实验一 普通光学显微镜的构造和使用
实验一显微镜的构造和使用、植物细胞基本结构
实验一显微镜的构造和使用、植物细胞基本结构一、实验目的1、了解普通光学显微镜的构造和各部分性能，学习和掌握显微镜的使用方法。
2、学习生活细胞观察方法，掌握植物细胞基本结构。
3、掌握细胞主要后含物的种类及鉴别4、学习临时制片方法（斯取法、刮取法）、粉末装片法和生物绘图方法。
二、实验器具与试剂光学显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊子、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、纱布块、吸水纸蒸馏水、稀碘液、苏丹Ⅲ、水合氯醛、稀甘油、20%蔗糖液。
三、实验材料洋葱鳞叶表皮细胞制片、马铃薯块茎、半夏粉末、大黄粉末、黄柏粉末、麻黄粉末。
四、实验内容（一）普通光学显微镜的构造显微镜是研究植物细胞结构、组织特征和器官构造的重要的和不可替代的仪器。
显微镜的种类繁多，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。
电子显微镜结构相对复杂，光学显微镜结构较为简单，基本结构均可分为机械部分和光学系统部分。
1．机械部分：显微镜机械部分是由精密而牢固的零件组成，主要包括镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等。
（1）镜座：是显微镜的基座，用以支持镜体平衡，其上装有反光镜或照明光源。
（2）镜柱：是镜座上面直立的短柱，连接、支持镜臂及以上的部分。
（3）镜臂：弯曲如臂，上接镜筒、下接镜柱，支持载物台、聚光器和调焦装置。
是取放显微镜时手握的部位。
直筒显微镜镜臂和镜柱连接处有活动关节，可使显微镜在一定范围内后倾，一般不超过30°。
（4）镜筒：一般长160 mm～170 mm。
其上端放置目镜，下端与物镜转换器相连。
双筒斜式的镜筒，两镜筒距离可以根据两眼距离及视力来调节。
（5）物镜转换器：是固着在镜筒下端的圆盘，其上装有不同倍数的物镜。
可以左右自由转动，便于更换物镜。
（6）载物台：放置切片的平台，中央有一个通光孔，旁边装有固定玻片的压夹或标本移动器。
有的显微镜载物台下装有聚光镜。
（7）调焦装置：镜臂两侧有粗、细调焦轮各一对，旋转时可使镜筒上升或下降，以便得到清晰物像，即调焦。
高中生物竞赛实验课件：普通光学显微镜的构造及使用规范
细胞分裂和细胞周期
（三）纺锤体的形成 构成纺锤体的纤维是由成束的微管和与微 管相结合的蛋白质组成的。 极纤维和动粒纤维
细胞分裂和细胞周期
纺锤体
细胞分裂和细胞周期
（四）染色体的行为 前期：两染色单体并列排列。 前中期：动粒（在着丝粒外面）出现，纺 锤体形成。 中期：染色体位于赤道板上。 后期：着丝粒分裂，染色体向两极移动。 秋水仙素：破坏微管的组成，因而阻止染 色体移向两极，结果形成多倍体细胞。
三、染色体观察
观察 制片用显微镜仔细观察，染色体染成紫红 色，细胞质淡红色或无色。蚕豆染色体数 目2n=12，洋葱为2n=16。寻找染色体数目 准确 ，而且染色体分散良好，缢痕清晰的 细胞。 染色体形态
蚕豆染色体组型
（附）细胞分裂和细胞周期
细胞周期：细胞从一次分裂开始到第二次 分裂开始所经历的全过程。 细胞周期分成四个阶段：间隙期1、合成期、 间隙期2和有丝分裂期。
物镜
安装在镜筒下端，是显微镜的心脏。 其作用是利用入射光线使被检物体形 成放大的实像，而且它还决定显微镜 分辨率的高低。物镜上往往刻有一系 列的参数，如镜口率（NA，其值越大， 分辨率越高）、放大倍数等。
目镜
位于镜筒上端，其作用是将已经被物 镜所放大的物像再次加以放大，使之 便于观察。目镜筒外侧刻有放大倍数。
镜筒 标准长度为160mm，其上接目镜，下接物 镜。 物镜转换器 固定在镜筒下端。其有数个物镜孔，用以安 装物镜。 调焦螺旋 调节物镜与被检物体之间的距离，以获得清 晰的物象。分为粗调焦螺旋和细调焦螺旋。 前者用于在低倍镜下找到被检物体的放大像， 或者观察；后者用于在高倍镜下观察时的精 密调焦。
物镜转换器
（三）晶体和气孔器观察
撕取紫鸭跖草叶下表皮，用刀片取一 小块，然后置载玻片上，滴上一滴甘 油后，用盖玻片封片，在显微镜下观 察。 注意晶体所在的细胞及晶体的类型， 还有气孔器的形态结构以及保卫细胞 与其他表皮细胞在形态结构上的差别。
显微镜的结构和使用
实验一普通光学显微镜的结构与使用方法一、光学显微镜的基本构造（一）机械部分1、镜筒：为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构，其上端装有目镜，下端与物镜转换器相连。
2、物镜转换器：是安装在镜筒下方的一圆盘状构造。
其上均匀分布有3～4个圆孔，用以装载不同放大倍数的物镜。
3、镜臂：为支持镜筒和镜台的弯曲状构造，是取用显微镜时握拿的部位。
在使用临时装片时，千万不要倾斜镜臂，以免液体或染液流出，污染显微镜。
4、粗/细准焦螺旋：为调节焦距的装置，位于镜臂的上端或下端。
