显微镜的构造和使用

（7）调焦装置：为了得到清晰的物像，必须调 节物镜与标本之间的距离，使它与物镜的工作距 离相等。这种操作叫调焦。在镜臂两侧有粗、细 调焦螺旋各一对，旋转时可使镜筒上升或下降。 大的一对是粗调焦螺旋，调动镜筒升降距离大， 旋转一周可使镜筒移动2毫米左右。小的一对是 细焦螺旋，调动镜筒的升降距离很小，旋转一周 可使镜筒移动约0.1毫米。在用低倍物镜观察时， 使用粗调焦螺旋；用高倍物镜观察时，用细调焦 螺旋。 （8）聚光器调节螺旋：在镜柱的左侧或右侧， 旋转它时使聚光器上下移动，以调节光线。
（3）在换用高倍镜观察时，视野变小 变暗，所以要重新调节视野的亮度， 此时或升高聚光器或放大虹彩光圈。
5、显微镜使用后的整理 观察完毕，应将镜头转为低倍镜，再水平取下切 片，取下时要注意勿使切片触及镜头，切片取下 后，再转动物镜转换器，使物镜镜头与通光孔错 开，再下降镜筒，使两个物镜位于载物台上通光 孔的两侧，并将反光镜还原成与桌面垂直，擦净 镜体，仍用右手握住镜臂，左手平托显微镜，送 回镜箱中。
（4）镜筒：为显微镜上部圆形中空的长筒，其 上端放置目镜，下端与物镜转换器相连，并使目 镜和物镜的配合保持一定的距离，其作用是保护 成象的光路与亮度。 （5）物镜转换器：接于镜筒下端的圆盘，可自 由转动，盘上有3-4个螺旋圆孔，为安装物镜的 部位，当旋动转换器时，物镜即可固定在使用的 位置上，保证物镜与目镜的光线合轴。 （6）载物台：为放置玻片标本的平台，中央有 一圆孔，以通过光线。两旁装有压片夹或移动器， 可固定玻片标本和移动玻片。
四、作业： 1、绘一个黑藻叶片的细胞图，绘出叶绿体 的分布情况及原生质流动的方向。 五、思考题 1、使用显微镜过程中应该注意哪些事项？ 2、在光学显微镜下观察黑藻叶片细胞中的 叶绿体为什么会运动？ 3、细胞壁的结构如何？纹孔是怎样形成的？ 4、植物细胞有哪些后含物？各以什么形式 存在于细胞的哪一部分？
② 白色体： 白色体是不含色素的质 体，所以无色。多存在 于植物的幼嫩细胞或不 见光的细胞中，取大白 菜的叶柄作徒手切片或 撕取一小块表皮装片观 察：在细胞质中无色的 颗粒就是白色体。 ③ 有色体： 取新鲜红辣椒，切一小 块表皮并带有少量果肉 细胞薄片，装片观察， 细胞质里许多橙红色颗 粒就是有色体。
2、光学部分 由成像系统和照明系统组成，成像系统包括物镜 和目镜，照明系统包括反光镜和聚光器。 （1）物镜：这是决定显微镜质量的最主要部件， 安装在镜筒下端的物镜转换器上，一般有三个放 大倍数不同的物镜，即低倍（10×）、高倍 （40×）、油镜（100×）。使用油镜时，必须 在盖玻片上和聚光器上滴加一滴香柏油（镜油）， 然后才能使用。
2、单纹孔的观察 取新鲜红辣椒， 用刀片沿辣椒表 面切取薄片，然 后以表皮外切向 壁朝上装片，先 用低倍镜观察， 选择边缘薄而清 晰的区域，换用 高倍镜寻找呈念 珠状的相邻两细 胞之间的细胞壁 上多处发生相对 的凹陷，这就是 单纹孔对。
3、胞间连丝的观察 取柿胚乳细胞永久制片，置低倍镜下观察，可 以看到很多多边形的细胞壁明显增厚，而细胞 腔小，其内的原生质体被染上颜色或在制片过 程中丢失，使细胞成为空腔。在相邻两细胞加 厚的细胞壁上，选择胞间连丝清晰而比较集中 的地方，换高倍镜观察。那些微细的暗色细丝 即胞间连丝，它们把相邻两细胞原生质体联系 起来。
