periodical__zgmzmjyyzz__zgmz2009__0922pdf__092208
periodical__azjz__azjz2009__0903pdf__090301

的一期结肠和肝切除是安全可行的。机器手臂也有利于肝切除的顺利开展,可以使更多的患者从微创手 术中获益。 (资料来源:Patriti
tion of colorectal 2009。Mar A,Ceccarelli G,Bartoli A,et a1.Laparoscopic and robot—assisted one—stage with synchronous liver metastases:A pilot
resec—
cancer
study[J].J
Hepatobiliary Pancreat Surg,
26)
背景对肿瘤标本的大体观察是直肠全系膜切除(TME)后肿瘤转归的一个独立预后因子。本研究 旨在评估腹腔镜和开腹直肠癌全系膜切除后大体上所观察到的标本质量。患者和方法72例低位直肠癌 患者接受了开腹(n=39)或腹腔镜(n=33)TME。在所有标本中,对直肠中段前侧的腹膜切缘、腹膜 会阴筋膜、从后面和侧面覆盖直肠系膜的脏层筋膜以及直肠系膜下的肠壁进行了大体观察。结果
N,Tsiaoussis J,Pechlivanides G,et
a1.Quality
of surgery for rectal carcinoma:
Comparison between open and laparoscopic
approaches[J].Am J Surg,2009,Mar 21) (顾良军)
Colon Rectum,2009,
52:71)
目的
吸烟与结肠直肠癌(CRC)之间的相关性一直未能确定。2002年,挪威女性的CRC发病率高
居世界第2位。与此同时,挪威蚤性的吸烟率也一直居高不下。在本研究中,作者探讨了挪威女性中吸烟 与CRC发病率之间的相关性。方法作者共随访了68 160名年龄在30~69岁的挪威女性。受访者来由于 “挪威妇女和癌症研究”。率比(rate ratios,RRs)和95%可信区间(CIs)通过Cox比例危险模型测算。 随后,作者估算了人群归因分值(population
periodical__zglnxzz__zgln2009__0911pdf__091164

化学发光法(CL)
化学发光分析系统是利用化学发光
物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间 体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子 (hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。谢志鹏等¨叫 发现,Na2SO,歧化反应的中间态产物[Na2so。]能与鲁米诺 (Lumin01)构成化学发光体系,通过高锰酸钾(KMn04)的桥梁 作用,维生素B:能使体系的发光强度减弱,其强度的下降值与 维生素B:浓度在一定范围内呈良好线性关系,从而建立了测 定维生素B:的流动注射CL新方法。张琰图等¨7’基于水溶性 维生素在碱性介质中只有维生素B。和维生素B:,可与K3Fe (CN)。直接氧化产生化学发光的原理,建立了反相高效液相色 谱(RP-HPLC)分离柱后化学发光检测维生素B。和维生素B: 的新方法。cL具有灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单等优 点,加上RP-HPLC具有高效分离的特性,使得HPLC・CL成为一 种有效的痕量及超痕量分析技术。
第一作者:蒲玲玲(1979.),女。硕士,助理实验师,主要从事营养与食品 卫生方向研究工作。
万方数据
蒲玲玲等维生素B:检测方法的研究进展第11期
・1455・
核苷酸,并在检测复合维生素Ds 3时对B族维生素和烟酰胺也 达到了很好的分离效果¨…。具有快速、高效、高灵敏度i易定 量、重现性好及自动化等优点,已广泛地应用于小分子、小离 子、多肽及蛋白质的分离分析研究旧…。紫外、荧光、电化学、质 谱、激光等类型检测器均已运用于毛细管电泳技术,从检测灵 敏度的角度来说,毛细管电泳技术提供了很好的质量灵敏度, 而高效液相色谱法具有良好的浓度灵敏度。
19 Li Y,de Silva PG,Xi L,et a1.Separation of flavins and nieotinamide
periodical__zgyxjyjs__zgyx2009__0905pdf__090507

