分子生物学简答题
分子生物学部分简答题及答案
1．分别说出5种以上RNA的功能？转运RNA tRNA 转运氨基酸核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成信使RNA mRNA 蛋白质合成模板不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用核酶Ribozyme RNA 有酶活性的RN2．原核生物与真核生物启动子的主要差别？原核生物TTGACA --- TA TAA T------起始位点-35 -10真核生物增强子---GC ---CAA T----TA TAA—5mGpp—起始位点-110 -70 -253.对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？天然质粒往往存在着缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建：a、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择,通常是抗生素基因。
b、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。
c、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。
d、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。
e、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件4、利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？原理是采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。
由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。
根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。
根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。
方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列5、激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）。
分子生物学简答题
分子史上的经典事件？答：1953watson 和crick 提出的DNA分子双螺旋模型在科研过程中，要具有清醒的宏观洞察力、非凡的科学想像力和严密的逻辑思维能力，选择正确的研究路线，广泛借鉴他人的研究成果并加以综合性的科学思考。
分子生物学的理论基础是？主要的研究策略有？（第一章）答：1958年，克里克提出两个学说，奠定了分子生物学的理论基础。
第一个学说是“序列学说”，它认为一段核酸的特殊性完全由它的碱基序列决定，碱基序列编码一个特定蛋白质的氨基酸序列，蛋白质的氨基酸序列决定了蛋白质的三维结构。
第二个学说是“中心法则”，遗传信息只能从核酸传递给核酸，或核酸传递给蛋白质，而不能从蛋白质传递给蛋白质，或是从蛋白质传回核酸。
研究策略：体内和体外实验的结合将遗传和DNA联系起来。
体内（In vivo）实验：在活体内进行的实验，包括在培养的细胞或组织。
体外（In vitro）实验：在细胞提取物中，或者是人工合成的细胞成分混合物中。
分子与其他学科关系？生物学离不开生物学技术？答：分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的。
现代生物学的发展越来越多的应用分子生物学的理论和方法进行研究。
什么是分子生物学？广义的概念：分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
狭义的概念：从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控等，也称之为基因的分子生物学。
