阿魏蘑提取物清除羟自由基和体外抗肿瘤活性的研究


青河 、 托里 等 气 候 恶 劣 的沙 漠 戈 壁 里 , 一 性 生 专 长在死 的阿魏植 物 根茎 上 。我 国传 统 中 医认 为 :
白阿 魏 蘑 功 效 似 阿 魏 , 消 积 、 虫 、 咳 、 炎 有 杀 镇 消
全 挥 发 后 , 人 离 心 管 中 冷 冻 干 燥 , 乙 醇 粗 放 得
减 压 浓 缩 , 冻 干 燥 , 阿 魏 蘑 乙 酸 乙 酯 粗 提 物 冷 得 和 石 油 醚 粗 提 物 。 另 一 份 浸 提 液 浓 缩 至 乙 醇 完
区特 有 的 食 药 两 用 珍 稀 真 菌 , 间 称 为 “ 民 白灵
菇” 野生 阿 魏 蘑 主 要 分 布 在 我 国 新 疆 的木 垒 、 。
李 维瑶 ,杨 焱 ,唐 庆 九 ,郝瑞霞 ,刘 艳芳 ,张劲松 ,赵 勇
( 上海 市食 用 菌 工程 技术 研 究 中心 , 海 市 农 业 遗 传 育 种 重 点 实 验 室 , 海 市 农业 科 学 院 食 用 菌 研究 所 , 上 上 上 海 市 农 业 科 学 院 天 然 药 用 资 源 研 究 与 开 发 中 心 , 海 2 lO ;上 海 水 产 大 学 食 品 学 院 , 海 20 9 ) 上 O l 6 上 0 0 0
光 仪 ( 国 B O— 美 I TEK 公 司 )进 行 测 定 。 每 孔 每
乙酯 和石 油 醚 不 同 溶 剂 提 取 阿 魏 蘑 子 实体 所 得 的粗 提物在 抗氧 化 及体 外 抗 肿瘤 方 面 的活 性 , 为
阿 魏 蘑 的深 度 开 发 利 用 奠 定 理 论 基 础 。
1 材 料与方 法
维普资讯
食用 菌学 报 @ 20 .5 1 :5 ~ 5 081() 1 4
文 章 编 号 :0 59 7 ( 0 8 0 —0 1O 10 —8 3 2 0 ) 10 5 一4
阿 魏 蘑 提 取 物 清 除 羟 自 由基 和 体 外 抗 肿 瘤 活 性 的 研 究
国 内外 的相 关 报 道 较 少 。 本 文 研 究 了 乙 醇 பைடு நூலகம் 酸 乙
1 3 阿 魏 蘑 粗 提 物 清 除 羟 自 由基 活 性 的 测 定 .
参 照 陈 季 武 等 的 方 法 略 作 改 进 : 于 9 先 6 孔板 依 次 注 人 5 L 1mmo/ 维 生 素 C溶 液 , lL 1 L 1 0 mmo/ u O4・ H2 溶 液 , O L lL C S 5 O 1 1mmo/ 邻 菲哕啉 溶液 ,5 L不 同浓 度 的样 品 lL 1 溶 液 ( 白 对 照 加 双 蒸 水 ) 由 1泵 注 人 1 L 空 ; O 06 H O 溶液 , . 2泵注人 1 O L 0 0 lL 5 . 5mo/ 硼 酸 一硼 砂缓 冲液 ( H 8 2 , p . ) 使用 C ai lr y化 学 发 t

