手术室空气培养培训
如何做空气培养
如何做空气培养1 空气细菌培养的采样方法检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。
此法简便，目前大部分医疗单位采用。
在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。
基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好营养琼脂平板，采样高度距地面～，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。
将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。
2 细菌数的计算方法细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。
3 空气消毒效果和污染状况的评价空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。
Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。
Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。
Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间，采用紫外线消毒，化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。
空气中细菌监测在空气消毒后、操作之前，用空气采样器或空气沉降法采样。
手术室健康培训
手术室健康培训
手术室是医院最重要的部门之一，是执行各种手术的重要场所，因此操作者要时刻注意手术室的卫生和操作规范。
以下是关于手术
室健康培训的一些主要内容：
1. 手术室消毒
手术室的消毒非常重要，可以通过定期的彻底清洁来实现。
在
手术室进行手术前和手术后，都需要对工作区域进行消毒，以确保
手术无菌。
消毒剂的配比和使用方法需要严格按照医院的标准操作
规范来进行。
2. 手术室低噪音
手术室中有各种各样的噪音，如呼吸机和心电图仪等。
有一些
声音会影响操作者的注意力和专注度。
因此手术室需要降低噪音。
例如，使用低噪音呼吸机或心电图仪设备，减少不必要的对话或噪
音等措施。
3. 手术室的空气质量
手术室内空气质量对术后患者恢复非常重要。
操作者应根据医院相关要求，对手术室定期进行清洁与消毒，确保手术室空气质量符合标准，维持合理舒适的室内温度和湿度，同时可以使用空气过滤器去除室内空气中的细菌和异味。
总之，手术室中各个细节环节的健康因素都需要仔细考虑和处理，这些通过持续健康培训来对操作者进行教育和实践，才能使手术室更安全、更卫生。
同时，健康意识的增强是改善健康卫生的长久之计。
空气培养操作方法
空气培养操作方法 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020空气培养操作方法1、采样时间I类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；II类、III 类、IV类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。
2、人员要求：测试人员穿着整洁，戴口罩，手消毒或戴手套。
动作要轻，避免产生污染干扰。
3、采样方法（1）I类环境：被测区域洁净度级别最少培养数*（ф90 m m，沉降计）最大平均浓度（个/30min·ф90m m皿）洁净手术室I级洁净手术室II级洁净收术室III级洁净手术室IV级洁净手术室100级区13点，周边1000级区8点，各有一个对照皿。
1000级区5点，周边10000级区6点，各有一个对照皿。
10000级区3点，周边100000级区4点，各有一个对照皿。
面积>30m2时4点，面积≤30m2时2点，各有一个对照皿。
手术区，周边手术区, 周边手术区，周边洁净辅助用房I级（1000级）II级（10000级）III级（100000级）IV级局部100级区13点，1000级区5点3点2点2点局面，周边（300000级）（2）II类、III类、IV类环境采用平板暴露法。
室内面积≤30m2，设内中外对角3点，内、外点应距墙壁1米处；室内面积>30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1米处。
将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各采样点，采样高度为距离地面—；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（II类环境暴露15min；III 类、IV类环境暴露5min）后盖上平皿盖及时送检。
4、放置方法、次序：放置培养皿从平面中最靠里的房间布置，依次向外布，最后人员撤出。
每间房间也是从房间最靠里的地方开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。
收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的最后收。
环境卫生学监测方法培训试题
环境卫生学监测方法培训试题XX分数考试时间一、空气细菌培养〔自然沉降法〕〔每空3分〕1、采样时间:选择后与进展之前采样。
2、采样高度:与地面垂直高度米〔干净手术室等除外〕。
3、布点方法〔干净手术室除外〕〔1〕室内面积，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点。
〔2〕室内面积，设两条对角线，于东、西、南、北、中取五点，其中东、西、南、北距墙均1米。
4、采样方法及培养时间:用直径普通琼脂平皿放置各采样点，翻开后盖面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露规定时间后盖上平皿盖，及时送检。
培养时间：平皿置℃±1℃恒温箱培养〔干净手术室除外〕，计数菌落数。
5、要求标准:〔1〕干净手术部、干净集中配药中心等，新建与改建验收时、更换高效过滤器后、日常监测时，空气中的细菌菌落总数应符合等相关要求。
〔2〕门诊手术室、美容科手术室、宫腔镜室、介入科、新生儿室、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数。
〔3〕儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、注射室、治疗室、换药室、输血科、消毒供给中心、血液透析室、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等，空气中的细菌菌落总数。
6、考前须知〔1〕采样前，关闭门窗，在无人走动的情况下，静止后采样。
〔2〕检测时必须做和。
：不翻开平皿。
：翻开平皿立即合上。
与其他平皿一起送培养。
二、物体外表细菌培养1、采样时间：在后或有关时进展采样。
2、采样方法：〔1〕规那么物体外表：用灭菌规格板放在被检物体外表，用浸有无菌缓冲液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹次，并随之转动棉拭子，连续采样个规格板面积，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml无菌采样液的试管中送检。