粗准焦螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降，能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中，适于低倍镜观察时的调焦。
而细准焦螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降（升或降的距离不易被肉眼观察到），适用于高倍镜观察，一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋，精细调节焦距。
5、载物台：是放置被观察的玻片标本的地方。
平台的中央有一圆孔，称为通光孔，来自下方光线经此孔照射到标本上。
在载物台上通常装有标本移动器（也称标本推进器），移动器上安装的弹簧夹可用于固定玻片标本，另外，转动与移动器相连的两个螺旋可使玻片标本前后左右地移动，这样寻找物像时较为方便。
6、镜柱：为镜臂与镜座相连的短柱。
7、镜座：位于显微镜最底部的构造，为整个显微镜的基座，用于支持和稳定镜体。
（二）光学系统部分光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置（反光镜、聚光器和光圈等）。
1、目镜：又称接目镜，安装在镜筒的上端，起着将物镜所放大的物像进一步放大的作用。
常见的有5×、10×和15×（×表示放大倍数）的目镜，可根据不同的需要选择使用，最常使用的是10×目镜。
目镜的长度与放大倍数成反比。
2、物镜：也称接物镜，安装在物镜转换器上。
常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。
物镜的放大倍数与其工作距离成反比。
实验一光学显微镜的结构、使用及保养
实验一光学显微镜的结构、使用及保养一、目的了解光学显微镜的基本结构和各部分的作用，能正确、熟练地使用显微镜观察植物材料，掌握显微镜的保养措施。
二、用具和材料显微镜、擦镜纸或小绸布、二甲苯、任意一种植物切片或临时装片。
三、方法步骤（一）显微镜的结构：通常使用的生物显微镜，其结构分为机械部分和光学部分，现说明如下：1. 机械部分（1）镜座：即显微镜最下面的马蹄形部分，用以固定和支持镜体。
（2）镜柱：直立于镜座上的短柱，与镜臂相连。
（3）镜臂：取放或移动显微镜时手握的部位，一般呈弓形，也称执手。
（4）倾斜关节：镜柱与镜臂相连的关节，用于调节显微镜的倾斜度，以便于观察。
观察临时装片时，不要倾斜，以防玻片上的水流出，一般观察时，倾斜度不宜超过30°，以免显微镜因倾斜跌倒。
（5）载物台：位于显微镜中部，载标本制片的方形或圆形平台。
中央有一圆孔，既通光孔，光线即由此孔通过，台上两侧有用以固定制片的推进器。
（6）镜筒：为一金属圆筒，连接在镜臂上，下接转换盘。
（7）物镜转换盘：可以任意转动，上面安装有3—4个物镜，使用时根据需要可更换放大倍数不同的接物镜。
（8）焦螺旋：装在镜臂上部两旁，通过转动，调节焦距，有大小两对，大的叫粗准焦螺旋，转动一周可使镜筒升降10mm，小的是细准焦螺旋，每转动一周可使镜筒升降1mm。
2. 光学部分（1）目镜：装于镜筒上端，上面刻有号码，表示放大的倍数。
“5×、16×”可根据需要选择使用。
（2）物镜：安装在转换盘的螺旋孔上，一般有三个物镜：即低倍镜（10×）、高倍镜（40×）、油镜（100×，）物镜下端的镜孔越小，放大的倍数越大。
（3）聚光器：在载物台下，由透镜组成，可以聚集反光镜反射来的光线，照明玻片标本，聚光器下装有光圈，推动其上的小柄可使光圈任意开大或任意缩小，以调节光线强弱。
（4）反光镜：在聚光器下，安在镜臂下端可前后左右随意移动的一个镜片，通过它把光线反射到聚光器上面，凹面反射的光较强。
实验一普通光学显微镜的构造和使用[详细讲解]
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实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。
2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。
3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。
二、显微镜的基本构造显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成（图1-1）。
光学显微镜的构造(图1-1)1. 物镜转换器2. 接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6. 彩虹光阑7.光源8. 镜座9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋1．机械装置镜座（base）和镜臂（arm）镜座位于显微镜底部，呈马蹄形，它支持全镜。
镜臂有固定式和活动式两种，活动式的镜臂可改变角度。
镜臂支持镜筒。
镜筒（body tube）是由金属制成的圆筒，上接目镜，下接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种，单筒又可分为直立式和后倾式两种。
而双筒则都是倾斜式的，倾斜式镜筒倾斜45°。
