消化系统疾病动物模型
人类疾病的动物模型概述人类疾病动物模型Animalmodelsofhuman
消化系统疾病动物模型
化学损伤性肝纤维化动物模型 动物：wistar大鼠 130g左右 药物：硫代乙酰胺腹腔内注射 方法：第一次20mg/100g体重 第二次起：12mg/100g体重 每周两次 时间：8周
四氯化碳肝硬化动物模型
动物：wistar大鼠
药物：四氯化碳
180～200g
40%～50%（CCl4）油溶液0.3ml/100g
肺水肿动物模型
二、生理盐水注射法
动物：家兔或狗
药物：生理盐水
给药：静脉快速输入大量生理盐水，按40ml/kg体重 /分钟 时间：达到动物血量1～1.5倍时即可发生肺水肿
心血管系统疾病动物模型 动脉粥样硬化动物模型
大鼠诱发模型（其中之一） 动物：大鼠 180～200g 药物：胆固醇、猪油、甲基硫氧嘧啶 方法：1%～4%胆固醇 10%猪油 0.2%甲基硫氧嘧啶 86%～89%基础饲料 时间：连续饲喂7～10天
诱发性肝癌动物模型
有多种方法可诱发肝癌，介绍其中的一种 药品：黄曲霉素 动物：大鼠 途径：饲料中拌喂 浓度：0.011~0.015PPM 时间：6个月 诱发率：80%
自发性肿瘤及移植瘤株
自发性肿瘤在小鼠中较多
主要部位：乳腺、肺、肝、造血 组织等，以乳腺最多
移植瘤株
动 物：大、小鼠均可 材 料：肝肿瘤组织碎块 移 植 方 法：开腹手术植入肝脏 体外B超引导注射入肝 成 功 率：接近100 % 时 间：1周以上可见
十三、儿科疾病动物模型
十四、传染性疾病动物模型 十五、寄生虫病动物模型 十六、普通外科手术动物模型 十七、创伤动物模型
十八、中医症候动物模型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
肿瘤动物模型
一、诱发性肿瘤动物模型
消化系统疾病学实验设计
选择合适的动物模型
根据研究目标选择合适的动物模 型，模拟人类消化系统疾病状态
。
制定实验方案
包括实验分组、给药方案、观察 指标、实验时间等。
实验结论和总结
根据实验结果得出结论，总结实 验成果和不足，提出改进意见。
数据分析和解释
对实验数据进行统计分析，解释 实验结果，并验证假设。
01
免疫学技术是利用免疫学原理和方法，研究机体免疫系 统的结构、功能和疾病发生发展机制的技术手段。
02
免疫学技术包括抗体技术、免疫细胞技术、免疫分子技 术等，具有高度的特异性和敏感性。
03
免疫学技术在医学领域广泛应用，对于疾病的预防、诊 断和治疗具有重要意义。
免疫学技术在实验设计中的应用
利用免疫学技术检测消化系统疾 病相关抗原和抗体，如肝炎病毒 抗原和抗体、幽门螺杆菌抗体等
实施实验
按照实验方案进行实验操作，记 录实验数据。
02 消化系统疾病模型建立
模型选择依据
01
02
03
疾病类型
针对不同类型的消化系统 疾病，如胃炎、胃溃疡、 肝炎等，选择相应的动物 模型或细胞模型。
研究目的
根据实验目的，如研究发 病机制、药物筛选等，选 择能够模拟疾病病理生理 过程的模型。
模型特点
考虑模型的稳定性、可重 复性、操作简便性等因素 。
模型建立方法
动物模型
采用化学诱导、基因敲除、微生 物感染等方法建立动物模型，模 拟人类消化系统疾病的病理生理
过程。
细胞模型
利用细胞培养技术，建立消化系统 疾病相关的细胞模型，如肝细胞损 伤模型、肠上皮细胞炎症模型等。
组织工程模型
利用组织工程技术，构建消化系统 疾病的组织工程模型，模拟疾病的 组织结构和功能异常。
动物模型的概念
动物模型的概念动物模型是指利用动物作为研究对象，以模拟人类疾病或生理过程的实验方法。
