结核病的实验室诊断方法学比较及进展


病流行病学抽样调查结 果显示 , 结核病 年发病患者数约为 1 3 0万。正因为我国结核病发病率居高不下 因此 如何快速检
验结核病对于我国控制及治疗结核病起到 了至关重要的作用。作 为医学检验工作者要充分掌握新 知识 、 新技术 , 在实 践 中灵活运用 , 优势互补 , 予找准确度高 、 特异性好 、 敏感度高 、 简便快捷 、 经济的结核分枝杆菌检测新方法 。 本 文从 细 菌学检测 , 免疫学检测和分子生物学检测 等方 面 , 对各种检 测方法 的优缺 点进行综述 , 并对结核病 实验室诊断技术进
mo l e c u l a r b i o l o g y d e t e c t i o n, t h e a d v a n t a g e s a n d d i s a d v a n t a g e s o f v a r i o u s d e t e c t i o n me t h o d s a r e r e v i e we d,
Ab s t r a c t : Tu b e r c u l o s i s i s a n i n f e c t i o u s d i s e a s e c a u s e d b y My c o b a c t e r i u m i n f e c t i o n, i s a s i n g l e p a t h o g e n i n f e c t i o n d e a t h s c a u s e d mo s t o f t h e d i s e a s e . Re s u l t s t u b e r c u l o s i s e p i d e mi o l o g i c a l r a n d o m s a mp l i n g s u r v e y i n C h i n a i n 2 0 1 0 s h o w e d t h a t t h e n u mb e r o f a n n u a l i n c i d e n c e o f t u b e r c u l o s i s p a t i e n t s i s a b o u t 1 3 0 0 0 0 0 . B e c a u s e o f t h e h i g h r a t e o f T B i n c i d e n c e i n o u r c o u n t r y S O h o w f a s t t h e i n s p e c t i o n o f t u b e r c u l o s i s t o t h e i mp o r t a n t r o l e i n T B c o n t r o l i n C h i n a a n d t h e t r e a t me n t . As a me d i c a l l a b o r a t o r y wo r k e r s t o f u l l y ma s t e r n e w k n o w l e d g e a n d n e w t e c h n o l o g y , f l e x i b l e u s e o f c o mp l e me n t a y r a d v a n t a g e s i n p r a c t i c e , a n e w me t h o d f o r d e t e c t i o n o f My c o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s b y t h e e c o n o my f i n d h i g h a c c u r a c y, g o o d s p e c i f i c i t y , h i g h s e n s i t i v i t y , s i mp l e a n d f a s t .T h i s a r t i c l e f r o m t h e b a c t e r i o l o g i c a l d e t e c t i o n , i mmu n o l o g y t e s t i n g a n d
中国城 乡企业卫生 2 0 1 5 年 8月第 4期( 总第 1 6 8期 )


述 ・
结核病 的实验室诊 断方法 学 比较及进 展
冯 玉敏
东丽 区 东丽 医院检 验科 ,天 津
3 0 0 3 0 0
摘要 : 结核病是一种 由分枝杆菌感染 引起 的传染病 , 也是 单一致病菌感染引起死亡人数最多的疾病; 实验室 ; 诊断方法学
中图分类号 : R 4 4 6 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 3 — 5 0 5 2 l 2 0 1 5 ) 0 4 — 0 2 9 — 0 3 DOI : 1 0 . 1 6 2 8 6  ̄ . 1 0 0 3 — 5 0 5 2 . 2 0 1 5 . 4. 0 0 1 1
La b or a t or y di a g n o s i s o f t ube r c ul o s i s c o mp ar a t i v e s t u dy a n d p r og r e s s
FENG Yu-m i n
T i a n j i n D o n g l i Ho s p i t a l , T i a n j i n 3 0 0 3 0 0 , C h i n a
合集下载