(Zhaoqing Medical College,Zhaoqing 526020。China) view of the present situation of the traditional teaching model of pharmacology at higher vocational colleges。this paper analyzes the major problems found in pharmacology teaching of the specialty.By discussing the proper curricular arrangement,training objectives-teaching materials-
第23卷第5期 2009年10月
中国医学教育技术
CHINA MEDICAL EDUCAlrION TECHNOLOGY
V01.23 No.5 Oct.2009
以“工学结合”为导向的高职高专药理学课程建设探讨
赵燕芬,胡 苹,郑 恒,陈妙茹,赖文思,闰 莉
(肇庆医学高等专科学校,广东肇庆526020)
【摘要】:针对传统高职高专药学专业的药理学课程教学现状,分析了其存在的主要问题,探讨 了适应药学岗位实际需求的药理学课程定位、培养目标、教材、课程体系及教学内容等问题,提出了
调学科体系,课程分为理论讲授和动物实验两部分,
理论与实验之比为3:1,造成理论知识与实际应用 脱节,学生在药物应用能力上显得比较薄弱,指导患 者合理用药能力明显不足,无法胜任职业岗位要求。 1.3教材内容缺乏针对性和适用性 1.3.1缺乏高职高专特色 国内现有高职高专药 理学教材基本属于“本科压缩型”,教学内容的设置 过于强调知识的系统性,偏向于高深理论知识,存在 重理论、轻实践现象。 1.3.2缺乏药学职业化 现有药理学教材存在药 理学知识的医疗化现象,处方审核、处方分析、用药 指导、常用药物用法、用量等与药学行业岗位用药所
periodical__zgzzzz__zgzz2009__0908pdf__090816

・指南与规范・心血管疾病绝对风险评估循证医学指南李建锋1,栾璟煜2,秦海强2【编者按】 2009年1月,澳大利亚血管疾病预防联盟组织发布了“心血管疾病绝对风险评估循证医学指南”,此指南中的心血管疾病包括了冠心病、卒中和其他血管疾病。
本指南强调了对上述疾病危险因素的综合评估,摒弃以前重视纠正单一危险因素的观点,展现了最新心脑血管疾病研究的最新成果。
我们对该指南的主要观点进行整理,与广大读者分享。
【关键词】心血管疾病;绝对风险评估;循证医学;临床共识作者单位1河北省石家庄市河北医科大学第四医院2首都医科大学附属北京天坛医院神经内科通信作者李建锋lijianfeng88@. cn在澳大利亚,心血管疾病是最主要的致死和致残性疾病。
由于人口老龄化,预计心血管疾病所造成的负担在未来十年内将进一步加重。
心血管疾病由多种危险因素共同导致。
据估计,1/4的澳大利亚人存在3种或3种以上的危险因素,多种危险因素可能有叠加或协同作用,而控制几种危险因素可能会比控制单个危险因素更为有效。
准确的心血管疾病风险评估,既有利于普通人群的预防,也有利于患病人群的临床治疗。
从20世纪90年代中期,心血管疾病预防指南转向关注个体多种危险因素的综合评估(绝对风险评估),而既往则是从相互独立的指南中识别和控制危险因素,1 概要1.1 目的 帮助澳大利亚初级医疗工作者准确地评估心血管疾病风险。
以便实施合理有效的控制心血管疾病措施。
推广心血管疾病绝对风险评估方法,取代相互独立的单个风险因素评估指南。
1.2 指南的适用人群 本指南为普通医疗工作者、其他需对心血管疾病、风险进行评估的医疗人员制定。
也可以为卫生政策制定人员提供心血管疾病如何进行危险评估的证据,做为制定国民健康政策的基础。
1.3 指南范围・如何识别心血管疾病风险增高的成年人,以及通过计算发现有患者风险的人群。
・对以下特殊人群的心血管疾病绝对风险评估提出建议:成年土著居民和托雷斯(Torres)海峡岛屿居民,成年糖尿病患者,成年超重或肥胖者,成年中重度肾病患者。
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・37・・药物与临床・院内甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染及临床应用药物分析李娅娟,时平,刘月芬,郭素,冷雪梅【摘要】回顾性分析国内甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染状况,并从分子结构、药物敏感率、药代动力学以及安全性等药物药理药代学特性各方面比较现有治疗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染的药物,从而分析针对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染用药选择依据,指导临床合理应用治疗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染药物。
