铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗研究
铁皮石斛组织培养研究进展组织培养.

铁皮石斛组织培养研究进展1、1 种子萌发1.2 基本培养基铁皮石斛种子在N6,改良N6,MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6,White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响,除残外,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以N6最好,SH 、Kn 、MS 次之,l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养,得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。
罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响,30d 种子发芽率均达到95 % ,但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。
1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发,浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长,过高起抑制作用。
2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。
6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。
KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大,当浓度超过1mg/L 时,对胚萌发和成苗起抑制作用。
ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用,但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量,浓度以0.5mg/L为最佳。
1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发,但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响,干扰其正常发育过程。
1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭,可以吸附代谢过程中产生的废弃物,防止组织褐变,并刺激胚胎的发生与生根,可加人2 %蔗糖。
曾宋君等在改良N6+NAA 0.2mg/L 的最适培养基上,发现以白糖、片糖为炭源时,胚萌发和成苗的效果比蔗糖好,这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素2 原球茎增殖2.1 基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS,MS等作为基本培养基。
铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究

期为进行工厂化育苗提供有效途径。铁皮石斛植株由上海中药研究所引进,
! ! 收稿日期: "##* 8 #& 8 #9 基金项目: 宁德市科技计划项目 (编号为 "##(:%" ) 。 作者简介: 林丛发 (%&** 8 ) , 男, 副研究员, 从事生物技术研究工作。
江西农业学报! "##$ , %& (%) : ’( ) ’* +,-. +/01,23-20.4 51.6/71
铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究
林丛发, 钟爱清, 林云斌, 陈芦根
(福建省宁德市农业科学研究所, 福建 宁德 ;99#%$ )
