微生物实验复习资料
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微生物学复习第二章纯培养和显微技术第一节微生物的分离和纯培养一、无菌技术(在分离、转接及培养纯培养物时防止其被微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术)o 用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物；o 在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染，其自身也不污染环境；1. 微生物培养的常用器具（试管玻璃烧瓶培养皿）及其灭菌（高压蒸汽灭菌可杀死微生物休眠体：芽孢高压干热灭菌）2. 接种操作：在无菌条件下，用接种针或接种环挑取微生物，把它有一个培养皿转接到另一个培养皿进行的操作。
是微生物最常用的基本操作。
二、用固体培养基分离纯培养菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。
菌苔：在还固体培养基表面众多菌落连成一片时便成为菌苔。
不同微生物在特定的固体培养基上生长形成菌落和菌苔都具有稳定的特征，可成为对该菌落进行分类鉴定的重要依据。
培养平板：被用于微生物纯培养的最常用固体培养基形式它是冷却凝固后的培养基在无菌培养皿中形成的固体培养平面，简称平板。
以下各方法具体内容参见复印资料第10页1. 稀释倒平板法：操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好！2、涂布平板法：使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！3. 平板划线法4.稀释摇管法三、用液体培养基分离纯培养1、稀释法2、富集培养四、单细胞（孢子）分离单细胞分离法：采取显微分离法从混杂群体中直接分离单细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。
五、选择培养分离选择培养分离：1）、抑制大多数其它微生物的生长；2）、使待分离的微生物生长更快；使待分离的微生物在群落中的数量上升，方便用稀释法对其进行纯化。
3）、使待分离的微生物生长"突出"；直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养。
1、利用选择平板进行直接分离:根据待分离微生物的特点选择不同的培养条件（抗生素平板牛奶平板高温培养）2、富集培养：利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定特定的环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在菌落中的数量大量增加，是人们更容易从自然界中分离到这种所需的特定的微生物。
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微生物学复习资料第一章原核微生物的形态、构造和功能伴孢晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规那么形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体〔即ð内毒素〕。
L型细菌：在某些环境条件下〔实验室或宿主体内〕通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。
1．没有完整而坚韧的细胞壁，细胞呈多形态，有些能通过细菌滤器，故又称“滤过型细菌〞。
对渗透敏感，在固体培养基上形成“油煎蛋〞似的小菌落〔直径在左右〕古生菌：又称古细菌，是一个在进化途径上特别早就与真细菌和真核生物相互独立的生物类群，要紧包括一些独特生态类型的原核生物，如产甲烷菌及大多数嗜极菌。
革兰氏染色机制：结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
乙醇脱色：G＋细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其维持紫色；G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，使细胞退成无色。
复染:G-细菌呈现红色，而G+细菌那么仍维持最初的紫色。
重要性:革兰氏染色有着十分重要的理论与实践意义。
通过这一染色，几乎可把所有的细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两个大类，因此它是分类鉴定菌种时的重要指标。
又由于这两大类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异，因此任何细菌只要通过简单的革兰氏染色，就可提供许多其他重要的生物学特性方面的信息。
第二章真核微生物的形态、构造和功能1子实体：是指在其里面或上面可产生无性或有性孢子，有一定外形和构造的任何菌丝体组织2菌物界：指与动物界，植物界相并列的一大群无叶绿素，依靠细胞外表汲取有机养料，细胞壁一般含几丁质的真核微生物3二级菌丝：又称气生菌丝，由基内营养菌丝长出培养基外伸向空间的菌丝。
它是担子菌中由相应的异性的初生菌丝进行体细胞接合而形成的菌丝。
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绪论一、填空题1 世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人列文虎克，他的最大贡献是利用自制的单式显微镜发现了微世界。
2 微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德，而被称为细菌学奠基者是德国的科赫。
3 微生物的五大共性指：体积小面积大、吸收快转化多、生长旺繁殖快、适应强易变异、分布广种类多，其中最主要的共性应是：体积小面积大。
(课文中给出的特点是1、大多数微生物肉眼难以直接观察2、微生物通常以独立的增值单位存在3、微生物结构简单4、微生物生长快速5、微生物几乎无所不在6、微生物的研究使用相同的方法)因为有一个巨大的营养物质吸收面，代谢废的排泄和环境信息的交换面，并由此产生其他4个共性。
4 微生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒；具原核细胞结构的真细菌、古生菌、具真核细胞结构的真菌，单细胞藻类、原生动物等。
二、选择题1、微生物是一些个体微小，构造简单的低等生物的总称，它们的大小一般小于（C ）。
A、1cmB、1mmC、0.1mmD、1μm2、当今，一种新的瘟疫正在全球蔓延，它是由病毒引起的（C ）。
A、鼠疫B、天花C、艾滋病D、霍乱3、人类已消灭的第一个传染病是（C ）。
A、麻疹B、脊髓灰质炎C、天花D、水痘三、判断题1.微生物所包括的都是一些小型、简单的单细胞生物（×）2.17世纪后期，微生物学先驱者列文虎克用自制的只有一块小透镜的单式显微镜最先观察到了细菌（√）3.巴斯德是细菌学的奠基人（×）4.巴斯德曾用著名的曲颈瓶试验推翻了当时流行的生命起源于生命的胚种学即生源论。
（√）第一章原核生物的相态、构造和功能1．细菌的基本形态有（球状）、（杆状）和（螺旋状）。
2．根据分裂方式及排列情况，球菌分（单球菌）、（双球菌）、（四联球菌）、（八叠球菌）、链球菌）和（葡萄球菌）等。
3．螺旋状的细菌有三类不同形态，若螺旋不满一周者称（弧菌），小而坚硬，螺旋数在2-6环间者，称（螺菌），而螺旋数多，体长而柔软者，则称（螺旋体）。
微生物复习总结资料
微生物复习资料总结一．名词解释1. 微生物．个体微小，结构简单，肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。
2．菌落：单个微生物细胞或一小堆同种细胞在固体培养基表面在适宜的培养条件下以母细胞为中心形成的有一定形态结构的子细胞集团。
3．发酵：厌氧微生物的一种产能方式，有机物氧化放出的电子直接交给基质本身未完全氧化的某种中间产物，放出少量能量和产生各种不同的中间产物。
4．转化：受体菌在环境中直接吸收供体菌的部分DNA片段，并整和到自身的DNA组合中，获得供体菌部分遗传性状的现象。
5．选择培养基：根据某种微生物的特殊营养需要或对某种化合物的敏感性不同而设计的一种培养基。
6．生长因子：指微生物生长所必须且需求量很小，微生物自身不能合成以满足机体生长需要的有机物。
7．化能自养：利用无机物氧化放出的化学能为能源，以二氧化碳或碳酸盐为唯一碳源或主要碳源的营养类型。
