DMEM培养基配方
DMEM高糖配方培养基
DMEM高糖配方/F12培养基说明书产品代号：MD207-050一．【组成成分】成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68二．【产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解，溶液澄明。
pH值①加NaHCO3 6.60～7.20②不加NaHCO3 5.50～6.10水分（%）≤5.0渗透压（mOsm/kgH2O）①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238～263细菌内毒素（EU/ml）≤10微生物检查（CFU/g）≤1000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛应用于细胞培养、病毒繁殖和实验室研究中。
DMEM培养基含有多种必需和非必需氨基酸、糖类、维生素和盐类成分，提供了生长细胞所需的营养和环境。
以下是DMEM培养基的配制方法。
配制DMEM培养基的主要成分包括基础培养基、补充物和pH调节剂。
基础培养基：1.准备适量的无菌去离子水，用于稀释和配制DMEM培养基。
补充物：1.氨基酸：将提供的无菌氨基酸液中的每种氨基酸均匀混合，制得氨基酸混合液。
如有需要，可以根据实验需求添加特定的氨基酸。
2.糖类：将葡萄糖溶液与无菌去离子水混合，配制成葡萄糖溶液。
3.维生素：将提供的无菌维生素溶液与去离子水混合，制得维生素溶液。
4.盐类：将提供的无菌盐溶液与去离子水混合，制得盐溶液。
pH调节剂：1. 英文名Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）：是一种常用的pH缓冲剂。
取适量的Tris溶液。
2. 英文名Sodium bicarbonate：是一种重要的pH调节剂，可提供细胞培养中所需的碱性环境。
取适量的Sodium bicarbonate溶液。
先准备好所需的试剂和仪器，并保证它们是无菌的。
配制过程如下：1.取适量的基础培养基（DMEM），移至无菌培养瓶中。
2.依次向DMEM基础培养基中加入补充物。
首先加入氨基酸混合液，根据提供的比例将其加入培养基中，充分混合。
然后加入葡萄糖溶液、维生素溶液和盐溶液，依次混合均匀。
3. 加入适量的Tris溶液，用于调节pH值。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Tris溶液，同时用pH计测量pH值，直到达到所需的pH范围（通常为7.2-7.4）。
4. 加入适量的无菌Sodium bicarbonate溶液，用于调节和维持培养基的碱性环境。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Sodium bicarbonate溶液，充分混合。
DMEM培养基配方
DMEM培养基配方DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种常用的培养基，常用于细胞培养和病毒培养中。
该培养基是由Eagle在1961年发展而来的，并在之后被Dulbecco所改进，增加了可以用于细胞培养的组分。
DMEM培养基具有良好的细胞生长和维持能力，适用于多种细胞系的培养。
以下是DMEM培养基的标准配方：成分（每1升DMEM培养基）：-无菌去离子水1000mL- 葡萄糖（D-葡萄糖） 1000 mg- L-谷氨酰胺 584 mg-青霉素/链霉素100单元/mL-菌脂体抗生素混合物（氰胺苯胂和核黄素酮）10mL-青霉素/链霉素抗生性混合物10mL- 乳酸 660 mg- 杂酸钠 200 mg- 高氨基酸（L-谷氨酸，L-赖氨酸，L-Leu，L-异亮氨酸，L-Lys，L-Met，L-Phe，L-Thr，L-Trp，L-Arg，L-His，L-Ile，L-Val） 2 mL - L-胱氨酸 4 mg- 胖利钠 392 mg-维生素溶液（1X）10mL-必需氨基酸溶液10mL-非必需氨基酸10mL-小牛血清10%各组分的详细介绍如下：1.无菌去离子水：用于稀释和制备培养基，确保培养基的无菌。
4.青霉素/链霉素：抗菌药物，避免培养基中细菌的污染，浓度为100单元/mL。
5.菌脂体抗生素混合物：混合了氰胺苯胂和核黄素酮，提供对细菌和真菌的广谱抗生素覆盖。
6.青霉素/链霉素抗生素性混合物：对细菌的广谱抗生素覆盖。
7.乳酸：调节培养基的酸碱平衡，以维持适宜的细胞生长环境。
8.杂酸钠：提供缓冲剂，维持培养基的pH值稳定。
9.高氨基酸：添加了多种必需氨基酸，为细胞提供生长所需的氨基酸。
10.L-胱氨酸：提供了硫含量丰富的氨基酸，对细胞代谢和抗氧化有重要作用。
11. 填充无机盐 392 mg：提供一些无机盐，维持细胞代谢所需的电解质平衡。
12.维生素溶液（1X）：提供维生素，满足细胞生长过程中的营养需求。
DMEM-F12培养基成分
DMEM/F12培养基说明书产品代号：MD207-050【组成成分】成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042五水硫酸铜 0.0013 L—赖氨酸盐酸盐 91。
25 硫辛酸 0。
105 九水硝酸铁 0。
05 L—蛋氨酸 17。
24 酚红 8.1七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081氯化钾 311。
8 L-丝氨酸 26。
25 丙酮酸钠 55氯化镁 28.64 L—苏氨酸 53。
45 维生素H 0.0035无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2。
24氯化钠 6999.5 L—天门冬酰胺 7。
5 氯化胆碱 8。
98无水磷酸二氢钠 54。
35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠 71。
02 L—半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6 七水硫酸锌 0.432 L—谷氨酸 7.35 烟酰胺 2。
02L—精氨酸盐酸盐 147.5 L—脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2L—胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031L-谷氨酰胺 365 L—酪氨酸 38.4 核黄素 0.219甘氨酸 18.75 L—缬氨酸 52。
85 盐酸硫胺 2.17L—组氨酸盐酸盐 31.48 D—葡萄糖 3151 胸苷 0.365 L—异亮氨酸 54。
47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68 【产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解,溶液澄明。
pH值①加NaHCO3 6。
60～7。