双筒中的一个目镜有屈光度调节装置，以备在两眼视力不同的情况下调节使用。
转换器（no sepiece）为两个金属碟所合成的一个转盘，其上装3—4个物镜，可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。
载物台（stage）又称镜台，为方形或圆形的盘，用以载放被检物体，中心有一个通光孔。
在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹，用以固定标本；有的装有标本推动器，将标本固定后，能向前后左右推动。
有的推动器上还有刻度，能确定标本的位置，便于找到变换的视野。
调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件，有粗动螺旋（coarse adjustment）即粗调节器和微动螺旋（fine adjustment）即细调节器，利用它们使镜筒或镜台上下移动，当物体在物镜和目镜焦点上时，则得到清晰的图像。
2．光学系统物镜（objective）物镜安装在镜筒下端的转换器上，因接近被观察的物体，故又称接物镜。
其作用是将物体作第一次放大，是决定成像质量和分辨能力的重要部件。
实验一光学显微镜的构造使用和临时装片制作
（三）茎的次生结构
1 双子叶植物茎的次生结构 观察椴树茎一年生、多年生横切片，杨树茎一
年生横切片，棉花茎次生生长切片，接骨木皮孔 （树皮）切片，注意区分出初生、次生结构、重点 观察次生木质部、次生韧皮部、维管形成层的结构 及各组成成分的细胞特征，观察周皮、皮孔、维管 形成层的结构特征。
有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透 性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨 水中的酸性大红G不能进入细胞内，胚部不着色。 而丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了 选择吸收的能力，染料进入细胞内是胚部染色， 所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活 力。
三 实验仪器、试剂和材料
恒温箱、培养皿Leabharlann 刀片、烧杯、镊子、恒温箱、 电炉。
实验五 植物种子活力的检定
一 实验目的 掌握植物种子活力检定的基本原理及
TTC法和红墨水法快速测定种子活力的方 法，奠定种子活力检定方法在农业生产实 际中的应用基础。
二 实验原理
凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中
都有氧化还原反应，而无生命活力的种胚则无此反 应。当氯化三苯基四氮唑（TTC）渗入种胚的活细 胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH2或 NADPH2）上的氢还原时，便由无色的TTC变为红 色的三苯基甲腙（TTF）。
（五）输导组织
观察南瓜茎纵切片（双韧维管束、中空）、 苋茎纵切片（外韧维管束）看导管、筛管；观察 松木离析装片看管胞。
（六）分泌组织
观察柑桔果皮切片（溶生型）、松木质茎横 切片（裂生型）
显微镜的结构和使用
显微镜的结构和使用（检验仪器实验考核）（一）显微镜的主要构造普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。
1.机械部分（1）镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。
（2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。
（3）镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。
（4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。
（5）物镜转换器(旋转器)：接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3－4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。
（6）镜台(载物台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。
（7）调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。
①粗调节器(粗螺旋)：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。
②细调节器(细螺旋)：小螺旋称细调节器，移动时可使镜台缓慢地升降，多在运用高倍镜时使用，从而得到更清晰的物象，并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。
2．照明部分装在镜台下方，包括反光镜，集光器。