结核病实验室诊断技术研发进展

结核病实验室诊断技术研发进展
广计划 。
结核杆 菌培养是诊 断结核病 的金标 准 , 但传 统 的罗 氏培 养需要 4~ 6周 的培养方能 检测 到结 核菌 的生长 。 目前 正在
推广 的液体培养系统 仅需 1 —3周 , 更加敏 感 、 快速 。早 期 的
B C E -6 由于具有 放射 性 而 限制 了其应 用 。M I A T C4 0法 G T为 m cbc r l r t idct b yoat i o h n i o t e的简称 , ea g w a ru 其原 理是 J试 管 : 底部的荧光复合物与氧气结 合时处 于淬灭状 态 , 当结核 菌生 长时 , 氧气逐渐减少 , 荧光 复合 物就发出荧光 而被 检测 到。 自 动化的 MGT还可 加入 临 界浓 度 的抗 结核 药物 进 行药 敏 分 I 析。B D公 司 推 出的 B C E - I 6 A T C MGT 90全 自动分 枝杆 菌 培 养/ 鉴定/ 药敏系统操作简便 ; 阳性标本检出时间平均为 9天 ;
诊断性能优于标准荧光显微镜。多项研究经 m t e a分析显示 : L D检查 的敏感 性 比传 统镜 检方法 高约 1 %… 。同时具 备 E 0 荧光染色的优点 , 且花 费低 、 可实施性 强 , 可更广泛 的常规 使 用。中国卫 生部 一 茨基金会 和中国卫 生部 一 国梅 里埃 基 盖 法 金会结核病防治项 目已准备将 L D显微 镜在 我 国基 层实 验 E
室推广。 二 、 枝 杆 菌 培 养 技 术 研 发 进 展 分
扩增反应在 等温条 件下进行 , 不需 要专 门的 P R仪 , C 只需一 个水浴 锅或 简单 的保 温桶 和温度计 ; 其结果可以肉眼读值 : 通 过 生成 的焦磷 酸盐置换锰 离子 , 使与之结 合的钙黄绿素 ( a— Cl ci) e 游离 而发 出荧光 J也可通过 加人 核酸燃料 S B re n , Y RG en I 或产生 白色混浊焦磷酸镁沉淀进行 肉眼观察或实时浊度计 观察 。其对于发展 中国家而言是一项分子检测结核杆菌的很 有前景 的方法 。 文献报 道 L MP的 总 特 异 性 为 9 % J 总 敏 感 性 为 A 9 , 8 .% , 中在痰涂 片 阴性 、 82 其 培养 阳性 病 例 中 的敏 感性 只 有 4 . % , 在 痰 涂 片 阳性 、 养 阳 性 病 例 中 的 敏 感 性 达 88 但 培 9 . % 。中国卫生部 一盖茨基金会和 中国卫生部 一法 国梅里 77 埃基金会结核病防治项 目已将 L M A P列 入我国基层实验室推

结核病实验室诊断方法的现状与进展

结核病实验室诊断方法的现状与进展

结核病是 由结核杆 菌引起 的疾病 , 该 致病菌 可侵
犯肺 组织 、 淋 巴 系统 。结 核病 患者 可 出现 胸部 疼 痛 、
咳痰 、 咳血等 临床症 状 , 并 且男 性发 病 率 明显 高 于女 性 … 。近年结核病 的发病率 越来越 高 , 每 年新发病 人
数约 1 0 0 0万 , 防治工 作十分 严峻 。国外研 究认 为 ,

5l 7・
结核病实验室诊断 方法 的现状 与进展
袁 方
【 关键词】 结核病 ; 实验室诊断; 发展 【 中圈分类号】 R 5 2 【 文献标识码】 A
【 文章编号】 1 0 0 4 - 5 5 1 1 ( 2 0 1 7 ) 0 5 - 0 5 1 7 - 0 4 取标本 , 滴入含有 2 0 0 p . 1 双 蒸水 的离心 管 内 , 并进 行 高温灭活 。 。提取 结 核分 支 杆 菌 D N A, 再 通 过 使 用 D N A扩增反应 、 反 向杂交膜显 色方 法进行诊 断。涂 片
方法检测 时间较 长 , 患 者需要 等待 较 久方 知结 果 。
对于菌株的耐药性检测 , 只要将 探针 固定 在基 因芯片 上, 即可进行观察和分析耐药情 况。
2 . 4 P C R检测法 P C R检测法 又可称为 聚合酶链 反 应检测法 , 其 为通过 体 外酶 合成 特异 性 D N A片段 的 பைடு நூலகம்
实验室诊 断技术是结核病诊 断 中极 为重要 的手段 , 随
着基 因芯 片 、 一干 扰素 释放 试验 等诊 断技 术 的成熟
运用 , 极大地促进 结核 病诊断技术的发展 。 1 传统结核病病原 学诊 断方法
度快 , 准确度 高 。但线 性探 针 法也 有不 足之 处 , 不 能