摘! 要: 通过单因素浓度试验和正交试验研究了 9 种金属离子、 不同激素组合及不同天然附加物对铁皮石斛类原球茎增 殖、 分化的影响。试验结果表明, 9 种金属离子对类原球茎增殖影响的主次顺序为 </" = ! >4" = ! ?." = ! <6" = ! :6" = , 类原 球茎增殖的最佳培养基为 % @ "<A = B++ #C 9D/ @ E = %#F 马铃薯汁 = ;F 蔗糖 (含 </" = %C # DDG3 @ E、 ?." = "C # DDG3 @ E、 >4" = #C % DDG3 @ E、 <6" = #C %DDG3 @ E 和 :6" = #C #; DDG3 @ E) 。培养基 % @ "<A = B++ #C 9D/ @ E = "#F 马铃薯汁 = 蔗糖 "#/ @ E = 琼脂 #C ’/ @ E 最适于铁皮石斛类原球茎的分化。 关键词: 铁皮石斛; 类原球茎; 金属离子; 增殖; 分化 中图分类号: H&(&C $%’! 文献标识码: +! 文章编号: %##% 8 ’9’% ("##$) #% 8 ##’( 8 #;
不同有机附加物对铁皮石斛原球茎增殖和组培苗生根壮苗的影响

不同有机附加物对铁皮石斛原球茎增殖和组培苗生根壮苗的影响徐玲;陈自宏;杨晓娜;杨丽华【摘要】有机附加物在铁皮石斛组培过程中起着重要作用,扩大天然有机物种类的研究范围将有可能挖掘到更多促进生长的附加物.本研究在铁皮石斛原球茎增殖和组培苗生根壮苗过程中,将多种天然有机物进行组合添加,探索具促进作用的有机附加物新种类和新组合.在原球茎增殖培养基中添加100 g/L土豆汁与100 g/L其他有机物(香蕉汁、玉米汁、西瓜汁、荔枝汁及小麦面粉),以土豆汁与玉米汁对增殖的促进效果最佳(平均增殖5.66倍,鲜重提高4.12倍),而分化程度较低(分化率67.9%,排第3),适合作为原球茎继代培养前期的添加成分.添加土豆汁与小麦面粉,原球茎分化率(平均95.1%)和鲜重增加(平均5.35倍)最高,分化苗健壮度最高,适合作为原球茎继代培养后期的添加成分.在组培苗生根壮苗期间,添加100 g/L香蕉汁与100 g/L其他有机物(土豆汁、玉米汁、西瓜汁、荔枝汁及小麦面粉),以香蕉汁与小麦面粉为最佳有机附加物,平均生根率96.6%,平均根长4.82 cm,与其他组合差异极显著;组培苗健壮度、整齐度也最高.玉米汁和小麦面粉都是取材于种子,富含多种营养物质,其在石斛组培过程的促进作用尚未有人报道过.本研究结果将对提高铁皮石斛瓶苗质量,缩短培养周期具有一定现实意义.【期刊名称】《云南农业大学学报》【年(卷),期】2016(031)002【总页数】7页(P250-256)【关键词】有机附加物;铁皮石斛;组培苗;原球茎【作者】徐玲;陈自宏;杨晓娜;杨丽华【作者单位】保山学院,云南保山678000;保山学院,云南保山678000;保山学院,云南保山678000;保山学院,云南保山678000【正文语种】中文【中图分类】S567.906.2铁皮石斛(Dendrobium officinale)是兰科石斛属附生草本植物,具有滋阴清热、生津养胃、调节免疫力等功效,是中国传统名贵中药之一[1]。
铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究

s tsoe a t etom t n o I s m e fn e g fatn e r a M >Fz i w h . ef sf a o P Bp us h dt t h e c e i B n J  ̄ m o r s nin adh s d l i w e i ic t o w e >C2 a >M z n >
10m lL C 22 0m lL mo 。 a . mo 。 / /
O 1m lL Mn .m o LadZ “O 0 m VL .h p m l i f L 8r de- . mo , “O 1 m l n n .3m o ) T eot a I d / / i l I 唧 0 P B e r e r d
中图分类号 :9 978 文献标识码 : 文章编号:0 1 8 8 (0 7 0 - 04一 3 Q4.1 A 10 — 5 1 2 0 ) 1 0 8 o
S u y 0 r le ain a d R df r nit n o r tc r —l eB d ̄ o n r / n c n /u td n P oi r t n e i e e t i fP oo o m i o i f f o ao k De d o ̄v a aa m ll
铁皮石斛 ( ed b m cn i m Wa .xLn]) D nr i d u l e i . 为 ou a d 1 d 兰科多年生草本, 属附生兰类 , 是名贵中药 , 具有提高人
类原球茎由胚培养获得 。
12 试 验方 法 .
体免疫功能、 抗衰老、 防治肿瘤和心血管疾病以及改善睡