8．BOD：五日生化需氧量。
9.烈性噬菌体：引起寄主细胞迅速裂解的噬菌体10. 将含有微生物的纯种或材料转移到培养基上的过程11.一些属的细菌当生长到一定阶段时，细胞内部即形成一种圆形或椭圆形的特化的休眠体。
12. L型细菌：严格地说，专指实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损的菌株。
13.鉴别性培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。
14.同步生长:这种通过同步培养而使细胞群体处于分裂步调一致的状态，就称同步生长。
15.无菌技术：在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。
2.噬菌斑:由于噬菌体粒子对敏感菌宿主细胞的侵染和裂解，而在菌苔上形成具有一定大小、形状、边缘的透明圈，称为噬菌斑。
3.溶源性: 温和噬菌体侵入宿主细胞后，由于基因组整合到宿主细胞的基因组上，与宿主细胞 DNA 同步复制，因此，一般情况下不引起宿主细胞裂解，这称为溶源性。
微生物复习重点
环境工程微生物学复习资料绪论1、什么是微生物Microbe答：对形体微小,形态简单的低等生物的统称;2、微生物的共同特性有哪些答：1形体微小,结构简单；2 分布广,种类多； 3 生长旺盛,繁殖快；4 适应力强,易变异;3、微生物是如何分类的在生物学上,对生物的分类采用按其生物属性和它们的亲缘关系有次序地分门别类排列成一个系统,系统中有七个等级：界、门、纲、目、科、属、种;每一种生物,包括微生物,都可在这个系统中找到相应的位置;其中种species是分类的基本单位;必要时,还可以在这些等级之间再增设一些亚等级;4、微生物是如何命名的采用生物学中的二名法：即用2个拉丁词或拉丁化的词的方法进行命名;第一个词为属名,第二个词为种名,同时在名称后加上命名人的姓氏缩写;采用生物学中的二名法：学名= 属名 + 种名 + 命名人的姓拉丁文n. 拉丁文adj.斜体斜体第一字母大写第一字母小写第一字母大写5 试说明原核微生物和真核微生物的区别;具有原核细胞的生物称为原核微生物;原核微生物：核发育不完善,仅有核质,没有定形的细胞核,无明显的核膜,没有特异的细胞器,不进行有丝分裂; 典型的原核生物有细菌、放线菌、蓝细菌等; 具有真核细胞的生物称为真核生物;真核细胞：细胞核发育完善,有定形的细胞核核仁、染色体等,有明显的核膜,有特异的细胞器,进行有丝分裂; 大多数生物,包括高等生物都是真核的,如酵母菌;Chapter 1 病毒名词解释：病毒、亚病毒、类病毒、毒性噬菌体、温和噬菌体、原噬菌体1.何为病毒病毒区别于其他生物的特点是什么病毒是没有细胞结构,专性寄生在活的敏感宿主体内的超小微生物;特点；个体极小；专性寄生；没有细胞结构;2.病毒包括哪些形态和基本结构动物病毒的形态有球形、卵圆形、砖形等,植物病毒的形态有杆状、丝状和球状;噬菌体的形态有蝌蚪状和丝状;病毒没有细胞结构,整个病毒体分两部分：蛋白质衣壳和核酸内芯,两者构成核衣壳;蛋白质衣壳是由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳;核酸内芯有两种：核糖核酸RNA和脱氧核糖核酸DNA;被膜囊膜是在衣壳外包围的一层由糖蛋白和脂类物质;3.有被膜的病毒是哪几种类型被膜的作用是什么痘病毒、腮腺炎病毒及其他病毒具有被膜;被膜的作用是维系病毒粒子结构、保护病毒核壳的作用;特别是病毒的被膜糖蛋白,具有多种生物学活性,是启动病毒感染所必需的;4、怎样判断病毒有无被膜用对醚类等脂溶剂鉴别;凡对其敏感的病毒为有被膜病毒,无被膜的病毒对上述物质不敏感;5、叙述大肠杆菌T系噬菌体的病毒的繁殖过程;大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程有：吸附、侵入、复制、聚集与释放;首先,大肠杆菌T系噬菌体以它的尾部末端吸附到敏感细胞表面上某一特定的化学成分,或是细胞壁,或是鞭毛,或是纤毛;噬菌体侵入宿主细胞后,立即引起宿主的代谢改变,宿主细胞内的核酸不能按自身的遗传特性复制和合成蛋白质,而由噬菌体核酸所携带的遗传信息所控制,借用宿主细胞的合成机构复制核酸,进而合成噬菌体蛋白质,核酸和蛋白质聚集合成新的噬菌体,这个过程叫装配;大肠杆菌T系噬菌体的装配过程如下：先合成含DNA的头部,然后合成尾部的尾鞘、尾髓和尾丝,并逐个加上去就装配成一个完整的新的大肠杆菌T系噬菌体;噬菌体粒子成熟后,噬菌体的水解酶水解宿主细胞壁而使宿主细胞破裂,使菌体被释放出来重新感染新的宿主细胞一个宿主细胞可释放10到1000个噬菌体粒子;6、何为溶源性,溶源性有何特性温和噬菌体感染宿主细胞形成原噬菌体的过程;溶源性有遗传特性7、亚病毒包括哪几类病毒类病毒、卫星病毒拟病毒、朊病毒Chapter 2原核微生物1、细菌有哪几种基本形态其形态是固定不变的吗细菌大小用什么单位测量答：1球菌：细胞呈球形,球菌排列方式优势排列较稳定,对于细菌分类鉴定有重要意义;2杆菌：杆菌排列方式不稳定,对细菌分类鉴定无意义;有单杆菌、双杆菌和练球杆菌3螺旋状菌：弧菌：菌体弯曲程度小于一周,呈“C”状,如霍乱弧菌;螺旋菌：菌体弯曲程度大于一周,螺旋圈数及螺距大小因种而异;4丝状菌,有铁细菌、丝状硫细菌细菌形态受环境条件如温度、营养状况、培养时间等因素的影响,环境条件不适时,菌体形态长呈现异常形态;细菌大小的测量单位是微米um2、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有什么区别答：革兰氏阳性菌细胞壁——一层,由很厚的肽聚糖和磷壁酸组成;革兰氏阴性菌细胞壁——分内壁层和外壁层两层;内壁层,紧贴细胞膜,仅由1—2层肽聚糖分子构成,无磷壁酸;外壁层,位于肽聚糖层的外部;3、菌胶团、芽孢、荚膜、菌落的概念答：菌胶团——有些细菌的粘液层粘连在一起,使许多细菌成团块状生长;芽孢：是某些细菌细胞生长发育后期在胞内生成的圆形、椭圆形、圆柱形的抗逆性休眠结构;荚膜——某些细菌细胞壁外形成的厚度不一,疏散、透明、粘稠胶状物质结构;主要由多糖多肽或蛋白质组成;保持水分、储存养分;菌落：在适合的培养条件下单个菌体在固体平面培养基上形成的肉眼可见的群体;4、简单说明细菌有哪些一般结构和特殊结构特殊结构有哪些生理功能答：细菌的一般结构又叫基本结构,即所有细菌都具有的细胞结构部分,包括细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、质粒、内含物等;特殊结构：部分细菌专有的细胞结构部分,包括芽孢、鞭毛、荚膜、菌胶团等; 荚膜的功能：①具有荚膜的S—型肺炎链球菌毒力强,有助于肺炎链球菌侵染人体；②荚膜保护致病菌免受宿主吞噬细胞的吞噬,保护细菌免受干燥的影响；③当缺乏营养时,荚膜可被用作碳源和能源,有的荚膜还可作氮源；④废水生物处理中的细菌荚膜有生物吸附作用,将废水中的有机物、无机物及胶体吸附在细菌体表面上;粘液层在废水生物处理过程中有生物吸附作用,在曝气池中因曝气搅动和水的冲击力容易把细菌粘液冲刷入水中,以致增加水中有机物,它可被其他微生物利用; 细菌之间按一定的排列方式互相粘集在一起,被一个公共荚膜包围形成一定形状的细菌集团,叫做菌胶团;菌胶团在废水生物处理过程中有生物吸附作用和氧化分解有机物的能力,并具有指示作用;芽孢是抵抗外界不良环境的休眠体;鞭毛是细菌的运动器官;5、试述细菌芽孢的特征为什么具有芽孢的细菌能够抵抗不良的环境答：a 强抗逆性：抗高温,抗干燥,抗压,抗药物渗透难于被染色,抗酸碱抗辐射,折光性等;b 休眠性：芽孢可长时间保持休眠状态而不表现代谢活性,正因为此,可保存多年而不丧失生命活力;若环境条件适宜,休眠状态芽孢可萌发并发育形成新营养细胞;C 壁厚质浓,水分少;所以芽孢的特殊结构和代谢活力弱决定了芽孢能够抵抗不良的环境;6、试述细菌革兰氏Gram染色原理答：革兰氏阳性菌G+和革兰氏阴性菌G-两类细菌细胞壁结构组成上有明显差异导致其染色结果不同;G+经过结晶紫初染,碘液媒染,菌体胞壁被染成紫色,后经酒精脱色,由于其细胞壁较厚,肽聚糖结构层次多,且交联程度大,网孔径因酒精脱水而缩小,细胞壁内形成的结晶紫—碘复合物被阻留于细胞壁内,表现为不被脱色,后虽经过复染,最终染色结果仍然为紫色;G-经过结晶紫初染,碘液媒染,菌体胞壁被染成紫色,后经酒精脱色,由于其细胞壁较薄,肽聚糖结构层次少,且交联程度低松疏,细胞内类脂成分含量较大,网孔径因酒精溶解脂类作用而增大,细胞壁内形成的结晶紫—碘复合物被洗脱,后经过红色染料复染,最终染色结果为红色;7、试述革兰氏Gram染色步骤;8、P69 第14题Chapter 3真核微生物名词解释：原生动物、原生动物的孢囊1 