【关键词】甲氧西林耐药金黄色葡萄球茵(MRSA);万古霉素;利奈唑胺【中图分类号】R978【文献标识码】A【文章编号】1008—5971(2009)01—0037—02近年全球甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)广泛流行,我国MRSA的发病率也呈明显上升趋势;作为糖肽类代表药物万古霉素仍然是治疗MESA感染的标准药物之一,然而近年来用于治疗严重MRSA感染存在一定的局限性,因此临床需要全新药物以替代糖肽类或作为补充;新上市的全新类别的嗯唑烷酮类药物利奈唑胺具有分子量小、组织穿透率高、敏感率高、安全性好的优势,作为一种全新药物,可以将利奈唑胺作为经验性治疗严重MRSA感染的一线药物。
1MESA感染状况金黄色葡萄球菌是引起感染性疾病的重要致病菌,侵袭性金葡菌感染常可导致患者死亡。
金黄色葡萄球菌(SA)通常寄居在皮肤或鼻腔(25%一30%)。
MRSA感染多发生于医院或医疗机构中,特别常见于老年人和危重患者,MRSA感染主要涉及肺炎、皮肤/皮肤软组织感染、血流感染及骨感染等,MRSA传播几乎总是通过直接或间接与MRSA感染患者接触所致。
20世纪40年代以来,随着青霉素类抗生素的广泛应用,金葡菌通过自身产生的B内酰胺酶而水化青霉素产生耐药。
1959年以后,能够抵抗p内酰胺酶的降解的甲氧西林的问世,金葡菌的耐药性也进一步的发展,不久就产生了MESA。
在美国,MRSA的分离率在1997年比1990年翻了1倍。
2003年,美国重症监护室(ICU)分离到的金葡菌57%对甲氧西林耐药…。
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源足。诸药合用,共奏补益心脾,养心安神之效,使脾 健统血、生血之职得复,心神得养,于是失眠及诸症可
愈。
因失眠是心神病变,故治疗同时应注意帮助患者 消除顾虑和紧张情绪,使患者保持心情舒畅;创造良好 的环境;同时生活要规律,劳逸结合;睡眠前避免激动, 不吸烟、不饮酒、不喝浓茶及咖啡等,如此与归脾汤治 疗相配合,可获事半功倍之效。归脾汤加减治疗失眠, 是通过调整机体脏腑气血功能,从而改善患者睡眠状 况,故停药后无引起药物依赖现象。
清脂饮治疗2型糖尿病合并高血脂
耿丽梅 河北大学卫生职业技术学院(保定071000) 吏建伟 河北医科大学(050011)
张利众
关键词:清脂饮;糖尿病;高血脂;中医药疗法
doi:10.3969/j.issn.1003.8914.2009,02.055 文章编号:1003-8914(2009)-02-0283-02
补肾解毒化瘀法治疗免疫性不育症62例
忽中乾 南阳医专第二附属医院(473000) 摘要:运用补肾解毒化瘀法治疗免疫性不育症62例,并与对照组50例比较,结果:治疗组总有效率95.17%,对照组总有效率 76%,两组疗效比较差异有显著性意义(P<0.05)。提示:本法具有补肾填精、利湿解毒、活血化瘀的作用,作用于人体免疫系统的 不同环节,扶正祛邪,调和阴阳,消除抗精子抗体,使精子数量和活力、活动率明显提高。 关键词:免疫性不育;补肾解毒化瘀法;中医药疗法
1.1研究对象
对在应用日服降糖药控制血糖达标
的情况下,指导饮食及运动疗法,其血脂仍高于正常的 2型糖尿病伴高血脂症患者进行观察。 1.1.1糖尿病诊断标准西医诊断:全部受试者均按 照WHO(1985)糖尿病专家委员建议的糖尿病诊断标 准,并参照美国糖尿病协会(ADA)诊断标准,即空腹血 糖≥7.0mmol/L,葡萄糖负荷后2h≥11.1mmol/L,并伴 有多饮、多食、多尿、乏力等症状,即可诊断为糖尿病。 1.1.2高脂血症诊断 两次血脂测定(间隔2周以 上)符合以下一项或数项标准:血甘油三酯(TG)>
periodical__xxgbxjz__xxgb2009__0905pdf__090538

[17]
Gasparini
[24]
Eldadah
Z.Rosen
with cardiac resynchronization therapy:a 3-year
foUw-up
study from
ventricle-paced
by sLt-dl/l
late
patients
to
vesynchmmzation
canventiona}patients
congestive
failure[J].Pacing
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Thackray
Heart J,2003,24:442-463.
