分子生物学简答题全
分子生物学部分简答题及答案
1．分别说出5种以上RNA的功能？转运RNA tRNA 转运氨基酸核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成信使RNA mRNA 蛋白质合成模板不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用核酶Ribozyme RNA 有酶活性的RN2．原核生物与真核生物启动子的主要差别？原核生物TTGACA --- TA TAA T------起始位点-35 -10真核生物增强子---GC ---CAA T----TA TAA—5mGpp—起始位点-110 -70 -253.对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？天然质粒往往存在着缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建：a、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择,通常是抗生素基因。
b、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。
c、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。
d、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。
e、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件4、利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？原理是采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。
由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。
根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。
根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。
方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列5、激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）。
分子生物学简答题
分子史上的经典事件？答：1953watson 和crick 提出的DNA分子双螺旋模型在科研过程中，要具有清醒的宏观洞察力、非凡的科学想像力和严密的逻辑思维能力，选择正确的研究路线，广泛借鉴他人的研究成果并加以综合性的科学思考。
分子生物学的理论基础是？主要的研究策略有？（第一章）答：1958年，克里克提出两个学说，奠定了分子生物学的理论基础。
第一个学说是“序列学说”，它认为一段核酸的特殊性完全由它的碱基序列决定，碱基序列编码一个特定蛋白质的氨基酸序列，蛋白质的氨基酸序列决定了蛋白质的三维结构。
第二个学说是“中心法则”，遗传信息只能从核酸传递给核酸，或核酸传递给蛋白质，而不能从蛋白质传递给蛋白质，或是从蛋白质传回核酸。
研究策略：体内和体外实验的结合将遗传和DNA联系起来。
体内（In vivo）实验：在活体内进行的实验，包括在培养的细胞或组织。
体外（In vitro）实验：在细胞提取物中，或者是人工合成的细胞成分混合物中。
分子与其他学科关系？生物学离不开生物学技术？答：分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的。
现代生物学的发展越来越多的应用分子生物学的理论和方法进行研究。
什么是分子生物学？广义的概念：分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
狭义的概念：从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控等，也称之为基因的分子生物学。
