放线菌的形态结构
放 线 菌 (4)
营养菌丝匍匐生长于 培养基内，吸收营养
营养菌丝发育到一定阶段， 伸向空间形成气生菌丝
放线菌 孢子
放线菌 孢子
（二）形成孢子的方式
1. 横隔分裂形成横隔孢子 2. 产生孢子囊 链孢囊菌属(Streptosporangium)和游动放线菌属 (Actinoplanes)等少数类群的放线菌 。
图1-33 粉红链孢囊菌(S.roseum)孢子囊形成过程
已知链霉菌属有1 000多个种。据统计链霉 菌属产生的抗生素占放线菌目的90%以上，
如灰色链霉菌(S.griseus)产生链霉素， 龟裂链霉菌(S.rimosus)产生土霉素， 红霉素链霉菌(S.erythreus)产生红霉素等。 抗肿瘤的丝裂霉素(自力霉素)、 抗真菌的制霉菌素、 抗结核的卡那霉素等是链霉菌的次级代谢产物
⑩凡细菌所敏感的抗生素，放线菌也同样敏感。
分布与生活习性
放线菌常以孢子或菌丝状态极其广泛地存在 于自然界，土壤中最多，其代谢产物使土壤 具有特殊的泥腥味。
多数为腐生菌，少数为寄生菌。多数为好氧菌， 少数为厌氧菌。
放线菌与人类的关系
能产生大量的、种类繁多的抗生素（其中90%由链霉菌产生） 有的放线菌可用于生产维生素、酶制制；此外，在甾体转化、 石油脱蜡、烃类发酵、污水处理等方面也有应用 少数寄生型放线菌可引起人、动物（如皮肤、脑、肺和脚部感染）、 植物（如马铃薯和甜菜的疮痂病）的疾病。
（三） 其他放线菌所特有的形态结构 1.基内菌丝会断裂成大量杆状菌的放线菌 2. 菌丝顶端形成少量孢子的放线菌 3. 具有孢囊并产生孢囊孢子的放线菌 4.具有孢囊并产生游动孢子的放线菌
二. 放线菌的繁殖方式
放线菌也可借菌丝断裂片段形成新的菌体。常
见于液体培养及液体发酵生产中。
微生物实验放线菌的形态观察
实验一：丝状微生物的鉴定实验目的：1、观察常见放线菌的基本形态特征。
2、观察镰刀菌与木霉的基本形态。
3、掌握埋片培养法培养放线菌。
4、掌握载片培养法培养丝状真菌。
5、学会用显微镜观察未染色样品。
实验原理：放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
真菌的菌丝较放线菌粗，菌落疏松，主要用肉眼观察，必要时借助放大镜或显微镜。
利用显微镜主要观察孢子的着生状态，孢子形状及菌丝有无横隔等。
3材料3.1菌种链霉菌（Streptomyces sp.）；诺卡氏菌（Nocardia sp.）；尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)；绿色木霉（Trichoderma viride）3.2培养基高氏1号培养基，PDA培养基。
3.3器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4流程4.1埋片培养法: 倒琼脂→切槽→接种→埋片→培养→镜检→记录绘图。
4.2载片培养法：滴琼脂→凝固→边缘接种→盖盖玻片→培养→镜检→记录绘图。
5步骤埋片培养法：1 向每个培养皿倒约20毫升高氏一号琼脂培养基，待凝固。
2 用无菌手术刀在琼脂平板上平行开两条槽，取出其中的琼脂培养基。
3 在槽的外侧边缘接种待鉴定的放线菌菌株。