Electrophysi01.2002,25:1166一1171.
S,Witte
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Lau C.Yu
by
synehro-
等容收缩期心肌加速度评价心室收缩功能的研究进展
苗
丽1
综述邓万俊2
审校 山东 文登264400;2.南华大学附属南华医院心内科, 湖南
(1.潍坊医学left'属文登中心医院心内科, 衡阳421002)
Advances in Evaluation of Ventricular Contraction Function Using
Abstract:Myocardial acceleration
during isovohmic contraction f IVA)obtained by tissue Doppler imaging(TDI)is
a
sensitive and
relatively independent index of preload and afterload of ventriettlar contractile function.It correlates well with maximum dp/dt(dp/dtmax l
periodical__xdzxyjhzz__xdzx2009__0902pdf__090286

现代中西医结合杂志ModemJournalofIntegratedTraditionalChineseandWestemMedicine2009Jan,18(2)・227・阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征咽部组织形态学研究进展刘凤芳1。
陈贤明2(1.福建中医学院,福建福州350108;2.南京军区福州总医院,福建福州350025)[关键词】阻塞性睡眠呼吸暂停;软腭;悬雍垂;形态学[中图分类号]R563.8[文献标识码】A[文章编号】1008—8849(2009)02—0227—02阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是指睡眠时上气道塌陷阻塞引起的呼吸暂停和通气不足,伴有打鼾、睡眠结构紊乱,频繁发生血氧饱和度下降、白天嗜睡等病症【1J,是一种常见的具有一定潜在危险的疾病,并可诱发多种疾病,尤其是心、脑血管疾病,严重影响患者的身体健康及生活质量。
据临床统计,全球每天约有3000人的死亡与OSAHS有关[2]。
OSAHS的发病机制尚不明确,已知咽腔形态和咽部肌肉顺应性是产生OSAHS的重要因素,而肌肉过度疲劳、脂肪浸润以及长期低氧导致肌肉代偿性增生肥大、支配肌肉的神经功能障碍等都是影响肌肉顺应性的因素。
现将OSAHS患者咽部组织形态学改变与神经损伤及炎症相关性的研究进展综述如下。
1软腭和悬雍垂的解剖正常人的软腭和悬雍垂组织结构共包含3层:外面的上皮层、下面厚的固有层和中心的肌肉腺体层。
朝向鼻咽部的黏膜由假复层纤毛柱状呼吸上皮覆盖,口腔侧黏膜则为鳞状上皮。
固有层由疏松的结缔组织构成,内含血管和神经,并有浆液黏液腺管穿过。
中心层是由肌肉和浆液黏液腺混合组成的。
Berger等[3]研究发现,轻、中、重度OSAHS患者和正常人的悬雍垂及软腭组织成分以结缔组织为主,腺体、肌肉、脂肪、血管和上皮逐次减少。
在上述几组人群中,最具差异性的是结缔组织,其他成分无显著性的差异。
OSAHS患者最主要的病理变化是悬雍垂血管充血和纤维化,其次为悬雍垂末端的水肿、腺管扩大及炎细胞浸润。