在医学、生物学和药物研发等领域，动物模型被广泛应用于疾病机制研究、药物筛选和治疗效果评估等方面。
通过对动物模型的研究，科学家们可以更深入地了解疾病的发生机制，寻找新的治疗方法，并评估治疗效果。
动物模型的应用起源于古代。
早在公元前400年，亚里士多德就开始使用动物进行实验研究。
而现代动物模型的建立则主要始于20世纪。
在之后的几十年里，科学家们不断开发和完善各种动物模型，以满足不同领域的研究需求。
常见的动物模型包括小鼠、大鼠、猪、狗、猴等。
选择哪种动物模型取决于研究目的和所研究的疾病或生理过程的特点。
例如，小鼠是最常见的动物模型之一，其具有生育力强、寿命短、易于育种等优点，非常适用于基因功能研究和药物筛选。
而猪则因其解剖结构和生理功能与人类较为相似，成为心血管疾病、消化系统疾病等研究的理想模型。
动物模型的建立需要经过严格的实验设计和伦理审查。
在进行动物实验之前，科学家们必须制定详细的实验方案，确保实验目的明确、实验过程严谨，并保证动物的福利不受伤害。
伦理审查委员会会对实验方案进行评审，并根据动物福利法规对实验进行监督。
动物模型的优缺点需要充分考虑。
虽然动物模型在科学研究中具有重要的地位，但也存在一些限制。
首先，动物模型与人类生物学和疾病机制存在差异，因此研究结果可能无法完全适用于人类。
其次，动物模型的建立和维护需要大量的时间、金钱和资源。
此外，动物实验也涉及伦理和道德问题，需要权衡动物利益与科学研究的价值。
近年来，随着生物技术的进步，越来越多的替代方法被用于替代或减少动物实验。
例如，体外细胞实验、计算机模拟和人体器官芯片等技术的发展，为人类疾病研究提供了新的途径。
然而，目前这些替代方法仍然无法完全替代动物模型，仍需依赖动物模型进行深入研究。
总的来说，动物模型作为一种重要的研究工具，对于疾病机制研究、药物研发和治疗效果评估都具有重要意义。
实验动物学课7-9
4．生物医学动物模型 （Biomedical Animal Model） 是指利用健康动物生物学特征来提供人类疾 病相似表现的疾病模型。
兔甲状旁腺分布比较分散，位置不固定，有的附着 在主动脉弓附近，摘除甲状腺不影响甲状旁腺功能，是 摘除甲状腺实验较理想的动物模型
（二）按系统范围分类
1．疾病的基本病理过程动物模型
4
（二）B淋巴细胞缺陷动物
又称为性连锁免疫缺陷小鼠
（X-Linked Immune Deficiency Mice，XID） 起源于CBA／N品系，其B细胞功能缺陷，基因 xid，位于X性染色体上。纯合子雌鼠（xid／xid） 和杂合子雄鼠（xid／Y）对非胸腺依赖Ⅱ型抗原没 有体液免疫反应，血清中IgM和IgG含量降低，对B 细胞分裂素缺乏反应，B细胞数量减少，T细胞功能 正常。其病理与人类Bruton丙种球蛋白缺乏症和 Wziskott-Aidsch综合征相似。
Animal Model of Different System Diseases
是指与人类各系统疾病相应的动物模型，如消 化、呼吸、泌尿、心血管、神经等系统疾病相应 的动物模型。
四、影响动物模型质量的因素
• 致模因素 • 动物因素 • 实验技术因素
1．实验季节 2．昼夜不同时间的影响 3．麻醉深度的影响 4．操作技术的 5．实验给药的影响 6．对照组对造模的影响
6
(一)胚胎分割
用显微术将未着床的早期胚胎一分为二，四或更多，然后分 别移植给受体，妊娠产仔。一枚胚胎可克隆出两个或两个以 上的后代。