4 将无菌载玻片呈与槽垂直的方向盖在平板上面，用镊子轻轻压下，使载玻片与琼脂平板接触。
5 放于28℃培养3天。
6 将载玻片从平板上取下，直接在显微镜下观察。
载片培养法：1 将无菌载玻片放于洁净工作台。
放线菌的形态观察
实验四放线菌的形态观察一、目的要求1. 学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。
2. 了解放线菌的形态特征和繁殖方式。
二、基本原理放线菌是由纤细的有分枝的菌丝构成，菌丝体为单细胞原核微生物。
大多数放线菌的菌丝分化为营养菌丝和气生菌丝两部分。
营养菌丝深入培养基中生长，气生菌丝则生长在培养基的表面，并向空中伸展。
因此用普通方法制片，往往很难观察到放线菌的整体形态。
必须采用适当的培养方法，以便将自然生长的放线菌直接置于显微镜下观察。
通常采用的方法有玻璃纸培养法、插片法和印片法。
三、材料及器材1. 菌种：细黄链霉菌(5406放线菌)2. 溶液和试剂：吕氏美蓝染液3. 仪器及其他用具：盖玻片，载玻片，擦镜纸，接种环，显微镜，剪刀，镊子，吸管，玻璃涂布棒，玻璃纸等。
四、方法与步骤（一）插片法1. 取一淀粉琼脂培养基平板，用接种环将菌种在琼脂平板上划线接种，然后用无菌镊子将灭菌的盖玻片以大约45°角插人琼脂内(插在接种线上，插片数量可根据需要而定。
2. 倒置培养，28℃，3～5天。
3. 用镊子小心取出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝上放在载玻片上，直接镜检。
（二）玻璃纸法1. 以无菌操作用镊子将已灭菌的小块玻璃纸片铺在琼脂淀粉培养基表面，用无菌涂布棒将玻璃纸压平，使其紧贴在琼脂表面，不留气泡，每个平板可铺5～10块玻璃纸。
2. 用接种环挑取菌种斜面培养物在玻璃纸上划线接种。
3. 平板倒置，28℃，培养3～5天。
4. 镜检在载玻片上加一小滴水，用镊子小心取下玻璃纸片，菌面朝上放在玻片的水滴上，使玻璃纸平贴在玻片上，中间不要有气泡，直接镜检。
（三）印片法用一洁净盖玻片，平放在培养皿中放线菌的培养物上，轻轻按压一下，取出盖玻片，将印有放线菌的一面朝下，放置在加有一滴美蓝染液的载玻片上，观察孢子丝和孢子。
五、实验作业及实验报告（一）结果绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态特征。
（二）思考题1. 试比较3种培养和观察放线菌方法的优缺点。
知识点1细菌
放线菌1. 内容放线菌是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物。
一、放线菌的形态结构细胞呈丝状分枝，在营养生长阶段，菌丝内无隔，为多核单细胞。
菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝。
二、放线菌的繁殖方式可借孢子或以菌丝断裂的方式繁殖。
三、放线菌的菌落特征在固体培养基上形成菌落，小型、干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状，上有一薄层彩色“干粉”；菌落与培养基的连接紧密，难挑取；菌落正反面的颜色往往不一致，菌落边缘的琼脂平面有变形。
