微生物的分类鉴定
微生物分类鉴定方法
微生物分类鉴定方法
微生物分类鉴定方法是指利用生物学和化学原理,对微生物进行分类和鉴定的方法。
随着微生物学的不断发展,微生物分类鉴定方法也在不断更新和完善。
下面将介绍几种常见的微生物分类鉴定方法。
1. 双盲分离法
双盲分离法是指将待分类的微生物样本随机分成两组,一组用于实验,一组用于对照。
实验组和对照组分别使用不同的培养基进行培养,然后通过分离技术将两种培养基中的微生物进行分离。
通过双盲分离法可以消除实验者的主观因素,提高分类的准确性。
2. 形态学鉴定法
形态学鉴定法是指通过观察微生物的形态结构,对其分类进行鉴定的方法。
常见的形态学鉴定方法包括细胞壁结构、细胞骨架、鞭毛、伪足等特征。
通过比较不同微生物的形态结构,可以初步确定其分类方向。
3. 基因组学鉴定法
基因组学鉴定法是指通过分析微生物的基因组序列,对其分类进行鉴定的方法。
基因组学鉴定法可以通过比对微生物基因组序列,确定其属于同一类微生物的不同亚种。
该方法对于复杂微生物的鉴定和分析非常有用。
4. 代谢谱鉴定法
代谢谱鉴定法是指通过分析微生物代谢物的结构、组成和功能,对其分类进行鉴定的方法。
代谢谱鉴定法可以确定微生物的代谢途径和代谢物,从而确定其分类方向。
除了上述方法外,还有其他许多微生物分类鉴定方法,如免疫学鉴定法、荧光
法、PCR法等。
不同的分类方法有不同的优缺点,选择合适的分类方法,可以有效提高微生物分类鉴定的精度和效率。
章十 微生物的分类和鉴定
亚种以下的分类单元
亚种（subspeciers）：种的进一步细分，一般指其某 一民而稳定的特征与模式中不同的种常在种名、署名 的加词后写上subsp.然后再写具体亚种的加词； 变种（ variety）：容易引起混乱； 型 form：使用中用型作为后缀；表示细菌菌株，现已 作废； 类群（group）：没有分类地位非正式地指定一组具有 某些共同性状的生物； 菌株（strain）：表示任何由一个独立分离的单细胞繁 殖而成的纯种群体极其一切后代；实际上是一个微生 物达到遗传性纯的标志。 小种（race）：涵义较乱，在不同分支学科中由不同 涵义； 相（phase）：自然界存在的微生物交互变异的一定阶 段； 态（state）：通常指微生物的菌落变异状态。
《伯杰氏系统细菌学手册》
1st ed, 1984-1989, 分为4卷；是在《伯杰氏鉴定细菌 手册》 8th ed 的基础之上增加了大量的分子生物学资料。 但由于当时细菌系统发育的资料仍较零碎，所以有相当一 部分类群未能科目级别分类，从实际需要出发，主要根据 表型特征将整个原核生物分为33组，33个组的划分见表。 国际上最为流行的版本。微生物分类技术和学术理论的发 展促进了生物科学的进步。 2ed ed, 2000开始出版，分为5卷，提出完整的系统分类， 将原核生物分为：古细菌界（2门、5组、8纲、11目、17科、 63属、208种）；细菌界：（16门、26组、27纲、62目、 163科、814属、4727种）；反映了人们对生物系统发育的 深刻认识。
微生物分类鉴定
第三节微生物的分类鉴定方法一、微生物鉴定的依据获得纯化的微生物分离菌株后，首先判定是原核微生物还是真核微生物,这实际上在分离过程中所使用的方法和选择性培养基已经决定了分离菌株的大类的归属，从平板菌落的特征和液体培养的性状都可加以判定.然后，如是原核微生物，便可根据表14—3 所示的经典分类鉴定指标进行鉴定，如条件允许,可做碳源利用的BIOLOG-GN 分析和16S rDNA 序列分析。
多项结果结合起来确定分离菌株的属和种。
表14—3 微生物经典分类鉴定方法的指标依据二、微生物鉴定的技术与方法根据目前微生物分类学中使用的技术和方法，可把它们分成四个不同的水平：①细胞形态和行为水平,②细胞组分水平，③蛋白质水平，④基因组水平；在微生物分类学发展的早期,主要的分类鉴定指标是以在细胞形态和习性为主，可称为经典的分类鉴定法。
其他三种实验技术主要是60 年代以后采用的，称为化学分类和遗传学分类法，这些方法再加上数值分类鉴定法，可称为现代的分类鉴定方法。