• Mular等于1968年将兔的2～8细胞期胚胎一分为二，移植给受体获得成功。 • 70年代，利用胚胎分割先后得到小鼠、牛、山羊、马和猪的同胚双生后代。 • 1986年，西北农业大学张涌、窦忠英等分别获得胚胎二分割的同胚双鼠和 半胚犊牛。 • 1987年，谭丽玲等，奶牛，张涌等，山羊获得同胎双生后代。 • 1988年，杜森等，获得同胚双生后代兔。1992年，徐宁等得同胚三鼠6组。 • 1996年陶涛等得胚胎单细胞(分裂球)移植仔猪。 • 目前，小鼠、家兔、山羊、绵羊、猪等实验动物均可用胚胎分割技术获得 同卵孪生后代。
消化系统疾病动物模型
消化系统疾病动物模型（一）胃肠疾病动物模型1、急性胃炎动物模型（1）酸制剂诱发急性胃炎模型：Wistar大鼠，雄性，300g，大鼠禁食24h，在清醒状态下，用下述试剂或物质灌胃：①水杨酸制剂（如20mmol／L阿司匹林或水杨酸溶液）按100mg／kg体重灌胃；②2ml10mmol／L的醋酸或2ml不同浓度的盐酸（1、10、100mmol／L）；③2ml同种动物胆汁或2mmol／L的牛磺胆酸；④2ml15％的乙醇。
4h 后处死动物，剖检可见胃内发生急性弥漫性炎症改变。
胃粘膜表面有浅表糜烂、出血，粘膜层内见中性粒细胞浸润。
（2）胆汁反流性胃炎模型：碱性肠液倒流入胃，刺激胃粘膜可引起炎症，即胆汁反流性胃炎。
常见于原发性或继发性幽门功能紊乱或胃切除手术后。
本法取上部小肠的碱性肠液注入已结扎幽门的同种大鼠胃内，使之对胃粘膜产生持续刺激，形成胃炎。
动物选取雄性Wistar大鼠，体重180～220g,制备上部小肠液，向胃内注入小肠液，2 ml/只（正常对照组注入2 ml生理盐水）。
缝合腹壁，腹腔注射阿托品5 mg/kg体重，以抑制胃液分泌，利于胃粘膜损伤模型的形成。
处死大鼠，开腹，结扎贲门，取出胃，沿胃大弯剪开。
用滤纸吸干表面水分，立即称量胃重，以胃湿重/体重之比（胃系数）表示胃水肿程度。
肉眼观察并计数整个胃粘膜出血点数，作为损伤指数。
模型组动物胃系数和损伤指数明显增加，肉眼观察模型组胃粘膜充血、水肿，皱襞减少，颜色暗红，并有大量散在出血点。
2、慢性胃炎动物模型（1）大鼠慢性萎缩性胃炎模型酗酒、用药不当、饮食习惯不良、幽门螺杆菌感染、自身免疫等是此病的主要病因。
组织病理学是评价造模成功的最主要指标，主要观察和测量胃粘膜厚度、粘膜肌层厚度、腺体数量、壁细胞数量、固有层炎细胞浸润程度和肠化生发生率等。
综合法一：胆汁（去氧胆酸钠）+热水+主动免疫综合法二：去氧胆酸钠+热糊+主动免疫综合法三：去氧胆酸钠+酒精+氨水+吲哚美锌3、动物胃粘膜肠上皮化生模型（1）X线胃局部照射诱发胃粘膜肠化生模型：选用5～8周龄的Wistar 或JCL/SD大鼠。
胃溃疡实验动物模型制作研究进展
胃溃疡实验动物模型制作研究进展作者：董伟来源：《赢未来》2018年第08期摘要：胃溃疡是一种慢性消化系统疾病，发病率高，病程长，临床症状特点是周期性疼痛，恶心呕吐，严重者可出现胃出血。
建立胃溃疡模型，对溃疡机制及药效、治疗机制进行深入研究具有重要的临床意义。
胃溃疡有多种造模方法，本文就近几年常用的大鼠胃溃疡模型进行综述，为胃溃疡的进一步研究提供参考依据。
关键词：大鼠胃溃疡模型胃溃疡是最常见的上消化道疾病，在消化内科较为常见，发病率居高不下。
为了开展溃疡发生机制及药效、治疗机制的研究，一些常用实验性胃溃疡大鼠模型被广泛引用，目前大鼠胃溃疡模型的方法已经有数种，包括水浸应激性、幽门结扎性、水杨酸性、乙醇性、利血平性、冰乙酸性等。
本文就目前实验中常用的胃溃疡模型进行综述，为实验研究提供更多的信息。