Ab ta t T i ee rh i c n e e i e i ec t t  ̄o f rt no f emea o 8 df rn om n n aua tc o sr c : hsrsac o c r dw t rdf rni i 8 n h a c p miai f v t in 。iee t r o ea dn trl r efr i o i l h i i
铁皮石斛组织培养

铁皮石斛组织培养研究进展组织培养摘要:近年来,对铁皮石斛的需求日趋增加,而野生资源难以满足市场需求,组织培养技术使大规模人工栽培成为可能。
从种子萌发、原球茎分化、生根与壮苗、原球茎增殖等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养技术的研究概况,并展望了发展前景。
铁皮石斛为兰科石斛属植物,是传统名贵中药材。
《神农本草经》列为上品,具有益胃生津、滋阴清热、止咳润肺的功效。
现代药理研究表明,石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。
由于石斛自然繁殖力低,种子需与真菌共生才能萌发,加上长期采挖,使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭,成为濒危植物,被列为国家重点保护的野生药材品种。
为了满足市场的需求,国内许多科研人员进行了铁皮石斛组织培养技术的研究。
1种子萌发1.1胚龄不同种龄的种子萌发率不一样。
叶秀嶙等取铁皮石斛6个月种龄的种子进行组织培养发现,种龄愈长,萌发率愈高。
2个月种龄的种子接入改良N6培养基中,萌发率仅为6 % ; 3个月种龄的种子接入改良叹培养基中,培养2周后开始萌发,萌发率为87 % ; 4 一 6个月种龄的种子接入培养基中,只要培养一周即可萌发,萌发率为95 %。
曾宋君等将铁皮石斛种子接入改良N6培养基中进行组织培养,亦得到相似的结论,幼胚胚龄在60d以下时,萌发率极低,随着胚龄的增长,其萌发期逐渐缩短,萌发率逐渐升高,成苗率也逐渐升高,但到达一定的胚龄后,差异并不明显。
1.2基本培养基铁皮石斛种子在N6,改良N6, MS , 1 / 2 MS , SH、KS、VW、KundsonC , 1 / 2N6, White等培养基上均可萌发。
赵天榜等比较风、MS 等14种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响,除残外,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以N6最好,SH、Kn、MS次之,1 /2MS、1 / 2 Vw最差。
曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH、改良N6、MS、KS、VW、KundsonC培养基中培养,得出最适培养基为改良N6 或自制PT培养基。
铁皮石斛毛状茎分化和生根试验

黑节草 ,是 传统 的名 贵 中药 材 ,位 于 “ 九大仙草” 之首 ,具 有 滋 阴养 胃、润 肺 止 咳和 清 热 明 目之 功 效 ;另 外 ,铁皮 石 斛 还 具 有 增 强 人 体 免 疫 力 和 抗 肿瘤 等作用 “ 。由于人 为长期 过 度采 摘 野生 石 斛和环 境 的破坏 ,野 生资源 处 于极度 濒危状 态 ,被
的 影 响 。结 果 表 明 ,铁 皮 石 斛 毛状 茎 最 适 宜 分 化 培 养 基 为 MS+ 6 - B A 0 . 3 mg・ L +N A A 0 . 0 3 m g・ L ‘ 。 ,最 适 宜 分 化 培 养 基 的添 加 物 为 1 0 % 土 豆 提 取 液 ,最 适 宜 生 根 培 养 基 添 加 物 为 熟 香 蕉 皮 。 关 键 词 :铁 皮 石 斛 ;毛状 茎 ;分 化 中图 分 类 号 :S 5 6 7 文 献标 志 码 :B 文 章 编 号 :0 5 2 8 — 9 0 1 7 ( 2 0 1 4 )o 2 - o 1 9 2 - o 3
