2019届高考生物二轮复习专题八生物技术实践学案
热点微专题08 基因编辑技术及定点突变-2023年高考生物二轮复习(人教版2019)
得到含有突变位点的双链载体；
④最后将双链载体引入宿主细胞复制，
并进行筛选和鉴定。
知识拓展：基因定点突变技术
2．PCR定点突变技术 （1）重叠延伸PCR
①此技术共需四个引物 引物2和引物3的突起处代表与模板链不 能互补的突变位点，而这两条引物有部 分碱基（包括突变位点）是可以互补的。 ②分别利用引物1和引物2，引物3和引 物4进行PCR，得到两个DNA片段 ③得到的DNA片段可以通过引物2和引物 3互补的碱基杂交在一起，它们再在DNA 聚合酶的作用下延伸，就能成为一条完 整的DNA片段。 ④最后，用引物1和引物4进行扩增得到 含有突变位点的DNA片段。
①首先人工合成一段含有特定突变位
点的单链寡核苷酸片段（除突变位点外，
该片段的其他部分可以与目的基因互补
配对）
②然后将该寡核苷酸片段与带有目的
基因的单链载体（通常由M13噬菌体衍生
而来）进行杂交；
M13噬菌体是一种丝状噬菌体， 内有一个环状单链DNA分子
③继而在DNA聚合酶和DNA连接酶的作
用下分别进行DNA链的合成和连接反应，
(3)在构建改良基因表达载体时，有的质粒含有改良基构因建，改有良的基质因粒组为质空粒白时质破粒坏，了将含上 述组件的溶液加入到大肠杆菌菌液中，适宜温度下培L养ac一Z基段因时(间因后)，，含再该将质菌粒液的涂大布肠在含 氨苄青霉素和__β__-_半__乳__糖__苷___的平板上。一段时间后杆，菌在不培能养分基解上β出-现半白乳色糖和苷蓝产色生两蓝种 菌落，其中白色菌落含有重组质粒，判断的依据是__色__物__质__（_。变），菌落为白色（果）
二轮微专题— 基因组编辑技术及定点突变技术
一、基因组编辑技术
• 【情境原理】 • 1.基因组编辑的含义:对基因进行定点修改,以改变目的基因的序列和功能,进行基因治
2019届高三生物二轮复习学案：专题八生物技术实践 Word版含解析
专题八生物技术实践第15讲生物技术实践1.微生物的分离和培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物5.运用发酵加工食品的基本方法6.微生物在其他方面的应用7.从生物材料中提取某些特定的成分◎(1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。
(×)(2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。
(√)(3)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落。
(√)(4)对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法。
(×)(5)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸。
(×)(6)酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度高于果醋发酵温度。
(×)(7)将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量。
(×)(8)提炼玫瑰精油的玫瑰花应在花开的初期采收，因为此阶段的花含玫瑰精油最高。
(×)(9)油水混合物中加入无水硫酸钠，有利于分离油层。
(×)(10)萃取是利用了芳香油易溶于有机溶剂的特性进行提取的一种方法。
(√),◎1．利用稀释涂布平板法统计的菌落数为什么往往比活菌的实际数目低？提示：是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
2．怎样准确鉴定某种细菌能够分解尿素？提示：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，如果pH升高，指示剂将变红。
3．说出利用水蒸气蒸馏法提取植物芳香油的原理。
提示：利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。
1．(2018·全国Ⅱ，T37)在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题：(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
新人教高考生物(不定项版)二轮专题复习：专题8 实验与探究 考点1 教材实验
新人教高考生物（不定项版）二轮专题复习专题八实验与探究考点1 教材实验1观察类实验(1)观察类实验的操作流程归纳提示：鉴定类实验中的“检测生物组织中的脂肪”、探究性实验中的“培养液中酵母菌种群数量的变化”都需用显微镜观察。