（二）植物细胞的观察 1、质体的观察 ① 叶绿体及细胞质运动现象： 取一片黑藻茎尖嫩叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片， 先在低倍镜下找到清楚的细胞图像，再转高倍镜下观察。在 高倍镜下看更清楚，叶绿体是浸没在细胞质中的，紧贴细胞 之内，有时以其宽面正对视野，即紧贴细胞的上壁或下壁， 常呈扁圆形；有时则紧贴侧壁，使我们看到的是其窄面。同 时，在黑藻叶片细胞里还可看到叶绿体随胞质运动而作一个 或几个方面的流动。温度在25度左右最适宜。注意：观察时， 靠顺脉部位细胞质流动看得更清楚些。
3、用显微镜观察时，切忌睁一眼闭一眼，要左眼窥镜，右眼作图。 4、标本必须加盖玻片，制作带水或药液的玻片标本时，必须两边擦 净再观察，千万不可将药水沾到镜头上。 5、注意防潮，在观察时，显微镜上凝结的水珠（尤其在冬天观察， 呼吸中的水分常在显微镜上凝结成水珠），要及时擦掉，显微镜要 放干燥处保存，镜箱内应放一袋兰色硅胶干燥剂。 6、如遇机件不灵，使用困难时，千万不可用力转动，更不要任意拆 修，应立即报告指导教师，要求协助排除故障，以免造成损坏。
3、低倍镜的使用 观察任何标本，都必须先用低倍镜，因为 低倍镜的视野范围大，容易发现目标和确 定观察的部位。 （1）放置切片：升高镜筒，把玻片标本放 在载物台中央，使材料正对通光孔的中心， 然后用压片夹压住载玻片的两端。
（2）调整焦点：两眼从侧面注视物镜，并慢慢按顺时针 方向转动粗调焦螺旋，使镜筒徐徐下必至物镜玻片约5毫 米处，接着用左眼注视镜筒内，同是按反时针方向，向 右、向内转动粗调焦螺旋使镜筒缓慢上升，直到看见清 晰的物像为止（注意不可在调焦点时边观察边下必镜筒， 否则会使物镜和玻片触碰，压碎破片，损坏物镜）。如 一次调节看不到物像，应重新检查材料是否在光轴线上， 重新移正材料，再重复上述操作过程直至物像出现和清 晰为止。
为了使物像更加清晰，此时可使用细调焦螺旋， 轻微转动到使物像最清楚时为止，但切忌连续转 动多圈，以免损伤仪器的精确度。当细调焦螺旋 向上或向下转不动时，就是转到了极限，千万不 能再硬拧，而应重新调粗调焦螺旋，把物镜与标 本的距离稍稍拉开后，再反拧细焦螺旋，约10圈 左右（因一般可动范围为20圈）。
脐点
轮纹
马铃薯淀粉粒结构图
叶绿体 细胞壁
黑藻细胞原生质流动示意图
②油滴： 用花生种子作徒手切生，挑选薄片放在凹 玻片中用苏丹Ⅲ溶液染色数分钟，再夹到 载玻片观察，看到在细胞内有染成红色的 油滴。 ③蛋白质： 用蓖麻种子胚乳作徒手切片，选择薄片放 入100%酒精中洗涤数分钟，使切片中的脂 肪溶解在酒精中，然后，取出切片用蒸馏 水装片观察。可以看到胚乳细胞内的糊粉 粒存在，它是由贮藏在液泡中一种蛋白拟 晶体、球蛋白体充填的无定形的胶质共同 组成，如果在切片中加一滴碘液，其蛋白 质呈红色。
柿胚乳细胞是具有生 活原生质体的“厚壁 细胞”。实际上这种 组织是一种特殊的薄 壁，即贮藏组织，是 贮藏的营养物质半纤 维素（一种多糖）沉 积在细胞壁上，使其 初生壁相当增厚。
4、细胞贮藏物质的观察 ①淀粉粒： 用镊子或解剖针从马铃薯块茎上刮取少量薄壁细胞放入载玻片的水 滴中，然后加入稀碘液染色。先在低倍镜下找淀粉，再换高倍镜仔 细观察，可以清楚地看到许多从细胞中挤出来的淀粉粒，其上具有 轮纹，各层次轮纹以脐为中心环绕着。根据脐点和轮纹环绕方式不 同，而分为单粒、复粒和半复粒。