DNA分子在结构上为什么最适合作为遗传信息载体？（第二章第一节）化学性质比较稳定，DNA复制时严格遵守碱基互补配对原则，且为半保留复制；四种脱氧核糖核苷酸可以组成不同的长链，可以携带大量遗传信息。
DNA提取操作要点是?（第二章第一节）提取原则：保持一级结构的完整性，将其他生物大分子的污染降到最低。
分子生物学简答题
试述乳糖操纵子的阻遏作用、诱导作用及正调控。
阻遏作用：阻遏基因lacl转录产生阻遏物单体，结合形成同源四体，即阻遏物。
它是一个抗解链蛋白，当阻遏物与操纵基因O结合时，阻止DNA形成开放结构，从而抑制RNA聚合酶的功能。
lacmRNA的转录起始受到抑制。
诱导作用：按照lac操纵子本底水平的表达，每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶。
当加入乳糖，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶的作用下转变为诱导物异构乳糖，诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之因不能与操纵基因结合而失活，O区没有被阻遏物占据从而激发lacmRNA的合成。
调控作用：葡糖糖对lac操纵子的表达的抑制是间接的，不是葡萄糖本身而是其降解产物抑制cAMP的合成。
cAMP-CAP复合物与启动子区的结合是lacmRNA转录起始所必须的，因为该复合物结合于启动子上游，能使DNA双螺旋发生弯曲。
有利于形成稳定开放型启动子-RNA 聚合酶结构。
如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中，lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导试述 E.coli的RNA聚合酶的结构和功能。
2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个亚基组成的核心酶，加上一个亚基后则成为聚合酶全酶α亚基：核心酶组装、启动子识别β和β’亚基：β和β’共同形成RNA合成的催化中心因子：存在多种因子，用于识别不同的启动子试述原核生物DNA复制的特点。
1.原核只有一个起始位点。
2.原核复制起始位点可以连续开始新的复制，特别是快速繁殖的细胞。
3.原核的DNA聚合酶III复制时形成二聚体复合物。
4.原核的DNA聚合酶I具有5'-3'外切酶活性DNA解旋酶通过水解ATP 产生能量来解开双链DNA单链结合蛋白保证被解链酶解开的单链在复制完成前保持单链结构DNA拓扑异构酶消除解链造成的正超螺旋的堆积，消除阻碍解链继续进行的这种压力，使复制得以延伸真核生物hnRNA必须经过哪些加工才能成为成熟的mRNA，以用作蛋白质合成的模板？（1）、在5’端加帽，5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。
分子生物学名词解释、简答题答案
名词解释：1. 断裂基因：含有内含子的基因。
2. 假基因：DNA序列与有功能的基因相似，但不能表达有功能的基因产物。
3. 沉默突变：突变的密码子编码同样的氨基酸，不会引起产物的组成和结构上的改变。
4. 无义突变：使某氨基酸的密码子变为终止密码子，导致肽链合成中断。
5. 移码突变：又称移框突变，在基因的编码区缺失或插入一个或多个核苷酸，且缺失或插入的核苷酸不是3的倍数，造成了阅读框架的改变。
6. 转座子：发生转座的DNA片段。
7. 流产合成：若δ因子未能脱离核心酶，则新合成的RNA小片段会脱离复合物而重新启动转录。
这种现象称无效合成或流产合成。
8. 启动子：是连接在基因5’端上游的DNA序列，是转录起始时RNA聚合酶识别，结合的特定部位。
9. 操纵子：由操纵基因以及紧接着的若干结构基因共同组成的一个超基因的功能单位。
其中结构基因的转录由操纵基因所控制。
10. 调控基因：通过翻译和转录产生调节蛋白，该蛋白与操纵基因相互作用，控制下游基因转录。
11. 操纵基因：指能被调控蛋白质特异性结合的一段DNA序列，位于启动子和操纵基因之间，常与启动子临近或部分重叠。
12. 阻遏蛋白：在没有调节蛋白存在时，基因是表达的，加入调节蛋白后基因表达被关闭，为负调控，其调节蛋白称为阻遏蛋白。