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・12・中国民族民间医药ChineseJournalofEthnomedieineandEthnopharmacy药物研究Themedicinestudy冬虫夏~-—叶;J‘-草的遗传学研究进展雷呈祥张阵阵(海军医学研究所,上海,200433)【摘要】冬虫夏草是传统的名贵中草药,近年来由于需求旺盛导致自然资源枯竭,故其遗传学研究日益引起重视。
已经开展了冬虫夏草的全基因序列分析、基因文库构建、特征DNA区段鉴别和功能基因的克隆与表达研究等,这对冬虫夏草遗传信息的保护、菌株的鉴定和保存、人工培养技术及资源应用等具有重要的指导意义。
【关键词】冬虫夏草;DNA分子标记;基凼组学;活性成分l中图分类号】R282.7【文献标识码】AI文章编号】1007—8517(2009)22—0012—02冬虫夏草菌是真菌,属麦角菌科虫草菌属,又名中华虫草的分离和鉴定。
传统的鉴定方法有多途径多批次分离确定、菌,藏语谓之牙儿札更布,拉丁语为Cordycepssinensis。
作为微循环产孢确认和在特定的人工栽培培养基f:诱发虫草有性青藏高原的特有物种,冬虫夏草主要分布在西藏、青海、四川、子实体来确认等,已报道的从冬虫夏草中分离所得无性型菌云南、甘肃等省区海拔3000m~5000m的高寒地区的草甸、株已达10个属11个种之多。
传统的鉴定方法周期长且不能灌丛、山坡、谷地等高雪线附近。
冬虫夏草和人参、鹿茸一样完伞排除感染其它菌株的可能性,故又发展了DNA分子标记被誉为“中药三大宝”之一。
虽然早在1694年就有了“冬虫(DNAmolecularmarker)技术,该技术可从分子水平上快速、夏草”这个名称,但是我们对冬虫夏草的了解还有待深入。
高效、可靠地鉴定冬虫夏草无性型,且与传统经典分类学相互冬虫夏草菌寄生于鳞翅目蝙蝠科昆虫虫草蝙蝠蛾(Hepi.印证。
alusarmoricanus)幼虫上,或其它种别的蝙蝠科昆虫幼虫上。
1.1DNA分子标记技术DNA分子标记即DNA水平上进在自然界,蝙蝠蛾自产卵到幼虫期感染冬虫夏草菌至转变成行遗传分析的分子标记技术,是以个体间遗传物质内核苷酸真正的冬虫夏草,前后大概需要3年以上的时间。
真菌子座序列变异为基础的遗传标记,它可以反映牛物个体或种群基生长时,渐渐变大呈椭圆形,基部留在土中与幼虫头顶相连,因组的差异。
基本方法是将基因组DNA进行PCR扩增、限幼虫因体内充满菌丝体而死亡,因此冬虫夏草实际上是真菌制性片段长度多态性(RFLP)分析或DNA随机多态型和幼虫尸体的复合体。
(RAPD)分析等技术在凝胶电泳上检测出来。
利用DNA分1DNA分子标记与冬虫夏草鉴定子标记可以进行冬虫夏草与其它虫草间的亲缘关系研究及遗由于受自然条件限制,冬虫夏草资源稀少且过度采挖又传多样性分析,从而鉴定冬虫夏草菌种、确定不同虫草问的遗会严重破坏生态环境,产量有限,满足不了国内外日益增长的传距离等。
需要。
人们于是探索冬虫夏草的人工栽培或发酵技术。
人工DNA分子标记技术的重要靶标是位于核糖体16S一23S栽培虫草面临的首要问题就是冬虫夏草菌种(虫草无性型)rDNA之间的内转录间隔区(InternalTranscribedSequenc,÷・夺・・争・t争-夺・夺・夺・夺・夺・t争・夺-÷・争・弓,・・争・・争・专・夺・・}・・争・・}・夺・夺・・}・夺・夺・÷・・争・・争・夺・・争・.争・・}・夺・÷・专・夺・夺・.{,・夺・.争・÷・夺・夺・夺・夺・-—争・较易见,结节状,棕黄色,基部节较粗,达50~1601xm;顶端圆钝,较细。
⑦丝状短节易见,黑色,半透明,表面光滑,长短不一。
