生化仪器中的空白定标和质控
生化检验中的定标
生化检验中的定标 Revised final draft November 26, 2020定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时，无论是手工或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K值，计算出来的结果对我们就有意义了。
K 值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定，经过仪器测定出这两个吸光度，即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)PS：A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
任何标本，用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。
K值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响，如果仪器稳定，试剂也稳定，那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的？一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说K值是准确的，用这个K值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性由仪器与试剂决定，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K=(TV×1000)/(SV×L×ε)二是用有酶项目的定标液得出K值（K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)）：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化检验中的定标
定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂状态确定下来的。
当我们测定一个标本时，无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性。
那就要乘上一个K值，计算并打印出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般上最低要求是由试剂空白与标准品。
经过仪器测定出两个吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
无论什么样的标本，用其吸光度乘以K值我们就得到了答案。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。
K值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器状况、试剂状况的影响，如果您的仪器相当稳定，试剂是影响K值的一个主要因素。
如何确定K值是正确的？一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说K 值是准确的，用这个K值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性决定您的仪器与试剂，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化检验中的各种空白概念时间:2009-5-8 9:54:09,点击:61 对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论(包括本论坛高手们发表的一些意见)并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充:空白概念区别要点:**空白=只含**的空白（吸光度）1、试剂空白：由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度，所以从理论上说，所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除。
生化常见概念
关于参考范围、质控范围、靶值、定标浓度、重复性、cv值、相对误差概念及相互关系参考范围：通过临床试验选定不少于100个正常人群血样本，经全自动生化分析仪测定，所得测定值用统计学方法处理，并计算参考范围。
在我们生化仪软件项目参数设置中指的就是每一个测定项目都有一个正常的范围值。
定标是前提质控是保证质控范围：质控（Quality Control）为达到规范或规定对数据质量要求而采取的作业技术和措施。
就是把它当成标本来测试有的有商家给定的靶値有的没有都可以通过绘制质控图了解机器的稳定性相对误差则是绝对误差与真值的比值，因此它是一个百分数。
一般来说，相对误差更能反映测量的可信程度。
相对误差等于测量值减去真值的差的绝对值除以真值，再乘以百分之一百。
如上图所示，0SD就是靶值即浓度，测定项目时肯定会有偏差，在+-1SD以内质控测试非常好，+-2SD以内还勉强可以，+-3SD 以内质控结果需再重新测试定标和质控。
靶值：移除无关值后,参与的全部试剂反应的平均值.先按照分析仪的仪器类型对参加实验室进行分组，以各组的加权均值作为靶值。
在我们仪器中靶值即是质控液的浓度。
定标浓度：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（A=KCL）。
它是由仪器与试剂状态确定下来的。