结核病实验室诊断技术及其进展 - 结核病防治网

结核病实验室诊断技术及其进展 - 结核病防治网

诊 断 Diagnosis
标准 4. 所有胸部影象学检查可疑肺结核的病人,应该对其痰标本进行微生 物学检查。 Standard 4. All persons with chest radiographic findings suggestive of tuberculosis should have sputum specimens submitted for microbiological examination.
15人/年 • 如果不给予治疗涂阳病人更容易死亡
Rouillon A. Tubercle 1976;57:275-99
结核病变在体内的演变和播散
TB和HIV 双重感染 TB and HIV co-infection
• 在没有HIV感染的人群中,结核杆菌感染者在其一生中 大约有10%的人会发病
In the absence of HIV, about 10% of people infected with TB will develop TB disease. • 在TB/HIV双重感染者中约50%的感染者会成为结核病患者
In people co-infected with HIV and TB, about 50 % may develop TB disease • TB 加速和恶化 HIV/AIDS的疾病进展 TB accelerates the progression of HIV disease
TB和HIV 双重感染 TB and HIV co-infection (cont’)
卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA VNTR 2. 散在重复序列 Interpersed Repeats
GC富含重复序列和主要的串联重复序列 Polymorphic GC-Rich Repetitive Sequence & Major

结核病实验室诊断现状与进展

结核病实验室诊断现状与进展
光源寿命长(30,000h)
不需要预热 不需要暗室
可用现有的显微镜
可使用电池电源
结核病的微生物学检验
中盖项目LED评估结果
与初诊患者
LED涂阳患者检出率为14.96%(552/3691),萋 尼氏染色明场显微镜涂阳患者检出率12.46% (460/3691),前者较后者提高2.5个百分点( P=0.000) 随访患者 LED和明场显微镜的检出率分别为 7.09%(178/2509)和2.83%(71/2509),提高4.26 个百分点(P=0.000)
结核病的生物化学检验
降钙素原(PCT)——感染标志
肺结核患者血清PCT水平明显低于社区获得性肺炎( CAP)患者,HIV阴性的肺结核患者血清PCT水平并不 会明显增高,故可用于PTB和CAP的鉴别诊断,但当 PCT水平大于正常值时,其预后价值较差。可作为肺结核 和肺结核伴感染诊断的辅助指标。 ——[Eur Respir J 2011; 37(2):371]
结核病的分子生物学检验
(1)环介导等温扩增技术(Loop mediated isothermal amplification ,LAMP):Eiken,Japan 可同时检测患者是否感染结核 所用仪器设备极其简单 63 ℃扩增(避免非特异性扩增 多对引物(提高特异性和速度):靶基因6个不同区 域,设计4种引物 •对涂阴培阳病人具有非常高的敏感性和特异性 •密闭系统(没有污染的风险) •快速,两小时内即可得到检测结果, •肉眼观察
结核病的分子生物学检验
芯片制备质控 空白对照质 控 芯片杂交质控 靶基因扩增质控
1 2 3 4 5 6 7 8 9
1
2
3 QC BC
4
5
6

肺结核实验室诊断方法创新研究

肺结核实验室诊断方法创新研究

肺结核实验室诊断方法创新研究肺结核是一种常见的传染病,严重影响了人们的健康和生活质量。

早期诊断和治疗对于疾病的控制和防治具有重要意义。

为了提高肺结核的诊断水平,不断创新和发展实验室诊断方法是非常必要的。

本文主要介绍肺结核实验室诊断方法创新研究的相关内容。

一、传统实验室诊断方法1.痰涂片法:痰涂片法是一种传统的肺结核诊断方法,其原理是通过显微镜观察痰样本中的结核分枝杆菌,从而诊断肺结核。

但是,该方法的缺点是需要高度技术人员,且存在较高的漏诊率和误诊率。

2.结核菌抗原检测:结核菌抗原检测是通过检测患者血清或痰液中的结核菌抗原来诊断肺结核,其优点是快速、简单、易于操作,但其准确性有待提高。

3.结核菌DNA检测:结核菌DNA检测是通过PCR技术检测痰中的结核菌DNA,因其快速、敏感、特异性高等优点,已经成为肺结核的重要检测手段之一,但该方法的局限性是对操作人员有较高的技术要求。