13. 衰减子：当mRNA开始合成后，除非培养基中完全不含色氨酸，否则转录总是提前终止，产生仅有约140nt的RNA分子。
这个区域称为衰减子或弱化子。
14. 分解物阻遏：在培养基中同时加入葡萄糖时，细菌则优先利用葡萄糖。
只有当葡萄糖耗尽时，乳糖才能诱导基因的表达。
15. 绝缘子：真核生物基因组得调控元件之一，亦为一种边界元件。
16.启动子P:转录起始时RNA聚合酶识别、结合的特定部位。
17.结构基因:编码蛋白质或功能RNA的基因。
18.操纵基因0:能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列。
19.调节基因:编码合成参与基因表达调控的蛋白质(调节蛋白)的特异DNA序列。
医学分子生物学简答题
四、简答题1.碱基对间在生化和信息方面有什么区别?2.在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的百分含量?3.真核基因组的哪些参数影响Cot1／2值?4.请问哪些条件可促使DNA复性(退火)?5.为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?6.大肠杆菌染色体的分子量大约是2.5×109Da1)，核苷酸的平均分子量是330Da，两个邻近核苷酸对之间的距离是0.34mn；双螺旋每一转的高度(即螺距)是3.4nm，请问：(l)该分子有多长?(2)该DNA有多少转?7.曾经有一段时间认为，DNA无论来源如何，都是4个核甘酸的规则重复排列(如，ATCG．A TCG．A TCG．A TCG…)，所以DNA缺乏作为遗传物质的特异性。
第一个直接推翻该四核苷酸定理的证据是什么?8.为什么在DNA中通常只发现A—T和C—G碱基配对?9.列出最先证实是DNA(或RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。
10.为什么只有DNA适合作为遗传物质?ll.什么是连锁群?举一个属于连锁基因座的例子。
12.什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。
13.对于所有具有催化能力的内含子，金属离子很重要。
请举例说明金属离子是如何作用的。
14.列出真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别。
15.列出各种tRNA所有相同的反应及个别tRNA的特有反应。
16.在体内，rRNA和tRNA都具有代谢的稳定性，而mRNA的寿命却很短,原因何在?17.为什么真核生物核糖体RNA基因具有很多拷贝?18.为什么说信使RNA的命名源自对真核基因表达的研究，比说源自对原核基因表达的研究更为恰当?19.说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(3％一5％)。
20.为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定?21.起始tRNA具有哪两种与其他tRNA不同的特性?22.区别rRNA和mRNA在翻译中的作用。
23.氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?24.简要说明证明信使的存在及其本质为RNA的证据。
分子生物学简答题
1.简述临床分子生物学检验在复杂性疾病中的应用。
（1）在感染性疾病中，对微生物感染作出确诊、对感染性病原体进行分型和耐药性监测；（2）通过患者的DNA、RNA、染色体、蛋白质和某些代谢产物来揭示与遗传病发生相关的生物学标记，从而对遗传型疾病进行早期预防、早期诊断和早期治疗的目的；（3）用分子生物学检验方法寻找特异性肿瘤基因型标志进行肿瘤基因检测，有利于肿瘤的早期发现和诊断，以及肿瘤的预防和治疗；（4）推动个体化医学的发展。
2.简述RNA 生物标志物的优点。
RNA 生物标志物包括多种形式，如mRNA、tRNA、miRNA、lncRNA 等；多种病理生理过程、药物治疗或食品中的物质均可以在转录水平上出现差异；基因表达在mRNA 水平上的变化通常大于蛋白质水平的变化；在血浆中存在游离的循环miRNA 可以反应体内的病理生理过程；母亲血浆中的胎儿RNA 在无创产前诊断中对染色体疾病的诊断更加方便。