2. 练习一、选择题放线菌的菌体呈分枝丝状体，因此它是一种：（）A、多细胞的真核微生物B、单细胞真核微生物C、多核的原核微生物D、无壁的原核微生物答案：C2. 在下列原核生物分类中，属古细菌类的细菌是：（）A、大肠杆菌B、枝原体C、放线菌D、产甲烷细菌答案：D3. 细菌的鞭毛是：（）A、细菌运动的唯一器官B、细菌的一种运动器官C、细菌的一种交配器官D、细菌的繁殖器官答案：B二、填空题1. 放线菌个体为_____体，根据菌丝在固体培养基上生长的情况，可以分为_______，______和__________。
答案：分枝丝状；基内菌丝；气生菌丝；孢子丝2. 放线菌的菌体形态呈_____，革兰氏染色呈_____，________运动，为____营养型微生物。
答案：分枝的丝状体；阳性；不能；化能有机3. 抗生素的产生菌主要是_____菌类，其中50%以上是由______菌属微生物产生的。
答案：放线；链霉4. 放线菌菌落形状一般为_______，表面呈___________、而霉菌菌落表面常呈________，霉菌菌落如呈粉末状者____放线菌细腻致密。
答案：圆形；干燥细致的粉末状或茸毛状；绒毛状或棉絮状；不及5. 放线菌对国民经济的重要性，在于它们是__________的主要产生菌，许多临床和生产上有使用价值的抗生素如________、________、________、________等等都由放线菌产生。
放线菌的形态与结构
放线菌的形态与结构放线菌的形态与结构放线菌菌体为单细胞，大多由分枝发达的菌丝构成，*简单的为杆状或具原始菌丝。
菌丝直径与杆状**差不多，大约1微米。
细胞壁化学构成中亦含原核生物所特有的胞壁酸和二氨基庚二酸，不含几丁质或纤维素。
革兰氏染色阳性反应，极少阴性。
有很多放线菌对抗酸性染色亦吴阳性反应，像诺卡氏放线菌。
它与结核杆菌相比，假如脱色时间太长也可成为阴性，这是诺卡氏菌与结核杆菌的区分之一、放线菌菌丝细胞的结构与**基本相同。
依据菌丝形态和功能可分为营养菌丝、气生丝和孢子丝三种。
1. 营养菌丝又叫初级丝体或**菌丝体，匍匐生长于培育基内，重要生理功能是汲取营养物，故亦称基内菌丝。
营养菌丝一般无隔膜，即使有也特别少；直径0.2—0.8微米，但长度差别很大，短的小于100微米，长的可达600微米以上；有的无色素，有的产生黄、橙、红、紫、蓝、绿、褐、黑等不同色素，若是水溶性的色素，还可透入培育基内，将培育基染上相应的颜色，假如是非水溶性（或脂溶性）色素，则使菌落吨呈现相应的颜色。
因此，色素是鉴定菌种的紧要依据。
2. 气生菌丝又称二级菌丝体。
营养菌丝体发育到肯定时期，长出培育基外并伸向空间的菌丝为气生菌丝。
它叠生于营养菌丝上，以至可覆盖整个菌落表面。
在光学显微镜下，颜色较深，直径比营养菌丝粗，约1—1.4微米，其长度则更悬殊。
直形或弯曲而分枝，有的产生色素。
3. 孢子丝当气生菌丝体发育到肯定程度，其上分化出可形成孢子的菌丝即孢子丝，又名产孢丝或繁殖菌丝。
孢子丝的形状和在气生菌丝上的排列方式，随菌种而异。
孢子丝的形状有直形、波曲和螺旋形之分。
螺旋状孢子丝的螺旋结构与长度均很稳定，螺旋数目、疏密程度、旋转方向等都是种的特征。
螺旋数目通常为5—10转，也有少至1个多至20个的；旋转方向多为逆时针，少数种是顺时针的。