（一）、经典分类鉴定法经典分类法是一百多年来进行微生物分类的传统方法.其特点是人为地选择几种形态生理生化特征进行分类,并在分类中将表型特征分为主、次。
一般在科以上分类单位以形态特征、科以下分类单位以形态结合生理生化特征加以区分。
最后,采用双歧法整理实验结果，排列一个个的分类单元，形成双歧检索表（图14—4 ）。
A。
能在60 o C 以上生长B。
细胞大，宽度1.3～1.8mm ……………………………………… 1。
热微菌属（Thermomicrobium )BB。
细胞小，宽度0。
4～0。
8mmC. 能以葡萄糖为碳源生长D。
能在pH4.5 生长…………………………………………… 2. 热酸菌属（Acidothermus )DD. 不能在pH4.5 生长………………………………………………… 3。
栖热菌属（Thermus ）CC. 不能以葡萄糖为唯一碳源……………………… 4. 栖热嗜油菌属（栖热嗜狮菌属Thermoleophilum )AA。
微生物的分类与鉴定
第3页/共38页
●菌种保藏中心与菌种目录
ATCC：美国典型菌种保藏中心 CCTCC：中国典型菌种保藏中心： ---下设：CCGMC、ACCC、CICC、
CMCC等6个中心 ---菌种目录及菌种保藏和购买
第4页/共38页
二、学名的命名及有关法规
程序： 1、辅助特征 2、培养菌悬液加入生化反应板培养自动扫描
自动鉴定打印结果 第20页/共38页
第21页/共38页
二、现代分类鉴定方法
●
细 菌 化 石
第22页/共38页
二、现代分类鉴定方法
1．微生物遗传型的鉴定
（1）DNA碱基比例的测定 （G+C）mol%：
●(G+C)mol%值只能做否定判断； ●（G+C）mol%值差别>5，属不同的种；
第37页/共38页
感谢您的观看。
第38页/共38页
第33页/共38页
---- 列出相似度矩阵
第34页/共38页
---- 将矩阵图转换成树状谱
第35页/共38页
结果分析：
1. S （相似值）≥85% 2. S （相似值）≥65% 3. S （相似值）≤65%
（同种） （同属） （亲缘关系较远）
第36页/共38页
●数值分类法与传统分类法的比较
。
●双名法：Bacillus subtilis ●三名法：
Acetobacter pasteurianus subsp. pasteurianus
●名字的应用： Bacillus subtilis CMCC 63501 Bacillus subtilis Cohn 1874 Bacillus sp. Bacillus spp.
微生物的分类与鉴定
高通量鉴定技术的展望
01 基因测序技术
高通量测序技术能够快速获取微生物全基因组信 息，为微生物分类与鉴定提供了新的手段。
02 自动化鉴定系统
开发自动化鉴定系统，能够快速、准确地鉴定大 量微生物样本，提高鉴定效率。
03 标准化与数据库建设
建立标准化的微生物分类与鉴定数据库，为高通 量鉴定技术的广泛应用提供支持。
THANKS
感谢观看
微生物的分类与鉴定
汇报人：
202X-12-24
目录
• 微生物的分类 • 微生物的鉴定方法 • 微生物的鉴定技术 • 微生物鉴定的应用 • 微生物分类与鉴定的挑战与展望
01
微生物的分类
细菌
革兰氏阳性菌
具有厚重的细胞壁，对青霉素敏感。
厌氧菌
在缺氧环境中生长繁殖。
革兰氏阴性菌
具有较薄的细胞壁，对青霉素不敏感。
详细描述
分子生物学鉴定是通过分析微生物的基因序列、蛋白质表达等分子特征来进行分类和鉴定的方法。这种方法具有 很高的准确性和灵敏度，可以用于鉴定难以通过形态和生理生化特征鉴别的微生物。例如，PCR技术和基因测序 技术可以用于检测和鉴定特定的微生物。
03
微生物的鉴定技术
基因测序技术
基因测序技术是利用现代生物技术对微生物基因组进行 测序，通过比对已知基因库，确定微生物的种属和基因 型。
微生物分类与鉴定的挑战与
05
展望
微生物多样性的挑战
微生物种类繁多
微生物种类数量庞大，形态多样，给分类与鉴定带来很大挑战。