6 一 B A 0 . 1 m g・ L +N A A 0 . 1 0 m g ・L ~;A 3 为 6 - B A 0 . 2 0 m g・ L +N A A 0 . 1 0 m g ・L ~;A 4 为 6 一 B A 0 . 2 0 m g・ L~ + N A A 0 . 0 2 m g・பைடு நூலகம் ~;A 5 为 6 - B A 0 . 3 0 m g・ L +N A A 0 . 0 3 m g・ L~ ;A 6 为 6 一 B A 0 . 4 0 m g・ L ~ +N A A 0 . 0 4 m g・ L ~; A 7 为 6 一 B A 0 . 4 0 m g・ L ‘ 。 +N A A 0 . 0 8 m g ・L ~;A 8 为 6 一 B A 1 . 0 0 m g・ L ~ }N A A 0 . 5 0 m g ・L ;A 9 为 6 - B A 1 . 2 0 m g・ L +N A A 0 . 0 8 m g・ L ~;A 1 0 为
铁皮石斛的组织培养

由于石斛自然繁殖力极弱,生长缓慢,加之人们掠夺性采挖,资源已严重枯竭。
而石斛栽培一直未解决其存活率低、进入盛产期年限长等问题,故石斛药源一直处于紧张状态。
因此,组织培养、遗传转化、菌根技术、悬浮培养等生物技术在石斛的应用意义重大,甚为迫切。
石斛的组织培养,可用种子、根、茎尖、茎节及叶等为外植体,但以种子进行组培快繁的为多。
原球茎的增殖分化是石斛试管苗繁殖的关键,因此,研究原球茎增殖分化的适宜培养条件非常重要。
特别是应用组织培养技术快速大量繁殖石斛试管苗,是解决其种苗与发展生产的有效途径。
铁皮石斛的组织培养铁皮石斛,又名铁皮兰、节草、耳环石斛等。
野生铁皮石斛为国家珍稀濒危保护植物(三级)。
由于其生长环境要求特殊,野生资源已濒临灭绝。
现云南晨安生物科技开发有限公司对铁皮石斛的组培快繁已获成功,月出苗量50万瓶以上,为铁皮石斛工厂化育苗和大面积栽培闯出了一条新路。
1 胚培养(种子培养):取人工授粉的铁皮石斛果实,用75%的乙醇表面消毒,30s后再用0.1%升汞溶液消毒8min,无菌水冲洗4~5次。
在无菌操作下,把果实切成0.1mm见方的小块,接种到培养基上,每瓶3~5块。
研究结果表明,N6培养基对种子萌发和生长最好,蔗糖浓度2%最佳,NAA浓度0.2~0.5mg/L最适合胚的萌发和生长;种子培养中加入椰乳对胚萌发和萌发后的初期生长起促进作用;而香蕉汁对继代培养中石斛的生根和壮苗起促进作用,生根和壮苗培养中不加入NAA,只用N6+10%香蕉汁,苗长得更粗壮。
培养温度25~28℃,光照强度1600~2000lx,每日10~12h。
种子萌发后,转管3~4次,当幼苗长出4~5片真叶并具有3~4条1~2cm长的根时,可将试管苗进行炼苗后移栽。
在实验中尚发现,石斛原球茎的增殖与胚龄相关,不同胚龄培养,其萌发率不同:胚龄45天以下,萌发率极低,萌发时间长;60天胚龄的胚具34个细胞,萌发率为6%;90天胚龄的胚细胞为74个,萌发率为87%;120天胚龄的细胞数为90个,萌发率95%以上。
铁皮石斛原球茎组织培养研究进展

一••琴••零••零••琴••琴■■琴丨••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴••琴••琴••零••零■•零■•零■•零■•琴■•琴■•琴f文章编号:1002-0659 (2018) 02-0036-05I|铁皮石斛原球茎组织培养研究进展i专题综述t张鑫!(天津创世生态景观建设股份有限公司,天津南开300000)摘要:铁皮石斛是我国传统的名贵中药材,具有很高的药用价值,其所含的主要成分为石斛多糖和生 物碱。
由于长期的采挖,自然资源日益枯竭,现阶段铁皮石斛的种苗主要通过组织培养方法获得,但 在培养过程中存在诸多问题如出苗的成本过高,幼苗移栽成活率低,工厂化生产效率低等。
鉴于以上 问题,对于铁皮石斛原球茎的研究日益广泛,原球茎中含有同石斛苗相同的药用成分,通过大规模培 养来提取,同样可以满足药材市场对石斛的需求。
本文通过对相关文献的查阅,阐述了有关铁皮石斛 原球茎的组织培养方面的研究概况。
关键词:铁皮石斛;原球组织培养;多糖中图分类号:S682.1+9 文献标识码:A铁皮石斛(■O e/zdraW M m q^dna/e Kimura et Migo)是兰科(Orchidaceae)石斜属(Dendrobium)多年生附生草本植物,因其老基外呈黑色,又名为黑节草,是名贵中药,居“中华九大仙草”之首,所含的主要成分为石斛多糖及生物碱,另外,还 有酚类、菲类、芪类、倍半萜类及香豆素等。
现 代药理研究证明石斛多糖具有抗肿瘤、增强免疫 力的功能。
但由于铁皮石斛生长环境特殊,以及 长期采挖,自然资源日趋枯竭,已被国家列为重 点保护的野生药材。
从20世纪中期开始就有关 于铁皮石斛的研究,主要涉及组织培养方法、有 效成分含量和药理作用方面的研究。