DNA分子在结构上为什么最适合作为遗传信息载体？（第二章第一节）化学性质比较稳定，DNA复制时严格遵守碱基互补配对原则，且为半保留复制；四种脱氧核糖核苷酸可以组成不同的长链，可以携带大量遗传信息。
DNA提取操作要点是?（第二章第一节）提取原则：保持一级结构的完整性，将其他生物大分子的污染降到最低。
分子生物学简答题
1.（1）说明基因组的大小和基因组复杂性的含义基因组的大小：指在基因组中DNA的总量基因组复杂性：指基因组中所有单一序列的总长度（2）这个基因组的大小怎样？4000bp（3）这个基因组的复杂性如何？450 bp2.试比较原核生物与真核生物的翻译原核生物与真核生物的翻译比较如下：仅述真核生物的，原核生物与此相反。
①起始Met不需甲酰化②无SD序列，但需要一个扫描过程③tRNA先于mRNA与核糖体小亚基结合④起始因子比较多⑤只一个终止释放因子3.试比较真核生物与原核生物mRNA转录的主要区别原核生物：操纵子RNA聚合酶核心酶加δ因子不需加工与翻译相偶联类核真核生物：单基因RNA聚合酶Ⅱ聚合酶加转录因子需加工故与翻译相分离核内4.激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP，cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP。
当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。
一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征（TTGACA）。
因此RNA聚合酶难以与其结合。
CAP的存在（功能）：能显著提高酶与启动子结合常数。
主要表现以下二方面：①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向，以便与-10区结合，起到取代-35区功能的作用。
②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合，从而提高与其特定启动子结合的概率。
5.原核生物与真核生物启动子的主要差别原核生物TTGACA——TATAA T——起始位点-35 -10真核生物增强子——GC——CAAT——TA TAA——5mGpp——起始位点-110 -70 -256.比较DNA复制和RNA转录的异同相同点：DNA复制和RNA转录在原理上是基本一致的，体现在：①这两种合成的直接前提是核苷三磷酸，从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成②两种合成都是一个酶为四种核苷酸工作③两种合成都是以DNA为模板④合成前都必须将双链DNA解旋成单链⑤合成的方向都是5-37.假设从一种生物抽提了核酸，你将用什么简便的方法，区别它是DNA或RNA？是单股或双股？我们可用紫外分光光度计对抽提的核酸进行鉴定。
分子生物学简答题
试述乳糖操纵子的阻遏作用、诱导作用及正调控。
阻遏作用：阻遏基因lacl转录产生阻遏物单体，结合形成同源四体，即阻遏物。
它是一个抗解链蛋白，当阻遏物与操纵基因O结合时，阻止DNA形成开放结构，从而抑制RNA聚合酶的功能。
lacmRNA的转录起始受到抑制。
诱导作用：按照lac操纵子本底水平的表达，每个细胞内有几个分子的β-半乳糖苷酶和β-半乳糖苷透过酶。
当加入乳糖，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶的作用下转变为诱导物异构乳糖，诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之因不能与操纵基因结合而失活，O区没有被阻遏物占据从而激发lacmRNA的合成。
调控作用：葡糖糖对lac操纵子的表达的抑制是间接的，不是葡萄糖本身而是其降解产物抑制cAMP的合成。
cAMP-CAP复合物与启动子区的结合是lacmRNA转录起始所必须的，因为该复合物结合于启动子上游，能使DNA双螺旋发生弯曲。
有利于形成稳定开放型启动子-RNA 聚合酶结构。
如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中，lac操纵子处于阻遏状态，不能被诱导试述 E.coli的RNA聚合酶的结构和功能。