〔2〕不规那么物体外表：如门把手等不规那么物体那么采用棉拭子涂抹。
规那么物体外表的结果计算，用表示。
不规那么物体外表的结果计算，用表示。
3、要求标准〔1〕干净手术部、干净集中配药中心、介入科、门诊小手术室、产房、新生儿室、烧伤病房、重症监护病房、血液病区等，物体外表细菌菌落总数。
医院空气细菌培养常规知识讲解
六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。 2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。 3、采样方法，用5 x5cm2的标准灭菌规格板；
放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的 棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随 之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手 接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送 检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体 的方法采样。
Байду номын сангаас 6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记 清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行 采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸 有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面 从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积 30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部 位，将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米（cm ²）计算。
(6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
(7）暴露5分钟；
(8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
(9）看表、5分钟；
（10）收取平皿；
（11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
洁净手术间空气培养检测方法
03 PART 03
空气培养采样方法及注意事项
操作步骤：
操作步骤：
操作步骤：
①
②
③
④
⑤
⑥
10
11
9 1
12 4
3
2 8
7
5
6
13
I级（百级）手术间手术区5级周边6级
手术区布点：13个 点，手术床5个点 （双对角线），床 边区8个点（每边 内2点）。
周边区布点：8个 点，每边内各2点。
手术床
十万级（准洁净）手术室 南院北院：无菌间、洁净走廊 三十万级（准洁净）手术室 南院北院：污物走廊
注：内容选自《手术室护理学》15页 其中，数字越高，净化级别越低
洁净手术室采样方法分有沉降法和浮游菌法，而我们常用的一种就是沉降法
沉降法:
参照GB50333要求进行检测，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿 ，经若干时间培养，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数 ，并以此来评定洁净室(区)的洁净度。
Clean operating room air culture detection method
洁净手术间空气培养 检测方法
珠海市妇幼保健院麻醉科手术室院感组
1 手术间多次空气培养有霉菌的原因分析 2 洁净手术间的基础知识 3 空气培养采样方法及注意事项 4 总结
目录
01 PART 01
手术间多次空气培养有霉菌的原因分析
手术区
培养皿
8
9
1
3
7
2
4
6
5
II级（千级）手术间手术区6级周边7级
手术区布点：4个 点，分别在双对角 线布点。
医院常规空气细菌培养PPT课件
•
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。
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• 医护人员手采样
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• 1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行采样。
•
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根
到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放
• 次（一只手涂擦面积30 cm² )，并随之转动采样棉试子；
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•
(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞；
•
(11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中；
•
(12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管；
•
（13)将酒精灯盖严，整理用物；
•
(14）纪录采样时间、对象、采样人；
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7、操作步骤与质量标
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• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分别标记
1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、试管架、
笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
•
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期间采集空气样本；
第7页/共23页
•
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距离墙1 m。取出3个培养皿，将培养
皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中5点，其中
空气培养方法
空气细菌培养
一、流程：
二、注意事项：
1、取培养基时，应用手托住培养基的底座，避免污染。
2、打开培养基时，盖子向下扣放于平板旁。
3、取样后将培养基的盖子盖好，方可离开治疗室。
4、送检时间不超过6h ，若样品保存于2-8度条件时，送检时间不能超过24
小时。
