生物选修一实验知识点
高中生物选修一生物技术实践知识点总结材料

高中生物选修一生物技术实践知识点总结材料生物技术实践是高中生物选修一课程中的重要内容,其涉及的知识点较多。
下面是关于生物技术实践相关知识点的总结材料。
一、细胞培养技术1.细胞培养基本理论:细胞培养的定义、种类和应用2.细胞培养技术的步骤:细胞的分离、传代、化学培养基的制备等3.细胞培养的影响因素:温度、培养基成分、培养器具等4.细胞培养的应用:生物药物的生产、组织工程、基因工程等二、基因工程技术1.基因工程的基本概念:基因重组、基因表达等2.基因工程中的重要技术:限制性酶切、DNA连接、DNA复制等3.基因工程的应用:转基因技术、蛋白质表达与纯化、分子诊断等4.基因工程的伦理问题:风险评估、生物安全等三、单细胞技术1.单细胞技术的基本原理:单细胞分离、扩增等2.单细胞技术的应用:单细胞测序、单细胞克隆等3.单细胞技术在医学研究中的应用:癌症研究、免疫细胞研究等4.单细胞技术的发展前景:个体化医学、药物开发等四、酶工程技术1.酶工程的基本概念:酶的定义、性质等2.酶工程技术的步骤:酶的筛选、改造、固定化等3.酶工程技术的应用:生化制剂的生产、环境保护等4.酶工程技术的发展趋势:多功能酶的研究、酶催化反应的优化等五、生物传感器技术1.生物传感器的基本原理:生物元件的识别、信号转导等2.生物传感器的种类:酶电极、抗体电极等3.生物传感器的应用:生物分析、临床诊断等4.生物传感器技术的发展:微纳制造技术的应用、多样化生物传感元件的研究等六、生物安全技术1.生物安全的概念:生物实验的风险评估、安全管理等2.生物安全技术的措施:生物实验室建设、生物废弃物处理等3.生物安全的法律法规:《生物安全法》等相关法律法规4.生物安全技术的发展:新兴疾病、转基因生物等生物安全问题的研究与应对以上是高中生物选修一生物技术实践的知识点总结材料。
这些知识点涵盖了细胞培养技术、基因工程技术、单细胞技术、酶工程技术、生物传感器技术和生物安全技术等方面,希望对你的学习有所帮助。
高中生物知识点总结选修1

高中生物知识点总结选修1一、细胞的分子基础1. 细胞的概念与结构- 细胞是生命的基本单位,具有自主代谢和遗传信息传递的能力。
- 细胞的主要结构包括细胞膜、细胞质和细胞核。
2. 生物大分子- 蛋白质:由氨基酸组成,是生命活动的主要承担者。
- 核酸:包括DNA和RNA,是遗传信息的载体。
- 糖类:由单糖组成,主要提供能量。
- 脂类:包括甘油和脂肪酸,构成细胞膜的主要成分。
3. 酶的作用- 酶是生物体内的生物催化剂,能够加速化学反应的速率。
- 酶的特性:高效性、专一性、作用条件温和。
4. 细胞呼吸- 有氧呼吸:在氧气存在的条件下,有机物彻底氧化分解,释放大量能量。
- 无氧呼吸:在缺氧条件下,有机物不完全氧化,释放较少能量。
5. 光合作用- 光依赖反应:在光照下,水分子分解,产生氧气和ATP。
- 光合磷酸化:ATP的生成过程。
- 光合暗反应:固定二氧化碳,合成有机物。
二、遗传与进化1. 遗传的分子基础- DNA的复制:半保留复制原理。
- RNA的转录:DNA信息转录成mRNA。
- 蛋白质的翻译:mRNA指导蛋白质的合成。
2. 基因的结构与功能- 基因是遗传信息的基本单位,控制生物体的性状。
- 基因的结构包括启动子、编码区和终止子。
3. 基因突变- 突变的类型:基因突变、染色体变异。
- 突变的影响:有益、中性、有害。
4. 生物的进化- 进化的证据:化石记录、比较解剖学、分子生物学。
- 进化的机制:自然选择、遗传漂变、基因流、突变。
5. 分子系统发育- 通过比较DNA序列的差异,推断物种间的亲缘关系。
- 分子钟假说:物种分化的时间可以通过DNA序列的变异速率来估计。
三、生态环境与生物多样性1. 生态系统的组成- 生产者:通过光合作用制造有机物的生物。
- 消费者:直接或间接依赖生产者制造的有机物的生物。
- 分解者:分解有机物,释放营养物质的生物。
2. 生态系统的功能- 物质循环:生态系统中物质的循环利用。
- 能量流动:生态系统中能量的传递和转化。
高二生物 选修一生物技术实践 知识点总结

选修一生物技术实践知识点总结专题1 课题3 制作泡菜一、基础知识1、制作泡菜的原理:乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸。
2、测定亚硝酸盐含量的原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
将经过反应显色后的待测样品与标准液比色,大致估算出样品中的亚硝酸盐含量。
3、亚硝酸盐:白色粉末,易溶于水。
特定的条件下会转化成致癌物质亚硝胺。
二、实验设计流程图(1)泡菜盐水按清水和盐为4∶1质量比配制煮沸冷却备用。
煮沸为了杀灭盐水中的杂菌,冷却后使用为了保证乳酸菌的生命活动不受影响。
(2)倒入配制好的盐水,使盐水浸没全部菜料。
(3)盖上泡菜坛盖子,坛子边沿加水,以保证无氧环境(4)发酵时间受到温度影响。