20②不加NaHCO3 5.50～6。
10水分（%）≤5。
0渗透压（mOsm/kgH2O）①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238~263细菌内毒素（EU/ml）≤10微生物检查（CFU/g）≤1000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10%小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml 增加到105细胞/ml。
DMEM、F12培养基配置方法
DMEM/F12培养基（华越洋生物）DMEM/F12培养基说明书一．【组成成分】成分mg/L 成分mg/L 成分mg/L无水氯化钙116.6 L-亮氨酸59.05 亚油酸0.042五水硫酸铜0.0013 L-赖氨酸盐酸盐91.25 硫辛酸0.105九水硝酸铁0.05 L-蛋氨酸17.24 酚红8.1七水硫酸亚铁0.417 L-苯丙氨酸35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081 氯化钾311.8 L-丝氨酸26.25 丙酮酸钠55氯化镁28.64 L-苏氨酸53.45 维生素H 0.0035无水硫酸镁48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24 氯化钠6999.5 L-天门冬酰胺7.5 氯化胆碱8.98 无水磷酸二氢钠54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠71.02 L-半胱氨酸盐酸盐17.56 i-肌醇12.6七水硫酸锌0.432 L-谷氨酸7.35 烟酰胺 2.02L-精氨酸盐酸盐147.5 L-脯氨酸17.25 盐酸吡哆醛2L-胱氨酸盐酸盐31.29 L-色氨酸9.02 盐酸吡哆醇0.031 L-谷氨酰胺365 L-酪氨酸38.4 核黄素0.219 甘氨酸18.75 L-缬氨酸52.85 盐酸硫胺 2.17 L-组氨酸盐酸盐31.48 D-葡萄糖3151 胸苷0.365L-异亮氨酸54.47 次黄嘌呤2 维生素B12 0.68 二．【产品指标】外观：粉红色固体粉末溶解性：完全溶解，溶液澄明。
pH值：①加NaHCO3 6.60～7.20②不加NaHCO3 5.50～6.10水分（%）：≤5.0渗透压（mOsm/kgH2O）：①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238～263细菌内毒素（EU/ml）：≤10微生物检查（CFU/g）：≤1000细胞生长试验细胞形态：与标准细胞形态相似细胞数量：加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
DMEM培养基配方
序号
化合物名称
含量(mg/L)
序号
化合物名称
含量(mg/L)
1
无水氯化钙.2H2O
265.00
18
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁.9H2O
0.10
19
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
20
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
21
L-酪氨酸
72.00
5
氯化钠
6400.00
22
含量(mg/L)
1
无水氯化钙
200.00
17
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁.9H2O
0.10
18
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
19
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
20
L-酪氨酸钠盐
104.00
5
氯化钠
6400.00
21
L-缬氨酸
94.00
6
无水磷酸二氢钠
125.00
22
D-泛酸钙
4.00
29
盐酸硫胺
4.00
13
L-异亮氨酸
105.00
30
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-亮氨酸
105.00
31
葡萄糖
1000.00
15
L-盐酸赖氨酸
146.00
32
丙酮酸钠
.00
33
酚红
17
L-苯丙氨酸
各种培养液的配方
各种培养液的配方不同的细胞类型和培养目的需要使用不同的培养液。
下面列举一些常见的细胞培养液配方及其用途。
1.DMEM培养液：DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种最常用的细胞培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。
以下是DMEM培养液的配方：-1×DMEM：将DMEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%胎牛血清（FBS）：将FBS加入1×DMEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）加入1×DMEM中，使最终浓度为1%。
2.RPMI1640培养液：RPMI1640是一种适用于淋巴细胞和白血病细胞的培养基。
以下是RPMI1640培养液的配方：-1×RPMI1640：将RPMI1640粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×RPMI1640中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×RPMI1640中，使最终浓度为1%。
- 2-mercaptoethanol：将2-mercaptoethanol加入1×RPMI 1640中，使最终浓度为0.05mM。
3.MEM培养液：MEM（Minimum Essential Medium）是一种用于哺乳动物细胞培养的基础培养液。
以下是MEM培养液的配方：-1×MEM：将MEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×MEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×MEM中，使最终浓度为1%。
-1×非必需氨基酸：将非必需氨基酸（如谷氨酰胺、苏氨酸等）加入1×MEM中。
细胞培养基及其配制方法
D ME M(A)细胞培养基（粉末型）成分会上升0.1到0.3，因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0.2到0.3。
培养基在过滤前要保持密封。
配制培养基要注意以下问题：●认真阅读说明书。
说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。
这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。