当我们测定一个标本时，无论您是用手工的方法还是全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没什么意义，我们要把吸光度转换成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K值，计算并打印出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们定标出来的。
定标时我们需要的修改的参数有：定标液浓度（说明书上都有，多标准浓度计算后浓度由小到大依次排序）、杯号（定标液放在样品杯的位置）、定标模式、重复次数、重复性：也是CV值。
Cv：变异系数（coefficient of variation）。
标准变异系数是一组数据的变异指标与其平均指标之比，它是一个相对变异指标。
变异系数有全距系数、平均差系数和标准差系数等。
日立全自动生化分析仪使常规用指导
4.清除昨日安排及结果
操作步骤：
点击观看图例
删除选定数据
Batch Delete
删除全部数据
一、质控的测定
质控
1.质控编排：由于质控项目、靶值、标准差等参数是由 实验室该仪器的管理人员固定设置好的,因此不需要参照 操作手册每日进行操作。
2.运行质控：
点击观看图例
二、质控数据的确认
1.日内质控数据确认
在完成环境因 素分析和SWOT 矩阵的构造后, 便可以制定出 相应的行动计 划。
SW优势与劣势分析 内部环境分析
……
产品的 质量
服务 态度
提高公司 盈利性
服务的 及时性
产品的 适用性
产品线 的宽度
竞争优势可以指消费者眼中一个 企业或它的产品有别于其竞争对 手的任何优越的东西。
产品价 格
产品的 可靠性
PEST法
政治／法律:
•垄断法律 •环境保护法 •税法 •对外贸易规定 •劳动法 •政府稳定性
经济
•经济周期 •GNP趋势 •利率 •货币供给 •通货膨胀 •失业率 •可支配收入 •能源供给 •成本
社会文化
•人口统比收入 分配 •社会稳定 •生活方式的变 化 •教育水平 •消费
技术
•政府对研究的 投入
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结果的传输
该仪器正常情况下应自动向LIS传输结果数据。 当遇LIS故障导致数据不能自动传输的情况下,执行以下操作
用鼠标选中需 要传输的结果
点击观看图例
注意：当遇LIS故障时可导致7180传输端口自动关闭。LIS故障排除 后应检查7180传输端口是否关闭,如关闭需打开后再进行手工传输操 作。
SWOT分析传统矩阵示意图
生化相关名词定义与测量点计算详解
测量时间-以日立7180为例
测量时间-以日立7180为例
起始加入样本+第一试剂，第16-17点加 入第二试剂，18秒/点，10min反应34点。
1 Point-测光点
被测物质在反应过程中完全转变为产物，整个反应达到平衡，即反应达到 终点，反应液的吸光度不再增加（或降低），根据终点吸光度的大小求出 被测物的浓度。
只设置一个测光点 测光点=反应开始点+孵育时间/18秒 ALB:基本参数 分析方法：终点法 主波长：630nm 副波长：700nm 反应方向：正 样本量：3μl 试剂量：300μl 孵育时间：2min 温度：37℃ 比色杯光径：1cm 测光点=1+120/18=8
2 Point End-测光点
如若吸光系数 (ε)未知，我们就需要采用定标
曲线来计算待测物的浓度。
A
70
60
50
吸 40 光 度 30
20
10
待测样本
标准品
1
23 45 6
浓度C
C样= 待测样本浓度 C标= 标准品浓度 A样= 样本据朗伯-比耳定律 A = εCL 样本浓度 C样 = A样／εL 标准浓度 C标= A标／εL
计算公式推导-一点终点法
一点终点法：被测物质在反应过程中完全转变为
产物，整个反应达到平衡，即反应达到终点，反 应液的吸光度不再增加（或降低），根据终点吸 光度的大小求出被测物的浓度。
以上页两公式做比值：
C样 A样=／εL
C标 A标／εL
即求出样本浓度 C样 = A样／A标×C标
计算公式推导-两点终点法
朗伯-比耳定律定义
检验科生化室内质控办法
1检验科生化室内质控方法一、质控的概念。
质量控制是为了监测和评估本实验室的工作质量，以此决定本实验各检验可否发出的检查、控制手段。
二、1、OCV：表示本实验室在目前最佳条件下某项目所能达到的最好精密度水平。
其基本原则是，OCV测定需采用与常规工作相同的试剂、仪器及检测方法。
一般来说，实验室都用OCV测定来确定本室新开展的一项新项目的精密度，如果数值偏大，则说明该测定方法可能不稳定，不成熟，应该尽量避免在本实验室使用该方法。
三、2、RCV：表示本实验室在目前条件下，常规工作中某项目检验的精密度水平，是室内质控中靶值和允许误差范围确定的依据。
在第一次测定OCV后及每更换一次质控血清批号后，均应对新质控血清进行RCV测定。
一般实验室的质控工作都是以RCV为标准的。
四、3、RCVK：表示常规条件下对定值血清测定的变异。
在RCVK中，根据RCV数据所绘制的“空图”，对于同一批号的质控品是不变的。
不得将当月的检测结果代替RCV测定中的数据来绘制质控图。
五、4、RCVU。
常规条件下未定值血清测定的变异。
六、。
在建立七、二、准备工作。
八、1、建立质控的规章制度及普及质控知识。
质控工作的开展，是需要耗费大量的时间与精力的，还需要掌握大量的质控知识。
这就需要在平时的工作中下大力气规定出一些制度来实施质控的工作，并在检验科中多加强这方面的学习，使每个员工都掌握一定的质控知识，才能让员工在平时的工作中加以用心，把质控工作开展起来。
九、2、定期检校仪器。
对使用的仪器定期进行检查和校正，并建立完善的资料数据，以便在质控工作开展起来后，分析数据时加以应用。
十、3、制备生化质控血清。
质控工作的开展需要大量的质控血清，而假如全部从试剂公司购置的话，是笔不小的开支。
可以采取多份血清标本，混合后分装冻存作为质控血清使用。
自制质控血清最好一次性制备够半年甚至是一年的量。
在检验过程中应注意防止肝炎感染。