简述真菌、藻类、原生动物在废水生物处理中的作用;答：真菌在生物滤池中起到结合生物膜的作用;有效氧化无机氰化物;若大量繁殖易引起污泥膨胀;铁细菌的存在会造成铁质水管的腐蚀和堵塞,并使水呈现颜色,影响水质;藻类大量繁殖产生气味,使水有颜色;藻类过量繁殖造成水体富营养化,危害水生生物,使湖泊变成沼泽或旱地;适量的藻类可使水体自净;原生动物净化废水,以原生动物作为水环境的指示生物;2 原生动物对废水净化有哪些影响答：1鞭毛虫、肉足虫、纤毛虫能直接利用水中的有机物,对水中有机物的净化有一定的积极作用;纤毛虫吞噬游离细菌,改善生物处理出水的水质2在活性污泥中,纤毛虫可促进生物凝絮作用;小口钟虫、累枝虫等能分泌糖类促进絮凝;3指示作用,能指示污水生物处理的效果;3、如何区别霉菌和放线菌的菌落Chapter 4微生物的生理名词解释培养基、生长因子、选择培养基和鉴别培养基1、微生物需要哪些营养物质答：营养物质主要包括碳源、氮源、无机盐、生长因子、水;2、根据所需碳源和能源的不同,微生物的营养类型分为几种其碳源和能源分别是什么答：分为4种,1光能无机营养型,碳源为二氧化碳,能源为光；2化能无机营养型;碳源为二氧化碳,能源为无机化合物氧化；3光能有机营养型,碳源为有机物,能源为光；4化能有机营养型,碳源为有机物,能源为来自有机物氧化;3、简述培养基的分类答：根据物理状态分液体、半固体和固体培养基；根据组成成分分天然培养基、合成培养基和半合成培养基；根据用途分加富培养基、选择培养基和鉴别培养基;4、在配制培养基时琼脂的特性及作用是什么答：琼脂的成分是多缩半乳糖,不被绝大多数微生物分解利用,96℃溶解,42-45℃凝固,对微生物无毒害;琼脂的作用是在培养基的配制中用做凝固剂;5、在进行高压蒸汽灭菌时,为什么要排净锅内的冷空气答：高压蒸汽灭菌利用水蒸气的压力来提高温度,一般要求温度121℃15磅,时间20~30分钟,当水蒸气的压力为15磅时,温度达到121℃;空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压,如果不排除锅内的空气,当压力达到15磅时,温度低于121℃,达不到灭菌的要求;6、影响酶促反应速率的因素有哪些答：温度、pH值、底物浓度、酶的浓度、激活剂和抑制剂;7、试对酶催化效率高的原因进行简要说明;答：酶催化效率高的原因：酶能降低活化能的高度即能阈,从而降低反应物所需的活化能,这样间接增加活化分子的数目,使反应速率加快;8、试区别自养微生物与异养微生物;答：自养微生物生活时所需碳源为无机物,异养微生物生活时所需碳源为有机物;9、灭菌、消毒的概念;答：灭菌——用理化方法杀死全部微生物的营养细胞和它们的芽孢的过程;消毒——用理化方法杀死致病微生物或杀死全部微生物的营养细胞及一部分的芽孢;10、试述微生物灭菌和消毒分别有哪些方法,微生物灭菌和消毒两者的本质区别是什么11、营养物质顺浓度梯度进入细胞的方式有哪些是如何进入的12、营养物质逆浓度梯度进入细胞的方式有哪些是如何进入的13、什么是营养物质营养物质有那些生理功能Chapter 5微生物的生长繁殖与生存因子1、解释细菌的生长曲线;答：将少量纯菌接种到一定量的液体培养基内,在适宜的温度下培养,并定时取样测定活细菌的数目和重量的变化,以活细菌个数的对数或活细菌重量为纵坐标,以培养时间为横坐标作图,所得的曲线即为细菌的生长曲线;2、微生物学实验室常用的灭菌方法有哪些当对啤酒、培养皿、LB培养基、接种工具和无菌室空间进行灭菌时,可分别采用哪些方法答：实验室常用的灭菌方法有：①干热灭菌：包括火焰灼烧法和烘箱内热空气灭菌法160～170℃②湿热灭菌法有常压蒸汽灭菌和加压蒸汽灭菌另外对那些高温易分解或者破坏其营养成分的物质,必须采用除高温以外的其他灭菌手段,如巴斯德消毒法、过滤除菌和紫外灭菌等;③巴氏消毒法④过滤除菌⑤紫外灭菌啤酒--巴氏消毒法培养皿——烘箱内热空气灭菌法、常压蒸汽灭菌和加压蒸汽灭菌LB培养基——加压蒸汽灭菌接种工具——火焰灼烧法和烘箱内热空气灭菌法无菌室空间——先用酒精等消毒液擦洗,再进行紫外灯照射灭菌3、画图解释微生物生长曲线各个时期的特征;常规活性污泥法应该利用哪个时期的微生物为什么1．停滞期少量细菌刚接入一定量的新鲜液体培养基中,并不立即生长繁殖,需要有一个适应过程;此时细胞物质开始增加,但数量不增加或增加很少,而后个别菌体繁殖,个数少许增加;曲线平缓；大量诱导酶合成;2．对数期特点•生长速率最快,细菌数以几何级数增加•代谢旺盛,细胞成分平衡发展•群体的生理特性较一致接种用的好种子;代谢、生理研究的好材料3．静止期特点：细胞代谢活力钝化,细胞成分合成缓慢；细胞生长速率为零；活细胞总数维持不变,即新生的细胞数与死亡的细胞数相等,细菌总数达到最大值4．衰亡期——营养物质被耗尽,细菌进入内源呼吸阶段；有害物质大量积累,不利于细菌的生长繁殖,此时,菌体死亡速度大于繁殖速度,死亡率增加,活菌数减少;细菌常出现畸形或衰退型;对于常规活性污泥法,是利用静止期生长下降阶段的微生物,而不是对数期的,这时因为：对数期的微生物生长繁殖快,代谢活力强,能大量去除废水中的有机物,但是相应地要求进水有机物浓度要高,而出水有机物浓度也相应提高,不易达到排放标准；又因为对数期的微生物生长旺盛,没形成荚膜和粘液层,不易形成菌胶团,沉淀性能差,降低出水水质;而处于静止期的微生物虽然代谢活力略低,但仍能较好地去除水中的有机物,且微生物体内积累了大量的贮存物,形成荚膜等,强化了微生物的生物吸附能力,自我絮凝、聚合能力强,在二沉池泥水分离效果好,出水水质好;4、菌种退化、菌种复壮的概念;菌种退化：指群体中退化的细菌占到一定数量后表现出的菌种性能下降的现象; 为了保持菌种的优良特性能够得到保存,需要进行退化菌种的复壮;5、微生物菌种保藏的原理和目的是什么保藏目的：使优良菌种不受污染、不退化、不死亡;保藏原理：创造一定的环境,使被保藏的菌种代谢活力减弱,使其生长、繁殖受到抑制,使微生物处于休眠状态;6、抗生素是如何抑制杀灭微生物的答：通过4个方面：A、抑制微生物细胞壁合成B、破坏微生物的细胞质膜C、抑制蛋白质合成D、干扰核酸的合成7、菌种的保藏方法有哪几种保藏方法：定期移植法低温保藏、干燥、隔绝空气法、蒸馏水悬浮法、综合法等;8、简述测定细菌生长的几种方法;答：直接测定法和间接测定法;直接测定法有显微镜计数法和比浊计数法,测定的是总菌数;间接测定法有平板计数法和薄膜计数法,计数的是活菌数;9、细菌是怎样繁殖的答：细菌的繁殖是裂殖;一个细胞分裂为两个子细胞,核质分裂为二,每个细菌子细胞具有亲本细胞同样的核物质,再进行下一轮的裂殖;以2n级数增加个体数;10、根据最适生长温度不同可将微生物分为几种类型答：三种;低温菌、中温菌和高温菌;11、在微生物的培养过程中,引起pH值改变的原因有哪些在生产实践中如何能保证微生物能处于稳定和合适的pH环境中答：在培养微生物的过程中,随着微生物的生长繁殖和代谢活动的进行,培养基的pH会发生变化,其原因有多方面;例如,大肠杆菌在pH为7左右的培养基中生长,分解葡萄糖、乳糖产生有机酸这会引起培养基的pH下降,培养基变酸;微生物在含有蛋白质、蛋白胨及氨基酸等中性物质培养基中生长,这些物质可经微生物分解,产生NH3和胺类等碱性物质,使培养基pH上升;在废水和污泥厌氧消化过程中,通常pH应控制在—之间;城市生活污水、污泥中含蛋白质,在处理时可不加缓冲性物质;如果不含蛋白质、氨等物质,处理之前就要投加缓冲物质;所加的缓冲物质有碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化铵及氨等;12 紫外线杀菌的机理和适用范围是什么答：机理,使核酸变性形成胸腺嘧啶二聚体,产生新生态氧杀菌;紫外线杀菌力弱,不能穿透玻璃,只用于表面和空气杀菌;书上P200-201习题6,7,21Chapter 7微生物的生态名词解释土壤自净、土壤生物修复、水体自净、富营养化1、为什么说土壤是微生物良好的天然培养基微生物的生长发育主要受到营养物、含水量、温度、pH等因子的影响,土壤具备了微生物所需要的营养和各种环境条件1营养：土壤内有大量的有机和无机物质2pH ：土壤pH 范围在~,多为~；适合于大多数微生物的生长繁殖;3渗透压：土壤内通常为~,土壤是等渗或低渗溶液,有利于微生物吸收水份和营养4氧气和水：土壤具有团粒结构,有孔隙,可以通气和保持水分;5温度：土壤具有较强的保温性,其变化幅度要小于空气;6保护层：表面几毫米厚的土壤,可以使下面的微生物免受紫外线的直接照射;所以说,土壤具备了微生物所需要的营养和各种环境条件,是微生物良好的天然培养基;2、土壤中有哪些微生物从种类上看,以细菌最多,达70-90%,其次为放线菌、真菌,以及藻类、原生动物和微型后生动物等;3、以什么微生物作为空气污染指示菌为什么4、4、什么是指示生物如何用指示生物来评价水体的污染程度答：一种生物只在某一种环境中生长,这种生物就是这一环境的指示生物;污化系统一般根据以下原理分区：当有机污染物排入河流后,在其下游的河段中发生正常的自净过程,在自净中形成了一系列连续的“带”;因为各种水生生物需要不同的生存条件,对各种有害物质也有不同的耐力,包括细菌、真菌、原生动物、藻类、底栖动物、鱼类等;多污带指示生物是细菌、颤蚯蚓,a-中污带的指示生物是细菌、天蓝喇叭虫,B-中污带的指示生物是水生植物出现、轮虫出现,寡污带显花植物出现、鱼类种类多;5、水体有机污染指标有几种6、为什么用大肠菌群作为检验水的卫生指标答：对饮用水进行卫生细菌学检验,目的是保证水中不存在肠道传染病的病原菌;天然水本身存在病原菌的可能性很小,水中的病原菌很可能是受粪便污染带入;所以只检测水中是否有肠道正常细菌存在,而不直接检测水中的病原菌;肠道正常细菌有三类：大肠菌群、肠球菌、产气荚膜杆菌;大肠菌群的生理习性与伤寒杆菌、痢疾杆菌和霍乱弧菌病原菌较为相似,外界存活时间基本一致,肠球菌在外界存活时间比病原菌短检不出不能说水没被污染,产气荚膜杆菌有芽孢可长期存活检出不能说明水体近期污染的；大肠菌群在人粪便中数量很大,另两种数量少不宜检测；大肠菌群的检测技术操作简单,不复杂;所以大肠菌群可做水受粪便污染的指标;7.