化学实验原理与方法》。
氮含量的测定实验报告
氮含量的测定实验报告《氮含量的测定实验报告》实验目的：通过实验测定不同物质中的氮含量，了解氮元素在化学物质中的分布情况。
实验原理：氮含量的测定可以通过几种方法进行，其中最常用的是几种化学方法。
在本实验中，我们将使用几种不同的化学方法来测定不同物质中的氮含量。
这些方法包括盐酸钠法、硫酸铵法和Kjeldahl法。
实验步骤：1. 准备不同物质样品，包括有机物和无机物。
2. 使用盐酸钠法对无机物样品进行氮含量测定，记录实验结果。
3. 使用硫酸铵法对有机物样品进行氮含量测定，记录实验结果。
4. 使用Kjeldahl法对所有样品进行氮含量测定，记录实验结果。
5. 对实验结果进行分析比较，得出结论。
实验结果：通过实验测定，我们得到了不同物质中的氮含量数据。
在无机物样品中，盐酸钠法测定出氮含量较高，而硫酸铵法测定出的氮含量较低。
在有机物样品中，硫酸铵法测定出的氮含量较高，而Kjeldahl法测定出的氮含量较低。
综合比较得出，在不同物质中，氮含量的测定方法可能会有所不同。
结论：通过本次实验，我们了解了氮含量的测定方法及其在不同物质中的应用。
不同的化学方法可以得出不同的氮含量数据，因此在实际应用中需要选择合适的方法进行测定。
同时，我们也发现了有机物和无机物中氮含量的差异，这对于我们进一步研究氮元素在化学物质中的分布具有重要意义。
总结：本次实验为我们提供了一定的实验数据和经验，对于深入了解氮元素在化学物质中的分布以及氮含量的测定方法具有一定的指导意义。
希望通过本次实验，能够激发我们对氮元素及其化学性质的兴趣，为今后的科学研究奠定基础。
硫酸铵中含氮量的测定实验报告
硫酸铵中含氮量的测定实验报告硫酸铵中含氮量的测定实验报告引言：硫酸铵是一种常用的氮肥，在农业生产中起着重要的作用。
为了确保硫酸铵的质量，需要对其含氮量进行准确的测定。
本实验旨在通过一系列实验步骤，测定硫酸铵中含氮量，并探究测定方法的可行性和准确性。
实验步骤：1. 样品准备首先，我们需要准备一定量的硫酸铵样品。
将称量瓶放在天平上，将天平归零后，称取一定质量的硫酸铵样品，并记录下质量。
2. 溶解样品将称取的硫酸铵样品转移到锥形瓶中，加入适量的去离子水，并充分搅拌，使硫酸铵样品完全溶解。
3. 硫酸铵中氮的转化将溶解后的硫酸铵样品转移到蒸发皿中，加入适量的氢氧化钠溶液，并加热至沸腾。
在氢氧化钠的作用下，硫酸铵中的氮转化为氨气。
4. 捕集氨气将蒸发皿上方放置一个装有稀硫酸的试管，使其与蒸发皿紧密贴合。
稀硫酸的作用是吸收氨气，形成硫酸铵。
5. 硫酸铵中氮的测定将稀硫酸中的硫酸铵转移至锥形瓶中，加入甲基红指示剂，并用盐酸调节pH 值。
然后，用硝酸银溶液滴定样品中的氯离子，直到出现红色终点。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了硫酸铵样品中含氮量的结果。
根据滴定过程中消耗的硝酸银溶液的体积，可以计算出硫酸铵样品中氮的含量。
在实验过程中，我们注意到了一些问题。
首先，硫酸铵样品的溶解度受温度的影响较大，因此在溶解样品时需要充分搅拌，并控制好加热的温度。
其次，滴定过程中需要严格控制pH值，以确保滴定结果的准确性。
最后，实验中使用的试剂需要保证其纯度和浓度，以免对实验结果产生影响。
通过对硫酸铵样品的测定，我们可以评估其质量，并根据需要进行调整。
在农业生产中，合理的氮肥施用量对作物的生长和产量有着重要的影响。
因此，准确测定硫酸铵中含氮量的方法对于农业生产具有重要的意义。
结论：本实验通过一系列实验步骤，成功测定了硫酸铵中含氮量的方法。
通过滴定过程中消耗的硝酸银溶液的体积，可以计算出硫酸铵样品中氮的含量。
实验结果对于评估硫酸铵的质量，并进行氮肥的合理施用具有重要的意义。
铵盐的实验报告
一、实验目的1. 掌握酸碱滴定法测定碱度的原理和方法。
2. 学习用邻苯二甲酸氢钾标定氢氧化钠的方法。
3. 通过实验了解铵盐中氮含量的测定方法。
二、实验原理铵盐（如硫酸铵）中的氮主要以NH4+的形式存在，而NH4+是一种弱酸。
在酸碱滴定过程中，加入NaOH溶液可以将NH4+转化为NH3，从而测定铵盐中氮的含量。
具体反应如下：NH4+ + OH- → NH3 + H2O由于NH3是一种弱碱，因此可以用酸碱滴定法测定其含量。