三、操作提示1、泡菜坛的选择:火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好,否则容易引起蔬菜腐烂。
2、腌制的条件:注意腌制的时间、温度和食盐的用量。
温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短易造成细菌增殖,亚硝酸盐含量增加。
3、测定亚硝酸盐含量的操作。
四、教材答案1、含有抗生素的牛奶能不能发酵成酸奶?为什么?不能。
因为酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。
抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。
2、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。
酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。
3.为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?放置过久时发生变质(发黄、腐烂),蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体4.用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?保证泡菜坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。
如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。
专题2 课题1 微生物的实验室培养一、基础知识1、培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
高中生物选修1知识点汇总

考点1、传统发酵技术一、制作果酒1.原理:酵母菌在________的条件下能进行酒精发酵。
2.反应式:C6H12O6→2C2H5OH+2CO23.发酵条件(1)温度限制在18~25℃,最适为________。
(2)pH呈________。
4.制作流程图:选择水果→冲洗→________→酒精发酵→果酒。
想一想传统葡萄酒制作中,葡萄酒为什么是深红色的?二、制作果醋1.原理:醋酸菌在________的条件下进行醋酸发酵。
2.反应式:C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O3.发酵条件(1)最适温度为________。
(2)适时通气。
(3)限制________供应。
4.制作流程:选择水果→冲洗→榨汁→________→醋酸发酵→果醋。
探究点一果酒、果醋的制作1.完成下面果酒和果醋制作的试验流程和其发酵装置。
选择葡萄→→→发酵→发酵↓↓果酒果醋图1 果酒、果醋制作流程思维拓展1.在果酒制作过程的前期通入空气或在发酵瓶(罐)中留有肯定的空间(大约1/3),可以给酵母菌供应氧气、使其进行有氧呼吸,为酵母菌的生长、繁殖供应能量。
酵母菌快速增殖,缩短发酵时间。
在产生酒精的阶段要求严格的厌氧环境,此阶段假如有氧,则会抑制其酒精发酵。
2.果醋制作过程中要求始终通氧,因为醋酸菌是好氧细菌,缺氧时醋酸菌的生长、增殖都会受到影响,另外醋酸的生成也会受到影响。
3.由于在发酵过程中都产生CO2,因此又需设排气口;为防止空气中微生物的污染,排气口应连接一个长而弯曲的胶管。
探究示例1(2010·北京卷,1)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是( )A.让发酵装置接受光照B.给发酵装置适时排气C.向发酵装置通入空气D.将发酵装置放在45℃处三、制作腐乳1.原理:毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的____________;脂肪酶可将脂肪水解为____________。
2.制作流程图:让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加____装瓶→密封腌制。
生物选修一知识点汇总

选修1专题一一、知识归纳1.几种常用发酵菌种的比较菌种/项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧, 后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧2.果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较制作内容/比较项目果酒果醋腐乳泡菜所用菌种酵母菌醋酸菌主要是为霉乳酸菌控制条件O2的有无无氧有氧有氧无氧最适温度18℃~25℃30℃~35℃15℃~18℃常温时间控制10~12天7~8天腌制8天左右腌制10天左右其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用量控制盐水比例相关反应式3.