我国生活饮用水卫生标准GB5749-2006中关于生活饮用水的细菌标准的具体规定是怎样的答：具体规定:1细菌总数1ml水中不超过100个;2 每100ml水样不得检出总大肠菌群数、耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌;3游离性余氯：加氯消毒时,接触时间为30分钟,游离性余氯不低于l；管网末梢游离性余氯不低于l;Chapter 9环境污染控制与治理中的微生物学1、如何区分新生菌胶团和老化菌胶团答：活性污泥性能的好坏,主要可根据所含菌胶团多少、大小及结构来确定; 新生菌胶团颜色较浅,无色透明,有旺盛的生命力,氧化分解有机物的能力强; 老化菌胶团吸附了许多杂质,染色较深,看不到细菌单体,像一团烂泥,生命力较差;2 好氧活性污泥的组成和性质如何答：好氧活性污泥由好氧微生物和兼性厌氧微生物与其上吸附的有机的和无机的固体杂质组成;性质——颜色以棕褐色为佳,黑色说明厌氧、白色说明无机物过多,含水率在99％大小为0．02-0．2mm弱酸性pH约为6．73、菌胶团的作用是什么4、好氧活性污泥运行时微生物会造成哪些问题加以分析;答：常见故障是二次沉淀池中固液分离泥水分离出现问题;起因是活性污泥絮状体的结构不正常造成;造成活性污泥絮状体的结构不正常的原因1不凝聚;污泥在沉淀池中呈悬浮状,高浓度地随水流流出;2起泡沫厚、棕色泡沫;由“硬”洗涤剂的使用而引起诺卡氏菌属的丝状微生物超量生长,气泡又附着在诺卡氏菌的菌体上3污泥膨胀;是活性污泥的性能发生变化,絮块漂浮水面,比重减轻,随着水流而排出;5、生物膜的概念、生物膜处理废水的原理;答：生物膜——微生物在滤料表面繁殖形成的膜状结构;是一个生态系统;生物膜处理废水的原理：1滤池内设置固定的滤料,当废水自上而下滤过时,由于废水不断与滤料接触,微生物在滤料表面繁殖,逐渐形成生物膜;2当生物膜形成并达到一定厚度时,氧就无法透入生物膜内层,造成内层的厌氧状态,使生物膜的附着力减弱;此时,在水流的冲刷下,生物膜开始脱落;随后在滤料上又会生长新的生物膜;如此循环往复,废水流经生物膜后得以净化;6、试述活性污泥法处理废水的净化作用原理,活性污泥法常见的处理工艺有哪些答：活性污泥法处理废水的净化作用过程分三步：第1步在有氧的条件下,活性污泥绒粒中的絮凝性微生物吸附废水中的有机物第2步是活性污泥绒粒中的水解性细菌水解大分子有机物为小分子有机物,同时,微生物合成自身细胞;第3步是其他的微生物吸收或吞食未分解彻底的有机物;好氧活性污泥法的处理工艺很多,常见的有推流式活性污泥法、完全混合式活性污泥法、接触氧化稳定法、分段布水推流式活性污泥法、氧化沟式活性污泥法;7、废水生物处理法、生物处理单元、好氧生物处理法、厌氧生物处理法的概念; 答：废水生物处理法——利用微生物处理废水的方法;生物处理单元——处理废水的微生物和处理构筑物共同构成生物处理单元;好氧生物处理法——在有氧的条件下借好氧微生物的作用处理废水;又叫废水生物处理;厌氧生物处理法——在无氧的条件下,借多种厌氧微生物的作用处理废水;又叫厌氧消化;8、叙述好氧活性污泥中的主要微生物群落并画出好氧活性污泥法的工艺流程图; 好氧活性污泥的微生物群落好氧活性污泥的结构和功能的中心是菌胶团;在其上面生长有其他微生物,如酵母菌、霉菌、放线菌、藻类、原生动物及微型后生动物等;好氧活性污泥法的工艺流程图如下：。
微生物实验复习提纲
实验一培养基的配置（一）牛肉膏蛋白胨培养基的配置（用于分离培养细菌以及测定其数目、天然培养基，）1、称量牛肉膏可以放在小烧杯、表面皿、称量纸中称量，热水溶解后倒入大烧杯。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速；滤纸不可称量牛肉膏。
2、溶解加水加热搅拌，药品完全溶解（若配置固体培养基，则加入1%~2%的琼脂，再加热融化，此过程需不断搅拌，以防止琼脂糊底或溢出）定容。
若偏酸，滴加1mol/L NaOH3、调pH 待培养基冷却至室温时检测其pH 不停搅拌并随时用pH试纸检测，若偏碱，滴加1mol/L HClpH调节通常放在加琼脂之前；应注意pH不要调过头，以免回调影响各离子浓度。
液体培养基：滤纸4、过滤固体培养基：4层纱布趁热过滤固体培养基：试管高度的1/5，灭菌后摆斜面、三角瓶的1/25、分装半固体培养基：试管高度的1/36、加透气膜7、包扎将三角瓶的棉塞外包双层报纸，以防灭菌时冷凝水沾湿透气膜。
8、灭菌上述培养基121.0℃湿热灭菌20min9、摆斜面斜面长度不超过试管总长1/210、无菌检查37℃温箱培养1-2d（二）高氏1号培养基的配制（放线菌、组合培养基）1、称量和溶解可溶性淀粉加冷水调成糊状，再加水加热溶解；微量成分FeSO4*7H2O 现配成高浓度的储备液后加入：100ml+1g=0.01g/ml 再在1000ml+1ml储备液。
2、同上（三）马丁氏培养基（霉菌、半组合培养基）1、称量和溶解土豆去皮切块煮开半小时，各成分溶解好后，将孟加拉红配成1%的水溶液，在1000ml培养液中加3.3ml，加入琼脂加热融化2、同上3、链霉素的加入它受热易分解，故临用前将培养基融化后待温度降至45℃左右才能加入。
可先将其配成1%溶液，在100ml培养基中加0.3ml，使每ml培养集中含其30μg。
注意事项：称药品时牛角匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖；谨慎调pH，避免多次回调影响各离子浓度；分装过程中注意不要使培养基沾在管上，以免引起试剂污染。
微生物检验技术 复习资料(全)
基础知识1.致腹泻病毒有轮状病毒是儿童胃肠炎的首要病原体；杯状病毒是引起成人和大龄儿童非细菌性胃肠炎暴发流行的主要病原体；肠道腺病毒主要感染2岁以下儿童；可用大肠癌细胞分离培养星状病毒2.急性出血性结膜炎的病原为肠道病毒70型或柯萨奇A组24型3.某小学3年级同一个班级3天内陆续有5名学生患有临床症状相似的疾病，他们的主要症状和体征是发热、食欲减退、一侧或双侧腮腺肿胀伴疼痛追问病史，5名学生均未接种过麻腮风3联疫苗他们可能患有流行性腮腺炎4.致癌物的最终确定应该依据流行病学调查，剂量反应关系，哺乳动物终生实验5.针对耶尔森菌的分离方法有使用冷增菌方法6.无芽胞厌氧菌可导致腹腔脓肿7.抗酸染色后细菌呈细长略带弯曲红色杆菌是结核分枝杆菌邮局一名工作人员发现一个信封内有白色粉末物质，怀疑是有毒物质，派你参与采样和检测。