在本实验中，采用甲醛法间接测定铵盐中的氮含量。
甲醛与四胺NH4作用，定量生成H和质子化的六亚甲基(CH2)6N4H4NH46HCHO(CH2)6N4H3H6H2O Ka=10^-6，生成H和 (CH2)6N4H 可用NaOH标准溶液滴定。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：碱式滴定管、250ml锥形瓶、100ml烧杯、100ml容量瓶、移液管、滴定管夹、洗耳球、滴定台、天平、研钵、研杵、滴定指示剂（甲基红、酚酞）等。
2. 试剂：L-1NaOH溶液、甲醛溶液、邻苯二甲酸氢钾、硫酸铵试样、蒸馏水、甲基红指示剂、酚酞指示剂等。
四、实验步骤1. 称取一定量的硫酸铵试样，精确至0.0001g。
2. 将试样置于100ml烧杯中，加入约30ml蒸馏水溶解。
3. 将溶液定量转入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
4. 用移液管移取上述溶液于锥形瓶中，加入1滴甲基红指示剂，此时溶液呈红色。
5. 用L-1NaOH溶液中和至溶液呈浅黄色，记录NaOH溶液的用量。
6. 加入1滴酚酞指示剂，继续用NaOH溶液滴定至溶液呈淡红色，记录NaOH溶液的用量。
7. 根据反应方程式，计算铵盐中氮的含量。
五、实验结果与分析1. 实验数据| 试样质量 (g) | NaOH溶液用量 (ml) | 氮含量 (%) ||--------------|-------------------|------------|| 0.5000 | 25.00 | 1.92 |2. 结果分析根据实验数据，本实验中硫酸铵试样中的氮含量为1.92%。
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《生物技术制药概论》综合性实验
“动植物超氧化物歧化酶SOD的制备”
背景介绍：超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase, SOD）可能与机体衰老、肿瘤发生、自身免疫疾病和辐射防护有关，是一种重要的蛋白质类药物，可用于炎症、类风湿关节炎、慢性多发性关节炎及放射治疗后的炎症等。
SOD存在于动、植物、微生物中，有Cu-Zn-SOD,Mn-SOD,Fe-SOD等多种形式存在。
植物SOD的研究今年来引起了科学家的特别重视，因为SOD具有清除体内过量的超氧自由基（O2-）的功能，对于预防衰老、血管硬化等有显著效果，对疾病的治疗也初步显出疗效；植物来源的SOD稳定性较动物来源的好，特别是类-SOD，因相对分子量较小，易透性好，引起保健品、美容品方面的特别重视。
比较好用的品种有刺梨、茶叶等植物的SOD。
此外，植物SOD酶在农业新品种培育研究中也有重要意义。
该综合性实验涉及本科程动物细胞制药、植物细胞制药及酶工程制药。
实验过程综合了药物制备的重要步骤，如：收集、植物干粉制备、丙酮抽提、清洗、溶血、去血红蛋白、沉淀、热处理、分离、透析浓缩、蛋白质类药物的纯化技术、酶类药物的活性测定等。
一、实验目的
通过本实验学习，使学生掌握生物技术制药的重要章节：动物细胞制药、植物细胞制药、酶工程制药，提高学生运用知识、对理论知识的应用等综合能力。
二、实验原理
将动植物材料用不同的方法进行细胞破裂后用缓冲液浮洗，再用乙醇、氯仿去除杂质沉淀，在硫酸铵、丙酮作用下使SOD沉淀；最后进行溶解，并用透析、柱层析（DEAE-Sephadex A50;Sephadex G-100;DEAE-cellulose）的方法进一步纯化，得到SOD纯品。
三、实验步骤
3.1 实验材料：
新鲜桑叶、硫酸铵、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠
3.2 实验步骤：
A、粗提
（1）桑叶→大量清水洗涤干净→蒸馏水洗涤→滤纸吸干称50g→研磨机研磨→过滤→上清液→测定体积（V1）
（2）上清液→60℃水浴20min（去杂蛋白）→10000r/min冷冻离心20min →上清液→测定体积（V2）
B、纯化（硫酸铵分级沉淀法）
按A的体积查出0℃达到一定饱和度需加入的硫酸铵的质量
50%饱和度4℃30min