鉴定方法有限
传统的微生物鉴定方法依赖于形态、生理生化特征等，对于某些特 殊或稀有微生物可能难以准确鉴定。
微生物生态学研究需求
微生物分类鉴定方法
微生物分类鉴定方法微生物分类鉴定是微生物学领域的重要研究内容之一，它涉及到对微生物的形态、生理生化特性、遗传特征等方面进行综合鉴定和分类。
准确地鉴定和分类微生物对于了解其生态学、分子进化等方面的特征以及应用于医学、农业等领域具有重要意义。
本文将介绍几种常用的微生物分类鉴定方法。
1.形态学鉴定法：形态学鉴定法是最传统和常用的微生物分类鉴定方法。
通过观察微生物在显微镜下的形态特征，如细胞形态、细胞大小、结构特征、胞壁形态等来对微生物进行鉴定和分类。
例如，革兰氏染色可以用于区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌；芽孢形态特征可以用于区分芽孢杆菌属和其他杆菌属等。
2.生理生化鉴定法：生理生化鉴定法是通过微生物对不同生理生化试验的反应特征来鉴定和分类微生物。
常用的试验包括碳源利用试验、氧需求性试验、双氧水试验、酸碱度试验等。
例如，氧需求性试验可以区分厌氧菌和好氧菌；双氧水试验可以区分产气乳杆菌和其他乳杆菌属。
3.免疫学鉴定法：免疫学鉴定法是通过检测微生物产生的抗原或对抗原的反应来对微生物进行鉴定和分类。
包括血清学鉴定、补体结合试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫电泳等。
例如，通过检测微生物产生的特定抗原来诊断细菌感染。
4.分子生物学鉴定法：分子生物学鉴定法是近年来发展迅速的微生物分类鉴定方法。
通过检测微生物的核酸序列来鉴定和分类微生物。
常用的方法包括PCR、序列分析、比较基因组学等。
例如，16SrRNA基因序列分析可以用于鉴定和分类细菌。
此外，还有一些综合鉴定方法，如荧光原位杂交（FISH）、质谱分析、流式细胞术等。
这些方法在微生物分类鉴定中各具特色，能够提供更准确和细致的分类信息。
总之，微生物分类鉴定方法多种多样，各种方法常常结合使用，以提高鉴定的准确性。
随着基因测序技术的发展，分子生物学鉴定方法在微生物分类鉴定中的地位越来越重要并逐渐取代了传统的鉴定方法。
微生物分类鉴定
（4）学名的第二个词为种名。
种名是拉丁语中的形容词，表示微生物的次要特征。 例如金黄色葡萄球菌（Stophylococcns aureus）中的 aureus是形容词，意思是“金黄色的”。 种名也有用 人名或地名来表示的。例如巴氏芽孢杆菌（Bacillus pasteurii），保加利亚乳杆菌（Lactobacteriurn bulgaricus）。 种名首字母不大写。
有时在两个主要分类单位之间，可添上次级分类单 位，如“亚门”、“亚纲”、“亚 目”、“亚科”、 “亚属”等。在科与属之间有时还可有“族”（Tribe） 一级。
*人：动物-脊椎动物-哺乳动物-灵长目-人科
以啤酒酵母为例，它在分类学上的地位是： 真菌门Eumycophyta 子囊菌纲Ascomycetes 内孢霉目Endomycetales 内孢霉科E.domcetaceae 酵母属Saccharomyces
特征外，还有某一个显然不同的特征，而此特征又是稳定
献上记载的典型种的特征完全一致，才能鉴定为同一个种。
的。我们就把这种微生物称为典型种的“变种”。
例如，巨大芽孢杆菌是以巴氏1884年原始报告为标
准。1953年有人从土壤中分离到一株分解有机磷能力很强
的巨大芽孢杆菌，而且性状稳定，因此将它称为巨大芽孢 杆菌变种，称之为巨大芽孢杆菌解磷变种 。
由于世界上不存在两个绝对相同的个体因而从自然界中分离到的微生物纯培养物尽管它们同属一个种但由于来源不同总会表现出细微的差为了表现出这些细微的差异和工作方便我们就采用菌株或品系这个名称来代表某个具体的微生物纯培养物
本章重点掌握
1．微生物的分类单位。 2．微生物学名的书写及意义。 3. 菌种鉴定的方法。 了解 1．微生物的分类系统。 2. 菌种鉴定的条件。