以上三种方法都有一定的缺陷,如漏诊、误诊等,所以需要不断创新和发展实验室诊断方法。

1.核酸纳米探针技术:该技术是基于纳米技术和核酸技术的结合,能够检测低浓度的结核分枝杆菌,具有快速、灵敏度高、特异性强等优点,是肺结核的新型检测手段。

2.蛋白质组学分析:蛋白质组学分析是一种全面研究生物体内蛋白质表达和调控的方法,可以发现新的生物标志物,从而提高肺结核的诊断准确性和鉴别诊断能力。

3.微流控技术:微流控技术是最近几年发展起来的一种新型技术,通过微小化、可控制的流体流动来实现生物分析的高通量和高灵敏度,可用于快速、准确地检测肺结核病原体。

4.支持向量机算法:支持向量机算法是一种人工智能算法,能够分类和预测数据,已被应用于医学领域,可以通过数据挖掘发现新的生物标志物,为肺结核的诊断和治疗提供更准确的数据支持。

三、结语随着生物技术的发展和人工智能算法的应用,肺结核的实验室诊断方法正不断创新和发展,其准确性和效率不断提高,为病人提供更好的医疗服务。

结核分枝杆菌实验室检测方法的研究进展

结核分枝杆菌实验室检测方法的研究进展

结核分枝杆菌实验室检测方法的研究进展结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病。

它已成为严重危害人民身体健康、发病率及病死率很高的传染病。

由于细菌学检查阳性率低及血清学诊断的敏感性和特异性不高等原因,因此结核病的诊断一直是临床上的难题。

发现和研究对结核分枝杆菌诊断较敏感和特异性且快速、简便的实验室检测方法,对结核病的预防和诊断具有重要的意义。

笔者就目前国内外结核分枝杆菌的检测方法现状及其进展作一综述。

标签:结核分枝杆菌;结核病;检测方法;研究进展近年来,由于人口的剧增、世界范围内大面积的人口大流动、菌株变异和耐药性的产生、HIV感染流行等种种原因,在世界上许多地方结核病发病率出现了回升的现象。

结核分枝杆菌是结核病的主要致病菌,可在人群中传播,对外界环境的抵抗力强,易产生耐药菌株[1]。

传统检测结核分枝杆菌的方法有涂片找结核分枝杆菌法、培养法以及抗原抗体反应法等,但这些方法特异性、敏感度较差,且操作繁琐、耗时。

近年来,实验室研究出了一系列的新技术和方法,对传统的检测技术加以补充,弥补了其不足,取得了很大的进步,现对其研究进展综述如下:1 细菌学诊断技术1.1 涂片法1.1.1 直接厚涂片法直接厚涂片法检出率比普通涂片法高14%~19%,这种方法快速、费用低,是目前国内常用方法,也是《结核病诊断细菌学检验规范》规定的方法。

1.1.2 集菌涂片法通过加大被检标本的体积或通过离心、浮游等方法,富集标本中的抗酸杆菌,与厚涂片法相比,方法操作繁琐、临床应用不多。

涂片抗酸染色法,虽然有简便、快捷、成本低廉的优点,但其敏感性低,为36.8%,特异性为94.3%,且不能区分结核与非结核分枝杆菌[2]。

1.2 培养法1.2.1 BACTEC-TB-460快速检测系统其主要原理是测定结核分枝杆菌的代谢产物。

在米氏7H12培养基中加入含放射性14C的量,用生长指数GI值表示,大于19为阳性[3]。

该法有较高的初代分离率,显著缩短了报告时间,阳性标本最早仅需2 d就能检出,阴性一般1个月可发报告;而传统的改良罗氏法最早检出一般为20 d左右,阴性2个月发报告。