2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个亚基组成的核心酶，加上一个亚基后则成为聚合酶全酶α亚基：核心酶组装、启动子识别β和β’亚基：β和β’共同形成RNA合成的催化中心因子：存在多种因子，用于识别不同的启动子试述原核生物DNA复制的特点。
1.原核只有一个起始位点。
2.原核复制起始位点可以连续开始新的复制，特别是快速繁殖的细胞。
3.原核的DNA聚合酶III复制时形成二聚体复合物。
4.原核的DNA聚合酶I具有5'-3'外切酶活性DNA解旋酶通过水解ATP 产生能量来解开双链DNA单链结合蛋白保证被解链酶解开的单链在复制完成前保持单链结构DNA拓扑异构酶消除解链造成的正超螺旋的堆积，消除阻碍解链继续进行的这种压力，使复制得以延伸真核生物hnRNA必须经过哪些加工才能成为成熟的mRNA，以用作蛋白质合成的模板？（1）、在5’端加帽，5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。
医学分子生物学简答题
四、简答题1.碱基对间在生化和信息方面有什么区别?2.在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的百分含量?3.真核基因组的哪些参数影响Cot1／2值?4.请问哪些条件可促使DNA复性(退火)?5.为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?6.大肠杆菌染色体的分子量大约是2.5×109Da1)，核苷酸的平均分子量是330Da，两个邻近核苷酸对之间的距离是0.34mn；双螺旋每一转的高度(即螺距)是3.4nm，请问：(l)该分子有多长?(2)该DNA有多少转?7.曾经有一段时间认为，DNA无论来源如何，都是4个核甘酸的规则重复排列(如，ATCG．A TCG．A TCG．A TCG…)，所以DNA缺乏作为遗传物质的特异性。
第一个直接推翻该四核苷酸定理的证据是什么?8.为什么在DNA中通常只发现A—T和C—G碱基配对?9.列出最先证实是DNA(或RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。
10.为什么只有DNA适合作为遗传物质?ll.什么是连锁群?举一个属于连锁基因座的例子。
12.什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。
13.对于所有具有催化能力的内含子，金属离子很重要。
请举例说明金属离子是如何作用的。
14.列出真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别。
15.列出各种tRNA所有相同的反应及个别tRNA的特有反应。
16.在体内，rRNA和tRNA都具有代谢的稳定性，而mRNA的寿命却很短,原因何在?17.为什么真核生物核糖体RNA基因具有很多拷贝?18.为什么说信使RNA的命名源自对真核基因表达的研究，比说源自对原核基因表达的研究更为恰当?19.说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(3％一5％)。
20.为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定?21.起始tRNA具有哪两种与其他tRNA不同的特性?22.区别rRNA和mRNA在翻译中的作用。
23.氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?24.简要说明证明信使的存在及其本质为RNA的证据。
分子生物学简答题
1.简述临床分子生物学检验在复杂性疾病中的应用。
（1）在感染性疾病中，对微生物感染作出确诊、对感染性病原体进行分型和耐药性监测；（2）通过患者的DNA、RNA、染色体、蛋白质和某些代谢产物来揭示与遗传病发生相关的生物学标记，从而对遗传型疾病进行早期预防、早期诊断和早期治疗的目的；（3）用分子生物学检验方法寻找特异性肿瘤基因型标志进行肿瘤基因检测，有利于肿瘤的早期发现和诊断，以及肿瘤的预防和治疗；（4）推动个体化医学的发展。
2.简述RNA 生物标志物的优点。