3.简述原核生物基因组的特征。
（1）原核生物基因组较小（2）原核生物的类核结构（3）原核生物的操纵子结构（4）原核生物的结构基因中无内含子成分，其R NA 合成后不需要经过剪接加工过程（5）具有编码同工酶的基因（6）含有可移动D NA 序列4.简述核酸分离纯化的主要步骤。
目前核酸的分离纯化主要包括4 个步骤：①制备细胞及破碎细胞。
②消化蛋白质，去除与核酸结合的蛋白质、多糖及脂类等生物大分子。
③去除其它不需要的核酸分子。
④沉淀核酸，去除盐类、有机溶剂等杂质。
5.简述蛋白质分离纯化的方法及其原理。
（1）根据蛋白分子大小不同：主要有透析、超滤、凝胶过滤和离心等。
（2）根据蛋白分子溶解度不同：常用的方法有等电点沉淀和pH 值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法等。
（3）根据蛋白表面电荷不同：常用方法有电泳和离子交换层析。
（4）采用配体的特异性亲和力：亲和层析等。
6.Southern 印迹杂交的临床应用（1）单基因遗传病的基因诊断（2）基因点突变的检测7.Nouthern 印迹杂交的临床应用（1）RNA 病毒的检测（2）基因表达的检测8.核酸分子杂交的影响因素在核酸杂交反应中影响杂交体形成因素较多，主要有探针的选择、探针的标记方法、探针的浓度、杂交率、杂交最适温度、杂交的严格性、杂交反应时间及杂交促进剂等。
(完整word版)分子生物学简答题
课后思考题1. 试述乳糖操纵子的结构及调控原理？乳糖操纵子开放转录需要什么条件？（1）乳糖操纵子的结构：含Z、Y、A3个结构基因,分别编码乳糖代谢的3个酶；一个操纵序列O，一个启动序列P，一个CAP结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区.乳糖操纵子的上游还有一个调节基因I。
(2）阻遏蛋白的负性调节：I基因的表达产物为一种阻遏蛋白，在没有乳糖存在时，阻遏蛋白与O序列结合，阻碍RNA聚合酶与P序列结合，抑制转录启动，乳糖操作子处于阻遏状态；当有乳糖存在时，乳糖转变为半乳糖，后者结合阻遏蛋白，使构象变化，阻遏蛋白与O序列解离，在CAP蛋白协作下发生转录。
（3）CAP的正性调节：分解代谢基因激活蛋白（CAP）分子内存在DNA和cAMP结合位点.当没有葡萄糖时，cAMP浓度较高，cAMP与CAP结合，cAMP-CAP结合于CAP结合位点，提高RNA转录活性;当有葡萄糖时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP结合受阻，乳糖操纵子表达下降。
(4）协调调节:乳糖操纵子阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节机制协调合作，CAP不能激活被阻遏蛋白封闭基因的表达，但如果没有CAP存在来加强转录活性，即使阻遏蛋白从操纵序列上解离仍无转录活性。
因此，乳糖操纵子开放转录需要的条件是:1）诱导物乳糖存在，解除阻遏蛋白的负调节。
2）葡萄糖缺乏，CAP蛋白活化，启动正调节。
2.试述原核生物和真核生物基因表达调控特点的异同.（1）相同点：转录起始是基因表达调控的关键环节。
(2）不同点：1)原核生物基因表达调控主要包括转录和翻译水平；真核基因表达调控包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次.2)原核基因表达调控主要为负调节；真核生物基因表达调控主要为正调节。
3）原核转录起始不需要转录因子，RNA聚合酶直接结合启动子，由σ因子决定基因表达的特异性；真核转录起始需要基础、特异两类转录因子，依赖DNA—蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用，调控转录激活。
分子生物学简答题
第二章1、DNA二级结构的特点？答：（1）DNA分子是由两条互相平行的脱氧核甘酸长链盘绕而成的（2）DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在内侧.2.阐述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验？答：用普通培养基（含14N的氮源）培养15N标记的大肠杆菌，经过一代后，所有DNA 的密度都在15N-DNA和14N-DNA之间，即形成了一半15N和一半14N的杂合分子，两代后出现等量的14N分子和14N-15N杂合分子。