(2)观察类实验汇总实验名称观察方式观察对象细胞状态染色剂常用实验材料观察根尖分生组织细胞的有丝分裂染色观察染色体死甲紫溶液(或醋酸洋红液)洋葱根尖低温诱导植物细胞染色体数目变化染色体死甲紫溶液蒜或洋葱根尖用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质的流动直接观察叶绿体活不需要新鲜的菠菜叶(稍带叶肉的下表皮)、藓类的小叶；黑藻叶片探究植物细胞的吸水和失水紫色大液泡活成熟植物细胞，如紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞特别提醒酒精和盐酸在实验中的应用2鉴定提取类实验(1)鉴定类实验的操作流程归纳(2)鉴定提取类实验汇总实验名称试剂颜色生物材料备注还原糖的鉴定斐林试剂砖红色沉淀苹果或梨匀浆等斐林试剂现配现用、水浴加热脂肪的鉴定苏丹Ⅲ橘黄色花生种子子叶切片需用显微镜观察蛋白质的鉴定双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清溶液等先加A液1mL，摇匀，后加B液4滴(不能过量)，再摇匀绿叶中色素的提取和分离提取液：无水乙醇；分离液：层析液①胡萝卜素：橙黄色；②叶黄素：黄色；③叶绿素a：蓝绿色；④叶绿素b：黄绿色新鲜的绿叶(如菠菜叶)加入二氧化硅是为了研磨得更充分；碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏DNA的粗提取和鉴定鉴定：二苯胺试剂蓝色新鲜洋葱等沸水浴加热5min特别提醒关注物质检测类实验中的四个问题(1)在显色实验(如物质检测)中，材料最好不带颜色或颜色较浅，或实验时对有色材料进行脱色处理。
(2)物质检测实验一般不设置对照实验，若需设置对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清。
(3)可溶性还原糖检测中不宜选择甜菜、甘蔗等作为实验材料，因为它们所含的糖类主要是蔗糖，为非还原性糖。
(4)颜色深浅与所检测的物质的含量有关，含量越多，颜色越深。
高考生物二轮复习专题限时集训（新课标）：专题八 生物的变异、育种与进化 Word版含解析
专题限时集训(八)[专题八生物的变异、育种与进化](时间：40分钟)1．下列有关遗传变异与进化的叙述中，正确的是( )A．原发性高血压是一种多基因遗传病，其发病率比较高B．基因内增加一个碱基对，只会改变肽链上一个氨基酸C．每个人在生长发育的不同阶段中，基因是不断变化的D．突变和基因重组都会引起种群基因频率的定向改变2．人类疾病中有一种虽然数量较少但却颇有特色的阿帕特综合征，症状是尖头，指、趾呈蹼状。
研究发现，引起阿帕特综合征的突变基因多存在于精子中，从而影响体内Z受体蛋白的结构。
下列关于该病的说法错误的是( )A．该病是一种遗传病B．患病基因突变多发生在有丝分裂C．Z受体蛋白基因突变的概率与年龄有一定的关系D．患者Z受体蛋白的氨基酸序列或空间结构与正常人不同3．一对夫妇，妻子是镰刀型细胞贫血症携带者，丈夫不带该致病基因，孩子出生后表现正常，但长到18岁时，患了镰刀型细胞贫血症。
这个孩子得病最可能的原因是( )A．孩子的造血干细胞发生了基因突变B．孩子的致病基因一定来自母亲，属于交叉遗传C．孩子体内的核糖体发生了变异合成了异常的蛋白质D．孩子的mRNA发生变异造成的4．现有一种能生产甲硫氨酸的M菌，但产量很低，而且当培养液中甲硫氨酸的含量达到最大值后，继续培养，甲硫氨酸合成量会迅速下降。
这是由于甲硫氨酸的积累反过来抑制了其合成。
用紫外线照射可选育得到能抗甲硫氨酸抑制的高产新菌株。
下列有关选育过程的表述，不正确的是( )A．这种新菌株的选育方法属于用物理因素诱导的诱变育种B．M菌培养液中甲硫氨酸的含量达到最大值后又不断减少是反馈调节的结果C．用紫外线照射M菌时，还应在其培养基中添加甲硫氨酸D．该选育过程中采用的培养基是液体培养基5．科学家发现一类蜣螂，不仅取食粪便，还取食包括蜈蚣在内的千足虫。
与普通蜣螂相比其部分结构也发生变化：头部较窄而长，便于进食千足虫内脏；后腿较蜷曲，便于捕猎千足虫。
下列有关说法错误的是( )A．该类蜣螂的出现是自然选择的结果B．该类蜣螂与千足虫相互选择共同进化C．如果该类蜣螂能与普通蜣螂交配，说明它们之间没有生殖隔离D．该类蜣螂出现的实质是种群基因频率定向改变的结果6．已知家鸡的无尾(A)对有尾(a)是显性。
2019届高考生物二轮复习选考教案(适用全国)
第Ⅰ课时 生物技术实践(选修①)点点落实(一) 微生物的利用[一过基础]1．理清微生物培养的基本技术2．把握微生物分离与计数的两个实例(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。
②测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数。
③过程：土壤取样→样品稀释→微生物的培养与观察。
④鉴定方法：含酚红指示剂以尿素为唯一氮源的培养基→细菌→出现红色透明圈，则该菌能分解尿素。
(2)分解纤维素的微生物的分离①实验原理：即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
②流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。
[二过易错](1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(2015·江苏卷，T19B)(×)(2)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。