●配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。
●配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。
●所用器皿应严格消毒。
●配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。
●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素等的溶液，可节省科研人员的工作量。
DMEM各种成分都有什么作用一般的基础培养基包括四大类物质：无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物。
（1）无机盐：对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。
（2）氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型)都是细胞用以合成蛋白质的必需氨基酸，不能由其他氨基酸或糖类转化合成。
除此之外，还需要谷氨酰胺(glutamine)。
谷氨酰胺具有特殊的作用，对细胞的培养特别重要，能促进各种氨基酸进入细胞膜；它所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的来源，还是合成—磷酸腺苷、二磷酸腺甘和三磷酸腺苷的原料。
细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，谷氨酰胺缺乏可导致细胞生长不良甚至死亡。
在配制各种培养液中都应补加一定量的谷氨酰胺。
值得注意的是：谷氨酰胺在溶液中很不稳定，故4℃下放置1周可分解50%，使用中最好单独配制，置-20℃冰箱中保存，用前加入培养液中。
（3）维生素：是维持细胞生长的一种生物活性物质，在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶，对细胞代谢有重大影响。
（4）碳水化合物：是细胞生命的能量来源，有的是合成蛋白质和核酸的成分。
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13
L-异亮氨酸
105.00
30
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-亮氨酸
105.00
31
葡萄糖
1000.00
15
L-盐酸赖氨酸
146.00
32
丙酮酸钠
110.00
16
L-甲硫氨酸
30.00
33
酚红
9.30.00
17
L-苯丙氨酸
66.00
DMEM(H)细胞培养基（粉末型）成分
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
1
无水氯化钙
200.00
17
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁 .9H 2 O
0.10
18
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
19
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
20
L-酪氨酸钠盐
104.00
5
氯化钠
6400.00
21
L-缬氨酸
94.00
6
无水磷酸二氢钠
125.00
22
D-泛酸钙
4.00
7
L-盐酸精氨酸
84.00
23
氯化胆碱
4.00
8
L-盐酸胱氨酸
63.00
24
叶酸
4.00
9
L-谷氨酰胺
584.00
25
肌醇
7.20
10
甘氨酸
30.00
26
烟酰胺
4.00
11
L-盐酸组氨酸
42.00
27
核黄素
0.40
12
L-异亮氨酸
105.00
28
盐酸硫胺
4.00
13
L-亮氨酸
105.00
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁 .9H 2 O
0.10
18
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
19
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
20
L-酪氨酸钠盐
104.00
5
氯化钠
6400.00
21
L-缬氨酸
94.00
6
无水磷酸二氢钠
125.00
22
D-泛酸钙
4.00
7
L-盐酸精氨酸
84.00
23
氯化胆碱
序号
化合物名称
含量(mg/L)
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
1
无水氯化钙 .2H 2 O
265.00
18
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁 .9H 2 O
0.10
19
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
20
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
21
L-酪氨酸
72.00
5
氯化钠
6400.00
22
L-缬氨酸
29
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-盐酸赖氨酸
146.00
30
葡萄糖
4500.00
15
L-甲硫氨酸
30.00
31
丙酮酸钠
110.00
16
L-苯丙氨酸
66.00
32
酚红
15.00
DMEM(L)细胞培养基（粉末型）成分
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
1
无水氯化钙
200.00
17
4.00
8
L-盐酸胱氨酸
63.00
24
叶酸
4.00
9
L-谷氨酰胺
584.00
25
肌醇
7.20
10
甘氨酸
30.00
26
烟酰胺
4.00
11
L-盐酸组氨酸
42.00
27
核黄素
0.40
12
L-异亮氨酸
105.00
28
盐酸硫胺
4.00
13
L-亮氨酸
105.00
29
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-盐酸赖氨酸
146.00
30
葡萄糖
1000.00
15
L-甲硫氨酸
30.00
31
丙酮酸钠
110.00
16
L-苯丙氨酸
66.00
32
酚红
15.00
94.00
6
无水磷酸二氢钠
109.00
23
D-泛酸钙
4.00
7Байду номын сангаас
丁二酸
75.00
24
酒石酸胆碱
7.20
8
丁二酸钠
100.00
25
叶酸
4.00
9
L-盐酸精氨酸
84.00
26
肌醇
7.20
10
L-盐酸胱氨酸
63.00
27
烟酰胺
4.00
11
甘氨酸
30.00
28
核黄素
0.40
12
L-盐酸组氨酸
42.00
29
盐酸硫胺