8.采样时的生物防护级别是一级生物防护9.为了迅速和正确地分析信封内白色粉末物质的来源和性质，你要采取的检测方法为动物接种、检测抗原和核酸10.开展检测的实验室条件应该具备BSL-2实验室11.运送信封内有白色粉末的标本，应该符合两个人乘坐单位车运送12.与细菌运动有关的结构是鞭毛13.可使细菌染色体畸变的原因是转座因子转移位置14.伤寒与副伤寒为乙类传染病，其传播方式为通过污染的食物、水经口传播15.人乳头瘤病毒感染实验室诊断最常用的方法是聚合酶链反应16.可通过垂直传播感染胎儿的病毒是风疹病毒，水痘一带状疱疹病毒，巨细胞病毒，人类免疫缺陷病毒17.可侵犯人体神经系统的病毒有肠道病毒70型，肠道病毒71型，脊髓灰质炎病毒，柯萨奇A组16型18.森林脑炎病毒在自然界存在的条件是森林、动物宿主和蜱19.培养分离流行性腮腺炎病毒，采样标本可来源于唾液、小便和脑脊液20.临床上常用下列哪种细胞分离腮腺炎病毒Vero21.当今人类中流行最广的虫媒病毒病是登革热22.病毒复制：只在活细胞内进行，从宿主细胞获得能量，病毒蛋白抑制宿主的DNA合成，利用宿主细胞的合成场所合成病毒蛋白质23.控制病毒遗传变异的主要成分是核酸24.对病毒干扰现象叙述是可使感染自然终止、与干扰素产生有关、与病毒竞争细胞受体有关、与缺陷性干扰颗粒有关25.决定病毒遗传、变异和复制的物质是核酸26.细胞融合有利于病毒的扩散27.迟发感染的特点是症状多为亚急性28.感染病毒的细胞在细胞核或胞浆内存在可着色的斑块状结构称为包涵体29.病毒中最易发生变异的病毒是流感病毒30.孕妇感染病毒后可引起胎儿先天性畸形的病毒是风疹病毒31.脊髓灰质炎病毒主要侵犯元脊髓前角运动神经32.对病毒衣壳的叙述是由多肽构成的壳粒组成，可增加病毒的感染性呈对称形式排列，可抵抗核酸酶和脂溶剂33.病毒免疫因素中中和抗体能阻止病毒吸附，分泌型IgA能阻止病毒从黏膜侵入，细胞免疫起主要作用，迟发型变态反应有局限病毒感染的作用34.生物安全柜的作用是保护操作者、环境和样品35.适合于登革病毒的分离和培养的细胞是C6/3636.狂犬病毒属于弹状病毒科37.荚膜是细菌的特殊结构，它具有很多功能，其中最重要的功能是抗吞噬38.检测沙眼病人标本时，一般采用做预处理的抗生素是链霉素39.分离军团病人的病原培养基是BCYE琼脂培养基40.在人工培养集中，能生长的最小的微生物是支原体41.缺乏细胞壁的原核细胞型微生物是螺旋体42.破伤风梭菌可导致毒血症43.慢性毒性试验的目的是确定长期接触毒物造成生物体损害的阈剂量、观察慢性毒性的毒作用靶器官、观察慢性毒性效应谱、观察慢性毒性作用特点44.根据流感病毒核蛋白与基质蛋白抗原性的不同，流感病毒又可分为3型45.常用的麻疹的诊断实验是ELISA检测急性期血清中特异性IgM抗体46.HIV抗体检测包括HIV抗体筛查试验和HIV抗体确认试验，国内常用的确认试验方法是免疫印迹试验47.人类可以从胃肠道的正常菌群获得的营养物质是B族维生素48.人类利用微生物资源开发的产品有米酒、酸奶、豆豉49.水痘-带状疱疹病毒的叙述是属疱疹病毒科、是DNA病毒、人类是唯一宿主、可长期潜伏于脊神经后根神经节内，再激活后引起带状疱疹50.细菌缺乏细胞壁结构在一定条件下仍可存活51.对L型细菌描述是L型细菌主要致病物质为毒素52.热原质的描述是G菌的热原质就是细胞壁中的脂多糖、液体中的热原质可用吸附剂或过滤等方法除去、是许多G-菌、少数G菌的一种合成性代谢产物、注入机体可致发热反应53.对病毒杀灭无效的因素是青霉素54.采取了患者的血液培养脑膜炎球菌时，符合标本采集和运送的原则是注意无菌操作采集标本、标本要立即送检并保温、保湿、在使用抗菌药物之前采集血液、采集的标本无菌操作接种到增菌肉汤中55.属于肠道正常菌群的是双歧杆菌56.为调整菌群严重失调，应使用益生素57.对于正常菌群的描述手足口病的主要病原是柯萨奇A组16型或肠道病毒71型58.手足口病的实验室诊断可采集的临床标本是粪便，咽拭子，疱疹液，血液59.手足口病的常用实验室诊断实验是RT-PCR60.2008年7月，3岁男孩，头痛、高热伴寒战2天就诊，2天后出现昏睡、颈项强直患儿居住地靠近水塘，家里养有生猪临床初步诊断是流行性乙型脑炎传播乙脑病毒的最重要的中间宿主是猪；乙脑主要传播媒介是三带喙库蚊61.用于乙脑病毒的分离和培养的细胞是C6／3662.携带和传播肾综合征出血热病病原的动物是鼠63.外来化合物经消化道吸收的主要方式是简单扩散64.伤寒病人发病第1周内，分离病原菌应采取的标本血液65.慢性寄生虫感染时，人体内Ig升高显著的是IgE66.进行肠道菌生化鉴定，除了IMViC试验，还要进行的试验是糖发酵试验67.拟态弧菌与霍乱弧菌生化特性上最重要的区别是拟态弧菌不发酵蔗糖68.流行性斑疹伤寒的病原体是普氏立克次体69.目前检测的鼠疫抗体主要是Fl抗体70.杀灭物体表面病原微生物的方法称为消毒71.患者3岁，突然高热，头痛，喷射状呕吐，皮肤出血点，颈项强直，脑脊液较混浊为确诊此病是流脑，脑脊液接种到巧克力琼脂上培养脑膜炎球菌时需要传染性非典型肺炎冠状病毒抗体中和试验检测的是总抗体72.人禽流感患者发病初期尚未产生抗体，用于确诊的方法是病毒核酸检测73.生殖器疱疹的主要病原是II型单纯疱疹病毒(HSV-2)74.传播途径包含性传播途径的病毒是人类免疫缺陷病毒，丙型肝炎病毒，II型单纯疱疹病毒，人乳头瘤病毒75.II型单纯疱疹病毒的分离主要采集小便76.按照《突发公共卫生事件应急条例》把突发公共卫生事件分为四级，其中把烈性病菌株或毒株等丢失事件划归为T级突发公共卫生事件77.产品质量检验机构在考核人员的工作成绩时，首先应考核检验质景78.检测大肠菌群一般使用超净工作台79.属于真核细胞微生物的是真菌80.判断灭菌是否彻底的指标是杀菌芽胞81.具有黏附作用以增强细菌侵袭力的结构是普通菌毛82.在人工培养集中，能生长的最小的微生物是支原体83.可以称为病毒体的是核衣壳84.卫生标准是指“为保护人的健康，对食品、医药及其他方面的卫生要求制定的标准”85.我国产品质量检验机构用于检验的仪器设备实行标志管理，可贴合格证的仪器设备是仪器设备经计量部门检定合格者86.《病原微生物实验室生物安全管理条例》规定我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物属于第一类病原微生物87.药敏试验中，MIC的含义是最低抑菌浓度88.不含有核酸的微生物是朊粒89.突变使细菌遗传物质发生溶原性转换基因重组质粒丢失核苷酸序列改变90.腹泻呈脓血便，有里急后重症状，曾称志贺样大肠埃希菌的是肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)91.某男性青年午餐后数小时出现头晕、恶心、腹痛、呕吐等症状呕吐物接种到血液琼脂平血培养出现完全溶血环，金黄色菌落培养滤液给幼猫腹腔注射4小时后出现呕吐，此病可初步诊断为金黄色葡萄球菌引起的食物中毒92.构体病的主要传染源是黑线姬鼠93.大肠菌群计数国家标准是GB4789.3-201094.我国法定计量单位中，属于国际单位制的辅助单位是平面角，弧度95.法定计量单位中，属于国际单位制中具有专门名称的导出单位是压力，帕96.苯扎溴铵用于皮肤表面消毒的常用浓度是0.05%～0.10%97.实验室常用干烤法灭菌的器材是玻璃器吼98.煮沸消毒法，煮沸100℃5分钟可杀死细菌繁殖体,可用于一般外科手术器械、注射器、针头的消毒,水中加入126～2%碳酸氢钠，可提高沸点到105℃,常用于食具消毒99.用于测量病毒大小的单位是纳米(nm)100.感染人的禽流感病毒Ⅱ型主要为HsNi、HgNZ和HTN7101.传染性非典型肺炎血清学诊断的金标准是传染性非典型肺炎冠状病毒抗体中和试验102.我国法定计量单位中，属于国家选定的非国际单位制单位是体积，升103.染色体畸变的描述是DNA断裂的结果、染色体结构异常、染色体数目异常、光镜下可见104.霍乱弧菌分离的说法是O1群与O139群霍乱弧菌营养要求简单、可采取直接分离和增菌后分离的方法、对于水样便可直接接种TCBS选择性平板、对于含菌量少的样品宜用碱性蛋白冻水增菌105.荚膜是细菌的特殊结构，它具有很多功能，其中最重要的功能是抗吞噬106.霍乱弧菌依据0抗原的不同有200多血清群，其中致病的有0i群霍乱弧菌107.可以通过气溶胶方式传播的立克次体是Q热立克次体108.在生物学上的位置介于细菌与原虫之间螺旋体109.缺乏细胞壁的原核细胞型微生物是支原体110.通过性菌毛相互连接沟通进行DNA转移的是接合111.细菌直接摄取外源DNA的是转化112.引起人类痢疾的病原菌是志贺菌113.人类肠道的正常菌群是粪链球菌114.我国法定计量单位中，属于国际单位制的基本单位是质量，千克115.对L型细菌描述正确的是L型细菌主要致病物质为毒素116.大肠菌素属于细菌素117.破伤风梭菌可导致毒血症118.嗜冷菌最适温为10～20℃，嗜温菌为20～40℃，嗜热菌为50～60℃119.细菌代谢所需能量主要以生物氧化作用而来120.饮用水中1ml菌落总数不超过100个，1000ml水中大肠杆菌群不超过3个121.流感病毒主要传播途径是空气飞沫122.有芽胞破伤风菌需沸水煮3h才杀死水中加入2%碳酸钠能将沸点提到105℃又能防止金属生锈123.滤菌器用于除菌的孔径是0.22µm，另外以石棉板为滤板的金属滤器称Seitz滤器（蔡氏滤器）按滤孔大小124.影响基因表达的因素有调控部位，调节蛋白，效应分子125.质粒不依赖染色体而复制，不相容性，转移性，指令性主要有耐药质粒，Col质粒（编码肠毒素）Vi质粒（编码细菌与致病性有关的蛋白）126.细菌主要的繁殖方式为二分裂方式繁殖127.溶原性转换是指噬菌体的基因与细菌染色体DNA的重组128.属于逆转录病毒的是人类免疫缺陷病毒129.