在使用冻存的质控血清时，必须使其完全融化并达到室温后方可测定。
生化检验中的定标
生化检验中的定标(总3页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时，无论是手工或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K值，计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定，经过仪器测定出这两个吸光度，即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白) PS：A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
任何标本，用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。
K值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响，如果仪器稳定，试剂也稳定，那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的？一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说K值是准确的，用这个K值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性由仪器与试剂决定，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K = (TV × 1000)/(SV × L× ε)二是用有酶项目的定标液得出K值（K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)）：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化质控规则
生化质控规则生化质控规则是在进行生化检验时，为了确保结果的准确性和可靠性而采用的一套质量控制方法。
这套规则主要包括以下几个部分：1.样本采集与处理：确保采集的样本符合标准，无污染、无变质。
处理过程中要遵循无菌操作原则，避免样本被污染。
同时，要保证样本的储存温度和时间符合要求，以保持其生物活性。
2.仪器与试剂：使用的生化分析仪应经过校准，确保测量准确。
试剂的品质、纯度以及有效期都要得到保证，避免因试剂问题导致的结果误差。
3.室内质控：通过采用已知浓度的质控品，在生化分析仪上进行多次测量，以评估仪器的稳定性。
通过室内质控可以及时发现仪器故障或操作中的问题，并进行相应的调整。
4.室间质评：通过与其他实验室进行比对，评估本实验室的生化检测结果是否与其他实验室一致。
室间质评有助于发现实验室的系统性误差，进一步提高结果的可靠性。
5.标准操作程序：制定并执行标准化的操作程序，确保每一步实验操作都符合规范。
这包括样本的采集、处理、分析、存储和报告等环节。
通过标准化操作，可以减少人为误差，提高实验的一致性。
6.数据审核与复查：对每一个生化检测结果进行审核，确认其是否合理、可靠。
对于异常值或离群点，应进行复查或重新实验，以排除可能的误差来源。
7.持续改进与培训：定期对生化质控规则进行更新和改进，以满足技术和标准的不断提高。
同时，对实验室人员进行培训和教育，提高他们的技能和意识，确保他们能够遵循这些规则。
通过以上七个方面的生化质控规则，可以有效地提高生化检测的准确性和可靠性，为临床诊断和治疗提供可靠的依据。
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第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准 确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响，如果您 的仪器相当稳定，试剂是影响K值的一个主要因素。 如何确定K值是正确的？ 一般我们用质控血清来检 查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果 很好，可以说K值是准确的，用这个K值计算出来病 人的结果也是准确的，所以K值非常关键。 K值的真 面目： K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白， 试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性决定您 的仪器与试剂，如果仪器与试剂都十分稳定，那K 值也很稳定。 多长时间定一次标合适？ 这要看您 试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空 白可以解决，有些项目要做两点定标。 酶的项目如 何确定K值： 一是计算出来的理论K值； K = (TV × 1000)/(SV × L × ε) 二是用有酶项目的定标液得出K 值：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有 底物类的项目，也有酶类的项目。
(仪器的精度、波长的准确度) 检测方法的选择和评价 （重复实验、回收实验、干扰实验、方法比较实验） 试剂和标准品的选择和评价 （线性范围测定、反应曲线的观察、稳定性实验） 标本准备 （血清、血浆、胸腹水等)
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生化检验中的各种空白概念
1、试剂空白： 由于生化测试测量的吸 光度为相对吸光度，所以从理论上说，所 有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光 度扣除。试剂本身的吸光度就是 试剂空白。 测量方法是按照正常测试的试剂和样本量