要 :采 用 乙醇 、 酸 乙 酯 和石 油 醚 3种溶 剂对 阿魏 蘑 子 实体 进行 提 取 , 化 学 发 光 法 和 A a r le 分 乙 用 lma Bu 法
别 对 不 同 的粗 提 物 进 行 了清 除 羟 自由基 和 体 外 抑 制 肿 瘤 细胞 生 长 作 用 的研 究 。 结 果 显 示 , 粗 提 物 对 羟 自 由 各 基 的抑 制 作 用 均 随 着 剂 量 的增 加 而 逐 渐 增 强 , 中 乙 酸 乙 酯 粗 提 物 清 除 羟 自 由基 的 活 性 最 强 ; 其 3种 粗 提 物 对 肿
瘤 细 胞 I 2 0都 具 有 很 强 的抑 制 作 用 。利 用 HP C初 步 分 析 了 粗 提 物 中 的 组 分 , 果 显 示 , 3种 粗 提 物 中 1 1 L 结 这 含 有 某 种 结 构 相 近 的组 分 , 醇 提 取 物 和 乙 酸 乙 酯 提 取 物 中 化 合 物 的 种 类 较 多 。 乙 关键 词 :阿 魏 蘑 ;羟 自 由基 ;抗 氧 化 剂 ;抗 肿 瘤
中 图分 类 号 : S 4 1 0 1 6 6.4 . 文 献 标 识 码 :A
阿 魏 蘑 ( lu ou e ua a z P e rts r leL n i 新 疆 地 f )是
液合 并 , 压 浓 缩 。 其 中 两 份 浸 提 液 浓 缩 至 减 5 OmL, 分 别 用 等 量体 积 的 乙酸 乙 酯 和石 油 醚 并 萃取 , 萃取 3次 , 别合 并 乙酸 乙脂 和 石 油 醚层 , 分
1 1 试 验 材 料 .
0 6s 集 一 次 光 信 号 , . 收 连续 收 集 3 , 录相 对 0S 记
发 光强 度 。
阿 魏蘑 子 实 体 购 于 新 疆 乌 鲁 木 齐 县 食 用 菌
研 究 所 ;5 乙 醇 、 酸 乙 酯 、 油 醚 和 甲 醇 等 均 9 乙 石 为 国产分析 纯 。 1 2 阿 魏 蘑 粗 提 物 的 制 备 .
提物 。
之功效 , 可用 于 治疗 胃病 , 防治 妇 科 肿 瘤 、 部 肿 腹 块 、 脾 肿 大 和 脘 腹 冷 痛 等 。近 年 来 的 研 究 表 肝 明, 阿魏蘑 多 糖 具 有 调 节 免 疫 、 氧 化 及 抗 肿 瘤 抗 等多种 生物 活 性 口 。除 多 糖外 , 魏 蘑 子 实体 ] 阿 内还含 有其 它抗 氧化 、 肿 瘤 的活性 成 分[ , 抗 5 但 ]
清 除 率 计 算公 式 : 除率 ( ) ( 白对 照 清 一 空 发 光强 度 峰 值 一样 品发 光 强 度 峰值 ) 空 白对 照 / 发 光强 度峰值
1 4 阿 魏 蘑 粗 提 物 体 外 抗 L 2 0肿 瘤 细 胞 活 性 . 11
的 测 定
称 取 1 0g阿魏 蘑 子 实体 3份 , 1L 9 0 用 5
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5种中药提取物清除自由基的体外抗氧化活性研究

5种中药提取物清除自由基的体外抗氧化活性研究
收稿日期:2019-04-19 基金项目:南通市卫生和计划生育委员会科研课题专项(WKZL2018
084) 作者简介:郭新颖(1986-),女,工程师,主要从事理化检验工作。 通信作者:陆 娟。
单、试剂便宜,可为开拓现代食药用途、开发功能性 保健1.1 仪器与试剂
GUO Xin-ying,SHI Yu-kun,CHEN Feng,LU Juan (Nantong Center for Disease Control and Prevention, Nantong 226007, China) Abstract :Objective A new fluorescence detection method was established for the indirect determination of
抗氧化活性,其中以五倍子最佳。
关键词:羟自由基;荧光强度;抗氧化;中药
中图分类号:R284.1
文献标识码:A
Study on scavenging free radicals and antioxidant activity in vitro for 5 kinds of traditional Chinese medicine extracts*
F96 型荧光分光光度计 (上海棱光技术有限公 司);930 型荧光光度计 (上海第三分析仪器厂); FA2004 型电子天平(上海良平仪器仪表有限公司)。
5.0×10-5mol·L-1 曙红 B 溶液(上海新中化学试 剂厂);5.0×10-4mo·l L-1 FeSO4 溶液(批号 20140630 国 药集团化学试剂有限公司);2.0×10-3mol·L-1 硫脲溶 液(批号 96-12-02 上海试剂一厂);2.0×10-3mol·L-1 抗坏血酸溶液 (批号 L-8754-50 Sigma 试剂公司); 0.002% H2O2 溶液 (批号 10011218 国药集团化学试 剂 有 限 公 司);1.0 ×10-4mol·L-1 H2SO4 溶 液 (批 号 20061204 上海试剂四厂昆山分厂)。