2004-10-10175903结核病实验室诊断技术进展


6、分子生物学检测技术
⑴核酸探针:用于测定待检菌核酸同源性序列 的标记核酸片断或序列。结核菌和非结核分枝 杆菌的核酸探针有C-DNA探针;全染色体核酸 探针;克隆核酸探针和寡核苷酸探针。主要用 于分离株的快速鉴定(经培养分离得的菌株), 其特异性与敏感性均达到100%,有助于结核 病的诊断和鉴别诊断。但核酸探针技术存在检 测灵敏度低,在临床技术中有104-105菌体细 胞/ml才能呈现杂交阳性反应。
结核病实验室诊断技术进展
一、细菌学方面
1、
荧光镜检法检查抗酸杆菌:
可提高工作效率;提高检出率
镜检观察视野以60视野为宜,避免造成 假阴性且可提高工作效率3-5倍,荧光 镜检(直接涂片)法优于抗酸镜检(直 接涂片及集菌)法。
2、BACTEC460自动检测系统
利用分枝杆菌在液体培养基中能早 期微量生长的原理,采用放射技术,在 含有14CO2,仪器能自动测定其脉冲数, 即结核菌生长指数以GI表示,当GI达到 50-100时进行涂片抗酸染色证实是否抗 酸杆菌并观察是否呈索状生长。并以 NAP培养基进行结核菌和非结核分枝杆 菌鉴定。
耐药SM菌株中70-85%有核糖体蛋白S12编码基 因核S16γ RNA编码基因突变所致。耐INH株50- 76.2%的过氧化氢酶-过氧化物酶编码基因突 变有关,12%在烯酸基还原酶基因,16.6%有 烷基过氧化氢酶编码基因突变。72%的耐PZA 菌株有PZA编码基因突变,69%耐EMB结核菌有 阿拉伯糖基转移酶编码基因B突变,89%发生 306位氨基酸密码子。耐奎诺酮类时由DNA回旋 酶A单位核B亚单位基因突变所致,集中在A亚 单位基因的保守区。
与常规方法的符合率为95-100%,但此法存
在放射性环境污染,费用昂贵,不易普及。

浅谈结核病实验诊断技术的新进展


TS O .B试验是 以特异性抗 原为刺激 源 , .P TT 应用 酶联免
疫斑点技术诊 断结核感染 的新方法。结核感染后体 内长期存
在抗原特异性 的记忆性 T细胞 , 当再次遇到抗原刺激时 , 能迅 速活化增值 , 释放 干扰素 。综合上述 原理 ,avn 建立了 Llai 。 以R I D 编码 的结核特异性抗原 6k D早期分泌 靶向抗原 ( S E— A -) 1 K T6 和 0 d培养滤过蛋 白( F 一0 肽段库为刺激原 , C P1 ) 检测 外周血中结核特异性释放 干 扰素 的 T淋 巴细胞 , 从而诊 断 结 核杆菌感染 。其优点 为 : 实验结 果清晰 , 于判断。P i 易 a 等 对 近 3年的 1 3项研究 进行 Me t a分析 , 明 TS O —B的综 表 —P TT 合 敏感性为 9 % , 0 在免疫力 低下 的人群 中 , 然能够 维持较 依 高的敏感性 ” 。在肺外结 核 的诊 断中 ,—P TT TS O —B也具有较 高的敏感性 。F r r er a和 Le等报道 的 2个前 瞻性研究 中 , a e 共 包括 1 8例 肺 外结 核 患者 , -P TT 阳性率 为 10 [9。 T S O —B 0 % 8j , 同时以 TS O —B为标 准能够 更加准 确地 锁定 需要 预防性 .P TT
酸扩增法。
抗结核治疗 的感染者 。其斑点 数越多 , 发生活动性 结核 的可
能性越大 , 时间内斑点数显著增 加 , 短 则强烈提示体 内结核活 动 , 时给 予预防性 的治疗 十分必要 。T S O ・B在 现有结 此 —P TT 核诊断方法存在诸多缺陷 的今 天 , 以给临床 医生 提供有力 可
速、 特异、操作简单 、 无须 昂 贵仪器 等优点 。但 其可 与少数

结核病实验室诊断技术进展

结核病实验室诊断技术进展结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病,其发病规律和流行特点决定了在今后相当长的时期内其危害将持续存在。