2、对光： 一般情况下可用由窗口进入室内的散射光（应避用直射阳光），或 用日光灯作光源。对光时，先把低倍物镜转到中央，对准载物台上 的通光孔，然后用左眼从目镜下注视（左眼不要紧闭）同时，用手 转动反光镜，使镜面向着光源。一般用平面镜即可，光弱时可用凹 面镜，当光线从反光镜面向上反射入镜筒时，在镜筒内就可以看一 个圆形的、明亮的视野，此时再利用聚光镜或虹彩光圈调节光的强 度，使视野内的内线既均匀、明亮、又不刺眼。在对光的过程中， 要体会反光镜、聚光镜和虹彩光圈在调节光线中的不同作用。
（3）低倍物镜的观察：焦点调好后，可根据需 要，移动玻片，把要观察的部分移到最有利的位 置上。找到物像后还可根据材料的厚薄、颜色、 成像的反差强弱等是否合适再进行调节，如果太 亮，可降低聚光器或缩小虹彩光圈，反之则升高 聚光器或开大光圈。
4、高倍物镜的使用 在观察较小的物体或细微结构时使用。 （1）选好目标：由于高倍镜只能把低倍镜视野 中心的一小部分加以放大。因此，使用高倍镜前， 应先在低倍镜中选好之合轴，即使其与镜筒成一 直线（因高倍镜的工作距离很短，操作时要十分 仔细，以防镜头碰击玻片）。
实验一 显微镜的构造和使用 植物细胞 一、目的要求 1、了解显微镜的构造及其维护 2、初步掌握显微镜的使用方法 3、了解植物细胞的基本结构 4、认识纹孔和胞间连丝的形状，并理 解其功能 5、学习临时装片技术和方法
二、实验用品和材料 用品（以后各次实验基本相同）： 显微镜、扩大镜、镊子、实验剪、 解剖针、载玻片、盖玻片、纱布、 吸水纸、单面刀片、双面刀片、 蒸馏水、番红、碘液、70%酒精、 醋酸洋红、苏丹Ⅲ等。
（2）调下焦点，在正常情况下，当高倍物镜转正之后， 在视野中即可见到模糊的物像，只要略微调动焦螺旋， 就可获得最清晰的物像。 初用一台显微镜时，必须注意它的高、低倍物镜是否能 如上述情况那样很好的配合？如果高倍物镜离盖玻片较 远看不到物像时，则需重新调整焦点；此时眼睛应从侧 面注视物镜，并小心地转动粗调焦螺旋使镜筒慢慢地下 必到高倍镜头几乎要与切片接触时为止（注意切勿使镜 头紧压玻片，以锡损坏镜头和压碎玻片标本）。然后再 由目镜向下观察，同时向内，向右转动粗调焦螺旋，稍 微升高镜筒至看见物像后，换细调焦螺旋，使物像看得 更加清晰为止。
实验报告纸及绘图工具自备。 三、实验内容和方法 （一）显微镜的构造 一般光学显微镜的构造包括两大 部分，即保证成象的光学系统和 用以装置光学系统的机械部分。
1、机械部分 （1）镜座：是显微镜的底座，支持整个镜体， 使显微镜放置稳固。 （2）镜柱：镜座上面直立的短柱，支持镜体上 部的各部分。 （3）镜臂：弯曲如臂，下连镜柱，上连镜筒， 这取放镜体时手握的部位。镜臂的下端与镜柱连 接处有一活动关节，可使镜体在一定范围内后倾， 便于观察。
（4）聚光器（或镜）：装在载物台下，由聚光 镜（几个凸透镜）和虹彩光圈（可变光栏）等组 成。它可将平行的光线汇集成束，集中在一点， 以增强被检物件。聚光器可以上下调节，如用高 倍镜时，视野范围小，则需上升聚光器，用低倍 物镜时，视野范围大，可下降聚光器。 （5）虹彩光圈：装在聚光器内，位于载物台下 方，拨动操纵杆，可使光圈扩大或缩小，借以调 节通光量。
三、使用显微镜时的注意事项 1、显微镜是精密仪器，使用时一定要严格地按 规程进行操作。同时，显微镜的几个主要部件都 是配套的，并已编号，不能互换，特别注意不要 斢错镜Байду номын сангаас。 2、要注意保持显微镜清洁，特别是光学部分， 如有灰尘，要用擦镜纸轻轻擦去。若使用过油镜 头，需用二甲苯擦拭干净镜头与聚光器上的油。