5、送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取标本送检。
三、放置培养皿示意图
图1 （≤30㎡) 图2（大于＞30㎡） 盖面朝下斜扣到底盘边上
三十三、物体表面培养（细菌）
注意事项：
1、要在台面的工作区或需重点监测的区域采取。
2、送检时间不超过6小时，若样品保存于1-4度条件时，送检时间不超过24h。
3、送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取标本送检。
三十四、紫外线消毒
注意事项：
1、在使用过程中，应保持紫外线灯表面的清洁，每日用95%的酒精擦拭灯管
一次，发现灯管表面有灰尘，油污时，应随时擦拭。
2、用紫外线等消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥，减少尘埃和水雾，
温度低于20℃或高于40℃，相对湿度大于60%时应适当延长照射时间。
3、用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射。
不得使紫外线光源照射到人，以免引起损伤。
4、紫外线灯使用过程中其辐射强度逐渐降低（一般紫外线使用时限为1000
小时），故应定期测定消毒紫外线的强度，一旦降到要求的强度以下时，
应即使更换。
5、每月一次空气培养，空气消毒后作空气培养。
6、如消毒时，仍有补液未接完，将剩余补液放在治疗室外，备治疗盘及部
分必用治疗用物。
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染；进入手术间应以减少走动为原则摆放培养基
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细菌培养期间
空气培养采样时间为30min 采样期间手术间严格禁止人员走动，保证门
窗处于关闭状态
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细菌培养后
采样后，操作者戴好手套、穿好手术衣将培养 皿取出，并根据院感科下发文件依次标明取样 标本序号。
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细菌培养皿
➢ 培养皿是一种用于微生物或细胞培养的实验室 器皿，由一个平面圆盘状的底和一个盖组成， 一般用玻璃或塑料制成。
➢ 存放要求：冰箱冷藏保存
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细菌培养前准备
物品准备 • 1.在采样前晚所有物品表面用500mg/L的
含氯消毒液/消毒湿巾进行擦拭 • 2.地面用500mg/L的含氯消毒液进行湿式
空气培养
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概念
1.目的：监测空气中沉降下来的细菌总数 2.原理：空气中细菌等微生物可随尘粒一起
下降，降落在室内采样点放置好的培养皿上， 最后将培养皿置于37摄氏度的温箱中培养 48h~72h后计算菌落数
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洁净手术室分级标准
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洁净手术室分级标准
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周边区和手术区定义
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布点方法
对应房间：1号间、9号间
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布点方法
了解：二级手术室即千级层流（6级）
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布点方法
对应房间：2~8号间
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细菌皿放置方法
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细菌皿放置方法
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细菌培养前准备
操作者准备 • 1. 操作者在放置培养皿前，应戴好口罩、帽子，
清洗双手，剪短指甲，人数≤2人 • 2.操作者进房间应做好两轻，即走路轻、放置培
打扫 • 3.手术间墙面用墙刷进行擦拭，出风口着
重打扫
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细菌培养前准备
物品准备 • 4.吊塔及手术间无影灯远离出风口及培
养皿放置区 • 5.根据院感科下发培养皿摆放序列号将
板凳进行布点
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细菌培养前准备
房间准备 1、采样时间：选择消毒处理后与进行医疗
活动之前期间采样。 （一般在清晨）要求 层流至少打开≥30min，关闭手术室房门 （后门），禁止人员走动。 2、采样高度：与地面垂直高度80-150厘米， 距离四周墙面至少1米。一般放置在高板凳、 治疗车表面；严格禁止直接放置在地面上。
3.送检过程中，如发现可疑污染，应重新留 取样本送检
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系统上报流程 ➢进入德朗诺系统
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系统上报流程 ➢选择住院手术1工作站-院感系统-环境卫生学采样
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系统上报流程 ➢进入页面填写相关信息-场所填写手术间号
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系统上报流程 ➢进入页面填写相关信息-样品名称填写培养后必须尽快对样品进行相应指标的监测， 送检时间不得超过6h。若样品保存0-4度条 件时，送检时间不得超过24h。
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注意事项
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注意事项
1.打开培养基时应盖子向下放置，培养皿盖 子要反扣于培养皿边上，禁止内面向上放于 桌上
2.取样后应将培养基盖子盖好后方可离开房 间
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系统上报流程 ➢进入页面填写相关信息-样品名称填写培养皿放置位置
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➢进入页面填写相关信息-培养皿需在备注里注明，填写 完毕点击保存完成上报。
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谢谢，请各位 老师指导！
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