第十一章微生物的分类和鉴定ppt课件
例1：苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis （subsp）galleria 例2：椭圆酿酒酵母（或酿酒酵母椭圆变种） Saccharomyces cerevisiae （var）ellipsoideus
由于细菌分类单元的划分缺乏一个易于操作的统一标准， 为了减少因采用不同标准界定分类单元所造成的混乱， 细菌系统分类也像其他生物分类一样采用“模式概念”
学名（scientific name）
指一个菌种的科学名称，它是按照《国际 细菌命名法规》命名的、国际学术界公认并通 用的正式名字。
一、双名法（binominal nomenclature）
双名法指一个物种的学名由前面一个属名（generic name）和后面一个种名加词（specific epithet）两部分
Ainsworth从1966年起，就把真菌界分为两大门 （粘菌门和真菌门），并把真菌门再分成五个亚门。 目前，该系统已为各国广大真菌分类学者所普遍采 用，影响较大。
三、酵母菌的分类
酵母菌的分类普遍采用荷兰的Loddov在1970 年提出的分类系统。
在这个分类系统中，以是否形成各类有性孢子 作为分类的起点，
细致的观察和测试，参照一定的，用对比的方法来 确定该微生物的分类地位。
第一节 通用分类单元
三、种以下的分类单元
亚种（subspecies，subsp.，ssp.） 变种（variety，var.） 型（form） 类群（group） 菌株（strain） 小种（race） 相（phase） 态（state）
一般指自然存在的微生物交互变异中的一定阶段。
（八）态（state）
通常指微生物的菌落变异状态，如粗糙、光 滑或粘液状等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
利用16S rDNA序列对微生物进行鉴定
利用16SrRNA建立分子进化树的美国科学家
Carl Woese
微生物的16Sr DNA序列具有进化上的 保守性，因此可作为分类的良好依据。
基于16S rDNA序列 同源性的脱氮细菌系 统发育树
16S rDNA微生物鉴定流程
培养微生物
提取基因组DNA
PCR扩增16S rDNA片段
从进化论诞生以来，已经成为生物学家普遍接受的分类原则
生物系统学(systematics)
进化的测量指征
rRNA作为进化指征
⑴ 生物功能：rRNA参与蛋白质的合成。 ⑵ 分子结构：序列中既存在高度保守的区域，也存在高度变化 区域。其中16S rRNA大小适合，操作方便。 ⑶ 数量与分布：数量大，普遍存在于原核和真核生物中。
《伯杰氏系统细菌学手册》 (Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology
（20世纪80年代末期）
伯杰氏手册是目前进行细菌分类、鉴定的最重要
依据，其特点是描述非常详细，包括对细菌各个属 种的特征及进行鉴定所需做的实验的具体方法。
二、微生物的命名
双名法，属名和种名加词组成，一般用斜体表示。
rRNA序列测定
分析比较
微生物之间的系统发育关系
第一节 细菌分类
分类是认识客观事物的一种基本方法。我们要认识、 研究和利用各种微生物资源也必须对它们进行分类。
分类学涉及三个相互依存又有区别的组成部分：
分类、
命名、 鉴定
分类(classification)：根据一定的原则(表型特征相似性或系统发育 相关性)对微生物进行分群归类，根据相似性或相关性水平排列成 系统，并对各个分类群的特征进行描述，以便查考和对未被分类的 微生物进行鉴定；
在现代微生物分类中，任何能稳定地反映微生物种类特征的资料， 都有分类学意义，都可以作为分类鉴定的依据。
一、形态学特征
培养特征、 细胞形态及其染色特性、 特殊的细胞结构、 运动性、 等等
(根据现有系统确定未知微生物分类归属的过程)
主要以细菌为例介绍微生物分类、命名和鉴定的有关知识
一、分类单元及其等级
常用的细菌分类学术语：