孢子丝的排列方式，有的交替着生，有的丛生或轮生。
孢子丝从一点分出3个以上的孢子枝者，叫做轮生枝。
它有**轮生和二级轮生。
放线菌
放线菌
（一）概念
放线菌是具有菌丝、以孢子进行繁殖、革兰氏染色阳性的一类原核微生物，属于真细菌范畴。
放线菌实际上是属于细菌范畴内的原核微生物，只不过其细胞形态为分枝状菌丝。
（二）形态与结构
单细胞，大多由分枝发达的菌丝组成；
菌丝直径与杆菌类似，约1mm；
细胞壁组成与细菌类似，革兰氏染色阳性（少数阴性）；
细胞的结构与细菌基本相同，
按形态和功能可分为营养、气生和孢子丝三种。
营养菌丝匍匐生长于培养基内，吸收营养
营养菌丝发育到一定阶段，伸向空间形成气生菌丝
气生菌丝发育到一定阶段，其上可分化出形成孢子的菌丝，即孢子丝
（三）生长与繁殖
繁殖方式
（1）无性孢子：凝聚孢子横隔孢子孢囊孢子分生孢子后壁孢子
（2）菌丝断裂：常见于液体培养中，工业发酵生产抗生素时都以此法大量繁殖放线菌
放线菌主要是通过横割分裂形成无性孢子的方式进行繁殖，在液体培养中放线菌也借菌丝断裂的片段形成新的菌体
横割断裂通常有两种方式：
（1）孢子丝的细胞膜内陷，由外向内逐渐收缩形成完整的横割膜，分割成许多分生孢子（2）孢子丝的细胞壁和细胞膜同时内陷，向内一所，使孢子丝溢裂成一串分生孢子
（四）菌落形态
（五）分布特点及与人类的关系
放线菌常以孢子或菌丝状态极其广泛地存在于自然界，土壤中最多，其代谢产物使土壤具有特殊的泥腥味。
能产生大量的、种类繁多的抗生素（其中90%由链霉菌产生）
有的放线菌可用于生产维生素、酶制制；此外，在甾体转化、石油脱蜡、烃类发酵、污水处理等方面也有应用
少数寄生型放线菌可引起人、动物（如皮肤、脑、肺和脚部感染）、植物（如马铃薯和甜菜的疮痂病）的疾病。
第二节 放线菌
0.2-0.25
立克次氏体
0.2-0.5
衣 原 体
0.2-0.3
病
毒
直径( μ m)
0.5-0.2
＜0.25
可见性 过滤性
革兰氏染色 细胞壁 繁殖方式 培养方法 核酸种类 核糖体 产生 ATP 系统
光学显微镜 不能过滤
阳性或阴性 有坚韧的细胞壁 二均分裂 人工培养基 DNA 和 RNA 有 有
生的一类原核生物。
过去误认为“大病毒”，但它们的生物学特性更接近细菌而不同 于病毒。
在宿主细胞内观察到的 衣原体微菌落（microcolony）
2、特性
1）细胞结构与细菌类似；
具有类似的细胞壁，细胞壁内也含有胞壁酸、二氨基庚二酸； 2）细胞呈球形或椭圆形，能通过细菌滤器； 70S核糖体也是由30S和50S二个亚基组成。 3）专性活细胞内寄生；
Cncnc-micro
放线菌孢子丝形态
二、繁殖：（无性）
放线菌的繁殖
无性孢子（主要）
菌丝片段
分生孢子 分生孢子
孢囊孢子 孢囊孢子
横隔分裂
孢子 形态
1、分生孢子
细菌的芽孢是休眠体，而放线菌的孢子是繁殖体
放 线 菌 孢 子
横隔分裂方式形成孢子
2. 孢囊孢子(sporangiospore) 有的放线菌由菌丝盘卷形成孢囊，其间产 生横隔，产生孢子。孢囊成熟后，释放出孢囊 孢子。孢囊可以在气生菌丝上，也可在基内菌 丝上形成。
衣原体有一定的代谢活性，能进行有限的大分子合成，但缺 4）在宿主细胞内生长繁殖具有独特的生活周期，即存在原体和 乏产生能量的系统，必须依赖宿主获得ATP，因此又被称为 始体两种形态。 “能量寄生型生物”。
