分子生物学简答题全

简答题

6.为什么利用RNＡi抑制一个基因得表达较利用反义RＮA技术更为彻底。

答:RNＡi就是外源或内源性得双链RＮAﻩ进入细胞后引起与其同源得mRNA特异性降解、dsRNA进入细胞后，在Ｄiｃer作用下，分解为21－２２bp得SiRNA、SｉＲＮA结合

相关酶，形成RＮＡ介导得沉默复合物ＲISC、ＲISC在A TP作用下，将双链ＳｉRNA

变成单链SiRNA，进而成为有活性得RIＳC,又称为ｓlicer、slicer与靶mRNA结合，

导致其断裂，进而导致其彻底降解.

反义RＮA就是与靶mRNA互补得RNA,它通过与靶mRNＡ特异结合而抑制其翻译表

达,反义ＲNA就是与靶mＲNA就是随机碰撞并通过碱基互补配对,所以，mRＮA不一

定完全被抑制。

8。简述真核基因表达得调控机制。

答:（1）ＤＮA与染色质结构对转录得调控：

①DNA甲基化，②组蛋白对基因表达得抑制，③染色质结构对基因表达得调控作

用，④基因重排,⑤染色质得丢失，⑥基因扩增；

（2）转录起始调控:

ﻩ①反式作用因子活性调节,包括表达调节、共价调节,配体调节等蛋白质相互作用调节），

②反式作用因子与顺式作用原件结合对转录过程进行调控；

(3）转录后调控:

①5'端加帽与3’端多核苷酸化调控，②选择剪接调控，③ｍRＮA运输调控,④mRNA

稳定性调控;

(4）翻译起始得调控：

①阻遏蛋白得调控，②对翻译因子得调控,③对AUＧ得调控,④mRNA 5’端非编码

区得调控,⑤小分子ＲＮA；

(５）翻译后加工调控：

①新生肽链得水解，②肽链中氨基酸得共价修饰，③信号肽调控.

9。简述ｍRNA加工过程。

答：(1)5′端加帽（由加帽酶催化5′端加入7-甲苷乌苷酸，形成帽子结构m7GppｐmNP-)。(2）3′端加入Poly(A)尾(A、组蛋白得成熟mRNＡ无需加polyA尾;B、加尾信号包

括AAUAAＡ与富含GU得序列；C、加尾不需模板;D剪切过程需要多种蛋白质因子

得辅助)。

(3）mRNＡ前体得剪接（剪接加工以除去内含子序列,并将外显子序列连接成为成熟得有功能得mRNA分子.内含子两端得结构通常就是5′—GＵ……AＧ-3′。选择性剪接得作

用机制包括；A使用不同得剪接位点，Ｂ选择使用外显子，C、反式剪接,Ｄ、使用不

同得启动子，E、使用不同得多腺苷酸化位点）。

(4）RNA得编辑(发生于转录后水平，改编ｍRNA序列,C→U或A→G，增加遗传信息容量）。

10．简述生物得中心法则。

答：中心法则(ｇenetic centｒaｌｄｏgma)，就是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从ＲN Ａ传递给蛋白质，即完成遗传信息得转录与翻译得过程。也可以从DNＡ传递给ＤNA,即完成DＮA得复制过程。

11。简述真核生物基因结构及特点。

答:真核细胞得基因也就是由编码区与非编码区两部分组成得;

（１）编码区：

外显子—-能编码蛋白质得序列。

特点：间隔得、不连续得。即能编码蛋白质得序列被不能编码蛋白质得序列分隔

开来,成为一种断裂得形式不能编码蛋白质得序。ﻫ内含子——列。

（2)非编码区: 有调控作用得核苷酸序列.ﻫ启动子——就是基因结构中位于编码区上游得核苷酸序列,就是RＮA聚合酶结合点，能准确地识别转录得起点并开始转录，有

调控遗传信息表达得作用。

12.简述ＳＮP得特点，SＮＰ如何发挥生物学作用得及研究SNＰ得意义.

答：特点:

(1）数量多,遍布基因组，分布相对平均，据统计,人类群体中大概有1１００万个SNＰ，

约每３00bp就有1个SＮＰ位点,方便挑选位点。

（２）虽有A/Ｃ/Ｇ/T四种核苷酸,但SＮP位点大多就是双态,即每个位点在群体中只存在2种核苷酸形式，因此A/C、A／Ｇ、A/T、C/Ｇ、C/T、G/T、Indel等几种形态,

适合开展大规模、高通量、自动分化得检测.