在检测工作公正性的措施中,包括明确对所有险测提供相同质量的服务，检测结果不受行政的、经济的和其他方面利益的干预，为用户保守技术秘密，检验人员不从事所检产品的技术开发工作130.在选择使用检测检验方法时，应优先选择的方法是具有GB或GB/T号的标准方法131.检验方法是卫生标准的重要部分要确保卫生标准的量值准确，检测检验方法要规范化和标准化132.我国第一部实验室生物安全国家标准是《实验室生物安全通用要求》133.与动物细胞比较，细菌所特有的一种重要结构是具有核糖体134.与细菌黏附于黏膜的能力有关的结构是菌毛135.细菌所具有的细胞器是核糖体136.细菌对糖的吸收是基团移位137.细菌形态、染色、生物活性很典型的时期是对数生长期138.荚膜是具有免疫原性，可用于鉴别细菌，可增强细菌对热的抵抗力，具有抗吞噬作用，化学成分可是多糖，也可是多肽等139.去除热原质最好的方法是蒸馏法140.B SL-3以上实验室应该使用全排生物安全柜141.超净工作台的作用是保护环境和样品142.检测致病菌一般使用生物安全柜143.转位因子为存在于细菌染色体或质粒上的一特异的核苷酸序列可在DNA中移动，主要有三类：插入顺序（最小的转位因子），转座子，转座噬菌体144.我国最早实验室生物安全卫生行业标准是《微生物实验室生物安全通用准则》145.沙门菌检验国家标准是GB／T4789.4-2010146.决定病毒具有感染性的是核酸147.病毒单纯疱疹病毒1型可引起人类口唇疱疹148.属于病毒界的微生物是噬菌体149.引起人类克一雅病,库鲁病的病原是朊病毒（朊粒）150.通过消化道传播的病毒是HEV151.在乙型肝炎患者血清中可查出病毒颗粒的形态是小球形颗粒、管形颗粒和Dane颗粒rE，颗粒152.乙型肝炎病毒最重要的传播途径是输血及血源性传播153.肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒，肠道病毒71型(EV71)，甲型肝炎病毒(HAV)，ECHO病毒154.孕妇感染风疹病毒早期诊断常用的诊断方法有孕妇血清中特异性IgM抗体155.登革热病毒的传播途径是虫媒传播156.培养基的制备和质量控制规定标准是GB／T4789.28157.食品微生物检验的生物安全标准应该符合GB19489 158.属于非细胞型微生物的是衣原体159.原生质体与原生质球都是细胞壁缺陷的细菌160.肽聚糖的结构由聚糖骨架，四肽侧链和五肽交联桥（G－无交联桥）磷壁酸为G＋特有，分壁和膜两种161.外膜层由脂多糖，脂质双层，脂蛋白组成细胞质内有核蛋白体（蛋白合成地），核质（主要遗传物质）质粒，162.R NA主要存在于细胞质中占细菌干重的10%，DNA存在于染色体和质粒中163.细菌营养转运的方式有离子，透性酶，磷酸酶164.营养摄取的机制是被动扩散，主动吸收基团转位165.人乳头瘤病毒可引起尖锐湿疣166.与细菌的运动有关的结构是鞭毛167.革兰染色阴性，弧形或逗点状的细菌是霍乱弧菌168.菌体细长弯曲，革兰染色阳性，亚甲蓝染色可见菌体内有异染颗粒的细菌是白喉杆菌169.革兰染色阳性呈竹节状排列的大肠杆菌是炭疽芽胞杆菌170.代谢第三阶段通过三羧酸循环将第二阶段产物分解成C02171.为防止肠道传染病发生，蔬菜、瓜果可选用的最佳消毒剂是84消毒液172.血清学检测时，电解质浓度通常是0.9%173.对肝炎患者用过的餐具进行消毒最好选用过氧乙酸174.最快的细菌计数方法是显微镜直接计数法175.人类皮肤上的正常菌群是铜绿假单胞菌176.源性疾病的病原菌是单核增生李斯特菌177.名儿童忠低热、阵发性痉挛性咳嗽，偶有特殊的”鸡呜”样吼声患者鼻咽分泌物涂片镜检可见革兰阴性短小杆菌，咳痰涂片荧光抗体染色镜检亦可见病原菌此病原菌可初步判断为百日咳杆菌感染178.莱姆病主要病原体是伯氏道疏螺旋体179.腹泻旱脓血便，有里急后重症状，曾称志贺样大肠埃希菌的是肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)180.结核病近年来重新抬头的原因主要是耐药性的出现专业知识3.红细胞在Alsever液中的保存期限4℃保存1个月4.一般的细菌生长最适宜的PH值是PH7.0-7.65.含有糖的培养基，高压时避免糖的破坏，在压15分钟时压力应为0.56kg/cm26.在病毒的提纯过程中，将大部分细胞碎块和其他杂质去除的最有效最常用的方法是低速离心7.离子交换层析主要用于分离和纯化蛋白，常用介质是纤维素8.凝胶过滤法主要用于蛋白或核酸分离，此法又称分子筛层析法，常用介质是葡聚糖9.噬菌体用于细菌鉴定的原理正确的是噬菌体可以根据细菌某些受体来裂解目标菌10.紫外透射仪的用途是紫外光下看DNA条带11.鉴定肠杆菌科的基本条件是发酵葡萄糖，氧化酶阴性，还原硝酸盐12.PAGE原理是凝胶介质形成立体多孔网状结构，分离条带上边是大分子13.过硫酸铵在PAGE制备中起的作用是催化聚合14.SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，十二烷基硫酸钠作用是解离蛋白15.聚丙烯酰胺凝胶电泳中，凝胶不仅有分子筛效应，还具有浓缩效应，两性电解质是制备该电泳凝胶不同pH重要物质，用聚丙烯酰胺制备等电聚焦凝胶，主要用于蛋白质分离16.琼脂糖凝胶电泳用于核酸分离与纯化，分离DNA片段最佳范围为200bp～50kb17.人喉癌上皮细胞Hep-218.传代保存菌种的方式很容易造成菌种突变而失去原来的性质，因而现代微生物实验室中，除了少数不耐冷的细菌，或者只作为短期使用的工作菌株时，已经不再使用传代保存的方式了分离培养螺旋体时需用Korthof培养基其中含有10%的兔血清19.破碎细菌细胞作用常用的方法是酶处理法、SDS处理等，较少用冻融法20.含有万古霉素和多粘菌素B的巧克力琼脂培养基常用于分离脑膜炎球菌21.试管凝集法检测军团菌时，抗体的阳性标准为≥1：32022.结核菌素试验时，72小时后结果判断为弱阳性反应，其局部肿大直径范围为≥20mm23.三糖铁培养基与双糖铁培养基的区别在于加与不加蔗糖24.细菌染色标本制作基本步骤涂片—干燥—固定—染色25.钩端螺旋体适宜的生长温度是28℃26.用显微镜检验已染色的标本最合适的亮度是很强27.病毒实验中用于浸泡和清洁玻璃器材的清洁浸泡液含有硫酸和重酪酸钾28.观察细菌内部的超微结构需要采用电子显微镜29.病毒分离培养常用的细胞类型可分为原代细胞、二倍体细胞和传代细胞三大类传代细胞与原代细胞的根本区别是能否在体外无限传代30.组织培养细胞接种必须首选敏感细胞的关键原冈是病毒对细胞的感染性具有严格的选择性和特异性31.病毒蚀斑技术是指病毒在已长成的单层细胞上形成的局限性病灶改变32.既可用于病毒的纯化又可用于病毒悬液中感染病毒含量的测定的实验技术是病毒空斑技术33.组织培养是分离和培养病毒以及进行病毒学实验研究的简便而有效的丁具和手段在组织培养系统中判定病毒增殖的最直接方法是观察细胞病变34.CPE可以表现为严重的细胞破坏、肿大、颗粒增多、细胞融合成合胞体或无明显细胞变化35.病毒的分子生物学鉴定包括病毒核酸和蛋白质测定，蛋白质测定可使用免疫测定技术、电泳技术和质谱技术等36.欲对血清培养基进行灭菌，宜选用间歇灭菌法37.血清、抗毒素等可用滤菌器过滤方法除菌38.在病人死后，用于分离病毒的尸体标本的采集时限是6小时内39.用组织制作分离病毒的标本时，通常将组织制成10%的悬液保存40.细胞培养技术全过程的关键是防止污染41.高压蒸汽灭菌器杀灭所有细菌芽胞和繁殖体要求103.4kpa的压力121.3℃15~25min42.对粪便标本增菌培养沙门氏菌合适的培养基是亚硒酸盐胱氨酸增菌液43.美兰在细菌学中也是常用染料之一,它是指碱性染料44.细菌生长繁殖中所需营养物质，其中葡萄糖、淀粉、甘露醇等属于碳源45.对患者进行传染病诊断时，常常采用CFT，在CFT反应必不可少的成份是补体，在一般的CFT反应中所用的补体是来源于豚鼠Power by YOZOSOFT相关专业知识1.在细菌里能发现蛋白质合成开始的位置的是rRNA和mRNA之间一段互补序列2.生物基因组分子量巨大3.-次精确的测定生物基因组的方法称为高通量检测技术4.就模板DNA而言，影响PCR的主要因素是模板的数量，模板的纯度5.-般DNA的物理图谱表示的方式为以直线图式6.多重PCR需要的引物对为多对引物7.PCR产物的分析方法有酶切分析，分子杂交，序列分析，电泳分析8.可以用鼠疫杆菌多重PCR电泳产生的条带判断弱毒株的方法为产生一条目标条带和一条对照条带9.多重PCR电泳产生的一条对照条带或多数不规则的条带判断结果为阴性结果10.多重PCR电泳没有产生条带判断结果为无效结果11.在真核生物核糖体的五种主要的组蛋白中，在进化中最不保守的是Hl蛋白12.