若再继续培养，可以看到14N-DNA分子增多，说明DNA分子复制时均可被分成两个亚单位，分别构成子代分子的一半，这些亚单位经过很多代复制仍然保持着完整性。
3.描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用？答：该酶被认为在切除由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中起着重要的作用，它也可用以出去冈崎片段5,端RNA引物，使冈崎片段间缺口消失，保证连接酶将片段连接起来。
4.DNA的损伤原因是什么？答：DNA的损伤分自发性损伤、物理因素引起的DNA损伤、和化学因素引起的DNA损伤.自发性损伤是由于DNA复制中的错误和碱基的自发性化学变化造成DNA的损伤.物理因素引起的DNA损伤常是缘于紫外线引起的DNA损伤和电离辐射引起的DNA损伤.化学因素引起的DNA损伤是突变剂或致癌剂对DNA的作用,包括烷化剂对DNA的损伤和碱基类似物对DNA的损伤.5.组蛋白具有哪些特性？答：进化上的极端保守性，无组织特异性，肽链上氨基酸分布的不对称性，组蛋白的修饰作用（包括甲基化，乙酰化，磷酸化，范素化9口「核糖基化），富含赖氨酸的组蛋白H56.比较原核生物和真核生物DNA复制的不同点。
答：真核生物每条染色质上可以有多处复制起始点，而原核生物只有一个起始点；真核生物的染色体在全部完成复制之前，个个起始点上DNA的复制不能再开始，而在快速生长的原核生物中，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，表现为虽只有一个复制单元，但可有多个复制叉。
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简答题6.为什么利用RNＡi抑制一个基因得表达较利用反义RＮA技术更为彻底。
答:RNＡi就是外源或内源性得双链RＮAﻩ进入细胞后引起与其同源得mRNA特异性降解、dsRNA进入细胞后，在Ｄiｃer作用下，分解为21－２２bp得SiRNA、SｉＲＮA结合相关酶，形成RＮＡ介导得沉默复合物ＲISC、ＲISC在A TP作用下，将双链ＳｉRNA变成单链SiRNA，进而成为有活性得RIＳC,又称为ｓlicer、slicer与靶mRNA结合，导致其断裂，进而导致其彻底降解.反义RＮA就是与靶mRNA互补得RNA,它通过与靶mRNＡ特异结合而抑制其翻译表达,反义ＲNA就是与靶mＲNA就是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以，mRＮA不一定完全被抑制。
8。
简述真核基因表达得调控机制。
答:（1）ＤＮA与染色质结构对转录得调控：①DNA甲基化，②组蛋白对基因表达得抑制，③染色质结构对基因表达得调控作用，④基因重排,⑤染色质得丢失，⑥基因扩增；（2）转录起始调控:ﻩ①反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用调节），②反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控；(3）转录后调控:①5'端加帽与3’端多核苷酸化调控，②选择剪接调控，③ｍRＮA运输调控,④mRNA稳定性调控;(4）翻译起始得调控：①阻遏蛋白得调控，②对翻译因子得调控,③对AUＧ得调控,④mRNA 5’端非编码区得调控,⑤小分子ＲＮA；(５）翻译后加工调控：①新生肽链得水解，②肽链中氨基酸得共价修饰，③信号肽调控.9。
简述ｍRNA加工过程。
答：(1)5′端加帽（由加帽酶催化5′端加入7-甲苷乌苷酸，形成帽子结构m7GppｐmNP-)。
(2）3′端加入Poly(A)尾(A、组蛋白得成熟mRNＡ无需加polyA尾;B、加尾信号包括AAUAAＡ与富含GU得序列；C、加尾不需模板;D剪切过程需要多种蛋白质因子得辅助)。
(3）mRNＡ前体得剪接（剪接加工以除去内含子序列,并将外显子序列连接成为成熟得有功能得mRNA分子.内含子两端得结构通常就是5′—GＵ……AＧ-3′。
选择性剪接得作用机制包括；A使用不同得剪接位点，Ｂ选择使用外显子，C、反式剪接,Ｄ、使用不同得启动子，E、使用不同得多腺苷酸化位点）。