结核病被列为我国重大传染病之一,是严重危害人民群众健康的呼吸道传染病。

世界卫生组织的统计资料显示,约三分之一的世界人口曾经感染结核菌,亚洲地区感染者占全世界的三分之二。

据WHO估计,2007年全球约有927万新发结核患者,175万人死于结核病,我国是全球22个结核病流行严重的国家之一,同时也是全球27个耐多药结核病流行严重的国家之一。

目前我国三分之一左右的人口已感染了结核菌,受感染人数超过4亿。

据研究,受结核菌感染的人群中,10%的人会发展为结核病。

我国现有肺结核病人约500万,主要集中在25岁及以上人群;每年约有13万人死于结核病,死亡平均年龄为55.2岁。

如果不采取有效的控制措施,在未来的10年,我国可能有近5000万的感染者发生结核病。

历年来全国结核病流行病学调查结果显示,全国肺结核患病率继续呈现下降趋势。

特别是传染性肺结核患病率下降尤为明显,由2000年的122/10万下降到66/10万,十年降幅近50%。

结核分枝杆菌从分类上看是分枝杆菌科、分枝杆菌属中引起人类患病最多的致病菌。

结核病实验室检查,尤其是细菌学检查是结核病诊断的最主要和最基本技术,也是选择治疗方案、考核疗效、评价防治效果的主要指标。

目前结核病实验室检查技术包括:全菌体为基础的病原微生物学检测、细菌核酸为靶标的分子生物学检测和机体免疫相关反应及其产物的检测。

一、全菌体为基础的病原微生物学检查技术与其它传染性疾病相同,从检测原理和临床检验目的上,结核病的病原微生物学检查,分为基于形态学的显微镜镜检、基于微生物表型的分离培养、药物敏感性实验和菌种鉴定实验。

1. 分枝杆菌形态学检查——抗酸染色镜检:是结核病临床诊断最基本的方法之一,简单快速,在不考虑生物安全防护的前提下,2-4小时即可发报告,对于结核病的诊断、指导和评价临床用药具有重要意义。

肺结核实验室诊断方法创新研究

肺结核实验室诊断方法创新研究肺结核(tuberculosis,TB)是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病,其对全球公共卫生产生了严重的影响。

根据世界卫生组织的数据,每年有数百万人感染结核菌,其中约有数十万人死亡。

肺结核是最常见的一种结核病型,因此对其进行及时、准确的实验室诊断显得尤为重要。

近年来,随着生物技术和医学技术的进步,肺结核实验室诊断方法得到了很大的改进,其中包括分子生物学技术的应用、新型生物传感器的使用、免疫诊断方法的发展等。

本文将着重介绍肺结核实验室诊断方法的创新研究。

一、分子生物学技术的应用传统的肺结核诊断方法主要包括痰涂片检查、培养和荧光素酶标记法。

尽管这些方法在一定程度上能够检测到结核分枝杆菌的存在,但是存在着一些缺点,如需要较长的培养周期、操作繁琐、结果不稳定等。

随着分子生物学技术的快速发展,聚合酶链式反应(PCR)技术在肺结核实验室诊断中的应用日益广泛。

PCR技术不仅可以快速、准确地检测到结核分枝杆菌的存在,而且还能对其进行分子亚型鉴定,从而为临床治疗提供更为精确的依据。

新型PCR仪器的问世也大大提高了检测的效率和稳定性,可为肺结核的早期诊断提供更有力的支持。

二、新型生物传感器的使用生物传感器是一种能够快速、灵敏地检测特定生物分子的设备,其在肺结核实验室诊断中的应用也颇具潜力。

近年来,研究人员开发出了一种新型的肺结核生物传感器,通过电化学和免疫传感技术,可以实现对结核分枝杆菌特异性抗原的检测。

这种生物传感器不仅具有快速、高灵敏度和低成本的特点,而且还能够通过智能手机等设备进行实时数据监测和远程传输,大大方便了诊断过程。

相信随着技术的进一步成熟和应用,这种新型生物传感器将会在肺结核实验室诊断中发挥越来越重要的作用。

三、免疫诊断方法的发展除了分子生物学技术和生物传感器的应用外,免疫诊断方法也在肺结核实验室诊断中得到了较大的发展。

目前,最常用的免疫诊断方法包括血清抗体检测、干扰素-γ释放试验(IGRA)和淋巴细胞转化试验(T-SPOT.TB)等。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
相关文档
最新文档