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程的比较及亚硝酸盐含量的检测比较项目果酒和果醋制作腐乳的制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量制作原理果酒: 无氧呼吸果醋: 有氧呼吸果醋:有氧呼吸多种微生物发酵泡菜制作: 乳酸菌无氧呼吸亚硝酸盐检测:在盐酸酸化条件下, 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后, 与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色亚硝酸盐检测: 在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色亚硝酸盐检测:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色实验流程图挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵↓↓果酒果醋让豆腐上长也毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制操作提示材料选择与处理;防止发酵液被污染;控制好发酵条件。
控制好材料的用量;防止杂菌污染。
泡菜坛的选择;腌制的条件;测定亚硝酸盐含量的操作。
专题2 课题1 微生物的培养与应用一、知识归纳4.微生物的纯化培养包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段, 纯化(分离)微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
微生物培养: 水、无机盐、碳源、氮源等平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作, 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
高中生物选修1知识点总结

高中生物选修1知识点总结1.1 果酒和果醋的制作一、实验原理1.酒精发酵的原理:①酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖,表达式为:C6H12O6+O2→CO2+H2O+能量②酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳,表达式为:C6H12O6→C2H5OH+CO2+能量③酵母菌的营养代谢类型为异养兼性厌氧型。
在有氧时,酵母菌大量繁殖,但是不起到发酵效果;在无氧时,繁殖速度减慢,但是此时可以进行发酵。
在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖,再隔绝氧气进行发酵。
20℃左右最适合酵母菌繁殖,酒精发酵的最佳温度是在18℃~25℃,pH最好是弱酸性。
2.醋酸发酵的原理:①醋酸菌是好氧型细菌,当缺少糖源时和有氧条件下,可将乙醇(酒精)氧化成醋酸。
表达式为:C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O;当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。
醋酸菌生长的最佳温度是在30℃~35℃二、实验步骤1. 对发酵瓶、纱布、榨汁机、盛葡萄汁的器皿等实验用具进行清洗并消毒。
先用温水反复冲洗几次,再用体积分数为75%的酒精擦拭消毒,晾干待用。
2. 取葡萄500 g,去除枝梗和腐烂的子粒。
3. 用清水冲洗葡萄1~2遍除去污物,注意不要反复多次冲洗。
4. 用榨汁机榨取葡萄汁后,将其装入发酵瓶中或将葡萄打成浆后,用洁净的纱布过滤至发酵瓶中,盖好瓶盖。
如果没有合适的发酵装置,可以用500 mL的塑料瓶替代,但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的2/3。
5. 将发酵瓶置于适宜的温度下发酵。
6. 由于发酵旺盛期CO2的产量非常大,因此需要及时排气,防止发酵瓶爆裂。
如果使用简易的发酵装置,如瓶子(最好选用塑料瓶),每天要拧松瓶盖2~4次,进行排气。
7. 10 d以后,可以开始进行取样检验工作。
例如,可以检验酒味、酒精的含量、进行酵母菌的镜检等工作。
8. 当果酒制成以后,可以在发酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后将装置转移至30~35 ℃的条件下发酵,适时向发酵液中充气。
生物选修一知识点

生物选修一知识点生物选修一知识点一、传统发酵技术1.果酒制作:1)原理:酵母菌的无氧呼吸反应式:C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。
3)条件:18-25℃,密封,每隔一段时间放气(CO2)4)检测:在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。