⑧油滴少量,大小不一,直径18~55p.m,浅黄色,单个散在。
见图1。
1.体壁碎片;2.足碎片;3.透明带状物:4.深棕色团块5.棕黄色团块;6.触角碎片;7.丝状短节;B.油滴图1竹虱粉末图3结果与讨论通过生物学考察及对原动物形态的观测,证实了同翅目扁蚜科竹茎扁蚜Pseudoregmabambusicala(Takhashi)的无翅孤雌虫即为《本草纲目》上所记载之竹虱¨卜【4]:密集于竹节间成簇存在,体呈椭圆,长1~4mm,宽1—2mm,形大如虱,被白色蜡粉而旱苍灰色。
通过实验研究,首次观测并描述了竹虱的药材性状特征及显微鉴别特征,为其生药鉴定提供了依据。
在样品采收及调查中发现,竹虱作为竹类常见害虫之一,其有分布广,数量大的特点,如果能将竹虱开发成治疗哮喘的新药,变废为宝,将产生绝大的社会和经济效益。
参考文献[1]李时珍.本草纲目[M].中医古籍出版社,1994:1406.[2]陈存仁.中国药学大词典[M].世界书局,1979:524.[3]于炜,曾新宇,徐芸茜,等.竹茎扁蚜生物学特性与防治[J].湖北植保,2006,5.(收稿日期:2009.08.15)万方数据药物研究Themedicinestudy中国民族民间医药ChineseJournalofEthnomedicineandEthnopharmaey・13・ITS)。
核糖体RNA(rRNA)是细胞中最古老的分子之一,编码rRNA前体的基因即rDNA.是基因组DNA中中等重复并有转录活性的基因家族。
ITS包括进化f:高度保守的5.8SrDNA和包含有rDNA前体加工信息的两个间隔区ITS一1,ITS一2。
在rDNA多基因家族成员中,ITS区是多拷贝,以串连重复方式出现在一个或多个染色体|:;而且ITS区两侧有高度保守序列存在,可以作为冬虫夏草遗传分析的主要靶标。
I.2冬虫夏草菌种鉴定到底哪类菌藻类是真正的冬虫夏草。
一直是有争议的。
赵锦等采用特异引物扩增冬虫夏草(有性阶段)、中国被毛孢(无性阶段)、中国拟青霉(无性阶段)、古尼拟青霉(无性阶段)ITSl区的伞部序列和5.8SrD-NA的部分序列。
经PCgene和Phylip软件分析计算不同种间的遗传距离序数,得出冬虫夏草与中国被毛孢的序列相似性为97.8%,与中国拟青霉、古尼拟青霉的种间相似性分别为72.6%和72.99%,这一结果从分子水平证明了中国被毛孢是冬虫夏草的无性型。
李增智等以RAPD为分子指标,研究冬虫夏草和中国被毛孢的DNA,发现其相似率为96%,也提示中国被毛孢是冬虫夏草的无性型。
事实上,冬虫夏草的有性型和无性型是冬虫夏草发育过程中的不同阶段,它们的DNA是一致的,形态不同只是由于mRNA不同时期的表达不同所致。
通过DNA分子标记技术,可以快速、准确地确证冬虫夏草的无性型。
基因分析和比较也发现,青藏高原上各地产的冬虫夏草基因序列差别约为2%,冬虫夏草与中国被毛孢基因序列差别亦约2%,有趣的是冬虫夏草与虫草属其他虫草基因序列差别>20%,这与前述是一致的。
基因序列差别>20%的两个生物物种相差有多远?用“相差十万八千里”形容并不过分。
比如说,人与狗基因序列差别约为4%,而人与老鼠基因序列差别也只有约10%。
1.3遗传学差异RAPD可以揭示野牛虫草群体遗传结构的差异,也能从分子水平上提供一些虫草的分类、起源及进化方面的依据。
张云武等应用RAPD技术对滇西北地区冬虫夏革、阔孢虫草和蛹虫草的遗传分化研究。
根据18个随机引物获得的RAPD谱带进行的遗传距离分析表明,冬虫夏草与阔孢虫草和蛹虫草之间存在显著的遗传差异,云南虫草的不同地理群体间也存在着遗传分化。