接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(×)(3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(√)(4)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(×)(5)检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数(×)(6)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(×)[三过高考]1．(2018·全国卷Ⅰ)将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。
在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。
回答下列问题：(1)M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制________的生长，加入了链霉素的培养基属于________培养基。
(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有__________________(答出两点即可)。
氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有________________(答出两点即可)。
高三生物复习课件：专题八 生物技术实践
要求实验操作应在酒精灯____________附近进行，以避免周围
环境中微生物的污染。 [名师点拨](1)由于该细菌能够分解原油，所以应该以原油 为唯一碳源来筛选，这种培养基称为选择培养基。
(2)菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂 布平板法。
(3)菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明 该菌株的降解能力强。
[名师点拨]洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分 离纯化，加入的是生理盐水，红细胞内液与生理盐水是等渗的， 所以可以防止细胞破裂。哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与 众多的细胞器，提纯时杂蛋白较少。血红蛋白是有色蛋白，因 此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收
集洗脱液，这使得血红蛋白的分离过程非常直观，简化了操作。
[答案]D
【典例 3】(2012 年深圳六校联考)有些细菌可分解原油， 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤
中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题： (1) 在 筛 选 过 程 中 ， 应 将土壤样品 稀 释 液 接 种 于以
________________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲， 该培养基属于____________培养基。
专题八
生物技术实践
微生物的利用 (1)微生物的分离和培养 (2)某种微生物数量的测定 (3)培养基对微生物的选择作用 (4)利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其 他方面的应用 酶的应用 (5)酶活力测定的一般原理和方法 (6)酶在食品制造和洗涤等方面的应用 生物技术在食品加工及其他方面的应用 (7)植物的组织培养 (8)蛋白质的提取和分离 (9)PCR 技术的基本操作和应用
实 验 与 探 究 能 力
酵母菌
2019届高考生物二轮复习实验教案(适用全国)
第Ⅰ课时教材基础实验分类归纳——系统知识类型(一)显微观察类实验[一过基础]1．比较六个显微观察类实验(填表)甲基绿、吡罗红活健那绿龙胆紫溶液(或死洋葱根尖醋酸洋红液)改良苯酚品红染液活活2.关注洋葱在实验中的“一材多用”(填表)3．归纳盐酸和酒精的“同材异用”(填表) (1)不同浓度酒精的用途(2)盐酸在不同实验中的应用[二过易错](1)若要观察处于细胞分裂中期的染色体可用醋酸洋红液染色(2017·全国卷Ⅰ，T2C)(√)(2)洋葱表皮细胞滴加蔗糖溶液后，发生质壁分离说明细胞有活性(2015·江苏卷，T23C)(√)(3)低温诱导染色体加倍实验中，将大蒜根尖制成装片后再进行低温处理(2014·山东卷，T4C)(×)(4)以新鲜洋葱鳞片叶内表皮为材料，经甲基绿吡罗红染色，可观察到红色的细胞核(×)(5)光学显微镜可用于观察植物细胞的质壁分离现象(√)(6)只有在保持细胞活性的条件下，才能用健那绿染色观察动物细胞中的线粒体(√)[三过小题]1．(2018·海南高考)关于普通光学显微镜的使用，下列叙述正确的是()A．在高倍镜下观察时，用粗准焦螺旋调整焦距B．高倍镜下无法观察到花生子叶中被染色的脂肪颗粒C．由低倍镜转到高倍镜前，将待观察目标移至视野中央D．高倍镜下可以观察到细胞膜清晰的暗－亮－暗三层结构解析：选C在高倍镜下观察时，只能用细准焦螺旋调整焦距，A错误；高倍镜下可以清楚观察到花生子叶中被染色的脂肪颗粒，B错误；由低倍镜转到高倍镜前，将待观察目标移至视野中央，C正确；电子显微镜下可以观察到细胞膜清晰的暗－亮－暗三层结构，D错误。