2、果醋制作:1)原理:醋酸菌的有氧呼吸。
O2,糖源充足时,将糖分解成醋酸O2充足,缺少糖源时,将乙醇变为乙醛,再变为醋酸。
C2H5OH+O2CH3COOH+H2O2)条件:30-35℃,适时通入无菌空气。
3、腐乳制作:1)菌种:青霉、酵母、曲霉、毛霉等,主要是毛霉(都是真菌)。
2)原理:毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和aa;脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
3)条件:15-18℃,保持一定的湿度。
5)加盐腌制时要逐层加盐,随层数加高而增加盐量,盐能抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质。
4、泡菜制作:1)原理:乳酸菌的无氧呼吸,反应式:C6H12O62C3H6O3+能量2)制作过程:①将清水与盐按质量比4:1配制成盐水,将盐水煮沸冷却。
煮沸是为了杀灭杂菌,冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
②将新鲜蔬菜放入盐水中后,盖好坛盖。
向坛盖边沿的水槽中注满水,以保证乳酸菌发酵的无氧环境。
3)亚硝酸盐含量的测定:①方法:比色法;②原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
二、微生物的培养与应用1、培养基的种类:按物理性质分为固体培养基和液体培养基,按化学成分分为合成培养基和天然培养基,按用途分为选择培养基和鉴别培养基。
2、培养基的成分一般都含有水、碳源、氮源、无机盐P143、微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。
4、培养基还需满足微生物对PH、特殊营养物质以及O2的要求。
5、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
6、常用灭菌方法有:灼烧灭菌,将接种工具如接种环、接种针灭菌;干热灭菌:如玻璃器皿、金属用具等需保持干燥的物品。
生物科学选修一知识点

生物科学选修一知识点
1. DNA复制
- DNA复制是指在细胞有丝分裂或减数分裂过程中,DNA分子通过酶的作用,沿模板链自行合成一条互补的新链的过程。
- DNA复制是生物体遗传信息传递的基础,确保每个新细胞都能够获得与母细胞完全相同的遗传信息。
- DNA复制分为三个主要步骤:解旋、复制和连接。
2. 基因表达与调控
- 基因是确定细胞形态和功能的遗传单位,基因表达是指基因信息转化为蛋白质的过程。
- 基因表达与调控过程包括转录、剪接、翻译和后转录调控等多个环节。
- 调控基因表达是细胞根据环境条件和内部需求调整基因表达水平的过程。
3. 细胞代谢
- 细胞代谢是维持细胞正常生长和生命活动所需的一系列化学反应。
- 细胞代谢包括有氧呼吸和发酵等能量产生途径,以及蛋白质合成、核酸合成和有机物降解等物质转化途径。
- 细胞代谢与细胞功能密切相关,不同细胞类型及环境条件下的代谢活性有所差异。
4. 遗传与进化
- 遗传是指通过基因传递父代到子代的基因信息的过程。
- 进化是指生物种群在漫长的时间中逐渐改变和适应环境的过程。
- 遗传与进化是生物科学的核心概念,揭示了生物多样性和物种起源的原理。
5. 细胞分裂与生长
- 细胞分裂是指细胞在生长、发育或修复损伤时,将自身复制为两个同样的细胞的过程。
- 细胞生长是指细胞体积和质量的增加过程。
- 细胞分裂与生长是生物体维持生命活动的基础,保证细胞数量和组织结构的稳定。
以上为生物科学选修一的知识点概述,这些知识对于理解生命起源、细胞功能和遗传变异等方面具有重要意义。
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1、参与果酒(如葡萄酒)制作的微生物是酵母菌,属于真核生物,其代谢类型是异养兼性厌氧,酒精发酵的原理(反应式)是略。
酵母菌中有(有/没有)线粒体,不能(能/不能)在线粒体中将葡萄糖彻底氧化分解。
酒精发酵一般将温度控制在18-25℃,而在20℃左右时,是酵母菌的最适繁殖温度。
在果酒制作初期,向发酵装置通气的目的是使酵母菌在有氧条件下大量繁殖,增大菌种密度。
在葡萄酒的自然发酵过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
葡萄酒呈红色的原因是随着酒精度数的提高,红葡萄皮中的色素进入发酵液。
在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因为无法适应这一环境而受到抑制,他们与酵母菌之间的种间关系是竞争。
酵母菌的繁殖方式主要包括条件适宜时的出芽生殖,与条件恶劣的孢子生殖。
2、参与果醋(如葡萄醋)制作的微生物是醋酸菌,属于原核生物,其代谢类型是异养需氧型,当氧气、糖源充足时,该菌能够将葡萄汁中的糖分解成醋酸,当氧气充足,糖源不足时,该菌能将乙醇变为乙醛,再将其变为醋酸,此时的醋酸制作原理(反应式)是略。