2.2 放线菌
放线菌属，丝状菌落 （ × 18000）
小 单 孢 菌 属
2.3 蓝细菌（蓝藻，蓝绿藻）
• 是一类含有叶绿素a、具有放氧性光合作 用的原核生物。过去也称为蓝藻或蓝绿藻。 • 蓝细菌与藻类的最大区别：无叶绿体、无 真核、有70S核糖体，细胞壁中含有肽聚 糖，对青霉素和溶菌酶敏感等。
2.3.1 蓝细菌
菌落质地硬而且致密，菌落小而不广泛延伸。 菌落表面呈紧密的绒状或坚实、干燥多皱。
接种针难以挑取，有时可挑碎，有时可将整 个菌落挑起。 基内菌丝和孢子常有 颜色，使得菌落的正 反面颜色常不一致。
放线菌的菌落特征
A：诺尔斯氏链霉菌 B：皮疽诺卡氏菌 C：酒红指孢囊菌 D：游动放线菌 E：小单胞菌 F：皱双孢马杜拉放线菌
肺炎支原体
本章小结
原核生物的共同特征是细胞细小，核的结构原 始，无核膜包裹，细胞壁含独特的肽聚糖，细 胞内无细胞器分化，无有丝分裂。 通过革兰氏染色可把所有原核生物区分为G+和 G-两大类，并能揭示其在结构、生理、遗传、 生态等特性上的不同，故此染色法具有重要的 理论和实践意义。 原核细胞的共同结构有细胞壁（支原体例外）、 细胞质膜、细胞质、核区和各种内含物等，部 分种类的细胞壁外还有荚膜、鞭毛、菌毛和芽 孢等特殊构造。芽孢高度耐热，在理论与实践 上均很重要。
（3）可有效去除氮、磷，可作水体富营养化的指示生物。
（4）有的蓝细菌是污染水体中发生“赤潮”及“水华”的原凶
蓝细菌造成无锡太湖水华
2.4 古细菌
古生菌是一群具有独特的基因结构或系统发育 生物大分子序列的单细胞原核生物；
多生活在地球上极端的生境或生命出现初期的 自然环境中，营自养和异养生活；
具有特殊的生理功能，如在超高温、高酸碱度、 高盐及无氧状态下生活； 具有独特的细胞结构，如细胞壁骨架为蛋白质 或假胞壁酸，细胞膜含甘油醚键；以及代谢中的 酶作用方式既不同于细菌又不同于真核生物。
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干燥、小能、产密生大量分枝和气生菌丝的菌种
（如链霉菌）
菌落表面颜菌色落为质孢地致子密丝,与颜培色养基+结孢合子紧的密,颜色
菌落形态
小而不蔓延,不易挑起或挑起后不
菌丝细，直易径破同碎细. 菌类似
菌丝密
不能产生大量菌丝体的菌种
菌落边缘下陷，难以（挑如诺起卡。氏菌）
粘着力差,粉质,针挑起易粉碎
生
繁殖菌丝
活 (孢子丝)
史
孢子丝释放孢子
孢子在适宜的条件 下萌发,长出1-3 个芽管 气生菌丝
营养菌丝
繁殖方式
借孢子 借菌丝
分生孢子：最常见链霉菌属
无鞭毛：孢囊链霉菌属
孢囊孢子 有鞭毛：游动放线菌属
基内菌丝断裂：诺卡氏菌属
任何菌丝断裂：各种放线菌
细菌的芽孢是休眠体,而放线菌的孢子是繁殖体
四、菌落形态与特征
菌落特征
在固菌体的培菌养基落上特：征基内菌丝与培养基结合紧密，接种
ABC：：：针 生 多 状卡 弗 吸不长皱或特氏水易后的颗利链链挑期表粒起表面状链霉霉；面，的霉菌菌菌形上典菌 ；金落成面型；泪周紧常菌亚缘密有落有的一，辐绒层菌射毛色落的状彩的菌或鲜正ABC丝坚艳反：：：，实的面酒皮诺称、干颜红疽尔为干粉色辐燥；往指诺斯射、可往孢卡氏状不形不囊氏链菌透成一菌菌霉丝明絮致；；菌；、，；