(4）RNA得编辑(发生于转录后水平，改编ｍRNA序列,C→U或A→G，增加遗传信息容量）。
10．简述生物得中心法则。
答：中心法则(ｇenetic centｒaｌｄｏgma)，就是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从ＲN Ａ传递给蛋白质，即完成遗传信息得转录与翻译得过程。
也可以从DNＡ传递给ＤNA,即完成DＮA得复制过程。
11。
简述真核生物基因结构及特点。
答:真核细胞得基因也就是由编码区与非编码区两部分组成得;（１）编码区：外显子—-能编码蛋白质得序列。
特点：间隔得、不连续得。
即能编码蛋白质得序列被不能编码蛋白质得序列分隔开来,成为一种断裂得形式不能编码蛋白质得序。
ﻫ内含子——列。
（2)非编码区: 有调控作用得核苷酸序列.ﻫ启动子——就是基因结构中位于编码区上游得核苷酸序列,就是RＮA聚合酶结合点，能准确地识别转录得起点并开始转录，有调控遗传信息表达得作用。
12.简述ＳＮP得特点，SＮＰ如何发挥生物学作用得及研究SNＰ得意义.答：特点:(1）数量多,遍布基因组，分布相对平均，据统计,人类群体中大概有1１００万个SNＰ，约每３00bp就有1个SＮＰ位点,方便挑选位点。
（２）虽有A/Ｃ/Ｇ/T四种核苷酸,但SＮP位点大多就是双态,即每个位点在群体中只存在2种核苷酸形式，因此A/C、A／Ｇ、A/T、C/Ｇ、C/T、G/T、Indel等几种形态,适合开展大规模、高通量、自动分化得检测.(3）人类基因组９0％得变异形式为SＮP,SNＰ得遗传很稳定——每一代之间不会有太大变化.SNP得研究意义:虽然人类9９％以上得ＤNA序列就是相同得,但DNA序列得变化能对人类对疾病、环境攻击（比如细菌、病毒、毒素与化学物质)、药物与治疗得反应产生重大影响。
这就使得SＮP对生物医学得研究与药物开发、医学诊断得发展有重要意义。
SＮPｓ可作为遗传作图研究中得遗传标记，帮助定位与鉴定功能基因.研究者相信ＳNＰ图谱将帮助她们认识复杂得多基因疾病，如癌症，糖尿病，血管性疾病与某些精神性疾病。
1３。
简述ｍｉRNA得结构特点与生物功能。
答:广泛存在于真核生物中,就是一组不编码蛋白质得短序列RNＡ，它本身不具有开放阅读框架(ＯＲF）；通常得长度为2０~24nt,但在3′端可以有１～2个碱基得长度变化;成熟得mi ＲNＡ5′端有一磷酸基团,3′端为羟基，这一特点使它与大多数寡核苷酸与功能RNA得降解片段区别开来；多数mｉRNA还具有高度保守性、时序性与组织特异性。
miRNA执行一定得生物学功能：对与其互补得mRNA表达水平具有调节作用；一些偏大得ｍiRNA可能参与了基因组得重组装（27nt)。
1４。
什么就是ＤNＡ甲基化？简要说明甲基化得检测方法及其生物学效应。
答：胞嘧啶与甲基在甲基化酶得作用下形成5’-甲基胞嘧啶得过程叫做DNA得甲基化。
ＤＮA甲基化抑制或降低转录水平,在基因转录起始点附近,有高度密集得CｐＧ重复序列,被称为CpG岛,或HTF岛。
推测该序列与基因转录活性有关.检测方法:①酶切鉴定：HpaⅡ只能切割未甲基化得－CＣGG-,HpaⅡ如果第二个C被甲基化了就不能切割.MspⅠ能够识别与切割甲基化或未甲基化-ＣCＧG－.比较这两种酶切割DNA产生得ＤNA片段得差异，可知DNA片段甲基化得程度与有无。
②限制性内切酶＋Southeｒnｂlｏｔｉng;③甲基化特异性PCＲ(MSＰ)；④亚硫酸盐变性后测序；⑤甲基化敏感性单核苷酸引物扩增(Mｓ—SｎuPE）；⑥甲基化荧光检测；⑦亚硫酸氢钠变性后限制酶分析（COＢRA)；⑧差异甲基化杂交（DMN）;⑨酶得区域性甲基化分析(ERMA).1５.何为顺式作用元件？请举出三种真核生物基因得顺式作用元件.答:影响自身基因表达活性得非编码DNA序列,组成基因转录得调控区。
例：启动子:转录调节蛋白与ＲNA聚合酶得结合位点；增强子:就是一个有增强转录得顺式作用元件,能够提高一些真核生物启动子得效率，并能能在启动子得任何方向与任何位置（上游或下游)作用。
沉默子：负性调节元件，当其结合特意蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。
16．以trp操纵元为例简述衰减子得调控机制。