其典型的细胞增殖方式是二分裂,酵母菌与醋酸菌最主要的区别是有无核膜包被所形成的细胞核。
3、教材中P4果酒果醋发酵装置图1—4b中的充气口作用是在醋酸发酵时充入氧气;排气口的作用是排除发酵时产生的CO2,以及残余气体;出料口的作用是取发酵液进行检测,并放出发酵液;其中的排气口通过一个长而细的胶管连接瓶身的目的是防空气中的微生物的污染。
在果酒制作时,应该适时排气,原因是防止发酵中因气压过高而炸瓶,若用装置1—4a进行果酒果醋制作,在排气时不能(能/不能)完全打开瓶盖,而是拧松瓶盖即可。
对葡萄的处理应该先冲洗(去枝梗/冲洗)再去枝梗(去枝梗/冲洗),且不能(能/不能)反复冲洗,以防止降低了酵母菌的数量。
在果醋制作时,要适时通气的原因是醋酸菌是好氧菌,且果酒变为果醋过程中需要氧气的参与。
发酵装置需要(需要/不需要)进行消毒处理,我们在果酒制作时,不需要(需要/不需要)对葡萄汁进行煮沸处理。
在果酒发酵到第10-12 天之后,便可以对果酒进行检测,可在酸性条件下,用重铬酸钾与发酵液反应,如果发酵液呈灰绿色,且颜色较深,则说明酒精度数较高。
若需进一步对发酵液中的酵母菌数量进行检测可以用稀释涂布平板法、显微镜直接计数法方法。
到了果酒制作的后期会发现,酵母菌的数量会呈现下降趋势,其原因主要有①营养物质消耗殆尽②酒精度数的提高对细胞的毒害作用③PH的降低。
在果酒制作完成后可以转为果醋制作,但是应该改变的实验条件是适当升温并通氧。
4、为微生物的生长繁殖提供营养的基质叫做培养基。
从物理性质上划分,主要可分为固体培养基与液体培养基,其中的液体培养基主要用于工业生产与扩大培养,而扩大培养的目的是增大菌种密度,要让培养基呈固态,一般需向其中加入琼脂这一凝固剂。
固体培养基可以用于菌株的分离、鉴定、计数、菌种保存等。
从功能上划分,可分为选择培养基与鉴别培养基,其中的选择培养基,是在培养基中加入某种化学物质,抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长,如以纤维素为唯一碳源的培养基来筛选纤维素分解菌;以不加氮源的培养基来筛选自身固氮微生物;在培养基中加入高浓度NaCl筛选金黄色葡萄球菌;培养基中加入青霉素等抗生素抑制细菌、放线菌,从而筛选酵母菌、霉菌;以尿素为唯一氮源的培养基来筛选尿素分解菌。
而鉴别培养基是根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂,来鉴别相应微生物,如在培养基中加入伊红-美蓝,可鉴别大肠杆菌,使其菌落呈黑色。
选择培养基不是(是/不是)都是固体培养基。
5、不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
如在培养乳酸杆菌时需在培养基中添加维生素;培养霉菌时需将PH调节至酸性;培养细菌时需将PH调节至中性或微碱性;培养厌氧微生物时则需提供无氧条件。
牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏能够为微生物提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素,主要提供碳源;蛋白胨能够为微生物提供碳源、氮源、维生素,主要提供氮源。
6、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵,主要包括消毒与灭菌。
对实验操作空间、操作者的衣服、双手应该进行清洁与消毒;培养皿、培养基、接种用具应该灭菌;实验操作应该在酒精灯火焰旁进行。
操作者的双手一般用体积分数70%的酒精进行消毒;接种环、涂布器应该用火焰灼烧灭菌;培养基一般用高压蒸汽灭菌法进行灭菌;培养皿、滴管等玻璃器材一般用干热灭菌进行灭菌。
接种室、超净工作台、接种箱在使用前可以用紫外线照射30min,进行消毒处理。
不论是消毒还是灭菌,其主要的原理都是在理化因素的作用下使微生物蛋白质变性或者核酸破坏损伤,以杀灭微生物。
7、固体培养基的制备一般包括计算、称量、溶化、调PH 、灭菌、倒平板。
在灭菌后,待培养基冷却到50℃左右时,便可以进行倒平板操作。
在倒平板过程中,拔出棉塞后需使锥形瓶瓶口通过火焰的原因是防止瓶口微生物污染培养基,平板冷凝后,需倒置的原因是防止皿盖上的水珠滴落到培养基,又可避免培养基中水分过快挥发。
8、微生物的接种最常用的方法是稀释涂布平板法、平板划线法,其中稀释涂布平板法除了可以用于微生物的分离、纯化外,还可以用于菌落的计数。
平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续的划线操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,在数次划线后培养,可以分离得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落。