1.冰乙酸性模型目前大鼠胃溃疡模型中以冰乙酸性模型在实验研究中应用较广，大量研究表明此模型方法可靠，成功率高，重复性好，溃疡深而大，与人类的慢性胃溃疡极为相似，其自然愈合需要60 d左右。
利用乙酸注射、乙酸滤纸贴敷和乙酸直接灼烧法型[1]：大鼠禁食不禁水24h，用10%水合氯醛（3. 5mL/kg）腹腔注射麻醉，剑突下0. 5cm纵向切开腹壁约2cm，找出胃，轻移出腹腔。
①乙酸注射法，用微量注射器在胃前壁胃窦部浆膜下近肌层处注入一定剂量（0.05，0.03， 0.01mL）的冰乙酸。
②乙酸滤纸贴敷法，用直径为5mm的圆滤纸片浸适量的冰乙酸后，在胃窦部浆膜层贴敷30s x2次。
③乙酸直接灼烧法，将内径5mm、长30mm的玻璃管垂直置于胃体浆膜层，管内加入冰乙酸0. 2mL，15min后用棉签蘸出冰乙酸。
以上操作完毕，将胃轻轻送回腹腔，后覆盖网膜，缝合腹膜，腹壁各层组织。
此模型操作较简便，重复性好，所制造的溃疡大小稳定。
此溃疡的外形和组织结构都与人的胃溃疡十分接近。
因此，本模型适用于各种药物治疗胃溃疡的研究，也适用于胃溃疡修复机理的探讨。
人类疾病动物模型概述
按中医药体系分 中医证候动物模型：阴虚、阳虚、气虚、血虚、脾虚、肾虚动物模型，厥脱症动物模型
02
影响动物模型的因素
致模因素 研究目的 人类疾病的致病因素，临床症状和发病机理在动物上的区别
动物因素（种类、品系、年龄、性别、生理状态等）
01
实验技术因素（昼夜、麻醉深度、手术技巧、给药途径、对照组）
02
抗疾病型动物模型（negative animal model）
是指特定的疾病不会在某种动物身上发生。因此可借以探讨为何该种动物对该疾病有天然的抵抗力。
如哺乳类动物均感染血吸虫病，而洞庭湖流域的东方地鼠却不能复制血吸虫病，故可用于血吸虫感染和抗病的研究。
是指利用健康正常的动物生物学特征来提供人类疾病相似表现的疾病模型。
适用性：复制模型应尽量考虑今后临床能应用和便于控制其疾病的发展，动物背景资料要完整，生命史能满足实验需要。
安全性：动物模型应不对实验人员和其它人员的生命安全产生威胁。
易行性和经济性：动物经济而来源充足，便于转运，易于关养。在同等条件下，优先使用标准化的实验动物。
第二节 动物模型分类 按产生原因分类 诱发性动物模型（experimental animal model） 自发性动物模型（spontaneous animal model） 抗疾病型动物模型（negative animal model） 生物医学动物模型（Biomedical animal model）
其它动物自发瘤
01
大鼠内分泌肿瘤和恶性淋巴瘤，跟品系和年龄有关。
02
金黄仓鼠是实验性肿瘤研究中常用的一种动物，自发瘤发生率的（0.5％～17％），主要发生于神经系统和膀胱以外的组织和器官。
03
兔类自发瘤发生率很低，仅为0.8％～2.6％，以乳头状瘤和子宫腺瘤最为常见。
动物模型
DBA/2
声音
100％发生听源性癫痫
C57
声音
不发生听源性癫痫
年龄和体重的影响： 动物的寿命差异较大，解剖生理特征和反 应随年龄而明显变化，一般幼龄动物比成年动 物敏感，应根据实验要求，选择相应年龄的动 物复制模型（健康动物年龄与体重有相关）。
性别因素的影响： 同种、同品系，不同性别的动物，对某些 反应不一致。 麦角新硷
（2）昼夜不同的影响
实验动物的体温、血糖、基础代谢的、
内分泌等随昼夜的不同呈有节律的变化，
在复制模型时要注意昼夜不同对模型的影
响。
（3）麻醉深度的影响 不同的麻醉药、剂量对动物麻醉效果
有差异，这种差异会影响模型的复制。
（4）手术技巧的影响
手术熟练，将减少对动物的刺激，损伤和出血