三种阿魏根提取物的体外抑菌作用研究

三种阿魏根提取物的体外抑菌作用研究
植 物 样 品于 l O O mI 锥形瓶中, 加入 5 倍量 9 5 乙醇 , 于超
声波清洗器中振荡 2 0 m i n , 过滤 , 滤渣加入一定量 9 5 乙 醇, 重复提取 5 次, 合并滤液 , 7 5  ̄ C 旋转蒸发仪减压浓缩滤 液至干, 用 9 5 乙醇溶解并定容至浓度 1 r n I , 备用 。 1 . 2 . 2 菌种活化培养及 菌液 的制备 在无 菌条件下 , 用
种再接 种 于液体 培 养基 ,
1 . 2 . 3 滤 纸片法测 定 抑菌 活性 在无 菌条 件 下 向牛 肉膏蛋 白觫 琼 脂 平板 中加入 0 . 4 mI 菌液, 将 直 径 为
阿魏是伞形科 ( Um b e l l u f e r a e ) 阿魏属( F e r u l a I ) 植 物 的总称 , 全世界 上约有 1 5 0种 , 主要分 布于地 中海 、 中
供试培养 基 : 培养 细菌 采用 牛 肉膏 蛋 白胨琼 脂 培
养基 。
亚及其邻近地 区 。在我 国主要 分 布于新疆 , 共有 2 6个 种及 1 _ 个变种【 ] 。据 2 0 1 0版《 中华人 民共 和 国药典 》 记
硫 酸庆 大霉 素注 射液 ( 宜 昌人福 药 业有 限责 任公 司) ;
9 5 乙 醇为 分 析 纯 ( 天 津 市 光 复科 技 发 展 有 限公 司 ) 。 1 . 2 试 验 方 法
以倍半萜类 、 香豆素类和多硫化合物 为主要生物活性 物 质 ] 。 目前 , 对 于阿 魏提取 物抑 菌活 性研 究报 道较 少 且主要集 中于化学成分及药理 作用 ] 。该 试验采 用滤 纸片扩散 法 对新 疆 阿魏 、 多伞 阿魏 ( F . f e r u l a e o i d e s K . M ) 和大果 阿 魏 ( F . 1 o h m a n n i i B o i s s . ) 根 提 取物 的体 外 抑菌活性进行 探讨 和比较 , 以期为 阿魏抑菌活性物 质的 开发和利用提供科学依据 。

20种多孔类真菌乙醇提取物体外抗氧化和抗肿瘤活性的比较研究

20种多孔类真菌乙醇提取物体外抗氧化和抗肿瘤活性的比较研究

20种多孔类真菌乙醇提取物体外抗氧化和抗肿瘤活性的比较研究陈永强;陈先晖;孙勇;缪倩;王力;蒋继宏【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2011(032)005【摘要】采用清除DPPH自由基的方法和Alamar Blue法比较20种多孔类真菌乙醇提取物抗氧化活性和对3株癌细胞体外增殖的影响,对它们的子实体和菌丝体乙醇提取物进行测定.结果表明:20种多孔菌子实体乙醇提取物清除自由基和抗肿瘤活性大部分都强于菌丝体乙醉提取物,其中有10株多孔类真菌子实体乙醇提取物质量浓度在5mg/mL时,自由基清除率超过70%;质量浓度在500μg/mL时,对人非小肺癌细胞NCI-H46.和人肝癌细胞HepG2两株癌细胞抑制率在90%左右,而对耐药细胞株Bel-7402/5-Fu抑制率略低于正常细胞株.【总页数】5页(P27-31)【作者】陈永强;陈先晖;孙勇;缪倩;王力;蒋继宏【作者单位】徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116;徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室,江苏,徐州,221116【正文语种】中文【中图分类】TS201.2【相关文献】1.肉色香蘑子实体提取物的体外抗氧化与抗肿瘤活性研究 [J], 陈颖;孙红;张树斌;王立安2.灵芝属真菌乙醇提取物抗肿瘤活性的筛选 [J], 周月琴;糜可;杨庆尧;钟顺昌;李绪泉;杨晓彤3.不同“桑黄”类真菌水提取物的抗肿瘤活性研究 [J], 武晓林;王超儀;包海鹰4.10种多孔类真菌体外抗肿瘤活性的筛选 [J], 孙勇;蒋继宏;陈玉芹;高甜惠;陈凤美5.水柏枝乙醇提取物不同极性部位体外抗氧化活性研究 [J], 李芳龙;阿呷尔布;李家东;梁晓霞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长及生物活性影响的研究的开题报告

阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长及生物活性影响的研究的开题报告

阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长及生物活性影响的研究的开题报告一、研究背景及意义阿魏(Angelica dahurica)是一种常见的中药材,其主要成分为阿魏酸及其衍生物。

阿魏酸的提取物已被广泛应用于医药、保健品等领域,显示出了抗菌、抗氧化、提高免疫力等多种生物活性。

阿魏菇(Angelica sinensis)是一种新兴的食用菌,其具有较高的营养价值和药用价值。

阿魏菇具有抗氧化、抗肿瘤、降血脂等多种药理作用。

阿魏菇的种植及生产成本较高,因此为了有效地提高其生产效率和活性成分含量,需要寻找能够促进阿魏菇菌丝生长的有效方法。

阿魏酸提取物是一种具有生物活性的物质,因此研究阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长及生物活性的影响具有重要的实践意义。

二、研究内容及研究方法1. 研究内容:本研究将针对阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长和生物活性的影响进行探究。

主要包括以下内容:(1)探究阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长速度和菌丝产量的影响;(2)研究阿魏提取物对阿魏菇的抗氧化活性和抗肿瘤活性的影响。

2. 研究方法:(1)菌丝生长实验:选取适宜的阿魏提取物浓度,将阿魏提取物加入培养基中,分别培养阿魏菇菌丝,测定菌丝生长速率和产量。

(2)抗氧化活性实验:采用自由基清除法或铁离子螯合法测定阿魏提取物的抗氧化能力。

(3)抗肿瘤活性实验:采用体外细胞实验或体内实验,通过检测细胞增殖、凋亡和肿瘤体积等指标,评价阿魏提取物的抗肿瘤效果。

三、研究预期结果(1)探究阿魏提取物对阿魏菇菌丝生长速度和产量的影响,为提高其生产效率提供理论基础;(2)研究阿魏提取物的抗氧化活性和抗肿瘤活性,为其在医药、保健品等领域的开发和应用提供依据。

新疆阿魏抗氧化活性部位研究

新疆阿魏抗氧化活性部位研究

新疆阿魏抗氧化活性部位研究目的建立高通量的药物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力的检测方法,用于新疆阿魏抗氧化活性部位的初步筛选。

方法以抗坏血酸的DPPH自由基清除率为阳性对照,并以半抑制浓度(IC50)作为评价各供试品清除DPPH自由基能力的指标,评价和筛选新疆阿魏各极性部位(石油醚部、乙酸乙酯部、甲醇部、水部)的抗氧化能力。

结果新疆阿魏不同极性部位对DPPH 自由基清除的IC50分别为石油醚部3252.22 μg/mL、乙酸乙酯部36.22 μg/mL、甲醇部32.22 μg/mL、水部2643.38 μg/mL,抗坏血酸为27.16 μg/mL。

结论乙酸乙酯部、甲醇部为新疆阿魏清除DPPH自由基的有效抗氧化活性部位。

本研究建立了简便、灵敏的药物对DPPH自由基清除测定方法,其高通量的快速检测可为其他抗氧化药物的筛选提供参考。

标签:新疆阿魏;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基;抗氧化活性;抗坏血酸物名实图考》中都有阿魏的记载。