质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行构建的，构建方法为人工构建13.DNA标本的保存方法为冷冻14.生物芯片的最大特点为生物芯片的主要特征是高通量、微型化和自动化15.在DNA凝胶电泳过程中，不同构象的DJ\TA的泳动率通常为超螺旋>线性>切口环状16.在PCR反应中，经过n次循环，理论上DNA链的数目扩增了2n倍17.提高质粒的收获量，可以在细菌生长到足够量时加入抑制蛋白合成的抗生素18.生物芯片的描述是常用的生物芯片分为三大类，即基因芯片、蛋白质芯片和芯片实验室，生物芯片的主要特点是高通最、微型化和自动化，生物芯片是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术，基因芯片可分为主动式芯片和被动式芯片19.基因芯片的应用领域包括疾病诊断，环境监测，食品卫生，药物筛选20.体内DNA复制时必须具备的引物是NA和RNA21.属于酶切技术的是DNA物理图谱22.肺炎病人痰标本为翠绿色脓痰，应考虑绿脓杆菌感染23.采用抗原体反应对传染病进行诊断，抗原与抗体的比例为3：224.急性、亚慢性、慢性毒性试验分别选择动物年龄为初成年，性刚成熟，初断乳25.急性经口染毒，为了准确地将受试物染人消化道中，多采用灌胃26.距慢性毒性试验对动物的要求是大鼠100g左右，小鼠15g左右27.在核酸分子杂交技术基础之上又发展了一系列检测DNA和RNA的技术，其中包括Southernblotting，菌落杂交，Northernblotting，dotblotting28.医生怀疑某患者可能有链球菌和肺炎链球菌感染，拟进行环状沉淀试验鉴定其微量抗原，以助于疾病的诊断。
微生物学复习资料
微生物学中的一些问题第2章纯培养1.冷冻真空干燥保藏、液氮保藏法是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法，大多数专业的菌种保藏机构均采用这两种方法作为主要的微生物保存手段。
（ T ）2.如果要从环境中分离得到能利用对氨基苯乙酸/以2，4-D作为唯一碳源和能源的微生物纯培养物，你该如何设计实验？从对氨基苯乙酸/2，4-D含量较高的环境中采集土样或水样;配制仅以对氨基苯乙酸//2，4-D作为唯一碳源培养基，进行增殖培养;配制培养基，制备平板，一种仅以对氨基苯乙酸/2，4-D作为唯一碳源(A)，另一种不含任何碳源作为对照(B) ;将样品适当稀释(十倍稀释法)，涂布A平板;将平板置于适当温度条件下培养，观察是否有菌落产生;将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板，置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气中CO2的自养型微生物) ;挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落，在一个新的A平板上划线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用对氨基苯乙酸/2，4-D作为碳源和能源的微生物纯培养物。
第3章结构1．革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖单体由（1）双糖单位（2）四肽尾（3）肽间桥三部分组成。
2.大肠杆菌与金黄色葡萄球菌在细胞壁的组成与结构上的差别.组成上的差别：大肠杆菌（革兰氏阴性菌）：肽聚糖含量低；无磷壁酸；类脂质含量高；蛋白质含量高。
金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）：肽聚糖含量很高；磷壁酸含量很高；无类脂质；无蛋白质。
结构差别：大肠杆菌：肽聚糖：四肽尾是“L丙氨酸—D谷氨酸—L赖氨酸—D丙氨酸”）；甘氨酸五肽桥；厚度大；交联度大。
金黄色葡萄球菌：四肽尾是“L丙氨酸—D谷氨酸—mDPA—D丙氨酸”；无特殊肽桥；厚度小；交联度小。
3.肽聚糖种类的多样性主要反映在_A_结构的多样性上。
A肽桥B粘肽C双糖单位D四肽尾4. 革兰氏染色法的分子机制是什么，基本操作步骤，哪一步是关键步骤；G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。
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微生物实验复习资料（填空、选择、判断、问答、实验结果分析）选择：1.革兰氏染色的关键操作步骤是: C。
酒精脱色。
2.放线菌印片染色的关键操作是: A。
印片时不能移动。
3.高氏培养基用来培养: C。
放线菌。
4.肉汤培养基用来培养: C。
细菌。
5.无氮培养基用来培养: A。
自生固氮菌。
B。
硅酸盐细菌。
6.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: C。
香柏油。
7.常用的消毒酒精浓度为: A。
75%。
8.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: B。
6ml/M3。
9.高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A。
121℃/30min。
10.巴氏消毒的工艺条件是: A。
62-63℃/30min。
B。
71-72℃/15min。
11.半固体培养基的主要用途是: A。
检查细菌的运动性。
B。
检查细菌的好氧性。
12.半固体培养基的琼脂加入量通常是: B。
0。
5%。
13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A。
排冷气彻底。
14.目镜头上的K字母表示: C。
补偿目镜。
15.目镜头上的P字母表示: A。
平场目镜。
16.物镜头上的PL字母表示: A。
正低相差物镜。
17.物镜头上的UVL字母表示： C。
相差物镜。
18.镜头上标有“双 C”字母的镜头是: A。
相差调整望远镜。
19.PA 表示: A。
马铃薯培养基。
20.无菌室空气灭菌常用方法是: A。
甲醛熏蒸。
B。
紫外灯照射。
21.干热灭菌的关键操作是: A。
灭菌物不能有水。
22.霉菌水浸制片的关键操作是: A。
菌丝要分散。
23.用来染芽胞的染料通常是: A。
孔雀绿。
24.复红法染鞭毛的关键操作是: B。
染料新鲜。
25.镀银法染鞭毛的关键操作是: A。
玻片干净。
26.进行简单染色使用的染色液通常是: A。
复红。
27.物镜头上的APO字母代表: B。
复消色差物镜。
28.物镜头上的Ach字母表示: A。
平场物镜。
29.物镜头上的NH字母表示: C。
负高相差物镜。
30.物镜头上的0。
17表示: A。
要求的盖玻片厚度。
31.镜头上标有NK字母的镜头是: A。
照相目镜。
32.目镜头上的PK字母表示: C。
平场补偿目镜。
33.物镜头上的Splan字母表示: A。
超平场物镜。
34.物镜头上的SplanApo表示: A。
超平场复消色差物镜。
35.物镜头上的Planapo表示: C。
平场复消色差物镜。
36.物镜头上的Plan字母表示: A。
平场物镜。
37.目镜头上的W字母表示: C。
广视野目镜。
38.目镜头上的SWK字母表示: A。
超广视野目镜。
39.目镜头上的WHK字母表示: B。
广视野高眼点目镜。
40.物镜头上的“错。
L”字母表示: B。
半消色差物镜。
判断：正确——1.无菌吸管上端塞入棉花是为了过滤口中的有菌空气。
2.稀释平板测数时，放线菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。
3.稀释平板测数时，细菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。
5.用混菌法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是1ml。
6.用涂抹法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是0。
1ml。
7.用油镜镜检时应将聚光器升至最高。
8.为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水。
9.稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。
10.使用油镜的正确操作步骤是:1。
低倍镜观察。
2。
高倍镜观察。
3。
转出高倍镜头，滴加香柏油后用油镜观察。
11.在擦拭显微镜镜头时，应向一个方向擦拭。