RNA 生物标志物包括多种形式，如mRNA、tRNA、miRNA、lncRNA 等；多种病理生理过程、药物治疗或食品中的物质均可以在转录水平上出现差异；基因表达在mRNA 水平上的变化通常大于蛋白质水平的变化；在血浆中存在游离的循环miRNA 可以反应体内的病理生理过程；母亲血浆中的胎儿RNA 在无创产前诊断中对染色体疾病的诊断更加方便。
3.简述原核生物基因组的特征。
（1）原核生物基因组较小（2）原核生物的类核结构（3）原核生物的操纵子结构（4）原核生物的结构基因中无内含子成分，其R NA 合成后不需要经过剪接加工过程（5）具有编码同工酶的基因（6）含有可移动D NA 序列4.简述核酸分离纯化的主要步骤。
目前核酸的分离纯化主要包括4 个步骤：①制备细胞及破碎细胞。
②消化蛋白质，去除与核酸结合的蛋白质、多糖及脂类等生物大分子。
③去除其它不需要的核酸分子。
④沉淀核酸，去除盐类、有机溶剂等杂质。
5.简述蛋白质分离纯化的方法及其原理。
（1）根据蛋白分子大小不同：主要有透析、超滤、凝胶过滤和离心等。
（2）根据蛋白分子溶解度不同：常用的方法有等电点沉淀和pH 值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法等。
（3）根据蛋白表面电荷不同：常用方法有电泳和离子交换层析。
（4）采用配体的特异性亲和力：亲和层析等。
6.Southern 印迹杂交的临床应用（1）单基因遗传病的基因诊断（2）基因点突变的检测7.Nouthern 印迹杂交的临床应用（1）RNA 病毒的检测（2）基因表达的检测8.核酸分子杂交的影响因素在核酸杂交反应中影响杂交体形成因素较多，主要有探针的选择、探针的标记方法、探针的浓度、杂交率、杂交最适温度、杂交的严格性、杂交反应时间及杂交促进剂等。
分子生物学简答题
第二章1、DNA二级结构的特点？答：（1）DNA分子是由两条互相平行的脱氧核甘酸长链盘绕而成的（2）DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在内侧.2.阐述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验？答：用普通培养基（含14N的氮源）培养15N标记的大肠杆菌，经过一代后，所有DNA 的密度都在15N-DNA和14N-DNA之间，即形成了一半15N和一半14N的杂合分子，两代后出现等量的14N分子和14N-15N杂合分子。
若再继续培养，可以看到14N-DNA分子增多，说明DNA分子复制时均可被分成两个亚单位，分别构成子代分子的一半，这些亚单位经过很多代复制仍然保持着完整性。
3.描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用？答：该酶被认为在切除由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中起着重要的作用，它也可用以出去冈崎片段5,端RNA引物，使冈崎片段间缺口消失，保证连接酶将片段连接起来。
4.DNA的损伤原因是什么？答：DNA的损伤分自发性损伤、物理因素引起的DNA损伤、和化学因素引起的DNA损伤.自发性损伤是由于DNA复制中的错误和碱基的自发性化学变化造成DNA的损伤.物理因素引起的DNA损伤常是缘于紫外线引起的DNA损伤和电离辐射引起的DNA损伤.化学因素引起的DNA损伤是突变剂或致癌剂对DNA的作用,包括烷化剂对DNA的损伤和碱基类似物对DNA的损伤.5.组蛋白具有哪些特性？答：进化上的极端保守性，无组织特异性，肽链上氨基酸分布的不对称性，组蛋白的修饰作用（包括甲基化，乙酰化，磷酸化，范素化9口「核糖基化），富含赖氨酸的组蛋白H56.比较原核生物和真核生物DNA复制的不同点。
答：真核生物每条染色质上可以有多处复制起始点，而原核生物只有一个起始点；真核生物的染色体在全部完成复制之前，个个起始点上DNA的复制不能再开始，而在快速生长的原核生物中，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，表现为虽只有一个复制单元，但可有多个复制叉。
简答题
分子生物学考试简答题１、何谓断裂基因( split gene)?何谓重叠基因( overlapping gene)?它们在生物进化与适应上有何意义?答：断裂基因是指真核生物的结构基因，它由外显子和内含子组成。