能提高模型的成功率。 （5）实验给药的影响 给药途径、剂量和熟练程度不同会对造模产生 影响。
可靠性：复制模型应特异地、可靠地反映该种疾病或 某种机能、代谢、结构变化，同时应具备该种疾病的 主要症状和体征，并经受一系列检测得以证实。
适用性和可控性：复制模型应尽量考虑今后临床能应
用和便于控制其疾病的发展，以利于开展研究工作。 易行性和经济性：动物选择、复制方法、指标检测。
动物模型的评估：
其他因素容易控制，短时间内可复制大量的
动物模型 不足之处：诱发的与自然产生的在某些方面 有所不同。而且有些人类疾病不能用人工方 法诱发出来。
自发性动物模型：指不加任何人工诱发，在自然条件下 动物自然产生的疾病，或者由于基因突变的异常表现通 过遗传育种保留下来的动物疾病模型。其中包括近交系
的肿瘤疾病模型和突变系的遗传性疾病模型。突变系的
癌物作用过的器官、组织移植于同种或同种系裸鼠皮下进行 肿瘤的重复实验。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
常用的方法
① 应激法 ② 幽门结扎法 ③ 药物法 ④ 醋酸法
乙醇 组胺 促胃液素 肾上腺类固醇 水杨酸盐 血清素 利血平 保泰松
……
阳性对照药：
H2受体拮抗药——西咪替丁，雷尼替丁，法莫替丁等 加强胃黏膜防御功能——甘珀酸，果胶铋，硫糖铝
2019/9/22
王慷慨
19
研究抗胃溃疡药物
胃黏膜形态观察 胃分泌试验 胃黏膜血流量测量 胃粘液测定 抗炎镇痛试验 抑制幽门螺杆菌试验等
muropeptide
MAP3KINASES
2019/9/22
INFLAMMATION
GASTRITIS
Naumann M, Trends in Microbiology, 2004, 12(1): 29–36
王慷慨
9
酸制剂法
急性胃炎动物模型
实验动物
体重300g左右雄性Wistar大鼠。
2019/9/22
（6）15%的乙醇；
（2）-（6）可单独或几种合用（2ml左右）灌胃；
急性胃炎动物模型
结果
4h后处死动物，剖检可见胃内发生急性 弥漫性炎症改变。
病变
胃黏膜表面有浅表糜烂、出血，粘膜层 内见中性粒细胞浸润。
2019/9/22
王慷慨
12
2019/9/22
王慷慨
13
？ 观察指标：
组织：HE，免疫荧光，干湿重比等 NOS， PGE2等
平法和乙醇法可任选其一。
2019/9/22
王慷慨
17
急性胃溃疡动物模型
常用的方法
① 应激法 ② 幽门结扎法 ③ 药物法 ④ 醋酸法
乙醇 组胺 促胃液素 肾上腺类固醇 水杨酸盐 血清素 利血平 保泰松
……
治疗性给药——醋酸法复制的模型 预防性给药——其他模型
2019/9/22
王慷慨
18
急性胃溃疡动物模型
王慷慨
10
操作方法
急性胃炎动物模型
大鼠禁食24h，在清醒状态下，用下述试剂或物质灌胃：
（1）水杨酸制剂（如20 mmol/L阿司匹林或水杨
酸溶液）按100 mg/kg体重灌胃；
（2）10 mmol/L的醋酸；
（3）不同浓度的盐酸（1，10，100 mmol/L）；
（4）同种动物胆汁；
（5）2 mmol/L的牛磺胆酸；
Microaerophilic, i.e. it requires oxygen but at lower levels than those contained in the atmosphere (5-8%)