我国药典收载阿魏为新疆阿魏Ferula sinkiangensis K. M. Shen、阜康阿魏Ferula fukanensis K. M. Shen的树脂[1],阿魏对呼吸系统、消化系统、神经系统等相关疾病有良好治疗作用。

国外研究表明,阿魏属植物的特征成分为香豆素类、倍半萜类和含硫化合物等,并发现其具有抗氧化、抗癌、抗炎、抗病毒等良好的药理活性[2-3]。

国内对阿魏的研究主要集中在成分与生药上,其活性研究处于初步阶段。

由于氧化自由基引起的连锁反应,产物经体内代谢后会引起脂质细胞膜等体内大分子损伤,是多种疾病如动脉粥样硬化、癌症、各种炎症等的诱因[4],因此,本研究采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法对新疆阿魏抗氧化作用进行研究,初步筛选出其活性部位,为其药理活性的深入研究提供依据。

1 仪器与试药超声波清洗机,200 W,40 kHz,昆山市超声仪器有限公司;酶标仪,美国Thermo公司;96孔板,美国COSTAR公司;BS2202S型天平,北京赛多利斯仪器公司。

新疆阿魏抗肿瘤活性部位筛选

新疆阿魏抗肿瘤活性部位筛选

新疆阿魏抗肿瘤活性部位筛选目的筛选新疆阿魏抗肿瘤的活性部位。

方法采用溶剂法将新疆阿魏分离成不同极性部位,磺酰罗丹明B法检测各部位对肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析各部位诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

结果新疆阿魏石油醚部位无抗肿瘤活性,新疆阿魏乙酸乙酯部、正丁醇部对人结肠癌细胞HCT116、人结肠腺癌细胞Caco-2、人肝癌细胞HepG2、小鼠肾癌细胞MFC均有不同程度的增殖抑制和促凋亡作用,甲醇部位活性较弱。

结论乙酸乙酯、正丁醇部位有较强的抗肿瘤活性,可确定为新疆阿魏抗肿瘤活性部位。

Abstract:Objective To screen the active parts of Xinjiang Ferulae Resina with anti-tumor effects. Methods Solvent method was used to separate Xinjiang Ferulae Resina into parts with different polarities. SRB assay was applied to screen the effects of tumor cell inhibiting proliferation of different parts. Flow cytometry method was applied to study the effects of inducing tumor cell apoptosis of different parts. Results Petroleum ether parts of Xinjiang Ferulae Resina have no anti-tumor activity. Ethyl acetate and n-butyl alcohol polarity parts can inhibit proliferation and promote apoptosis of HCT116,Caco-2,HepG2 and MFC cells to some extent. Methanol polarity parts have weak anti-tumor effects. Conclusion Ethyl acetate and n-butyl alcohol polarity parts of Xinjiang Ferulae Resina have strong anti-tumor effects,which can be identified as active parts of Xinjiang Ferulae Resina with anti-tumor effects.Key words:Xinjiang Ferulae Resina;anti-tumor;active part;apoptosis阿魏属隶属伞形科前胡族,约有150余种,主要分布于地中海、中亚及其邻边地区,我国有31种,其中新疆产25种[1]。

阿魏蘑菇乙醇提取物对S180小鼠免疫功能的影响

fn t n o es al a. u ci f h m l r t o t
Ke r s p e r t sfr le; 1 ;i sd x e me tr g l t gi mu i u c in ywo d : lu ou eu a ¥8 n iee p r o i n ;e uai n m nt f n t y o
醇提 物 可 能 时荷 瘤 小 鼠免 疫 功 能有 影 响 。 关键 词 : 阿魏 菇 ;。 鼠 ; 内实验 ; 疫功 能调 节 S 小 体 免
EF FECT OF THE AL C0H0LEXT RAC OF P T LEUROTUS F ERUI E A
0N M MUNI Y I T FUNC 0N N I T1 I M CE 1 OFS8 0 YANG i a , Ha—y n ZHANG a — o g TAN Zh o h n , Huiln W ANG — i —i, Ai xa
h v edf rn e ( < .5 , esle d xi du d s n W d s o ae i ln a etedf aet iee e P 00 )h pe ni e me im oea dl oec mp rdw t ba kh v i h f t n n O h h -
定 一 定 的基 础 。
疆 医科 大学动物 中心提供 ) 。 11 主要仪器与试剂 .3 .
仪器 :M s T pw型电子天平 :上海天平仪器厂 ;5 一 7 1
G B型分光 光度计 : 南京群 发分析仪器有 限公 司 ;7 一 2Q 8 A旋转蒸发仪 :上海爱 朗仪器有 限公 司 ; K ¥ 6 5 D 一 2 型 恒温水 浴锅 : 上海一恒科 技有限公 司; lm u 型显微 Oy p s 镜: 广州市 明美科技有 限公 司。