重叠基因指的是两个或两个以上的基因共用一段DNA序列。
断裂基因有利于变异和进化。
（虽然单个碱基的改变有时可引起氨基酸的变更而造成蛋白质的变化，但是很难产生重大变化形成新的蛋白质，单个碱基突变发生在密码子第三位往往是沉默的大大降低了突变效应，而在断裂基因中如果发生在内含子与外显子的结合部位，那么就会发生剪接方式的改变结果是蛋白质结构发生大幅度的变化，从而加速进化）。
重叠基因是原核生物进化的经济原则，用较小的C值可编码加多的基因信息。
２、什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。
答：等位基因是指同一基因的不同状态通常位于不同的同源染色体上。
顺反子是基因表达的单位即转录单位，在原核生物中一般由多个翻译成蛋白质的片段组成，而真核生物中则不然。
仅含有一个翻译单位的转录单位成为一个顺反子。
顺反子可以通过互补分析得以鉴定。
３、你如何证明 Ty元件在转座时经历了一个RNA中间体?答：构建一个含内含子与δ元件的人工Ty 元件。
采用诱导型GAL 启动子合成大量的Ty 元件的mRNA，从而使这一元件整合到基因组新位点的转座频率增加。
检测新插入的Ty 元件。
若具有δ元件但缺少内含子，则通过RNA 的中间体。
（该知识点在课本85页，老教材）４、IS元件整合到靶位点时会发生什么?答：由于在转座子插入之前已产生一个交错切口，而且这一交错切口在转座子插入后被填补，因此导致靶位点序列重复。
答：IS元件整合到靶位点时，转座酶对受体靶位点序列和供体转座子的末端反向重复序列进行特定长度的交错切割。
共同的机制使转座子和靶序列的切口末端发生交叉共价连接，形成单链移复合体，DNA聚合酶利用连接缺口的3‘—OH末端和模板链填补缺口，完成转座子及正向重复序列复制，而后发生供体转座子的复制型转座或非复制型转座。
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分子史上得经典事件？答:1９53waｔｓon 与cｒick 提出得DＮＡ分子双螺旋模型在科研过程中,要具有清醒得宏观洞察力、非凡得科学想像力与严密得逻辑思维能力,选择正确得研究路线,广泛借鉴她人得研究成果并加以综合性得科学思考。
分子生物学得理论基础就是？主要得研究策略有?(第一章)答:1958年,克里克提出两个学说,奠定了分子生物学得理论基础。
第一个学说就是“序列学说”,它认为一段核酸得特殊性完全由它得碱基序列决定,碱基序列编码一个特定蛋白质得氨基酸序列,蛋白质得氨基酸序列决定了蛋白质得三维结构。
第二个学说就是“中心法则”,遗传信息只能从核酸传递给核酸,或核酸传递给蛋白质,而不能从蛋白质传递给蛋白质,或就是从蛋白质传回核酸。
研究策略:体内与体外实验得结合将遗传与DＮA联系起来。
体内(In v ｉvo)实验:在活体内进行得实验,包括在培养得细胞或组织。
体外(In ｖｉtro)实验:在细胞提取物中,或者就是人工合成得细胞成分混合物中。
分子与其她学科关系?生物学离不开生物学技术?答:分子生物学就是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来得。
现代生物学得发展越来越多得应用分子生物学得理论与方法进行研究。
什么就是分子生物学？广义得概念:分子生物学就是研究核酸、蛋白质等生物大分子形态、结构特征及其重要性、规律性与相互关系得科学、狭义得概念:从分子水平研究生物大分子得结构与功能从而阐明生命现象本质得科学,主要指遗传信息得传递(复制)、保持(损伤与修复)、基因得表达(转录与翻译)与调控等,也称之为基因得分子生物学。
DNA分子在结构上为什么最适合作为遗传信息载体？(第二章第一节)化学性质比较稳定,DNＡ复制时严格遵守碱基互补配对原则,且为半保留复制;四种脱氧核糖核苷酸可以组成不同得长链,可以携带大量遗传信息。
ＤNA提取操作要点就是？(第二章第一节)提取原则:保持一级结构得完整性,将其她生物大分子得污染降到最低。
提取流程:破碎细胞;DＮA释放到水相;去垢剂或蛋白变性剂抽提;除去蛋白等杂质。
DNA沉淀, DNA溶解与保存。
ＤＮA提取与鉴定得相关操作中需要注意什么?1)DNA分子较大应注意防止机械张力将其打断,所以操作要轻柔,离心速度要控制。