1）培养物(culture)：一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长
物。如微生物的斜面培养物、摇瓶培养物等。
2）菌株(strain)：从自然界中分离得到的任何一种微生物的纯培养
最原始的生命
漫长的进化历程
千姿百态的生物种类
今天仍生存在地球上的生物种类， 彼此之间都有或远或近的历史渊源。
生物分类的二种基本原则：
a）根据表型(phenetic)特征的相似程度分群归类，这种 表型分类重在应用，不涉及生物进化或不以反映生 物亲缘关系为目标；
b）按照生物系统发育相关性水平来分群归类，其目标 是探寻各种生物之间的进化关系，建立反映生物系 统发育的分类系统。
美国宾夕法尼亚大学的细菌学教授伯杰(D.Bergey)越广泛地吸收了国 际上细菌分类学家参加编写(如1974年第八版，撰稿 人多达130多位，涉及15个国家；现行版本撰稿人多 达300多人，涉及近20个国家)，所以它的近代版本反 映了出版年代细菌分类学的最新成果，因而逐渐确 立了在国际上对细菌进行全面分类的权威地位。
第十二章
微生物的分类和鉴定
形成于8.5亿年前的微生物化石
形成于35亿年前的微生物化石
主要是些类似简单杆状细菌的原始生物
20亿年前以后的岩石中的微生物的化石形态多样性明显增多
形 成 于
10
亿
年
前
的
微
生
物
形态上非常类似于现代的蓝细菌，
化 石
进行不产氧光合作用的光能自养 菌，及化能无机营养的硫细菌。
形态上类似于现代的绿藻（真核生物）
物都可以称为微生物的一个菌株；用实验方法(如通过诱变) 所获得的某一菌株的变异型，也可以称为一个新的菌株， 以便与原来的菌株相区别。
Bacillus subtilis ASI.398
生产蛋白酶
Bacillus subtilis BF7658
生产α淀粉酶
菌株是微生物分类和研究工作中最基础的操作实体
3）型(form或type)：常指亚种以下的细分。当同种或同亚种不同菌 株之间的性状差异，不足以分为新的亚种时，可以细分为不同的型。
例如抗原特征的差异分为不同的血清型；对噬菌体裂解反应的 不同分为不同的噬菌型等。
4）种（species）： 物种，生物分类中基本的分类单元和分类等级。
高等生物中，“生殖隔离”被看作是区分物种的标准。
微生物的种：具有高度特征相似性的菌株群，这个菌株群与其 他类群的菌株有很明显的区别。
伯杰氏手册
《伯杰氏鉴定细菌学手册》 (Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology)
属名在前，一般用拉丁字名词表示，字首字母大写
种名在后，常用拉丁文形容词表示，全部小写 若所分离的菌株只鉴定到属，而未鉴定到种，可用sp来表示，
例如 Bacillus sp
Pseudomonas aeruginosa
铜绿假单孢菌
二、微生物的命名
由于细菌分类单元的划分缺乏一个易于操作的统一标准， 为了减少因采用不同标准界定分类单元所造成的混乱， 细菌系统分类也像其他生物分类一样采用“模式概念”
(根据现有数据建立系统的过程)
命名(nomenclature)：是根据命名法规，给每一个分类群一个专有 的名称；
(分类系统建立过程中的步骤之一)
鉴定(identification或determination)：借助于现有的微生物分类 系统，通过特征测定，确定未知的、或新发现的、或未明确分类 地位的微生物所应归属分类群的过程。
种和亚种指定模式菌株（type strain）； 亚属和属指定模式种（type species）； 属以上至目级分类单元指定模式属（type genus）；
模式菌株应送交菌种保藏机构保藏，以便备查考和索取。
第二节、细菌分类鉴定的特征和技术
生物分类的传统指标： 形态学特征、
生理学特征、 生态学特征
从不同层次(细胞的、分子的)，用不同学科(化学、物理学、 遗传学、免疫学、分子生物学等)的技术方法来研究和比较 不同微生物的细胞、细胞组分或代谢产物，从中发现的反 映微生物类群特征的资料。