答：当细胞中有色氨酸存在时,核糖体能够顺利翻译出整个前导肽而在终止密码子处停下来。
这时，核糖体占据了序列1与部分序列2，使序列2与序列3不能产生有效得配对，因而序列3与序列4配对产生终止子得发夹结构，于就是实现转录得终止.当出现Trp饥饿时,核糖体停顿在两个Tｒｐ密码子上,这时,核糖体占据了序列１而留下完整得序列２以便与转录出得或即将转录出得序列3形成二级结构。
这样，当序列４转录出来后仍然就是单链状态,即终止子不能形成,于就是转录继续进行下去。
23．在基因转录水平得表达调控方式上，真核生物往往采用正控制系统,而原核生物却往往采用负控制系统，请简要阐明其原因。
答：这两种调控方式就是长期自然选择得结果,也就是生物体采用得经济有效得原则选择得。
原核生物基因组小，基因少而简单,生命繁殖快，多采用负控制得保险机制，即使调节蛋白质失活，酶系统照样合成,只不过有时浪费一点罢了，绝不会使细胞因缺乏该酶系统而造成致命得后果。
另外,采用负控制具有一开俱开，一关俱关得特点，减少不必要得环节;而真核生物基因组大，基因多且复杂,采用正控制具有更大得优越性，转录因子相互作用缺一不可，可以保证真核生物基因表达调控得严谨性与灵活性以及经济性原则.2４.根据您得理解说明利用”酵母双杂交系统”研究蛋白质间相互作用得原理。
答：真核生物得转录因子可以分为两部分，BiｎdingDomａｉn与AｃtivatｅｄＤomain。
BindingDomain负责结合在DNA上,ActivaｔedＤｏｍａiｎ负责激活转录。
二者都就是相互独立得区域，但二者单独时都不能有转录活性，必须结合在一起或相互靠近在一起才有活性。
在研究蛋白质相互作用中，将一种蛋白质得基因连接在BinｄiｎｇDomａｉn上，将另一种蛋白质得基因结合在BindｉngＤoｍaiｎ上，蛋白质基因表达后就与转录因子得两个Ｄomａin分别结合,两个蛋白质因相互作用而结合在一起,进而使BindｉngDomain与ＡcｔｉvatedDｏmaｉn相互靠近在一起，从而形成具有转录活性得转录因子。
在欲表达得基因区域连上报告基因，通过报告基因得表达与否，就可判断蛋白质之间就是否发生了相互作用。
２5．举三例RNA得研究成就及其在推动分子生物学发展中得重要意义.答：Ribｏzｙme:拓展了酶得概念、内含子自我剪切、生命起源与分子进化。
Antisenｓe-RNＡ：基因表达调控、基因工程。
RNAi：基因表达调控、功能基因组学。
2６。
简要阐明中心法则得提出对分子生物学研究得理论意义与指导作用.答：中心法则体现了遗传信息得唯一性、遗传物质得自决性、信息表达得单程性、序列转换得共线性，为分子生物学研究提供了一个理论框架,分子生物学就是一部从DNA到蛋白质得中心法则得演绎。
中心法则面临得挑战：反转录酶、内含子、不连续转录、非翻译序列、伴刀豆球蛋白A肽链一级结构得重排、RNＡ变通性剪切、RNA编辑、以蛋白质为模板得肽链合成、朊病毒得发现.中心法则得修正：从DNＡ到RNA到肽链不断有新得遗传信息得加入：DＮA:重排RNA:反转录、不连续转录、多种方式剪切、编辑mRNA:跳跃翻译、折叠肽链:氨基酸重排、蛋白质内含子剪切朊病毒复制2７。
比较两种ｍRNA得剪切方式得异同。
答：Cis-splｉciｎg与Trａｎs－spｌiciｎg得比较2９。
4种基因表达调控类型得区分:答:正、负调控：调节蛋白缺乏时对操纵子得影响；ﻫ可诱导、阻遏：操纵子对调节基因表达得小分子所作出反应得特点；有或无Glu调节ｃＡMP—CAP活性得分子生物学机制：Glu代谢物抑制腺苷环化酶、促进磷酸二酯酶调节细胞中ｃAMＰ得水平.当缺乏Glｕ时,生物体内ATP环化酶会使ATP变成ｃAMP，cAMP与CＡP蛋白结合，进入操纵元上CAP位点，此时RNA聚合酶才能进入结合位点开始转录。
如果不缺乏Ｇlｕ得情况下，无法生成cＡＭＰ，也就无法形成复合物，也不能使RＮA聚合酶进入结合位点，开始转录.3２.何谓ＲＮA剪接,何谓RNA编辑？答:RNA剪接:从DNA模板链转录出得最初转录产物中除去内含子，并将外显子连接起来形成一个连续得RＮＡ分子得过程。
RNA编辑（RNAediｔｉnｇ):RNA编辑就是指在mRNA水平上改变遗传信息得过程.RＮA编辑就是通过比较成熟得mRNA与相应基因得编码信息时发现得，成熟得mRＮＡ序列中有几种意想不到得变化,包括U→Ｃ,C→U;Ｕ得插入或缺失、多个G或C得插入等。