2．染色是生物实验常用的方法，下列有关实验的叙述正确的是()A．观察脂肪：切取花生子叶薄片→去浮色→染色→制片→观察B．观察植物细胞的有丝分裂：制片→解离→漂洗→染色→观察C．观察DNA和RNA在细胞中的分布：制片→水解→染色→冲洗→观察D．观察线粒体：滴染液→涂片→观察解析：选D观察细胞中的脂肪，切取花生子叶薄片放在载玻片中央，然后用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液染色，并用50%的酒精洗去浮色；观察植物细胞的有丝分裂实验步骤为：解离→漂洗→染色→制片→观察；观察DNA和RNA在细胞中的分布实验步骤为：制片→水解→冲洗→染色→观察；观察线粒体时先滴染液，然后刮取口腔上皮细胞，放在染液中涂抹几下，再盖上盖玻片观察。
2020高考生物二轮复习 专题八 生物技术实践 考点3 植物有效成分的提取、DNA技术学案
考点3 植物有效成分的提取、DNA技术1．三种生物成分的提取方法、原理及步骤的比较提取物质提取方法提取原理步骤玫瑰精油蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来①水蒸气蒸馏；②分离油层(加NaCl)；③除水过滤(加无水Na2SO4)橘皮精油压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗；②压榨、过滤、静置；③再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂中，蒸发后得到提取物①粉碎、干燥；②萃取、过滤；③浓缩特别提醒(1)胡萝卜素不溶于水，含水量影响胡萝卜素的萃取效果。
(2)油脂类物质不易挥发，可选用萃取法从菌体中提取。
(3)萃取加热时要加装冷疑回流装置，目的是防止加热时有机溶剂挥发。
(4)β－胡萝卜素在人体肝脏中可被氧化成两分子的维生素A，因此可用于治疗因缺乏维生素A引起的夜盲症等。
2．把握物质分离的5种方法(1)分离油水混合物：分液法。
(2)除去固体物和残渣：过滤法。
(3)除去液体中质量较小的固体残留物：离心法。
(4)除去芳香油中的残留水分：加入无水硫酸钠后过滤的方法。
(5)除去萃取液中的有机溶剂：蒸馏法。
3．明确冷凝管的2种用法(1)冷凝收集油水混合物：如玫瑰精油的提取。
(2)冷凝回流：如胡萝卜素的提取。
4．DNA粗提取与鉴定实验原理(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在物质的量浓度为0.14 mol/L时最低。
(2)DNA不溶于酒精，但是细胞中的一些有机物如某些蛋白质则溶于酒精，因此可以用酒精提纯。
(3)DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色，因此，二苯胺可用来鉴定DNA分子。
5．DNA的粗提取与鉴定实验流程选取材料→破碎细胞，获取含DNA的滤液→去除滤液中的杂质→D NA的析出与鉴定。
1．(2017·全国Ⅲ，37)绿色植物甲含有物质W，该物质为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。
其提取流程为：植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。
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第15讲 生物技术实践
1.微生物的分离和培养
2.某种微生物数量的测定
3.培养基对微生
物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物 5.运用发酵加工食品的基本方法 6.微生物在其他方面的应用 7.从生物材料中提取某些特定的成分
◎
(1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。
(×)
(2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。
(√)
(3)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落。
(√)
(4)对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法。
(×)
(5)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸。
(×)。