12.显微镜镜头的放大倍数越大，它的数值孔径值越大，其镜口角也越大。
13.稀释平板测数通常是采用十倍稀释法。
14.做稀释平板测数时，每做一个稀释度都必须更换一支无菌吸管。
15.实验室做固体培养基时，常加1。
8%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是0。
5%。
16.镜台测微尺每小格的实际长度是10微米。
17.血球计数板两边的平台比计数区高0。
1mm。
18.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。
19.摆斜面的长度应不超过试管长度的1/2。
20.血球计数板计数区的面积是1mm2。
21.在使用细菌计数板计数时，为了防止计数偏大，计数区四周压线的菌只能数两边。
22.目镜测微尺每格的实际长度是未知的，需用长度已知的镜台测微尺校正。
23.测微生物细胞大小时，需要校正的是目镜测微尺每格的实际长度。
24.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。
25.用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。
26.琼脂的熔化温度是95℃以上，凝固温度是45℃以下。
27.玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。
28.细菌计数板每小格的体积是1/20000mm3。
29.无菌室用甲醛熏蒸消毒后可喷氨水以减少甲醛的刺激。
错误——1.无菌吸管上端塞入棉花的目的是为了防止菌液吸入口中。
2.稀释平板测数时，细菌，放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在30-300个的稀释度进行计数。
3.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。
4.使用高倍镜时，可将聚光器升至最高。
5.观察根霉，青霉只需用低倍镜观察即可。
6.实验室通常使用血球计数板测微生物的总菌数。
7.浸油的油镜头可用软的卫生纸擦净。
8.为了节省时间，可直接在染色涂片上滴加香柏油后，直接用油镜观察。
9.稀释平板测数通常采用的是二倍稀释法。
10.做稀释平板测数时，只需一支吸管从头稀释到尾即可。
11.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法，每个平皿中的菌液加入量都是1ml。
12.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法，每个平皿中的菌液加入量都是0。
1ml。
13.实验室做固体培养基，常加2%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是1%。
14.E。
coli经革兰氏染色后，菌体呈红色，它是革兰氏正反应细菌。
15.在光学显微镜下，根霉的孢子囊是透明的。
16.使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气。
17.苏云金杆菌的芽胞在菌体的中央。
18.所有真菌菌落的表面干燥，呈绒毛状。
19.所有放线菌菌落表面干燥，呈粉粒状。
20.所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。
(芽胞菌菌落表面粗糙。
)。
21.目镜测微尺每小格的实际长度是10μm。
22.镜台测微尺每小格的实际长度是10nm(纳米)。
24.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。
25.摆斜面的长度应不超过试管长度的2/3。
26.用血球计数板计数时，任数5个大方格(80个小格)的菌数即可。
27.测微生物的细胞大小时，需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度。
28.血球计数板计数区共有400个小格，每小格的面积是1/400cm2。
29.琼脂的熔化温度是90℃以上，凝固温度是45℃以下。
30.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000cm3。
填空：1.霉菌水浸片的制片程序是加一滴水于载玻片中央，用解剖针挑取菌丝少许，将菌丝用50%的酒精浸润，将菌丝用蒸馏水水洗，将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散，盖上盖玻片。
2.放线菌印片染色的操作程序是印片，干燥，固定，复红染色2-3分钟，水洗，晾干。
3.固体培养基常用洋菜(琼脂)作凝固剂，普通固体培养基的用量一般为 1。
5-2。
0% ，半固体培养基的用量一般 0。
5%_。
4.简单染色的操作程序是涂片，干燥，固定，复红染色1-2分钟，水洗，晾干。
5.使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是锅内加水，灭菌物体装锅，对称上紧密封螺帽将锅密封上，加热升温，排尽锅内冷空气，升温至灭菌工艺条件(一般为98kpa)，在工艺条件下保压计时(一般为30分钟)，到时间后切断热源，降温，出锅。
6.实验室配制固体培养基的操作程序是照配方称取药品，将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸，将琼脂按量称取后用水浸湿，将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中，待琼脂全部融化后调节pH值，补充损失的水分，分装培养基入不同的容器中。
7.有荚膜的细菌用负染色法染色后，荚膜为无色，菌体为_红色。
8.细菌经革兰氏染色后，革兰氏正反应菌呈紫色，革兰氏负反应菌呈红色。
9.细菌经简单染色后呈_所染染料的颜色_。
10.显微镜的光学系统由_反光镜，聚光镜，物镜，_和目镜组成。
11.显微镜的机械部分包括_镜座，镜臂，载物台，转换器，镜筒，推动器，粗动螺旋，微动螺旋聚光镜升降螺旋等九部分组成。
12.高氏培养基通常用来培养_放线菌，其pH值为_7。
5-8。
0_。
13.PA培养基通常用来培养真菌_，其pH值为 5-6_。
14.牛肉膏、蛋白胨培养基通常用来培养_细菌，其pH值为_7。
0-7。
2_。
15.无氮培养基通常用来培养自生固氮菌。
其氮源来自_空气中的N2_。
16.干热灭菌的工艺条件是 160-170℃/2h_。
17.使用显微镜低倍镜观察时，聚光器应该降低，使用显微镜高倍镜观察时，聚光器应该适当升高。
18.革兰氏染色的关键操作是酒精脱色_。
19.显微镜的倍数越大，焦深越小，调焦应该越小心_。
20.按培养基的形态，可将培养基分为液体_，固体_，半固体_三种类型。
21.配制常规培养基时通常用_自来水。
22.热灭菌通常用来灭菌玻璃器材，培养基的灭菌通常用_高压蒸汽灭菌。
23.细菌稀释测数通常采用 10倍_稀释法，稀释用试管无菌水为 9_毫升。
24.配制培养基时常用_1molNaOH、和1molHCL 调节pH值。
25.按培养基的特殊用途，可将培养基分成__选择培养基，加富培养基，鉴别培养基等。
26.选择培养基可用来分离培养我们所需的特殊微生物类群，例如我们要从土壤中分离纤维分解菌，可以利用_纤维素_作唯一碳源来筛选纤维分解菌；要分离产蛋白酶的微生物，可以利用酪蛋白，作唯一氮源分离_蛋白分解菌_。
27.革兰氏染色的操作程序是涂片，干燥，固定，结晶紫染色1分钟，水洗，碘液媒染1分钟，水洗，95%的乙醇脱色25秒，水洗，蕃红复染3-5分钟，水洗，晾干。
28.培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
按营养物质的不同来源可分为_天然培养基，合成培养基，半合成培养基_三大类。
29.高倍镜头的数值孔径通常为_0。
65 ，放大倍数为_40x_。
30.油镜头的数值孔径通常为_1。
25 ，放大倍数为_100x或90x_。
32.穿刺接种使用的接种工具为_接种针，斜面接种使用的接种工具为接种环_。
33.进行稀释测数使用的主要器材有_酒精灯，1ml无菌吸管，9ml试管装无菌水，9cm的无菌平板。
34.用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时，可使菌体呈红色，使芽胞呈_绿色。
35.用日光灯作光源时，通常用_平面反光镜，用自然光作光源时，通常用凹面_反光镜36.无菌室杀菌通常采用紫外灯照射，和喷洒化学药剂(如酚)相结合的方法。