随着研究的 深人,发现铁皮石斛在组织快繁过程中存在一些 问题,例如通过组培生产出苗的成本过高,幼苗 移栽成活率低,工厂化生产效率低。
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A=6@ 8
,在总结 前 人
的研究经验下, 本文针对扩大繁殖系数, 提高瓶苗
39 材料与方法
343 材 料 铁 皮 石 斛 试 管 苗 在 培 养 的 过 程 中 分
化出的原球茎, 每个原球茎呈小圆锥状, 多个原球 茎聚生在一起, 呈 桑 椹 状 49 原 球 茎 顶 端 有 鳞 片 状 的 叶原基突起, 呈淡绿 色 , 未有真叶分化; 丛生芽由原 球茎分化而来, 无根, 具 3 !? 片 真 叶 , 簇生, 未能单 独分离成株 49
,NOK3) P) *22,’-NOK3 或 M2H’,NOK3) P) *22,’-NOK3 的 激 素 比 例 为 佳 ; 原 球 茎 分 化 以 GK!L; 添 加
丛 生 芽 的 生 长 中 以 H,Q蔗 M2!’,NOK3) P) *22,’!NOK3 或 M2H’,NOK3) P) *22,’!NOK3 的 激 素 比 例 为 佳 ; 糖浓度的培养基为佳; 生 根 壮 苗 中 最 佳 的 附 加 物 为 香 蕉 R) 铁皮石斛; 组织培养; 原球茎; 丛生芽 【 关键词】 ( +,,- ),HS ,,""S ,I 【 中 图 分 类 号 】" #$%【 文 献 标 识 码 】 &【 文 章 编 号 】G,,ISI"JG
的实验设计 培养基中添加的蔗糖为市售的食用 白 糖 49 选 取 3,* 左 右 , 具 有 3!? 片 真 叶 的 无 根 的 丛 生芽, 每 丛 直 径 约 3,* , 接种于以下 J 种含不同浓 度白糖的培养基中 ( 见 表 ? ), 每 种 培 养 基 接 种 3: 瓶, 每瓶接种 = 丛, 每个浓度随机取出 = 瓶 @:. 后 , 进行统计 49 表 ?999 丛 生 芽 生 长 实 验 不 同 蔗 糖 浓 度 的 培 养 基 组合
-
广西 玉林 -HJ,,,F =G 、 !’ 玉林师范学院 化学与生物系 副教授, 、 玉林师范学院 化学与生物系 生物科学专业 广西 玉林 -HJ,,,F =H -’ +,,+ 级本科生, 广西 玉林 -HJ,,,F =I’ 玉林师范学院 化学与生物系 生物科学专业 +,,G 级本科生,
筛选适宜铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮苗的培养基, 提高继代扩繁系数和 【 摘 要】目 的 : 组培苗的质量! 方法: 在相同的培养条件下, 把相同发育阶段的原球茎接种于含不同激素比例的培养 基中生长; 把丛生芽接种于蔗糖浓度不同的培养基中生长; 把相同高度的幼苗接种于含不同附加物的 原 球 茎 的 增 殖 以 GK!L; 添 加 M2!’ 培养基中生长; 对结果所产生的不同生长状况进行综合分析! 结果:
是兰科石斛属多年 2(#.3)又 名 黑 节 草 , 生草本植物,常附生于疏林中的树干或
碳岩地区岩石上, 主要分布于云南、 广西、 福建、 台 湾等地 49 4+ 铁皮石斛作为我国 传 统 名 贵 中 药 材 之 一 , 是石斛药材中的上品 49 石斛中 含 有 石 斛 碱 , 4+ 据报道, 石斛次碱, 石斛宁等多种生物碱, 并证实它具有滋 阴清热, 生津益胃, 润肺止咳等功效 49 4+ 现 代 药 理 研 究 表明: 石斛还具有抗 肿 瘤 、 抗衰老, 增强人体免疫力
-
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数 学 研 究 与 教 学
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率低, 生长速度缓慢, 其种子细如粉尘, 每粒重约 必须与真菌共生才能萌发, 自然条件下 :47 ! :4;9)< :4;+)< , 发芽率一般不足 =M => 49 多年来一直靠采挖野生植株
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34?4?9 培 养 基 中 的 蔗 糖 浓 度 对 丛 生 芽 生 长 影 响
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玉林师范学院学报 ( 自然科学)
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