液质使用操作规程

液质联用仪操作规程

CG-YF1358-2010 1操作前检查

1.1 检查氮气和氩气的出口压力，压力分别为0.5~0.6MPa和0.1~0.2MPa

1.2检查洗针溶液和流动相

1.3 流动相须现配并超声，缓冲盐溶液过0.22μm微孔滤膜（或者使用色谱纯的盐溶液和酸溶液）

1.4 如使用溶融石英进样管，操作前应检查石英管是否拉长，确保其未超出ESI探针尖端。

1.5 检查系统真空度，电离真空计读数（分析仪区域）应小于5×10-6 Torr。

1.6 检查废液液位，及时清空废液。

2操作步骤及注意事项

2.1 开机

2.1.1 打开UPS电源

2.1.2 打开质谱电源，即打开质谱主电源开关（Main Power Switch）至On（/）位置；打开真空开关（Vacuum Switch）在Operational状态；用密封垫或者放电针堵上离子传输毛细管；真空开关开启约10小时后，打开电子开关Electronics Service Switch）在Operational状态；

2.1.3 打开计算机（此时液相和质谱内置的CPU会通过网线与电脑主机建立通讯联系，这个时间大约要1～2分钟）

2.2双击Quantum tune图标，进入质谱界面，点击Quantum Tune Master界面上图标，查看质谱状态，确认Fore Pump Pressure为1.0~1.5 mTorr，Ion Gauge Pressure小于6e-6 Torr。

2.3 打开自动进样管理器和液相泵的电源

2.4 化合物ESI/MS/MS质谱条件优化建立

2.4.1. 双击桌面图标，打开Quantum Tune Master 界面；

2.4.2. 在Tune Master 中界面上，选择菜单Workspace，选择Compound Optimization

Workspace 按钮，显示Compound Optimization 工作界面；

2.4.

3. 设置优化参数：

A. 选择Optimization Modes (优化模式)：MS Only按钮；

B. 在Optimization Mass 列表中，输入母离子质量数;

C. 在优化参数列表中，选择() 优化的参数(Spray V oltage，Sheath gas pressure，Aux gas

pressure，Tube lens offset，Skimmer offset)；

D. 单击Start 按钮，开始优化；优化结束后, 选择Accept按钮；

E. 选择Optimization Modes (优化模式):MS+MS/MS按钮；

F. 在Optimization Mass 列表Num product 列中，输入子离子个数(1~8)；

G. 在优化参数列表中, 选择() 优化的参数(Collision energy)；

H. 单击Start 按钮，开始优化；优化结束后，选择Accept按钮；

I. 参数优化完成，保存质谱方法：选择Save tune as 按钮，选择保存位置，输入文件名称，

保存质谱方法(.TSQTune文件)；

J. 单击定义扫描模式Define scan 快捷图标，在扫描模式区单击鼠标右键, 选择Copy scan event。

2.5 化合物LC/MS/MS方法建立

2.5.1. 双击桌面上LC Quan快捷图标,点击Creat a New Workbook，输入相应Study Name（研究课题的名称等）及Workbook name（实验的名称和日期），继续点击next，选择同一文件夹里已存在的workbook，即导入该项目的方法（首次编辑方法时不选择该项）。继续点击Next，进入LCquan主界面

2.5.2. 在LCquan主页上，点击Instrument Setup按钮，建立LC/MS/MS方法；

2.5.2.1. 设置液相色谱部分参数：

A. Surveyor自动进样器参数设置：

1) 点击Instrument Setup窗口中的Surveyor AS图标；

2) 输入Wash Volume (如400 μl)，Flush Volume (如400 μl)；

Injection Volume：进样量，若定量环为25ｕL，Partial Loop部分进样一般设置为10ｕL（即小于定量环体积的1/2），（建议使用Partial Loop部分进样）；若需Full Loop满环进样，则设置为25ｕL

Needle Height from bottom：2.0mm

Syringe Speed（ｕL/s）：8.0

Flush Volume：如400ｕL

Flush/Wash Source：Bottle

Wash Volume：如400ｕL

Tray Temperature：10℃左右（视样品性质而定）

Column Oven Control：35℃左右（视样品性质而定）

B. Surveyor 液相泵的参数设置：

1) 点击Instrument Setup窗口中Surveyor pump图标；

2) 输入A，B，C，D流动相名称，Column Description(色谱柱标注)；

3) 设置流动相条件(流动相比例，流速等)；

点击Pump General，输入A、B、C、D各相代表流动泵中的流动相溶液的名称，最大柱压设定为400.0Bar；点击Gradient Program，设定流动相梯度，可以使用等度洗脱或梯度洗脱。2.5.2.2. 设置质谱部分(TSQ Quantum)参数:

点击Instrument Setup窗口中的TSQ Quantum图标;

1) 图中第一栏Run setting是设定样品的运行时间（MS Acquire Time）是否使用分段扫描（Segments）等

MS Acquire Time：样品的运行时间

Segments：若被测化合物较多时，可设置此项

Scan Events：设定扫描事件

Tune Method：即在Quantum Tune软件下优化的目标化合物的质谱条件

Scan Events 1：对于定量分析来说我们经常使用的是SRM（选择反应监测），需要设定母离子和子离子，扫描时间和各子离子的碰撞能量。

2) Same value for all SRMs

Scan Witdth（m/z）：0.002~5

Scan time：0.5左右（具体值是扫描点数而定）