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把样本换成蒸馏水来测量。 在传统手工方法 中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、 空白管。其中空白管是试剂加蒸馏水，测出来也 就是试剂空白。因为 操作环境、仪器状态、试剂
生化中的定标和空白
定标的意义： 定标就是要找出一个参考点，就是一个K值 （或F值）。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测 定一个标本时，无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪， 测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意 义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性。那 就要乘上一个K值，计算并打印出来的结果对我们就有意义 了。K值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是由 试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度。 K=标准 浓度/(A标准－A试剂空白) 标准液的浓度我们是知道的，这 两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。无论什 么样的标本，用其吸光度乘以K值我们就得到了答案。因此， K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。 K值 的决定因素： 我们看看K值会受到什么影响呢？ 第一，标 准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为 基质的）。
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2、样本空白： 由于溶血、脂血、黄疸等情况， 会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。
所以对样本本身吸光度的测量，即样本空白，可 以去除这 方面的影响。测量方法是按照正常测试
的试剂和样本量，把试剂换成蒸馏水或生理盐水 来进行测量。自动生化仪上，很难界定样本空白。
与消除样本空白有关的大约有如下几点: a).在双 试剂测定时，加入试剂1和样品后的吸光度可一定 程度上扣除样本空白，所以有单 试剂不能扣除样
个预先保存的值。这种做法，对于比较稳定的试 剂来讲，对结
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果影响不大。 通俗的讲，日立的仪器工作流 程中首先是将标本加入到比色杯中，然后依次加 入R1试剂、R2试剂，所以试剂空白在每个测定项 目曲线 中是无法看到的。但是7600从 CALIBRATION中是可以看到的，S1ABS就是代表 试剂空白吸光度，在CALIBRAT ION画面里的下 方找到Reaction Monitor（反应监察），其中STD(1) 就是代表试剂空白反应曲线.为了减小误差，日立 仪器会连续做两次测定，所以你看到 FIRST和 SECOND两条，计算时是取他们的平均值。做试 剂空白目的之一就是观察试剂是否稳定，积极采 取措施纠正。对于日立 的这种试剂空白测定很多 仪器都采用这种方法，也叫做试剂空白校准。 总的说来，自动生化仪上的试剂空白一般表现为 零点吸光度，该吸光度是通过校准确立的。
本空白的说法。 b).现在优质的试剂的抗干扰能 力都比较强，比如有些双试剂，R1加入后先和样 本孵育一段时间，将血红蛋白、脂肪
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胆红素等反应 掉，再加入R2开始测定反应。在一 定范围内都可以消除样本空白。 c).现代全自动 生化仪大多采用双波长测定.双波长测定的原则是 根据干扰组分和待测物质吸收光谱的峰形特征， 选择两个波长和 ，使干扰组分在这两个波长处的 吸光系数相等，而使待测物质在两波长处的吸光 系数有显著差别。以两波长分别测定分析溶液的 吸光度， 以两个吸光度值之差(△A)计算。这也可 以扣除一部分样本空白. d).有些仪器,例如日立 系列,有专门的“血清信息”功能的设置。做法都 是单 独占用一个空白通道来计算，这也叫做样品 空白校准。 3、水空白： 比色杯在加入水以后 的吸光度。水空白的意义主要是对光路系统进行 检查和校正，如光源，比色杯等，同时在计算中 起到消除“杯差”的 作用。日立7060中的Cell Blank（杯空白）测定的就是水空白。
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全面质量控制的内容
全面质量控制的内容主要包括分析前、分 析中、分析后这三个主要过程的质控。
只有认真的检测和控制这三个过程中各个 环节可能出现的误差，才能保证最后检测 结果的准确性，才能达到我们的质量要求。
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8
（一）分析前质控
人员培训 实验室的设置 （水、电、相关设备、用具等） 实验仪器的质量保证
稳定性等变异，所以要求每次都要测定试剂空白， 称为实时试剂空白。 在全自动分析仪上，大
体上是模拟手工操作。但许多全自动分析仪为追 求速度，在设计上采用一些折中方法来测定试剂 空白。以日立全系 列生化仪为例。该系列分析仪
是做不了实时试剂空白，因为它们全是先加入样 本后加试剂，为了折中，只好在定标时做一个试 剂空白，保 存起来，需要扣除试剂空白时再减这