孢囊链霉菌属在气生菌丝上形成孢囊，产生不能游动的 孢囊孢子；
游动放线菌属在基内菌丝上形成孢囊，产生有鞭毛的孢 囊孢子。
放线菌的基内菌丝气生菌丝
ShenYang Normal University
营养菌丝匍匐 生长于培养基 内,吸收营养
营养菌丝发育到一定阶段, 伸向空间形成气生菌丝
三、放线菌的生长与繁殖
能产生大量的、种类繁多的抗生素(其 中90%由链霉菌产生）
有的放线菌可用于生产维生素、酶制制; 此外，在甾体转化、石油脱蜡、烃类发酵、 污水处理等方面也有应用
少数寄生型放线菌可引起人、动物(如 皮肤、脑、肺和脚部感染),植物(如马铃薯 和甜菜的疮痂病）的疾病。
放线菌与细菌的比较
2.其他放线菌所特有的形态 构造
（1）诺卡氏菌属：具分枝状、发达的营养菌丝，多数无气 生菌丝。当营养菌丝成熟后，以横隔分裂方式突然产生形状、 大小较一致 杆菌状、球菌状或分枝杆菌状的分生孢子。 （2）菌丝顶端形成少量孢的放线菌：小单孢菌属无气生菌 丝，由分枝的基内菌丝顶端产生一个孢子。小双孢菌属和小 四孢菌属放线菌在基内菌丝上不形成孢，而在气生菌丝顶端 分别形成2个和4个孢子。 （3）产孢囊孢子的放线菌
放线菌定义
放线菌是具有菌丝、以孢子进行繁 殖、革兰氏染色阳性的一类原核微生物, 属于真细菌范畴。
放线菌一般分布在有机物丰富和呈微 碱性的土壤中。 孢子数：107个／g左右。
一、放线菌近于细菌的特征 ① 原核，核糖体同为70S；
② 菌丝直径与细菌相仿，直径0.2-0.8μm，长达600μm左右； ③ 细胞壁的主要成分是肽聚糖，对溶菌酶敏感； ④ 有的放线菌产生有鞭毛的孢子，其鞭毛类型与细菌的相同； ⑤ 放线菌噬菌体的形状与细菌的相似； ⑥ 最适生长pH与多数细菌的生长pH相近，一般呈微碱性； ⑦ 凡细菌所敏感的抗生素，放线菌也同样敏感； ⑧ DNA重组的方式与细菌的相同。
二、放线菌的形态结构
1. 典型放线菌----链霉菌形态构造
放线菌根据菌丝形态和功能分为三类
1.基内菌丝:又称营养菌丝或初级菌丝体，匍匐生长在培养基内或培养基 表面。其主要功能为吸收营养物质和排泄代谢废物，一般无横隔膜(诺 卡氏菌属除外)。直径0.2—1.2μm，但长度差别很大，短的小于100μm， 长的可达600μm以上。无色或产生水溶性或脂溶性色素而呈现黄、绿、 橙、红、紫、蓝、褐和黑等各种颜色。 2.气生菌丝：又称二级菌丝体，基内菌丝发育到—定阶段后，向空间长出 的菌丝体。一般颜色较深，比基内菌丝粗（直径为1-1.4μm）。气生菌 丝长度差别悬殊，直形或弯曲，有分枝。 3.孢子丝：又称繁殖菌丝或产孢丝，当气生菌丝生长发育到一定阶段，气 生菌丝上分化出可形成孢子的菌丝。孢子丝的形状及在气生菌丝上排列 的方式随种而异；有的直形，有的波浪形或螺旋形。螺旋的数目、疏密 程度、旋转方向等都是种的特征。
种；菌落边缘培养基的平面有变形现象D；：有游特动殊气放味线（菌土；霉
D：气卡味那）霉等。素链霉菌；
E：小单胞菌；
EF：：在除 生液磺虫体酸链培链霉养霉菌基菌；上：集结成团，有些线F：沿菌试皱管双壁孢生马长杜形成拉放
菌膜，也有沉淀，无混浊。
五、放线菌的分布及与人类的关系
放线菌常以孢子或菌丝状态极其广泛地 存在于自然界,土壤中最多,其代谢产物使土 壤具有特殊的泥腥味。