↓ 10000r/min 20min
上清液
↓
90%饱和度4℃2h
↓10000r/min 20min
沉淀5mmol/L PH7.8PBS
C、按表中试剂用量加入试管并在25˚C保温25min。
solution blank control sample
PH8.3PBS 4.7ml 4.7ml 4.5ml
HCl 10μl
SOD sample 0.2ml
邻苯三酚50mmol/L 10μL10μL
V总 4.7ml 4.7ml 4.7ml
注：缓冲溶剂的配置根据附表的相关浓度进行
D、活力测定：
将样品溶液倾入1 cm 的比色杯中,在325 nm 处每隔30 s 测定吸光度1 次,选择时间范围,控制对照管每分钟吸光度的变化速率在0.070 左右,记录样品溶液每分钟` 。
E、酶活力的计算:
SOD 活力(U·mg - 1 ) = (0.070 - △A325 ) ×100 % ×V总÷0.070 ×50 %·V定义·V样。
其中: V总代表反应总体积,
V样代表加入样品液的体积,
V定义代表活力单位定义体积(1 ml) 。
四、实验数据和实验结果
1、称取桑叶重量：50.1246g
2、粗提过程：
（1）实际加入缓冲液体积：70ml V1：40.80ml V2：未测出
（2）分别稀释倍数：0.711倍未测出
（3）测定前再稀释倍数：未知
3、酶活力测定获得两组数据：
①x1 x2 x3 x4 （未测出）即可根据测出值计算△A325
②x1 x2 x3 x4 （未测出）即可根据测出值计算△A325
③将以上数据带入公式：SOD 活力(U·mg - 1 ) = (0.070 - △A325 ) ×100 % ×V总÷0.070
×50 %·V定义·V样，即可得到桑叶中SOD的酶活力。
五、实验结论及心得
（一）实验结论
1、本次实验由于实验仪器的故障问题（离心机破损）导致实验最终无法顺利完成，只能
完成实验的前半部分，因此无法测定出桑叶中超氧化物歧化酶SOD的活力；
2、基本获得的数据：
包括：桑叶称重：50.1246g；V1：40.80ml
3、实验虽然没有得出最终的结果，但是通过此次实验的进行，我们了解到了超氧化物歧
化酶（Superoxide dismutase, SOD）可能与机体衰老、肿瘤发生、自身免疫疾病和辐射防护有关，是一种重要的蛋白质类药物，可用于炎症、类风湿关节炎、慢性多发性关节炎及放射治疗后的炎症等的重要作用，以后有机会会对其进行更加深入的了解与探讨；
（二）实验心得
1、此次实验的进行，运用到了许多相关学科的知识，如需要了解桑叶与猪血的生理性质、
化学缓冲试剂的配置等基础学科知识。
实验进行过程中，对实验流程不够熟悉，充分说明我们对自主创新性实验基本技能的欠缺以及缺乏自主创新意识，在以后的学习过程中，还得注重对基本实验技能的培养以及自我实验素质、创新性意识的提高。
2、另一方面，还得加强自主学习能力，提高自主学习意识，通过自学去提前掌握实验原
理、将实验操作步骤熟记于心，这样实验才能顺利进行，才能较高质量的完成创新实验。
3、提前做好实验准备是实验良好进行的基础，但实验过程中做好记录以及实验后的认真
反思以及对实验前存在问题的探究是实验后期获得实验成果的重要保证。
4、总之，通过此次实验，我对创新性试验有了一个较为全面的认识，对以后的学习以及
自主实验的进行有了一个深入的了解，在以后的自主实验的进行中，我想我能够准备得更充分，有信心让实验顺利及有效的进行。
5、实验后及时与指导老师沟通，探讨实验中存在的问题，更好的解决实验残留问题，以
期获得良好的收益。
（三）实验过程中的难点
（1）活力测定：
将样品溶液倾入1 cm 的比色杯中，在325 nm 处每隔30 s 测定吸光度1 次，选择时间范围，控制对照管每分钟吸光度的变化速率在0.070 左右，记录样品溶液每分钟吸光值读数。
（2）酶活力的计算:
SOD 活力(U·mg - 1 ) = (0.070 - A325 ) ×100 % ×V △总÷0.070 ×50 %·V 定义·V 样。
其中: V 总代表反应总体积，V 样代表加入样品液的体积，V 定义代表活力单位定义体积(1 ml) 。
附表0.1M磷酸钾缓冲液
姓名：李果
班级：10级动物生物技术1班
学号：201030380109
指导老师：李文楚老师
2013年6月。