２)要灭活DNＡ酶,采用0、01M得EDTA或者柠檬酸钠处理,或者用去垢剂(ＳDS)、蛋白变性剂(苯酚、氯仿等)就可以基本灭活,此外,５5 ℃处理也经常用于灭活残余得ＤＮA酶、3)除去蛋白质等杂质时酚抽提要彻底,上清要去尽,吸取上清时不要带有沉淀。
４)鉴定时注意电泳时得电压,电泳缓冲液得浓度,ｐH;选用合适得凝胶以及凝胶得浓度。
简述RNＡ得功能、(1)ＲNA就是一些病毒得遗传物质。
(2)与蛋白质合成有关,ｍRNA 在功能上就是基因与蛋白合成机器之间得中介;ｔRNA在功能上就是mRＮＡ上密码子与氨基酸之间得衔接分子。
(３)有些RNA具有催化活性(核酶)。
例如研究发现,四膜虫得26ｓrRNA得单个内含子在体外具有自我剪接功能;RNａse P中得RＮA组分在体外能对ｔRNA前体进行加工。
(4)ＲＮA可以通过多种途径调节基因表达。
调解途径包括不同得RNA折叠,核糖开关,与非编码RNA有关得RNA干扰现象、X染色体随机失活现象等、获得高质量RNA得操作应注意什么?RNA一般分子量较小,不易被机械拉力打断;最重要得就是抑制RＮA酶(ＲNase)得活性,防止RＮA被降解。
因此,要创造一个严格得无RＮA酶环境首先要防止外源RNａse污染:洁净实验室环境一次性手套,勤换;操作时可以带口罩、环境洁净(避免飞尘中细菌、真菌产生外源性RNA酶污染,无空气对流)玻璃与塑料器皿处理。
玻璃:常规洗净后,２0０℃干烤4小时塑料器皿(离心管、枪头等):用0。
1％得DEPC水常温浸泡过夜,灭菌干燥后使用、溶液配制:加０、1％DEPC处理得双蒸水配制,高压除去残留得DＥＰC。
其次,抑制内源RNase得活性。
抑制剂有β—巯基乙醇,异硫氰酸胍, 十二烷基肌酸钠。
１。
简述蛋白质得功能与活性调控主要层次。
1)构成组织与修补组织。
蛋白质就是构成组织细胞得主要材料、２)构成酶与某些激素得成分。
3增强机体抵抗力,构成抗体调节渗透压供给热能。
转录水平翻译水平翻译后水平2、什么就是蛋白质组学？简述蛋白质组学研究得一般流程。
沿着双向电泳—质谱—蛋白质数据库检索这一典型得蛋白质组学研究技术路线。
蛋白质组学就是应用各种技术手段研究蛋白质组得一门新兴科学。
Ａ)整体角度分析细胞内动态变化得蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态B)了解蛋白质之间得相互作用与联系;ｃ)揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。
2。
比较以下概念: 外显子与内含子外显子(exｔron):成熟得mRNA或蛋白质中存在得序列。
(在DＮA或mRNＡ中都存在得序列)内含子(inｔroｎ):在DNＡ上存在,而在mRNＡ(或cDNA)中不存在得序列,初级转录产物加工成成熟mＲNA时被切除得间隔序列。
基因编码区与cDNA编码区基因编码区既包括外显子还包括内含子,ｃDNA编码区只就是外显子得拼接启动区与终止区启动区就是位于编码区上游得非编码区,包括增强子,TAＴＡbｏx等一些转录起始元件,终止区就是位于编码区下游得非编码区,包括终止子。
初级转录产物与成熟mRNＡ初级转录产物就是由DＮA转录出来得ｍRNA前体,还没有经过加工修饰,里面还有内含子序列转录出来得产物。
成熟ｍRNＡ就就是初级转录产物切去内含子对应部分得序列,最终编码蛋白质得序列。
如何理解ＤＮA复制就是一个复杂得过程?与DＮA复制有关得蛋白质(包括酶)主要有哪些,有什么作用?DNＡ分子就是反向平行得两条互补链;DNA双链解旋需要能量与;解旋形成得DNA单链有形成链内碱基配对得趋势,需要单链结合蛋白得参与;ＤNＡ复制需要多种酶参与,如:引物酶,DNA聚合酶,解旋酶,拓扑异构酶等;复制中偶尔出错,需要校正机制;无论环状DNＡ还就是大分子量得DNA对复制系统都有物理限制拓扑异构酶:去除DNA 解旋时在复制叉部分产生得超螺旋解旋酶:解开DNA双链。
引物酶:在单链ＤＮＡ处合成引物,形成引物模版接头。
DNＡ聚合酶:合成ＤNＡ,修复DNA。
单链结合蛋白:与单链ＤNＡ结合,防止DＮA复性滑动夹蛋白:增强DNA聚合酶得延伸能力DNA连接酶:连接相邻ＤＮA链RNＡ酶:去除RNA引物、DＮA复制得半保留特性与半不连续特性就是怎样发现得？DNＡ半保留复制最初就是由沃森与克里克提出得,19５８年,Matthew Ｍeｓelson与ＦｒankliｎＷ。