With its flagella and its spiral shape, the bacterium drills into the mucus layer of the stomach, and can either be found suspended20in05th诺e贝ga尔st医ric学m奖u，coWsaarorrena和ttaMcharesdhtaollepithelial cells
2019/9/22
王慷慨
3
Gastritis
胃黏膜层的炎症（上皮细胞、固有层、黏膜肌）
急性
固有层中性粒细胞浸润 糜烂出血
上皮细胞
慢性
损伤与修复交替 进行，病程迁延
浅表性：淋巴细胞、浆细胞浸润
固有层
萎缩性：炎性细胞浸润，固有黏层膜腺肌
体减少，细胞增生
2019/9/22
王慷慨
4
胃炎模型的种类
1、HP法 2、药物、乙醇、应激法 3、非甾体抗炎药法 4、复合法 5、酸制剂法
溃疡的形成主要由于防御因素和致溃疡因素的 平衡失调所致。
2019/9/22
王慷慨
16
急性胃溃疡动物模型
常用的方法
乙醇
① 应激法
组胺
② 幽门结扎法 ③ 药物法 ④ 醋酸法
促胃液素 肾上腺类固醇 水杨酸盐 血清素 利血平
保泰松
……
在抗溃疡药物药效学试验中，应激法、幽门结
扎法和醋酸法制备的胃溃疡模型为必做实验，利血
Breaks down urea (NH2CONH2) to NH3 and HCO-3
Stomach acidity
Chassaing B. Gastroenterology, 2011,140(6):1720–8
2019/9/22
王慷慨
7
实验动物
小鼠（18-22g），蒙古沙鼠（55-60g），仔犬、仔猪
2019/9/22
王慷慨
5
HP法
Helicobacter pylori
Spiral-shaped Gram-negative, oxidase and catalase-positive motile bacterium with 4-6 flagella (Thruster and anchor)
PCR：特定基因或炎症因子 Western：特定激酶或信号分子，特定基因等 ……
2019/9/22
王慷慨
14
第二节 急性胃溃疡动物模型
2019/9/22
王慷慨
酶、非甾体抗炎药 不合理应用、幽门螺杆菌感染等。
防御因素：粘液-碳酸氢盐屏障、粘膜屏障、 粘膜血流量、胃上皮细胞的更新、表皮生长因 子和内生性前列腺素等。
2019/9/22
Barry J. Marshall and J. Robin Warren got the Nobel Prize in 2005
王慷慨
6
Produces adhesins which bind to membraneassociated lipids and carbohydrates and help its adhesion to epithelial cells
2019/9/22
王慷慨
20
幽门结扎法胃溃疡模型
2019/9/22
第八章 消化系统疾病动物模型
The animal models of digestives system diseases
2019/9/22
王慷慨
1
讲授内容
胃炎动物模型 消化性溃疡模型 病毒性肝炎模型（乙型肝炎） 脂肪肝、肝硬化模型 胰腺炎模型
2019/9/22
王慷慨
2
第一节 急性胃炎动物模型
操作方法
HP标准菌株灌胃（109-1010CFU/ml）法
实验前12小时禁食禁水
实验前1小时，0.1mol/L 碳酸氢钠0.5ml灌胃
0.5ml /只/次 每两天一次（隔天灌胃） 8周时模型成功率90% 保证HP活性及浓度
2019/9/22
王慷慨
8
H. Pylori induces inflammation