阿魏不同溶剂提取物抑菌活性测定

阿魏不同溶剂提取物抑菌活性测定摘要:通过超声波萃取法用不同溶剂提取阿魏有效成分,结合生长速率法测定阿魏不同溶剂提取物对植物病原菌的抑制活性。

结果表明,丙酮、氯仿、乙酸乙酯对阿魏抑菌活性成分的提取能力较强,而且氯仿萃取相表现出较高的抑菌活性;在降低测试浓度的条件下,低浓度的氯仿萃取相对供试病原菌也表现出了较好的抑菌效果。

关键词:阿魏;有效成分;抑菌效果;生长速率法Determination of Antibacterial Activity of Different Extraction from Ferula SolventsAbstract:ActiveingredientswereextractedfromdifferentsolventsofFerulathroughtheultrasonicextractionmethod.Combinedwithgrowthratemethod,antibacterialactivitiesofdifferentextractionfromFerulasolventsagainstplantpathogensweredetermined.Theresultsshowedthatacetone,chloroform,ethylacetatehadbetterextractionabilityinantibacterialingredients,andchloroformextractionshowedhighantibacterialactivity.Furthermore,thechloroformextractionalsoshowedbetterantibacterialactivitiesagainsttestedpathogensat lowerconcentration.Keywords:Ferula;activeingredient;inhibitoryeffect;growthratemethod中药材阿魏属于伞形科芹亚科前胡族阿魏亚族植物,阿魏属植物大多生长于内陆干旱荒漠地区,主要分布于地中海、中亚及其临近地区,产地属大陆性气候,干旱少雨,夏热冬寒,气温变化剧烈,日照长,日温差大。

新疆特色中药阿魏提取物的制备及抑菌活性研究

新疆特色中药阿魏提取物的制备及抑菌活性研究【摘要】采用阿魏粉醇浸剂的提取和阿魏粉水煎剂的提取测定新疆阿魏对5种标准菌株(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌)的菌群生长的影响。

结果表明,对于新疆阿魏2种制剂对大肠杆菌和普通变形杆菌不具有抑制作用,而对枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌抑菌效果较强。

【关键词】溶剂二氯甲烷;阿魏;提取率;阿魏粉醇浸剂;5种标准菌株;抑菌活性阿魏用于治疗肉食积滞、瘀血痞块、虫积腹痛等,是一类具有重要药用价值的植物资源。

已有学者报道从阿魏根及油胶树脂中分离提取出84种成分,从阿魏中分离出的单体(Galbanicacid)具有抗菌活性。

本试验的目的是测定新疆阿魏对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌和苏云金芽孢杆菌等5种标准菌株的抑菌作用,为新疆阿魏用于临床治疗细菌性疾病提供参考。

一、实验材料与方法1.仪器材料①实验仪器。

脂肪测定仪(ZF-06A型)。

②实验材料。

新疆阿魏块茎干品(采购于新疆喀什市普济堂药店);乙醇、二氯甲烷(均为分析纯)。

牛肉膏蛋白胨培养基(g/l):牛肉膏3g,蛋白胨10g,5gNaCl,15~20g琼脂粉,蒸馏水定容到1000ml,pH7.2~7.4。

5种标准菌株为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌。

2.实验方法①索式提取法。

称取粉碎的阿魏根样品150.0g利用400mL的索氏提取管加入400mL二氯甲烷溶剂,水浴温度55℃,提取时间24h。

提取物过滤、80℃真空旋转蒸发得浅棕色粘稠不易流动的样品,称重15.97g。

②水煎法。

③阿魏的提取方法。

阿魏粉醇浸剂的提取:阿魏块茎干品粉碎(筛直径为5mm),加50%的乙醇没过药面,每次浸泡1h,过滤,共浸泡3次,合并滤液,80℃真空旋转蒸发至粘稠状,80℃烘干,用蒸馏水配制成10%阿魏醇浸剂。