（1）反光镜：装在镜座上面，可向任意方向转动，它有平、凹两面，其作用是将光源光线反射到聚光器上，再经通光孔照明标本，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱的时候使用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。
（2）集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上，由聚光镜和光圈组成，其作用是把光线集中到所要观察的标本上。
①聚光镜：由一片或数片透镜组成，起汇聚光线的作用，加强对标本的照明，并使光线射入物镜内，镜柱旁有一调节螺旋，转动它可升降聚光器，以调节视野中光亮度的强弱。
实验一-光学显微镜的使用与微生物观察
实验一光学显微镜的使用与微生物观察第一节普通光学显微镜的使用一、实验目的1、了解普通光学显微镜的基本构造和工作原理。
2、学习并掌握普通光学显微镜，重点是油镜的使用技术和维护知识。
3、在油镜下观察微生物的几种基本形态。
二、基本原理（一）普通光学显微镜的构造普通光学显微镜由机械系统和光学系统两部分组成（图1-1）。
1、机械系统机械系统包括镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器等。
（1）镜座：它是显微镜的基座，可使显微镜平稳地放置在平台上。
（2）镜臂：用以支持镜筒，也是移动显微镜时手握的部位。
（3）镜筒：它是连接接目镜（简称目镜）和接物镜（简称物镜）的金属圆筒。
镜筒上端插入目镜，下端与物镜转换器相接。
镜筒长度一般固定，通常是160mm。
有些显微镜的镜筒长度可以调节。
（4）物镜转换器：它是一个用于安装物镜的圆盘，位于镜筒下端，其上装有3～5个不同放大倍数的物镜。
为了使用方便，物镜一般按由低倍到高倍的顺序安装。
转动物镜转换器可以选用合适的物镜。
转换物镜时，必须用手旋转圆盘，切勿用手推动物镜，以免松脱物镜而招致损坏。
（5）载物台：载物台又称镜台，是放置标本的地方，呈方形或圆形。
载物台上装有压片夹，可以固定被检标本；有标本移动器，转动螺旋可以使标本前后和左右移动。
有些标本移动器上刻有标尺，可指示标本的位置，便于重复观察。
（6）调节器：调节器又称调焦装置，由粗调螺旋和细调螺旋组成，用于调节物镜与标本间的距离，使物像更清晰。
粗调螺旋转动一圈可使镜筒升降约10mm，细调螺旋转动一圈可使镜筒升降约0.1mm。
图1-1 普通光学显微镜的构造1. 镜座2. 镜臂3. 镜筒4. 转换器5. 载物台6. 压片夹7. 标本移动器8. 粗调螺旋9. 细调螺旋10. 目镜11. 物镜12. 虹彩光阑（光圈） 13. 聚光器 14. 反光镜2、光学系统光学系统包括目镜、物镜、聚光器、反光镜等。
（1）目镜：它的功能是把物镜放大的物像再次放大。
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实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。
2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。
3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。
二、显微镜的基本构造显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成（图1-1）。
光学显微镜的构造(图1-1)1. 物镜转换器2. 接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6. 彩虹光阑7.光源8. 镜座9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋1．机械装置镜座（base）和镜臂（arm）镜座位于显微镜底部，呈马蹄形，它支持全镜。
镜臂有固定式和活动式两种，活动式的镜臂可改变角度。
镜臂支持镜筒。
镜筒（body tube）是由金属制成的圆筒，上接目镜，下接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种，单筒又可分为直立式和后倾式两种。
而双筒则都是倾斜式的，倾斜式镜筒倾斜45°。
双筒中的一个目镜有屈光度调节装置，以备在两眼视力不同的情况下调节使用。
转换器（no sepiece）为两个金属碟所合成的一个转盘，其上装3—4个物镜，可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。
载物台（stage）又称镜台，为方形或圆形的盘，用以载放被检物体，中心有一个通光孔。
在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹，用以固定标本；有的装有标本推动器，将标本固定后，能向前后左右推动。
有的推动器上还有刻度，能确定标本的位置，便于找到变换的视野。