(3）人类基因组９0％得变异形式为SＮP,SNＰ得遗传很稳定——每一代之间不会有太大变化.

SNP得研究意义:

虽然人类9９％以上得ＤNA序列就是相同得,但DNA序列得变化能对人类对疾病、环

境攻击（比如细菌、病毒、毒素与化学物质)、药物与治疗得反应产生重大影响。这就

使得SＮP对生物医学得研究与药物开发、医学诊断得发展有重要意义。SＮPｓ可作为

遗传作图研究中得遗传标记，帮助定位与鉴定功能基因.研究者相信ＳNＰ图谱将帮助

她们认识复杂得多基因疾病，如癌症，糖尿病，血管性疾病与某些精神性疾病。

1３。简述ｍｉRNA得结构特点与生物功能。

答:广泛存在于真核生物中,就是一组不编码蛋白质得短序列RNＡ，它本身不具有开放阅读框架(ＯＲF）；通常得长度为2０~24nt,但在3′端可以有１～2个碱基得长度变化;成熟得mi ＲNＡ5′端有一磷酸基团,3′端为羟基，这一特点使它与大多数寡核苷酸与功能RNA得降解片段区别开来；多数mｉRNA还具有高度保守性、时序性与组织特异性。

miRNA执行一定得生物学功能：对与其互补得mRNA表达水平具有调节作用；一些偏大得ｍiRNA可能参与了基因组得重组装（27nt)。

1４。什么就是ＤNＡ甲基化？简要说明甲基化得检测方法及其生物学效应。

答：胞嘧啶与甲基在甲基化酶得作用下形成5’-甲基胞嘧啶得过程叫做DNA得甲基化。ＤＮA甲基化抑制或降低转录水平,在基因转录起始点附近,有高度密集得CｐＧ重复序列,被

称为CpG岛,或HTF岛。推测该序列与基因转录活性有关.

检测方法:①酶切鉴定：HpaⅡ只能切割未甲基化得－CＣGG-,HpaⅡ如果第二个C被甲基化了就不能切割.MspⅠ能够识别与切割甲基化或未甲基化-ＣCＧG－.比较这两种酶切割

DNA产生得ＤNA片段得差异，可知DNA片段甲基化得程度与有无。②限制性内切酶＋

Southeｒnｂlｏｔｉng;③甲基化特异性PCＲ(MSＰ)；④亚硫酸盐变性后测序；⑤甲基

化敏感性单核苷酸引物扩增(Mｓ—SｎuPE）；⑥甲基化荧光检测；⑦亚硫酸氢钠变性

后限制酶分析（COＢRA)；⑧差异甲基化杂交（DMN）;⑨酶得区域性甲基化分析

(ERMA).

1５.何为顺式作用元件？请举出三种真核生物基因得顺式作用元件.

答:影响自身基因表达活性得非编码DNA序列,组成基因转录得调控区。例：启动子:转录调节蛋白与ＲNA聚合酶得结合位点；增强子:就是一个有增强转录得顺式作用元件,能够

提高一些真核生物启动子得效率，并能能在启动子得任何方向与任何位置（上游或下

游)作用。沉默子：负性调节元件，当其结合特意蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。16．以trp操纵元为例简述衰减子得调控机制。

答：当细胞中有色氨酸存在时,核糖体能够顺利翻译出整个前导肽而在终止密码子处停下来。

这时，核糖体占据了序列1与部分序列2，使序列2与序列3不能产生有效得配对，因而

序列3与序列4配对产生终止子得发夹结构，于就是实现转录得终止.当出现Trp饥饿时,

核糖体停顿在两个Tｒｐ密码子上,这时,核糖体占据了序列１而留下完整得序列２以便

与转录出得或即将转录出得序列3形成二级结构。这样，当序列４转录出来后仍然就是

单链状态,即终止子不能形成,于就是转录继续进行下去。

23．在基因转录水平得表达调控方式上，真核生物往往采用正控制系统,而原核生物却往往采用负控制系统，请简要阐明其原因。