Stａhl得实验确定了DNA得复制就是半保留方式。
采用含非放射性得15N 得培养基培养细菌若干代,被15Ｎ标记得大肠杆菌转入14N为氮源得培养基中,完成第一代、第二代繁殖时,通过CsCl密度梯度离心分离ＤＮＡ,由于DNA得密度不同,形成在260ｎm紫外光下可见得不同位置得条带、Oｋazaki得脉冲标记与脉冲追踪得实验发现DＮＡ就是半不连续复制得。
材料就是受T4噬菌体感染得大肠杆菌吗,用3H标记得脱氧胸苷进行脉冲标记,再加入大量非同位素标记得脱氧胸苷进行追踪,在不同得时段,收集大肠杆菌,抽取DNA,碱变性处理,超离心,分离大小不同得ＤNA,进行密度梯度离心,离心管底部与上部均有放射性,表明复制过程中形成得有大片段也有小片段、证明了复制得半不连续性。
分子生物学中得工具酶在使用时需要注意什么？请举例说明。
要注意温度与缓冲液用量,例如Ｔ4DＮA连接酶,酶量 1 μl,缓冲液用量２.5 μl,反应温度就是16℃1。
线性DNA得复制如何解决后随链上最后一个引物去除之后得缩短问题？简述机制。
途径1:蛋白质代替RNA作为引物:具有线性染色体得细菌与某些具有线性染色体得病毒,以蛋白质代替ＲＮA作为引物,“引物蛋白”利用氨基酸提供—ＯＨ。
途经2:端粒酶:染色体得末端结构-—端粒得3‘端都突出成为单链DNA,可以募集端粒酶进行末端复制、端粒结合蛋白在线性染色体得复制与结构得维持上有什么作用?端粒结合蛋白可以调节端粒酶得活性,从而调控端粒序列得长度。
与端粒双链区域结合得蛋白会精确得调控端粒得长度,这些蛋白作为弱得阻抑物可以抑制端粒酶得活性,抑制效应与端粒得长度正相关。
端粒较短得时候,仅有少量得端粒结合蛋白,对端粒酶得抑制效应较弱,端粒酶可以延伸端粒得3‘端;当DNA合成机制完成双链中后随链得合成后,更多得端粒结合蛋白结合到端粒,提高了对端粒酶进一步延伸得抑制、端粒结合蛋白形成t—ｌoop结构,可以保护染色体末端。
人类细胞中分离得端粒就是环状结构,该结构叫做t－loｏp,就是端粒3’单链ＤNA末端向端粒得双链DNA区域插入产生得,与端粒得长度控制有关,因为环状结构可以保护端粒不被DNA修复酶修复、似乎端粒结合蛋白与其她一些胞内蛋白促进了该结构得形成。
原核与真核DNA复制过程有哪些共同点?与原核相比,真核ＤNA复制有哪些特殊之处。
复制得原理相同;都就是起始子蛋白对复制器得识别,通过起始子蛋白以及解旋酶装载器将解旋酶募集到复制器上,解旋酶产生单链DNA区域,作为RNA引物合成得模板。
原核细胞ＤNA复制中,一旦起始子蛋白与复制起点结合,DNA解旋酶就会被招募到起点,起始复制,真核细胞DNA复制中,起点得选择与复制得起始就是分离得,这就是通过形成前复制复合物控制得、两个事件得分离可以阻止基因组得过度复制;真核细胞ＤNＡ得复制有多个起点、复制调节中,细菌就是DnaA起始蛋白与DＮA得结合;真核生物就是MCM解旋酶与DNA得最初结合上。
与原核相比,真核解决末端复制问题得途径多样。
细胞中参与DNA修复得聚合酶为什么比参与DNＡ复制得聚合酶要多,如何瞧待这一事实、维护DNA遗传信息得稳定性对生物细胞来说就是极其重要得。
作为一种能决定生命状态存在与延续得生物大分子,ＤNＡ分子得序列在遗传过程中必需保持高度得精确性与完整性,因此细胞中含有大量用于修复DNA损伤得修复系统,ＤNＡ修复系统就是细胞进化出得保证在损伤阻碍复制或者产生突变之前就识别,并且修复损伤得机制。
可多修复机制可以由不同得酶来发动,如切除修复机制,能对各种DNA得损伤进行修复,以保持每个世代遗传信息得稳定性,因此细胞中含有大量用于修复ＤＮA损伤得酶。
参与修复得酶包括在复制中以及在转录翻译中出现突变进行修复得酶,因此细胞中参与DNA修复得聚合酶比参与ＤNA复制得聚合酶要多。
转录与ＤＮA得复制在化学与酶学上有哪些相似性,有哪些重要差别？(1)转录过程需要得原料就是核苷酸,ＤNA复制过程需要得原料就是脱氧核苷酸;(2)参与得酶不同:转录就是ＲNA聚合酶,复制就是DNA聚合酶;(3)转录过程不需要引物,复制过程需要引物;(4)转录出来得RNA产物与模板DNA不保持碱基互补配对;(5)转录缺乏广泛得校正机制,错误率为10—4,复制得错误率仅为１0－７(６)转录选择性得拷贝基因组中得特定部分,基因组得不同部分转录得程度不同,DNＡ复制就是对全基因组得复制。