调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件，有粗动螺旋（coarse adjustment）即粗调节器和微动螺旋（fine adjustment）即细调节器，利用它们使镜筒或镜台上下移动，当物体在物镜和目镜焦点上时，则得到清晰的图像。
2．光学系统物镜（objective）物镜安装在镜筒下端的转换器上，因接近被观察的物体，故又称接物镜。
其作用是将物体作第一次放大，是决定成像质量和分辨能力的重要部件。
物镜上通常标有数值孔径、放大倍数、镜筒长度、焦距等主要参数。
如：NA0．30；10×；160/0．17；16mm。
其中“NA0．30”表示数值孔径（numerical aperture，简写为NA），“10×”表示放大倍数，“160/0．17”分别表示镜筒长度和所需盖玻片厚度（mm），16mm表示焦距。
目镜（ocular lens）装于镜筒上端，由两块透镜组成。
镜把物镜造成的像再次放大，不增加分辨力，上面一般标有7×、10×、15×等放大倍数，可根据需要选用。
一般可按与物镜放大倍数的乘积为物镜数值孔径的500—700倍，最大也不能超过1000倍的选择。
目镜的放大倍数过大，反而影响观察效果。
聚光器（condenser）光源射出的光线通过聚光器汇聚成光锥照射标本，增强照明度和造成适宜的光锥角度，提高物镜的分辨力。
聚光器由聚光镜和虹彩光圈（iris diaphragm）组成，聚光镜由透镜组成，其数值孔径可大于1，当使用大于1的聚光镜时，需在聚光镜和载玻片之间加香柏油，否则只能达到1．0。
虹彩光圈由簿金属片组成，中心形成圆孔，推动把手可随意调整透进光的强弱。
调节聚光镜的高度和虹彩光圈的大小，可得到适当的光照和清晰的图像。
光源（light source）较新式的显微镜其光源通常是安装在显微镜的镜座内，通过按钮开关来控制；老式的显微镜大多是采用附着在镜臂上的反光镜，反光镜是一个两面镜子，一面是平面，另一面是凹面。
在使用低倍和高倍镜观察时，用平面反光镜；使用油镜或光线弱时可用凹面反光镜。
滤光片（filter）可见光是各种颜色的光组成的，不同颜色的光线波长不同。
如只需某一波长的光线时，就要用滤光片。
选用适当的滤光片，可以提高分辨力，增加影像的反差和清晰度。
滤光片有紫、青、蓝、绿、黄、橙、红等各种颜色的，分别透过不同波长的可见光，可根据标本本身的颜色，在聚光器下加相应的滤光片。
三、油镜物镜的基本原理微生物学研究用的显微镜的物镜通常有低倍物镜（16mm，10×）、高倍物镜（4mm，40—45×）和油镜（1．8 mm，95—100×）三种。
油镜通常标有黑圈或红圈，也有的以“OI（oil immer-sion）字样表示，它是三者中放大倍数最大的。
根据使用不同放大倍数的目镜，可使被检物体放大1000—2 000多倍。
从图Ⅲ-3中可看出油镜的焦距和工作距离（标本在焦点上看得最清晰时，物镜与样品之间的距离）最短，光圈则开得最大，因此，在使用油镜观察时，镜头离标本十分近，需特别小心。
使用时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与物镜之间不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。
这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n=1．52，与玻璃相同。
当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系，当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样就减低了视野的照明度（图1-2）。
(图1-1)利用油镜不但能增加照明度，更主要的是能增加数值孔径，因为显微镜的放大效能是由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度（称为镜口角）的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质的折射率所得的乘积，可用下列公式表示：NA＝n·sinα式中 NA=数值孔径；n=介质折射率；α=最大入射角的半数，即镜口角的半数。
因此，光线投射到物镜的角度愈大，显微镜的效能就愈大（图Ⅲ-5），该角度的大小决定于物镜的直径和焦距。
同时，α的理论限度为90°，sin90°=1，故以空气为介质时（n=1），数值孔径不能超过1，如以香柏油为介质时，则n 增大，其数值孔径也随之增大。
如光线入射角为120°，其半数的正弦为sin60°=0．87，则：以空气为介质时：NA=1×0．87=0．87以水为介质时：NA=1．33×0．87=1．15以香柏油为介质时：NA=1．52×0．87=1．32显微镜的分辨力是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力。
它与物镜的数值孔径成正比，与光波长度成反比。
因此，物镜的数值孔径愈大，光波波长越短，则显微镜的分辨力愈大，被检物体的细微结构也愈能明晰地区别出来。
因此，一个高的分辨力意味着一个小的可分辨距离，这两个因素是成反比关系的，通常有人把分辨力说成是多少微米或纳米，这实际上是把分辨力和最小分辨距离混淆起来了。