110℃灭菌10min,4℃冰箱保存备用。

④体外抑菌试验方法。

阿魏菇中抗氧化多糖提取物及其制备方法和应用[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201911109806.3(22)申请日 2019.11.14(71)申请人 南开大学地址 300350 天津市津南区海河教育园区同砚路38号(72)发明人 刘方 木古丽·木哈西 (74)专利代理机构 天津耀达律师事务所 12223代理人 张耀(51)Int.Cl.C08B 37/00(2006.01)A61K 31/715(2006.01)A61P 39/06(2006.01)(54)发明名称阿魏菇中抗氧化多糖提取物及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种阿魏菇中抗氧化多糖提取物及其制备方法和应用,本发明所述的抗氧化多糖提取自阿魏菇,分别命名为G -1、AG -1和AG -2。

该抗氧化多糖是将阿魏菇子实体磨成粉后,经热水浸提、乙醇沉淀、除蛋白、透析、冻干、离子交换和分子筛而获得。

该多糖提取物为白色及淡黄色絮状粉末,分子量为168kDa、204kDa和132kDa 的纯多糖。

该多糖具有较强的抗小鼠红细胞溶血和一定的清除DPPH及羟基自由基的作用。

本发明的阿魏菇抗氧化多糖提取物为天然提取物,对人类和环境均无害;制备方法简单,成本较低,适于工业化生产。

权利要求书1页 说明书6页 附图4页CN 110698567 A 2020.01.17C N 110698567A1.阿魏菇中抗氧化多糖提取物,其特征在于:所述的抗氧化多糖提取物G -1、AG -1和AG -2来自阿魏菇,是分子量为168kDa、204kDa和132kDa的纯多糖,具有一定的抗氧化活性。

2.根据权利要求1所述的阿魏菇中抗氧化多糖提取物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:1)将阿魏菇子实体50℃烘干并研磨成粉,加入8倍体积蒸馏水,80℃水浴震荡浸提6h,过滤所得滤渣再次浸提,合并滤液,4000~8000rpm离心10~20min,收集上清液,即得阿魏菇子实体多糖粗提液;2)将阿魏菇子实体多糖粗提液用旋转蒸发仪进行旋转蒸发浓缩,加入4倍体积无水乙醇,2~6℃放置8~16小时,10000rpm离心20min,收集沉淀,即得阿魏菇多糖粗提物;3)将阿魏菇多糖粗提物用蒸馏水进行复溶,得到多糖溶液,置于分液漏斗中,用Sevage 法除蛋白,剧烈震荡,静置,等到水相和有机相之间的界面出现白色时,将分液漏斗打开,将下层有机相和中间白色絮状物去除,重复上述操作3-5次;取上层水相,装入分子截留量为3500Da的透析袋中,在4℃、足量蒸馏水中透析8~20小时,反复3~5次,再经旋转蒸发除去残留的有机溶剂,冷冻干燥,即得阿魏菇多糖粗粉;4)将阿魏菇多糖粗粉溶解于10mM、pH 7.4的Tris -HCl缓冲液中,上样于DEAE -Sepharose F.F阴离子色谱层析柱,用0-2mol/LTris -HCl -NaCl溶液连续梯度洗脱,用分布收集器收集洗脱液,蒽酮-硫酸法与分光光度计法跟踪监测每管洗脱液,根据吸光值绘制曲线,收集洗脱峰,透析后冻干;5)将每一个洗脱峰的多糖样品,分别上样于Sephadex G -75葡聚糖凝胶色谱层析柱进一步纯化,用蒸馏水洗脱,用分布收集器收集洗脱液,蒽酮-硫酸法与分光光度计法跟踪监测每管洗脱液,根据吸光值绘制曲线,收集洗脱峰,透析后冻干;获得阿魏菇抗氧化多糖提取物G -1、AG -1和AG -2。

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