陈永久等对来自青藏高原三个区域的13个冬虫夏草样本进行了RAPD分析,发现受试的13个冬虫夏草样本中,来自同一地方的样本问遗传差异甚微,同一区域不同地方的样本问遗传差异较大,不同区域样本间的遗传差异最大。
1.4菌种的退化人工栽培虫革的另一个重要难题是菌种的退化。
一般来说选育的菌种通常在使用半年到一年左右就有退化现象发牛。
实际上,菌种退化是一个普遍性问题。
李美娜等曾利用PCR、RFLP和RAPD方法对野生驯化北东冲夏草(蛹虫草)及其退化菌种进行了基因水平的分析。
PCR、RFLP实验对两个菌种ITS分析发现共有13个位点发生碱基突变,且都为C转换为T。
RAPD实验也表明所有供试个体均存在明显差异的引物。
结果提示退化菌株较野牛驯化菌株在DNA水平上发生了频率较高的突变。
2基因组学有报道说已对冬虫夏草进行了全基因测定,但尚未见到正式公开的全序列。
我国部分科学家通过对冬虫夏草遗传物质DNA进行测序,共获得100多条相关的特异DNA序列,并建立起冬虫夏草DNA数据库和分子鉴定体系。
cDNA文库是生物体表达基因信息的一个集合体,是获取未知功能基因的一种重要文库,是系统研究一种生物的基因结构和功能的基础。
考虑到冬虫夏草是寄牛的复合体,刘燕南等分别构建了’冬虫夏草真菌子座部分及所寄生虫体部分的cDNA文库。
其中冬虫夏草虫体部分的cDNA文库含有1.28×106重组子、子座部分的cDNA文库含有1.0×106重组子,插入片断长度均在O.5kb~2kb之间。
eDNA的构建可以通过现代基因组学的方法保存冬虫夏草的生物学信息,进而研究其有效组份并对其功能基因进行分析。
3活性成分与相关基因冬虫夏草是我国传统名贵中药,多年来对其化学成分及药理作用研究甚多,但其作为中药应用的确切生物活性成分及相关的毒理、药理作用原理和分子生物学作用机制仍不清楚。
目前已有多个活性物质的相关基因获得克隆及特征分析。
虫草素(3’一脱氧腺苷)是冬虫夏草和蛹虫草(又名北冬虫夏草)的重要活性成分之一,据国内外相关文献披露,具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤及降m脂等功效。
不过虫草素在天然冬虫夏草中含量极低,通过人工技术培育高产虫草素菌株也是一个很好的思路。
中炬高新技术实业(集团)股份曾开展《冬虫夏草功能基因应用开发的研究》项目。
通过人工诱变筛选,运用基因工程技术,培育出高产虫草素的菌株,虫草素含量高出普通虫草13倍。
并从该菌株中克隆到7个虫草素生物合成相关基因。
冬虫夏草还具有较强的抗氧化能力,这可能与超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)有关。
SOD是牛物体内抗氧化的重要酶类,存在于粒线体和细胞质中,在真核生物中多与铜cu和锌zn离子结合,它可清除或减少超氧自由基。
因此,SOD具有调节牛理机能、青春永驻、养颜美容等延长人体寿命的功能。
利用分子生物学技术从北冬虫夏草(蛹虫草)中首次克隆到活性成分SOD的基因。
Zhang等从冬虫夏草中也克隆了2个糜蛋白酶样丝氨酸蛋白酶Cspl和csp2的基因。
Cspl和Csp2属同一蛋白酶家族,在cDNA和氨基酸水平上的差异分别是72.9%和68.9%。
这两种酶均可降解蝙蝠科昆虫幼虫表皮蛋白。
4结语由于近年来人为的过度采挖,作为我国特有的中药材冬虫夏草的前景堪忧,应加大对冬虫夏草的保护,一方面限制采挖或禁采,另一方面应加强冬虫夏草的遗传学研究,构建冬虫夏草的遗传图谱、cDNA库并进行全序列测定,大力开展人工栽培或发酵技术,对部分特异活性成分应用基因工程技术进行扩大牛产。