显微镜的分辨力是用可分辨的最小距离来表示的。
式中λ=光波波长。
我们肉眼所能感受的光波平均长度为0．55μm，假如数值孔径为0．65的高倍物镜，它能辨别两点之间的距离为0．42μm。
而在0．42μm以下的两点之间的距离就分辨不出，即使用倍数更大的目镜，使显微镜的总放大率增加，也仍然分辨不出。
只有改用数值孔径更大的物镜，增加其分辨力才行。
例如用数值孔径为1．25的油镜时，能辨别两点之间的因此，我们可以看出，假如采用放大率为40倍的高倍物镜（NA=0．65），和放大率为24倍的目镜，虽然总放大率为960倍，但其分辨的最小距离只有0．42μm。
假如采用放大率为90倍的油镜（NA=1．25），和放大率为9倍的目镜，虽然总的放大率为810倍，但却能分辨出0．22μm间的距离。
四、器材显微镜、香柏油、乙醇-乙醚混合液、擦镜纸、吸水纸等。
细菌三种形态的染色标本。
五、操作步骤1．观察前的准备（1）1、显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。
（2）将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图纸。
（3）调节光照:不带光源的显微镜，可利用灯光或自然光通过反光镜来调节光照，光线较强的天然光源宜用平面镜；光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜，但不能用直射阳光，直射阳光会影响物像的清晰并刺激眼睛。
将10×物镜转入光孔，将聚光器上的虹彩光圈打开到最大位置，用左眼观察目镜中视野的亮度，转动反光镜，使视野的光照达到最明亮最均匀为止。
自带光源的显微镜，可通过调节电流旋钮来调节光照强弱。
凡检查染色标本时，光线应强；检查未染色标本时，光线不宜太强。
可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调节光线。
2.低倍镜观察镜检任何标本都要养成必须先用低倍镜观察的习惯。
因为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定检查的位置。
将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢下降载物台，直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰为止。
用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。
3．高倍镜观察在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。
较好的显微镜，低倍、高倍镜头是同焦的，在转换物镜时要从侧面观察，避免镜头与玻片相撞。
然后从目镜观察，调节光照，使亮度适中，缓慢调节粗调节旋钮，慢慢下降载物台直至物像出现，再用细调节旋钮调至物像清晰为止，找到需观察的部位，并移至视野中央进行观察,并准备用油镜观察。
4．油镜观察（1）用粗调节器将镜筒提起约2cm，将油镜转至正下方。
（2）在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。
（3）从侧面注视，用粗调节器将镜筒小心地降下，使油镜浸在香柏油中，其镜头几乎与标本相接，应特别注意不能压在标本上，更不可用力过猛，否则不仅压碎玻片，也会损坏镜头。
（4）从接目镜内观察，进一步调节光线，使光线明亮，再用粗调节器将镜筒徐徐上升，直至视野出现物像为止，然后用细调节器校正焦距。
如油镜已离开油面而仍未见物像，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作至物像看清为止。
5. 观察完后复原下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦镜纸蘸少许乙醚乙醇混合液擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭2—3下即可，（注意向一个方向擦拭）。
将各部分还原，转动物镜转换器，使物镜头不与载物台通光孔相对，而是成八字形位置，再将载物台下降至最低，降下聚光器，反光镜与聚光器垂直，最后用柔软纱布清洁载物台等机械部分，然后将显微镜放回柜内或镜箱中。
六、注意事项1.学生使用显微镜固定镜号、位置，填写使用卡，本学期一直使用本台显微镜。
2.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏3.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度。
4.观察标本时，必须依次用低、高倍镜，最后用油镜。
当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。
5.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯，以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。