在划线操作中,第一次划线前要灼烧接种环的目的是防止接种环上可能存在的微生物污染培养物;在第二次、三次…划线前灼烧接种环的目的是杀死接种环上的残留菌种,使下一次划线的菌种来源于上次划线的末端,以便获得单个菌落划线结束后还需灼烧接种环的原因是杀死接种环上的残留菌种,避免污染环境或感染操作者。
灼烧接种环后必须待其冷却,才能进行划线操作,原因是以免接种环温度过高,杀死菌种;在做第二次以及以后的划线操作时,必须从上一次划线末端开始,原因是末端菌体数目少,以便获得单个菌落。
在打开试管棉塞后以及塞上棉塞前都必须使试管口通过火焰灼烧,稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个菌落。
该方法主要包括两个步骤,即系列稀释操作与涂布平板操作。
在稀释时,应该将分别盛有9ml水的各支试管进行灭菌,并编号。
在将菌液用移液管加入相应稀释倍数的试管时,应该用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸3次,使充分混匀。
移液管事先应该灭菌处理。
涂布平板操作,用到的涂布工具是涂布器,应该事先将其放入盛有酒精的烧杯中,然后在涂布前将其取出在火焰上引燃,并冷却,方可进行涂布。
不是(是/不是)用涂布器从试管中取菌液,而是用胶头滴管,取的菌液一般不超过0.1 ml。
整个接种操作应该在酒精灯火焰旁完成。
9、若用平板划线法接种后培养基上的某条线上的菌落分布呈沟槽状,其原因是划线时用力过大,划破培养基;若第二划线区域的第一条线上没有菌落长出,其原因可能是未从上次划线末端开始、接种环未冷却。
若用稀释涂布平板法接种后的培养基的右下方没有菌落长出,而其他地方有较多的菌落长出,其原因最可能是涂布不均。
不是(是/不是)每次划线的菌种都来源于上次划线的末端;如果在平板上有5个划线区域,则接种环应该被灼烧6 次。
10、在接种后,应该将一个未接种的培养基与接种的培养基都放入37℃恒温箱进行同步培养,其目的是判断培养基灭菌是否彻底或是否被污染。
在微生物培养时,有时候需要进行振荡培养,其主要目的是①增大培养液中的溶解氧②使营养物质被充分利用。
接种后的培养基在12h与24h时,菌落的颜色、位置、形状基本不变,大小有(有/没有)明显差异。
11、对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,首先将菌种接种在试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养,待菌落长成后,将试管放入4℃的冰箱中保藏。
但该方法的缺点是保存时间不长,且容易产生变异或被污染。
对于需要长期保存的菌种,可采用甘油管藏的方法,在-20℃的冷冻箱中保存。
12、尿素是一种农业氮肥,不能(能/不能)被农作物直接吸收,必须被土壤中的细菌分解成NH3后,才能被植物吸收,尿素被细菌分解的反应式是略。
在寻找目的菌株时的思路是根据它对生存环境的要求到相应环境中去寻找。
以尿素为唯一氮源的培养基具有选择作用的原因是原则上只允许能够利用尿素的微生物在其上生长。
若要判断该培养基是否起到选择作用,可以用接种了的牛肉膏蛋白胨培养基做对照进行同步培养,如果,对照培养基上长出的菌落数明显多于(多于/少于)该选择培养基,则说明该培养基起到选择作用。
在选择培养基上生长的菌,不一定(一定/不一定)就是我们的目的菌株。
在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果PH 升高,指示剂变红,这样便可初步鉴定该中细菌能够分解尿素。
在鉴定尿素分解菌时,一个以尿素为唯一氮源的酚红鉴定培养基平板只能鉴定此前在选择培养基上生长的一种菌落。
13、测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法(或称活菌计数法)与显微镜直接计数法。
其中的稀释涂布平板法能够统计是菌落的数目,因此统计结果一般不用活菌数。
在统计时一般选择菌落数在30—300 的平板进行计数,其目的是保证结果准确。
选择30---300的原因主要包括以下几点:①稀释度过低,容易计数不准确,造成实验误差②稀释度过低,可能导致两个或者两个以上的菌体连在一起形成一个菌落,造成实验误差③稀释度过低,会造成培养基中的微生物的种内斗争、种间竞争激烈,使得一些个体无法形成菌落,而造成实验误差④稀释度过高,形成的菌落数过少,不具有代表性。
该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
在用该方法进行菌落计数时,每个稀释度下至少涂布3 个平板,当几个平板上的菌落数都在30---300时,且数据相差不是很大的情况下,应该用几个数据的平均值作为该稀释度下的菌落值做计算。
计算公式为:每克土壤(ml)样品菌株数= (C/V)M (其中,C代表某一稀释度下的平均菌落数,V代表涂布时用的稀释液体积,M代表稀释倍数)。
显微镜直接计数的计算公式可描述为:1ml原液中的菌体数=每中格平均菌落数×25(或16)×稀释倍数× 10000 =每小格平均菌体数×400×稀释倍数× 10000 。